羟基喜树碱纳米脂束制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种具有主动靶向功能的羟基喜树碱纳米脂束油剂、羟基喜树碱纳米脂束注射剂及其制备方法。所述羟基喜树碱纳米脂束油剂包含磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、甘油、丙二醇、乙醇和羟基喜树碱和X-PEG-DSPE，所述X-PEG-DSPE选自叶酸-PEG-DSPE、胆酸-PEG-DSPE、CRGDK-PEG-DSPE、唾液酸-PEG-DSPE、低聚糖-PEG-DSPE。将所述羟基喜树碱纳米脂束油剂溶于注射用水性溶剂制成羟基喜树碱纳米脂束注射剂，其粒径均匀，能降低羟基喜树碱的毒性、具有长循环效果、能增强肿瘤靶向富集作用和增加病人顺应性。所述羟基喜树碱纳米脂束油剂及羟基喜树碱纳米脂束注射剂制备方法工艺简单，能够满足临床应用的各种需要。
【专利说明】羟基喜树碱纳米脂束制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物纳米脂束制剂【技术领域】，尤其涉及一种具有主动靶向功能的10-羟基喜树喊纳米脂束制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]作为一种细胞毒性生物碱,喜树碱(camptothecin,CPT)于20世纪50年代从植物喜树中被分离出来。与拓扑异构酶1-DNA复合物结合，能够抑制DNA超螺旋结构松弛过程中的再连接步骤，进而导致高拓扑异构酶表达的肿瘤细胞凋亡。初期研究发现，不仅出血性膀胱炎和骨髓毒性的副作用阻碍了喜树碱进一步的应用，而且其低的水溶性，也大大阻碍了其临床中的应用。
[0003]降低毒性、增加溶解性和提高药效是喜树碱类药物发展的方向。通过对7、
9、10、11位的结构改造，人们成功获得了喜树碱的一些列衍生物，如羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecin, HCPT)、9_ 氨基喜树喊(9_aminocamptothecin)、9_ 硝基喜树喊(9-nitrocamptothecin)、拓扑替康(topotecan)、依立替康(lrinotecan, CPT-11)、勒托替康(Iurtolecan)、DB-67 (7-t-butyldimethylsilyl-10-hydroxycamptothecin)等，这其中
10-羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康已用于临床治疗结肠癌、卵巢癌和小细胞肺癌。在这三种药物中，羟基喜树碱成本最低，以三周用药为期，羟基喜树碱约需要1700元，拓扑替康约需要5065元,伊立替康价格最高,需要14000元左右。作为治疗成本最低的喜树碱类药物，羟基喜树碱具有最差的溶解性。这大大阻碍了其实际应用。
[0004]临床上应用的羟基喜树碱注射剂是借助PH8-9.5的水溶液实现其溶解性，但是在此PH环境下，大量羟基喜树碱的药效基团，生物学功能较强的d—羟基一 δ —内酯环打开，形成生物学功能较弱的羟酸盐结构。这些羟酸盐结构的喜树碱衍生物，羟酸盐结构与血浆蛋白的结合力是内酯结构的150倍。而这些与血浆蛋白结合的喜树碱及其衍生物的抗肿瘤活性已经下降至1/1000。因此，保证羟基喜树碱的内酯环结构的同时，增加其溶解性，降低其内酯药效基团的不稳定性，减少与血浆蛋白的高度结合性是充分发挥其抗肿瘤作用，拓展其临床应用的关键。
[0005]作为不溶于水的物质，羟基喜树碱具有一定的脂溶性，并且在脂质中溶解后，并不会发生内酯开环现象。不仅如此，研究表明，包裹的喜树碱制剂，例如囊泡、固体脂质颗粒、脂质体等不仅保持其闭环结构，具有良好的抗癌活性，而且能够有效的降低喜树碱的毒性，延长血液中的滞留循环时间。随着纳米技术的快速发展，纳米尺寸的药物逐渐被开发研究，而且它们具有被动靶向作用，在治疗肿瘤方面也体现了独特的优势。前期的研究发现，表面PEG化的脂质体能够躲避体内巨噬细胞的吞噬，延长循环时间。因此，纳米尺寸、表面PEG化的药物有望在延长循环时间、提高药效、降低毒性方面展示独特的优势。
[0006]较普通制 剂而言，微乳具有热力学稳定、单相、成品较透明和自乳化的特点。PEG表面化的纳米脂束能够兼具长循环、隐形和立体稳定的特点，对减少巨唾细胞吞噬、提高药物靶向性、阻碍血液蛋白成分与磷脂的结合等具有重要的作用。然而，如何将目的药物即羟基喜树碱、增溶剂以及实现表面PEG化和靶向性的试剂制成微乳，在实践中遇到了很大困难。
【发明内容】
