一种中药组合物在制备抗抑郁药物中的应用
【专利摘要】本发明公开了一种中药组合物在制备抗抑郁药物中的应用，所述中药组合物的主要活性成分的原料的重量份为：乌鳢3～16份、黄芪2～7份、大枣2～7份、生姜0.5～3份和甘草0.5～3份。该中药组合物为复方乌鳢口服液。
【专利说明】
一种中药组合物在制备抗抑郁药物中的应用
技术领域
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种中药组合物在制备抗抑郁药物中的应 用。
【背景技术】
[0002] 产后抑郁症(pro)是发生于产褥期的一种抑郁症。我国pro的发病率为1〇%-2〇%， 不仅危害产妇的健康，影响婴儿的发育，也给家庭与社会带来沉重的负担。对于pro的治疗， 西医存在药物治疗副作用大、价格昂贵等诸多缺点，因此挖掘副作用小，安全性高的中药制 剂具有重要的研究意义和价值。
[0003] PPD不同于典型的抑郁症，临床上主要表现为焦虑、激动、易激惹、失眠和意识错 乱，而抑郁的典型症状主要在疾病的后期出现。目前西医对pro的治疗主要包括药物治疗和 心理治疗，心理疗法主要是配合pro药物发挥抗抑郁的作用，但该治疗方案和流程需要进行 即时选择和调整，且存在可控性较差和一致性不均的缺点，临床治疗方法难以控制，缺乏可 比性，无法评判临床疗效。
[0004] 复方乌鳢口服液(其配方和制备方法已获得国家专利，专利号200910042795.1)是 湖南明瑞制药有限公司生产的用于促进创伤、外科手术、妇人分娩后的伤口愈合及伤后头 面虚肿、心悸气短、神疲自汗等症中药复方制剂。
【发明内容】
[0005] 本发明中所述的中药组合物的主要活性成分的原料的重量份为:乌鳢3~16份、黄 芪2~7份、大枣2~7份、生姜0.5~3份和甘草0.5~3份。优选地，其主要活性成分的原料的 重量份为:乌鳢8~13份、黄芪3~5份、大枣3~5份。更优选地，其主要活性成分的原料的重 量份为:乌鳢1 〇份、黄芪4份、大枣4份、生姜1份和甘草1份。所述中药组合物是由中药组合物 活性组分与药学中的辅料制备成的口服剂型和经皮给药剂型。优选地，所述中药组合物是 口服液。本发明所述中药组合物的配方及制备方法与专利号为200910042795.1的专利中所 述生肌活血的中药组合物的配方及制备方法相同，即，本发明所述中药组合物的配方与复 方乌鳢口服液相同，也就是说，本发明通过研究表明复方乌鳢口服液可用于制备抗抑郁药 物。
[0006] 下面对本发明作进一步说明：
[0007] 本发明发明人将60只SPF级受孕SD大鼠（体质量250-280g)随机分为空白对照组、 模型对照组、盐酸帕罗西汀组、复方乌鳢口服液低、中、高剂量组。观察母鼠对幼崽的关爱行 为，及应用旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验研究复方乌鳢口服液抗抑郁作用。结果表明， 与空白对照组比较，模型组大鼠对幼崽关爱行为减少，悬尾实验及强迫游泳实验大鼠绝望 不动时间延长，旷场实验大鼠活动性减少(P〈〇.05);与模型组大鼠比较，复方乌鳢口服液组 和氟西汀组大鼠对幼崽关爱行为增多，悬尾实验及强迫游泳实验大鼠绝望不动持续时间减 少，旷场实验大鼠活动性及兴趣性增加(p〈〇. 〇5)。因此，复方乌鳢口服液能够改善pro模型 大鼠的行为学指标，具有抗抑郁作用。
【具体实施方式】
[0008] 1材料与方法
[0009] 1.1药物:复方乌鳢口服液，规格：10ml/支，含量1.062g生药/ml，批号：160109。由 湖南明瑞制药有限公司提供。盐酸帕罗西汀片，规格:20mg/片，由浙江尖峰药业有限公司提 供，批号：150101。地塞米松磷酸钠注射液，规格：lml: 5mg，济南利民制药有限责任公司，批 号：15120602-1。
