专利名称：：纳斯他汀钠和相关化合物的合成的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一些化合物，和合成一些化合物的方法，其中所述化合物显示出针对癌细胞系的抗肺瘤活性，且由此预期可用于动物和人类中各种形式的癌症的治疗.发明概述本发明涉及化合物水仙环素(2a)和7-脱氧-水仙环素(2c)的用途，其通过从药用植物水仙(Narcissus)种(石蒜科(Amaryllidaceae))中分离而获得，作为新合成方法中的前体，其中将这些化合物的每一种选择性氢化以制得反式-二氢-水仙环素(la)和7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(lc)。本文中还描述了由水仙环素(2a)制备纳斯他汀(narcistatin)钠(ll)的新合成方法。本文中还描述了一些新的3，4-环状磷酸盐前药，包括7-脱氧纳斯他汀钠(8)、7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钠(9)和反式-二氢-纳斯他汀钠(10)。本发明涉及化合物水仙环素(2a)和7-脱氧-水仙环素(2c)的用途，所述化合物通过从一些水仙(石蒜科)中分离而获得，作为新和非显而易见的合成方法中的前体，通过该方法可以将这些化合物的每一种选择性氢化以制得反式-二氢-水仙环素(la)和7-脱氧-反式-二氩-水仙环素(lc)。图1显示了本文中所述化合物的结构式；图2显示了用于合成本发明的一些化合物的反应方案。发明详述材料和方法从自然中发现的物质如植物中分离新的化合物和制造这些化合物的衍生物，是对于具有药用实用性的化合物的研究的活跃领域.本文中所述的为这种"天然"化合物的合成方法、和其在其它化合物的合成中的用途方法，许多该化合物显示作为抗肿瘤活性药物的前景.从中国的药用植物葱兰(ZephyranthesCandida)(石蒜科)的1982采集物(球茎)中分离出了强(EDs。0.0032ng/ml)P388淋巴细胞性白血病细胞生长抑制剂反式-二氢-水仙环素(la)(PettitG.R.，etal.，Antineoplastic162.ZephyranthesCandida.J.Nat.Prod.53:176-178;1990),通过其全乙酸酯衍生物(lb)的详细光谱分析确定了结构，且通过与催化氩化水仙环素(2a)的产物比较得到了证实(Mondon，A,，etal.，ZurKenntnisdesNarciclasins，ChenhBer.108:445-463;1975).氢化作用获得了作为主要产物的预期的顺式-二氢-水仙环素(3a)，伴随有反式异构体(la)和异-水仙环素(4a)。最近，发现对于癌细胞系的美国国家癌症研究所(NCI)组，反式-二氢-水仙环素(la)显示强的癌细胞生长抑制作用(平均组(meanpanel)GI5。12.6nM),但是其顺式异构体(3a)仅为极弱活性(平均组GI5。3800nM)(Pettit，G.R.，etal"Antineoplasticagents256.CellgrowthinhibitoryisocarbostyrilsfromHymenocallis.J.Nat.Prod.56:1682-1687;1993)。重要地，相对于(+)-pancratistatin(5)等于1.00，反式异构体(la)获得的活性比较相关系数为0.92(Pettit，G丄，etal.,Antineoplasticagents256.CellgrowthinhibitoryisocarbostyrilsfromHymenocallis.J.Nat.Prod.56:1682-1687;1993)。反式异构体(la)还显示了针对多种RNA病毒的强活性，但是合成的顺式异构体(3a)是完全无活性的(Gabrielsen,B.，etal.，Antiviral(RNA)activityofselectedAmaryllidaceaeisoquinolineconstituentsandsynthesisofrelatedsubstances.J.Nat.Prod.55:1569-1581;1992)。已从Narcissusimcomparabilus的球茎中分离出7JC仙环素(2a)，且从Tempe，Arizonad的ASU-CRI研究组(现在theArizonaBiodesignInstitute的一部分)种植的掩蛛兰(Hymenocallislittoralis)的球茎中分离出7-脱氧-水仙环素(2c)和7-脱氧-二氢-水仙环素(lc)(Piozzi，F.，etal"NarciclasineandNarciprimine.Tetrahedron.24:1119-1131;1968)，(Pettit，G.R.，etal.，Antineoplasticagents256.CellgrowthinhibitoryisocarbostyrilsfromHymenocallis.J.Nat.Prod.56:1682-1687;1993).将所有溶剂再蒸馏，且试剂购自Lancaster,Sigma-AldrichCo.和AerosChemicalCo..