[0007]本发明借助磷脂、甘油、丙二醇、乙醇、新型聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯(Solutol HS15)的组合和配比，以及制备步骤，实现了表面PEG的羟基喜树碱脂束纳米药物的制备。制备工艺简单，能满足临床应用的各种需求，对造福于广大的癌症患者具有重大意义。
[0008]本发明的目的在于提供一种具有主动靶向功能的羟基喜树碱纳米脂束油剂、羟基喜树碱纳米脂束注射剂及其制备方法。所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂粒径均匀，能降低羟基喜树碱的毒性，具有长循环效果，能增强主动肿瘤靶向富集作用和增加病人顺应性；所述制备方法工艺简单，用简单、可重复性高的制备方法在纳米脂束中引入主动靶向基团，能够满足临床应用的各种需要。
[0009]为实现本发明的目的，采用以下技术方案:
[0010]在第一方面，本发明提供一种羟基喜树碱纳米脂束油剂，包含磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、甘油、丙二醇、乙醇，X-PEG-DSPE (X为叶酸、胆酸、CRGDK、唾液酸、低聚糖等)和羟基喜树碱。
[0011]作为本发明的优选，所述制剂包含4-8重量份磷脂、10-20重量份聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、5-15重量份甘油、10-20重量份乙醇、4-8重量份丙二醇、0.1-0.4重量份轻基喜树碱和 0.01-10.00 份 X-PEG-DSPE。
[0012]在具体实施方案中，所述油剂中磷脂的含量可以是例如5重量份、6重量份或7重量份；聚乙二醇-十二 羟基硬脂酸酯的含量可以是例如12重量份、14重量份、16重量份或18重量份；甘油的含量可以是例如7重量份、9重量份、11重量份或13重量份；乙醇的含量可以是例如12重量份、14重量份、16重量份或18重量份；羟基喜树碱的含量可以是例如0.2重量份、0.3重量份、0.15重量份；X-PEG-DSPE的含量可以是例如0.5重量份、I重量份、5重量份或9重量份。
[0013]在第二方面，本发明提供一种羟基喜树碱纳米脂束注射剂，其包括第一方面所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂和注射用水性溶剂。
[0014]在本发明中，所使用注射用水性溶剂是主要基质为水的含溶质或不含溶质的能够用于注射的溶剂，不作特别地限定。
[0015]作为本发明的优选，所述注射用水性溶剂选自生理盐水、葡萄糖注射剂和注射用水。
[0016]作为本发明的优选，所述注射用水性溶剂的体积是所述羟基喜树碱纳米脂束油剂体积的5-100倍，例如6倍、8倍、10倍、15倍、20倍、30倍、50倍、70倍、80倍或90倍，优选
5-80倍，更优选10-20倍。
[0017]作为本发明的优选，所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂还包含注射用辅料，例如pH调节剂，所述卩^1调节剂选自柠檬酸、乳酸、山梨糖醇、似20)3、似0!1、順4(:1、似!10)3或0&(0!1)2。
[0018]在具体实施方案中，所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂通过静脉注射、肌肉注射、皮下注射等常规给药方式给药。
[0019]在第三方面，本发明提供一种制备如第一方面所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂的方法，包括:
[0020]将磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、甘油、乙醇、丙二醇和羟基喜树碱混合，配成澄清透明溶液。
[0021]在本发明制备羟基喜树碱纳米脂束油剂的方法中，配制所述澄清透明溶液的方法有多种，可以将磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、X-PE⑶SPE (X为叶酸、胆酸、CRGDK、唾液酸、低聚糖等)、甘油、乙醇、丙二醇和羟基喜树碱混合在一起，借助磁力搅拌、机械搅拌、超声、加热、匀浆器匀浆或其组合等外力作用得到澄清透明溶液。在具体实施方案中，可以将上述配方中的成分一次性全部加入容器中进行混合处理，也可以先加一部分配方中的物质，搅拌均匀后，再加另一部分并混合处理得到澄清透明溶液。为方便生产中的储存与实际操作，两种优选的配制本发明制剂的方法如下:
[0022]第一种方法具体为:
[0023](I)将磷脂与丙二醇混合溶解，配成第一溶液；
[0024](2)将聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、甘油、乙醇、X-PE⑶SPE、乙醇和羟基喜树碱混合溶解，配成第二溶液；
