复方盐酸溶菌酶软膏及其制备方法和应用

复方盐酸溶菌酶软膏及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明公开了一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏及其制备方法和应用。所述的软膏包括活性成份和辅料，所述的活性成份是盐酸溶菌酶和蔗糖；其中盐酸溶菌酶在复方盐酸溶菌酶软膏中的重量百分比为1.4％～3.3％；蔗糖在复方盐酸溶菌酶软膏中的重量百分比为40％～50％；所述的辅料为制备复方盐酸溶菌酶软膏所需的可接受的任何辅料。本发明软膏具有祛腐生肌作用，可抑菌、杀菌、抗病毒、抑制感染、促进创面迅速愈合，本发明还提供复方盐酸溶菌酶软膏在制备治疗皮肤溃疡的药物中的应用。
【专利说明】
复方盐酸溶菌酶软膏及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏及其制备方法和应用，属于 医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 慢性皮肤溃疡又称难治性溃疡，多见于老年人，尤其是在有糖尿病、脉管炎及下肢 静脉回流障碍的老年人群中更为常见。随着人口的老龄化趋势及糖尿病、心血管疾病等发 病率的增高，慢性皮肤溃疡的发病率也有所上升。临床上因动脉硬化闭塞症、糖尿病、心脑 血管疾病及创伤引起的皮肤溃疡越来越多，占外科住院患者的3 %左右。由于皮肤溃疡发生 在体表，具有病程长、对外观影响大以及并发症多等特点，对患者的生活质量造成了极大的 危害。
[0003] 皮肤溃疡是临床上较常见的合并症之一，其形成因素多种多样。难治性溃疡常因 原发疾病如烧伤、烫伤、糖尿病等病情长期得不到控制而引起，如处理方法不当，可发生局 部炎症，甚至引发全身性炎症反应，病程反复，迀延难愈，给患者带来极大痛苦，严重影响其 生活质量。目前，皮肤溃疡的治疗分为全身疗法和局部治疗。全身支持疗法，补充高能饮食， 纠正贫血和低蛋白血症。由于长期营养不良，致使皮肤抵抗力低下，皮肤弹性减弱，脂肪层 较薄，机体免疫力降低，因此对病人要进行有针对性的饮食护理，给予病人充足合理的营养 素，满足病人对营养的需求，要给予高蛋白、高热量、高维生素、富含纤维素饮食，增强机体 抵抗力，预防褥疮的发生。局部治疗法是对创伤面进行治疗，根据褥疮不同临床时期，采取 相应的治疗措施。局部治疗可分为物理治疗及药物治疗。紫外线照射:紫外线具有杀菌、消 炎及干燥作用，对各类细菌感染创面均有较好的杀菌作用。红外线照射:在促进血液循环， 增强细胞功能及局部抵抗力的同时，可使创面干燥，减少渗出，有利于组织的再生与修复。
[0004] 目前临床上一般采用传统治疗皮肤溃疡的方法即为尽可能地保持伤口干燥，以防 止发生细菌感染，吸收和排除伤口渗液，这些方法可使伤口脱水、结痂，但也存在缺陷，在痂 皮中混有一些表皮细胞，这些细胞被迫移向干燥痂皮下深处，从而延长了褥疮的愈合过程。
[0005] 总之，以上治疗方法都存在不同程度的缺陷，使临床应用受到很大限制。为满足广 大患者的临床需求，因此，本领域技术人员多年来一直在寻求一种安全高效，使用方便的治 疗皮肤溃疡的外用药物，以丰富临床用药。
[0006] 按照中国药典规定，用于烧伤或严重创伤的软膏剂、乳膏剂、凝胶剂，应是无菌制 剂。制剂所用的原料药、辅料以及生产条件不灭菌或灭菌方法不当的话，在临床上容易产生 二次染菌，造成创伤面更难愈合，治疗效果很不理想或对溃疡面产生更大的危害。此外，专 用于治疗皮肤溃疡的盐酸溶菌酶与蔗糖复方外用药物，特别是复方盐酸溶菌酶软膏制剂尚 未见报道。

【发明内容】

[0007] 本发明针对现有技术的不足，提供一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，本 发明还提供该软膏的制备方法和应用。
[0008] 术语说明：
[0009] 本发明所述的皮肤溃疡，是指以长期不能愈合为主要临床特征，皮肤组织缺损液 化感染坏死的一种体表疾病。
[00?0] 盐酸溶菌酶:英文名Lysozyme hydrochloride，系自新鲜鸡蛋清中提取的一种粘 多糖的碱性蛋白酶，与氯离子结合成为溶菌酶氯化物，CAS登录号9066-59-5，市场可购。
[0011] 本发明技术方案如下：
[0012] -种复方盐酸溶菌酶软膏，包括活性成份和辅料，所述的活性成份是盐酸溶菌酶 和蔗糖;其中盐酸溶菌酶在复方盐酸溶菌酶软膏中的重量百分比为1.4%~3.3 % ;蔗糖在 复方盐酸溶菌酶软膏中的重量百分比为40%~50%。
[0013] 根据本发明，所述的辅料为制备复方盐酸溶菌酶软膏所需的可接受的任何辅料。
[0014] 本发明所使用的盐酸溶菌酶为本领域常规原料，市购产品。其质量卫生部药品标 准98版二部制定要求，其中每Img的效价不得少于6250单位(酶活力）。
[0015] 本发明提供以下优选的技术方案：
[0016] -种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 3. 0~6. 0份 蔗糖 80~90份 甘油 Θ~10份
[0017] 聚乙二醇1000 0~6.0份 海藻酸钠 1.0~1.8份 甘氨酸 3. 0~6. 0份 无菌水 80~90份。
[0018] 进一步优选的，一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，由以下原料按质量份 制成： 盐酸溶菌酶 3. 0~5.()份 鹿糖 80~85份 甘油 5. 0~9. 0份
[0019] 聚乙二醇1000 2.0~5. 5份 海藻酸钠 LO~1.6份 甘氨酸 3. 0~5. 0份
[0020] 无菌水 80~85份。.
