一株淡紫拟青霉PlTS01及其在防治烟粉虱中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物农药技术领域，具体地，涉及一株淡紫拟青霉P1TS01及其在防治 烟粉虱中的应用。
【背景技术】
[0002] 烟粉虱ifeazisiaiaAaci(Gennadius)是一类刺吸式口器的小型昆虫，也是一个正 在快速进化的复合种，其生物型B与生物型Q属于世界性大害虫。20世纪80年代以来，随 着世界范围内的贸易往来，烟粉虱借助花卉、苗木及其他经济作物的迅速扩散，在世界各地 广泛传播并爆发成灾，目前烟粉虱已广泛分布于亚洲、欧洲、美洲、大洋洲、非洲等90多个 国家和地区，给全球农业生产带来了严重的经济损失。在我国，烟粉虱已蔓延为害至除西藏 以外的各省、市与自治区，严重影响农业生产。
[0003] 烟粉虱是多食性害虫，寄主范围广泛，可危害农作物、花卉植物、野生植物，如豆 科、十字花科、茄科、菊科、萌芦科、旋花科、大戟科等。烟粉虱若虫、成虫通过口针直接刺吸 植物汁液，造成寄主营养缺乏，导致植株衰弱、黄化等症状；其分泌的大量蜜露可诱发煤污 病，造成植物光合作用下降及果实等商品价值降低；最重要的是，烟粉虱又是植物病毒的传 播媒介，其传播的双生病毒给农业生产造成严重的危害。
[0004] 防治烟粉虱依然以化学杀虫剂为主，但是化学防治的安全性及抗药性等问题越来 越突出，因此生物防治越来越受到人们的重视。淡紫拟青霉是 一类常见的土壤真菌，也是昆虫、线虫的重要病原真菌，已有一些有关淡紫拟青霉的发明专 利： 申请号为201310669589.X的专利公开了一种淡紫拟青霉菌株分生孢子用于防治温室 蚜虫、温室白粉虱等刺吸式害虫。
[0005] 申请号为201210358765. 3的专利公开了一种淡紫拟青霉菌株，并用于防治香蕉 根结线虫。
[0006] 申请号为201310538318. 0的专利公开了淡紫拟青霉航天诱变突变株的微生物制 剂及其在防治根结线虫生物中的应用。
[0007] 申请号为201210074067. 0的专利公开了一种淡紫拟青霉的培养方法及其对线虫 卵的应用。
[0008] 申请号为201110289518. 8的专利公开了一种包含淡紫拟青霉和丁硫克百威的杀 线虫组合物。
[0009] 申请号为201110024803. 7的专利公开了一种含阿维菌素和淡紫拟青霉的杀线虫 组合物。
[0010] 申请号为201310117537. 1的专利公开了一株对柑橘木虱具强致病力的淡紫拟青 霉菌株。
[0011] 申请号为201210229012. 2的专利公开了一株具有抑菌活性的淡紫拟青霉。
[0012] 综上可见，利用淡紫拟青霉防治线虫的发明专利较多，防治害虫的也有少量专利 申请，但是应用于防治烟粉虱的却未有报道。
【发明内容】
[0013] 本发明要解决的技术问题是为开发新的真菌杀虫剂提供材料，提供一株对烟粉虱 具有杀灭作用的淡紫拟青霉菌株。
[0014] 本发明的另一个目的是提供所述淡紫拟青霉菌株在防治烟粉虱方面的应用。
[0015] 为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的： 一株淡紫拟青霉（Paecilomyceslilacinus)菌株P1TS01，所述菌株于2015年3月26 日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO.M2015168,保藏地址为 中国武汉武汉大学。
[0016]P1TS01菌株的菌落特征：在察氏培养基上，起初菌落规则圆形，隆起，菌丝白色， 背面淡黄色或近米黄色；延长培养，菌落仍呈圆形，形成淡粉色色孢子层；培养14天后，菌 落直径44~46mm。
[0017] 显微结构：菌丝细长，无色透明，具分隔，宽度1.58~3. 61μπι;分生孢子梗上着 生2~5个瓶梗，瓶梗椭圆形或梭形膨大，向上逐渐细管状，长6. 07~7. 44μm，宽2. 77~3. 66 ym;其上产大量分生孢子，分生孢子串生、无色透明，单胞子呈椭圆形至卵圆形，长 2·51~3·66μπι，宽 1·77~2·66μπι。
[0018] 分子系统发育：采用通用引物ITS1、ITS4扩增P1TS01菌株的rDNA-ITS基因序 列（如SEQIDNO:1所示)，测序后与NCBI数据库中已知序列比对，构建系统发育树，结果表 明，P1TS01菌株与淡紫拟青霉处在同一分支上，同源性为99%。
[0019] 通过上述生物学性状及生理生化和分子鉴定可知，P1TS01菌株分类地位属于 真菌界（半知菌亚门丝抱纲丝抱目 (iaJes)、丛梗抱科（iftwiiaceae)、拟青霉属（〇
[0020] 本发明同时提供了所述淡紫拟青霉菌株P1TS01在防治烟粉虱中的应用。
[0021]P1TS01菌株以浓度为IX10s个分生孢子/ml，在处理第10天，2龄B型烟粉虱若 虫的累计校正死亡率达到92. 78%，半致死浓度LC5。为1. 66X10 6孢子/mL(处理后第6天)， 半致死时间LT5。为4. 35d(在1. 0X10 7孢子/mL剂量下）。
[0022] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果： 本发明所述淡紫拟青霉菌株对防治烟粉虱高效；本发明所述的菌株是一种昆虫病原真 菌，作为一种生物活体农药，具有不同现有化学杀虫剂的全新作用机理、对发展绿色生态控 制技术，为农林业的可持续发展有促进作用，具有非常好的推广应用价值。
【附图说明】
[0023] 图1为菌株在察氏培养基上培养14天的菌落形态，A :菌落正面；B :菌落背面。
[0024] 图2为淡紫拟青霉P1TS01菌株产孢结构与分生孢子。
[0025] 图3为P1TS01菌株及相关菌株的rDNA-ITS构建的系统发育树。
【具体实施方式】
[0026] 下面结合说明书附图和具体实施例来进一步详细阐述本发明。如下实施例为本发 明较佳的实施方式，本发明主要阐述所述菌株的发明思想，实施方式不一一在实施例中追 述，但并不因此限制本发明，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修 饰、替代、组合、简化，应被视为等效的置换方式，包含在本发明内。
[0027] 实施例1淡紫拟青霉菌株P1TS01的分离、筛选 采集甘肃省永登县中川镇的土壤，土壤样品过筛去掉石粒和杂物，取净土 10g悬浮于 90mL0. 05%的吐温80溶液中，摇匀，静置15min，取其上清液2mL稀释于8mL0. 05%吐 温80中。
[0028] 选择培养：将0. 1mL上述悬浮液接种于选择培养基平板表面上，用三角玻棒均匀 涂抹。25°C下，恒温培养3~6d，然后用接种环于单菌落上挑取菌丝，接种于PDA平板上继 续培养，纯化后保存于4°C冰箱中备用。