在耐缺氧及抗疲劳中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明公开一种蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl在耐缺氧及抗疲劳中的用途，属于中药和 保健品领域。
【背景技术】
[0002] 生活在现在化都市，感受着城市的快节奏，人们都摒住呼吸，大步向前，为不落后 于他人，为有一份稳定工作，为拥有一个幸福家庭而努力着，拼搏着。而在我们努力、拼搏的 同时，疲劳也如影随形，不断地侵蚀着每一位"工作狂"身体，让我们身心憔悴。在1987年美 国疾病控制中心就定义了慢性疲劳综合征的概念，1993年英国一项大型调查显示：约20% 的男性和25%的女性总是感到疲劳；2001~2002年的调查则显示，10万人中有1. 2万人患有 至少持续6个月的慢性疲劳；日本劳工部在2000年3月公布日本全国有1/3的工龄人口患 有慢性疲劳综合征，疲劳已经成为当今社会影响我们身体健康的一大重要因素。
[0003] 氧是人体进行新陈代谢的关键物质，是人体生命活动的第一需要，缺氧时一种相 当常见的病理过程，由于氧气的摄入不足以供应机体所需，导致肺泡氧分压和血样饱和度 降低，组织细胞不能从血液中获得所需氧气，从而造成机体损伤，严重时可导致机体死亡， 因此，军事、体育、航空航天、水下作业、旅游等领域越来越重视对缺氧的研宄。
[0004] 蝙蝠蛾拟青霉为天然冬虫夏草中分离到的内寄生菌，是天然冬虫夏草中普遍存在 的一种虫草的无性型，其菌丝体发酵物具有广泛的药理活性，可以作为天然冬虫夏草有效 成分和功效的原料，开发前景广阔。
【发明内容】
[0005] 本发明公开一种蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl在耐缺氧及抗疲劳的用途，具有明显的医 疗效果。
[0006] 本发明所述的水提物以可用于保健食品的蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl菌丝体为原料， 采用热水浸提方法获得，保证用药的安全性。
[0007] 本发明所述的蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40以蝙蝠蛾拟青霉菌株（RCEF1429)为原始菌 株，经诱变筛选获得，所述的菌株已于2014年12月26日保藏《中国典型培养物保藏中心》， 保藏号为：CCTCC No :M 2014670 ;命名为cAe/7 PH40 ;蝙蝠蛾拟青 霉菌株PH40。
[0008] 本发明所述的蝙蝠蛾拟青霉菌株PiVK提物，是通过以下的技术方案实现的。
[0009] 1、称取蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl冻干干粉，按照质量体积比（g:ml)l:10~1 :50的 比例加入去离子水，50~100°C提取2~5小时，重复一次，合并两次提取的上清液，旋转蒸 发后冻干，得蝙蝠蛾拟青霉菌株PH 4tl水提物干粉。
[0010] 2、取蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物干粉，加入药用辅料，制备得到蝙蝠蛾拟青霉 菌株PH4tl水提物制剂。
[0011] 采用小鼠负重游泳实验、跑步机实验、疲劳转棒实验首次证明蝙蝠蛾拟青霉菌株 PH4tl水提物抗疲劳活性，采用亚硝酸钠中毒实验、常压耐缺氧实验、急性脑缺血缺氧实验首 次证明蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物抗缺氧活性，为蝙蝠蛾拟青霉菌株PH 4(|水提物作为抗 疲劳和耐缺氧药物及保健品的研发提供依据。
[0012] 本发明的积极效果在于：提供了蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl制备抗疲劳和耐缺氧药物 及保健品药物中的用途，并具有明显的医疗效果。
【具体实施方式】
[0013] 为了能够更好地了解本发明的技术内容，下面通过具体实施案例对本发明进行详 细描述。
[0014] 实施例1 取蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl菌丝体100g，按质量体积比（g :ml) 1:20的比例加入去离子 水2L，60°C提取4h，重复提取一次，合并两次的上清液，60°C减压浓缩后冻干得提取物干粉 1〇
[0015] 实施例2 1、取蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl菌丝体100g，按质量体积比（g :ml) 1:30的比例加入去离 子水3L，80°C提取3. 5h，重复提取一次，合并两次的上清液，80°C减压浓缩后冻干得提取物 干粉2。
[0016] 2、取提取物干粉2,加入淀粉、硬脂酸镁等药用辅料，制备得到蝙蝠蛾拟青霉菌株 PH4tl水提物制剂2。
[0017] 实施例3 1、 取蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl菌丝体1000g，按质量体积比（g :ml )1:30的比例加入去离 子水30L，60°C提取3. 5h，重复提取一次，合并两次的上清液，80°C减压浓缩后冻干得提取 物干粉3 ; 2、 取提取物干粉3,加入碳酸氢钠、羧甲基纤维素钠等药用辅料，制备得到蝙蝠蛾拟青 霉菌株PH4tl水提物制剂3。
[0018] 以下试验表明本发明在抗疲劳、耐缺氧保健品中的用途 1、材料和方法 I. 1受试物实施例1干粉1、实施例2干粉2、实施例3制剂3。
[0019] 1.2实验动物 由吉林大学实验动物中心提供健康昆明种雌性小白鼠240只，体重18-22g。随机分为 4组，每组60只。
[0020] 1. 3动物实验室环境 温度22 °C，湿度52%。
[0021] 1.4剂量选择 该保健品制剂的推荐剂量为成人(按体重60kg计算）1.2g，按人体推荐量的10倍对小 鼠进行给药，三组受试物分别用生理盐水配置成浓度为〇. 〇2g/ml的溶液，小鼠灌胃给药30 天后测定各项指标，灌胃给药体积为〇. lml/10g。同时设置一空白对照组，用生理盐水代替 受试物进行给药，灌胃体积与受试物相同。
