鼻粘膜疫苗组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及作为感染症、癌的预防或治疗剂有用的鼻粘膜疫苗组合物。特别是本 发明设及通过将特定的脂多糖作为佐剂、与抗原一起对鼻粘膜给药，能够安全且有效地诱 导全身性免疫应答和粘膜免疫应答的鼻粘膜疫苗组合物。
【背景技术】
[0002] 作为疫苗制剂的剂型，现在产品化的制剂大部分为注射剂。注射型疫苗存在如下 问题:诱导血中（全身性）的免疫应答（IgG抗体的产生)而不会诱导粘膜中的免疫应答（IgA 抗体的产生），虽然可W防止由于感染后所导致的病原体的增殖，但是难W防御由于粘膜途 径所导致的病原体的感染自身。
[0003] 因此，近年由粘膜的疫苗接种受到关注，其中，使用流感病毒作为抗原的粘膜给药 (经鼻给药)型疫苗的开发显露头角。
[0004] 粘膜给药型疫苗，不仅能够诱导全身性免疫（IgG抗体的产生)而且还能够诱导粘 膜免疫（IgA抗体的产生）。该IgA抗体的特征在于，不怎么严格区别成为对象的疾病的病原 体的类型，即使每年改变的病原体的流行型变化也能够应对，认为对于防止流行病而言是 有效的。
[0005] 另外，经鼻给药型疫苗显露头角的理由之一，可列举出对消化道粘膜给予抗原时， 容易受到胃酸的影响、蛋白分解酶的影响却难W防止运些影响，与此相对，经鼻对粘膜给予 抗原时，没有运些影响。进而，在鼻腔粘膜上存在被称为NALT的抗原识别组织对于免疫应答 而言是有效的也是理由之一。
[0006] 作为经鼻给药型疫苗的例子，例如有W下的报告。
[0007]例如专利文献1中提出了源自泛菌属菌的脂多糖（11口〇口〇173曰。证曰1'1(16、1^^)，记 载了与W往的LI^相比安全性高，与抗原同时给药的情况下免疫响应增强。
[000引但是，专利文献1中，对于对获得性免疫的使用没有明确的提及、例示，另外，对于 最合适的佐剂/抗原的比率也没有提及。进而，专利文献1中，对于源自泛菌属菌的LPS的作 为粘膜疫苗的使用也没有明确提及。
[0009] 另外，专利文献2中提出了含有病原体的灭活抗原、W及作为免疫刺激剂(佐剂）的 Poly(I:C)与酵母聚糖的组合的疫苗，记载了使用源自成团泛菌(Pantoea agglomerans)的 脂多糖(LPS)作为佐剂，使用流感病毒作为病原体的例子。
[0010] 但是，专利文献2中记载的疫苗，对于经鼻给药，利用流感病毒W外的抗原时是否 发挥效果还不明确。
[0011] 现有技术文献 [0012] 专利文献
[0013] 专利文献1:日本专利第4043533号
[0014] 专利文献2:日本特开2009-242367号公报
【发明内容】
[00巧]发明要解决的问题
[0016] 本发明鉴于上述现状，其目的在于提供安全，作为感染症、癌的预防或治疗剂有 用，并且可W有效地诱导全身性免疫应答和粘膜免疫应答的鼻粘膜疫苗组合物。
[0017] 用于解决问题的方案
[0018] 本发明人等为了解决上述问题而进行深入研究，结果发现，对于鼻粘膜给药而言， 将源自特定的革兰氏阴性细菌的脂多糖或其盐作为佐剂，与流感W外的抗原一起对鼻粘膜 给药，由此可W安全且有效地诱导全身性免疫应答和粘膜免疫应答，从而完成了本发明。
[0019] 目P，本发明为一种鼻粘膜疫苗组合物，其特征在于，其为对人或动物的鼻粘膜给药 的鼻粘膜疫苗组合物，其含有至少一种抗原(其中源自流感病毒的抗原除外)和作为免疫刺 激剂的源自革兰氏阴性细菌的脂多糖或其盐，所述革兰氏阴性细菌选自由沙雷氏菌属 (Serratia)、勒克菌属(Xeclercia)、拉恩菌属（Rahnella)、嗜热酸菌属(Acidicaldus)、嗜 酸菌属(4(^(1;[地;[1;[11111)、酸球形菌属(4(^山391136脚）、酸胞菌属(4(^(10。6113)、酸单胞菌属 (Acidomonas)、亚细亚菌属（Asaia)、别尔纳普氏菌属（Belnapia)、脆弱球菌属 (Craurococ州S)、葡糖醋杆菌属（Gluconacetobacter)、葡糖杆菌属（Gluconobacter)、柯扎 克氏菌属化ozakia)、利亚杆菌属(Xeahibacter)、鼠球菌属(Muricoccus)、新亚细亚菌数 (化oasaia)、嗜油单胞菌属（Oleomonas)、副脆弱球菌属（Paracraurococcus)、红球状菌属 (肺0(109；[1日）、玫瑰球菌属（1?03日0(30(3(3113)、如比特皮达（1?11131'；[1日91(1日）、糖杆菌属 (Saccharibacter)、星状菌属（Stella)、斯瓦米纳坦氏菌属（Swaminathania)、替考球菌属 (Teichococcus)、扎瓦尔金氏菌属（Zavarzinia)、假单胞菌属（Pseudomonas)、无色杆菌属 (Ac虹omobacter)、芽抱杆菌属（Bacillus)、甲烧袋状菌属(Methanoculleus)、甲烧八叠球 菌属（Methanosarcina)、梭菌属（Clostridium)、微球菌属（Micrococcus)、黄杆菌属 (尸1日￥06日。1日1'；[11111)、泛菌属"日]11:〇日日）、醋酸杆菌属（4。日1:〇6日。1日1')、发酵单胞菌属 (Zymomonas)、黄单胞菌属(Xanthomonas)和肠杆菌属巧nterobacter)组成的组中的至少一 种。