[0025](3)将所述第一溶液与所述第二溶液混合，搅拌混匀得到所述澄清透明溶液。
[0026]第二种方法具体为:
[0027](I)将磷脂与乙醇混合溶解，配成第一溶液；
[0028](2)将聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、X-PE⑶SPE、甘油、丙二醇、乙醇和羟基喜树碱混合溶解，配成第二溶液；
[0029](3)将所述第一溶液与所述第二溶液混合，搅拌混匀得到所述澄清透明溶液。
[0030]本发明中，澄清透明溶液是一般意义上的概念，即肉眼不可见颗粒物或析出物的存在，激光照射下，没有丁达尔现象的发生，紫外吸收光谱中不会有源于颗粒散射所导致的消光。
[0031]本发明配制的澄清透明溶液即羟基喜树碱纳米脂束油剂，可以在氮气保护条件下密封保存，如果配制的澄清透明溶液马上进行自乳化也可以不密封保存。
[0032]作为本发明的优选，所述羟基喜树碱纳米脂束油剂含4-8重量份磷脂、10-20重量份聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、5-15重量份甘油、10-20重量份乙醇、4-8重量份丙二醇、0.1-0.4重量份羟基喜树碱和0.01-10.00份X-PEG-DSPE。
[0033]在具体实施方案中，所述羟基喜树碱纳米脂束油剂中磷脂的含量可以是例如5重量份、6重量份或7重量份；聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯的含量可以是例如12重量份、14重量份、16重量份或18重量份；甘油的含量可以是例如7重量份、9重量份、11重量份或13重量份；乙醇的含量可以例如是12重量份、14重量份、16重量份或18重量份；丙二醇的含量可以是例如5重量份、6重量份或7重量份；羟基喜树碱的含量可以是例如0.2重量份、0.3重量份、0.15重量份；X-PEG-DSPE的含量可以是例如0.5重量份、I重量份、5重量份或9重量份。
[0034]在第四方面，本发明提供一种制备如第二方面所述的羟基喜树碱纳米脂束注射剂的方法，包括:
[0035]用注射用水性溶剂稀释如第二方面所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂，自乳化得到所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂。[0036]本发明中，所述自乳化过程，根据需要可借助外力，比如轻柔或剧烈震荡。
[0037]本发明制备羟基喜树碱纳米脂束注射剂的方法中，注射用水性溶剂是主要基质为水的含溶质或不含溶质的能够用于注射的溶剂，不作特别地限定。
[0038]作为本发明的优选，所述注射用水性溶剂选自生理盐水、葡萄糖注射剂和注射用水。
[0039]作为本发明的优选，所述注射用水性溶剂的体积是所述羟基喜树碱纳米脂束油剂的5-100倍，例如6倍、8倍、10倍、15倍、20倍、30倍、50倍、70倍、80倍或90倍，优选5-80倍，更优选10-20倍。
[0040]注射用水性溶剂的温度是本领域的技术人员可以根据经验确定的，一般室温即可，本发明所用的注射用水性溶剂的温度可以是0-80°C范围内的任意温度，优选0-40°C范围内的任意温度。
[0041]为储存的方便，本发明制备得到的羟基喜树碱纳米脂束注射剂，可以选择冻干等再加工工艺进行后续处理，并不影响所述纳米脂束药物的再分散和使用，所涉及工艺可产业化生产，并直接应用于大批量药物生产开发。
[0042]本发明的有益效果为:本发明配制出羟基喜树碱纳米脂束油剂(澄清透明溶液);经在注射用水性溶剂中的自乳化过程后，得到具有主动靶向功能的羟基喜树碱纳米脂束注射剂，其微乳粒径分布均匀，能降低羟基喜树碱的毒性、具有长循环效果、能增强肿瘤主动和被动靶向富集作用和增加病人顺应性；本发明填补了主动靶向功能羟基喜树碱纳米脂束药物的空白，所发展的配方工艺简单，可满足临床应用的各种需要。 【专利附图】
【附图说明】
[0043]图1为本发明羟基喜树碱纳米脂束油剂的制备及经自乳化过程后得到羟基喜树碱注射剂的过程示意图。
[0044]图2为本发明实施例1经生理盐水自乳化过程后得到的羟基喜树碱纳米脂束注射剂的动态光散射结果，显示其粒径均匀。
[0045]图3为本发明实施例1经生理盐水自乳化过程后得到的羟基喜树碱纳米脂束注射剂的透射电镜照片。
[0046]图4为皮下荷瘤小鼠实验取得的实体瘤样本荧光照片，注射A (生理盐水)的小鼠的肿瘤无荧光；注射B (注射连接有荧光分子的羟基喜树碱纳米脂束)的小鼠的肿瘤有微弱荧光；注射C (连接有荧光分子并含有叶酸-PEGDSPE的羟基喜树碱纳米脂束)的小鼠的肿瘤的突光明显强于B。
