用于治疗银屑病的药物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术领域，具体设及一种用于治疗银屑病的药物。
【背景技术】
[0002] 银屑病俗称牛皮癖，是临床常见的一种慢性炎症性皮肤病，青壮年者发病多，病程 较长，易复发，呈进行性皮损与角质增厚。临床表现W红斑、鱗屑为主，全身均可发病。
[0003] 虽然早期认识到该病是一种与遗传、感染等有关的自身免疫性疾病。但具体致病 机制不清楚，致使目前尚无特效药，主要采用非特异性药物治疗，W软化角质层的对症策 略，或辅助使用少量激素的治疗方案。副作用较大，且疗效不理想。
[0004] 近年来，诸多报道逐步表明，银屑病的致病机制主要是由于自身免疫发生素乱，皮 肤巨隧细胞和T淋己细胞等免疫细胞上的Toll样受体(TLRs)家族中的化R7/8、9,在识别自 身破损细胞及微生物中的核酸片段后，引发过度炎症反应，导致自身表皮细胞进一步损伤， 继而又促使淋己细胞聚集和表皮角化，由此，反复循环使其不断恶化。
[0005] 最近，国外采用特殊抗体来对抗炎症因子，如：抗白介素（IL)和肿瘤坏死因子 (TN巧的抗体，取得初步疗效。但是，制备工艺较为复杂，价格昂贵。
[0006] 如何从化Rs活化的源头来阻断银屑病的发生和发展，是本领域技术人员关注的热 点。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于提供一种括用于治疗银屑病的药物。所述药物能括抗化R7/8及 化R9活化，抑制TNF，IL等促炎因子的释放，达到抑炎效果;通过表皮微针系统，在无痛感情 况下，建立透过角质层的微孔，通过涂搔使该药物顺利进入患处，在真皮层中扩散，阻止聚 集的免疫细胞的活化，可显著缓解银屑病的病理损伤。
[000引本发明的技术方案是：
[0009] 用于治疗银屑病的药物，包括作为活性成分的包含序列如SEQ ID N0:1所示的硫 代修饰分子制剂和憐酸缓冲液。所述硫代修饰分子的结构为T*G*G*C*G*C*G*C*A*C*C*C*A* C*G*G*C*C*T*G,其中*为硫代修饰。
[0010] 所述的制剂和憐酸缓冲液的重量:体积比为1~2:3~5。
[0011] 本发明所述药物制备为搔剂，在表皮微针系统引导下，通过涂搔方式给药，达到治 疗银屑病的目的。
[0012] 本发明所述药物的制备过程:通过普通化学合成、硫代修饰并纯化的方法获得硫 代修饰分子制剂，剂型为(水溶性)粉末，可单独，也可辅W甘露醇膨化剂等混合后，进行真 空包装，可保存于室溫或4°C冰箱中。
[OOU]使用时，采用外用液性佐剂，如:憐酸缓冲液(PBS)等，进行稀释，在患处涂抹，通过 微针整列系统打微孔，再次涂搔。可按每天一次，每次用药为每10-20平方厘米病灶涂抹100 ~300ug/ml所述药物，每两周为一个疗程，实际疗程次数可按临床具体情况而定。
[0014] 由于本发明所述搔剂的作用祀点与治疗位置明确、效果显著、安全性好的优点，能 显著抑制促炎因子的释放，改善银屑病的病理损伤，可作为治疗银屑病的外用药物，具有迫 切的社会健康需求和广泛的应用前景。
[0015] 申请人长期从事Toll样家族相关先天免疫研究，深入的研究化R9阻断剂c41分子 的作用机制及其适应症，通过实验验证，该分子不仅可W阻断化R9介导的炎症活化，同时能 括抗化R7/8介导的活化;并且在银屑病动物模型上，获得了显著的疗效。而且，c41分子可通 过胞内自身代谢，不影响细胞的再次应答能力，运使得c41分子既能在疾病活动期起抑制作 用，又不会破坏机体正常免疫。经初步安评和药学研究，证实该分子稳定性好，无毒副作用。 由此，c41分子，即本发明所述药物分子，是一种从银屑病发病的起始环节阻断炎症反应，从 而到达治疗效果的药物分子，它势必为广大银屑病患者带来希望，积极推动临床治疗发展。 [00 16]本发明所述重量:体积，当重量单位为Jig，体积单位则对应为Jil;当重量单位为mg， 体积单位则对应为ml;当重量单位为Kg，体积单位则对应为1。
【附图说明】
[0017] 图1为所述药物抑制巨隧细胞TLR7/8，9活化；
[0018] 图2为所述药物改善银屑病的病理损伤(X20,皿）.其中a为安慰剂组，b为c41治疗 组。
【具体实施方式】
[0019] 下面的实施例可详细地说明本发明，但不从此限制本发明。
[0020] 实施例1:治疗银屑病的搔剂制备
[0021] 药物名称:c41分子
[0022] 序列如SEQ ID NO: 1所示，修饰结构： G，其中，（*为硫代修饰）。
[0023] 制备方式:化学合成，委托上海生工公司。产量，采用HPLC纯化，抽取真空，采用玻 璃小瓶保存于室溫，按33化g/小瓶(干粉)包装。
[0024] 使用配置:取一小瓶，注入60化1 PBS，稀释混匀，备用。
[0025] .实施例2:抑制TLR7/8和9的活化鉴定
[0026] 2.1主要材料、试剂与设备：
[0027] 1)细胞株:RAW264.7 (ATCC，USA.)。
[002引 2)细胞培养基:DMEM(Gibco，Inc.，USA)。
[0029] 3化lisa试剂盒：抗鼠 TNF-a(eBioscience，Inc.，USA)。
[0030] 4)细胞培养箱:FORMA 3111.
