专利名称：新型三芳基咪唑的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型的三芳基咪唑以及它们的可药用盐。这些化合物是蛋白-酪氨酸激酶抑制剂，特别是c-met激酶抑制剂，因此是用于治疗癌症的优异疗法。本发明还涉及含有这种新型化合物作为治疗癌症和癌症相关疾病的活性试剂的药物组合物。
背景技术：
催化ATP的γ磷酸根向蛋白底物的酪氨酸残基转移的酶，蛋白-酪氨酸激酶(PTKs)，是控制细胞增殖和分化的信号途径的关键组分。PTKs可以细分成两大家族，受体酪氨酸激酶(RTKs)和非受体酪氨酸激酶(NRTKs)。RTKs横跨质膜，并且含有结合配体的细胞外结构域和具有催化活性和调节序列的细胞内部分。大多数RTKs，像肝细胞生长因子受体c-met拥有单个多肽链并且在配体不存在时是单体形式。配体结合到RTKs的细胞外部分，使单体形式的受体二聚，从而导致胞质部分的特定酪氨酸残基的自磷酸化(评论文章参见Blume-Jensen，P.和Hunter，T.，Nature 411(2001)355-365；Hubbard，S.R.等，J.Biol.Chem.273(1998)11987-11990；Zwick，E.等，Trends Mol.Med.8(2002)17-23)。通常，酪氨酸自磷酸化或者刺激受体固有的催化激酶活性，或者产生含磷酸酪氨酸-识别结构域如Src同源物2(SH2)结构域或含磷酸酪氨酸-结合(PTB)结构域的下游信号蛋白的补充位点。
蛋白酪氨酸激酶在细胞内信号转导途径中起关键作用，所述的细胞内信号转导途径导致不同的细胞响应，例如增殖，凋亡和分化。因此这些酶成为开发新型疗法的首要靶目标，所述新型疗法设计用于阻断癌细胞增殖、转移、血管生成并且促进凋亡。在临床开发方面进展最大的策略是以生长因子受体酪氨酸激酶为靶目标的单克隆抗体。但是，使用小分子酪氨酸激酶抑制剂可以比单克隆抗体具有显著的理论优势。小分子抑制剂可以具有更好的组织穿透性，可以对细胞内靶位点和突变靶位点具有活性，并且可以设计成具有口服生物利用度。几种先导化合物已经显示出对这样的靶位点的有希望的活性，所述靶位点如EGFR(血管内皮细胞生长因子受体)和bcr-abl。
肝细胞生长因子受体c-met是由其转化NIH 3T3小鼠成纤维细胞的能力在N-甲基-N’-亚硝基胍处理的人成骨肉瘤细胞细胞系(MUNG-HOS)中作为激活的致癌基因被首次识别的。c-met原癌基因(位于染色体7上)编码的受体是由50kDa(α)链和145kDa(β)链通过二硫键以190kDa的αβ复合物形式组成的两条链的蛋白。α链暴露在细胞表面，而β链横跨细胞膜并且具有细胞内酪氨酸激酶结构域。这种细胞内酪氨酸激酶结构域的存在使c-met成为细胞表面分子的受体酪氨酸激酶(RTK)家族的一员。
肝细胞生长因子(HGF)，也称作Scatter Factor(SF)，是在不同细胞和组织中引发多种响应的多官能细胞因子。由于其最初的发现和表征，HGF/SF已经成为深入研究的对象，特别是关于其在癌症发展和进行中的角色。大量证据指出其作为癌发生、癌侵入和转移调节剂的作用(评论文章参见Herynk，M.H.和Radinsky，R.，In Vivo 14(2000)587-596；Jiang，W.等，Crit.Rev.Oncol.Hematol.29(1999)209-248；Longati，P.等，Curr.DrugTargets 2(2001)41-55；Maulik，G.等，Cytokine Growth Factor Rev.13(2002)41-59；Parr，C.和Jiang，W.G.，Histol.Histopathol.16(2001)251-268。
HGF/SF结合到并且诱导成熟c-met受体β链的酪氨酸磷酸化。据认为这种事件促进了含有src同源物(SH)区域的细胞内信号蛋白如PLC-γ、Ras-GAP、PI-3激酶pp60c-src和GRB-2Socs复合物与活化受体的结合。每种含SH2的蛋白可以活化不同的信号磷酸肽的子集，从而引发细胞内的不同响应。
C-met突变体已经在遗传和散发性人乳突状肾癌中进行了充分描述，并且已经在卵巢癌、幼年肝细胞癌、转移性头和颈鳞状细胞癌和胃癌中有报道。C-met还在非小细胞肺癌和小细胞肺癌细胞中，在胸、结肠和前列腺瘤中过表达。由于c-met看来似乎在各种肿瘤的肿瘤发生中起重要作用，已经采用了各种抑制策略来治疗性地靶向这种受体酪氨酸激酶。
在许多经过证明的临床前实验中已经显示了抑制蛋白-酪氨酸激酶c-met对于抑制肿瘤生长和侵入的有效性(例如Abounader，R.等，J.Natl.Cancer Inst.91(1999)1548-1556；Laterra，J.等，Lab.Invest.76(1997)565-577；Tomioka，D.，Cancer Res.61(2001)7518-7524；Wang，R.等，J.Cell Biol.153(2001)1023-1033)。
WO 96/18626描述了酪氨酸激酶和c-met激酶的抑制剂，这些抑制剂是2-(2，6-二氯苯基)-4-苯基-5-(吡啶-4-基)-1H-咪唑的衍生物(实施例5、6和55)。但是它们具有不适宜的细胞色素P450相互作用。
现在发现根据本发明的化合物避免了这种缺点，其具有良好溶解度，是c-met激酶的有效抑制剂。
发明概述本发明涉及通式(I)的化合物，
其中W是-N＝；并且X是氢；Y是氢或基团A2-R；A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基；氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基；O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或3-甲基噻吩-2-基；n是1或2；并且Z表示一种或两种取代基，所述取代基独立地选自卤素；羟基；烯丙氧基；甲基；C1-C3-烷氧基，其任选被吡啶基取代；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亚甲二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基和任选被卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的苄氧基；或者备选地，W是-CH＝；并且X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y氢或基团A2-R；A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基；氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基；O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或3-甲基噻吩-2-基；n是1或2；并且Z如果n是1，其表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基；并且如果n是2，一个取代基表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基，且第二个取代基独立地选自卤素；羟基；烯丙氧基；甲基；C1-C3-烷氧基；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亚甲二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基；和它们的可药用盐。
令人惊奇地发现当在咪唑环的2-位上存在2，6-二氯苯基或-吡啶基残基时，本发明化合物由于c-met抑制作用而特殊地具有药物和抗肿瘤发生活性。
发明详述优选的与R1、R2、R3、R4和A2有关的C1-C6-烷基是甲基、乙基和丙基。