[0021 ]更进一步优选的，一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，由以下原料按质量 份制成： 盐酸溶菌酶 3.0:份 蔗糖 80份 甘油 5. 0份
[0022] 聚乙二醇 1000 2.0 份 海藻酸钠 1. 0份 甘氨酸 3.0份 无菌水 80份。
[0023] 或者，一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 4. 0份 蔗糖 82份 甘油 7. Q份
[0024] 聚乙二醇 1000 3. 8 份 海藻酸钠 1. 3份 甘氨酸 4. 0份 无菌水 83份。
[0025] 或者，一种治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 5. 0份 蔗糖 85份 甘油 9. 0份
[0026] 聚乙二醇 1000 5. 5 份 海藻酸钠 1. 6份 甘氨酸 5. 0份 无菌水 85份。
[0027] 根据本发明，所述复方盐酸溶菌酶软膏制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0028] (1)按配比称取盐酸溶菌酶、蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、甘氨酸备用；
[0029] (2)按配比称取盐酸溶菌酶和甘氨酸，分别加无菌水溶解，并分别用0.1~0.22μπι 滤膜，进口压力〇.65MPa，过滤除菌后，将所得盐酸溶菌酶料液、甘氨酸料液合并，输送至已 灭菌的罐内，常温备用；
[0030] (3)按配比称取蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、无菌水各组分混合，用2%~ 5%(W/W)盐酸调pH4~6,然后升温至126°C~131°C，并保持时间30~60min进行灭菌，输送 至已灭菌的罐内存放，在50~55°C保温备用；
[0031] (4)在无菌条件下，将步骤(2)、（3)所得的物料混合，搅拌均匀；
[0032] (5)将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在温度控制在40~50°C条件下，在搅拌 下用5%(W/W)盐酸调混合物的pH4~6之间，然后开启剪切机低速1000~1500r/min，剪切5 ~IOmin;然后高速2000~2500r/min剪切3~6分钟，关闭剪切机;开启搅拌转速为30~50r/ min，继续搅拌3~4min，然后再在搅拌转速为20~25r/min继续搅拌，降温至30~35°C时停 止搅拌，即得。
[0033] 将上述产品进行无菌包装，检验，入库。
[0034] 根据本发明优选的，所述的复方盐酸溶菌酶软膏制剂的制备方法，步骤(5)的方法 如下：
[0035] (5)将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在温度控制在40~50°C条件下，在搅拌 下用5%(W/W)盐酸调混合物的pH4~5之间，然后开启剪切机低速1000~1200r/min，剪切5 ~IOmin;然后高速2000~2200r/min剪切3~4分钟，关闭剪切机;开启搅拌转速为30~40r/ min，继续搅拌3~4min，然后再在搅拌转速为20~25r/min继续搅拌，降温至30~35°C时停 止搅拌，即得。
[0036]本发明所述的室温系指10~30°C。
[0037] 需要说明的是，在以上制备方法中，所有用于物料输送的管道必须预先通过灭菌 处理。就制备方法而言，以上是本发明的优选方法，但不限于此。本领域的技术人员根据其 熟知的知识，可以适当加以调整。以上所述复方盐酸溶菌酶软膏制剂制备方法中未特别限 定的，可参照现有技术。
[0038] 实验证明本发明的复方盐酸溶菌酶软膏具有祛腐生肌作用，可抑菌、杀菌、抗病 毒、抑制感染、促进创面迅速愈合。复方盐酸溶菌酶软膏在治疗缺损性慢性皮肤溃疡或糖尿 病皮肤溃疡方面具有很好的疗效，因此，本发明还提供复方盐酸溶菌酶软膏在制备治疗皮 肤溃疡的药物中的应用，特别是在制备治疗缺损性慢性皮肤溃疡或糖尿病皮肤溃疡药物中 的应用。
[0039] 本发明所述的制备方法中复方盐酸溶菌酶软膏制剂质量标准如下，但不限于此。
[0040] 复方盐酸溶菌酶软膏质量标准
[0041] 本发明每Ig复方盐酸溶菌酶软膏含盐酸溶菌酶的效价不得低于31.25万单位;蔗 糖应为标示量的94.0%~110.0%。
[0042]【形状】本品为类白色软膏剂。
[0043]【鉴别】盐酸溶菌酶（1)取本品1片，加入纯化水30mL溶解后，取出2mL加10 %氢氧化 钠溶液5滴与10 %硫酸铜溶液1滴，混匀后显紫红色；
[0044] (2)取鉴别（1)项下溶解液5mL，加茚三酮试液ImL，加热，溶液应显蓝紫色；
[0045] (3)取鉴别（1)项下溶解液IOmL加醋酸-醋酸钠缓冲液(取无水醋酸钠6.7g，加水约 900mL，振摇使溶解，用醋酸调节pH值至5.4,加水稀释至1000 mL，摇勾）制成每ImL中含盐酸 溶菌酶0.4mg的溶液，照分光光度法（中国药典2010年版二部附录IVA)测定，在280nm的波长 处有最大吸收，吸收度应为〇. 39~0.49;
[0046] (4)取盐酸溶菌酶标准品适量，用磷酸盐缓冲液[取磷酸二氢钠10.4g与磷酸氢二 钠7.86g及乙二胺四乙酸二钠O . 37g，加水溶解使成1000 mL，调节pH值至6.2]制成每ImL含 Img的溶液。照有关物质项下方法试验。供试品色谱中，在与标准品色谱相应的位置上，显相 同颜色的条带；
[0047]取蔗糖对照品10mg，加甲醇溶液20mL，作为对照品溶液。另取本品适量(约相当于 蔗糖IOmg)加甲醇溶液20mL，作为供试品溶液。
[0048] 分别取上述溶液各2yL，点在薄层板上，立即吹干，用体积比10:5:3:2的I，2-二氯 乙烷:冰乙酸：甲醇：水混合液展开，至15cm左右，取出，高温吹干。重复一次展开，高温吹干 后。均匀的喷上麝香草酚溶液，130°C加热10分钟。供试品溶液主要斑点的颜色大小同对照 品溶液一致。
[0049]所述的麝香草酚溶液是按照如下方法制备的：取麝香草酚0.5g，溶解于IOOmL乙醇 与硫酸混合液(乙醇与硫酸体积比19: 1V/V)下同。
