够数目的研究参与者。
[0027] 本发明人已经研究了副干酪乳杆菌副干酪亚种或动物双歧杆菌乳亚种是否也具 有对适应性免疫的作用，适应性免疫不像先天免疫，导致针对指定病原体的特异性免疫应 答。
[0028] 为此目的，本研究被设计为研究副干酪乳杆菌副干酪亚种（干酪乳杆菌431κ, 以前保藏在美国典型培养物保藏中心（American Type Culture Collection)，保藏号 ATCC55544)和动物双歧杆菌乳亚种（，以前保藏在德国微生物菌种保藏中心 (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH)，保藏号 DSM15954) 在流感疫苗接种模型中的免疫调节特性。这些菌株均可从Chr.Hansen A/S，H0rsho丨m,:丹麦商购得到。本研究的目的是确定摄入含有干酪乳杆菌43 Γκ的乳制饮料或补充含有 ΒΒ-1的胶囊分别与安慰剂饮料或安慰剂胶囊相比，对针对疫苗的特异性免疫应答和全 身免疫应答的作用。
[0029] 本文的结果显示摄入含有副干酪乳杆菌副干酪亚种，干酪乳杆菌43厂的迷你饮 料或补充含有益生菌株动物双歧杆菌乳亚种，ΒΒ-丨21;的胶囊导致增强的对流感疫苗的体 内免疫应答。在此研究中证明的引起和加强多种补充的效应器机制被认为与针对经粘膜传 播的病原体，诸如流感病毒的最佳保护作用相关。因此，由于与相应的安慰剂组相比，在干 酪乳杆菌431?和ΒΒ-12?产品组中流感特异性抗体和总抗体增加，这些结果暗示益生菌 对粘膜和全身免疫性的有益作用。
[0030] 术语"免疫加强"意指包括其中与相应的安慰剂治疗组相比，在治疗组中疫苗特异 性抗体诸如IgG、IgGl和IgG3的浓度显著增加的情况。这种免疫加强在预防或治疗例如由 透粘膜病毒引起的疾病，例如流感、普通感冒等中可能是有效的。
[0031] 涉及的病原体特别是细菌或病毒；在后者中，将提到，例如，鼻病毒、呼吸道合胞病 毒（RSV)和粘病毒（正粘病毒诸如流感病毒（A、B或C型流感），或副粘病毒）。
[0032] 在实施本发明的背景下，菌株副干酪乳杆菌副干酪亚种（干酪乳杆菌43 ATCC55544)和动物双歧杆菌乳亚种（BB-12\DSM15954)可以单独使用，或与其他种的 其他乳酸菌联合使用。有利地，其可以与酸奶发酵物，即保加利亚乳杆菌（Lactobacillus bulgaricus)和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus)联合使用。
[0033] 菌株可以以全细菌（可以是活的或死的）的形式使用，并且也可以以细菌溶解产 物的形式，或以细菌组分的形式使用。
[0034] 优选地，在根据本发明的用途的背景下制备的组合物含有至少105,优选至少10 6， 通常 Ixl0s-1. 5xl09个细胞 /ml。
[0035] 当所述菌株与酸奶发酵物联合使用时，所述组合物也有利地包含至少107,优选 2xl0s-lxl09,嗜热链球菌细胞/ml,和至少5xl05,且优选4xl0 6-2xl07个保加利亚乳杆菌/ ml〇
[0036] 最特别地适合用于本发明中的菌株是副干酪乳杆菌副干酪亚种（干酪乳杆菌 431?, ATCC55544)和动物双歧杆菌乳亚种（BB-12?，DSM15954)菌株。这些菌株是益生 菌株。
[0037] 根据本发明制备的组合物可以以食品或食品增补剂的形式施用。它们可以，例如， 是乳制品，并且特别地是包含至少所述菌株的发酵乳制品，任选地包含与其他乳杆菌，例 如，酸奶发酵物组合的发酵乳制品。
[0038] 根据本发明制备的组合物可以在预防和治疗传染原，且特别地病毒原的病理学状 况，且特别地流感，的背景下使用。优选地，为了获得最佳效应，它们将以对应于吸收至少 1〇7,优选至少1〇8,通常109-1012个干酪乳杆菌431? 1或ββ-12?细胞的量施用至少1周，和 有利地施用至少10天。
[0039] 益生菌细胞的施用可以与疫苗同时进行，但优选在施用疫苗前施用益生菌细胞， 诸如在疫苗接种前至少1周、2周或3周。益生菌优选地定期施用，诸如一天一次或一天两 次。益生菌也可以在疫苗接种后施用，诸如疫苗接种后1周、2周、3周或4周的时期期间。 在优选的实施方案中，益生菌的施用在疫苗接种前2周进行并且持续至疫苗接种后4周为 止。
[0040] 本发明因此提供了一种治疗方案，其中益生细菌诸如上面提到的菌株与疫苗以如 上所述的剂量和时间表联合施用。
[0041] 本发明因此提供了用作免疫加强组合物的保藏号为ATCC55544或DSM15954的益 生细菌菌株，其中所述组合物在疫苗接种前1天-20天之间，或在疫苗接种前约10天施用。
[0042] 在一个实施方案中，本发明提供了用作免疫加强组合物的保藏号为ATCC55544或 DSM15954的益生细菌菌株，其中所述组合物在6周期间施用。
