一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，是由按照重量份计的以下原料制备得到的：黄连10?18份，白头翁11?15份，金银花8?12份，黄芩13?16份，乌梅10?15份，地锦草10?18份，葛根8?13份；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，具有清热燥湿、凉血止痢、健脾和胃的功效，对犊牛隐孢子感染具有显著的治疗效果，治愈率83.00%以上，总有效率为93.00%以上，且该组方安全无毒副作用，提供了犊牛隐孢子虫感染临床有效治疗方法。
【专利说明】一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物及其制备方法
[0001]
技术领域
[0002]本发明涉及兽用中药技术领域，具体涉及一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物及其制备方法。
【背景技术】
[0003]犊牛隐孢子虫病是由隐孢子虫寄生于犊牛肠道上皮细胞内而引起的原虫病。临床症状主要表现为精神沉郁，食欲减退，消瘦，虚弱无力，腹泻，粪便带有大量纤维素和血液，体温有时升高，死亡率高达16%?40%，尤以4?30日龄的犊牛死亡率更高，耐过的犊牛，生长发育长期受阻。剖检可见，死亡犊牛尸体消瘦，脱水，肛门周围污秽;主要病变发生于回肠和大肠，呈现卡他性及纤维素性炎症;肠绒毛萎缩、脱济，绒毛刷状缘中有隐抱子虫寄生。已经成为目前发现仅次于轮状病毒的主要肠道疾病。
[0004]自20世纪80年代人们发现隐孢子虫是引起人类腹泻的重要病因以来，隐孢子虫在公共卫生方面的作用越来越重要。犊牛隐孢子虫病首次报道于美国，其后在英国、澳大利亚、加拿大、匈牙利、丹麦、比利时、法国、德国、罗马尼亚、捷克、前苏联和日本等国被发现。我国1986年，陈义民等在兰州首次发现犊牛隐孢子虫病，此后北京、江苏、安徽、河南、广东、内蒙古等地区均有报道，并且具有较高的感染率。该病主要通过饲料、饮水等经口传播给动物，通过牛奶、饮水、蔬菜等食物经口传播给人，常引起暴发性流行。2002年，Harper等报道因饮用未经高温消毒的牛奶而引起人隐孢子虫病暴发的案例。犊牛隐孢子虫病已经给奶牛养殖业带来很大的经济损失，并引起严重的公共卫生问题。
[0005]基于隐孢子虫的致病特点，目前还没有治疗犊牛隐孢子虫病的有效方案，主要以预防为主。同时，犊牛隐孢子虫的卵囊对自然环境和消毒药的抵抗力很强，给预防和管理造成了一定的难度，效果往往不显著。对免疫功能正常的犊牛常采用对症治疗和支持疗法(止泻、补液、营养)可以达到治愈的目的。但对免疫功能较低的犊牛常可发生危机生命的腹泻。为此，各国研究机构都在探索新的防治药物和治疗方法，应用中药治疗犊牛隐孢子虫感染，研制开发新型安全高效环保的新兽药已成为当务之急。
[0006]中兽药在我国畜牧业生产中的应用已有5千多年的历史，在防治畜禽疾病促进养殖业发展中发挥着积极的作用，其无污染、无残留、不易产生耐药性、不污染动物源性食品的特点，已引起各国学者的注视，传统经典方剂、新组方、药物饲料添加剂等中草药在防治畜禽疾病，特别是防治奶牛疾病方面已成为新药研制与开发的热点。
【发明内容】
[0007]本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物及其制备方法。
[0008]为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为:一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连10-18份，白头翁11-15份，金银花8-12份，黄芩13-16份，乌梅10-15份，地锦草10-18份，葛根8-13份。
[0009]进一步的，上述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连12份，白头翁11份，金银花9份，黄芩14份，乌梅13份，地锦草12份，葛根8份。
[0010]进一步的，上述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连11份，白头翁12份，金银花11份，黄芩16份，乌梅14份，地锦草13份，葛根12份。
[0011]进一步的，上述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连13份，白头翁14份，金银花1份，黄芩15份，乌梅12份，地锦草11份，葛根9份。
[0012]本发明的第二个目的是提供了上述一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物的制备方法，按照重量份配比称取各原料，加10倍原料总重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至温度60 °C时相对密度1.13，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌月艮，每次80-120ml(即生药量为80-120mg/次)，每天2次，2天为I个疗程。
[0013]根据犊牛隐孢子虫病感染的发病特点，依据中兽医辩证论治的原则，经过试验研究，筛选出了以黄连、白头翁、金银花为主药的中药组方，该药具有清热燥湿、凉血止痢、健脾和胃的功效，在甘肃、宁夏、青海、陕西等地对确诊为犊牛隐孢子虫病感染的病犊牛进行了治疗试验，治愈率为83.08%，总有效率为93.52%，治疗期间未发现犊牛有任何不良反应。
