专利名称：肌苷·l－精氨酸盐及其用途的制作方法
技术领域：
本发明主要涉及作为细胞活化剂或植物生长促进剂有用的新型物质肌苷·L-精氨酸盐本身以及以其作为有效成分的细胞活化剂或植物生长促进剂。
背景技术：
众所周知，肌苷具有使细胞活化的作用，根据该药效，东和药品株式会社以“肌苷注射液(イノチン注射液)”，马尔科(マルコ)制药株式会社以“肌苷颗粒”的名称销售作为治疗由暴露在放射线中或由药物引起的白血球减少症状的药物。此外，持田制药株式会社以“异丙肌苷片剂”的名称，以具有延长亚急性硬化性全脑炎患者生存时间为功效，销售其与4-乙酰胺安息香酸2-羟丙基二甲基铵的络盐。同时大家也知道肌苷具有促进植物生长的作用，例如特许第2927269号公报公开了以肌苷作为有效成分的促进植物根部生长的促进剂，并以“育王”的名称实现商品化，由昭光通商株式会社进行销售。同一发明者在特开2001-72514号公报中公开了使用肌苷钙盐或游离肌苷的例子。
发明公开肌苷对水的溶解度比较低，在常温下约为1.6％。因此作为溶液使用时，存在有溶解费时并且浓度也受到限定的问题。在前述特许第2927269号公报中提出了通过用苛性碱等把溶液调制成强碱性的方法解决这一问题，但是如同一发明者在特开2001-72514号公报中所述，存在有安全上的问题。同时作为预溶液物质，还可以指出其保存性和每单位量肌苷的输送效率低的问题。
因此能够以固体形式流通并且在使用时，能够迅速溶解的肌苷制剂便成为研究的课题。
本发明者为了解决上述课题进行了锐意研究，结果发现通过把肌苷制成精氨酸盐，可以作为非常容易溶解于水的固体进行离析，在这一认识的基础上完成了本发明。
也就是本发明直接以上述认识为基础，首先涉及可以作为非常容易溶解于水的固体进行离析的、并且作为细胞活化剂或植物生长促进剂是有用的肌苷·L-精氨酸盐及含有该肌苷·L-精氨酸盐的细胞活化剂或植物生长促进剂。本发明还进一步涉及在前述第一发明基础上进一步延伸的肌苷和L-精氨酸的混合水溶液。
以下详细说明本发明的情况。
首先说明肌苷·L-精氨酸盐的制造方法。
前述特许第2927269号公报中，作为碱，除苛性碱以外，还介绍了以赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸。使用碱的目的归根到底是为了使溶解度低的肌苷形成溶液，关于将肌苷和碱性氨基酸的盐作为固体进行离析的方法没有作任何介绍。而且其它文献中也没有介绍肌苷·L-精氨酸盐的情况，即可以认为这是一种新型物质。
根据本发明者的研究，用含有等摩尔精氨酸的水，对中和溶解肌苷的水溶液单纯进行浓缩时，析出的固体为纯肌苷，不能得到所需的肌苷·L-精氨酸盐。为了得到肌苷·L-精氨酸盐，必需通过在搅拌下把肌苷和等摩尔L-精氨酸的浓水溶液注入到无水乙醇中的操作，才有可能将所需要的肌苷·L-精氨酸盐作为固体得到。附带说明，肌苷和L-精氨酸的等摩尔混合水溶液的浓度在60℃时可高达50％或以上。同时，这里所说的肌苷·L-精氨酸盐的分子式用C16H26N8O7表示，是文献中未曾介绍过的新物质。肌苷·L-精氨酸盐，根据其制造条件，也是有可能达到含有水和/或溶剂的(水化物和/或溶剂化物)。除此种方法之外，例如肌苷·L-精氨酸盐还可以通过对肌苷和等摩尔精氨酸的水溶液进行冷冻干燥或喷雾干燥的方法获得。
肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，并且肌苷和L-精氨酸的比基本上是等摩尔的肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，在文献中也没有记载，也是新型组合物。这样的混合水溶液可以通过例如对肌苷和L-精氨酸分别进行计量取相同摩尔数，把它们添加在水中进行搅拌混合制成。这里所谓的基本上是等摩尔表示，下面将要说明的使用肌苷·L-精氨酸盐制作时，肌苷和L-精氨酸的比也可以有若干不同。即在预先溶解有肌苷或L-精氨酸的水溶液中可以溶解肌苷·L-精氨酸盐，或者也可以把肌苷·L-精氨酸盐溶解于水中形成水溶液后，再溶解肌苷或L-精氨酸。对于该混合水溶液的浓度没有特别限制。从输送效率等观点考虑，浓度越高越好，而且高浓度溶液，在实际使用过程中也可以进行适当稀释后使用。
肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，当然可以把肌苷·L-精氨酸盐溶解在水中制成，这时水溶液中的肌苷和L-精氨酸的比与由等摩尔的肌苷和L-精氨酸组成肌苷·L-精氨酸时是一致的，是等摩尔的。
所谓把肌苷·L-精氨酸盐溶解于水形成的肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，如字面意义所示，可以把肌苷·L-精氨酸盐溶解于水而得到。也可以在预先溶解有肌苷和/或L-精氨酸的水中再溶解肌苷·L-精氨酸盐而获得。还可以在这样得到的肌苷和L-精氨酸的混合水溶液中进一步使肌苷、L-精氨酸等溶质溶解。对该混合水溶液的浓度没有特别限制。从输送效率的观点考虑，浓度越高越好，而且高浓度溶液，在实际使用时，也可以进行适当稀释后再使用。
下面说明肌苷·L-精氨酸盐的用途。
含有肌苷·L-精氨酸盐作为有效成分的细胞活化剂，可用于治疗白血球减少症，所以除了肌苷·L-精氨酸盐以外，当然还可以含有形成制剂时常用的赋形剂、润滑剂或调味剂等。在可以形成制剂的范围内，它们的配合比是任意的。
此外还可以是把它们溶解于水的液体剂型(水溶液)。或者也可以作为有效成分使肌苷和L-精氨酸二者基本上以等摩尔比溶解于水中，调制成肌苷和L-精氨酸的混合水溶液剂型。在可以溶解的范围内，这时的浓度可以是任意浓度，例如在25℃时是5％。
此外，含有以肌苷·L-精氨酸盐作为有效成分的植物生长促进剂可用于促进大豆、小豆等豆类，马铃薯、红薯等薯类，或包括大麦、小麦、水稻、玉米等禾草科植物的所有谷物类，莴苣、洋白菜、菠菜等叶菜类，萝卜、胡萝卜等根菜类，包括番茄、黄瓜、青椒、茄子、南瓜等果菜类的全部蔬菜类、苹果、梨、葡萄、樱桃、桃、柑桔等果树类，包括草莓、甜瓜等果菜类的所有水果类或棉花、烟草等食用以外的所有有用植物的、地上部分和地下部分的生长，除肌苷·L-精氨酸盐以外，还可以含有铁、铜、锰、锌、钼、硼、钴、钾、钙、镁等的盐类。还可以含有脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸等氨基酸。这些物质的配合比，只要在可以形成制剂的范围内，可以是任意的。
同时，也可以是把它们溶解在水中，形成液体剂型(水溶液)的形态。或者也可以作为有效成分，使肌苷和L-精氨酸二者基本以等摩尔比溶解于水中，调制成肌苷和L-精氨酸混合水溶液的剂型。只要是在可以溶解的范围内，这时的浓度是任意的。这些情况与前面叙述的细胞活化剂的情况相同。
附图的简单说明
图1表示肌苷和L-精氨酸的等摩尔比混合物的红外分光分析谱图(实施例1)图2表示用实施例1制造的肌苷·L-精氨酸盐的红外分光分析谱图。
图3表示用实施例1制造的肌苷·L-精氨酸盐的粉末X光衍射谱图。
图4表示肌苷和L-精氨酸的等摩尔比混合物的粉末X光衍射谱图(实施例1)。
实施发明的最佳方案以下通过实施例详解说明本发明的情况。
实施例1制造肌苷·L-精氨酸盐在67ml水中，加入肌苷20.00g(74.6mmol)和L-精氨酸13.00g(74.6mmol)，在热水浴中加热振荡至完全溶解。在强搅拌条件下把该水溶液一点一点地添加到2L的乙醇中时，有白色固体析出。过滤取出该白色固体，在40℃、减压条件下干燥一夜后的重量为25.65g。