优选的与Q1、R和Z有关的C1-C6-烷氧基是甲氧基、乙氧基或异丙氧基。
优选的由R3和R4一起形成的环体系表示1-吡咯烷基-、哌啶子基-、吗啉代-或4-甲基哌嗪-1-基。
优选X＝A1-Q表示-CH2OH或-CH2-CH2-OH。
优选X＝-O-A1-Q1是-O-CH2-CH2-OH；-O-CH2-COOH或-O-CH2-CN。
Y＝A2-R的优选基团是2-羟基乙基；3-羟基丙基；2-甲氧基乙基；3-甲氧基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；(R)-3-羟基丁基；(S)-3-羟基丁基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基丙基；(CH2)3COOH；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；3-羟基-2，2-二甲基丙基；3-羟基-1-苯基丙基；3-叔丁氧基乙基；2-氨基乙基；3-氨基丙基；4-氨基丁基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨基)丙基；3-(吡咯烷-1-基)丙基；CH2COOH；(CH2)2COOH；CH(C2H5)COOH；(CH2)3COOC(CH3)3；(CH2)2-N-COOC(CH3)3；(CH2)3-N-COOC(CH3)3；(CH2)2-O-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-O-(CH2)2-NH2；(CH2)2-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-S-(CH2)3-N(CH3)2；(CH2)3-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)3-S-(CH2)3-N(CH3)2；(1，2，4-三唑-1-基)乙基；3-(1，2，4-三唑-3-基)丙基；卤素是氟、氯、溴或碘。
优选n是1，并且所述的取代基Z位于3-或4-位。如果Z表示被吡啶基取代的甲氧基；苄氧基或取代的苄氧基，则优选Z位于3-位。
特别优选的是通式(I)的化合物和它们的可药用盐，其中W是-N＝；Z选自3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基；3-(2-甲氧乙氧基)甲氧基；3-甲硫基；3-乙氧甲氧基；3，4-亚甲基二氧基或任选被卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的3-苄氧基.
还特别优选的是通式(I)的化合物，其中W是-N＝；X是氢；Y表示2-羟基乙基；3-羟基丙基；2-甲氧基乙基；3-甲氧基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；(R)-3-羟基丁基；(S)-3-羟基丁基；3-羟基-2，2-二甲基丙基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基丙基；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；3-羟基-1-苯基丙基；2-氨基乙基；3-氨基丙基；4-氨基丁基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨基)丙基；3-(吡咯烷-1-基)丙基；CH2COOH；(CH2)2COOH；(CH2)3COOH；CH(C2H5)COOH；(CH2)2-O-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-O-(CH2)2-NH2；(CH2)2-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-S-(CH2)3-N(CH3)2；(CH2)3-S-(CH2)2-N(CH3)2或(CH2)3-S-(CH2)3-N(CH3)2；n是1；并且Z选自3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基或任选被卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的3-苄氧基。
还特别优选的是通式(I)的化合物，其中W是-N＝；X是氢；Y是2-羟基乙基；3-羟基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基丙基；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；2-氨基乙基；3-氨基丙基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨基)丙基或3-(吡咯烷-1-基)丙基；n是1；并且Z选自3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基或任选被卤素、甲氧基或氰基取代的3-苄氧基。
这样的化合物例如2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-[3-羟基丙基-氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑。
本发明的另一实施方案是式(I)的化合物，其中W是-CH＝；X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自；氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y是3-羟基丙基；并且Z是任选被卤素、甲氧基或氰基取代的3-苄氧基。
本发明的再一实施方案是式(I)的化合物，其中W是-CH＝；X是氢；或OR1；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；A1表示C1-C3-亚烷基；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基；Y是3-羟基丙基；并且Z是3-苄氧基。
本发明的再一实施方案是式(I)的化合物，其中
W是-CH＝；X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y是氢或基团A2-R；A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基；氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基；O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或3-甲基噻吩-2-基；n是1；并且Z表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基。
本发明的再一实施方案是式(I)的化合物，其中
W是-CH＝；X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y是3-羟基丙基；n是1；并且Z是吡啶-2-基甲氧基；吡啶-3-基甲氧基或吡啶-4-基甲氧基。
这样的化合物例如2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑，和2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑。