[0050]【检查】粘度依照《中国药典2010年版二部附录VIG第二法》;黏度(Pa. s)48~69。 [00511 酸碱性取本品Ig，加水30mL，溶解后，滤过，取滤液，依法测定，PH值应为4.5~ 6.00
[0052]粒度照粒度和粒度分布测定法《中国药典2010年版附录KE第一法》检查，均不得 检出大于90μηι的粒子。
[0053]有关物质取本品照效价测定项下供试品溶液制备方法用ρΗ6.2磷酸盐缓冲液制 成每ImL中含盐酸溶菌酶Img的溶液，作为供试品溶液。取盐酸溶菌酶标准品适量，用ρΗ6.2 磷酸盐缓冲液制成每ImL含2mg的溶液，作为标准品溶液。分别精密吸取各溶液IOyL照电泳 法(《中国药典》2010年版二部附录VF)测定，用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，考马斯亮蓝染 色。供试品溶液如显杂质斑点，与标准品溶液杂质斑点比较，不得更深。
[0054] 转化糖对照溶液，称取葡萄糖IOmg，置50mL量瓶中，加甲醇溶液适量溶解，并用甲 醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
[0055]供试品溶液，称取样品1.0g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇溶液适量溶解，并用 甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
[0056] 分别取上述溶液各2yL，点在硅胶G薄层板上，立即吹干，用体积比10: 5:3:2的1， 2-二氯乙烷:冰乙酸：甲醇:水混合液展开，至15cm左右，取出，高温吹干。重复一次展开，高 温吹干。均匀的喷上麝香草酚溶液，130 °C加热10分钟。结果;供试品溶液在对照溶液斑点处 不显斑点；如显斑点，供试品溶液斑点的颜色不得深于对照溶液斑点颜色1.0%。
[0057] 无菌照无菌检查法《中国药典2010年版附录XIH》检查，应符合规定。
[0058]其他本品应符合《中国药典2010年版附录IF》软膏项下的其他要求。
[0059] 【效价测定】供试品溶液的制备称取软膏适量(相当于溶菌酶25mg)，置试管中，加 水20mL搅拌后，过滤，取滤饼用80mL水反复冲洗三次，滤液合并至100毫升量瓶中，用pH6.2 磷酸盐缓冲溶液定刻度。精密移取2mL置50mL容量瓶中，加pH6.2磷酸盐缓冲液至刻度，做为 供试品溶液备用。
[0060] 标准品溶液制备精密称取盐酸溶菌酶标准品25毫克，置IOOmL容量瓶中，加磷酸 盐缓冲溶液溶解，定容至刻度。分别精密移取lmL、2mL溶液置50mL容量瓶中，加PH6.2磷酸盐 缓冲溶液至刻度，做为标准溶液(1)及标准溶液(2)。样品溶液，标准溶液(1)标准溶液(2)置 冰浴中保存。
[0061 ]底物悬浮液的制备称取溶酶小球菌15~20mg，加磷酸盐缓冲液（pH6.2)0.5~ ImL，在研钵内研磨3分钟，再加磷酸盐缓冲液(pH6.2)适量，使总体积约为50mL，使悬浮液于 25 ± 0.1°C时，在450nm的波长处测得的吸收度为0.70 ± 0.05(临用前配制）。
[0062] 测定法精密量取溶菌酶底物试液4mL，在35°C水浴中加热5分钟，精密移取在水浴 提前加热3分钟的样品溶液IOOyU加入底物试液中，并在35°C水浴中加热10分钟后，再精密 量取lmol/L的盐酸溶液0.5mL加入底其中，摇匀。以水做为空白，在波长640nm处，紫外可见 分光光度法测量样品溶液的吸收值Ast。标准溶液(1)、标准溶液(2)按以上方法测定吸光度 Asi、As2〇
[0063] 每g盐酸溶菌酶的单位=X ( Afl ~ AaS' + 1)1 2 Wt As1 - As2 _
[0064] Ws:盐酸溶菌酶标准品称取量；
[0065] Wt:样品称取量X规格；
[0066] As1 :标准溶液（1)吸收度；
[0067] As2:标准溶液(2)吸收度。
[0068]【含量测定】蔗糖取本品1.4g，精密称定，置小烧杯中，加水适量，搅拌溶解，转移 置IOOmL量瓶中，并用水稀释至刻度，摇匀；精密量取ImL，置IOOmL量瓶中，稀释至刻度，摇 匀，作为供试品溶液。另取精制蔗糖12.5mg，精密称定，置250mL量瓶中，加水振摇溶解，并用 水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
[0069] 精密量取对照品溶液和供试品溶液各ImL，分别置IOmL量瓶中，加硫酸溶液3mL (5ml硫酸用水稀释至100mL)，钼酸铵溶液(4g钼酸铵加入100mL水中溶解)3.5mL，并用水稀 释至刻度，摇匀，沸水浴中25分钟后，用水冷却至室温。照中国药典2010年版二部（附录）紫 外分光光度，于700nm处测定，并空白校正，记录吸光度，计算，即得。
[0070] 本发明的治疗皮肤溃疡的复方盐酸溶菌酶软膏，它采用盐酸溶菌酶和蔗糖为本发 明药物的有效成分，与药用辅料制成药剂，经过皮肤外用药物给药，对不同时期的病并发症 引起的皮肤溃瘍的治疗，都显不了它具有尚渗、杀菌，其中所具备的特点如下：
[0071] 1、本发明制剂中的盐酸溶菌酶具有促进纤维芽细胞的增殖作用、促进试验性创伤 愈合作用、促进结缔组织纤维形成等药理作用。复方盐酸溶菌酶软膏中的活性成分溶菌酶 为一种粘多糖溶解酶，其通过水解破坏组成细菌细胞壁的肽糖分子的由N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖氨之间的β_(1，4)糖苷键，使细胞因渗透压不平衡引起破裂，从而导致菌体 细胞壁溶解而杀死细菌。
[0072] 2、本发明制剂中使用蔗糖外敷于创面，在水肿组织外形成高渗状态，同时还能放 出热量，改变局部的渗透压，从而将水肿组织内多余水分吸出，高渗也能抑制细菌生长，还 可起到一种"消毒"作用。蔗糖具有高渗作用，能减轻局部创口水肿程度，加速肉芽组织生 成，加速愈合，能达到收敛生肌的目的。
[0073] 3、本发明制剂中使用蔗糖能改变创口的酸碱性，促使上皮细胞产生温良的生理刺 激，供给创口营养，使创口附近血液循环良好，促进细胞再生，加速创口愈合。