用高速液相色谱仪装置对该固体进行分析，可以检测出肌苷和L-精氨酸，摩尔比为1∶1。而且在红外分光分析中，与肌苷和L-精氨酸的等摩尔混合物(参照后面的图1)相比，混合物中，1961cm-1的特征峰减弱(参照后面的图2)。进行粉末X光衍射分析的结果表明该固体是无定形的(参照后面的图3)。元素分析的结果为C43.57％、H6.43％、N23.24％，它与肌苷·L-精氨酸盐·0.6乙醇·0.4水化物的理论值(C43.28％、H6.42％、N23.48％)是一致的。为了进行比较，也取得了对肌苷和L-精氨酸的等摩尔混合物进行粉末X光分析的谱图(参照后面的图4)。
比较例1在400ml水中，添加肌苷20.00g(74.6mmol)和L-精氨酸13.00g(74.6mmol)，在室温下搅拌使其完全溶解。使用旋转蒸发器对该溶液进行浓缩至约60ml，把浓缩液在冰箱中静止放置一夜，有白色固体析出。过滤取出该白色固体，在40℃、减压条件下干燥一夜后的重量为3.15g。用高速液相色谱仪装置对该固体进行分析的结果证明白色固体几乎是纯肌苷。
试验例1溶解速度试验在室温下，边搅拌边分别在10ml水中一次加入肌苷1.2mmol和L-精氨酸1.2mmol的混合物(0.53g)、用实施例1得到的肌苷·L-精氨酸盐1.2mmol(0.53g)和肌苷1.2mmol(0.32g)三种物料，测定它们至完全溶解的时间。结果表明肌苷和L-精氨酸的等摩尔混合物达到完全溶解需要50秒钟，而肌苷·L-精氨酸盐在瞬时即可溶解。此外，肌苷完全不溶解。由此可以确认肌苷·L-精氨酸盐的优异的溶解性。
实施例2(促进植物生长的作用)对矮草(混合草坪矮草小糠草)进行育苗，分2组，每组30株，进行无土栽培。对比组和肌苷·L-精氨酸盐组均使用稀释2000倍的哈依波耐克斯(ハイポネツクス)作为培养液。在对比组中原样采用稀释2000倍的哈依波耐克斯(ハイポネツクス)作为培养液，而另一组即肌苷·L-精氨酸盐组中是在该培养液中添加肌苷·L-精氨酸盐，使肌苷成分达到20ppm。
栽培一个月后，测定各组草的平均长度、平均根长、每30株的叶片数、每30株的分蘖数、每30株的重量和每30株干燥后的重量。把结果出示在下述表1中。由该表可以确认肌苷·L-精氨酸盐的有效性。
表1
(产业上的实用性)根据本发明可以提供作为非常容易溶解于水的固体进行离析、并且作为细胞活化剂或植物生长促进剂是有用的肌苷·L-精氨酸盐和以及含有肌苷·L-精氨酸盐的细胞活化剂或植物生长促进剂。此外，细胞活化剂和植物生长促进剂，也可以以肌苷和L-精氨酸(混合水)溶液的剂型提供。
权利要求
1.肌苷·L-精氨酸盐。
2.肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，它是肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，其特征在于，肌苷和L-精氨酸的比例基本上是等摩尔的。
3.肌苷和L-精氨酸的混合水溶液，其特征在于，把肌苷·L-精氨酸盐溶解在水中而形成。
4.细胞活化剂，其特征在于，含有肌苷·L-精氨酸盐作为有效成分。
5.细胞活化剂，其特征在于，以肌苷和L-精氨酸作为有效成分基本上以等摩尔比溶解于水中而形成。
6.细胞活化剂，其特征在于，把肌苷·L-精氨酸盐溶解于水中而形成。
7.植物生长促进剂，其特征在于，含有肌苷·L-精氨酸盐作为有效成分。
8.植物生长促进剂，其特征在于，以肌苷和L-精氨酸作为有效成分基本上以等摩尔比溶解于水中而形成。
9.植物生长促进剂，其特征在于，把肌苷·L-精氨酸盐溶解于水中而形成。
全文摘要
本申请公开新型物质肌苷·L－精氨酸盐以及把它溶解于水中形成的细胞活化剂或植物生长促进剂，它们是可以以固体形态进行流通，而使用时能迅速溶解的肌苷制剂。
文档编号C07H19/167GK1547585SQ0281659
公开日2004年11月17日 申请日期2002年9月10日 优先权日2001年9月27日
发明者仓内雅彦, 宫泽由纪, 佐藤弘之, 之, 纪 申请人:味之素株式会社