K20)含量分别为8. 34、28. 37%、14. 48%、1. 34%、1. 94%和1. 23%。腐熟猪粪由江苏省阿 波罗生物科技有限公司提供，PH、含水量、总碳、总氮（N)、总磷（P205)、总钾（K20)含量分别 为 7. 32、26. 23%、19. 48%、1. 76%、2. 12%和 1. 87% ?
[0043] 2、功能菌菌剂的生产
[0044] 将促生菌SQR9或者其他果蔬促生菌NJN-6、021接种到PDA培养液中，进行液体发 酵生产，发酵生产的条件为：pH生长范围自然，培养温度范围30~35°C，搅拌速度为180~ 200rpm，发酵中后期形成芽孢，使发酵液中含菌或芽孢量彡1X109CFUmL'所用PDA培养 液配制方法为，以配制1L培养基为例：用200g土豆削皮后切成小块放到水里煮，沸腾后 煮30min，经过滤后滤液中加20g普通蔗糖，定容至1000ml，pH值调至7. 0-7. 6,121 °C灭菌 20min〇
[0045] 3、固体发酵生成生物有机肥
[0046] 3. 1固体发酵配方的获得
[0047] 第一步，将不同比例酸解液加入腐熟鸡粪（0. 05、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4mLg_i分别代表 5%、10%、20%、30%、40%，不添加氨基酸为0(处理），然后直接接入0.051^8- 1(01)解淀 粉芽孢杆菌SQR9。每天统计功能菌SQR9的数量。结果如图1所示，功能菌数量在添加酸 解液之后不但没有增加，反而都有下降，分析主要原因在于堆肥pH过低。然后先将不同比 例酸解液接入腐熟鸡粪中（0.05、0.l、0.2、0.3、0.4mLg-1分别代表5%、10%、20%、30%、 40%，不添加酸解液为CK处理）进行自然堆置，每天测定堆肥的pH变化。结果如图2所 示，添加0.3mLg4以下酸解液的堆肥经过6天固态发酵后，pH均能上升至5以上，能够达 到功能菌SQR9的生长要求，而0.4mLg4添加量pH依然过低。待堆肥pH回升至5-6后，接 入0. 05mLg4解淀粉芽孢杆菌SQR9,每天测定功能菌SQR9的数量。结果如图3所示：不添 加酸解液的CK、添加0. 05mLg4、添加0.lmLg4及添加0. 4mLg的处理，功能菌数量均呈 下降趋势，只有添加〇.2mLg4和0.3mL 的处理功能菌数量上升，并且0.2mL 添加量 为最佳，达到1. 1X108CFUg'
[0048] 第二步，将不同比例酸解液加入腐熟猪粪（0. 15、0. 2、0. 25、0. 3mLg4分别代表 15%、20%、25%、30%处理，不添加氨基酸为0(处理），然后直接接入0.051^ 8-1(01)解淀 粉芽孢杆菌SQR9,每天统计功能菌SQR9的数量。结果如图4所示，功能菌数量也在添加酸 解液之后不但没有增加，反而都有下降，分析主要原因也在于堆肥pH过低。然后先将不同 比例酸解液接入腐熟猪粪中（〇. 15、0. 2、0. 25、0. 3mLg-1分别代表15%、20%、25%、30%处 理，不添加酸解液为CK处理）自然堆置，每天测定堆肥的pH变化。结果如图5所示，所有 添加氨基酸液的堆肥经过6天固态发酵后，pH均能上升至5以上，能够达到功能菌SQR9的 生长要求。待堆肥pH回升至5-6后，接入0.05mLg4解淀粉芽孢杆菌SQR9,每天测定功能 菌SQR9的数量。结果如图6所示：不添加酸解液的CK、添加0. 25mLg4和添加0. 3mL 的处理，功能菌数量均呈下降趋势，只有添加0. 15mLg4和0.2mL 的处理功能菌数量上 升，并且0.21^§_1添加量为最佳，达到1.3\10 !^"8_1。
[0049] 通过前两步试验的摸索，可知酸解液0. 2mLg4添加量在普遍有机肥能够pH自然 堆置回升至pH为5以上，并适合功能菌SQR9的发酵。
[0050] 第三步，将0. 2mLg-1酸解液添加入腐熟鸡粪中，经pH回升之后，接入功能菌 NJN-6和021，结果如图7所示：功能菌NJN-6和021数量也均能大于1X108CFUg'
[0051] 综上所述，可知将酸解液添加入腐熟有机肥经pH自然回升后适合各种功能微生 物的发酵，具有很大的推广意义，并且添加〇. 2mLg4酸解液为最适宜比例。
[0052] 3. 2固体大堆发酵生成成品有机肥
[0053] 根据上述配方和工艺，将酸解液以0. 2mLg4分别接入腐熟有机肥均匀混合，每天 翻堆一次，自然堆肥约3-5天至堆肥pH为5-6,分别接入0. 05mLg4促生菌SQR9,发酵3-4 天。每吨固体有机物料中加入促生菌液50L进行固体发酵，每天翻堆1次，使固体发酵温度 不超过50°C，发酵3-4天后结束；发酵结束后新型生物有机肥中促生菌数量大于1X108CFU g'超过腐熟有机肥越1个数量级。生物有机肥有机质质量比含量大于30 %，有含水量质量 比25-30%。研制成的低成本促生生物有机肥含有大于1X108CFUg4以上的促生菌SQR9、 全氮含量为1. 5-2. 5%，总氮磷钾养分为5-6%、有机质含量大于30%。以上结果表明所研 制配方和工艺完全能够最大化的发酵生产新型生物有机肥，且该生物有机肥完全能够符合 国家标准。
[0054] 4、温室促生试验
[0055] 4. 1生物有机肥在黄瓜和番茄上的不等养分盆栽试验
