一种开菲尔发酵黑人参粉及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种开菲尔发酵黑人参粉及其制备方法，属于药物保健品技术领域。
【背景技术】
[0002] 人参皂巧并不是W天然形式被人体直接吸收，也不被胃液及肝脏酶分解，能被人 体直接吸收利用的程度极低。人参真正起治疗作用的是人参皂巧经肠道微生物代谢生成的 次生代谢产物，即人参皂巧C-K、化1、化2、Rgi、R拓等稀有人参皂巧。稀有人参皂巧具有极强 的生理活性，如人参皂巧C-K、化1、化2等，具有极强的抗癌活性和医药保健价值。
[0003] 人体肠道细菌的种类和个体代谢差异很大，日常饮食、健康状况、精神压力等均会 影响人体内人参皂巧的代谢和吸收，不同的人会产生不同的药效。因此，提高人参制品中的 稀有人参皂巧含量，增强药理活性，提高药效，节省药材资源，都具有十分重要的意义。
[0004] 在现有技术中，黑人参一般采用发酵法和加热法。发酵法是W细菌类、真菌类、担 子菌、肠道菌等为菌种，经发酵过程中产生的复合酶对人参皂巧进行水解反应，完成人参皂 巧的生物转化。发酵法制成的黑人参制品含有大量的稀有人参皂巧和巧元，其优点是反应 条件溫和，发酵过程粗放，不需严格的无菌条件，操作简单，无污染。加热法是国内外生产红 参的主要方法。黑人参一般采用九蒸九晒的生产工艺，利用美拉德反应、氧化反应、热水解 反应所产生的褐变而制成的黑人参。其缺点是稀有人参皂巧含量低，反应条件剧烈，专属性 不强，耗工耗时，浪费能源。另有采用酶解法获得稀有人参皂巧的大量报道，其方法是W人 参皂巧糖巧酶为高效催化剂对人参底物进行酶解，转化成稀有人参皂巧。一般酶反应适合 溫度为40°c~50°C，制备人参皂巧C-K时，皂巧底物浓度在0.2%~1.0%之间；制备人参皂 巧陆2时，皂巧底物浓度在2%~2. 5%之间。其优点是可W定向转化，反应条件溫和。缺点 是反应底物浓度低，产量低，操作和技术条件复杂。 阳0化]开菲尔粒（Kefirgrain)起源于世界第一长寿地区的高加索地区，经自然形成的 不规则乳白色或乳黄色、形状不规则的菌块颗粒物。开菲尔粒是由数十种乳酸菌、乳球菌、 明串珠菌、酵母菌、醋酸菌和枯草芽抱杆菌所组成的复合型发酵菌，其中乳酸菌包括高加索 乳杆菌、开菲尔乳杆菌、醋酸菌等；乳球菌包括乳链球菌、明串球菌等；酵母菌包括巨大克 鲁维氏酵母菌、串状酿母菌等。开菲尔粒所包含的微生物变化多样，是数十种微生物几千年 来长期共生所形成的具有特定菌相的结合体。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种稀有人参皂巧含量高，经济实用， 易于操作的开菲尔发酵黑人参粉及其制备方法。
[0007] 本发明的技术方案是：一种开菲尔发酵黑人参粉的制备方法，是W开菲尔粒为菌 种，经菌种驯化、产酶诱导制成人参皂巧复合酶发酵液；人参经固体发酵、灭活、真空干燥、 超微粉碎，制成开菲尔发酵黑人参粉。
[0008] 上述方案中： 所述的人参皂巧复合酶发酵液是将开菲尔粒逐步转接至脱脂奶粉：麦芽汁：水分别为 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6、0:1:1 的培养基中，依次添加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%、5. 0%的人参粉或人参提取物，分别W25°C~38°C培养24~120h，分离发 酵液，得到人参皂巧复合酶发酵液。
[0009] W0. 2%~0. 5%氯化钢水溶液作为酶激活剂。
[0010] W人参皂巧复合酶发酵液接种人参粉，初期发酵溫度28°C~38°C，发酵1~5d; 后期发酵溫度38°C~42°C，发酵5~10天。
[0011] 人参是指鲜人参、生晒参、红参或人参须。
[0012] 一种开菲尔发酵黑人参粉的制备方法，其步骤如下： (1)人参皂巧复合酶发酵液制备：用脱脂奶粉、波美度为12°Be'的麦芽汁、水作为培 养基，人参粉或人参提取物为产酶诱导剂。将开菲尔粒逐步转接至脱脂奶粉：麦芽汁：水分 别为 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6 不同的培养基中，依次加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%的人参粉或人参提取物，分别W25°C~38°C培养24~4她，逐次增加培养 溫度，最后将开菲尔粒接种于麦芽汁：水为1:1的培养基中，添加5. 0%的人参粉或人参提 取物，W35°C~38°C培养48~12化，分离发酵液，得到人参皂巧复合酶发酵液。用此发酵 液对人参进行固态发酵，使其含有的原人参二醇类或Ξ醇类皂巧转化为稀有人参皂巧，制 成开菲尔发酵黑人参粉。
