本发明涉及一种菌剂及其制备方法。具体的说,涉及一种改良土壤酸化的微生物菌剂及其制备方法,属于农业技术领域。
背景技术:
引起土壤酸化的原因较多,包括土壤母质、自然环境、盲目施肥以及经验性施肥过量等;土壤酸化严重影响植物的根系发育以及养分吸收,导致植物主根根尖变黄、不发育,以及根基部腐烂,给农业生产带来严重的危害。
目前,改善土壤酸化的方法主要有:施用石灰,一调酸二补钙,调节酸碱,可以增加养分的有效性;或者熏制火粪,通过有机肥调整;但上述方法都是在土地没有农作物的条件下,对大田进行整体、调理;如果有作物生长的农田,上述方法无法使用,容易导致烧苗等问题。
在实际生产中,农民一般在植物生长过程中植株不长或者生长缓慢、烂根等发生后才发现土壤酸化,此时,人们多选用微生物肥料来调节,通过微生物改善土壤微环境,进一步缓解土壤酸化的问题,微生物代谢过程中产生的代谢产物以及中间产物还有助于提高植物的抗逆性,促进植物的生长;但普通微生物肥料只能缓解土壤酸化后,尽量保全未发病的植株,对于已经发生烂根、主根变黄不发育等症状的植株没有治疗效果。
因此,发明人针对上述问题,对改善土壤酸化方面的微生物菌剂进行了的多年实验和研究。
目前的改善土壤酸化的微生物菌剂存在的缺陷:1、改善土壤酸化效果不理想; 2、虽然土壤得到一定改善,但土壤酸化导致的植物主根不发育以及根基部腐烂的病症并不能得到改善。
技术实现要素:
针对以上问题,本发明提供一种改良土壤酸化的微生物菌剂及其制备方法,实现以下发明目的:
1、明显改善土壤酸化导致的植物主根不发育,主根恢复正常生长;
2、有效改善土壤酸化导致的植物根基部腐烂;
3、有效改良酸化土壤。
为解决以上问题,本发明采用以下技术方案:
一种改良土壤酸化的微生物菌剂,所述的微生物菌剂包括以下组分:乙酸钠、酵母浸膏、藻蓝蛋白、艾叶、葡萄糖、硫酸铵、紫云英、异嗪皮啶、磷酸氢钙、白云石粉、花椒粉、酸鱼乳杆菌菌粉、粘土壤杆菌菌粉、德尔布有孢圆酵母菌菌粉。
以下是对上述技术方案的进一步改进:
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠10~14份、酵母浸膏1~5份、藻蓝蛋白15~17份、艾叶5~6份、葡萄糖10~12份 、硫酸铵1~3份、紫云英 7~10份、异嗪皮啶0.5~0.8份、磷酸氢钙0. 1~0.6份、白云石粉0.8~1.2份、花椒粉2~3份、酸鱼乳杆菌菌粉18~21份、粘土壤杆菌菌粉4~6份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉6~7份。
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠12份、酵母浸膏4~5份、藻蓝蛋白16份、艾叶6份、葡萄糖11~12份 、硫酸铵2~2.5份、紫云英 9份、异嗪皮啶0.7份、磷酸氢钙0.5~0.6份、白云石粉0.9~1.2份、花椒粉2~2.8份、酸鱼乳杆菌菌粉19~20份、粘土壤杆菌菌粉5~6份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉6~6.5份。
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃。
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
一种改良土壤酸化的微生物菌剂的制备方法,所述的制备方法包括汽蒸步骤,所述的汽蒸:蒸汽温度为118-120℃,控制压强为1.2atm,汽蒸时间为1小时;汽蒸后,以1-4℃/min的降温速率冷却至25℃。
所述的制备方法还包括超声破壁步骤,所述的超声破壁:
将艾叶、紫云英、花椒粉进行混合,加入水,料液比为1:20。
所述的超声破壁:超声波功率为90-95w,破壁时间为20-22min。
所述的制备方法还包括菌粉制备,所述菌粉制备包括:
酸鱼乳杆菌菌种发酵:
采用的发酵培养基为肉汤培养基,控制培养基pH为6-6.5,控制32-34℃,接种菌种量为5%,发酵28-30小时;
粘土壤杆菌菌种发酵:
采用的发酵培养基为MRS培养基,控制培养基pH为7-7.2,控制35-36℃,接种菌种量为5%,发酵24-25小时;
德尔布有孢圆酵母菌菌种发酵:
采用的发酵培养基为:马铃薯200g、葡萄糖50g、黄豆汁50g、硫酸镁30g、水1000ml,控制培养基pH为7-7.1,控制30-32℃,接种菌种量为5%,发酵20-22小时。
所述的制备方法还包括菌种稳定处理,所述的菌种稳定处理:
