一种辣木叶总黄酮的提取方法及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然产物化学领域，具体涉及一种辣木叶总黄酮的提取方法及其用 途。
【背景技术】
[0002] 尿酸是一种含有碳、氮、氧、氢的杂环化合物，是人类嘌呤代谢的最终产物，通常由 黄嘌呤氧化酶催化生成，正常情况下，人体内尿酸的生产和排泄保持着动态平衡，若尿酸生 产过多或排出不足造成体内尿酸的生成量和排泄量不平衡，从而导致血尿酸含量升高，弓丨 起一系列的并发症，例如出现痛风性关节炎、痛风性肾脏病变、痛风性肾结石、痛风性心脏 病、痛风性高血压等严重并发症，严重的影响着人类的身体健康。
[0003] 随着人们生活水平提高和饮食结构改变，高尿酸血症的患病率日益上升，严重威 胁到人类的健康。降低尿酸主要有三种途径：一是防止细胞内核酸的氧化分解，该途径的治 疗方法是长期服用一些抗核酸氧化的物质，如虾青素、花青素，但是该类物质主要用于治疗 尿酸升高引起的痛风疾病，对其他高尿酸引起的并发症治疗效果不显著；二是阻断尿酸的 继续产生或新生尿酸的形成，该途径的治疗主要采用别嘌呤醇抑制黄嘌呤氧化酶的活性， 阻断尿酸的继续产生或新生尿酸的形成，但是该药物对已经生产的尿酸不起作用，而且由 于黄嘌呤氧化酶的活性受抑，可造成尿酸前体物质黄嘌呤和次黄嘌呤的堆积，而黄嘌呤和 次黄嘌呤也有肾毒性。三是促进尿酸的排泄，食用碱性食物或降尿酸茶能适度碱化尿液，以 促进尿酸排泄，但是该途径降尿酸效果较慢，无法达到治疗经尿酸的作用。所以，研宄开发 一种毒副作用小，降尿酸效果明显的天然降尿酸药物，是目前亟需解决的难题。
[0004] 目前，随着现代社会生活水平的提高，人们的平均寿命逐年上升，全球人口老年化 现象严峻。与高尿酸血症一样，老年痴呆症的发病率不断上升，成为危害老年人健康的头号 杀手。老年痴呆症是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上表现为 记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等特征， 随着疾病的发展，患者会逐渐丧失生活自理能力，给患者的个人家庭和社会带来沉重的负 担。鉴于目前治疗老年痴呆症的西药效果不明显，人们开始更多的关注中药药物的研宄和 开发，许多中药成分在改善老年痴呆症的记忆能力，认知功能及延缓衰老方面具有良好的 作用，而且中药成分具有毒副作用低，对患者的身体具有一定的调节作用，更有利于患者的 康复。因此，中药成分在治疗老年痴呆症疾病具有潜在的优势和广阔的开发前景。
[0005] 辣木（MoringaoleiferaLam.)为辣木科辣木属的植物，是多年生热带落叶乔木， 广泛种植在亚洲和非洲热带和亚热带地区，对土壤条件和降雨量有很强的适应性。我国 广东、台湾等地亦有栽培，辣木既可以供观赏，而且根、叶和嫩果可食用；种子可榨油，含油 30%左右，具有很高的经济价值。经研宄发现，辣木除了具有丰富的营养价值外，在抗氧化、 降血糖、降血脂、抗真菌方面亦表现出良好的活性，而且辣木叶中的黄酮类化合物和多糖类 化合物具有降血糖、降脂、降压、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、治疗心血管病、改善睡眠等功效， 是具有极大研宄开拓潜力的植物。
[0006] 食品与生物技术学报公开了辣木叶总黄酮的提取方法及其降血糖的作用（Vol. 26 No. 4Jul. 2007)经试验证明辣木叶的总黄酮对降血糖具有显著的作用，但辣木叶中总黄酮 对降尿酸和老年痴呆症的作用尚未见报道。
【发明内容】
[0007] 为了解决现有技术用于高尿酸血症和老年痴呆症的药物治疗效果不显著，毒副作 用的大的缺陷，本发明的目的在于提供一种辣木叶总黄酮的提取方法及其用途，以解决以 上缺陷。
[0008] 本发明提供的一种辣木叶总黄酮的提取方法，包括以下步骤： (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥2-3h，粉碎，过40-50目筛，得辣木叶粉备用； (2) 脱脂：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量2-4倍体积的石油醚，在68°C下回 流脱脂3次，每次5-7h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量10-15倍体积的65%-75%乙 醇，在微波功率500-600W下处理6-8min，置75°C-80°C温水浴中超声提取2次，每次提取 20-30min，过滤得提取液，合并提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入吸附树脂柱中，依次用蒸馏水2 倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱，调节体积流量 为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3_NaOH体系显色检测，在波长为510nm下测 定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇并浓缩 置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 16-0. 25的浸膏，在 50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