式(I)表示2-(2，6-二氯苯基)-4-苯基-5-(4-嘧啶基)-1H-咪唑，这些化合物是2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-4-(4-嘧啶基)-1H-咪唑的互变异构体。两种互变异构体表示相同的结构，它们的命名可以互换，并且两种互变异构体都是本发明的一部分。本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子，并且可以以外消旋体、外消旋混合物以及单独的非对映异构体形式出现，所有可能的异构体，包括光学异构体，都包含在本发明的范围内。
通式(I)的化合物可以通过通式(VI)或(VII)的化合物与胺Y-NH2，其中W、X、Y、n和Z具有此前定义的含义，在80～180℃范围内的温度下反应，然后分离所述的化合物而制备。优选使用化学计量比量的或者过量的所述胺。反应可以在没有溶剂的情况下进行，或者在如二噁烷、二甲氧基乙烷或甲苯的溶剂中进行。
通式(VI)和(VII)的化合物可以通过氧化由通式(V)表示的硫醚的硫醚基而获得。为了获得通式(VI)的亚砜，优选使用3-氯过苯甲酸进行氧化。为了合成通式(VII)的砜，优选使用过硫酸氢钾制剂TM。
通式(V)的硫醚
可以通过通式(IV)化合物的N-脱氧而获得。这种反应优选使用溴乙酸乙酯在三乙胺存在下进行(Somei，M.和Tsuchiya，M.，Chem.Pharm.Bull.29(1981)3145-3157)。备选地，该步还原可以通过在二甲基甲酰胺中使用亚磷酸三乙酯而实现。
通式(IV)的化合物可以通过通式(III)化合物与通式(II)化合物反应而获得，其中取代基W、X和Z具有此前定义的含义。该反应是缩合反应，优选在氨存在下使用已知的用于其它醛的方法进行。
本发明的另一实施方案是采用上述方法，使用通式(II)的化合物，其中取代基X具有此前定义的含义，来制造通式(I)的化合物。
2，6-二氯苯甲醛是制造本发明通式(I)化合物的有用中间体。2，6-二氯-3-羟基苯甲醛和2，6-二氯-4-羟基苯甲醛是现有技术已知的。已经从3-羟基苯甲醛合成了2，6-二氯-3-羟基苯甲醛(Gust，R.和Schoenenberg，H.，Eur.J.Med.Chem.28(1993)103-115)，但是该方法需要使用高毒性的氯气并且由于过氧化而产生副产物。本发明中公开的方法(实施例A2)避免了这些缺点。2，6-二氯-4-羟基苯甲醛可以从3，5-二氯苯酚通过Reimer-Tiemann反应(Baldwin，J.J.等，J.Med.Chem.22(1979)687-693)或通过溴化/格氏反应顺序(WO 01/44154)制备。Reimer-Tiemann方法由于非常低的产率(＜4％)而不能经济地制备；另外，要求使用氯仿也造成了相当大的生态问题。其它已知的通过溴化/格氏反应顺序的反应总共要求4步，包括用溴进行化学计量比的溴化和使用有毒的氯甲基甲基醚来保护苯酚。另外，总产率只有40％。
本发明提供制造2，6-二氯-3-羟基苯甲醛和2，6-二氯-4-羟基苯甲醛的改进方法。该方法的特征在于，用锂碱金属化保护的2，4-二氯苯酚或3，5-二氯苯酚，接着与甲酸的酯或酰胺反应，并且去保护和分离所述化合物。合适的锂碱是甲基锂、正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂、二异丙基酰胺锂或双三甲代甲硅烷基酰胺锂，优选丁基锂。适宜的溶剂是乙醚、四氢呋喃或1，2-二甲氧基乙烷，优选四氢呋喃。金属化步骤在-100℃～-60℃、优选在-80℃～-70℃进行。合适的保护基是三异丙基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基或苯基二甲基硅烷基，优选三异丙基硅烷基。合适的甲酸衍生物是甲酸甲酯、甲酸乙酯、二甲基甲酰胺或N-甲酰哌啶，优选二甲基甲酰胺。该方法还可用于制造根据本发明的2，6-二氯-3-羟甲基苯甲醛和2，6-二氯-4-羟甲基-苯甲醛。
此前使用的术语“可药用的盐”是指保持了式(I)化合物生物效力和性质的常规酸加成盐或碱加成盐，这些盐是从合适的无毒有机或无机酸、或者有机或无机碱形成的。酸加成盐的实例包括那些衍生自无机酸的盐，所述无机酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸，以及衍生自有机酸的盐，所述有机酸如对甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，富马酸等。碱加成盐的实例包括衍生自铵，钾，钠和季铵的氢氧化物的盐，例如衍生自氢氧化四甲基铵的盐。将药物化合物(例如药物)化学改性成盐是药物化学家众所周知的技术，以得到改善的化合物的物理或化学稳定性，吸湿性，流动性或溶解度(参见例如H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems，(第6版，1995)196和1456-1457页)。
可以将式(I)化合物和式(I)化合物的可药用盐用作药物，例如以药物制剂形式用作药物。所述药物制剂可以口服，例如以片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或悬浮剂形式口服。但是，还可以进行直肠给药，例如以栓剂形式，或者可以肠胃外给药，例如以注射液形式。
可以用药学惰性的无机或有机载体加工式(I)化合物而制备药物制剂。例如，可以使用乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其盐等，作为用于片剂、包衣片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的这种载体。软明胶胶囊的合适载体为，例如植物油，蜡，脂肪，半固体和液体多元醇等。但是，根据活性物质的自身性质，软明胶胶囊通常不需要载体。制造溶液或糖浆的合适载体为，例如水，多元醇，甘油，植物油等。栓剂的合适载体为，例如天然或硬化油，蜡，脂肪，半液体和液体多元醇等。
此外，药物制剂还可以包含防腐剂，增溶剂，稳定剂，湿润剂，乳化剂，甜味剂，着色剂，食用香料，用于改变渗透压的盐，缓冲剂，掩蔽剂或抗氧化剂。它们还可以包含其他有治疗价值的物质。
含有式(I)化合物或其可药用盐和治疗惰性载体的药物也是本发明的一个目的，它们的制备方法也是本发明的一个目的，该方法包括将一种或多种式(I)化合物和/或可药用盐，以及如果需要，一种或多种其它的有治疗价值的物质，连同一种或多种治疗惰性载体一起，制成盖仑氏给药形式。
由于它们作为酪氨酸激酶抑制剂、优选c-met激酶抑制剂的活性，通式(I)的化合物是用于治疗癌症和与提高的c-met受体或相关激酶受体表达有关的其它疾病的疗法的有价值的成分。
因此，根据本发明的化合物的剂量可以在宽限度内变化，并且还必须在每个具体病例中根据个体需要调整。在口服给药的情况下，成年人的剂量的变化范围可以是从每天约0.01mg到约1,000mg的通式(I)化合物或其可药用盐的相应量。日剂量可以以单剂量或者分剂量形式给药，另外，当发现有必须治疗的迹象时，可以超过上限。
以下实施例和制备例举例说明了本发明，但是无限制其范围的含义。
实施例A取代的2，6-二氯苯甲醛的合成实施例A12，6-二氯-4-羟基苯甲醛(A1)制备3，5-二氯三异丙基甲硅烷氧基苯(A1.1)于0℃在1小时内向200g 3，5-二氯苯酚和330ml 2，6-二甲基吡啶的3.0升无水CH2Cl2溶液中加入400g三异丙基-甲硅烷基三氟甲磺酸酯，并且将混合物在此温度再搅拌3小时。在用1.0升水水解后，将有机层用饱和NaCl洗涤，MgSO4干燥，并且蒸发至干(70℃/80毫巴)。残余物置于石油醚中，并且通过二氧化硅过滤，得到360g(92％)A1.1无色油状物。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝1.03-1.15(m，18H，CH3)；1.16-1.35(m，3H，CH)；6.73-6.80(m，2H，CH芳族)；6.92-6.98(m，1H，CH芳族)13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝12.7(CH)；18.0(CH3)；119.0，121.6(CH芳族)；135.2，157.4(C芳族)。