[0013] (2)W0. 2%~0. 5%氯化钢水溶液作为酶激活剂，喷入人参表面(人参是指鲜人参、 生晒参、红参或人参须中一种或几种组合)，干燥后粉碎成粗粉。
[0014] (3 )粗粉装入好氧发酵罐，装料体积为60%~80%，W30~12化pm速度揽拌，通入 蒸汽，90°C~110°C杀菌20~30min;冷却至40°CW下；在揽拌情况下按10%~20%接种量 接种人参皂巧复合酶发酵液，混合均匀，使含水量达到30%~90%。
[0015] (4)发酵罐转速30~12化pm，初期发酵溫度28°C~38°C，上下通入无菌空气，发 酵3~5d;后期发酵溫度38°C~42°C，发酵5~10天；每天观察含水量、溫度、转速等情况， 适时进行调整。
[0016] (5)发酵完成后，罐内通入蒸汽，W100°C~120°C灭活20~30min。 阳017] (6)将冷却后的发酵产物装盘，转入真空干燥箱，W65°C~75°C干燥至水分《5%。
[0018] (7)用带有超细粉分离器的粉碎机粉碎，粉碎成100~250目的粉末，制成开菲尔 发酵黑人参粉。
[0019] 本发明所述的方法是采用开菲尔粒为菌种，利用其复杂的微生物结构、菌群的多 样化和共生等特性，通过菌种驯化，选育出旺盛的优势菌群，通过诱导制备人参皂巧复合酶 发酵液。用此发酵液对人参进行固态发酵，使其含有的原人参二醇类或Ξ醇类皂巧转化为 稀有人参皂巧，制成开菲尔发酵黑人参粉。
[0020] 本发明的原理是：对人参中不被人体直接吸收的原人参二醇类皂巧或Ξ醇类皂巧 进行糖基结构修饰改造，利用人参皂巧复合酶发酵液对人参进行水解，使人参中含有的原 二醇类人参皂巧化1、化2、化I、Rc转化为人参皂巧C-K、化2及其巧元（PPD)，原人参Ξ醇类 皂巧Re、Rgi、Rg2转化成化1及其巧元（PPT)。 阳02U 原人参二醇类皂巧的转化途径：抓1 一Rd-F2-C-K和巧元（PPD); 化2一Rd-C-Y-C-K和巧元（PPD);Rd-F2-C-K和巧元（PPD);Rd-Rg3-化 2和巧元 (PPD);Rc一Mb一Me一C-K和巧元（PPD)。
[0022] 原人参Ξ醇类皂巧的转化途径：Re-Rgi或Rg2-F1或化1和巧元（PPT)。
[0023] 人参皂巧C-K(compoundK)是天然的二醇型人参皂巧在人肠道内的代谢产物，是 人参真正发挥药理高活性的化合物，是一个多祀点，可W直接作用于人体的高效成分。在抗 皮肤老化、抗肿瘤、抗炎、保护屯、肌、保肝、抗过敏等方面具有更好的生物活性，在神经系统 及免疫系统方面具有很好的调节作用，出色的药理活性越来越受医学界的关注。
[0024] 人参皂巧化1具有促进肝细胞增殖和促进DNA合成的作用，可用于治疗和预防肝 炎、肝硬化。
[0025] 人参皂巧化2具有抑制癌细胞向其它器官转移，增强机体免疫力，快速恢复体质， 对癌细胞具有明显的抗转移作用，服用人参皂巧化2可增强手术后伤口的愈合及体力恢复。 [00%] 本发明优点是：1、反应条件溫和，高底物浓度可产出高浓度产物，节省能源、无需 严格的无菌条件，无污染。2、本方法得到的发酵黑人参粉稀有人参皂巧含量高，经济实用， 方法易于操作。3、经通化市产品检验所检测（NO:WJ20150459)，黑人参粉人参皂巧化1、化2 、尺邑1,(：-1(、1?拓分别为2.08(111邑/邑）、0.80(111邑/邑）、2.34(111邑/邑）、4.56(111邑/邑）、4.03(111邑/邑）。【具体实施方式】
[0027] 下面结合实施例对本发明做进一步地描述。 阳0測 实施例1 开菲尔发酵黑人参粉的制备方法： 1、人参皂巧复合酶发酵液制备：用脱脂奶粉、波美度为12°Be'的麦芽汁、水作为培养 基，人参粉或人参提取物为产酶诱导剂。将开菲尔粒逐步转接至脱脂奶粉：麦芽汁：水分 别为 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6 不同的培养基中，依次加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%的人参粉或人参提取物，分别W25°C~38°C培养24~4她，逐次增加培 养溫度，最后接种于麦芽汁：水为1:1的培养基中，添加5. 0%的人参粉或人参提取物，W 35°C~38°C培养48~12化，分离发酵液，得到人参皂巧复合酶发酵液。
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