牛樟芝菌ac09在保护化学性肝损伤中的医用用图
【技术领域】
[0001]本发明公开了牛樟芝菌AC09在保护化学性肝损伤中的医用用途，属于医疗保健品技术领域，具有涉及一种具有对化学性肝损伤具有保护功能的牛樟芝高产菌株发酵液冻干粉及其在作为保健食品方面的应用。
【背景技术】
[0002]现如今，酒精性肝病是临床常见肝病之一。酒精中毒死亡率和癌症及冠心病的死亡率相仿，是中青年死亡的主要原因之一。随着人们生活条件的改善，酗酒所带来的身体危害也较为普遍。由于酒精具有成瘾性，很多患者经常不顾酗酒伤身的事实，持续大量饮酒，容易造成骨质疏松、心血管疾病、高血压、视线模糊、胃部疾病及肝脏硬化。我国近年来临床酒精性肝病的患病率也逐年升高，成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病，因此重视酒精性肝病的防治具有重要意义。随着人们生活水平的提高，安全而有效的保健食品成为人们保护酒精引起的化学性肝损伤一种的手段。
[0003]近年来，市场对许多药用真菌产品的需求量显著增加，而传统的药用真菌培养方式大多集中于对子实体的栽培，不能满足需求。液体发酵极大缩短培养周期，不受地理和时间的限制，且可能达到野生药用真菌具有的多项生理活性及有效成分，优势明显。经本发明考察了经液体发酵后的药用真菌其在保护化学性肝损伤等方面的作用，结果显示，除对肝功能指标、清除自由基和抗氧化等方面产生影响，该药用真菌还对白细胞介素、干扰素、月中瘤坏死因子等细胞因子水平产生影响。因此，利用大型真菌液体深层发酵技术制备一种具有保护酒精引起的化学性肝损伤功能的保健食品具有重要的意义。
[0004]樟芝，又名牛樟芝或牛樟菇，属于担子菌纲、非褶菌目、多孔科、多年生担子菌，只生长在台湾地区的牛樟树腐朽树干的内壁。樟芝子实体味苦，具有强烈的樟树香气，外形为板状或钟状，无柄。子实体初期新鲜时呈现橘红色、橘褐色，老熟时会渐渐转变为棕褐色，之后变为黑色。从近年的研宄报告发现，牛樟芝含有许多复杂成分，如精油、多糖体，其主要化学成分为P-D-葡聚糖、三萜类化合物(如樟萜酸A、B、e、K等)、超氧歧化酶、核酸类(腺苷等物质)、麦角固醇、蛋白质(含免疫蛋白)、维生素、氨基酸、凝聚素及一些微量元素等。这些有效成分中以三萜类化合物最特别，高达200种以上(单一品系的灵芝约20-50种，不同品系灵芝总合约200多种)，含量为10%-45% (灵芝为1%_3%)，是其他菇菌无法相比的；多糖体含量为13.13% (灵芝为2%) ο
【发明内容】
[0005]本发明公开了一种牛樟芝菌AC09在保护化学性肝损伤中的医用用途，制备的发酵液冻干粉对化学性肝损伤具有保护功能。
[0006]本发明涉及的牛樟芝AC09为诱变菌株，已于2015年5月3日保藏《中国典型培养物保藏中心》，命名为Antrodiacamphorata AC09，牛樟芝AC09，保藏号为:CCTCC Ν0:Μ2015274。
[0007]本发明提供一种牛樟芝菌AC09发酵液冻干粉，由如下方法制备得到:
将牛樟芝菌种ATC09在以下条件下进行发酵:培养基组分蛋白胨10?20g/L，葡萄糖15?25g/L，酵母浸粉10?20g/L，无水硫酸镁2?4g/L，磷酸二氢钾2?Ag/UVB1.I?
