优选添加IN浓度的碱，或以1~10%的量添加碱和醇的混合溶剂后， 在50~100°C，优选100°C的水浴槽中加热回流0. 5~24小时，优选12小时。
[0032] 所述酶是分解糖苷键的酶，它的特点是能够去除绿茶皂苷中糖的部分，从而生成 21-0-当归酰茶皂醇E3。该酶可以使用市售的或者根据需要制备使用，特别是可以从生成 上述酶的微生物中获得。
[0033] 此外，上述酶可以更加优选使用选自葡糖苷酶（glucosidase)、阿拉伯糖苷 酶（arabinosidase)、鼠李糖昔酶（rhamnosidase)、木糖昔酶（xylosidase)、纤维素酶 (cellulase)、橘皮苷酶（hesperidinase)、柚皮苷酶（naringinase)、葡糖醛酸糖苷酶 (glucuronidase)、果胶酶（pectinase)、半乳糖苷酶（galactosidase)及淀粉葡糖苷酶 (amyloglucosidase)中的一种以上。
[0034] 此外，生产所述酶的微生物可以使用选自曲霉属（Aspergi1lus)、杆菌属 (Bacillus)、青霉菌属（PeniciIlium)、根霉属（Rhizopus)、根毛霉属（Rhizomucor)、踝节 菌属（Talaromyces)、双歧杆菌属（Bifidobacterium)、被抱霉属（Mortierella)、隐球菌 属（Cryptococcus)、细杆菌属（Microbacterium)、明串珠菌属（Leuconostoc)及乳酸菌属 (Lactobacillus)中的一种以上。
[0035] 利用酶进行水解时，将皂苷粗提取物溶解于5至20倍，优选约10倍的酸性缓冲溶 液中，然后添加0. 001~10%的酶。然后将其在约25~37°C水浴中搅拌约40至55小时，优 选约48小时，利用薄层色谱法确认底物的消除率，待底物完全消失，在热水（80~100°C) 中加热5至15分钟终止反应。
[0036] 利用微生物进行水解的情况下，将皂苷粗提取物溶解于5至10倍，优选约10倍的 离子水中，然后在121°C下灭菌30分钟后冷却到30°C。然后，将预培养的微生物以相对于 液体量为5~10重量％的量进行接种，在20~30°C下培养2至5天，优选培养5天，然后， 利用薄层色谱法确认底物的消除率，待底物完全消失，以5, 000~10,OOOrpm离心分离培养 液，将回收的沉淀物用蒸馏水洗涤3次，然后通过离心分离来获得沉淀物。
[0037] 如上所述，利用酸、碱、酶或生产上述酶的微生物来进行水解后，对反应液进行减 压浓缩，从而去除溶剂，并且在残渣中加入乙醇并搅拌1~5次。然后，通过过滤去除沉淀 的盐，将过滤的滤液减压浓缩获得粗生成物，通过硅胶柱层析法（氯仿：甲醇=8 :1~4 :1) 来分离获得的粗生成物，从而能够获得21-0-当归酰茶皂醇E3。
[0038] 本发明的组合物以组合物总重量的0. 0001~10重量％的量包含如上述方法制备 的21-0-当归酰茶皂醇E3。上述含量不足0. 0001重量％时，无法获得上述成分所带来的抗 氧化或皮肤美白效果；含量即使超过10重量％，含量的增加所带来的效果的提升不大。
[0039] 本发明的组合物可以用作抗氧化组合物，其对DPPH和R0S生成的抑制效果优异。
[0040] 此外，本发明的组合物可用作皮肤美白用组合物，其抑制黑色素生成，改善因紫外 线（ultravioletrays:UV)而生成的色素沉着的效果优异。
[0041] 本发明的组合物含有化妆品学或皮肤科学上允许的介质或者基材，可剂型化为化 妆品组合物或药学组合物。其可以为适于局部应用的所有剂型，例如，可以提供为溶液、凝 胶、固体、糊状无水生成物、在水相中分散油相而获得的乳液、混悬液、微乳液、微胶囊、微细 颗粒球或离子型（脂质体）或非离子型小囊分散剂形态，或霜、化妆水、洗剂、粉、软膏、喷雾 或遮瑕棒形态。此外，也可以以泡沫（foam)形态或进一步含有压缩推进剂的气溶胶组合物 形态使用。这些组合物可通过本领域公知的方法制备。
[0042] 此外，本发明组合物还可以含有脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、凝胶化剂、 软化剂、抗氧化剂、混悬剂、稳定剂、发泡剂（foamigagent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子 型或非离子型乳化剂、填充剂、螯合剂、络合剂、保存剂、维生素、阻断剂、湿润剂、精油、染 料、颜料、亲水性或亲油性活性剂、脂质小囊或通常用于化妆品的任一种其它成分等在化妆 品学或皮肤科学领域通常使用的助剂。上述助剂以化妆品学或皮肤科学领域通常使用的量 加入。