[0074] 4、本发明蔗糖联合盐酸溶菌酶治疗皮肤溃疡，起到协同作用。其特点是抑菌力强、 无味、性能稳定、无刺激性、毒性低，能抑制细菌、病毒、真菌、芽孢及原虫等，对创面愈合无 干扰作用，应用胜过其他任何一种伤口护理产品。蔗糖联合溶菌酶应用从而促进皮肤溃疡 的快速愈合。将其制成复方剂型完全符合药物用药的要求及临床治疗的特点。
[0075] 5、本发明制剂中加入甘氨酸，一方面对盐酸溶菌酶起到稳定性作用，另一方面持 续性缓慢释放盐酸溶菌酶以达到延长药效的目的。
[0076] 6、本发明的复方盐酸溶菌酶软膏为皮肤局部外用无菌制剂，制备工艺中最关键的 就是灭菌技术。本发明制剂产品有效成分盐酸溶菌酶高温条件下易发生变性，不适于采用 高温灭菌法。考虑到盐酸溶菌酶在水中溶解性较好，根据本品生产过程中，本发明先将盐酸 溶菌酶溶解后再加入到水相中，选择过滤法灭菌，以保证本制剂既符合国家药典要求，又能 达到灭菌的目的。根据本发明制剂辅料各成分的理化性质，如果采用非热力灭菌方法，如过 滤法，因基质黏稠，难以过滤。经综合考虑本制剂的特点，本发明特别采用高温湿热灭菌工 艺对制剂辅料的水相进行灭菌。
[0077] 综上，本发明的治疗皮肤溃疡的外用药物的复方盐酸溶菌酶软膏制剂，采用盐酸 溶菌酶、蔗糖为本发明药物的有效成分与药用辅料，通过溶解、高温灭菌、滤膜过滤除菌、低 速均质、高速均质、搅拌、降温、无菌灌装等工艺制成药剂。经过皮肤外用药物给药，对不同 时期的皮肤溃疡都显示了它具有较好的临床作用。更为详细的效果实验将在实施例中予以 说明。
[0078] 下面结合实验例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
[0079] 实验例1、盐酸溶菌酶、甘氨酸过滤除菌实验研究
[0080] 1、材料与方法
[0081 ] 1.1试验材料
[0082] 盐酸溶菌酶由山东鲁北药业有限公司、甘氨酸由宜昌人福药业有限责任公司提 供；
[0083] 1.2主要设备
[0084] 电子天平，压滤装置，恒温水浴锅，滤膜，分光光度计；
[0085] 1.3试验方法
[0086] 1.3.1膜孔径选择
[0087]根据细菌的特征，分别选用孔径为0.05、0.22、0.5μπι的滤膜，对接种细菌的盐酸溶 菌酶、甘氨酸进行过滤，进口压力〇. 65MPa。温度52°C，30min时对过滤后的滤液进行采样，检 测细菌。
[0088] 1.3.2操作压力的确定
[0089]分别用孔径为0.22μπι的滤膜过滤盐酸溶菌酶、甘氨酸溶解液，连续工作25min，期 间每隔30min检测透过通量。操作温度为37~52°C，进口压力分别为0.35、0.55、0.65、 0.70MPa，最后根据通量的大小及稳定性选定合适的进口工作压力。
[0090] 1.3.3滤膜过滤盐酸溶菌酶、甘氨酸溶解液效果试验
[0091] 滤膜过滤盐酸溶菌酶、甘氨酸溶解液，操作温度37~52°C，进口压力为0.65MPa。每 隔30min分别对过滤前及过滤后的提取液进行采样，检测细菌、菌落总数、浊度色值过滤前 为对照组，过滤后为试验组。
[0092] 2结果与分析
[0093] 2.1不同膜孔径对细菌的去除效果
[0094]试验结果如表1所示。从表中可以看出，随着滤膜孔径的减小，盐酸溶菌酶、甘氨酸 溶解液中细菌的去除率越高，〇. 22μπι孔径的滤膜能达到完全除菌的要求。
[0095]表1滤膜孔径对细菌的影响
[0097] 2.2不同操作压力对通量的影响
[0098] 在过滤温度52°C的条件下，采用不同的压力进行过滤试验，试验结果见图1，可以 看出，随着时间的延长，过滤初期通量下降较快，随后下降速率变缓；在压力小于〇.65MPa 下，随着压力的增加，盐酸溶菌酶、甘氨酸溶解液通量增加较快;但当压力达到〇. 7MPa时，过 滤后期通量反而小于〇. 65MPa时的通量。过滤初期，污染层较少，流道较为通畅，料液流动速 度较快，过滤阻力主要为过滤膜的阻力。通量与压力成正比，增加压力即可增加通量。压力 继续增大时，浓差极化作用增加，形成较厚的膜面凝胶层，凝胶层引起流道堵塞。浓差极化 作用进一步加强，形成恶性循环，此时过滤阻力除膜阻力外，还有极化层阻力和凝胶层阻 力。随着凝胶层厚度及浓差极化程度增加，阻力增加，使得通量反而降低，因此，操作压力取 0.65MPa〇
[0099] 实验例2、蔗糖以及辅料灭菌实验研究
[0100] 不同的湿热灭菌和时间对蔗糖以及辅料湿热灭菌效果的比较，按配比称取蔗糖、 甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、无菌水各组分混合，用2%~5% (W/W)盐酸调pH4~6,考察 湿热灭菌温度和时间，见表2:
[0101]表2蔗糖以及辅料湿热灭菌效果比较
[0103]由表2中可分析出：
[0104] 1、湿热灭菌温度在121°C，时间在30~60min条件下，蔗糖中转化糖含量<1.0%符 合规定，表明在此条件下未对蔗糖化学结构发生破坏，但无菌检查，不符合规定。
[0105] 2、湿热灭菌温度在126~131°C，时间在30~60min，蔗糖中转化糖含量<1.0%符 合规定，表明在此条件下未对蔗糖化学结构发生破坏，无菌检查，符合规定。
[0106] 试验结论；由于蔗糖的高渗性，改变液体环境的渗透压;又因蔗糖在PH4~6溶液条 件，抑菌效果明显，所以在湿热灭菌温度在126~131°C，时间在30min~60min，无菌检查，符 合规定。
[0107] 实验例3、甘氨酸对盐酸溶菌酶溶出度影响作用实验
[0108] 本发明制剂中加入甘氨酸，一方面对盐酸溶菌酶起到稳定性作用，另一方面持续 性缓慢释放盐酸溶菌酶以达到延长药效的目的，并对其溶出度进行实验；
[0109]取实施例1~3的复方盐酸溶菌酶软膏各2g，照《中国药典2010年版二部》(附录XC) 第二法溶出度测定法，以经脱气处理后的1000 mL水为溶出介质，转速为75转± 5转/分，依法 操作，分别于5min、IOmin、20min、30min、45min，取样20mL，滤过，取续滤液作为供试品溶液； 测定盐酸溶菌酶的效价并换算成含量。
[0110]复方盐酸溶菌酶软膏溶出度试验表明：复方盐酸溶菌酶软膏中的盐酸溶菌酶成分 在45min内持续性缓慢释放。见表3。
[0111]表3复方盐酸溶菌酶软膏中的盐酸溶菌酶效价
[0113] 结果表明：复方盐酸溶菌酶软膏实施例1~3的盐酸溶菌酶效价在45min后均在 31.25万单位以上。以时间（分钟)对其盐酸溶菌酶效价作曲线，即得各样品的溶出曲线，见 附图2~4。