[0010] 1.2动物:受孕SD大鼠，60只，180-240g，SPF级，由湖南斯莱克景达实验动物有限公 司提供，动物生产许可证号：SCXK(湘）2013-0004。使用单位为湖南斯莱克景达实验动物有 限公司，使用许可证号为S Y X K (湘）2 0 1 4 - 0 0 1 2。实验动物质量合格证号为 No. 43004700015835。实验动物设施使用证明编号为No. 00074325。
[0011] 1.3方法:将受孕大鼠60只，随机分为6组，对照组，模型组，盐酸帕罗西汀组，复方 乌鳢口服液低、中、高剂量组，独笼饲养，除空白对照组自然饲养外，其余各组大鼠自受孕第 1天起，皮下注射注射用水lml/kg;至受孕成功第15天开始，皮下注射地塞米松磷酸钠 〇.2mg/kg，直到产崽；产崽后继续给药:模型组(蒸馏水），盐酸帕罗西汀组(3.6mg/kg)，复方 乌鳢口服液低、中、高剂量组（1.8、3.6、7.2ml/kg)，连续给药15天，产后4天观察母爱行为 (噙崽潜伏期、集窝时间、舔崽时间、噙崽频率）。产后10天进行旷场实验(活动性及兴趣性）。 产后12天进行悬尾实验(绝望不动持续时间）。产后15天进行强迫游泳实验（自救持续时间、 绝望不动持续时间）。
[0012] 1.4检测指标[3-4]:
[0013] 1)关爱行为:于分娩后的第4天，母鼠给药lh后，将幼鼠分散于鼠笼四角，母鼠置于 鼠笼中央，在鼠笼正上方l〇〇cm处悬挂摄像机进行记录，记录时间为30min，每只母鼠关爱幼 崽行为。噙崽潜伏期，母鼠噙起第1只幼鼠的时间；集窝时间，母鼠将所有幼鼠集中的时间； 舔崽时间，母鼠用舌头舔或头部在幼鼠头背和肛门生殖器周围持续3s以上的总时间；噙崽 频率，母鼠噙起幼鼠的总次数。
[0014] 2)旷场实验：于分娩后的第10天，母鼠给药lh后，用自制OPEN-FIELD敞箱(80cmX 80cmX4〇Cm)。四周箱壁为黑色，底面用黑线均匀划分为相等面积的25块方格。以动物穿越 方格数作为水平活动的得分（以动物四爪均进入方格为准），以直立次数为垂直活动得分 (两前肢离地为准）。每只动物仅测定一次，每次3min。每次测试前保持敞箱内干净。旷场试 验水平运动的得分反映了大鼠的活动性，垂直活动的得分则反映大鼠的兴趣性。
[0015] 3)悬尾实验:于分娩后的第12天，末次给药1小时后，距大鼠尾尖部约lcm处用胶布 贴于悬尾箱(40cm X 50cm X 30cm)支架上，使大鼠成倒挂状态，其头部离箱底约10cm，一次悬 挂1只小鼠。悬挂时间为6min，计录大鼠4min内悬尾累积不动时间（不动状态即为大鼠停止 挣扎不动或无任何活动）。
[00?6] 4)强迫游泳实验：于分娩后的第15天，末次给药1小时后，在约60cm高的水桶内放 人约30cm高度的37 °C温水，距离桶上方100cm处悬挂摄像机进行记录。计录大鼠自救持续时 间，大鼠往桶缘上爬和用前爪在水中做大幅度水平运动的时间总和;大鼠持续游泳力竭后 继续观察6分钟，记录游泳不动时间，即大鼠只在水中做少量轻微摆动保持头部不下沉的时 间。
[0017] 1.5统计学方法:实验数据以X±S表示，用SPSS17.0软件进行单因素方差分析，P〈 〇. 05具有统计学意义，P〈〇. 01具有高度统计学意义。
[0018] 2 结果
[0019] 2.1关爱幼崽行为：与空白对照组比较，模型组母鼠噙崽潜伏期明显增加 （P = 0.019，P〈0.05)，模型组母鼠集窝时间显著增加 (P = 0.003，P〈0.01)，模型组母鼠舔崽时间 明显减少(P = 〇. 026，P〈0.05)，模型组母鼠噙崽频率显著降低(P = 0.007，P〈0.01);与模型 组比较，复方乌鳢口服液低剂量组噙崽潜伏期具有降低趋势，但无统计学意义(P = 〇. 528，P >0.05)，与模型组比较，复方乌鳢口服液中、高剂量组及盐酸帕罗西汀组噙崽潜伏期明显降 低(P值分别为〇.〇36,0.027,0.026，P〈0.05)，复方乌鳢口服液低剂量组母鼠集窝时间具有 减少趋势，但无统计学意义(P = 〇. 263，P>0.05)，复方乌鳢口服液中剂量组母鼠集窝时间具 有减少趋势，但无统计学意义(P = 〇.065，P>0.05)，复方乌鳢口服液高剂量组母鼠集窝时间 明显减少（P = 〇 . 