[0020] 本发明的鼻粘膜疫苗组合物中，上述免疫刺激剂与抗原的质量比（免疫刺激剂的 总质量/抗原的总质量)优选为0.002~500。
[0021] 另外，本发明的鼻粘膜疫苗组合物优选用于诱导体液免疫。
[0022] 另外，本发明的鼻粘膜疫苗组合物中，抗原优选为源自感染症的抗原或癌抗原。
[0023] W下对本发明进行详细说明。
[0024] 本发明的鼻粘膜疫苗组合物含有至少一种抗原和免疫刺激剂。
[0025] 本发明的鼻粘膜疫苗组合物中，上述免疫刺激剂与上述抗原的质量比（免疫刺激 剂的总质量/抗原的总质量)优选为0.002~500。若不足0.002则有可能不能诱导充分强度 的免疫，若超过500则有可能在安全方面产生问题。上述免疫刺激剂与上述抗原的质量比的 更优选的下限为0.01，更优选的上限为100。通过上述免疫刺激剂与上述抗原的质量比处于 该范围内，可W确保安全性的同时诱导充分强度的免疫。
[0026] 本说明书中所称的"抗原的质量"，除了特别记载的情况之外，指的是疫苗中的抗 原中含有的抗原蛋白质的质量。因此，抗原为源自病毒等生物体的物质的情况下，指的是该 抗原中含有的全部蛋白质的质量。
[0027] 上述抗原，可W选择除了源自流感的抗原之外的源自感染症的抗原、或癌抗原。流 感病毒由于为突变速度快的病毒，每年流行的病毒株变化，需要用对应于该病毒株的抗原 制造疫苗，需要进一步考虑到疫苗组合物的稳定性等特性。本发明中，由于宗旨在于将突变 少的抗原优选源自感染性病原体的抗原作为对象，从而将源自流感的抗原排除在外。
[0028] 作为本发明中使用的抗原，优选为除了源自流感的抗原之外的源自感染症的抗原 或癌抗原。
[0029] 对于源自感染症的抗原而言，为了预防疾病，需要通过疫苗给药来预先形成抗体， 因此优选利用本发明。本发明的粘膜疫苗组合物适于使得体液免疫活化。
[0030] 另外，作为本发明中使用的抗原，优选为除了源自流感的抗原之外的源自感染症 的抗原，作为该源自感染症的抗原，若为除了源自流感的抗原之外的感染性病原体和源自 感染性病原体的抗原则没有特别限定。
[0031] 作为由上述感染性病原体患染的疾病，除了源自流感的抗原之外没有特别限定， 可列举出例如由腺病毒、瘤疹病毒(例如HSV-I、HSV-II、CMV或VZV)、痘病毒(例如天花病毒 或痘苗病毒、或者传染性软痛等正痘病毒）、小核糖核酸病毒(例如鼻病毒或肠道病毒）、副 黏病毒(例如副流感病毒、流行性腮腺炎病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒(RSV))、冠状病毒 (例如SARS)、乳多空病毒(例如引起生殖器痛、寻常性膀脫痛或足底痛的乳多空病毒等人类 乳头瘤(papilloma)病毒）、嗜肝DNA病毒(例如乙型肝炎病毒）、黄病毒(例如丙型肝炎病毒 或登革病毒）、或反转录病毒(例如HIV等慢病毒)等病毒感染患染的疾病等病毒疾病；由埃 希氏菌属、肠杆菌属、沙口氏菌属、葡萄球菌、志贺氏菌、李斯特菌属、气杆菌属、螺杆菌属、 克雷伯氏杆菌属、变形杆菌属、假单胞菌属、链球菌、衣原体属、支原体属、肺炎球菌、奈瑟氏 菌属、梭菌属、杆菌属、棒状杆菌属、分支杆菌属、弯曲杆菌属、弧菌属、沙雷氏菌属、普罗维 登斯菌属、色素杆菌属、布氏杆菌属、耶尔森氏菌属、嗜血杆菌属、或博代氏杆菌属等细菌感 染患染的疾病等细菌疾病；W衣原体(化lamydia)症、念珠菌症、曲霉病、组织胞浆菌病、隐 球菌脑膜炎为代表但是不限于此的真菌疾病;追疾;卡氏肺囊虫肺炎;利什曼病；隐抱子虫 病；弓形体病和锥虫病等。
[0032] 本发明中，上述源自感染症的抗原优选为选自由源自人类乳头瘤病毒的抗原和源 自肺炎球菌的抗原组成的组中的至少一种。
[0033] 本发明的鼻粘膜疫苗组合物中，上述抗原若含有有效量即可，但是例如本发明的 鼻粘膜疫苗组合物中，优选W每1次给药量0.01~1000化g的范围含有。若不足O.Olyg则作 为感染症、癌的预防或治疗剂的功能有可能不充分，若超过l〇〇(K)yg则在安全性方面有可能 成为问题。上述抗原含量的更优选的下限为0.化g、更优选的上限为5000yg。