流感疫苗干燥制剂、及流感疫苗干燥制剂的制造方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及含有流感疫苗抗原的干燥制剂。更具体而言，本发明设及即使没有严 密进行低溫管理来进行保存也可W稳定地维持流感疫苗抗原的活性，并且能够稳定地供给 的流感疫苗干燥制剂。另外，本发明设及该流感疫苗干燥制剂的制造方法。
【背景技术】
[0002] 流感为由于流感病毒所导致的急性感染症的一种。流感病毒感染直至流感发病为 止的潜伏期通常为1~2天。发病的情况下，出现38度W上的发烧，除了全身倦怠感、头痛、关 节痛、肌肉痛等全身症状之外，还出现咽喉疼痛、咳嗽、鼻涕等症状。通常1周W内恢复。对于 流感而言，老年人、婴幼儿、孕妇、呼吸系统或屯、血管系统具有慢性疾病的患者、糖尿病患 者、慢性肾功能衰竭患者等发病的情况下，有可能引起肺炎、支气管炎等并发症，也有可能 严重化而死亡。另外，流感在短期集中流行，因此有可能会造成社会上的影响且产生经济上 的损失。
[0003] 为了防止流感的严重化，流感疫苗的给药是最有效的方法。流感疫苗制剂通常为 W注射剂、滴鼻剂形式使用的液体制剂。
[0004] 但是，流通流感疫苗液体制剂的情况下，为了防止流感疫苗抗原的失活，在流通和 保存的全部工序需要进行低溫管理(所谓低溫运输链(cold chain))。流感虽然根据地区不 同而时期不同，但是在全世界流行，在难W进行低溫管理的国家、地区，难W在维持流感疫 苗抗原的活性的状态下进行流通。
[000引另外，现在能够利用的流感疫苗抗原大致分为存活的弱毒化流感疫苗抗原和灭活 的流感疫苗抗原。进而，灭活流感疫苗抗原分为W下Ξ类：（1)用福尔马林等灭活的全粒子 病毒；（2)使用有机溶剂、表面活性剂将病毒粒子粉碎，使得脂质膜可溶化而得到的裂解疫 苗抗原；（3)将血凝素抗原化A抗原）和神经氨酸酶抗原(NA抗原)精制而成的亚单位疫苗抗 原。所有疫苗抗原通常都如下来制备:使用有机溶剂、表面活性剂将病毒粒子粉碎，根据种 类将病毒蛋白质分离或精制。
[0006] 但是，对于流感病毒粒子而言，酱醇含量高而通常是稳定的，但是将病毒粒子粉 碎、去除病毒粒子的脂质物质而对病毒蛋白质进行分离或精制的情况下，保存期间中会产 生效价经时降低等问题。如此，裂解疫苗抗原和亚单位疫苗抗原未必稳定，因此为了维持流 感疫苗抗原的活性，需要在流通和保存的全部工序进行低溫管理。
[0007] 作为用于克服运种流感疫苗液体制剂的缺点的方法，尝试制成干燥制剂的形态。 例如，一直W来为了保存存活的流感病毒而配合糖，专利文献1中记载了在存活的流感病毒 中配合海藻糖、使之冷冻干燥来进行保存的方法。非专利文献1中记载了对流感病毒的灭活 全粒子疫苗抗原进行冷冻干燥时，配合乳糖或海藻糖来进行制剂化的方法。非专利文献2中 记载了在禽流感的灭活病毒中配合海藻糖使之冷冻干燥来进行保存的方法。
[0008] 但是，现在稳定性优异的流感疫苗干燥制剂没有上市，要求进一步改善稳定性。另 夕h自从在1994年通过株式会社林原确立廉价的制造方法W来，海藻糖被该公司大致独占 性地供给。海藻糖在全世界用于各种用途，一个公司造成的独占对于稳定供给而言令人不 安。实际上，由于2011年株式会社林原申请了企业重建法，因而形成了海藻糖的供给变得令 人担屯、的局势。
[0009] 现有技术文献
[0010] 专利文献
[0011] 专利文献1:日本特表平2-503266号公报
[0012] 非专利文献
[001引 非专利文献l:R0bert J.Garmise et al.，AAPS PharmSciTech 2006;7(1) Article 19，E1-E7
[0014]非专利文献2:M.S.Pizzuto et al.，Biologicals Vol.39(2011) ,149-151
【发明内容】
[00"] 发明要解决的问题