[0014]方中黄连、白头翁清热解毒、凉血止痢为主药;金银花、黄芩清热燥湿、泻火解毒为辅药，乌梅、地锦草涩肠止泻、凉血解毒为佐药，葛根止泻治痢、清胃热为使药。以上诸药合用，共奏清热燥湿，凉血止痢、健脾和胃之功效。
[0015]本发明的有益效果为:本发明提供的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，具有清热燥湿、凉血止痢、健脾和胃的功效，对犊牛隐孢子感染具有显著的治疗效果，治愈率83.00%以上，总有效率为93.00%以上，且该组方安全无毒副作用，提供了犊牛隐孢子虫感染临床有效治疗方法。
[0016]该药物发明还具有以下优势:
1、该中药组合物的开发研究，符合农产品质量安全体系建设的原则，符合绿色环保型农业投入品的要求;符合国际医药生产管理规范的要求;符合畜牧业发展方向和奶业发展方向的要求;符合国家兽药开发的产业政策和肉、牛奶食品安全的要求，有益于我国奶业健康快速的发展，对生产绿色无公害畜产品具有重要实际意义，符合现代兽药科技型企业可持续发展和不断创新的要求。
[0017]2、满足独立知识产权新兽药和兽用中草药现代化发展的需要。
[0018]建国以来，具有我国自主知识产权的兽用原料药不超过4个，绝大部分西兽药制剂仍有依赖于进口原料药的态势，这无疑成为中国兽药更好更快发展的瓶颈，因此，开发拥有独立知识产权的安全型新兽药已是大势所趋，刻不容缓。根据国家食品药品安全和兽药GMP规范的要求，在中兽医理论指导下，加强兽用中草药和天然药物的研发，使中兽药生产实现技术现代化、质量标准化和产品规模化，才能充分发挥中草药传统优势，才能促进兽用中草药产业的健康有续发展，最终带动国产兽药的自身发展和走向国际化。
【具体实施方式】
[0019]实施例1:
黄连120g，白头翁I 1g，金银花90g，黄芩140g，乌梅130g，地锦草120g，葛根80g。
[0020]使用方法:准确称取上述药材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C )，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
[0021]实施例2:
黄连110g，白头翁120g，金银花110g，黄芩160g，乌梅140g，地锦草130g，葛根120g。
[0022]使用方法:准确称取上述药材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C )，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
[0023]实施例3:
黄连130g，白头翁140g，金银花100g，黄芩150g，乌梅120g，地锦草110g，葛根90g。
[0024]使用方法:准确称取上述药材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C )，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
[0025]实施例4:
黄连10g，白头翁I 1g，金银花80g，黄芩130g，乌梅10g，地锦草10g，葛根80g。
[0026]使用方法:准确称取上述药材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C )，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
[0027]实施例5:
黄连180g，白头翁150g，金银花120g，黄芩160g，乌梅150g，地锦草180g，葛根130g。
[0028]使用方法:准确称取上述药材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C )，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
[0029]实施例6:
临床试验:
按照实施例1的配比，取黄连120g，白头翁110g，金银花90g，黄芩140g，乌梅130g，地锦草120g，葛根80g。加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C)，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
[0030](I)犊牛隐孢子虫感染的诊断:
诊断标准:1-8月龄的犊牛，出现精神沉郁，食欲减退，消瘦，虚弱无力，腹泻，粪便带有大量纤维素和血液等症状，采集新鲜粪便用饱和糖水漂浮法检查，检出隐孢子虫即可确诊为隐孢子虫感染。
[0031]纳入标准:1-8月龄的犊牛，出现精神沉郁，食欲减退，消瘦，虚弱无力，腹泻，粪便带有大量纤维素和血液等症状，采集新鲜粪便用饱和糖水漂浮法检查，检出隐孢子虫，无眼观的明显脱水现象，且患病牛可以自主采食。
[0032]排除标准:患牛患有其他并发症，如肺炎、脐带炎及关节炎等，或者已被施予其它治疗措施均不纳入本试验研究。其次病原学检查，检出有其他病毒性感染均不纳入本试验研究。再次，精神沉郁，食欲废绝，脱水严重者，不纳入本试验研究。
[0033](2)临床治疗试验:
在陕西省、青海省、甘肃省和宁夏回族自治区的4个奶牛养殖场，进行该中药组合物治疗犊牛隐孢子虫感染的临床治疗试验，按每头每次10ml，每日2次(早晚各I次)，2天为I疗程，一般治疗2个疗程，治疗前均未使用任何药物。共收治患隐孢子虫感染的犊牛216头，治愈181头，治愈率为83.80%，总有效头数为202头，总有效率为93.52%，并在治疗期间未发现犊牛有不良反应。