2，6-二氯-4-羟基苯甲醛(A1)和2，6-二氯-4-三异丙基甲硅烷氧基-苯甲醛(A1.2)的制备在氮气下保持低于-65℃的温度，向360g A1.1的2.6升无水四氢呋喃溶液中加入440ml正丁基锂(2.7M己烷溶液)。在-70℃搅拌2小时后，在保持温度低于-65℃的情况下加入120ml无水二甲基甲酰胺。将混合物温热至室温过夜。在加入700ml 4M HCl后，将混合物在室温剧烈搅拌1小时。然后进行相分离(加入固体NaCl也许是必要的)，并且将有机层用硫酸钠干燥并真空缩减。沉淀物用甲苯/四氢呋喃重结晶，得到154g(70％)A1，m.p.229-230℃。
1H-NMR(250MHz，DMSO-D6)δ＝6.94(s，2H，CH芳族)；10.25(s，1H，CH＝O)，11.46(s(宽)，1H，OH)
13C-NMR(62.9MHz，DMSO-D6)δ＝117.0(CH芳族)；120.7，137.8，162.1(C芳族)；187.2(CH＝O)。
实施例A2(3，5-二氯-4-甲酰基苯氧基)乙酸乙酯(A2)的制备将2.87g(15mmol)A1、2.76g(16.5mmol)溴乙酸乙酯和2.90g(21mmol)碳酸钾在50ml无水丙酮中的混合物在60℃搅拌3小时。在过滤和除去溶剂后，残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇100∶2)。产量3.55g(86％)A2，无色固体。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝1.32(t，7.2Hz，3H，CH3)；4.30(q，7.2Hz，2H，CH2)；4.68(s，2H，CH2)；6.92(s，2H，CH芳族)；10.41(s，1H，CH＝O)。
13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝14.3(CH3)；62.1，65.5(CH2)；116.4(CH芳族)；123.8，139.2，160.9(C芳族)；167.3(C＝O)；187.8(CH＝O)。
B“Weinreb”-型酰胺的合成实施例B13-苄氧基-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B1)于10℃向136.8g(0.60mol)3-苄氧基苯甲酸的1200ml二氯甲烷悬浮液中加入60.6g(0.6mol)三乙胺。在保持10℃～15℃的温度下加入64.8g(0.60mol)氯甲酸乙酯(ethyl chloroformiate)的100ml二氯甲烷溶液，历时15分钟。在搅拌40分钟并且加入58.2g(0.60mol)N，O-二甲基羟胺盐酸盐后，于10～15℃加入60.6g(0.60mol)三乙胺溶液，历时20分钟。在另外搅拌30分钟后，加入水，并且将有机层用硫酸钠干燥。真空分馏得到131.9g(81％)B1。
MS273(API+)。
实施例B23-羟基-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B2)向100g(0.37mol)B1的750ml四氢呋喃溶液中加入10g Pd/C(10％)，并且将混合物在大气压下氢化2小时。滤出催化剂，将滤液蒸发，得到66.0g B2(98％)。
MS182(API+)，180(API-)。
实施例B33-(2-吡啶基甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B3)向1.21g(10.0mmol)B2、2.89g(11.0mmol)三苯膦和1.20g(11.0mmol)吡啶-2-甲醇的30ml无水四氢呋喃溶液中加入1.92g(11.0mmol)偶氮二羧酸二乙酯的5ml无水四氢呋喃溶液，将混合物在室温搅拌2小时。在除去溶剂后，经过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯2∶1)得到2.81g B3浅黄色油状物(72％产率，认为30mol％的氧化三苯膦杂质(由NMR测量))。由于该具体实例中杂质分离的问题，用PS-结合的三苯膦重复试验，得到58％产率的纯B3。
MSM＝273(API+)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝3.25(s，3H，CH3)；3.45(s，3H，OCH3)；5.15(s，2H，OCH2)；6.98-7.04(m，1H)；7.12-7.28(m，4H)；7.40-7.48(m，1H)；7.60-7.68(m，1H)；8.46-8.56(m，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，CDCl3)δ＝34.3(CH3)；61.5(OCH3)；71.0(OCH2)；114.9，117.6，121.3，121.8，123.2，129.7，135.9*，137.3，149.6，157.3*，158.3*(C芳族H)；169.9(C＝O)。(*＝季碳)。
实施例B43-(3-吡啶基甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B4)与实施例B3所述的反应类似，但是使用3-吡啶基甲醇进行反应，得到81％产率的B4。
MSM＝273(API+)1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝3.24(s，3H，CH3)；3.53(s，3H，OCH3)；5.20(s，2H，OCH2)；7.12-7.24(m，3H)；7.34-7.48(m，2H)；7.84-7.92(m，1H)；8.52-8.60(m，1H)；8.68-8.72(m，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，DMSO-D6)δ＝33.7(CH3)；61.1(OCH3)；67.4(OCH2)；114.1，117.3，120.5，124.0，129.7，132.8，136.1，136.2，149.5，149.6，157.9(C芳族H)；169.0(C＝O)。
实施例B53-(4-吡啶基甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B5)与实施例B3所述的反应类似，但是使用4-吡啶基甲醇进行反应，得到82％产率的B5。
MSM＝273(API+)1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝3.24(s，3H，CH3)；3.51(s，3H，OCH3)；5.24(s，2H，OCH2)；7.12-7.22(m，3H)；7.34-7.41(m，1H)；7.42-7.48(m，2H)；8.52-8.64(m，2H)。
13C-NMR(100.6MHz，DMSO-D6)δ＝33.7(CH3)；61.0(OCH3)；67.9(OCH2)；114.1，117.3，120.7，122.1，129.8，136.3，146.4，150.1，157.7(C芳族H)；169.0(C＝O)。
C“乙酮”的合成实施例C11-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C1)将2.1ml(15mmol)二异丙基胺溶解在70ml无水四氢呋喃中并冷却至-75℃，加入9.4ml的正丁基锂溶液(1.6M，15mmol)，历时10分钟。在-75℃搅拌15分钟后，于-75℃在10分钟内加入1.69g(12mmol)2-甲硫基-4-甲基嘧啶的5ml无水四氢呋喃溶液，再将混合物搅拌15分钟。然后于-75℃在10分钟内加入2.73g(7mmol)B3(70％纯度)的5ml无水四氢呋喃溶液。将混合物在-75℃搅拌1小时，然后使其温热到室温，最后倾倒在100ml乙酸乙酯/水(1∶1)中。水层用50ml乙酸乙酯萃取，并且将合并的有机层用硫酸钠干燥。真空除去溶剂，经过硅胶柱色谱(正庚烷/乙酸乙酯3∶1)得到1.52g(62％)C1。(用NMR在CDCl3中于400MHz测得的酮-烯醇比率约为30∶70)。
