治疗抑郁症的中药组合物活性部位及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种治疗抑郁症的中药组合物活性部位及其制备方法与应用，中药组 合物是由香附和夏枯草按一定重量配比组成，属于中药技术领域。
【背景技术】
[0002] 香附和夏枯草均为常用中药，香附为莎草科植物莎草（Cyperus rotundus L.)的 干燥根茎，具有行气解郁、调经止痛的功效，为治疗肝郁气滞及妇科疾病的常用中药，含有 挥发油类、黄酮类、酚酸类、留醇类、糖类等。具有多种药理活性，如镇痛、抗炎、清热、神经 保护、抗氧化、抗诱变、降血脂、降血糖等。醋香附为香附的一种炮制品，2010年《中国药典》 一部收载的香附炮制品为醋炙香附，其炮制方法为：在香附饮片中加入20%的米醋搅匀，浸 润至醋被吸收，文火炒干即得。香附醋炙后可增强其行气解郁、调经止痛的作用。夏枯草为 唇形科植物夏枯草（Prunella vulgaris L)的干燥果穗，具有清火明目、软坚散结的功效。 含有多种活性成分，如三萜酸类、黄酮类、留醇类、香豆素类、多糖类等，具有抗菌抗炎、抗病 毒、抗氧化、降血糖、降血压、抗肿瘤等广泛的药理作用。
[0003] 抑郁症是一种常见的精神疾病，是一种以持续的心境低落为主要特征的综合症， 主要表现为情绪低落、言语减少，行动迟缓，带自罪自责，甚至企图自杀等。属中医的"郁 症"范畴，根据周仲英所著《中医内科学》对郁证症候的分类，肝郁是常见证型。传统中医 认为，肝气郁滞是临床抑郁症发病的重要因素之一，具有疏肝解郁的方药常可能具有抗抑 郁作用。另外，肝开窍于目，肝气郁滞日久易化火，会出现火盛症状，因此，香附与夏枯草组 合既能行气解郁泻火，又能清肝明目，符合中医理论治疗原则。在抑郁症模型方面，行为绝 望抑郁动物模型是比较经典的抗抑郁药物筛选和评价模型，具有简单、快捷、敏感等特点， 一般采用小鼠悬尾实验和强迫游泳实验来造模，将小鼠在规定时间内的不动时间作为考察 指标。另外还有利血平拮抗模型、慢性轻度应激抑郁动物模型等。作为抗抑郁药物的药效 学初筛，多采用小鼠悬尾实验和强迫游泳实验来进行。目前，抑郁症的发病率正在快速攀 升，已位居世界10大疾病第4位。据调查估计，到2020年，重性抑郁症的功能残疾将仅次 于缺血性心脏病，位居世界第二位。而用于治疗抑郁症的药物主要有三环类抗抑郁剂、单 胺氧化酶抑制剂和5-羟色胺再摄取抑郁剂，但长期服用都会产生不同程度的副作用，如嗜 睡、视物模糊、高血压、惊厥和性欲低下等，患者常被迫停止用药。现代药理学研究表明，抑 郁症发病机理甚为复杂，诱发原因较多，针对某单一环节的药物往往难以取得满意疗效，多 受体靶点才是治疗抑郁症的关键。另外，大多数合成的抗抑郁药物大多存在抗抑郁谱窄、有 效率低、易复发等缺陷，因此，研制安全有效的治疗抑郁症的药物是非常必要和迫切的。目 前，国内外在抗抑郁药物的研制与开发方面越来越注重通过多途径、多靶点、多层次发挥作 用的传统中药及复方。
【发明内容】
[0004] 为了解决以上问题，本发明提供了一种治疗抑郁症的中药组合物活性部位，即香 附与夏枯草组合物(重量组合比例为2:1或1:2)的醇提液萃取物(活性部位）及其制备方 法。
[0005] 本发明还提供了其活性部位在治疗抑郁症药物中的新应用。
[0006] 本发明是通过以下方式实现的： 一种香附与夏枯草组合物活性部位的制备方法，其特征包括以下步骤： (1) 粉碎：将香附和夏枯草饮片烘干，分别粉碎成粗粉，混匀； (2) 提取：将步骤（1)混合粗粉以乙醇或甲醇反复提取，提取液过滤，滤液减压回收乙 醇或甲醇至无醇味，得到醇提物； (3) 萃取：将步骤（2)醇提物加适量蒸馏水，摇匀，分别以正己烷、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取至萃取液无色，分别减压回收溶剂，将回收溶剂后得到的乙酸乙酯和正丁醇残 留液合并，搅匀，水浴浓缩后真空干燥，得到香附与夏枯草组合物的活性部位。
[0007] 步骤（1)中香附为香附饮片或醋炙香附饮片。
[0008] 步骤（1冲香附与夏枯草使用高速粉碎机粉碎成20~40目的粗粉，然后按2:1或 1:2混合。
[0009] 步骤（2)中乙醇体积百分比浓度为50%~95%，每克粗粉加8倍~15倍的乙醇或 甲醇，使用乙醇或甲醇加热回流提取2~3次，每次1~3小时；或超声提取2~3次，每次 1小时。
[0010] 步骤（2)中减压回收溶剂的条件为水浴温度50°C~70°C、压力0· 06 MP~0· 09MP。
[0011] 使用75%乙醇加热回流提取3次，每次2h。
[0012] 步骤（3)中真空干燥的条件为60°C~70°C、压力0· 07 MP~0· 09MP。
[0013] 所述的提取方法得到的萃取物可用于制备治疗抑郁症的口服剂型，这些剂型包 括：片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、冲剂、混悬剂、溶液剂、喷雾剂等；优选口服剂型，如：胶 囊剂、片剂(如分散片)、颗粒剂、口服液等。