[0022] 1.5实验方法 1.5. 1小鼠疲劳转棒实验 小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物制剂30天后，于末次给药后30min，将 各组小鼠分别放在有机玻璃棒上，使肌肉处于静力紧张状态。进行小鼠疲劳转棒实验，将转 棒转速设置为15转/分钟，对其进行训练，在各小鼠在转棒上跌落3次后，开始记录小鼠由 于肌肉疲劳从玻璃棒上跌下的时间，平行3次。记录小鼠疲劳转棒时间。设置最高小鼠转 棒时间为300秒。实验结果如表1. 1所示。
[0023] 表1. 1小鼠疲劳转棒时间
如上表所示，小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉PH4tl制剂后，可以显著提高小鼠疲劳转棒 时间，增强小鼠肢体协调能力，结果P〈〇. 005,具有显著性差异。
[0024] 1.5.2小鼠耐力跑实验 小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物制剂30天后，进行小鼠耐力实验，将小 鼠置于FT-200动物跑步机中。先放置好动物，对小鼠训练2min，使其了解逃离带电区域后， 将转速设为20rpm，电流调到最高，记录5min内小鼠被电击的次数。结果如表1. 2所示。
[0025] 表1. 2小鼠耐力跑电击次数
结果显示，蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物制剂可以显著提高小鼠跑步时间，降低小鼠 电击次数，结果P〈〇. 005,具有显著性差异。
[0026] L 5. 3小鼠负重游泳实验 小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物制剂30天后，进行小鼠负重游泳实验， 将小鼠置于负重游泳测试仪中，每组鼠尾部系以体重10%的负荷，放入水温27±1 °C，水深 为小鼠3倍体长的桶式游泳池中（d=50cm)，测定各组小鼠持续游泳时间和力竭时间。结果 如表1. 3所示。
[0027] 表1.3小鼠负重游泳时间
结果显示，蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物制剂可以显著提高小鼠负重游泳时间，延长 小鼠力竭时间，结果P〈〇. 005,具有显著性差异。
[0028] 1. 5. 4小鼠耐缺氧实验 1. 5. 4. 1小鼠常压耐缺氧实验 小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物制剂30天后，进行常压耐缺氧实验， 125ml广口瓶中放IOg钠石灰。小鼠放到广口瓶中，塞上胶塞，采用凡士林封闭。测量小鼠 存活时间。结果如表1.4所示。
[0029] 表1. 4小鼠常压耐缺氧存活时间
实验结果显示，蝙蝠蛾拟青霉菌株水提物制剂可以显著提高常压缺氧条件下小鼠死亡 时间，结果P〈〇. 005,具有统计学意义。
[0030] 1.5. 4. 2亚硝酸钠中毒实验 小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉菌株水提物制剂30天后，末次灌胃Ih后，各组动物腹 腔注射亚硝酸钠240mg/kg*bw,立即记时，记录各受试小鼠的存活时间。结果如表1.5所 不O
[0031] 表1. 5亚硝酸钠中毒小鼠存活时间
实验结果显示，蝙蝠蛾拟青霉菌株水提物制剂可以显著提高亚硝酸钠中毒小鼠死亡时 间，结果p〈0. 005,具有统计学意义。
[0032] 1.5. 4. 3急性脑缺血缺氧实验 小鼠经灌胃给药蝙蝠蛾拟青霉菌株水提物制剂30天后，在末次灌胃Ih后，在乙醚浅 麻醉下，用粗剪刀自小鼠双耳连线处快速断头，逐只记录小鼠断头后至小鼠死亡时间。结果 如表1. 6所示。
[0033] 表1. 6急性脑缺血缺氧实验小鼠存活时间 实验结果显示，蝙蝠蛾拟青霉菌株水提物制剂可以显著提高急性脑缺血缺氧中毒小鼠 死亡时间，结果p〈0. 005,具有统计学意义。
【主权项】
1. 蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40在制备耐缺氧及抗疲劳病药物中的用途；所述的菌株已于 2014年12月26日保藏《中国典型培养物保藏中心》，命名为cAe/? PH40 ;蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40,保藏号为：CCTCCNo:M2014670。2. -种蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40水提物，是通过以下的技术方案实现的： 利用权利要求1所述蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40制成的冻干干粉，按照质量体积比 (g:ml) 1:10~1 :50的比例加入去离子水，50~100°C提取2~5小时，重复一次，合并两 次提取的上清液，旋转蒸发后冻干，得蝙蝠蛾拟青霉菌株PH4tl水提物干粉。3. 以权利要求2制备的蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40菌粉为主要成分，加以多种药用辅料， 制备得到的片剂、粉剂、胶囊剂及口服制剂。
【专利摘要】本发明公开一种蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40在制备耐缺氧及抗疲劳病药物中的用途，具有明显的医疗效果。以蝙蝠蛾拟青霉菌株PH40菌粉为主要成分，加以多种药用辅料，制备得到的片剂、粉剂、胶囊剂及口服制剂。CCTCC NO： M 201467020141226
【IPC分类】A23L1/29, A61P39/00, C12N1/14, A61K36/068
【公开号】CN104922165
【申请号】CN201510280984
【发明人】滕利荣, 王娟, 刘燕隔, 李兰洲, 胡文继, 张洋, 孟庆繁, 王迪, 权宇彤, 逯家辉
【申请人】吉林大学
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年5月28日