反应进程利用Analtech硅胶GHLFUniplates通过薄层色谦法来确定，在长-和短-波UV辐射下显现和在磷钼酸试剂(Sigma-AldrichCo.)的乙醇溶液中显影.使用E.Merck的硅胶60(230-400目)进行柱色谱。首先用甲醇、1N盐酸和去离子水洗提Dowex50WX8-400阳离子交换树脂(H+)形式。通过用1N适宜碱溶液并随后是去离子水洗提，制备该树脂的阳离子形式。所有的反应产物均为无色固体，除非例外指出，所有的熔点是采用电热数字熔点装置型号IA9200测量且并未校正。合成反式-二氢-水仙环素(la)的方法2，3，4，7-0-四乙酰氣基-水仙环素(2b)化合物2b如下来制备。往吡啶(3ml，氮气下)中水仙环素(1.00g,3.25mmol)的搅拌溶液中，加入乙酸酐(6ml).在室温下搅拌16小时，将冰(50ml)加到混合物中，并用二氯甲烷(3x20ml)提取。将结合的提取液在MgSO,之上干燥，过滤和在真空中蒸发，由此获得浅棕色粉末状的2，3，4，7-0-四乙酰氧基-水仙环素(2b)(1.4g，90%产率)。2，3，4，7-四乙酰氧基-反式-水仙环素(lb)制备lb的方法1在冰乙酸(120ml)中的水仙环素四乙酸酯(2b)(0.97g，20.42咖ol)的溶液中，加入5。/。Pd/C催化剂(0.56g，26mol%)。在氢气气氛室温下搅拌混合物3小时，并随后将溶液过滤，如通过槽式过滤纸。将滤液在MgS04之上干燥，再次过滤和在真空中蒸发。通过色谦柱在硅胶上用0.5%二氯甲烷中的甲醇洗提来纯化残留物，由此获得粉末状产物(lb)(0.290g,30%)，一起还有固体的顺式-二氩-全乙酸酯(3b)(0.60g，62%)。通过NMR数据的对比分析lb发现，其与真实样品相同(PettitG.R.，etal.，Antineoplastic162,ZephyranthesCandida.J.Nat.Prod.53:176-178;1990)。制备lb的方法2在乙醇/二氯甲烷的1:1混合物中的水仙环素四乙酸酯Ub)(0.200g，0.42mmol)的溶液中,加入10%Pd/C催化剂(0.004g，0.042mmol)。在1atm的氢气下室温下搅拌混合物4小时。随后通过硅胶垫将反应混合物过滤并在真空中除去溶剂.随后通过色谱柱(快速硅胶柱，洗提液45:55正己烷-EtOAc)将残留物纯化，由此获得固体的反式-二氢-全乙酸酯(lb)(0.131g，65%)，一起还有固体的顺式-二氬-全乙酸酯(3b)(0.050g，25%).反式-二氢-水仙环素(la)将2，3,4，7-0-四乙酰氧基-反式-二氢-水仙环素(lb)(0.512g,1.07mmol)溶解于甲醇水(9:1)(20ml)中，且加入二氯甲烷(12ml)以帮助溶解。加入碳酸钾(O.009g,0.06mmol)并将反应混合物在室温下搅拌3天。TLC(CH2C12:CH30H4%)显示彻底转化为产物。将反应混合物浓缩并通过色谱柱在硅胶上纯化残留物，由此获得无定形固体的(CH2C12:CH30H4%)(la)(0.134g,40%),熔点260°C(dec.)、285。C(熔融)。3，4-异亚丙基-7-脱氧水仙环素(2e)最初，将7-脱氧-水仙环素(2c)(0.205g，0.704mmol)和TsOH(O.133g，0.704mmol)溶解于DMF(10ml)并加入2、2'-二甲氧基丙烷(0.864ml,7.04mmol)。将获得的溶液搅拌16小时并随后倒入水(50ml)中，并用乙酸乙酯(4x30ml)提取。将结合的有机相干燥(MgS04),过滤和在真空中浓缩，由此获得浅黄色固体，通过柱色镨(快速硅胶柱，洗提液3:7正己烷-EtOAc)分离获得固体产物2e(0.215g，92%),从甲醇中重结晶为针状。2-[叔丁基-l，l-二甲基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氣-水仙环素(2f)往DMF(3ml)中的3，4-异亚丙基-7-脱氧水仙环素(2e，0.024g，0.0725mmol)中加入TBDMSCI(0.016g，0.109mmol)和咪唑(0.007g，0.109mmo1)。将获得的溶液搅拌5小时并在真空中除去DMF，由此获得浅黄色油。通过色谱柱(快速硅胶柱，洗提液3:2/正己烷-EtOAc)分离该残留物以获得固体的甲硅烷基醚(O.028g，87%):熔点269°C。2-[叔丁基-l，l-二甲基曱硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(ld)往乙醇和二氯曱烷的1:1混合物(8ml)中的2-[叔丁基-l，l-二甲基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-水仙环素(2f，0.050g,0.112咖ol)的溶液中加入10。/。Pd/C(1.2mg，0.0112咖o1)。将获得的混合物在1atm的氢气下搅拌4小时并随后通过硅胶短柱，用乙酸乙酯洗提。在真空中除去溶剂获得固体。通过色镨柱(重力，硅胶；洗提液7:3/正己烷-EtOAc)分离残留物，由此获得固体(0.028g,56%):熔点181.5-182.5°C。