MSM＝352(API+)，350(API-)。
实施例C2
1-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C2)类似于实施例C1中所述的反应，但是开始于B4，得到60％产率的C2。
MSM＝352(API+)，350(API-)。
实施例C31-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C3)类似于实施例C1中所述的反应，但是开始于B5，得到55％产率的C3。
MSM＝352(API+)，350(API-)。
实施例C41-(3-苄氧基苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C4)类似于实施例C1中所述的反应，但是开始于B1，得到89％产率的C4。
MSM＝351(API+)，349(API-)。
D“酮肟”的合成实施例D11-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基-亚氨基乙酮(D1)将1.50g(4.3mmol)C1溶解在18.6ml冰醋酸(glacial acid)、15.0ml四氢呋喃和2.0ml水的混合物中。在冷却至5℃后，在保持温度在5℃～10℃之间的情况下加入353mg(5.1mmol)亚硝酸钠的3.5ml水溶液。撤去冷却，在室温下搅拌混合物2小时。在真空除去溶剂后，加入35ml水和240ml乙酸乙酯。用3N NaOH将pH调节到8。进行相分离，水层用50ml乙酸乙酯萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，并且真空除去溶剂。
产量1.61g(99％)D1。
MSM＝381(API+)，379(API-)1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝2.17(s，3H，SCH3)；5.25(s，2H，OCH2)；7.30-7.35(m，1H)；7.36-7.42(m，3H)；7.47-7.54(m，2H)；7.62-7.65(m，1H)；7.78-7.85(m，1H)；8.52-8.55(m，1H)；8.68-8.72(m，1H)；12.80(宽，1H，OH)。
13C-NMR(100.6MHz，DMSO-D6)δ＝13.6(SCH3)；70.9(OCH2)；111.7，113.8，121.6，122.0，122.1，123.4，131.0，136.4*，137.3，149.5，154.0*，156.5*，158.7，158.9*，159.3*，171.8*；193.3*(C＝O).(*＝季碳)。
实施例D21-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基-亚氨基乙酮(D2)进行与实施例C1中所述的类似的反应，但是开始于C2，得到92％产率的D2。
MSM＝381(API+)，379(API-)1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝2.19(s，3H，SCH3)；5.23(s，2H，OCH2)；7.32-7.46(m，4H)；7.46-7.56(m，1H)；7.58-7.68(m，1H)；7.84-7.92(m，1H)；8.50-8.56(m，1H)；8.64-8.72(m，2H)。
实施例D31-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基-亚氨基乙酮(D3)进行与实施例C1中所述的类似的反应，但是开始于C3，得到97％产率的D3。
MSM＝381(API+)，379(API-)1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝2.18(s，3H，SCH3)；5.27(s，2H，OCH2)；7.36-7.43(m，3H)；7.43-7.49(m，2H)；7.49-7.55(m，1H)；7.61-7.68(m，1H)；8.54-8.63(m，2H)；8.68-8.74(m，1H)；12.78(s，1H，OH)。
实施例D41-(3-苄氧基苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基亚氨基乙酮(D4)进行与实施例C1中所述的类似的反应，但是开始于C4，得到86％产率的D4。
MSM＝380(API+)，378(API-)1H-NMR(250MHz，DMSO-D6)δ＝2.19(s，3H SCH3)；5.17(s，2H，OCH2)；7.24-7.53(m，9H)；7.59-7.69(m，1H)；8.63-8.72(m，1H)；12.83(宽，1H，OH)。
13C-NMR(62.9MHz，DMSO-D6)δ＝13.6(SCH3)；69.9(OCH2)；111.7，113.7，121.6，122.1，128.1，128.3，128.8，130.9，136.5*，136.9*，154.0*，158.6，159.1*，159.4*，171.8*；193.5*(C＝O).(*＝季碳)。
E“N-羟基咪唑”的合成实施例E12-(2，6-二氯-4-[乙氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E1)将1.60g(4.2mmol)D1、1.40g(5.0mmol)A2和3.25g(42mmol)乙酸铵在40ml乙酸中的混合物在105℃搅拌3.5小时。蒸馏除去溶剂，将残余物在40ml冰水和60ml乙酸乙酯之间分配，并且用浓氨水调节到pH8。水层用乙酸乙酯萃取，将合并的有机层用MgSO4干燥并且蒸发至干，得到3.60g浅棕色缓慢凝固的油状物，该油状物不经进一步纯化直接用于下一步骤(实施例F1)。
MSM＝638(API+)，636(API-)。
实施例E22-(2，6-二氯-4-[乙氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E2)进行与实施例E1中所述的类似的反应，但是开始于D2，得到橙色油状的E2。
MSM＝638(API+)，636(API-)。
实施例E32-(2，6-二氯-4-[乙氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E3)进行与实施例E1中所述的类似的反应，但是开始于D3，得到黄色固体E3。
MSM＝638(API+)，636(API-)。
实施例E42-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E4)进行与实施例E1中所述的类似的反应，但是开始于D4和3，5-二氯吡啶-4-甲醛(J.Med.Chem.44(2001)997)，得到E4橙色固体。
MSM＝536(API+)，534(API-)。
F“N-H咪唑”的合成实施例F12-(2，6-二氯-4-[甲氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F1)将3.59g(4.2mmol)E1、1.41g(8.4mmol)溴乙酸甲酯和2.85g(28mmol)三乙胺在80ml甲醇中的混合物于60℃搅拌过夜。在真空除去溶剂后，经过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/异己烷3∶1)得到2.08g(81％)纯F1(甲醇中的酯交换)。