【具体实施方式】
[0047]下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。本领域技术人员将会理解，以下实施例仅为本发明的优选实施例，以便于更好地理解本发明，因而不应视为限定本发明的范围。对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所用的实验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂厂商购买得到的。[0048]本发明制备羟基喜树碱纳米脂束注射剂的工艺过程示意图如图1所示，不拘先后顺序加入羟基喜树碱、磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、X-PE⑶SPE、丙二醇、甘油和乙醇(助剂)混合均匀配制成羟基喜树碱纳米脂束药物前体，然后加入注射用水性溶剂进行自乳化得到羟基喜树碱纳米脂束注射剂。
[0049]制备例I
[0050]一、羟基喜树碱纳米脂束油剂的制备
[0051]1、称取0.8g磷脂(德国Lipoid公司)和0.8g丙二醇，溶解，得到溶液A。
[0052]2、称取 0.025g 羟基喜树碱、3.0g 乙醇、3.8g Solutol HS15 (德国 BASF 公司)、0.038g叶酸-PE⑶SPE、2.6g甘油，常温溶解，得到溶液B。
[0053]3、将溶液A和溶液B混合，室温搅拌、混匀，得到澄清透明羟基喜树碱纳米脂束油剂，氮气保护，密封保存。
[0054]二、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的制备 [0055]将步骤一制备的羟基喜树碱纳米脂束油剂用20倍体积的生理盐水稀释，得到羟基喜树碱纳米注射剂。
[0056]三、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径测定
[0057]用英国Malven仪器公司的ZS90仪器检测羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径，结果如图2所示，羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径在98nm左右。
[0058]本实施例制备的羟基喜树碱纳米脂束注射剂的透射电镜照片如图3所示，显示制备的羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳为粒径均匀的纳米颗粒。
[0059]制备例2
[0060]一、羟基喜树碱纳米脂束油剂的制备
[0061]1、称取0.9g磷脂(德国Lipoid公司)和3.0g乙醇，溶解，得到溶液A。
[0062]2、称取 0.02g 羟基喜树碱、0.9g 丙二醇、3.6g Solutol HS15 (德国 BASF 公司)、50mg胆酸-PE⑶SPE、1.6g甘油，溶解，得到溶液B。
[0063]3、将溶液A和溶液B混合，室温搅拌、混匀，得到澄清透明羟基喜树碱纳米脂束油剂，氮气保护，密封保存。
[0064]二、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的制备
[0065]将步骤一制备的羟基喜树碱纳米脂束油剂用20倍体积的生理盐水稀释，得到羟基喜树碱纳米脂束注射剂，所述注射剂呈乳状液。
[0066]三、羟基喜树碱纳米注射剂的微乳粒径测定
[0067]用英国Malven仪器公司的ZS90仪器检测羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径，结果与图2类似。
[0068]制备例3
[0069]一、羟基喜树碱纳米脂束油剂的制备
[0070]1、称取1.0g磷脂(德国Lipoid公司)和1.0g丙二醇，溶解，得到溶液A。
[0071]2、称取 0.025g 羟基喜树碱、3.6g 乙醇、3.8g Solutol HS15(德国 BASF 公司)、60mg唾液酸-PE⑶SPE、1.6g甘油，常温溶解，得到溶液B。
[0072]3、将溶液A和溶液B混合，室温搅拌、混匀，得到澄清透明羟基喜树碱纳米脂束油剂，氮气保护，密封保存。[0073]二、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的制备
[0074]将步骤一制备的羟基喜树碱纳米脂束油剂用20倍体积的生理盐水稀释，得到羟基喜树碱纳米脂束注射剂，所述注射剂呈乳状液。
[0075]三、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径测定