[0114] 实验例4、甘氨酸对盐酸溶菌酶效价影响作用试验
[0115] 考察加入甘氨酸对盐酸溶菌酶活性起到保护作用;见表4。
[0116] 表4甘氨酸用量筛选单位(g)
[0118] 用实施例1的方法制备;对其5个处方所制备的软膏进行12个月的考察，按照复方 盐酸溶菌酶软膏质量标准，对加入甘氨酸所产生的盐酸溶菌酶效价分析;见表5。
[0119] 表5盐酸溶菌酶效价分析
[0122] 处方评价及结果：
[0123] 处方1:复方盐酸溶菌酶软膏为色泽均匀，但盐酸溶菌酶效价低；
[0124] 处方2:复方盐酸溶菌酶软膏为色泽均匀，但盐酸溶菌酶效价较低；
[0125] 处方3:复方盐酸溶菌酶软膏为色泽均匀，盐酸溶菌酶效价稳定；
[0126] 处方4:复方盐酸溶菌酶软膏为色泽均匀，盐酸溶菌酶效价稳定；
[0127] 处方5:复方盐酸溶菌酶软膏为色泽均匀，盐酸溶菌酶效价稳定。
[0128] 结果分析：以上处方软膏成型较好;处方1、2中甘氨酸用量低，造成盐酸溶菌酶效 价较低，不适合本制剂的要求。处方3、4、5成型较好;盐酸溶菌酶效价稳定，适合要求，由此 可见加入甘氨酸对盐酸溶菌酶活性起到保护作用。
[0129] 实验例5、复方盐酸溶菌酶软膏中蔗糖抑菌浓度以及pH实验研究
[0130] 1、材料与仪器
[0131] 电热恒温鼓风干燥箱、型数控超声波清洗仪、旋涡混合器、数显恒温水浴锅、循环 水真空栗、旋转蒸发仪、生化培养箱、细菌培养箱，蔗糖；
[0132] 2、方法
[0133] 2.1制备马铃薯葡萄糖琼脂培养基以及牛肉膏蛋白胨琼脂培养基细菌培养基；
[0134] 2.2制备菌悬液用牛肉膏琼脂平板活化大肠杆菌，分别挑取适量菌苔，用无菌水制 备10~I OOcf u/mL的供试菌液。
[0135] 2.3不同质量浓度蔗糖：蔗糖的抑菌效果比较，使用无菌水配制质量浓度分别为 50%、40%、20%、10%的蔗糖溶液，比较不同质量浓度溶液的抑菌效果。
[0136] 2.4不同pH蔗糖的抑菌效果比较:配制蔗糖质量浓度为40% ;pH分别为2.0、4.0、 6.0、8.0的蔗糖溶液，比较不同的pH值对蔗糖抑菌活性的影响。
[0137] 2.5检测分析方法
[0138] 2.5.1滤纸片扩散法测定抑菌效果:取直径为5.8mm经灭菌烘干的滤纸片若干，放 入一定质量浓度和pH的鹿糖溶液中，浸泡20~40min，干燥备用。在无菌条件下，接种适量供 试菌液于相应的固体琼脂培养基上，用涂布器涂布均匀后，静置0.5h。使用无菌镊子将供试 滤纸片贴在上述平板上，间隔一定的距离，每个平皿贴2片。以浸泡过无菌水的滤纸片作为 对照，每一菌种做2个平行。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌置于37°C恒温培养箱中培养16~ 18h，取出量取抑菌圈直径，判断抑菌效果。
[0139] 3、结果
[0140] 3.1不同浓度蔗糖的抑菌圈直径结果见表6。
[0141] 表6不同质量浓度蔗糖的抑菌圈直径Gwkm
[0143] "一"表示没有抑菌圈
[0144] 表1显示蔗糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用相当，在40%时有抑菌圈， 且抑菌圈直径都是6.0mm左右。蔗糖对的抑制具有选择性，在所测蔗糖质量浓度范围内，随 着浓度的增大，对细菌的抑菌效果呈增强趋势。
[0145] 3.2不同pH蔗糖的抑菌圈直径结果见表7。
[0146] 表7不同pH值蔗糖的抑菌圈直径ChAmra
[0148] 表示没有抑菌圈
[0149] 由表2可知，蔗糖在pH6的条件下对大肠杆菌抑菌活性明显;在pH4的条件下对金黄 色葡萄球菌的抑菌效果明显;而在强酸和强碱条件下抑菌活性相对较弱。
[0150] 4结论
[0151] 蔗糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用，质量浓度以及pH值影响其抑菌 效果。总的来说，随着质量浓度的增大，抑菌效果呈上升趋势。PH4~6对蔗糖抑菌活性有明 显影响。40% (W/W)以上质量浓度的蔗糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有较强地抑菌效果。
[0152] 实验例6、原辅料相容性实验
[0153] 本发明复方盐酸溶菌酶软膏研究过程中选用的盐酸溶菌酶、蔗糖，尤其是辅料在 处方中的应用，需进行原辅料的相容性试验，原辅料相容性试验如下；
[0154] 将原料与所选辅料按一定比例物理混合，按照中国药典2010版二部(附录XIXC)原 料药与药物制剂稳定性试验指导原则中影响因素的实验方法，由于盐酸溶菌酶在高温条件 下不稳定，所以影响因素分别在高温50°C±2°C、湿度90%±5%、强光4500±500以的条件 下放置10天，检查放置前后变化。试验结果如下：
[0155] 1、高温条件原辅料相容性试验
[0156] 将原辅料按照一定比例混合，暴露置高温50°C±2°C条件下10天取样，检验结果见 表8:
[0157] 表8原辅料相容性试验(50°C ±2°C)10天

[0160]经高温50°C±2°C条件下10天相容性试验，结果显示与各辅料性状、含量均无变 化。水分检查结果显示随时间延长而有所降低。
[0161]以上结果表明盐酸溶菌酶+蔗糖在高温50°C±2°C条件下与辅料相容性良好。
[0162] 2、光照条件原辅料相容性试验
[0163] 将原辅料按照一定比例混合，暴露置光照(4500±5001x)条件下10天取样，测定各 项指标，结果见表9。
[0164] 表9原辅料相容性试验光照(4500 ± 5001x) 10天
[0166] 以上结果表明盐酸溶菌酶+蔗糖在光照(4500 ± 5001x)条件下与辅料相容性良好； 经光照(4500±5001x)条件下10天相容性试验，结果显示与各辅料性状、含量均无变化。
[0167] 3、高湿条件原辅料相容性试验
[0168] 将原辅料按照一定比例混合，暴露置高湿(90% ±5%)条件下10天取样，测定各项 指标，结果见表10。
[0169] 表10原辅料相容性试验高湿(90% ±5% )10天
[0172] 经高湿90% ±5 %条件下10天相容性试验，结果显示与各辅料性状、含量均无变 化。因本法为物料暴露于高湿条件下，故水分有所增加。