MSM＝608(API+)，606(API-)。
实施例F22-(2，6-二氯-4-[甲氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F2)进行与实施例F1中所述的类似的反应，但是开始于E2，得到65％F2。
MSM＝608(API+)，606(API-)。
实施例F32-(2，6-二氯-4-[甲氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F3)进行与实施例F1中所述的类似的反应，但是开始于E3，得到66％F3。MSM＝608(API+)，606(API-)。
实施例F42-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F4)于0℃向在氮气下的2.07g(3.3mmol)F1的50ml无水THF溶液中加入LiAlH4(1M THF溶液)，直至用HPLC检测不到F1。在用0.5ml水进行水解并除去溶剂后，将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇9∶1)，得到93％F4。
MSM＝580(API+)，578(API-)。
实施例F52-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F5)进行与实施例F4中所述的类似的反应，但是开始于F2，得到64％F5。MSM＝580(API+)，578(API-)。
实施例F62-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F6)进行与实施例F4中所述的类似的反应，但是开始于F3，得到69％F6。MSM＝580(API+)，578(API-)。
实施例F72-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F7)进行与实施例F1中所述的类似的反应，但是开始于E4，得到66％F7。
MSM＝520(API+)，518(API-)。
G“N-H咪唑锍”和“N-H咪唑砜”的合成实施例G12-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲基亚磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G1)在-40℃向1.20g(2.1mmol)F4在300ml乙酸乙酯和50ml二氯甲烷中的溶液中加入0.70g(3.1mmol)间氯过苯甲酸的20ml乙酸乙酯溶液，历时10分钟。在此温度下1小时后，使混合物温热至室温并且搅拌过夜。洗涤混合物(饱和NaHCO3水溶液/饱和Na2CO3水溶液1∶1)，MgSO4干燥并且蒸发至干，得到1.21g G1粗品，其不经进一步纯化直接使用。
MSM＝596(API+)，594(API-)。
实施例G22-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲基亚磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G2)进行与实施例G1中所述的类似的反应，但是开始于F5，得到G2。
MSM＝596(API+)，594(API-)。
实施例G32-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲基亚磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G3)进行与实施例G1中所述的类似的反应，但是开始于F6，得到G3。
MSM＝596(API+)，594(API-)。
实施例G42-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G4)将2.38g(4.6mmol)F7悬浮在200ml甲醇中，在室温下于20分钟内加入5.62g(9.1mmol)OxoneTM溶液。在室温下搅拌过夜后，真空除去甲醇，将残余物置于乙酸乙酯中。有机层用NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4干燥并且蒸发至干。粗的G4(47％)不经进一步纯化直接使用。
MSM＝552(API+)，550(API-)。
H“N-H咪唑氨基嘧啶”的合成实施例H12-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H1)将1.21g(2.0mmol)G1和3.1g(40.6mmol)3-氨基-1-丙醇加热到110℃60分钟。采用制备型HPLC/MS，在RP18(甲醇-水-梯度)上纯化，得到510mg(42％)H1。
MSM＝607(API+)，605(API-)。
实施例H22-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H2)进行与实施例H1中所述的类似的反应，但是开始于G2，得到50％H2。
MSM＝607(API+)，605(API-)。
实施例H32-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H3)进行与实施例H1中所述的类似的反应，但是开始于G3，得到32％H3。
MSM＝607(API+)，605(API-)。
实施例H42-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-[3-羟基丙基-氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H4)进行与实施例H1中所述的类似的反应，但是开始于G4，得到68％H4。
MSM＝547(API+)，545(API-)。
实施例Jc-met自活化激酶试验(AKA)试验原理C-met是涉及肿瘤转移、增殖/凋亡和血管生成的典型酪氨酸激酶。该试验是使用磷酸-酪氨酸特异性抗体测量c-met的磷酸化的ELISA型试验。
将已知具有高c-met含量的人结肠腺癌HT29的细胞溶解产物通过抗-hHGF受体抗体(抗-hHGFR)结合到微量滴定板(MTP)的孔中。使用磷酸-酪氨酸小鼠IgG和POD标记的山羊抗-小鼠IgG检测体系，在测试化合物存在或不存在下，检测c-met的ATP-磷酸化。使用传统的POD底物TMB，使用450nm/620nm的吸收来计算酶活性。
材料板96孔聚苯乙烯板(NUNC)链菌抗生素-涂布的微量滴定板细胞系/溶胞产物HT29(ATCC HTB-38)，将人结肠腺癌(汇合2.5×105细胞/cm2)用PBS洗涤，并且在冰上用溶胞缓冲液温育10分钟。收集上清液，用TBS稀释。溶胞产物在液氮中速冻，在-80℃储存。