[0076]用英国Malven仪器公司的ZS90仪器检测羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径，结果与图2类似。
[0077]制备例4
[0078]一、羟基喜树碱纳米脂束油剂的制备
[0079]称取0.9g磷脂(德国Lipoid公司)、0.025g羟基喜树碱、1.6g无水乙醇、3.6gSolutol HS15 (德国BASF公司)、0.038g叶酸-PE⑶SPE、2.6g甘油和0.01g柠檬酸搅拌溶解，得到溶液澄清透明的羟基喜树碱纳米脂束油剂，氮气保护，密封保存。结果类似图2，羟基喜树碱纳米脂束油剂为澄清透明液体。
[0080]二、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的制备
[0081]将步骤一制备的羟基喜树碱纳米脂束油剂用20倍体积的葡萄糖注射剂稀释，得到羟基喜树碱纳米脂束注射剂，所述注射剂呈乳状液。
[0082]三、羟基喜树碱纳 米脂束注射剂的微乳粒径测定
[0083]用英国Malven仪器公司的ZS90仪器检测羟基喜树碱纳米脂束注射剂的微乳粒径，结果类似图2。
[0084]对比制备例I
[0085]本发明公开了制备具有主动靶向功能的羟基喜树碱纳米脂束药物所需的组成、配比及步骤，如果不采用本发明的制备方法，则很难获得所述药物，举例如下:
[0086]一、羟基喜树碱纳米脂束油剂的制备
[0087]1、称取1.0g磷脂(德国Lipoid公司)和1.5g乙醇，溶解，得到溶液A。
[0088]2、称取 0.014g 羟基喜树碱、3.4g Solutol HS15 (德国 BASF 公司)、
0.040gCRGDK-PE⑶SPE、2.1g甘油，溶解，得到浑浊溶液B。
[0089]3、将溶液A和溶液B混合，室温搅拌、混匀，得到浑浊羟基喜树碱溶液。
[0090]二、羟基喜树碱纳米脂束注射剂的制备
[0091]将步骤一制备的羟基喜树碱纳米脂束油剂用20倍体积的生理盐水稀释，不能得到羟基喜树碱纳米脂束。
[0092]效果例
[0093]按照以下方法制备不带有叶酸靶向基团的羟基喜树碱纳米脂束(配方中不含有叶酸-PE⑶SPE):
[0094]1、称取0.8g磷脂(德国Lipoid公司)和0.8g丙二醇，溶解，得到溶液I。
[0095]2、称取 0.025g 羟基喜树碱、3.0g 乙醇、3.8g Solutol HS15(德国 BASF 公司)、2.6g甘油，常温溶解，得到溶液2。
[0096]3、将溶液I和溶液2混合，室温搅拌、混匀，得到澄清透明羟基喜树碱纳米脂束油剂，氣气保护，S封保存。
[0097]将按照上述方法制备的不带有叶酸靶向基团的羟基喜树碱纳米脂束，加入DiR染料乙醇溶液，用20倍体积的生理盐水稀释，得到羟基喜树碱纳米脂束注射剂B。[0098]按照制备例I的方法制备带有叶酸靶向基团的羟基喜树碱纳米脂束，加入DiR染料乙醇溶液，用20倍体积的生理盐水稀释，得到羟基喜树碱纳米脂束注射剂C。
[0099]A为生理盐水。
[0100]取三只皮下荷瘤小鼠，分别注射A、B、C，24小时后取出实体瘤，用多光谱小动物活体成像系统(CRI Maestro2)观察肿瘤处药物富集效果，发现注射A (生理盐水)的小鼠的肿瘤无荧光；注射B (注射连接有荧光分子的羟基喜树碱纳米脂束)的小鼠的肿瘤有微弱荧光；注射C (连接有荧光分子并含有叶酸-PEGDSPE的羟基喜树碱纳米脂束)的小鼠的肿瘤的荧光明显强于B，表明具有主动靶向功能的羟基喜树碱纳米脂束具有最优地聚集于肿瘤部位的效果，从而发生可预见的最优的肿瘤杀伤效果，同时降低对于其他组织的毒性。
[0101]本发明通过上述实施例制备得到具有主动靶向功能的羟基喜树碱纳米脂束注射剂，其能降低羟基喜树碱的毒性、具有长循环效果、能增强肿瘤主动和被动靶向富集作用和增加病人顺应性。
[0102]以上详细描述了本发明的实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0103]另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
[0104]此外，本发明的各种不 同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【权利要求】
1.一种羟基喜树碱纳米脂束油剂，含有磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、甘油、乙醇、丙二醇、羟基喜树碱和X-PEG-DSPE，所述X-PEG-DSPE选自叶酸-PEG-DSPE、胆酸-PEG-DSPE、CRGDK-PEG-DSPE、唾液酸-PEG-DSPE、低聚糖-PEG-DSPE，以及其他具有主动靶向功能的包含PEG-DSPE结构的基团。
