物对大鼠骨量的影响研究 1、实验目的及方法 目的:根据《中药新药药理学研究指南》的要求，研究本发明中药组合物在治疗绝经后 骨质疏松症的主要药效学。取用本发明实施例一所得片剂，粉碎，加水，调成糊状，通过灌胃 给药，观察本发明片剂高、中、低剂量对大鼠骨量的影响，骨量是目前评价骨质疏松症治疗 效果的"金标准"。骨密度和骨巧含量可分别从不同侧面反映骨量，是骨质疏松症临床诊断 W及评估疾病程度的客观的量化指标。
[0034] 方法:60只雌性SD大鼠，体重250-310g，各批大鼠皆随机分为6组，各组分笼喂 养。其50只切除双侧卵巢，术后给予青霉素防止感染；10只SD大鼠切除双侧卵巢旁各一块脂 肪组织作假手术组，术后给予青霉素防止感染。术后45天，将去卵巢SD大鼠随机分成五组， 按组合物高剂量组(2.4g/Kg)、组合物中剂量组（1.2g/Kg)、组合物低剂量组(0.4g/Kg)、 阳性对照组和模型组(等容积生理盐水)灌胃给药，每日一次，连续90天。阳性对照组给予去 胶囊壳后加水调成糊状的仙灵骨碟胶囊（贵州同济堂制药有限公司生产，国药准字 Z20025337)，灌胃给药(2.4g/Kg)，每日一次，连续90天;假手术组等容积生理盐水灌胃给 药，每日一次，连续90天。
[0035]标本采集在试验期间，每周称量体重一次。末次给药后禁食24小时后处死动物，剥 离左右双侧股骨、腔骨进行测定。股骨骨巧含量的测定采用原子吸收分光光度法，从股骨的 骨灰中取出30mg~40mg左右，精密称定，用盐酸溶解定容后测定;骨密度测定（DEXA法）， 应用XR-36型双能X线骨密度仪，分辨率为1.0X1.0mm，速度为40mm/s，测厚离体股骨的 骨密度。
[0036] 2、实验结果:如表1、表2所不。
[0037]表1药物对大鼠全身骨密度影响结果
注：与假手术组比较，^^?<〇 . 01;与模型组比较吁<〇 . 05，*吁<0.01;与阳性对照组比 较，#P<0.05。
[0038]表2药物对大鼠股骨干重及骨巧的影响
注:与假手术组比较，^^?<0.01;与模型组比较中<0.05，*中<0.01，**吁<0.001;与阳 性对照组比较，咕<0.05，< 0.01。
[0039] 3、结论 本实验通过研究本发明中药组合物片剂高、中、低剂量对大鼠骨量的影响来判定本发 明中药组合物在骨量方面的疗效。首先，本实验用60只大鼠作试验动物。连续90天给药，小 鼠无一死亡，处死小鼠解剖观察各脏器未发现毒性反应，给药组与假手术组小鼠无任何差 异，说明本发明中药组合物具有较佳安全性。其中50只切除双侧卵巢，大鼠的激素分泌会发 生变化，与本发明中药组合物用于治疗绝经后的女性患者情况相似，另外10只切除双侧卵 巢旁各一块脂肪组织作假手术组。模型组(去卵巢大鼠）股骨巧含量和骨密度与假手术组相 比显著降低（P<〇.01)，说明去卵巢大鼠骨巧丢失严重。本发明中药组合物高、中、低剂量组 的骨密度与模型组相比，各组能够显著增加骨质疏松大鼠的股骨巧含量和骨密度（P< 0.05)，并且均接近或高于对照组水平。可见，本发明中药组合物的Ξ个剂量组均可增加大 鼠的骨密度、股骨干重和骨巧含量，具有良好的治疗骨质疏松的效果。
[0040]试验二:本发明中药组合物对骨质疏松临床志愿者患者的临床疗效观察 一、病例及诊断标准 1、西医诊断标准： 诊断骨质疏松症应W骨密度减少2个标准差W上为基本依据，须鉴别是原发性骨质疏 松症、还是继发性骨质疏松症。临床诊断时可参考年龄、病史、骨折和实验室检查等进行综 合考虑。