[0173] 以上结果表明盐酸溶菌酶+蔗糖在高湿90% ±5%条件下与辅料相容性良好。综合 试验结果表明制剂应密封保存。
[0174] 实验例7、复方盐酸溶菌酶软膏的长期稳定性实验
[0175] 将实施例1制备的复方盐酸溶菌酶软膏在上市规定的贮存条件下进行长期稳定性 试验，考察复方盐酸溶菌酶软膏在运输、保存、使用过程中的稳定性特征，从而作为确定有 效期和贮存条件的依据。将采用复合铝塑管包装的复方盐酸溶菌酶软膏样品，放置于25°C ± 2 °C、RH60 % ± 10 %的恒温、恒湿箱中放置24个月，分别于0、3、6、9、12、18、24个月取样，检 测各项质量指标。结果见表11。
[0176] 表11复方盐酸溶菌酶软膏长期稳定性试验
L〇178」结果：经长期稳定性24个月的考察，结果显示与O月比较各项指标无明显变化，表 明复方盐酸溶菌酶软膏在25°〇±2°(：、1^60%±10%条件下稳定性良好，在规定的各项条件 下生产、包装、贮存、运输均不会对本品的质量产生不利影响，可保障临床用药安全有效。
[0179]实验例8、复方盐酸溶菌酶软膏对家兔皮肤的刺激性研究 [0180] 1、材料与方法
[0181] 1.1材料
[0182] 复方盐酸溶菌酶软膏，实施例1方法制备、赋形剂不加盐酸溶菌酶、蔗糖软膏按照 实施例1方法制备。日本大耳白家兔（山东大学实验动物中心），体重约2.0kg，雌雄各半。
[0183] 1.2单次给药对家兔皮肤的刺激性实验
[0184] 1.2.1实验方法
[0185] 取家兔8只，雌雄各半，随机分成实验组和赋形剂组，每组雌雄各2只。实验开始前 对称剪去兔脊柱两侧毛，面积共约140cm，24h后将每只家兔脱毛皮肤自上而下平均分为4 块，脊柱两侧共8块，每块面积约为15cm，下部4块制作破损皮肤模型。制作方法为：用大头针 划直径为2cm的形擦伤，注意只刺破表皮，不伤及真皮，以有轻度渗血为度。所有家兔脊 柱左侧均给予赋形剂lg，实验组脊柱右侧给予复方盐酸溶菌酶软膏lg，涂药后用医用手术 巾包8h，然后用温水洗去药物。
[0186] 1.2.2观察项目观察并记录
[0187] 去除复方盐酸溶菌酶软膏及赋形剂后1、24、48、721!给药部位皮肤红斑、水肿、焦痂 等刺激反应情况，按新药毒理学研究指导原则，将红斑、水肿程度定为0~4级并进行刺激性 评价。将无红斑、勉强可见红斑、中度红斑、严重红斑、紫红色红斑并有焦痂形成等分别记分 为0.00、1.00、2.00、3.00、4.00。无水肿、勉强可见水肿、皮肤隆起轮廓清楚、水肿隆起约1111111 并范围扩大等分别记分为0.00、1.00、2.00、4.00。动物红斑形成总分与水肿形成总分之和 除以动物数为反应平均值，反应平均值< 〇. 05为无刺激，2.00为轻度刺激性，6.00为中度刺 激性，>6. OO为强刺激性。
[0188] 1.3多次给药对家兔皮肤的刺激性实验
[0189] 1.3.1实验方法
[0190] 取家兔8只，雌雄各半，分为实验组和赋形剂组，分组、给药方法、剂量及包扎时间 均同"1.2"项下，每日给药1次，连续7d，每次给药后8h，用温水洗去药物及赋形剂。
[0191] 1.3.2观察项目从末次除去药物及赋形剂后Ih开始观察刺激反应情况，每日1次， 连续观察14d。
[0192] 2、结果
[0193] 2.1单次给药对家兔皮肤的刺激性
[0194] 实验组有1只家兔的破损皮肤出现勉强可见的红斑反应(评1.00分），无水肿反应。 其他家兔的皮肤未见红斑、水肿、焦痂等刺激反应。表明单次给予复方盐酸溶菌酶软膏对家 兔完整及破损皮肤均无明显刺激反应。
[0195] 2.2多次给药对家兔皮肤的刺激性
[0196] 实验组完整及破损皮肤分别有1和2只家兔出现勉强可见的红斑反应（各评1.00 分），但均无水肿反应，完整皮肤在停药3d后红斑反应消失，破损皮肤在停药5d后红斑反应 消失。给予赋形剂的家兔皮肤均未出现刺激反应。结果见表12。
[0197] 表12 3种药物不同时间给药对家兔皮肤平均刺激反应评分n = 4
[0199] 3、讨论
[0200] 本实验结果表明，单次给予复方盐酸溶菌酶软膏对家兔皮肤无刺激性，复方盐酸 溶菌酶软膏多次连续给药对家兔完整皮肤无刺激性，对破损皮肤有轻度刺激反应;但停药 后上述刺激反应消失，表明复方盐酸溶菌酶软膏在此剂量下对家兔皮肤的刺激反应是可逆 的。
[0201] 实验例9、复方盐酸溶菌酶软膏对治疗缺损性慢性皮肤溃疡大鼠的实验观察
[0202] 1、材料和方法
[0203] 1.1实验动物：
[0204] SD大鼠，雌雄各半，200~250g，山东大学实验动物中心提供；
[0205] 1.2药品：
[0206] 复方盐酸溶菌酶软膏，由实施例1的方法制备。
[0207] 1.3方法：
[0208]取健康SD大鼠18只，雌雄各半，于大鼠背部去毛，将预先制成2cm X 2cm的印筐，用 龙胆紫染色后印在皮肤上，然后沿筐壁统一大小切开皮肤，深入浅筋膜，造成缺损创面。用 50 %冰醋酸涂创面1次/d，共1周，形成缺损性慢性皮肤溃疡模型。SD大鼠随机分为3组:复方 盐酸溶菌酶软膏组、阳性对照组、阴性对照组（阳性对照组用凡士林治疗，阴性对照组用液 状石蜡治疗）。1次/d，观察溃疡周围皮肤生长情况，每隔3d测定皮肤的溃疡面积，测定结果
[0209]见表1。然后以天数为横坐标，以各组的溃疡皮肤面积为纵坐标作图，分别观察药 物对慢性皮肤溃疡的愈合生长速度。
[0210] 2、结果：
[0211]从表13中可以看出，复方盐酸溶菌酶软膏对SD大鼠缺损性慢性皮肤溃疡有明显疗 效。从第6天起，复方盐酸溶菌酶软膏组皮肤愈合速度比阳性对照组快，相对于阴性对照组P <0.01，两者有非常显著差异;相对于阳性对照组P<〇.05,两者有显著差异，到给药后第9 天，复方盐酸溶菌酶软膏组的溃疡皮肤基本愈合。上述试验结果表明，复方盐酸溶菌酶软膏 能抑制局部组织炎症，促进组织细胞生长，加速溃疡皮肤的愈合。
[0212]表13大鼠缺损性慢性皮肤溃疡药物治疗各时间点创面面积比较(?^πι2，η = 6。 t/d)
[0214] 经过临床观察，复方盐酸溶菌酶软膏组能明显提高慢性皮肤溃疡创面新生毛细血 管数，改善创面微循环，加速组织修复过程。复方盐酸溶菌酶软膏用后在慢性皮肤溃疡创面 形成一层半透明保护膜，对创面起到保护和湿润作用，减少了创面细菌感染的机会。复方盐 酸溶菌酶软膏具有促进溃疡皮肤愈合的作用。
