一种香圆果实的提取物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，更具体地，涉及一种香圆果实的提取物及其制备方法 与应用。
【背景技术】
[0002] 目前，常见的抗炎药物主要有两大类:一类是留体抗炎药，糖皮质激素氢化可的松 及其衍生物，但长期应用有引起物质代谢和水盐代谢紊乱，诱发或加重感染，导致骨质疏松 等毒副作用。另一类是非留体抗炎药，如对乙酰氨基酚、吲哚美辛、萘普生、萘普酮、双氯芬 酸、布洛芬、尼美舒利、罗非昔布、塞来昔布等，但长期服用这类药物，易产生不良反应，例如 消化不良、粘膜糜烂、胃及十二指肠馈痕出血等，对身体的其他组织功能产生副作用。
[0003] 而纯天然的抗炎药物，由于其副作用低，不易产生耐药性等优点，而更易为人们所 接受。香圆(Citrus wilsonii Tanaka)分布在长江中下游地区，其果实香气浓厚，但果皮与 果肉极难分离，且味酸、苦麻，无法直接食用，即使直接将其果实入药，其抗炎活性仍然有 限。因此，要制备抗炎效果良好的抗炎药物，须将其中的有效成分提取出来。
[0004] 非专利文南犬Chemical and biological comparison of the fruit extracts of Citrus wilsoniiTanaka and Citrus medica L.(Food Chemistry，2015，173:54-60)，公 开了利用50%甲醇超声提取香圆干燥果实中抗氧化性物质的方法，然而由于甲醇具有强烈 的毒性，即使提取出其中的有效成分，也无法药用。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种香圆果实的提取物及其 制备方法与应用，其目的在于提取出香圆果实中的活性成分，从而制备得到具有香圆果实 天然成分的抗炎药物
[0006] 为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种香圆果实的提取物，所述提 取物的主要活性成分为类黄酮，所述类黄酮的总重量份数以100份计，由0.34份~0.43份的 柚皮素，83.6份~94.3份的柚皮苷，0.57份~2.7份的橙皮苷，0.53~1.6份的新橙皮苷， 0.91份~1.7份的圣草次苷，2.8份~4.4份的野漆树苷以及2.7份~4.2份的枸橘苷组成。
[0007] 优选地，所述类黄酮在所述提取物中的质量分数为34.811 %~57.4786%。
[0008] 优选地，所述提取物为香圆果皮的提取物，所述类黄酮由0.49份~0.64份的柚皮 素，84.0份~94.3份的柚皮苷，0.57份~2.4份的橙皮苷，0.53份~0.8份的新橙皮苷，0.91 份~1.7份的圣草次苷，2.8份~3.6份的野漆树苷以及3.3份~4.2份的枸橘苷组成。
[0009] 优选地，所述提取物为香圆果肉的提取物，所述类黄酮由0.34份~0.43份的柚皮 素，83.6份~92.7份的柚皮苷，0.89份~2.7份的橙皮苷，1.3份~1.6份的新橙皮苷，1.3份 ~1.5份的圣草次苷，3.8份~4.4份的野漆树苷以及2.7份~3.2份的枸橘苷组成。
[0010] 按照本发明的另一方面，提供了一种该提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0011] 1)将香圆果实切开后，100 °C以下干燥至恒重；
[0012] 2)将所述步骤1)得到的干燥后的香圆果实研磨过筛，得到20目~80目的香圆果实 粉末；
[0013] 3)在所述步骤2)得到的香圆果实粉末中，加入质量为所述香圆果实粉末的60倍~ 120倍的水，室温浸泡8小时~24小时后，60°C~100°C水浴加热30min~180min得到粗提液； [0014] 4)去除所述粗提液中的固体杂质后冻干，得到所述香圆果实的提取物。
[0015] 优选地，在所述步骤2)中，先将香圆果实的果皮和果肉分离，取果皮或果肉研磨过 筛，得到20目~80目的香圆果实粉末。
[0016] 优选地，在所述步骤2)中，得到25目~60目的香圆果实粉末。
[0017]优选地，所述步骤4)中冻干的具体方法为，先将所述粗提液在-40~_20°C冷冻成 冰块，再在-50~-80°C下冻干，即得到所需提取物。
[0018] 优选地，在所述步骤3)中，加入质量为所述香圆果实粉末的100倍~110倍的水，室 温浸泡16小时~24小时后，60°C~100°C水浴加热30min~180min得到粗提液。
[0019] 优选地，在所述步骤4)中，去除所述粗提液中的固体杂质，并将所述粗提液除菌后 冻干，得到所述香圆果实的提取物。
[0020] 作为进一步优选地，在所述步骤4)中，所述除菌的具体方法为过滤除菌法。
[0021] 优选地，在所述步骤4)中，去除所述粗提液中的固体杂质的具体方法为离心法。 [0022] 作为进一步优选地，所述离心法的转速为2000rpm~3000rpm，时间为15min~ 30min〇
[0023] 优选地，所述步骤1)中的香圆果实的产地为中国秦岭南麓。