[0041 ] 参照世界卫生组织(WHO)推荐的诊断标准，基于DEXA测定：骨密度值低于同性别、 同种族正常成人的骨峰值不足1个标准差属正常；降低1-2.5个标准差之间为骨量低下(骨 量减少）；降低程度等于和大于2.5个标准差为骨质疏松;骨密度降低程度符合骨质疏松诊 断标准同时伴有一处或多处骨折时为严重骨质疏松。骨密度通常用T-Score(T值)表示，T值 =(测定值-骨峰值)/正常成人骨密度标准差。T值^-1.0为正常;-2.5<Τ值<-1.0为骨量 低下;Τ值^-2.5为骨质疏松。Τ值用于表示绝经后妇女和大于50岁男性的骨密度水平。
[0042] 诊断标准为具备全身疼痛，多W腰背疼痛为主，酸软无力，逐渐加重，轻微外伤可 致骨折;脊柱后突崎形;骨密度减少2个标准差W上者。
[0043] 2、中医诊断标准： 按照《中药新药临床研究指导原则》(2002年）的"中药新药治疗骨质疏松症的临床研 究指导原则"的评定要求制定。表现为：腰脊疼痛、酸软少力、步履艰难、头目眩晕、不能持 重，舌质或偏红或淡，舌苔薄或薄白、脉沉细等症状，骨质疏松症见上述症候者。
[0044] 二、临床试验 1、一般资料 所有入选的骨质疏松患者均为临床志愿者。治疗组100例，均为绝经后的女性患者;对 照组100例，均为绝经后的女性患者。年龄为50岁-79岁，平均年龄64.5岁。两组年龄、症状等 影响因素，经统计学处理，无显著性差异，符合分组条件。
[004引2、治疗方法 治疗组:取用本发明实施例二中所得中药组合物胶囊剂，每次3粒，一天3次，连服3个 月。
[0046] 对照组：服用巧尔奇D片（国药准字Η10950029,江苏Wyeth惠氏制药有限公司生 产），一次1片，一日2次，连服3个月。
[0047] 3、临床疗效评价标准 骨质疏松症骨密度疗效判定： 先计算骨密度变化值=(治疗后骨密度-治疗前骨密度)/疗前骨密度X100% 显效:骨密度变化率大于等于骨密度最小显著变化值； 有效:骨密度变化率在正负骨密度最小显著变化值之间； 无效:骨密度变化率小于负骨密度最小显著变化值。
[004引其中骨密度最小显著变化值=2.77X( %CV)，CV-变异系数。
[0049] 总有效率=(显效+有效)/总病例数X100%2) 安全性观察指标:血、尿常规W及肝、肾功能、屯、电图等，用药前及疗程结束时各检测1 次。
[0050] 4、治疗结果，如表3所示。
[0051 ] 表3治疗效果
5、结论 本次临床试验的临床志愿者患者均为绝经后的女性患者，未包含男性患者或由于其它 原因引起的骨质疏松症患者，绝经女性一般年过50岁，因此选择年龄段在50-79岁之间；目 前市面上治疗骨质疏松症的药物主要包括巧制剂、化学药和中成药，本试验采取巧尔奇作 为对照组。从显效率和总有效率上也可看出，本发明中药组合物的显效率大于80%，总有效 率大于90%，远高于对照组的显效率和总有效率。由此可见，本发明的中药组合物相对于西 药，对治疗绝经后骨质疏松症具有显著的疗效。所有受试者经体格检查，肝肾功能正常，无 内分泌疾病及巧、憐代谢素乱，进一步证实本发明用于治疗绝经后骨质疏松症安全有效，具 有推广应用的价值。
[0052]由于已经通过W上较佳实施例描述了本发明，在本发明的精神和/或范围内，任何 针对本发明的替换/或组合来实施本发明，对于本领域的技术人员来说都是显而易见的，且 包含在本发明之中。
【主权项】