[0215] 实验例10、复方盐酸溶菌酶软膏外用治疗糖尿病皮肤溃疡
[0216] 肢端皮肤溃疡是糖尿病常见并发症之一，严重者需要截肢，给病人带来极大的痛 苦，威胁着糖尿病人的生活质量。用复方盐酸溶菌酶软膏外用治疗糖尿病湿性坏疽，取得良 好效果：
[0217] 1、临床资料：
[0218] 30例病人，符合WHO糖尿病诊断标准。病史7~21年，年龄44~82岁，男性17例，女性 13倒，其中合并糖尿病肾病14例，合并视网膜病变9例。皮肤病损病程半个月至6个月，溃疡 大小I .OcmX 1.2cm~3cmX 4cm不等，临床分级2~4级。其中2级患者17人，3级患者9倒，4级 患者4人。
[0219] 2、治疗方法：
[0220]予胰岛素控制血糖，使空腹血糖小于或等于7. Ommol/L，餐后血糖小于或等于 7.8mmol/L，并根据创面分泌物细菌培养选择敏感抗生素抗感染治疗，生理盐水250mL局部 常规清创，用复方盐酸溶菌酶软膏敷于刨面，覆盖单层油纱后包扎。
[0221] 3、治疗结果：
[0222] 2级患者12例15天~20天愈合，5例20~30天愈合；3级患者6例30天~40天愈合，2 例于40天~60天愈合，1例未愈;4级患者1例半年后愈合，3例未愈。总有效率86.7%，治疗期 间创面干洁，未见其他不良反应。
[0223] 4、讨论
[0224] 复方盐酸溶菌酶软膏其主要功能有祛腐生肌作用，可抑菌、杀菌、抗病毒、抑制感 染、促进创面迅速愈合。复方盐酸溶菌酶软膏治疗糖尿病肢端溃疡，效果颇佳，用药简便且 无副作用，大大降低致残率，提高了病人的生活质量。
【附图说明】
[0225] 图1是实验例1操作压力对通量的影响，横坐标为时间，纵坐标为通量；
[0226] 图2是实验例3实施例1溶菌酶溶出曲线，横坐标为时间、纵坐标为盐酸溶菌酶效 价；
[0227] 图3是实验例3实施例2溶菌酶溶出曲线，横坐标为时间、纵坐标为盐酸溶菌酶效 价；
[0228] 图4是实验例3实施例3溶菌酶溶出曲线，横坐标为时间、纵坐标为盐酸溶菌酶效 价。
【具体实施方式】
[0229] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
[0230]实施例1~3原辅料说明：
[0232]实施例中所涉及的装置和设备均为目前软膏剂生产通用设备，市场可购。说明如 下：
[0233]不锈钢溶解罐（型号100L)郑州永信搪瓷化工设备有限公司；剪切机(型号50L)温 州市东顶机械制造有限公司有售。
[0234]实施例1、复方盐酸溶菌酶软膏制剂及制备 [0235] 1、原辅材料投料量配比(w/w): 盐酸溶菌酶 3. O份 蔗糖 80份 甘油 5. 0份
[0236] 聚乙二醇iooo 2.0份 海藻酸钠 L 0份 甘氨酸 3. 0份
[0237] 无菌水 80份。
[0238] 2、按照如下方法制备：
[0239] (1)按配比称取盐酸溶菌酶、蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、甘氨酸备用；
[0240] (2)按配比称取盐酸溶菌酶和甘氨酸，分别加无菌水溶解，并分别用0.22μπι滤膜， 进口压力0.65MPa，过滤除菌后，将所得盐酸溶菌酶料液、甘氨酸料液合并，输送至已灭菌的 罐内，常温备用；
[0241] (3)按配比称取蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、无菌水各组分混合，用5% (W/W)盐酸调PH4~6,然后升温至126°C~131°C，并保持时间30~40min进行灭菌，输送至已 灭菌的罐内存放，在50~55°C保温备用；
[0242] (4)在无菌条件下，将步骤(2)、（3)所得的物料混合，搅拌均匀；
[0243] (5)将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在温度控制在40~50°C条件下，在搅拌 下用5%(W/W)盐酸调混合物的pH4~5之间，然后开启剪切机低速1000~1200r/min，剪切5 ~IOmin;然后高速2000~2200r/min剪切3~4分钟，关闭剪切机;开启搅拌转速为30~40r/ min，继续搅拌3~4min，然后再在搅拌转速为20~25r/min继续搅拌，降温至30~35°C时停 止搅拌，即得。
[0244] 将上述产品进行无菌包装，检验，入库。
[0245] 实施例2、复方盐酸蔗糖溶菌酶软膏制剂及制备
[0246] 1、原辅材料投料量配比(w/w): 盐酸溶菌酶 4.0份 蔗糖 82价 甘油 7. 0份
[0247] 聚乙二醇 10:00 3, 8 份 海藻酸钠 1. 3份 甘氨酸 4. 0份 无菌水 83份。
[0248] 2、按照如下方法制备：
[0249] (1)按配比称取盐酸溶菌酶、蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、甘氨酸备用；
[0250] (2)按配比称取盐酸溶菌酶和甘氨酸，分别加无菌水溶解，并分别用0.22μπι滤膜， 进口压力0.65MPa，过滤除菌后，将所得盐酸溶菌酶料液、甘氨酸料液合并，输送至已灭菌的 罐内，常温备用；
[0251] (3)按配比称取蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、无菌水各组分混合，用5% (W/W)盐酸调PH4~6,然后升温至126°C~131°C，并保持时间30~45min进行灭菌，输送至已 灭菌的罐内存放，在50~55°C保温备用；
[0252] (4)在无菌条件下，将步骤(2)、（3)所得的物料混合，搅拌均匀；
[0253] (5)将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在温度控制在40~45°C条件下，在搅拌 下用5%(W/W)盐酸调混合物的pH5~6之间，然后开启剪切机低速1000~1100r/min，剪切5 ~7min;然后高速2000~2100r/min剪切3~5分钟，关闭剪切机;开启搅拌转速为30~45r/ min，继续搅拌3~4min，然后再在搅拌转速为20~25r/min继续搅拌，降温至30~35°C时停 止搅拌，即得。