040，P〈0.05)，盐酸帕罗西汀组母鼠集窝时间明显减少（P = 0.040，P〈 0.05)，复方乌鳢口服液低、中、高剂量组及盐酸帕罗西汀组母鼠舔崽时间具有增加趋势，但 无统计学意义(P值分别为0.513,0.493,0.189,0.187，P>0.05)，复方乌鳢口服液低剂量组 母鼠噙崽频率具有增加趋势，但无统计学意义(P = 0.260，P>0.05)，复方乌鳢口服液中、高 剂量组及盐酸帕罗西汀组母鼠噙崽频率均明显增加（P分别为0.030，0.022，0.025，P〈 0.05)。见表 1。
[0020] 表1复方乌鳢口服液组对母鼠关爱幼崽行为的比较
[0021] (J±5Sn = 10)
[0022]
[0023] 注:与空白对照组比较，*P〈0.05，，〈0.01;与模型组比较，#P〈0.05，##P〈0.01。
[0024] 2.2旷场实验：与空白对照组比较，模型组母鼠水平运动（活动性）显著减少(P = 0.005，P〈0.01 )，与模型组比较，复方乌鳢口服液低、中剂量组母鼠水平运动具有增加趋势， 但无统计学意义(P值分别为0.061，0.053，P>0.05 )，盐酸帕罗西汀组和复方乌鳢口服液高 剂量组母鼠的活动性明显增加(P值分别为0.039，0.037，P〈0.05);与空白对照组比较，模型 组母鼠垂直运动(兴趣性)具有降低趋势，但无统计学意义(P = 0.099，P>0.05);与模型组比 较，复方乌鳢口服液低、中、高剂量组及盐酸帕罗西汀组母鼠兴趣性具有增加趋势，但无统 计学意义(P值分别为0 · 727，0 · 535，0 · 332，0 · 190，P>0 · 05)，见表2。
[0025] 表2复方乌鳢口服液组对母鼠旷场实验中的行为比较
[0026] (^ + ^^ = 10)
[0027]
[0029] 注:与空白对照组比较，*P〈0.05，，〈0.01;与模型组比较，#P〈0.05， ##P〈0.01。
[0030] 2.3悬尾实验:与空白对照组比较，模型组母鼠不动状态的持续时间明显增加 (P = 0.042，P〈0.05);与模型组比较，复方乌鳢口服液低、中剂量组母鼠不动状态的持续时间具 有减少趋势，但无统计学意义(P值分别为〇. 252，0.242，P>0.05)，盐酸帕罗西汀组和复方乌 鳢口服液高剂量组不动状态的持续时间明显缩短(P值分别为〇. 042，0.031，P〈0.05)，见表 3〇
[0031] 表3复方乌鳢口服液组对母鼠悬尾不动时间的影响
[0032] (Χ±5·，η = 10)
[0033]
[0034] 注:与空白对照组比较，*Ρ〈0 · 05，**Ρ〈0 · 01;与模型组比较，#Ρ〈0 · 05，##Ρ〈0 · 01。
[0035] 2.4强迫游泳实验：与空白对照组比较，模型组母鼠自救持续时间明显减少（Ρ = 0.014，？〈0.05)，而绝望不动持续时间明显增加(？ = 0.012，？〈0.05)。与模型组比较，复方乌 鳢口服液低剂量组母鼠自救持续时间具有增加趋势，而绝望不动持续时间具有减少趋势， 但无统计学意义(P值分别为0.137，0.204，P〈0.05);复方乌鳢口服液中剂量组母鼠自救持 续时间明显增加(？ = 〇.〇37，？〈0.05)，而绝望不动持续时间明显减少(？ = 0.032，？〈0.05); 复方乌鳢口服液高剂量组母鼠自救持续时间具有明显增加 (P = 0.048，P〈0.05)，而绝望不 动持续时间具有减少趋势，但无统计学意义(P = 〇. 078，P>0.05);盐酸帕罗西汀组自救持续 时间明显增加 (P = 〇. 〇 19，P〈0.05)，而绝望不动持续时间明显减少(P = 0.017，P〈0.05)，见 表4。
[0036] 表4复方乌鳢口服液组对母鼠强迫游泳实验的行为比较
[0037] (夏土S，n = 10)
[0038]