[0043] 在进一步的实施方案中，本发明提供了根据权利要求1或2使用的保藏号为 ATCC55544或DSM15954的益生细菌菌株，其中所述组合物是乳制饮料或胶囊。
[0044] 将借助于下面的进一步描述更清楚地理解本发明，下面的进一步描述是指说明干 酪乳杆菌或双歧杆菌菌株的用于增强对微生物抗原的特异性应答的特性的非限制性实例。
[0045] 实施例
[0046] 实施例1
[0047] 总体研究设计和计划-描述
[0048] 这是一个随机化、双盲的、安慰剂作对照的平行组研究，其在疫苗接种模型中评价 了两种益生菌株对免疫性的作用。该研究包括至少2周持续时间的筛选阶段，6周持续时间 的补充阶段（期间进行疫苗接种（补充2周后）），和10周持续时间的随访期（期间不补 充益生菌）。在马上进行补充前（第0天）和补充6周后（第42天）收集用于分析功效参 数的血液和唾液样品。在补充阶段期间一直收集关于上呼吸道感染/症状（URTI)和流感 样病（ILI)的症状的信息，并且在10周随访后再次收集。
[0049] 用于此研究的条件如下：
[0050] 受试者的安排
[0051] 总共221名受试者入选参与研究，并且随机化至4个治疗组之一。56名受试者被 分派至安慰剂饮料组，59名分派至干酪乳杆菌431?饮料组，52名分派至安慰剂胶囊组和 54名分派至ΒΒ-12 μ胶囊组。总计，1〇名受试者在研究期间退出，这1〇名中其中仅1名受 试者接受了流感疫苗。
[0052] 四种治疗方式是含有益生菌株副干酪乳杆菌副干酪亚种，干酪乳杆菌 431@ (干酪乳杆菌431?)的饮料或安慰剂饮料，含有益生菌株动物双歧杆菌乳亚 种，ΒΒ-12??：ΒΒ-12φ；)的胶囊或安慰剂胶囊。安慰剂产品类似于活性产品，然而，不含 活性成分，并且受试者、研究人员和员工不知道受试者摄入哪种产品，仅知道其是饮料或胶 囊。
[0053] 1. 1. 1 筛选（第-14 - 0 天）
[0054] 在筛选时，对每个可能受试者给予研究目的以及治疗和评价细节的完备解释。通 过收集人口统计学信息，包括饮食习惯和健康史来评价受试者参与研究的资格。
[0055] 另外，指示受试者从筛选访问至研究结束他们不允许摄入哪个发酵产品。
[0056] 可以通过电话进行筛选。如果在临床中心处筛选受试者并且发现合格，则在同一 天进行V2程序。
[0057] 1. 1. 2随机化访问（访问2,第0天，基线）
[0058] 在V2,受试者签署知情同意文件。另外，进行下列的程序和评价：
[0059] ?资格审核（纳入/剔除标准）
[0060] ?医学史
[0061] ?提供空腹血液样品用于分析免疫学标志物
[0062] ?提供唾液样品用于分析免疫球蛋白
[0063] ?包括身高和体重、生命体征（心率、血压、体温和呼吸频率）和感染状态的临床 检查
[0064] ?记录伴随用药
[0065] ?入选受试者的随机化
[0066] 鲁分配补充期所需要的所有胶囊或因为有效期而分批分配的部分饮料
[0067] 鲁关于在研究期间不允许受试者摄入哪些发酵产品的指示
[0068] 给受试者提供日记本以收集下列信息：
[0069] ?按已确定的感冒和流感样症状列表每周记录一次发生率、持续时间和严重性
[0070] ?基于症状日记每4周一次记录流感样病（ILI)的症状
[0071] ?记录整个研究期间的不良作用（ΑΕ)
[0072] ?记录整个研究期间研究的产品的遗漏剂量
[0073] 在第0天受试者开始摄入研究的产品。
[0074] 1. 1. 3疫苗接种访问（访问3,第14天）
[0075] 在 V3，对受试者肌内注射对 2〇〇8/2〇〇9 流行病（FluacT, Novartis Vaccines and Diagnostics, Siena, Italy)中涉及的病毒特异的流感疫苗。另外，进行感染状态的临床检 查，并且评价AE。受试者继续摄入研究的产品持续下一个4周。
[0076] 1. 1. 4评价访问（访问4,第42天）
[0077] 在V4,进行下列的程序：
[0078] ?提供空腹血液样品用于分析免疫学标志物
[0079] ?提供唾液样品用于分析免疫球蛋白
[0080] ?包括身高和体重、生命体征（心率、血压、体温和呼吸频率）和感染状态的临床 检查
[0081] ·ΑΕ 评价
[0082] ?记录伴随用药
[0083] 1 · 1 · 5随访访问（访问5,第112天）
[0084] 在V5,进行下列的程序：
[0085] ?包括身高和体重、生命体征（心率、血压、体温和呼吸频率）和感染状态的临床 检查
[0086] ?不良反应评价
[0087] ?记录伴随用药
[0088] 在研究方案中，此最后一次访问包括检查感染状态并收集关于上呼吸道感染/症 状（URTI)和流感样病（ILI)的症状的信息。然而，由于在2009年8月进行访问并且发现这 些症状的机会很