试剂(除非另外声明，所有工作溶液都保持在4℃)抗-hHGFR检测储液50μg/ml(R&D Systems，Cat.No.BAF 358)抗体最终浓度1μg/mlp-Tyr(PY99)小鼠储液200μg/ml(Santa Cruz Biotechnology，单克隆IgG2bCat.No.SC-7020)最终浓度0.2μg/ml山羊-抗-小鼠IgG2ml(BIO RAD，Cat.No.170-6516)，(H+L)-HRP共轭物；最终浓度1∶2000封闭试剂用于ELISA的Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.1112589，以1∶10稀释在TBS中ATP腺苷-5’-三磷酸，储液10mM，储液10mM(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.127531)，最终浓度40μMTBSTris-缓冲的盐水，50mM TRIS pH 7.5(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.708976)，150mM NaCl(SIGMA，Cat.No.S-3014)洗涤缓冲液TBS-TTris-缓冲的盐水，50mM TRIS pH 7.5 150mM NaCl，含0.5％吐温20激酶缓冲液Tris-缓冲的盐水，50mM TRIS pH 7.5，100mM NaCl，60mMMgCl2(SIGMA Chemical Company，Cat.No.M-1028)溶胞缓冲液50mM TRIS pH 7.5，含1％Nonidet P40(Roche DiagnosticsGmbH，Cat.No.1754599)0.5％脱氧胆酸(SIGMA Chemical Company，Cat.No.D-6750)，最终浓度1mM 1mM PMSF储液70mM(Roche DiagnosticsGmbH，Cat.No.83709140μl/ml Complete(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.1836145)，最终浓度40μl/mlTMB四甲基联苯胺(Intergen Company，Cat.No.91000)样品10mM DMSO溶液(于-20℃储存)，室温解冻。
程序1.将50μl抗-hHGFR检测抗体的封闭试剂溶液加入至试验板上(最终浓度1μg/ml)，在MTP振荡器上于室温温育试验板60分钟。
2.从试验板上除去抗-hHGFR检测抗体溶液。
3.向试验板每孔加入250μl封闭试剂，在4℃温育试验板20小时。
4.从试验板上除去封闭试剂。
5.加入50μl HT29溶胞产物，在MTP振荡器上于4℃温育试验板180分钟。
6.用每孔2×200μl TBS缓冲液的量洗涤试验板。
7.向试验板加入40μl在激酶缓冲液中的0.2％DMSO。
8.加入40μl样品溶液(溶解在激酶缓冲液中-最终浓度22.5μM)。
9.将样品溶解在MTP中(1∶3比率)。
10.将10μl溶解在激酶缓冲液中的ATP(200μM)加入到样品中(最终浓度40μM ATP)。阳性对照加入40μl激酶缓冲液+10μl 200μM ATP。阴性对照加入40μl激酶缓冲液+10μl不含ATP的激酶缓冲液。在MTP振荡器上于室温温育试验板60分钟。
11.用每孔2×200μl TBS缓冲液和2×200μl封闭液的量洗涤试验板。
12.将50μl P-Tyr(PY99)小鼠单克隆IgG2b的封闭试剂溶液(最终浓度200ng/ml)加入到试验板，在MTP振荡器上于4℃温育试验板过夜。
13.用每孔2×200μl TBS缓冲液和2×200μl封闭试剂的量洗涤试验板。
14.加入50μl山羊抗-小鼠IgG(H+L)-HRP共轭物的封闭试剂溶液(1∶2000比率)，在MTP振荡器上于室温温育试验板60分钟。
15.用每孔6×200μl TBS-T缓冲液的量洗涤试验板。
16.加入50μl TMB溶液，在MTP振荡器上于室温温育30分钟，加入25μl 1M H2SO4。
17.测量450nm/620nm处的光密度(E)。
18.如下计算％抑制率1-[(E样品-E阴性对照)/(E阳性对照-E阴性对照)×100]
当用上述试验测试时，本发明试剂的激酶抑制的典型IC50值范围为约1nM～约100nM
实施例K片剂配方(湿法造粒)项目 成分 mg/片1.式(I)化合物 5 25 1005002.乳糖无水DTG 12510530 1503.Sta-Rx1500 6 6 6 304.微晶纤维素 30 30 30 1505.硬脂酸镁1 1 1 1合计 167167167831制造方法1、混合1、2、3和4项，并用纯水造粒。
2、在50℃下干燥颗粒。
3、让颗粒通过合适的磨粉设备。
4、加入第5项并混合3分钟；在合适的压力机上压缩。
实施例L胶囊配方项目 成分 mg/胶囊1.式(I)化合物 5 25 100 5002.含水乳糖159123 148 ---3.玉米淀粉25 35 40 704.滑石10 15 10 255.硬脂酸镁1 2 2 5合计 200200 300 600制造方法1、在合适的混合器中混合1、2、和3项30分钟。
2、加入4和5项并混合3分钟。
3、填充到合适的胶囊中。
参考文献目录Abounader，R.等，J.Natl.Cancer Inst.91(1999)1548-1556Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，第六版，(1995)，196和1456-1457页Baldwin，J.J.等，J.Med.Chem.22(1979)687-693Blume-Jensen，P.和Hunter，T.，Nature 411(2001)355-365Gust，R.和Schoenenberg，H.，Eur.J.Med.Chem.28(1993)103-115Herynk，M.H.和Radinsky，R.，In Vivo 14(2000)587-596Hubbard，S.R.等，J.Biol.Chem.273(1998)11987-11990Jiang，W.等，Crit.Rev.Oncol.Hematol.29(1999)209-248J.Med.Chem.44(2001)997Laterra，J.等，Lab.Invest.76(1997)565-577Longati，P.等，Curr.Drug Targets 2(2001)41-55Maulik，G.等，Cytokine Growth Factor Rev.13(2002)41-59Parr，C.和Jiang，W.G.，Histol.Histopathol.16(2001)251-268Somei，M.和Tsuchiya，M.，Chem.Pharm.Bull.29(1981)3145-3157Tomioka，D.，Cancer Res.61(2001)7518-7524Wang，R.等，J.Cell Biol.153(2001)1023-1033WO 01/44154WO 96/18626Zwick，E.等，Trends Mol.Med.8(2002)17-23。
权利要求
1.一种通式(I)化合物， 其中W是-N＝；并且X是氢；Y是氢或基团A2-R；A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基；氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基；O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或3-甲基噻吩-2-基；n是1或2；并且Z表示一种或两种取代基，所述取代基独立地选自卤素；羟基；烯丙氧基；甲基；C1-C3-烷氧基，其任选被吡啶基取代；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亚甲二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基和任选被卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的苄氧基；或者备选地，W是-CH＝；并且X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y是氢或基团A2-R；A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基；氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基；O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或3-甲基噻吩-2-基；n是1或2；并且Z如果n是1，其表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基；并且如果n是2，一个取代基表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基，且第二个取代基独立地选自卤素；羟基；烯丙氧基；甲基；C1-C3-烷氧基；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亚甲二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基；和它们的可药用盐。
