专利名称：促进喜树种子芽内10－羟基喜树碱生成的方法
技术领域：
本发明涉及一种利用环境因子影响次生代谢产物的方法，特别涉及提供一种利用超声促进喜树种子芽内转化10-羟基喜树碱的方法。
背景技术：
目前，由于天然10-羟基喜树碱在喜树种子中含量很低，10-羟基喜树碱主要是通过人工合成的途径获得。中国知识产权局专利局1986年8月13日公开了《用生物转化法生产10-羟基喜树碱的方法(CN 851 00520 A)》，利用无菌黄霉素将喜树碱转化为10-羟基喜树碱，转化率为50％。人工合成10-羟基喜树碱的缺点是毒副作用大，而利用无菌黄霉素将喜树碱转化为10-羟基喜树碱的工艺复杂，成本高。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足之处，利用超声促进喜树种子发芽过程中10-羟基喜树碱的转化，进而得到高含量、高得率的10-羟基喜树碱的提取液。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案是将喜树种子在常温下水培192-720小时，使其发芽，将发芽的喜树种子置于超声装置中，再加水，使其浸没种芽，在频率20-40KHz，温度20-35℃条件下超声辐射10-30分钟后，将辐射后的喜树种芽置于预先加入70-95％乙醇的匀浆机中进行种芽组织的破碎、匀浆处理并过滤，得到含10-羟基喜树碱的滤液。
本发明工艺简单易操作、成本低，所得提取液中10-羟基喜树碱的含量相当于1.5-2‰的投料量的干燥喜树种子，10-羟基喜树碱的含量比干燥的喜树种子增加了20-25倍。
具体实施例方式
下面对本发明的实施例作进一步详细描述，本发明将喜树种子在常温下水培192-720小时，使其发芽，将发芽的喜树种子置于超声装置中，再加水，使其浸没种芽，在频率20-40KHz，温度20-35℃条件下超声辐射10-30分钟后，将辐射后的喜树种芽置于预先加入70-95％乙醇的匀浆机中进行种芽组织的破碎、匀浆处理并过滤，得到含10-羟基喜树碱的滤液。
将10公斤喜树种子在常温下水培750小时，使其发芽，将发芽的喜树种子置于超声装置中，再加水25公斤，使其浸没种芽，在频率40KHz，温度20℃条件下超声辐射30分钟后，将辐射后的喜树种芽置于预先加入25升85％乙醇的匀浆机中进行种芽组织的破碎、匀浆处理并过滤，得到含10-羟基喜树碱的滤液。滤液离心，取上清液，经高效液相测定，滤液中10-羟基喜树碱的含量为26.39mg/l，10-羟基喜树碱的含量比干燥的喜树种子增加了25倍。
权利要求
1.促进喜树种子芽内10-羟基喜树碱生成的方法，其特征在于将喜树种子在常温下水培192-720小时，使其发芽，将发芽的喜树种子置于超声装置中，再加水，使其浸没种芽，在频率20-40KHz，温度20-35℃条件下超声辐射10-30分钟后，将辐射后的喜树种芽置于预先加入70-95％乙醇的匀浆机中进行种芽组织的破碎、匀浆处理并过滤，得到含10-羟基喜树碱滤液。
全文摘要
本发明涉及一种促进喜树种子芽内10－羟基喜树碱生成的方法，其工艺流程是将喜树种子水培，使其发芽，将发芽的喜树种子置于加水的超声装置中，进行超声辐射，然后，将辐射后的喜树种芽置于加有乙醇的匀浆机中进行种芽组织的破碎、匀浆处理并过滤，得到含10－羟基喜树碱的滤液。本发明具有合成成本低、10－羟基喜树碱得率高的特点。
文档编号C07D491/22GK1482129SQ0213292
公开日2004年3月17日 申请日期2002年9月11日 优先权日2002年9月11日
发明者祖元刚, 史权, 赵春建, 祖柏实, 唐中华, 付玉杰, 张宝友 申请人:东北林业大学, 祖元刚