将菌粉分别放入恒温箱,20-21℃保持45-50min后,以0.5-1℃/min的升温速率升温至30℃,恒温60-65min,然后以0.5-1℃/min的降温速率降温至25℃,恒温120-130min。
本发明采用以上技术方案,与现有技术相比,具有以下有益效果:
1、采用本发明微生物菌剂,因土壤酸化引起的植物主根不发育症状明显得到改善,使用后主根恢复正常生长,主根不发育的治愈率达到96.72-98.23%;
2、采用本发明微生物菌剂,因土壤酸化引起的植物根基部腐烂症状明显得到改善,治愈率达80.36-96.43%;
3、本发明微生物菌剂明显改善土壤酸化,pH由5.2调整到6.5-7.2,效果显著。
具体实施方式
本发明所述粘土壤杆菌(Agrobacterium viscosum)保藏号为CICC10215;
所述酸鱼乳杆菌(Lactobacillus acidipiscis)保藏号为CICC10851;
所述德尔布有孢圆酵母菌(Torulaspora delbrueckii)保藏号为CICC 1004;
上述菌种均来自于市售。
实施例1 一种改良土壤酸化的微生物菌剂
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠10份、酵母浸膏2份、藻蓝蛋白15份、艾叶5.2份、葡萄糖11份 、硫酸铵1份、紫云英 7份、异嗪皮啶0.5份、磷酸氢钙0. 2份、白云石粉0.8份、花椒粉2份、酸鱼乳杆菌菌粉18份、粘土壤杆菌菌粉5份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉6份;
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的艾叶:为艾叶鲜草烘干至水分含量7%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的紫云英:为紫云英鲜草晒干后,烘干至水分含量9%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃;
所述的花椒粉:细度为800目;
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
实施例2 一种改良土壤酸化的微生物菌剂
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠12份、酵母浸膏1份、藻蓝蛋白16份、艾叶5份、葡萄糖10份 、硫酸铵1.5份、紫云英 8份、异嗪皮啶0.7份、磷酸氢钙0. 1份、白云石粉1份、花椒粉2.5份、酸鱼乳杆菌菌粉20份、粘土壤杆菌菌粉4份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉7份;
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的艾叶:为艾叶鲜草烘干至水分含量7%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的紫云英:为紫云英鲜草晒干后,烘干至水分含量9%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃;
所述的花椒粉:细度为800目;
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
实施例3 一种改良土壤酸化的微生物菌剂
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠14份、酵母浸膏3份、藻蓝蛋白17份、艾叶5.5份、葡萄糖11份 、硫酸铵3份、紫云英 10份、异嗪皮啶0.8份、磷酸氢钙0. 4份、白云石粉1.2份、花椒粉3份、酸鱼乳杆菌菌粉21份、粘土壤杆菌菌粉5份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉6.5份;
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的艾叶:为艾叶鲜草烘干至水分含量7%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的紫云英:为紫云英鲜草晒干后,烘干至水分含量9%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃;
所述的花椒粉:细度为800目;
