以下通过【具体实施方式】的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制， 本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发 明的基本思想，均在本发明的范围之内。
[0018] 实施例1、本发明辣木叶总黄酮的制备 (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥2h，粉碎，过40目筛，得辣木叶粉备用； (2) 提取：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量2倍体积的沸程为60~90°C的石 油醚，在68°C下回流脱脂3次，每次5h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量10倍体积的65%乙醇，在微波功 率500W下加热8min，置75°C温水浴中超声提取2次，每次提取30min，过滤得提取液，合并 提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入AB-8型大孔吸附树脂柱中，依 次用蒸馏水2倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱， 调节体积流量为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色检测，在波长 为510nm下测定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回 收乙醇并浓缩置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 16的 浸膏，在50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
[0019] 实施例2、本发明辣木叶总黄酮的制备 (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥2h，粉碎，过45目筛，得辣木叶粉备用； (2) 提取：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量3倍体积的沸程为60~90°C的石 油醚，在68°C下回流脱脂3次，每次6h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量12倍体积的70%乙醇，在微波功 率600W下加热7min，置80°C温水浴中超声提取2次，每次提取25min，过滤得提取液，合 并提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入AB-8型大孔吸附树脂柱中，依 次用蒸馏水2倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱， 调节体积流量为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色检测，在波长 为510nm下测定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回 收乙醇并浓缩置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 20的 浸膏，在50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
[0020] 实施例3、本发明辣木叶总黄酮的制备 (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥3h，粉碎，过50目筛，得辣木叶粉备用； (2) 提取：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量4倍体积的沸程为60~90°C的石 油醚，在68°C下回流脱脂3次，每次7h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量15倍体积的75%乙醇，在微波功 率550W下加热8min，置78°C温水浴中超声提取3次，每次提取20min，过滤得提取液，合 并提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入AB-8型大孔吸附树脂柱中，依 次用蒸馏水2倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱， 调节体积流量为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色检测，在波长 为510nm下测定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回 收乙醇并浓缩置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 25的 浸膏，在50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
[0021] 实施例4、本发明辣木叶总黄酮含量的测定试验 1、对照液：精密称取芦丁l〇mg，用30%乙醇定容至50ml瓶子中摇匀为0. 2g/L的对照 液。
[0022] 2、标准曲线回归方程的建立：精密吸取对照液0、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5和0. 6ml， 分别置25ml容量瓶中，各家30%乙醇至IOml，摇匀，加5%亚硝酸钠Iml，摇匀，静置6min，加 10%硝酸铝Iml，摇匀，静置6min，再加lmol/L氢氧化钠也IOml，用30%乙醇定容后摇匀，放 置15min，以0管作为空白，在510nm处测定吸光度A值，以吸光度A值为横坐标，浓度C为 纵坐标，绘制标准曲线，计算线性回归方程。
[0023] 3、测定：称取实施例1、实施例2、实施例3制备的辣木叶总黄酮粉末50mg，用30% 乙醇定容至50ml瓶子中摇匀，按照标准曲线制备的方法测定吸光度A值，将A值代入线性 回归方程，计算出总黄酮的含量，结果如表1所示。
【主权项】
1. 一种辣木叶总黄酮的提取方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥2-3h，粉碎，过40-50目筛，得辣木叶粉备用； (2) 脱脂：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量2-4倍体积的石油醚，在68°C下回 流脱脂3次，每次5-7h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量10-15倍体积的65%-75%乙 醇，在微波功率500-600W下处理6-8min，置75°C-80°C温水浴中超声提取2次，每次提取 20-30min，过滤得提取液，合并提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入吸附树脂柱中，依次用蒸馏水2 倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱，调节体积流量 为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3_NaOH体系显色检测，在波长为510nm下测 定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇并浓缩 置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 16-0. 25的浸膏，在 50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
2. 如权利要求1所述的辣木叶的提取方法，其特征在于，步骤（2)中石油醚的沸程为 60 ~90°C〇
3. 如权利要求1所述的辣木叶的提取方法，其特征在于，步骤（3)中的吸附树脂柱为 AB-8型大孔吸附树脂柱。
4. 如权利要求1所述的辣木叶的提取方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥2.5h，粉碎，过45目筛，得辣木叶粉备用； (2) 脱脂：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量3倍体积的石油醚，在68°C下回流 脱脂3次，每次6h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量12倍体积的70%乙醇，在微波功 率600W下处理7min，置80°C温水浴中超声提取2次，每次提取25min，过滤得提取液，合并 提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入AB-8型大孔吸附树脂柱中，依 次用蒸馏水2倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱， 调节体积流量为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色检测，在波长 为510nm下测定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回 收乙醇并浓缩置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 20的 浸膏，在50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
5. 如权利要求1所述的辣木叶总黄酮在制备治疗高尿酸血症药物中的用途。
6. 如权利要求1所述的辣木叶总黄酮在制备治疗老年痴呆症药物中的用途。
【专利摘要】本发明属于天然产物化学领域，具体涉及一种辣木叶总黄酮的提取方法及其用途。本发明的提取方法是采用微波-超声波协同萃取辣木叶总黄酮，该提取方法具有高效、省时、节能、能耗低，操作简单，重复性好的优点。另外，经动物试验证明，提取的辣木叶的总黄酮对高尿酸症和老年痴呆症具有显著的治疗效果，本发明总黄酮除了降尿酸外，还可以降低胆固醇、三酰甘油、尿素氮、肌酐、黄嘌呤氧化酶降低尿酸生成、直接分解尿酸、改善肾功能、促进尿酸排泄、保护血管多个层面降低尿酸，更有利于尿酸血症患者的康复，具有广阔的医学应用前景。
【IPC分类】A61K36-185, A61P25-28, A61P19-06
【公开号】CN104758325
【申请号】CN201510157323
【发明人】严俊霖, 萧丽雅
【申请人】萧丽雅
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年4月3日