[0254] 将上述产品进行无菌包装，检验，入库。
[0255] 实施例3、复方盐酸蔗糖溶菌酶软膏制剂及制备
[°256] 1、原辅材料投料量配比(w/w): 盐酸溶菌酶 5. 0份 蔗糖 85份 甘油 9. 0份
[0257] 聚乙二醇 1000 5, 5 份 海藻酸钠 L 6份 甘氨酸 5. 0份 .无菌水 85份。
[0258] 2、按照如下方法制备：
[0259] (1)按配比称取盐酸溶菌酶、蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、甘氨酸备用；
[0260] (2)按配比称取盐酸溶菌酶和甘氨酸，分别加无菌水溶解，并分别用0.22μπι滤膜， 进口压力0.65MPa，过滤除菌后，将所得盐酸溶菌酶料液、甘氨酸料液合并，输送至已灭菌的 罐内，常温备用；
[0261] (3)按配比称取蔗糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钠、无菌水各组分混合，用5% (W/W)盐酸调PH4~6,然后升温至126°C~131°C，并保持时间30~35min进行灭菌，输送至已 灭菌的罐内存放，在50~55°C保温备用；
[0262] (4)在无菌条件下，将步骤(2)、（3)所得的物料混合，搅拌均匀；
[0263] (5)将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在温度控制在45~50°C条件下，在搅拌 下用5%(W/W)盐酸调混合物的pH4~6之间，然后开启剪切机低速1000~1300r/min，剪切5 ~8min;然后高速2000~2300r/min剪切3~5分钟，关闭剪切机;开启搅拌转速为30~45r/ min，继续搅拌3~4min，然后再在搅拌转速为20~25r/min继续搅拌，降温至30~35°C时停 止搅拌，即得。
[0264] 将上述产品进行无菌包装，检验，入库。
【主权项】
1. 一种复方盐酸溶菌酶软膏，其特征在于，包括活性成份和辅料，所述的活性成份是盐 酸溶菌酶和薦糖；其中盐酸溶菌酶在复方盐酸溶菌酶软膏中的重量百分比为1.4%~ 3.3% ;薦糖在复方盐酸溶菌酶软膏中的重量百分比为40%~50%。2. 如权利要求1所述的复方盐酸溶菌酶软膏，所述的辅料为制备复方盐酸溶菌酶软膏 所需的可接受的任何辅料。3. 如权利要求1或2所述的复方盐酸溶菌酶软膏，其特征在于，由W下原料按质量份制 成： 盐酸溶菌酶 3.日~6. 0份 藤糖 80~90份 甘油 0~10份 聚乙二醇1000 0~6. 0份 海藻酸钢 1.0~1.8份 甘氨酸 3.0~6.0份 无菌水 80~90份。4. 如权利要求3所述的复方盐酸溶菌酶软膏，其特征在于，由W下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 3. 0~5. 0份 礁糖 80~85化 甘油 5, 0~9. 0份 聚乙二醇1000 2.0~5. 5份 海藻酸钢 1.0~1.6份 甘氨酸 3.0~5.0份 无菌水 锁~概份。...5. 如权利要求4所述的复方盐酸溶菌酶软膏，其特征在于，由W下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 3. 0份 薦糖 80份 甘油 5. 0粉 聚己二醇1猫:Q 2.0份 海藻酸钢 1. 0份 甘氨酸 3. 0份 无菌水 80份； 或者， 盐酸溶簡釀 4. 0份 藤糖 82份 甘油 7. 0份 聚乙二醇说朋 3. 8份 海藻酸钢 1. 3汾 甘氨酸 4. 0份 无菌水 83汾; 或者， 盐酸溶菌酶 日.0份 薦糖 如份 甘油 9. 0份 聚乙二醇1000 5. 5份 海藻酸钢 1.6份 甘氨酸 日.0份 无蘭水 85份。6. 如权利要求3-5任一项所述的复方盐酸溶菌酶软膏的制备方法，其特征在于，包括如 下步骤： (1) 按配比称取盐酸溶菌酶、薦糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钢、甘氨酸备用； (2) 按配比称取盐酸溶菌酶和甘氨酸，分别加无菌水溶解，并分别用0.1~0.22WI1滤膜， 进口压力0.65MPa，过滤除菌后，将所得盐酸溶菌酶料液、甘氨酸料液合并，输送至已灭菌的 罐内，常溫备用； (3) 按配比称取薦糖、甘油、聚乙二醇1000、海藻酸钢、无菌水各组分混合，用2%~5% (W/W)盐酸调pH4~6,然后升溫至126°C~13rC，并保持时间30~60min进行灭菌，输送至已 灭菌的罐内存放，在50~55°C保溫备用； (4) 在无菌条件下，将步骤(2)、（3)所得的物料混合，揽拌均匀； (5) 将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在溫度控制在40~5(TC条件下，在揽拌下用 5%(W/W)盐酸调混合物的pH4~6之间，然后开启剪切机低速1000~1500r/min，剪切5~ lOmin;然后高速2000~2500r/min剪切3~6分钟，关闭剪切机;开启揽拌转速为30~50r/ min,继续揽拌3~4min，然后再在揽拌转速为20~25r/min继续揽拌，降溫至30~35°C时停 止揽拌，即得。7. 如权利要求6所述的复方盐酸溶菌酶软膏的制备方法，其特征在于，步骤(5)的方法 如下： (5)将步骤(4)所得混和物抽入剪切罐中，在溫度控制在40~5(TC条件下，在揽拌下用 5%(W/W)盐酸调混合物的pH4~5之间，然后开启剪切机低速1000~1200r/min，剪切5~ lOmin;然后高速2000~2200r/min剪切3~4分钟，关闭剪切机;开启揽拌转速为30~40r/ min,继续揽拌3~4min，然后再在揽拌转速为20~25r/min继续揽拌，降溫至30~35°C时停 止揽拌，即得。8. 如权利要求1-5任一项所述的复方盐酸溶菌酶软膏在制备治疗皮肤溃瘍的药物中的 应用。9. 如权利要求8所述的复方盐酸溶菌酶软膏的应用，其特征在于，所述的皮肤溃瘍指缺 损性慢性皮肤溃瘍或糖尿病皮肤溃瘍。
【文档编号】A61P17/02GK105963689SQ201610309445
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】乔敏, 袁武杰
【申请人】山东司邦得制药有限公司