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
实施例4 一种改良土壤酸化的微生物菌剂
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠12份、酵母浸膏5份、藻蓝蛋白16份、艾叶6份、葡萄糖12份 、硫酸铵2份、紫云英 9份、异嗪皮啶0.7份、磷酸氢钙0.6份、白云石粉0.9份、花椒粉2.8份、酸鱼乳杆菌菌粉20份、粘土壤杆菌菌粉6份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉6份;
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的艾叶:为艾叶鲜草烘干至水分含量7%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的紫云英:为紫云英鲜草晒干后,烘干至水分含量9%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃;
所述的花椒粉:细度为800目;
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
实施例5 一种改良土壤酸化的微生物菌剂
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠12份、酵母浸膏4份、藻蓝蛋白16份、艾叶6份、葡萄糖11份 、硫酸铵2.5份、紫云英 9份、异嗪皮啶0.7份、磷酸氢钙0. 5份、白云石粉1.2份、花椒粉2份、酸鱼乳杆菌菌粉19份、粘土壤杆菌菌粉5份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉6.5份;
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的艾叶:为艾叶鲜草烘干至水分含量7%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的紫云英:为紫云英鲜草晒干后,烘干至水分含量9%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃;
所述的花椒粉:细度为800目;
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
实施例6 一种改良土壤酸化的微生物菌剂
所述的微生物菌剂包括以下重量份的组分:
乙酸钠10份、酵母浸膏1份、藻蓝蛋白17份、艾叶5份、葡萄糖10份 、硫酸铵3份、紫云英 7份、异嗪皮啶0.5份、磷酸氢钙0. 1份、白云石粉1.2份、花椒粉3份、酸鱼乳杆菌菌粉18份、粘土壤杆菌菌粉6份、德尔布有孢圆酵母菌菌粉7份;
所述的乙酸钠:有效成分含量为60%,密度为1.14g/m3;
所述的酵母浸膏:含氮(干基)%≥10%,氨基氮(干基)%≥4.5%,pH为6.5,NaCl含量≤1%;
所述的艾叶:为艾叶鲜草烘干至水分含量7%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的紫云英:为紫云英鲜草晒干后,烘干至水分含量9%以下,粉碎至200目的细粉;
所述的异嗪皮啶:有效成分含量为98%,密度为1.358 g/m3,闪点为183.2℃;
所述的花椒粉:细度为800目;
所述的酸鱼乳杆菌菌粉:含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
所述的粘土壤杆菌菌粉:含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
所述的德尔布有孢圆酵母菌菌粉:含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
实施例7 一种改良土壤酸化的微生物菌剂的制备方法
1、菌粉制备
将酸鱼乳杆菌、粘土壤杆菌、德尔布有孢圆酵母菌菌种分别发酵并制备菌粉;
酸鱼乳杆菌菌种发酵:
采用的发酵培养基为肉汤培养基,控制培养基pH为6,控制32℃,接种菌种量为5%,发酵28小时;
将发酵液12000rpm离心10min,分离收集菌体,将菌体喷于土豆淀粉上,含水量为15%,得到酸鱼乳杆菌菌粉,含酸鱼乳杆菌活菌量为8×108CFU/ g;
粘土壤杆菌菌种发酵:
采用的发酵培养基为MRS培养基,控制培养基pH为7.2,控制36℃,接种菌种量为5%,发酵25小时;