[0014] 本发明的有益效果： Γ|)香附与夏枯草按2:1或1:2组成的组合物其活性部位的抗抑郁效果非常显著，其作 用强度均比二者单用效果好，为中药组合物增加了一种新的临床用途和新的组合比例。
[0015] ?以香附与夏枯草组合物作为抗抑郁药物的提取对象，可以发挥多途径、多靶 点、多层次的抗抑郁作用。
[0016] 藝提取方法简单，易操作，成本低。
[0017] 本发明的药效学实验结果： 1.香附与夏枯草组合物醇提物与香附醇提物、夏枯草醇提物对行为绝望抑郁小鼠模型 影响的比较 根据香附和夏枯草中化学成分的性质，以75%乙醇为提取溶媒，分别提取制备香附与 夏枯草组合醇提物、香附醇提物和夏枯草醇提物，比较了三者的抗抑郁效果，以验证香附与 夏枯草组合的合理性与优势。
[0018] (1)悬尾实验 将昆明种（ΚΜ)小鼠56只，分为7组，每组8只，按表1剂量分别给予蒸馏水及药液， 每天给药1次，连续15天，末次给药lh后，在距小鼠尾尖部lcm处，用橡皮膏倒悬贴于横杆 上6min，头部距地面约6cm，累记各组后4min小鼠不动时间，即抑郁时间。结果见表1。
[0019] 表1香附、夏枯草及香附与夏枯草不同组合醇提物对悬尾小鼠不动时间的影响 (均值X± s )
注：与对照组比较*P〈〇. 05, #P〈0. 01 根据文献，以概率相加法计算香附、夏枯草及二者组合的药效（E)及比值Q，公式为： E香附=(T模型一T香附）/T模型，E夏枯草=(?'模型一T夏枯草）/1'模型 E组合=(T模型_Τ复配）/T模型，Q=E组合/ (E香附+E夏枯草一E香附X E夏枯草) 判断标准：Q >1为二者有协同作用，组合后作用增强；Q〈1为二者组合作用强度降 低。Q=1为二者组合后协同作用不明显；其中T为各组小鼠悬尾的不动时间。本发明的结 果为： E香附=〇· 2975，E夏枯草=0· 1654，E香附:夏枯草（2:1组合)=0.4200，Q香附:夏枯草（2:1组合）=1.015 >1; 计算结果显示，香附醇提物能明显缩短小鼠悬尾的不动时间（与模型组比较P〈〇. 05); 香附与夏枯草按2:1组合后，能显著缩短小鼠悬尾的不动时间（P〈0. 01);计算的Q比值大于 1，其抗抑郁作用明显优于单用香附醇提物和单用夏枯草醇提物，说明二者组合后其抗抑郁 作用增强。
[0020] 从表1中可以看出，香附与夏枯草按不同比例组合（2:1、1:2、1:1)的醇提物，其抗 抑郁作用强度不同，以2:1或1:2配合的醇提物，其缩短小鼠悬尾的不动时间的强度最大 (与对照组比较有显著性差异P〈〇. 01，P〈〇. 05)，而以1:1组合的醇提物也有一定抗抑郁作 用，但与对照组比较无统计学意义（P>〇. 05)。
[0021] (2)强迫游泳实验 分组、给药方式及时间同上。末次给药lh后，将小鼠放于内径20cm，水深15cm的塑料 桶中，水温保持在24-26°C，测定小鼠6min内后4min不动时间。结果见表2。
[0022] 表2香附、夏枯草及香附-夏枯草不同组合醇提物对小鼠强迫游泳不动时间的影 响(均值X± s )
注：与对照组比较*P〈〇. 05, #P〈0. 01 以概率相加法计算香附、夏枯草及二者组合物醇提物的药效（E)及比值Q。公式为： E香附=(T模型一T香附）/T模型，E夏枯草=(?'模型一T夏枯草）/1'模型 E组合=(T模型-T复配）/T模型，Q=E组合/ Φ香附+E夏枯草-E香附X E夏枯草），公式中T为小鼠强迫 游泳的不动时间。
[0023] 以t检验法比较不同组与对照组之间的差异性，P值越小说明差异性越大，抗抑郁 作用越强。
[0024] 计算结果如下： 药效E香附=0· 2779, E夏枯草=0.1826，E香附:夏枯草（2:1组合)=0· 4383, Q香附:夏枯草（2:1组合）=1.070 >1 结果显示，香附醇提物能明显缩短强迫游泳小鼠的不动时间（与对照组比较P〈〇. 05); 香附与夏枯草按2:1组合后，能显著缩短强迫游泳小鼠的不动时间（P〈0. 01);计算的Q比值 均大于1，其抗抑郁作用明显优于单用香附醇提物和单用夏枯草醇提物，说明二者组合后其 抗抑郁作用增强，具有协同作用。
[0025] 从表2中可以看出，香附与夏枯草按2:1和1:2组合后的醇提物，其缩短强迫游泳 小鼠的不动时间的作用显著（P〈〇. 01和P〈〇. 01);以1:1配合的醇提物也有缩短强迫游泳 小鼠不动时间的作用（P〈〇. 05)，但作用比2:1和1:2强度要弱。
[0026] 结果说明香附与夏枯草组合后有协同抗抑郁作用；香附与夏枯草按2:1或1:2组 合，其抗抑郁作用效果更好。
[0027] 本发明的活性部位与香附与夏枯草组合水煎液的抗抑郁作用比较 我们将得到的香附与夏枯草按2:1组合的醇提物，分别以正己烷、乙酸乙酯和水饱和 的正丁醇萃取，合并乙酸乙酯和正丁醇2个萃取物，作为本发明的活性部位，同时制备香