[0024] 按照本发明的另一方面，还提供了一种消炎制剂，咳嗽制剂或胃病制剂，包括该提 取物。
[0025] 优选地，所述药物用于消炎药物或治疗咳嗽药物，所述膳食补充剂用于
[0026] 总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，由于提取出了香 圆果实中的抗炎成分，能够取得下列有益效果：
[0027] 1、本发明提取物能明显抑制炎症因子环氧合酶_2的表达，具有明显的抗炎效果， 且其抗炎效果超过阿莫西林；
[0028] 2、与常规药物阿莫西林相比，对细胞的毒副作用较小；
[0029] 3、本发明制备的提取物由植物提取，无需添加工业合成的成分，作为药用更易于 为人们所接受；
[0030] 4、本发明提取物为水溶性，易于用常规方法制成各种剂型的消炎，咳嗽或胃病的 药物，适于大规模的应用；
[0031] 5、本发明制备方法简单，适用面广。
【附图说明】
[0032] 图1是本发明实施例4的高效液相色谱分析图；
[0033]图2是本发明实施例1提取物及阿莫西林处理下细胞中C0X-2的表达;结果数据表 示为平均值土标准差;其中，不同小写字母表示各处理间存在的显著性差异(P〈〇.05)，含有 相同字母则表示差异不显著；
[0034]图3是本发明实施例2提取物及阿莫西林处理下细胞中C0X-2的表达;结果数据表 示为平均值土标准差;其中，不同小写字母表示各处理间存在的显著性差异(P〈〇.05)，含有 相同字母则表示差异不显著；
[0035]图4是本发明实施例1和实施例2提取物和阿莫西林对细胞活力的影响。
【具体实施方式】
[0036]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对 本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并 不用于限定本发明。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要 彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
[0037]本发明提供了一种香圆果实的提取物，所述提取物包括质量分数为34.811%~ 57.4786 %的类黄酮，所述类黄酮的总重量份数以100份计，由0.34份~0.43份的柚皮素， 83.6份~94.3份的柚皮苷，0.57份~2.7份的橙皮苷，0.53~1.6份的新橙皮苷，0.91份~ 1.7份的圣草次苷，2.8份~4.4份的野漆树苷以及2.7份~4.2份的枸橘苷组成。
[0038]当提取物为香圆果皮的提取物时，所述类黄酮由0.49份~0.64份的柚皮素，84.0 份~94.3份的柚皮苷，0.57份~2.4份的橙皮苷，0.53份~0.8份的新橙皮苷，0.91份~1.7 份的圣草次苷，2.8份~3.6份的野漆树苷以及3.3份~4.2份的枸橘苷组成。
[0039]当提取物为香圆果肉的提取物时，所述类黄酮由0.34份~0.43份的柚皮素，83.6 份~92.7份的柚皮苷，0.89份~2.7份的橙皮苷，1.3份~1.6份的新橙皮苷，1.3份~1.5份 的圣草次苷，3.8份~4.4份的野漆树苷以及2.7份~3.2份的枸橘苷组成。
[0040] 该提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0041] 1)将完整的香圆果实切开露出果肉部分，100°C以下干燥至恒重，所述香圆果实的 产地优选为中国秦岭南麓；
[0042] 2)将所述步骤1)得到的干燥后的香圆果实整体研磨过筛，或者将果皮和果肉分离 后分别研磨过筛，得到20目~80目的香圆果实粉末，其粉末粒径优选为25目~60目，以保证 充分提取粉末中活性成分的同时，粉末不至于团聚结块；
[0043] 3)在所述步骤2)得到的香圆果实粉末中，加入质量为所述香圆果实粉末的60倍~ 120倍的水，室温浸泡8小时~24小时后，60 °C~100 °C水浴加热30min~180min，直至直至所 述香圆果实中的类黄酮等活性成分充分溶解得到粗提液;其中，优选加入质量为所述香圆 果实粉末的100倍~110倍的水，室温浸泡16小时~24小时后，60 °C~100 °C水浴加热30min ~180min得到粗提液；
[0044] 4)2000rpm~3000rpm离心所述粗提液15min~30min，以去除所述粗提液中的固体 杂质，并将粗提液通过〇. 22μπι微孔滤膜过滤除菌，在-40~-20 °C冷冻成冰块，再在-50~-80 °C下冻干，得到所述香圆果实的提取物。
[0045] 该提取物具有良好的抗炎活性，以及较小的细胞毒性，可用于制备消炎制剂，咳嗽 制剂或胃病制剂。
[0046] 以下内容为实施例：
[0047] 实施例1制备枳雀果皮水溶性提取物
[0048] (1)取5Kg采集的新鲜枳雀果实（即产自中国秦岭南麓的香圆果实)先用自来水清 洗，再用蒸馏水冲洗，横切成两半，置于恒温烘箱，平铺，切面向上，50°C条件下烘干，将果肉 与果皮分离；
[0049