一种连翘活性部位的制备及其在防治帕金森病中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药连翅中活性部位、其制备方法W及其在一种预防和/或帕金森病 中的应用，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 帕金森病（Parkinson'Sdisease,PD)是最常见的W运动功能奈乱为特征的神经 系统退行性疾病，65岁W上人群的发病率为1%，我国大约有170万帕金森病患者。该病的 发病率随着年龄的增长而急剧上升，因此随着我国人口老龄化趋势的加剧，发病人数还将 呈现出逐年上升的趋势。ro严重危害着人类的健康，不仅给患者带来巨大的痛苦，而且给家 庭和社会造成沉重的负担。然而，目前对该病尚无有效的治疗方法，临床常用的左旋多己替 代疗法仅能够维持5年左右，随着疾病的进展，左旋多己的药效逐渐减弱，并出现严重的毒 副作用。因此探寻新的活性治疗方案迫在眉睫。
[0003] 近年来，大量药理学研究发现，线粒体呼吸链复合物I抑制剂鱼藤丽的摄入，可导 致选择性的黑质纹状体神经退行性疾病和胞浆内突触核蛋白免疫阳性包涵体的出现，即产 生明显的PD病理症状。因此许多学者认为：抑制鱼藤丽毒性是治疗PD的一种可行性方案。
[0004] PD的主要病理改变是中脑黑质多己胺能神经元的退化、调亡，为此恢复多己胺能 神经元的功能，促进多己胺的分泌就成为PD治疗的关键。中药W其毒副作用小、疗效持久、 整体调节和协同效果好等优势，已成为近年来防治PD新药的研究热点。
[0005] 连翅（化UC化S化rsythiae)，又名旱莲子--《药性论》、大翅子--《新修本草》， 为木犀科植物连翅（Forsythiasuspensa)的干燥果实，其性苦，微寒，具有清热解毒，消肿 散结的功效。中医临床常用于治疗急性风热感冒、痛肿疮毒、淋己结结核、尿路感染等症，为 双黄连口服液、双黄连粉针剂、清热解毒口服液、连草解热口服液、银翅解毒冲剂等中药制 剂的主要原料。目前，从连翅中分离鉴定的化合物类型丰富，主要为苯己醇巧类，聰类，木脂 素类，黄丽类，生物碱类，酪酸类W及其它类成分。
[0006] 申请者研究发现，通过提取纯化工艺所得的连翅活性部位具有良好的抗帕金森病 作用，能够有效抑制由鱼藤丽诱导的PC12细胞损伤，减少调亡数目。同时，从该活性部位中 分离鉴定了 15个化学成分，其中9个为新化合物。目前，尚未见有将中药连翅活性部位用 于治疗帕金森病的研究报道，也未见关于对鱼藤丽诱导损伤的PC12细胞具有保护作用的 连翅活性部位及其制备方法的专利及文献。
【发明内容】
[0007] 本发明要解决的技术问题是，提供一种新的防治帕金森病药物。
[0008] 本发明第一方面提供一种来源于连翅的活性部位；
[0009] 本发明第二方面提供送种活性部位的制备方法；
[0010] 本发明第H方面提供含有送种活性部位的药物组合物；
[0011] 本发明第四方面提供送种活性部位在防治帕金森病药物中的应用。
[0012] 为解决上述技术问题，采用如下技术方案：
[0013] 本发明第一方面提供了一种来源于连翅的活性部位，其化学特征为，其中的 15 个化学成分：forsythoneosideA(l*)、forsythoneoside6(2水)、forsythoneoside C(3*)、forsythoneosideD(4*)、isolariciresinal-9-〇-P-D-glucopyranoside(5)、 forsythensideG(6*)、forsythensideH(7*)、rengyosideD(8*)，wikstronosideA(9*)、 8-hydroxypinoresinal-4-〇-P-D-glucopyranoside(lO)、secoisolariciresinol-4-O-P -D-glucopyranoside(ll)、mussaendosideX(12*)、3'，5' -dimethoxy-4' -0-P-D-glucopy ranosyl-cinnamicacid(13)、adoxosidicacid(14)、protocatechuicaldehyde(15)，其中 1*、2*、3*、4*、6*、7*、8*、9*、12*为新化合物，其结构如下：
[0014]
[0016] 本发明第二方面提供了上述活性部位的制备方法，即连翅干燥药材粉碎后，经有 机溶剂提取得到总提取物，有机试剂依次萃取并回收溶剂，蒸傭水分散、溶解正了醇萃取部 位，静置后，离必取上清液通过大孔吸附树脂柱进行分离纯化，W水醇系统作为洗脱液进行 洗脱，得到连翅抗帕金森病活性部位。具体通过W下几个步骤实现：
[0017] 步骤一；将连翅干燥药材粉碎，使用1-10倍量（体积（mL):质量（g))的体积浓 度为0-95%己醇加热回流提取2-5次，每次提取时间为1-3小时。其中，己醇浓度优选 30-85%，更优选 50-80 %。
[001引步骤二；合并提取液后减压回收溶剂，使用蒸傭水将所得浸膏密度调至 1. 00-1. 50,并用体积比为1-5倍量的有机试剂萃取，试剂包括石油離，氯仿，己離，己酸己 醋，正了醇，但不限于上述试剂种类，每种试剂萃取1-5次，正了醇萃取部位减压浓缩并干 燥，得连翅萃取部位。
[0019] 步骤H;将连翅萃取部位进行大孔吸附树脂柱分离纯化。连翅有机试剂萃取部位 加水分散溶解，静置过夜，W3000r/min的速度离必20min，取上清液浓缩至浓度为1.Og/ 血的上样液；上样液通过弱极性或中性大孔树脂，型号为DiaionHP-10、20、30、40、50、 DM-301、AB-8、D-101、DM-130、LSA-10、HPD-826 等；树脂用量为样品量的 10-30 倍（体积 (mL):质量（g))。使用体积浓度0-10 %己醇溶剂1-4BV除杂，再用30-90 %己醇溶剂洗脱 3-6BV，收集洗脱部位减压回收溶剂并干燥，得连翅活性部位。
[0020] 本发明第H方面涉及了一种药物组合物，包括W本发明所述的方法提取的连翅活 性部位及药学上可接受的载体。
[0021] 本发明还涉及含有作为活性成份的本发明的连翅活性部位和常规药物赋形剂或 辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0. 1~95%重量的本发明活性部位。
[0022] 本发明还提供了一种药物组合物，它包括药物有效剂量的，作为活性成分的如本 发明方法制备的连翅活性部位及药学上可接受的载体。
[0023]本发明活性部位的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，女口 果需要，可将本发明活性部位与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成 可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。
