一种小鼠主动脉夹层动脉瘤模型的建立方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及人类疾病动物模型的制作技术领域中一种小鼠主动脉夹层动脉瘤模 型的建立方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 主动脉夹层动脉瘤是指各种原因造成的主动脉壁内膜血管破裂并在内膜与中外 层之间，由于血液流体力学的压力沿此层面纵行剥离，形成有活动的血液假腔，因夹层分 离，假腔扩大膨出。形成的夹层动脉瘤极易破裂，这使得该疾病成为心血管疾病中最致命的 重症之一，在发病两周内的死亡率高达70%。
[0003] 在西方主动脉瘤的发生较多，主要出现于腹主动脉，而在中国主动脉夹层动脉瘤 更为高发，多累及主动脉根部、升主动脉、弓部、胸主动脉。目前主要利用大鼠和小鼠建立主 动脉瘤动物模型进行研宄，由于以往的基因工程动物多为小鼠，而且小鼠饲养成本较低，易 于大量用于实验，因此在小鼠中建立主动脉瘤疾病模型极为重要。
[0004] 腹主动脉瘤的小鼠模型的构建方法较为成熟，主要通过以下几类方法构建：（1) 腹主动脉瞬时灌注弹力蛋白酶；（2)动脉外孵育氯化钙；(3)不同品系小鼠间主动脉移植；
[4] ApoE或LDL受体缺失小鼠皮下植入微量渗透泵灌注血管紧张素 II。但是模型的建立往 往需要特异基因敲除的动物或者通过外科手术给予药物处理，实验动物杂交耗时长，并且 手术对实验人员技术要求高，模型建立困难。在小鼠中建立主动脉夹层动脉瘤模型基本上 需要小鼠某些基因发生突变，功能受到影响，如Fbnl等；在正常野生型小鼠中建立主动脉 夹层动脉瘤鲜有报道，限制了其发病机制和治疗手段的研宄。
[0005] 赖氨酰氧化酶（lysyloxidase, Iox)是一种糖蛋白，在铜离子的帮助下，能够在细 胞外基质中氧化胶原蛋白和弹性蛋白上的特殊氨基酸残基，使胶原蛋白和弹性蛋白形成共 价键。在血管壁中存在大量的弹力蛋白和胶原蛋白，它们交联成网状，从而维持血管的张力 和稳定性。
[0006] 因此在正常小鼠中建立简便易行，费用更为经济的模型，以用于大规模的病因学 和药物筛查以及发病机制的研宄，是目前亟待解决的问题。
【发明内容】
[0007] 本发明所要解决的技术问题是如何建立有效、简便易行和更为经济的动物主动脉 夹层动脉瘤模型。
[0008] 为解决上述技术问题，本发明首先提供了 一种动物动脉瘤模型的构建方法。
[0009] 本发明所提供的一种动物动脉瘤模型的构建方法，包括将β -氨基丙腈的水溶液 作为受试动物的饮用水，给所述受试动物饮用所述饮用水进行给药，获得具有动脉瘤的动 物，所述具有动脉瘤的动物为动物动脉瘤模型。
[0010] 上述方法中，所述氨基丙腈的水溶液在配制后0-3天内作用于所述受试动物， 具体可为3天。
[0011] 上述方法中，所述β -氨基丙腈的水溶液中β -氨基丙腈的浓度可为6-8mg/mL，具 体可为 6mg/mL 或 8mg/mL。
[0012] 上述方法中，所述给药的剂量可为Ig β -氨基丙腈/kg体重/天。
[0013] 上述方法中，所述给药的时间可为14-28d，具体可为28d。
[0014] 上述方法中，所述给药的方式为用β -氨基丙腈的浓度为6mg/mL的所述β -氨基 丙腈的水溶液按照Ig β -氨基丙腈/kg体重/天的给药剂量给药14天，自第一次给药第15 天开始，用β -氨基丙腈的浓度为8mg/mL的所述β -氨基丙腈的水溶液按照Ig β -氨基丙 腈/kg体重/天的给药剂量给药14天。
[0015] 上述方法中，所述动物可为哺乳动物，进一步的，所述哺乳动物具体可为小鼠。
[0016] 上述方法中，所述动脉瘤可为主动脉夹层动脉瘤、周围动脉瘤、腹主动脉瘤、胸腹 主动脉瘤或内脏动脉瘤中至少一种，具体可为主动脉夹层动脉瘤。
[0017] 实验证明，本发明的小鼠主动脉夹层动脉瘤模型的建立方法简便，可在短时间内 构建小鼠主动脉夹层动脉瘤模型，无需实施外科手术，减少了实验小鼠的创伤，可操作性 强。造模组小鼠主动脉夹层动脉瘤发生率为90 %，破裂率为20 %，胸段及以上位置主动脉 夹层发生率为90 %，腹段发生率为20 %，诱导成功率高。主动脉夹层动脉瘤的夹层发生位 置与人类发病位置相似，易于用此模型研宄人类主动脉夹层动脉瘤的病理机制，进行可疑 致病基因筛选和治疗研宄。
【附图说明】
[0018] 图1为利用β -氨基丙腈饲喂小鼠形成的主动脉夹层动脉瘤。
[0019] 图2为造模组小鼠胸主动脉形成夹层的HE染色图。
[0020] 图3为造模组小鼠胸主动脉弹力纤维断裂的弹力纤维染色图。
【具体实施方式】
[0021] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐 明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
[0022] 下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0023] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0024] β -氨基丙腈（β-Alaninenitri le，BAPN)为 Sigma Aldrich 公司的产品，目录 号为A3134。
[0025] 下述实施例中的C57BL/6小鼠为南京大学模式动物研宄所的产品，产品目录号为 J000664。
[0026] 实施例1、小鼠主动脉夹层动脉瘤模型的建立
[0027] 本实施例采用饮水法构建小鼠主动脉夹层动脉瘤模型，具体方法如下：
[0028] 1、在动物房洁净操作台内，用电子天平称取〇.6g0-氨基丙腈（BAPN)，溶于IOOmL 水中，颠倒震荡混匀，至BAPN充分溶解，配置成BAPN的浓度为6mg/mL的BAPN水溶液，将该 BAPN水溶液作为造模组的小鼠饮用水，将其称为造模组饮用水1。造模组饮用水1在配制 后3天内给造模组小鼠饮用，3天后重新配置造模组饮用水1。
[0029] 2、取3周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠14只，随机分为两组，对照组4只，造模组10 只。将步骤1的造模组饮用水1按照Ig β -氨基丙腈/kg体重/天的给药剂量给造模组小 鼠给药14天；对照组小鼠给予等体积的水，水在3天内给对照组小鼠饮用，3天后重新给对 照组小鼠换水。
[0030] 3、在动物房洁净操作台内，用电子天平称取0. 8g β -氨基丙腈（BAPN)，溶于IOOmL 水中，颠倒震荡混匀，至BAPN充分溶解，配置成BAPN的浓度为8mg/mL的BAPN水溶液，将该 BAPN水溶液作为造模组的小鼠饮用水，将其称为造模组饮用水2。造模组饮用水2在配制 后3天