[0031 ] 5)酶标仪:全波长多功能酶标仪(Thermo Scientific,USA).
[0032] 2.2实验方法：将RAW264.7细胞稀释至I X lOVmL，加入96孔板（200化/孔），置37 °C，5 % C〇2培养箱培养化后，加入化37/8激动剂R848巧山，终浓度lOOng/ml)为实验一组;加 入化R9激动剂CpG-0DN18265山（5山，终浓度化M)为实验二组，W上各组均设8复孔。然后，各 组分出4复孔，加培养液化1，分别作为安慰剂一组、二组;各组剩余的4复孔，分别加入本发 明所述药物c41分子扣1(终浓度4咖)作为治疗一组、二组。继续培养2地后，收集上清，进行 EI isa检测，W450nm处测定的各孔吸光度(0D4日日)值，获取TNF-a浓度。
[0033] 2.3实验结果：安慰剂一组，化R7/8正常活化，刺激RAW264.7细胞释放大量TNF-a， 安慰剂二组，TLR9正常活化，刺激RAW264.7细胞释放大量TNF-a;治疗一组和二组，在本发明 所述药物c41分子作用下，RAW264.7细胞释放TNF-a水平受到显著抑制(P<0.01)，所W，该 药物能有效抑制银屑病的关键祀标，遏制过度炎症反应。如附图1所示。
[0034] 实施例3:药物经微针打孔后涂搔给药治疗银屑病及其疗效 [00巧]3.1主要材料、试剂与设备：
[0036] 1)动物:Ba化/c(华阜康生物科技股份有限公司，中国）。
[0037] 2)建模药物:咪哇莫特（明欣药业，中国）。
[0038] 3)治疗药物:本发明所述搔剂(详见实施例1)
[0039] 3.2实验方法：
[0040] 1)小鼠剌毛后，咪哇莫特背部建立银屑病模型，10mg/cm2,每天1次，持续6天。
[0041 ] 2)分组:安慰剂组，药物治疗组各5只鼠。
[0042] 3)给药通道:采用美容用飞轮微针，在各鼠皮面滚动一遍。
[0043] 4)给药:安慰剂组：用憐酸缓冲液(PBS)，20化l/20g体重，实施涂抹；治疗组:本发 明所述C41药物用PBS稀释为55化g/ml，W20化l/20g体重，进行涂抹。
[0044] 5)各组从第一天开始治疗，持续6天。
[0045] 6) 6天后取各组皮肤组织，肥染色，病理观察。
[0046] 3.3实验结果：
[0047] 安慰剂组，皮下水肿，大量炎性细胞浸润，表皮细胞有损伤且排列素乱;而c41治疗 组，皮下炎症细胞较少，未见明显水肿，表皮细胞排列整齐，说明，本发明所述搔剂能够有效 遏制银屑病的病理损伤。如附图2所示。
【主权项】
1. 一种用于治疗银肩病的药物，其特征在于：该药物包括作为活性成分的包含序列如 SEQ ID NO: 1所示的硫代修饰分子制剂和磷酸缓冲液。2. 根据权利要求1所述的药物，其特征在于:所述硫代修饰分子的结构为T*G*G*C*G*C* G*〇A*C*C*C*A*C*G*G*C*C*T*G，其中 *为硫代修饰。3. 根据权利要求1或2所述的药物，其特征在于:所述的制剂和磷酸缓冲液的重量:体积 比为1~2:3~5。4. 根据权利要求1或2所述的药物，其特征在于:所述药物采用表皮微针下通过角质层 的微孔涂搽给药。5. 根据权利要求4所述的药物，其特征在于：用药为每10-20平方厘米病灶涂抹lOOug~ 300ug/ml所述药物。
【专利摘要】本发明涉及一种用于治疗银屑病的药物，包括作为活性成分的包含序列如SEQ？ID？NO：1所示的硫代修饰分子制剂和磷酸缓冲液。本发明所述药物能拮抗TLR7/8及TLR9活化，抑制TNF，IL等促炎因子的释放，达到抑炎效果；通过表皮微针系统，在无痛感情况下，建立透过角质层的微孔，通过涂搽使该药物顺利进入患处，在真皮层中扩散，阻止聚集的免疫细胞的活化，可显著缓解银屑病的病理损伤。
【IPC分类】A61P17/06, A61K38/10
【公开号】CN105597079
【申请号】CN201610015324
【发明人】李彦, 祝元峰, 刘万成, 郑新川, 杨雪姣, 郑江
【申请人】中国人民解放军第三军医大学第一附属医院
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2016年1月11日