[0043] 此外，本发明的组合物为了增加抗氧化或皮肤美白效果，还可以含有皮肤吸收促 进物质。
[0044] 此外，本发明的组合物可剂型化为食品组合物，例如，可剂型化为各种食品类、饮 料、口香糖、茶、维生素复合剂、健康功能性食品类和多种食品添加剂的形态。
[0045] 本发明的食品组合物除以公开的比例含有21-0-当归酰茶皂醇E3作为必需成分 之外，对于其它成分没有特别的限定，可以像通常的饮料那样含有各种香味剂或天然碳水 化物等附加成分。上述天然碳水化物的例子有包括例如葡萄糖、果糖等单糖；例如麦芽糖、 蔗糖等二糖；及例如糊精、环糊精等多糖的通常的糖类；以及木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇 等糖醇。除上述以外的香味剂可使用天然香味剂（索马甜、甜菊提取物（例如，甜叶菊甙A、 甘草素等））及合成香味剂（糖精、阿斯巴甜等）。上述天然碳水化物的比例为，相对于本发 明的组合物l〇〇ml，通常含有约1~20g，优选含有约5~12g，但不限于此。
[0046] 此外，本发明的食品组合物在不影响本发明的主要效果的范围内，可以含有对主 要效果起到提升作用的其它成分。例如，为了改善物理性质可以进一步含有香料、色素、杀 菌剂、抗氧化剂、防腐剂、保湿剂、增稠剂、无机颜料、乳化剂及合成高分子等添加剂。此外， 还可以含有水溶性维生素、油溶性维生素、高分子肽、高分子多糖及海草榨取物等辅助成 分。上述成分根据剂型或使用目的，本领域技术人员可以容易地适当选择并配合使用，其添 加量可在不影响本发明目的及效果的范围内选择。例如，上述成分的添加量可以是相对于 组合物总重量的0.01~5重量％，更具体地，可以是0.01~3重量％范围。
[0047] 下面，通过实施例和实验例进一步详细说明本发明，但本发明的范围并不由此限 定。
[0048] [实施例1]:绿茶种子提取物的制备
[0049] 在2kg的绿茶种子中添加6L的己酸，通过在常温下搅拌提取3次来进行脱脂，在 lkg的脱脂的绿茶种子中添加4L的50%乙醇，回流提取3次后，在15°C下沉淀1天。然后， 通过滤布过滤和离心分离将残渣和滤液分离，然后将对分离的滤液进行减压浓缩而得到的 榨取物悬浮于水中，利用1L的乙醚提取5次，从而去除色素，将水层用500ml的1-丁醇提取 3次。将由此获得的全部1- 丁醇层进行减压浓缩，从而获得1- 丁醇榨取物，将上述获得的 1-丁醇榨取物溶解于少量的甲醇中，添加大量乙酸乙酯进行沉淀，将沉淀物干燥，由此获得 300g绿茶种子提取物（皂苷粗提取物）。
[0050] [实施例2]:通过酸水解方法来制备21-0-当归酰茶皂醇E3
[0051] [2-1]向10g的从上述实施例1中获得的绿茶种子提取物中加入20倍（v/w)的 INHC1-50%甲醇溶液（v/v)，并在80°C水浴槽中加热回流8小时，使结合于绿茶种子粗皂 苷上的糖水解。将反应液减压浓缩去除溶剂，然后在残渣中加入乙醇（200ml)并搅拌3次， 然后通过过滤来去除沉淀的盐。将过滤的滤液减压浓缩获得粗生成物，然后利用硅胶柱层 析法（氯仿：甲醇=7 :1~3 :1)来分离上述获得的粗生成物，从而获得0. 55g的21-0-当 归酰茶皂醇E3。
[0052] [2-2]向10g的从上述实施例1中获得的绿茶种子提取物中加入20倍（v/w)的1M H2S04-30%水溶液（v/v)，在90°C水浴槽中加热回流8小时，使结合于绿茶种子粗皂苷上的 糖水解。将反应液减压浓缩去除溶剂，然后在残渣中加入乙醇（200ml)搅拌3次，然后通过 过滤来去除沉淀的盐。将过滤的滤液减压浓缩获得粗生成物，然后利用硅胶柱层析法（氯 仿：甲醇=7 :1~3 :1)来分离上述获得的粗生成物，从而获得0. 59g的21-0-当归酰茶皂 醇E3〇
[0053] [2-3]向10g的从上述实施例1中获得的绿茶种子提取物中加入20倍（v/w)的 1MHN03-10%7X溶液（v/v)，并在90°C水浴槽中加热回流8小时，使结合于绿茶种子粗皂苷 上的糖水解。将反应液减压浓缩去除溶剂，然后在残渣中加入乙醇（200ml)搅拌3次，然后 通过过滤来去除沉淀的盐。将过滤的滤液减压浓缩获得粗生成物，然后利用硅胶柱层析法 (氯仿：甲醇=7 :1~3 :