[0016] 鉴于上述状况，本发明的目的在于提供即使没有严密进行低溫管理来进行保存也 可W稳定地维持流感疫苗抗原的活性并且能够稳定地供给的流感疫苗干燥制剂。另外，本 发明的目的在于，提供该流感疫苗干燥制剂的制造方法。
[0017] 用于解决问题的方案
[0018] 本发明人等为了解决上述问题而进行深入研究，结果发现，通过形成利用各种添 加剂中特别是选自由薦糖、麦芽糖、帕拉金糖、蜜二糖、异麦芽酬糖醇（isomalt)、纤维二糖、 异乳糖、异麦芽糖、槐糖、乳糖酸、昆布二糖、木乙糖、松二糖、龙胆二糖、芸香糖、曲二糖、黑 曲霉糖、刺槐糖、新澄皮糖、Ξ氯薦糖和麦芽糖醇组成的组中的一种W上将流感疫苗抗原稳 定化而成的干燥制剂，即使没有如W往的液体制剂那样严密进行低溫管理来进行保存、也 可W稳定地维持流感疫苗抗原的活性。另外，运种流感疫苗干燥制剂利用能够廉价、稳定地 供给的二糖将流感疫苗抗原稳定化，因此运种流感疫苗干燥制剂也能够稳定地供给。
[0019] 目P，本发明为一种流感疫苗干燥制剂，其含有流感疫苗抗原和二糖，上述二糖为选 自由薦糖、麦芽糖、帕拉金糖、蜜二糖、异麦芽酬糖醇、纤维二糖、异乳糖、异麦芽糖、槐糖、乳 糖酸、昆布二糖、木乙糖、松二糖、龙胆二糖、芸香糖、曲二糖、黑曲霉糖、刺槐糖、新澄皮糖、 Ξ氯薦糖和麦芽糖醇组成的组中的一种W上。
[0020] 上述二糖的含量优选相对于流感疫苗抗原中的HA抗原1重量份为40~600重量份。
[0021] 上述流感疫苗抗原优选为裂解疫苗抗原或亚单位疫苗抗原，更优选为裂解疫苗抗 原。
[0022] 上述二糖优选为选自由薦糖、麦芽糖、帕拉金糖和蜜二糖组成的组中的一种W上。
[0023] 另外，本发明为一种流感疫苗干燥制剂的制造方法，其对含流感疫苗抗原的水溶 液在非加热下进行干燥，该含流感疫苗抗原的水溶液含有流感疫苗抗原和二糖，上述二糖 为选自由薦糖、麦芽糖、帕拉金糖、蜜二糖、异麦芽酬糖醇、纤维二糖、异乳糖、异麦芽糖、槐 糖、乳糖酸、昆布二糖、木乙糖、松二糖、龙胆二糖、芸香糖、曲二糖、黑曲霉糖、刺槐糖、新澄 皮糖、Ξ氯薦糖和麦芽糖醇组成的组中的一种W上。
[0024] 上述含流感疫苗抗原的水溶液中的上述二糖的含量优选为2~30w/v%。
[0025] 上述非加热下进行干燥的方法优选为减压干燥法或冷冻干燥法。
[0026] W下对本发明进行详细说明。
[0027] 本发明的流感疫苗干燥制剂含有流感疫苗抗原。
[0028] 在此所称的"干燥制剂"指的是含水率为20重量％ W下的制剂。
[0029] 对上述流感疫苗抗原中使用的流感病毒没有特别限定，可列举出例如A型流感病 毒株、B型流感病毒株等。
[0030] 对上述流感疫苗抗原没有特别限定，优选为用含胚卵使得病毒粒子增殖后，使用 有机溶剂、表面活性剂将病毒粒子粉碎，根据种类对病毒蛋白质分离或精制而制备的裂解 疫苗抗原或亚单位疫苗抗原，更优选为裂解疫苗抗原。
[0031] 对上述裂解疫苗抗原的种类没有特别限定，可列举出例如血凝素化A)抗原、神经 氨酸酶(NA)抗原、基质(Ml)抗原、基质(M2)抗原、核蛋白（NP)抗原等。其中，从通过流感疫苗 干燥制剂的给药而有效地获得免疫的观点考虑，优选为血凝素(HA)抗原。
[0032] 上述流感疫苗抗原可W含有单一的病毒抗原，也可W含有两种W上的病毒抗原。
[0033] 对制造上述流感疫苗抗原的方法没有特别限定，可W使用W往公知的方法。例如 可W利用通用方法使得由流感患者或流感感染动物分离的病毒株感染鸡蛋、细胞等并进行 培养，由纯化了的病毒原液制造流感疫苗抗原。另外，也可W将在各种细胞产生有基因工程 重组病毒或特定的抗原的物质作为材料来制造流感疫苗抗原。
[0034] 本发明的流感疫苗干燥制剂含有二糖。
[0035] 上述二糖为选自由薦糖、麦芽糖、帕拉金糖、蜜二糖、异麦芽酬糖醇、纤维二糖、异 乳糖、异麦芽糖、槐糖、乳糖酸、昆布二糖、木乙糖、松二糖、龙胆二糖、芸香糖、曲二糖、黑曲 霉糖、刺槐糖、新澄皮糖、Ξ氯薦糖和麦芽糖醇组成的组中的一种W上。运些二糖由于将上 述流感疫苗抗原稳定化，另外充分溶解于水，因此