[0039] 注:与空白对照组比较，*P〈0.05，，〈0.01;与模型组比较，#P〈0.05，##P〈0.01。
[0040] 2.5 5-HT含量检测：与空白对照组比较，模型组母鼠5-HT浓度明显降低(P〈0.05)。 与模型组比较，复方乌鳢口服液低、中剂量组母鼠5-HT浓度具有增加趋势，但无统计学意义 (P>0.05);复方乌鳢口服液高剂量组母鼠5-HT浓度明显增加(P〈0.05);盐酸帕罗西汀组5-HT浓度明显增加(P〈0.05)，见表5。
[0041 ] 表5复方乌鳢口服液对母鼠血清5-HT含量的影响 [0042] (X土SD，n = 10)
[0043]
[0045] 与空白对照组比较，_表示P〈0.05, 表示P〈0.01;与模型组比较，"#"表示P〈 0.05, "表示Ρ〈0·01。
[0046] 本实验主要是借助低剂量的地塞米松，对孕晚期母鼠进行短期（7d)注射，进而成 功模拟Pro动物模型。目前抑郁症动物模型建立成功与否，主要依靠旷场实验，悬尾实验和 强迫游泳实验等评价指标进行评估，同时选择母鼠关爱幼崽行为和消极行为与积极行为作 为进一步评估pro动物模型抑郁行为的标准。实验过程中发现，抑郁模型的母鼠关爱幼崽行 为减弱，在行为上主要表现为:噙崽潜伏期延长，集窝速度表现缓慢，噙崽频率减少，舔崽持 续时间缩短，并且呈现自身积极行为减少，消极行为增多，抑郁模型母鼠活动性及兴趣性降 低，悬尾实验及强迫游泳实验中绝望不动持续时间延长的抑郁症表现，母鼠的上述诸多表 现说明，此次pro模型复制是成功的。而给予复方乌鳢口服液后，母鼠关爱幼崽行为增强，旷 场实验中大鼠活动增加，并呈剂量依赖。悬尾实验及强迫游泳实验中绝望不动持续时间缩 短，提示复方乌鳢口服液具有一定的抗抑郁作用。另外，现代研究发现，抑郁的产生是由于 单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)功能降低，目前大部分治疗抑郁症的药物都以5-羟色胺HT 作为的靶点，主要通过增加单胺类递质的浓度、增强单胺类神经的功能而起到抗抑郁的疗 效。本实验中，复方乌體口服液能够使产后抑郁症(postpartum depression，PPD)母鼠抑郁 行为减轻，同时能够使母鼠血清5-HT含量增强提高，进一步提示复方乌鳢口服液具有抗抑 郁作用。
【主权项】
1. 一种中药组合物在制备抗抑郁药物中的应用，所述中药组合物的主要活性成分的原 料的重量份为:乌鳢3~16份、黄芪2~7份、大枣2~7份、生姜0.5~3份和甘草0.5~3份。2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物的主要活性成分的原料的重 量份为:乌鳢8~13份、黄芪3~5份、大枣3~5份。3. 如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述中药组合物的主要活性成分的原料的重 量份为:乌鳢10份、黄芪4份、大枣4份、生姜1份和甘草1份。4. 如权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述中药组合物是由中药组合物 活性组分与药学中的辅料制备成的口服剂型和经皮给药剂型。5. 如权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述中药组合物是口服液。
【文档编号】A61P25/24GK106039276SQ201610640280
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年8月8日 公开号201610640280.1, CN 106039276 A, CN 106039276A, CN 201610640280, CN-A-106039276, CN106039276 A, CN106039276A, CN201610640280, CN201610640280.1
【发明人】蔡辉
【申请人】湖南明瑞制药有限公司