[0009] 本发明的辣木叶总黄酮的提取方法中步骤（2)中石油醚的沸程为60~90°C。其 中本发明步骤（3)中的吸附树脂柱为AB-8型大孔吸附树脂柱。
[0010] 本发明的辣木叶总黄酮的提取方法优选为： (1) 备料：称取Ikg辣木叶于50°C干燥2.5h，粉碎，过45目筛，得辣木叶粉备用； (2) 脱脂：取步骤（1)辣木叶粉，加入辣木叶粉质量3倍体积的石油醚，在68°C下回流 脱脂3次，每次6h，过滤去滤液，将滤渣干燥，得干燥滤渣备用； (3) 提取：往步骤（2)得到的干燥滤渣中加入滤渣质量12倍体积的70%乙醇，在微波功 率600W下处理7min，置80°C温水浴中超声提取2次，每次提取25min，过滤得提取液，合并 提取液，得辣木叶总黄酮粗提取液； (4) 纯化：将步骤（3)得到的辣木叶总黄酮粗提液加入AB-8型大孔吸附树脂柱中，依 次用蒸馏水2倍柱体积，体积分数30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱， 调节体积流量为2mL/min，每管收集15min，以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色检测，在波长 为510nm下测定吸光度检识，收集50%和70%的乙醇洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液减压回 收乙醇并浓缩置原体积的1/5,得浓缩液，将浓缩液置于60°C水浴蒸干至相对密度0. 20的 浸膏，在50°C低温干燥至恒重，得辣木叶总黄酮粉末。
[0011] 本发明的提取方法是经石油醚脱脂、微波-超声波协同萃取和AB-8型大孔吸附 树脂柱除杂得到辣木叶总黄酮，为了保证总黄酮的质量，本发明用体积分数30 %乙醇、50% 乙醇、70%乙醇各3倍体积进行梯度洗脱，经以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色检测，在波 长为510nm下测定吸光度检识，发现辣木叶总黄酮在50%乙醇和70%乙醇中的含量较高， 即收集经50%乙醇和70%乙醇洗脱的洗脱液，大大提高纯化效率，因此，本发明以在510nm 的检测波长下有很大吸收的峰作为辣木叶黄酮类化合物特征吸收峰，辣木叶总黄酮含量为 18%-35%〇
[0012] 本发明的微波_超声波协同萃取辣木叶总黄酮是利用微波能使细胞内部的温度 迅速上升，细胞内部压力增高使细胞破裂，药材内有效成分流出，并在较低的温度下溶于萃 取液。该方法加热均匀，热效率较高，提取速度快。与比传统的回流提取具有高效、省时、 节能的优点，在中药提取中具有良好的应用前景。
[0013] 另外，本发明还提供了辣木叶总黄酮在制备治疗高尿酸血症药物中的用途。降尿 酸的主要途径是防止细胞内核酸的氧化分解，而辣木叶中总黄酮具有清除自由基、抗炎、抗 菌、抗病毒、抗氧化、降血糖的多种作用，辣木叶总黄酮的氧化作用可以有效的防止细胞内 核酸的氧化分解，从而达到将尿酸的作用。
[0014] 经本发明的试验例证实，本发明的辣木叶黄酮高、中和低剂量组的降尿酸作用强 于别嘌呤醇，而且在一定的范围内，辣木叶黄酮剂量越多降尿酸作用越明显，本发明辣木叶 黄酮除了能降低尿酸外，对胆固醇、三酰甘油、尿素氮、肌酐、黄嘌呤氧化酶也有显著的降低 作用，通过降低胆固醇、三酰甘油、尿素氮、肌酐、黄嘌呤氧化酶等降低尿酸生成、直接分解 尿酸、改善肾功能促进尿酸排泄、保护血管等多个层面降低尿酸，更有利于尿酸血症患者的 康复。
[0015] 本发明还提供了辣木叶总黄酮在制备治疗老年痴呆症药物中的用途。经动物试验 证明，本发明的辣木叶总黄酮的低、中和高剂量组的小鼠逃避潜伏期与模型组相比具有显 著性差异，均显著缩短小鼠的逃避潜伏期，其中第20天，本发明的高剂量组的小鼠逃避潜 伏期与模型组相比具有极显著性差异，证明辣木叶总黄酮对A0 :_42所致小鼠老年痴呆症症 模型具有显著的治疗效果，尤其是本发明的黄酮高剂量组效果最显著。
[0016]与现有技术相比，本发明的辣木叶提取方法采用微波-超声波协同萃取辣木叶总 黄酮，与比传统的回流提取具有高效、省时、节能的优点，在中药提取中具有良好的应用前 景。
[0017]
【具体实施方式】：