2.权利要求1的化合物，其中W是-N＝；X是氢；Y表示2-羟基乙基；3-羟基丙基；2-甲氧基乙基；3-甲氧基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；(R)-3-羟基丁基；(S)-3-羟基丁基；3-羟基-2，2-二甲基丙基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基丙基；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；3-羟基-1-苯基丙基；2-氨基乙基；3-氨基丙基；4-氨基丁基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨基)丙基；3-(吡咯烷-1-基)丙基；CH2COOH；(CH2)2COOH；(CH2)3COOH；CH(C2H5)COOH；(CH2)2-O-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-O-(CH2)2-NH2；(CH2)2-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-S-(CH2)3-N(CH3)2；(CH2)3-S-(CH2)2-N(CH3)2或(CH2)3-S-(CH2)3-N(CH3)2；n是1；并且Z选自3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基或任选被卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的3-苄氧基。
3.权利要求1的化合物，其中W是-N＝；X是氢；Y是2-羟基乙基；3-羟基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基-丙基；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；2-氨基乙基；3-氨基丙基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨基)丙基或3-(吡咯烷-1-基)丙基；n是1；并且Z选自3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基或任选被卤素、甲氧基或氰基取代的3-苄氧基。
4.权利要求3的化合物，其为2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-[3-羟基丙基-氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑。
5.权利要求1的化合物，其中W是-CH＝；X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基-乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y是氢或基团A2-R；A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基；氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基；O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或3-甲基噻吩-2-基；n是1；并且Z表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基。
6.权利要求1的化合物，其中W是-CH＝；X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；A1表示C1-C3-亚烷基；Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；R1选自氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3-二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基-乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；-CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或NR3R4；R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；R3，R4独立地选自氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；Y是3-羟基丙基；n是1；并且Z是吡啶-2-基甲氧基；吡啶-3-基甲氧基或吡啶-4-基甲氧基。
7.权利要求6化合物，其为2(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)-苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑，2(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)-苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑，或2(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)-苯基)-5-(2-[3-羟基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑。
8.一种制造权利要求1的化合物的方法，其中a)通式(VI)的化合物 或(VII)的化合物 是通过氧化通式(V)表示的硫醚的硫醚基而获得的， 通式(V)的硫醚是通过通式(IV)化合物的N-脱氧而获得的， 其中所述的通式(IV)化合物是由通式(II)的化合物 与通式(III)的化合物的反应获得的， 和b)将所述的式(VI)或(VII)化合物与式Y-NH2的化合物反应，得到式(I)的化合物；并且取代基W、X、Y和Z以及n具有权利要求1所给出的含义。
9.一种组合物，含有一种或多种如权利要求1～8中的一项所述的化合物和合适的佐剂。
10.一种药物组合物，含有一种或多种作为活性成分的如权利要求1～8中的一项所述的化合物和可药用佐剂。
11.一种或多种如权利要求1～8中的一项所述的化合物用于制造药物的用途，所述药物用于治疗由c-met激酶介导的疾病。
12.一种或多种如权利要求1～8中的一项所述的化合物用于制造治疗癌症用药物的用途。
13.一种或多种如权利要求1～8中的一项所述的化合物用于治疗癌症的用途。
14.一种治疗患者的癌症的方法，其特征在于将药学有效量的一种或多种如权利要求1～13中的一项所述的化合物向患者给药。
全文摘要
通式(I)的化合物是有价值的用于治疗癌症和癌症相关疾病的疗法。
文档编号C07D239/00GK1867561SQ200480030576
公开日2006年11月22日 申请日期2004年10月15日 优先权日2003年10月16日
发明者T·冯希施海特, E·福斯 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司