[0056] 共设黄瓜和番茄两个作物，每个作物一个对照七个处理，对照为不施肥处理（CK)， 处理分别为普通有机肥腐熟鸡粪处理（0F);腐熟鸡粪直接接入促生菌SQR9堆肥处理 (BI00);腐熟鸡粪添加0. 05mLg-1酸解液回升pH后接入促生菌SQR9堆肥处理（BI05);腐 熟鸡粪添加0.lmLg4酸解液回升pH后接入促生菌SQR9堆肥处理（BI010);腐熟鸡粪添加 0. 2mLg-1酸解液回升pH后接入促生菌SQR9堆肥处理（BI020);腐熟鸡粪添加0. 3mLg-1酸 解液回升pH后接入促生菌SQR9堆肥处理（BI030);腐熟鸡粪添加0. 4mLg4酸解液回升pH 后接入促生菌SQR9堆肥处理（BI040);每个处理9盆，每盆装2kg土，肥料的添加量为20g Kg'肥料与土充分混合均匀，常规管理。35天后测定黄瓜和番茄生长指数。结果如图8、 图9、表1、表2、表3、表4和表5。
[0057] 由表1所示可知：黄瓜和番茄促生试验中，BI020处理的株高都显著高于CK、0F、 BI00、BI05和BI010等处理；也高于BI030和BI040处理，但差异不显著。
[0058] 表1:不同处理对黄瓜和番茄株高的影响
[0059]
【主权项】
1. 一种利用酸解液与腐熟有机肥生产生物有机肥的方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 将果蔬促生菌接种到发酵培养液中，进行液体发酵生产，使发酵液中含菌或芽孢量 大于IXlO9CFUml/1得到果蔬促生菌发酵液； 2)将酸解液以0. 2-0. 4mL g4(干重）加入腐熟有机肥进行均匀混合，室温堆置3-5天， 每天翻堆1次，pH能够回升至5-6 ; 3)将步骤1)制备的果蔬促生菌发酵液以0.05mLP接入步骤2)制备的添加酸解液 并回升PH的堆肥中，每天翻堆1次，发酵3-4天后，促生菌含量可达到I X IO8CFU g4以上， 最后在温度不超过60°C的条件下将微生物有机肥的含水量蒸发至30%以下，即为成品生 物有机肥料； 其中，所述的酸解液为在80~90°C下利用硫酸对病死家畜瘦肉水解制得。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的果蔬促生菌选自黄瓜根际促生芽 孢杆菌SQR9,菌种保藏号为CGMCCNO. 5808 ;防除连作香蕉巴拿马枯萎病的拮抗菌NJN-6， 菌种保藏号为CGMCCNO. 3183 ;防除连作西瓜枯萎病的拮抗菌021，菌种保藏号为CGMCC NO, 1544中的任意一种。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的果蔬促生菌选自黄瓜根际促生芽孢 杆菌SQR9,菌种保藏号为CGMCCNO. 5808 ;防除连作香蕉巴拿马枯萎病的拮抗菌NJN-6,菌 种保藏号为CGMCCNO. 3183中的任意一种。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的果蔬促生菌选自黄瓜根际促生芽孢 杆菌SQR9,菌种保藏号为CGMCCNO. 5808。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的酸解液是使用浓度为5~7mol/L的 硫酸在80~105°C下对病死家畜瘦肉水解5~7h，瘦肉与所述的5~7mol/L的硫酸的物 料比为1:1. 5~2. 5。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的腐熟有机肥选自腐熟鸡粪有机肥、 腐熟猪粪有机肥、腐熟牛粪有机肥中的任意一种或多种；所述的腐熟有机肥优选为江苏省 惠农生物科技有限公司生产的腐熟鸡粪或江苏省阿波罗生物科技有限公司生产的腐熟猪 粪。
7.根据权利要求8所述的方法，其特征在于步骤2)中将酸解液以0.2mL g< (干重，下 同）加入腐熟有机肥进行均匀混合。
8. 按照权利要求1~7中任一项所述的方法制备的生物有机肥，其特征在于该产品中 功能菌活菌数大于IXIO8CFUg'全氮含量为1. 5-2. 5 %，总氮磷钾养分为5-6 %，有机质含 量大于30 %，其发芽指数为大于95 %。
9. 权利要求1~7中任一项所述的方法制备的生物有机肥在促进果蔬生长中的应用。
10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述的生物有机肥在促进蔬菜生长中的 应用，进一步优选在促进黄瓜和/或番茄生长中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种利用酸解液与腐熟有机肥生产生物有机肥的方法及产品。将酸解液以0.2mL g-1(干重，下同)加入腐熟有机肥室温下自然堆置3-5天，每天翻堆一次，待堆肥pH回升至5-6，接入0.05mL g-1功能菌SQR9或其他目标菌株，每天翻堆1次，发酵3-4天。所生产的生物有机肥促生菌数量大于1×108CFU g-1，全氮含量为1.5-2.5％，总氮磷钾养分为5-6％、有机质含量大于30％，同时含有大量的游离氨基酸及多肽类营养物质，生产成本低、促生效果好、可应用于粮食作物、蔬菜等。该工艺技术大大降低了生物有机肥生产的成本，提升了生物有机肥的市场竞争力，也为解决病死动物问题提供了支撑，减轻其对环境的污染。CGMCC NO. 154420051123CGMCC NO.318320090709CGMCC NO.580820120227
【IPC分类】C05F15-00, C05F17-00, A01C21-00
【公开号】CN104788143
【申请号】CN201510149568
【发明人】沈其荣, 刘红军, 李 荣, 钟茜, 邵铖, 乔策策
【申请人】南京农业大学
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年3月31日