含有源自绿茶种子的21-o-当归酰茶皂醇e3的抗氧化或皮肤美白用组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种含有源自绿茶种子的21-0-当归酰茶皂醇Ε3成分作为有效成分 的抗氧化或皮肤美白用组合物，更具体地，涉及一种含有通过利用酸、碱、酶或生产上述酶 的微生物的分解反应，从绿茶种子提取物中获得的21-0-当归酰茶皂醇Ε3成分作为有效成 分，从而具有优异的抗氧化及皮肤美白功效的组合物。
【背景技术】
[0002] 随着年龄的增长，人类的皮肤根据各种内因和外因而产生变化。即，从内部而 言，用于调节新陈代谢的各种激素的分泌减少，免疫细胞的功能和细胞的活性降低，从而 导致生物体所需的免疫蛋白和构成生物体的蛋白质的生物合成减少；从外部而言，由于 臭氧层的破坏，导致太阳光线中到达地表的紫外线的含量增加，环境污染日益严重而导致 自由基和活性有害氧等的增加，从而引起各种皮肤问题。以稳态存在的氧由于酶、还原代 谢、化学药品、公害物质、光化学反应等环境和生物化学因素等而转化为超氧阴离子基团 (superoxide anion radical，02)、羟基（hydroxyl radical，OH)、过氧化氢（hydrogen peroxide，H2〇2)、纯态氧（singlet oxygen，等反应性大的活性氧（reactive oxygen species :R0S)，就会非可逆地破坏作为人体细胞构成成分的蛋白质、脂质及DNA等。上述活 性氧的作用可以通过作为体内防御工具的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，S0D)、 过氧化氢酶（catalase)、过氧化物酶（peroxidase)、谷胱甘肽（glutat hione)等抗氧化性 酶和维生素C (vitamin C，抗坏血酸（ascorbic acid))、维生素E (tocopherol)等抗氧化物 质的作用而被最小化。但是，已知这种生物体防御力发生异常或过度暴露在活性氧中时， 残留或过剩的活性氧对生物体产生致命的氧毒性，并且诱导作为细胞构成成分的脂质、蛋 白质、糖、DNA等产生非选择性及非可逆性的破坏，进而不仅引起老化、还会引起包括癌症在 内的中风、帕金森病等脑病、心脏疾病、缺血、动脉硬化、皮肤病、消化系统疾病、炎症、风湿、 自身免疫疾病等各种疾病（Cross et al·，Ann. Intern. Med.，1987, 107, 526 ;Alderson et al.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，1988, 85, 2706)〇
[0003] 为了开发天然抗氧化剂，人们研究了很多源自天然物质的原料，但现实是以往大 部分源自天然物质的原料以简单提取物的形态使用，并没有正确地表明其提取物显示出的 功效是哪种物质所引起的，而是通过经验和口传用于化妆品等中。
[0004] 另外，在决定人的肤色方面，与多种因素有关。其中，生成黑色素的黑素细胞 (melanocyte)的活动性、血管的分布、皮肤厚度及类胡萝卜素、胆红素等人体内外色素含有 与否等因素尤为重要。
[0005] 其中，最重要的因素是在人体内的黑素细胞中由酪氨酸酶等多种酶的作用而生成 的被称为黑色素的黑色的色素。遗传因素、激素分泌、压力等相关的生理因素和紫外线照射 等环境因素会对所述黑色素的形成产生影响。
[0006] 由身体皮肤的黑色素细胞生成的黑色素是具有黑色色素和蛋白质的复合体形态 的酚类高分子物质，其担负着阻断从太阳照射的紫外线，从而保护真皮以下的皮肤器官的 同时，还起到捕捉皮肤生物体内生成的自由基等的保护皮肤内蛋白质和基因的有益作用。
[0007] 如上所述，由于皮肤内外的应激刺激而产生的黑色素是一种即使在应激消除之 后，在通过皮肤的角质化而向外部排出之前不会被去除的稳定的物质。但是，黑色素以超过 所需的量大量生成时，会诱发痣、雀斑、斑点等过色素沉着症，从而给美容方面带来不良的 结果。
[0008] 此外，随着休闲人群的增加而使喜欢在户外活动的人的数量增多，对于阻断紫外 线引起的黑色素沉着的需求也日益增加。