将发酵液12000rpm离心12min,分离收集菌体,将菌体喷于红薯淀粉上,含水量为10%,得到粘土壤杆菌菌粉,含粘土壤杆菌活菌量为4×108CFU/ g;
德尔布有孢圆酵母菌菌种发酵:
采用的发酵培养基为:马铃薯200g、葡萄糖50g、黄豆汁50g、硫酸镁30g、水1000ml,控制培养基pH为7.1,控制32℃,接种菌种量为5%,发酵20小时;
将发酵液10000rpm离心10min,分离收集菌体,将菌体喷于土豆淀粉上,含水量为12%,得到德尔布有孢圆酵母菌菌粉,含德尔布有孢圆酵母菌活菌量为2×109CFU/ g。
2、菌种稳定处理
将步骤1制备的酸鱼乳杆菌、粘土壤杆菌、德尔布有孢圆酵母菌菌粉分别放入恒温箱,20℃保持50min后,以0.5-1℃/min的升温速率升温至30℃,恒温60min,然后以0.5-1℃/min的降温速率降温至25℃,恒温120min,备用;
在实际操作中发明人发明采用上述菌种稳定处理后,与不经过稳定处理相比,微生物菌剂性能更强,酸鱼乳杆菌、粘土壤杆菌、德尔布有孢圆酵母菌及其代谢产物对腐烂植株细胞的修复效果明显增强,植株根基腐烂的治愈率提高22-26%。
3、原料准备
按照改良土壤酸化的微生物菌剂的配方称取原料乙酸钠、酵母浸膏、藻蓝蛋白、艾叶、葡萄糖 、硫酸铵、紫云英、异嗪皮啶、磷酸氢钙、白云石粉、花椒粉、酸鱼乳杆菌菌粉、粘土壤杆菌菌粉、德尔布有孢圆酵母菌菌粉备用。
4、超声破壁
将艾叶、紫云英、花椒粉进行混合,1000rpm搅拌20min;加入水,料液比为1:20;混合粉末置于超声波破碎仪中进行破壁,超声波功率为90w,破壁时间为20min;破壁后,将溶液浓缩烘干至粉末状,含水量低于8%。
5、混料
将上述步骤制得的混合粉末导入混料罐内;加入乙酸钠、异嗪皮啶、磷酸氢钙、白云石粉,开启搅拌1800rpm,20min;将搅拌速率降至600rpm,边搅拌,边向混料罐中依次加入葡萄糖、硫酸铵、乙酸钠、酵母浸膏、藻蓝蛋白;搅拌30min放料,得到混合料。
6、汽蒸
将上述混合料放入汽蒸装置中,控制通入蒸汽温度为120℃,控制压强为1.2atm(标准大气压),汽蒸时间为1小时;汽蒸后,以2-4℃/min的冷却速率冷却至25℃,不宜冷却过快,以免破坏分子结构;25℃恒温静置,备用;
在实际操作中发明人发明采用上述汽蒸步骤后,与不经过汽蒸相比,微生物菌剂在土壤中的下渗效果明显增强,使药物成分更多的到达植株根尖部位,植株主根不发育的治愈率提高30-35%。
7、混入菌体
将上述步骤的混合料与酸鱼乳杆菌菌粉、粘土壤杆菌菌粉、德尔布有孢圆酵母菌菌粉混合,80rpm搅拌30-35min,混合均匀,不宜搅拌过快,以免影响细菌活性。
在实际生产应用中,发明人发现:在种植西瓜的田块中,西瓜生长瓜蔓初期,测得pH为5.2,普遍存在土壤酸化导致的西瓜主根不长或生长缓慢,并有根基部腐烂症状;将西瓜种植区分为等面积的7个区域,每个区域100株;1-6区分别对应施用实施例1-6的微生物菌剂,将菌剂溶于水灌根施用,施用量为每棵植物2g菌剂,每5天施用一次,共施用4次, 7区为对照组施用等量水;25天后,测定具体效果见表1;
表1采用实施例1-6的微生物菌剂的效果
由表1可见,实施例4、5为优选实施例,本发明微生物菌剂明显改善土壤酸化,pH由5.2调整到6.5-7.2,效果显著,且改良土壤酸化的同时,因土壤酸化引起的植物主根不发育、根基部腐烂等症状明显得到改善,主根长度明显恢复正常生长,从10cm增长至16.5-22.5cm,主根不发育的治愈率达到96.72-98.23%;根基部腐烂的植株数量从56株降低至2-11株,即治愈率达80.36-96.43%。
实施例8 汽蒸温度和冷却速率对微生物菌剂储存时间的影响
在制备微生物菌剂的实际操作过程中,发明人发现汽蒸步骤中的汽蒸温度和冷却速率对微生物菌剂的耐热稳定性有较大影响,采用实施例4的配方按照实施例7的方法制备微生物菌剂,只改变汽蒸温度和冷却速率,采用表2所示的汽蒸条件进行实施例8-11;
表2实施例8-11的汽蒸条件
实施例8-11的微生物菌剂在42℃条件下维持菌剂性状不变的存储时间见表3;
表3 实施例8-11的微生物菌剂的热存储时间
由表3可见,汽蒸步骤中的汽蒸温度优选为118℃,冷却速率优选为2℃/min。
发明人长期从事微生物菌剂的研发工作,特别是对改良土壤的相关微生物菌剂开发,有独特的见解,并取得了显著的效果,攻克了本领域的瓶颈问题。
除特殊说明的外,本发明中的百分数均为质量百分数,本发明中的比值均为质量比值。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。