1. 一种治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物包括 如下重量份的中药材： 艾叶5-25份、黄芪6-25份、党参9-30份、黄精9-15份、川芎6-15份、熟地黄9-15份、骨碎 补3-9份、威灵仙3-9份、白芷3-9份、山茱萸6-12份、川牛膝3-9份和甘草1 -10份。2. 根据权利要求1所述的治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物，其特征在于，所述 中药组合物包括如下重量份的中药材： 艾叶5份、黄芪6份、党参9份、黄精9份、川考6份、熟地黄9份、骨碎补3份、威灵仙3份、白 芷3份、山茱萸6份、川牛膝3份和甘草1份。3. 根据权利要求1所述的治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物，其特征在于，所述 中药组合物包括如下重量份的中药材： 艾叶15份、黄芪15份、党参20份、黄精12份、川考10份、熟地黄12份、骨碎补6份、威灵仙6 份、白芷6份、山茱萸9份、川牛膝6份和甘草5份。4. 根据权利要求1所述的治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物，其特征在于，所述 中药组合物包括如下重量份的中药材： 艾叶25份、黄芪25份、党参30份、黄精15份、川考15份、熟地黄15份、骨碎补9份、威灵仙9 份、白芷9份、山茱萸12份、川牛膝9份和甘草10份。5. 根据权利要求1-4任一所述的治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物，其特征在 于，所述中药组合物被制成片剂、丸剂、散剂和胶囊剂。6. 根据权利要求1-5任一所述的治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物的制备方 法，其特征在于，所述中药组合物的制备方法包括以下步骤： 步骤1、按比例称取各味原料药材； 步骤2、将艾叶、黄芪、党参、黄精、川芎、熟地黄、骨碎补、威灵仙、白芷、山茱萸、川牛膝 和甘草分别去杂质，洗净，烘干，粉碎成粗粉； 步骤3、将黄芪、黄精、川芎、熟地黄、骨碎补、威灵仙、白芷、山茱萸、川牛膝和甘草制备 的粗粉混合，加8-11倍药材重量的纯化水，煎煮2-3次，每次1-3小时，过滤，合并滤液，浓缩 成55°C_65°C时相对密度为1.15-1.20的水提浓缩液，备用； 步骤4、将艾叶和党参制备的粗粉混合，加4-7倍量80-90%的乙醇，回流提取2-3次，每 次5-8小时，合并醇提液，减压蒸馏，除去乙醇，滤液浓缩至55°C_65°C环境下相对密度为 1.15-1.20的醇提浓缩液，备用； 步骤5、将步骤3所得水提浓缩液和步骤4所得醇提浓缩液合并，减压干燥，粉碎研磨，过 100-200目筛，即为本发明中药组合物。
【专利摘要】本发明属于中药技术领域，公开了一种治疗女性绝经后骨质疏松症的中药组合物及其制备方法。该中药组合物包括以下重量份数的制备原料：艾叶5-25份、黄芪6-25份、党参9-30份、黄精9-15份、川芎6-15份、熟地黄9-15份、骨碎补3-9份、威灵仙3-9份、白芷3-9份、山茱萸6-12份、川牛膝3-9份和甘草1-10份。本发明采用天然中药，毒副作用小，具有益肝补肾、活血止痛、强筋固骨之功效，可有效治疗女性绝经后骨质疏松症。
【IPC分类】A61P19/10, A61K36/8969
【公开号】CN105412584
【申请号】CN201510959592
【发明人】王一飞, 王璐, 刘秋英, 利奕成, 任哲
【申请人】暨南大学
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月21日