[0034]在甘肃秦王川奶牛养殖场，共收治患隐孢子虫感染犊牛52例，治愈43例，治愈率82.69%;显效4例，显效率7.69%;有效2例，有效率3.85%;无效3例，无效率5.77%;总有效头数为49头，总有效率为94.23%，且未见不良反应。
[0035]在西安现代农业综合开发总公司畜牧开发公司奶牛场，共收治患隐孢子虫感染犊牛47例，治愈40例，治愈率85.11%；显效2例，显效率4.25%;有效2例，有效率4.25%;无效3例，无效率6.38%;总有效头数为44头，总有效率为93.62%，且未见不良反应。
[0036]在青海天露乳业有限公司奶牛场共收治患隐孢子虫感染犊牛55例，其中治愈46例，治愈率83.64%；显效2例，显效率3.64%;有效3例，有效率5.45%;无效4例，无效率7.27%；总有效头数为51头，总有效率为92.73%，且未见不良反应。
[0037]在宁夏夏进奶牛繁育科技有限公司奶牛场共收治患隐孢子虫感染犊牛62例，其中治愈52例，治愈率83.87% ；显效3例，显效率4.84% ；有效3例，有效率4.84% ；无效4例，无效率6.45%;总有效头数为58头，总有效率为93.55%，且未见不良反应。
[0038]安全性评价:
为了明确治疗犊牛隐孢子虫病中药组合物的毒副作用，以期对其安全性做出准确、客观的评价，为临床试验用药提供科学依据，确保临床用药安全，进行了毒性试验。
[0039]按照实施例1配比，准确称取上述药材，加10倍重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至相对密度为1.13(60°C)，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，备用。
[0040]通过对小鼠灌服的LD50试验表明，以药物浓度lg/ml和动物耐受的最大给药容积给药，无出现死亡，无法测出灌胃给药方式的LD50，只能表明该中药制剂口服灌胃的LD50>40000mg/kg体重。通过腹腔注射给药，在药物浓度lg/ml和最大给药容积下，也无小鼠死亡，也无法测出腹腔注射给药方式的LD50，故认为，腹腔注射的LD50>10000mg/kg体重。根据《兽药试验技术规范汇编》的结果评定标准，以及毒理学评价标准，判定该中药组方实际无毒。在最大给药量试验中，16h内4次灌胃给药，每次以小鼠灌胃给药的最大给药容积给药，除给药后动物出现稍有不适，不爱活动，采食量下降等症状外，在常规观察的1d内小白鼠的状况良好，没有出现异常现象，且无一只死亡。根据最大耐受倍数的计算方式，该制剂相对于犊牛临床用量的最大倍数为80倍。
[0041]为了掌握因连续使用该中药组方而产生毒副反应和严重程度，以及停药后的发展和恢复情况，为拟定临床安全用药剂量提供参考。按40000mg/kg组、20000mg/kg组、lOOOOmg/kg组和O剂量组口服灌胃给药，连续28d，在大鼠上进行了该中药组方的亚慢性毒性试验，在试验期内，高剂量体重减轻明显外，其余各试验组小鼠的饮食，行为，粪便均正常，发育良好，无任何中毒症状且血象及血清中CREA、ALT、ALP、AST、TP、ALB的均在正常范围。这说明该制剂是安全的，为其在临床上的安全应用提供了依据。
[0042]最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，其特征在于，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连10-18份，白头翁11-15份，金银花8-12份，黄芩13-16份，乌梅10-15份，地锦草10-18份，葛根8-13份。2.根据权利要求1所述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，其特征在于，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连12份，白头翁11份，金银花9份，黄芩14份，乌梅13份，地锦草12份，葛根8份。3.根据权利要求1所述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，其特征在于，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连11份，白头翁12份，金银花11份，黄芩16份，乌梅14份，地锦草13份，葛根12份。4.根据权利要求1所述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物，其特征在于，是由按照重量份计的以下原料制备得到的:黄连13份，白头翁14份，金银花10份，黄芩15份，乌梅12份，地锦草11份，葛根9份。5.根据权利要求1-4任一所述的一种用于治疗犊牛隐孢子虫病的中药组合物的制备方法，其特征在于，按照重量份配比称取各原料，加10倍原料总重量的水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，煎液浓缩至温度60 0C时相对密度1.13，再加水调至药液生药含量为1.0mg/ml，灌服，每次80-120ml，每天2次，2天为I个疗程。
【文档编号】A61P33/02GK105853538SQ201610294111
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月3日
【发明人】王胜义, 崔东安, 王慧, 刘永明, 刘治岐, 齐志明
【申请人】中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所