2.根据权利要求1所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂，其特征在于，所述羟基喜树碱纳米脂束油剂包含4-8重量份磷脂、10-20重量份聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、5-15重量份甘油、10-20重量份乙醇、4-8重量份丙二醇、0.1-0.4重量份羟基喜树碱和0.01-2.00重量份所述 X-PEG-DSPE。
3.一种羟基喜树碱纳米脂束注射剂，包含根据权利要求1-2所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂和注射用水性溶剂；优选地，所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂还包含其它注射用辅料；优选地，所述其它注射用辅料为pH调节剂；优选地，所述pH调节剂选自柠檬酸、乳酸、山梨糖醇、Na2CO3^ NaOH, NH4C1、NaHCO3 或 Ca (OH)20
4.根据权利要求3所述的羟基喜树碱纳米脂束注射剂，其特征在于，所述注射用水性溶剂的体积是所述羟基喜树碱纳米脂束油剂体积的5-100倍，优选5-80倍，更优选10-20倍；优选地，所述注射用水性溶剂选自生理盐水、葡萄糖注射剂和注射用水。
5.根据权利要求3或4所述的羟基喜树碱纳米脂束注射剂，其特征在于，所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂通过静脉注射、肌肉注射、皮下注射方式给药。
6.一种制备权利要求1-5之一所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂的方法，包括: 将磷脂、聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、甘油、乙醇、丙二醇、羟基喜树碱、X-PEG-DSPE混合，配成澄清透明溶液，所述X-PEG-DSPE选自叶酸-PEG-DSPE、胆酸-PEG-DSPE、CRGDK-PEG-DSPE、唾液酸-PEG-DSPE、低聚糖-PEG-DSPE。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤具体为: (1)将磷脂与乙醇混合溶解，配成第一溶液； (2)将聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、X-PEG-DSPE、甘油、丙二醇和羟基喜树碱混合溶解，配成第二溶液； (3)将所述第一溶液与所述第二溶液混合，搅拌混匀得到所述澄清透明溶液。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤具体为: (1)将磷脂与丙二醇混合溶解，配成第一溶液； (2)将聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、X-PEG-DSPE、甘油、乙醇和羟基喜树碱混合溶解，配成第二溶液； (3)将所述第一溶液与所述第二溶液混合，搅拌混匀得到所述澄清透明溶液。
9.根据权利要求6-8任一项的方法，其特征在于，所述羟基喜树碱纳米脂束油剂包含4-8重量份磷脂、10-20重量份聚乙二醇-十二羟基硬脂酸酯、5-15重量份甘油、10-20重量份乙醇、4-8重量份丙二醇、0.1-0.4重量份羟基喜树碱和0.01-10.00份X-PEG-DSPE。
10.一种制备羟基喜树碱纳米脂束注射剂的方法，包括: 用注射用水性溶剂稀释根据权利要求6-9任一项所述的羟基喜树碱纳米脂束油剂，自乳化得到所述羟基喜树碱纳米脂束注射剂； 优选地，所述注射用水性溶剂选自生理盐水、葡萄糖注射剂和注射用水； 优选地，所述注射用水性溶剂的体积是 所述羟基喜树碱纳米脂束油剂的体积的5-100倍，优选5-80倍，更优选10-20倍。优选地，所述注射用水性溶剂包 含注射用辅料；优选地，所述注射用辅料为PH调节剂；优选地，所述pH调节剂选自柠檬酸、乳酸、山梨糖醇、Na2CO3、NaOH、NH4Cl、NaHCO3或Ca (OH) 2。
【文档编号】A61P35/00GK103784965SQ201410016965
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2014年1月14日 优先权日:2014年1月14日
【发明者】梁兴杰, 赵元元, 陈飞, 马晓溦, 李盛亮, 薛向东, 柳娟, 金叔斌, 李鸿基, 张吉梅, 王义峰, 甘雅玲, 姜永刚 申请人:国家纳米科学中心