0.2g/L，发酵条件为:装液量为60?80升，接种量(v/v) 5?10%，发酵温度25?27摄氏度，发酵罐转速150?300转/分钟，发酵时间3?5天，得发酵液。
[0008]将发酵液以4000?5000转/分钟，离心5?10分钟，弃上清，收集沉淀并以-30?-50°C冻干60?72小时，得到牛樟芝发酵液冻干粉。
[0009]经动物实验证明(详见实施例)，本发明牛樟芝水提物具有保护酒精引起的化学性肝损伤的功能，因而可以在作为保健食品方面得到应用。其主要的功效学作用如下:经用食品级白酒建模后的昆明小鼠在服用本发明的牛樟芝保健食品(即牛樟芝发酵液冻干粉)15天后，其血清中ALT、AST、SOD、GSH、GSHH-PX, TNF- α、NF- κ B等因子的水平发生显著变化。
[0010]本发明的积极效果在于:提供了牛樟芝菌ATC09在保护化学性肝损伤中的新的医用用途。本发明工艺制得的牛樟芝发酵液冻干粉安全、无副作用，具有显著保健功效，可长期服用，且各主要原料可通过深层液体发酵生产，降低了工业化成本、有很好的市场开发前景。
【附图说明】
[0011]图1为本发明对酒精引起的化学性肝损伤小鼠血清ALT升高的保护作用；
图2为本发明对酒精引起的化学性肝损伤小鼠血清AST升高的保护作用；
图3为本发明对酒精引起的小鼠肝脏GSH耗竭的影响；
图4为本发明对酒精引起的小鼠肝脏SOD活性的影响；
图5为本发明对酒精引起的小鼠肝脏GSH-PX活性的影响；
图6为本发明对酒精引起的小鼠肝脏TNF-α蛋白含量的影响；
图7为本发明对酒精引起的小鼠肝脏NF-κ B蛋白含量的影响。
[0012]具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明不受具体实施例限制。
[0013]实施例1
将牛樟芝菌种AC09经百升发酵罐内进行发酵(培养基组分:蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母浸粉10g/L，无水硫酸镁2g/L，磷酸二氢钾2g/L，VB10.lg/L，发酵条件为:装液量为80升，接种量(v/v) 10%，发酵温度26摄氏度，发酵罐转速150转/分钟，发酵时间4天)，发酵终止后得发酵液73升，以4000转/分钟离心10分钟，弃去上清，收集沉淀并_40°C冻干60小时，得到牛樟芝发酵液冻干粉粉931克。
[0014]实施例2
将牛樟芝高产菌种AC09经百升发酵罐发酵(培养基组分:蛋白胨12g/L，葡萄糖18g/L，无水硫酸镁4.0g/L，磷酸二氢钾4.0g/L，VB10.15g/L，发酵条件为:装液量为75升，接种量(v/v) 5%，发酵温度25摄氏度，发酵罐转速175转/分钟，发酵时间3天)，发酵终止后得发酵液68升，以4000转/分钟离心10分钟，弃去上清，收集沉淀并_40°C冻干65小时，得到牛樟芝发酵液冻干粉739克。
[0015]实施例3 将诱变选育出的牛樟芝高产菌种AC09经百升发酵罐发酵(培养基组分:蛋白胨15g/L，葡萄糖25g/L，无水硫酸镁3g/L，磷酸二氢钾3.0g/L, VB10.15g/L发酵条件为:装液量为70升，接种量(v/v) 10%，发酵温度26摄氏度，发酵罐转速125转/分钟，发酵时间5天)，发酵终止后得发酵液63升，以4000转/分钟离心10分钟，弃去上清，收集沉淀并_40°C冻干65小时，得到牛樟芝发酵液冻干粉801克。
[0016]通过以下实验明白本发明牛樟芝菌种AC09在保护化学性肝损伤中的医用用途
本试验例用于说明本发明的牛樟芝保健食品(即牛樟芝发酵液冻干粉)对酒精作用后小鼠化学性肝损伤的保护作用的影响。
[0017]1、动物分组及饲养
准备健康昆明小鼠75只，全雄，体重18?22g，饲养温度22±2°C，相对湿度40?70%，随机分为5个大