[0009] 为了迎合这种需求，从前就开始将抗坏血酸、曲酸、熊果苷、对苯二酚、谷胱甘肽或 它们的衍生物，或具有酪氨酸酶阻碍活性的物质与化妆品或医药品配合使用，但是由于它 们的不充分的美白效果、对皮肤的稳定性问题、配合化妆品时出现的剂型及稳定性等问题， 其使用受到限制。
【发明内容】
[0010] 要解决的技术问题
[0011] 为此，本发明的发明人为了解决上述问题，并寻找能够显示出更优异的抗氧化及 皮肤美白效果的物质而进行研究的结果，确认了通过利用酸、碱、酶或生成上述酶的微生物 的分解反应而从绿茶种子提取物中得到的21-0-当归酰茶皂醇E3成分具有优异的抗氧化 及皮肤美白效果，由此完成了本发明。
[0012] 因此，本发明的目的在于，提供一种含有从绿茶种子提取物中获得的21-0-当归 酰茶皂醇E3成分的抗氧化或皮肤美白用组合物。
[0013] 技术方案
[0014] 为了解决上述问题，本发明提供一种含有21-0-当归酰茶皂醇E3作为有效成分的 抗氧化用皮肤外用剂组合物。
[0015] 此外，本发明提供一种含有21-0-当归酰茶皂醇E3作为有效成分的皮肤美白用皮 肤外用剂组合物。
[0016] 有益效果
[0017] 本发明的21-0-当归酰茶皂醇E3除了具有抑制二苯基苦基苯肼（DPPH)及活 性氧（R0S)生成等的抗氧化效果外，同时还显示出基于抑制黑色素生成、改善由紫外线 (ultraviolet rays ;UV)而生成的色素沉着的效果的优异的皮肤美白效果，从而根据本发 明的21-0-当归酰茶皂醇E3可有效地用作抗氧化、皮肤美白用化妆品组合物或药物组合物 等皮肤外用剂组合物或食品组合物。
【具体实施方式】
[0018] 本发明提供一种含有下述化学式1所示的21-0-当归酰茶皂醇 E3(21-〇_angeloyltheasapogenol E3)作为有效成分的组合物：
[0019] 化学式1
[0020]
[0021] 所述21-0-当归酰茶皂醇E3优选源自绿茶种子。
[0022] 本发明中使用的21-0-当归酰茶皂醇E3可通过包括如下步骤的方法来制备，该方 法包括：利用水或有机溶剂从植物中获得皂苷粗提取物的第一步骤；及利用酸、碱、酶或生 产上述酶的微生物，将上述提取物进行水解，从而分离21-0-当归酰茶皂醇E3的第二步骤。
[0023]第一步骤：皂苷粗提取物的获得
[0024] 从植物，尤其是从绿茶种子中获得皂苷粗提物。此时，提取溶剂可以使用水或有机 溶剂，有机溶剂可以使用选自乙醇、甲醇、丁醇、醚（ether)、乙酸乙酯及氯仿中的一种以上 的有机溶剂或它们与水的混合物，优选使用50%乙醇。
[0025] 为了利用水或有机溶剂从植物中获得皂苷粗提取物，向植物中添加约1至6倍的 水或有机溶剂，优选添加约3倍的水或有机溶剂，并在常温下搅拌并提取1至5次，从而使 植物脱脂。在脱脂的植物中加入约1至8倍的水或有机溶剂，优选加入约4倍的水或有机 溶剂，并进行回流提取1至5次，然后在10至20°C下沉淀1至3天。然后，通过过滤和离心 分离来分离残渣和滤液，将分离的滤液减压浓缩获得榨取物（extract)，将获得的榨取物在 水中悬浮后，利用乙醚等去除色素。将水层使用有机溶剂提取1至5次后，将获得的有机溶 剂层减压浓缩，从而获得有机溶剂榨取物，然后将该榨取物溶解于少量的甲醇、乙醇、丙醇、 丁醇等中。然后，添加大量的乙酸乙酯、乙腈（acetonitrile)等来生成沉淀物，将该沉淀物 干燥，从而获得本发明的皂苷粗提取物。
[0026] 第二步骤：21-0-当归酰荼皂醇E3的分离
[0027]将上述第一步骤中获得的皂苷粗提取物进行水解，从而能够分离21-0-当归酰茶 皂醇E3,上述水解可以利用酸、碱、酶或生产上述酶的微生物来进行。
[0028]所述酸可以使用选自盐酸、硫酸和硝酸中的一种以上的酸，或这些酸与选自乙醇、 甲醇和丁醇中的一种以上的醇的混合溶剂，优选使用上述酸与50%乙醇的混合溶剂。
[0029]利用酸进行水解时，在皂苷粗提取物中添加0.1~2N浓度的酸，优选添加1N浓度 的酸；或添加1~10%的量的酸和醇的混合溶剂，在50~100°C下，优选在80°C的水浴槽 中加热回流0. 5~8小时，优选1小时。
[0030]所述碱可以使用选自甲醇钠、氢氧化钠和氢氧化钾中的一种以上的碱，或这些碱 与选自乙醇、甲醇和丁醇中的一种以上的醇的混合溶剂，优选使用上述碱与50%的丁醇的 混合溶剂。
[0031]利用碱进行水解时，将皂苷粗提取物溶解于水或水和乙醇的混合溶剂中后，添加 0. 1~2N浓度的碱，