[0024]本发明活性部位或含有它的药物组合物可W单位剂量形式给药，给药途径可为肠 道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼 吸道、皮肤、阴道、直肠等，优选口服给药。
[0025]给药剂型可W是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可W是溶液剂（包 括真溶液和胶体溶液）、乳剂（包括o/w型、w/o型和复乳）、混悬剂、注射剂（包括水针剂、 粉针剂和输液）、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搔剂等。固体剂型可W是片剂（包括普通片、肠溶 片、含片、分散片、巧嚼片、泡腾片、口腔崩解片）、胶囊剂（包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊）、 颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气（粉）雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可W是软 膏剂、凝胶剂、糊剂等。
[0026]本发明活性部位可W制成普通制剂、也可W是缓释制剂、控释制剂、祀向制剂及各 种微粒给药系统。
[0027] 为了将单位给药剂型制成片剂，可W广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀 释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可W是淀粉、糊精、藏糖、葡萄糖、乳 糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸巧、磯酸氨巧、碳酸巧等；湿润剂可W是水、己 醇、异丙醇等；粘合剂可W是，淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶 浆、明胶浆、駿甲基纤维素钢、甲基纤维素、居丙基甲基纤维素、己基纤维素、丙帰酸树脂、卡 波姆、聚己帰她咯焼丽、聚己二丙醇等；崩解剂可W是干淀粉、微晶纤维素、低取代居丙基纤 维素、交联聚己帰她咯焼丽、交联駿甲基纤维素钢、駿甲基淀粉钢、碳酸氨钢与构橡酸、碳酸 巧、聚氧己帰山梨糖醇脂肪酸醋、十二烷基礙酸钢；润滑剂和助流剂可W是滑石粉、二氧化 娃、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚己二醇等。
[0028] 还可W将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双 层片和多层片。
[0029] 为了将给药单元制成丸剂，可W广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例 子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氨化植物油、聚己帰化咯焼丽、 月桂酸聚己二醇甘油醋、高岭±、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄菩胶、明胶、己醇、蜂蜜、 液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基礙酸钢、甲基纤维 素、己基纤维素等。
[0030]为了将给药单元制成栓剂，可W广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例 子是，例如聚己二醇、卵磯脂、可可脂、高级醇、高级醇的醋、明胶、半合成甘油醋等。
[0031]为了将给药单元制成胶囊，将有效成分本发明活性部位与上述的各种载体混合， 并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明活性部位制 成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
[0032] 例如，将本发明活性部位制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉 针剂，送种制剂可W是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释 剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、己醇、聚己二醇、 1,3-丙二醇、己氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧己帰山梨醇脂肪酸醋等。另外， 为了制备等渗注射液，可W向注射用制剂中添加适量的氯化钢、葡萄糖或甘油，此外，还可 W添加常规的助溶剂、缓冲剂、抑调节剂等。送些辅料是本领域常用的。
[0033] 此外，如需要，也可W向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或 其它材料。
[0034] 为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给 药方法给药。
[0035] 本发明活性部位药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾 病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次 数、治疗目的，因此本发明的治疗剂量可W有大范围的变化。一般来讲，本发明中药学成分 的使用剂量是本领域技术人员公知的。可W根据本发明活性部位组合物中最后的制剂中 所含有的实际药物数量，加W适当的调整，W达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防 或治疗目的。本发明活性部位的每天的合适剂量范围，本发明活性部位的用量为0. 001~ 150mg/Kg体重，优选为0. 1~lOOmg/Kg体重，更优选为1~60mg/Kg体重，最优选为2~ 50mg/Kg体重。上述剂量可W单一剂量形式或分成几个，例如二、H或四个剂量形式给药送 受限于给药医生的临床经验W及包括运用其它治疗手段的给药方案。每一种治疗所需总剂 量可分成多次或按一次剂量给药。本发明的活性部位或组合物可单独服用，或与其他治疗 药物或对症药物合并使用并调整剂量。
[0036] 本发明第四方面涉及由上述方法得到的连翅活性部位在制备预防或治疗帕金森 病药品或保健品中的应用，经抗帕金森病药理活性实验表明具有良好的神经保护作用，体 外试验结果显示其具有明显的抗鱼