还分离出固体的2-[叔丁基-l，l-二甲基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-顺式-二氢-水仙环素(3c)(0.013g，26%):熔点237.5-238.5。C。分离的第三种次要组分为固体的2-[叔丁基-1，1-二曱基甲硅烷基〗氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-异-二氢-水仙环素(4c)(0.005g，10%):熔点246.5-248.0°C。7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(lc)将2-[叔丁基-l，1-二曱基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(O.02g，0.045mmol)溶解于四氢吹喃(2ml)中并在室温下加入甲酸(60%)(2ml)。将反应混合物加热到60。C下3小时。TLC(乙酸乙酯15%:己烷)显示彻底转化为更慢运动的产物。将反应混合物浓缩为白色残留物，通过硅胶快速柱色谦(CH2Cl2:CH30H10%)进行纯化以获得白色固体(13.1mg，71.4%):熔点230°C。^腿R(300MHz，DMSO-(U显示仍存在甲硅烷基瞇，其通过HRMS得到证实，对于C2。H3。N06Si(M+H)+计算的APCI+-408.1842,发现m/z=408.1845。无需进一步纯化将该材料带到曱硅烷基醚脱保护步骤。将2-[叔丁基-1,l-二甲基甲硅烷基]氣基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(0.037g，0.09鴯ol)溶解于四氢呋喃(5ml)中，并加入四丁基氟化铵(TBAF)(0.Olml，0.01咖ol)和将反应混合物在室温下在氩气下搅拌。6小时之后TLC(CH33OH10。/。；CH2C12)显示起始材料未彻底转化为产物，因此加入TBAF(0.1ml,0.1mmol)并将反应继续进行24小时，24小时之后加入额外的TBAF(0.lml，0.l,ol)。将反应混合物搅拌5天。加入乙酸乙酯(35ml)并用盐水(25ml)洗涤有机相，用MgS04干燥，过滤和真空中浓缩为黄色油。将该油在四氬呋喃中吸收，并在硅胶柱上利用CH2C12:CH30H10%-CH2C12:CH3OH30%的梯度洗提液洗提。分离出白色固体的产物，13.4mg，50%,且^NMR等同于7-脱氧-反式-二氢-水仙环素的天然样品(Gabrielsen，B.，etal.，Antiviral(RNA)activityofselectedAmaryllidaceaeisoquinolineconstituentsandsynthesisofrelatedsubstances.J.Nat.Prod.55:1569-1581;1992)。官能团如羟基、酯和酰胺经常定向氩化作用的立体化学。烯丙基醇的均质氢化作用经常高立体选择性地发生。用于该羟基指引的氢化作用的催化剂经常包括Wilkinson催化剂(6)[RhCI(PPh3)3]和Crabtree催化剂(7)[Ir(COD)(Pcy3)(py)]PF6(8)。随后，在二氯甲烷中用Crabtree催化剂(7)处理以其丙酮化合物(2d)保护的水仙环素，但是未能获得任何氢化产物(Mondon，A.，etal.，ZurKenntnisdesNarciclasins.Chem.Ber.108:445-463;1975)。还尝试了利用Wilkinson催化剂(6)在曱苯中的反应，且再次水仙环素丙酮化物(2d)抵制氢化作用。釆用证实即使在强制条件下对利用Wilkinson催化剂(6)的氢化作用无反应性的相关三取代的苯乙烯，当首先转化为其烷氧基化物时成功地将其氢化。这唯一地产生顺式异构体(Thompson,H.W.，etal.，Stereochemicalcontrolofreductions.IV.Controlofhydrogenationstereochemistrybyintramolecularanioniccoordinationtohomogeneouscatalysts.J.Amer.Chem.Soc.96:6232-6233;1974).当使用水仙环素丙酮化物(2d)时该线路是不成功的。不期望受理论限制，由于认为该反应与烯烃将不共享的电子对贡献给催化剂金属的未填充表面轨道的能力相关，所以水仙环素中双键可能阻碍性过大以致于不能实现这种类型的羟基定向的氢化作用(Thompson,H.W.Stereochemicalcontrolofreductions.Thedirectiveeffectofcarbomethoxyvs.hydroxymethylgroupsincatalytichydrogenation.J.Org.Chem.36:2577-2581;1971)。由此，接下来关注于离子氢化作用。有趣地，在我们的实验中，水仙环素(2a)和衍生物(2b)与(2d)抵制在二氯甲烷中在-75。C下和在25°C下使用三乙基硅烷/三氟乙酸的氢化作用。利用Adam催化剂在乙醇中氢化水仙环素(2a)获得下列通常获得28%的反式异构体(1&),一起还有58%的顺式异构体3a和13%的异-水仙环素(4a)(Mondon，A，，etal.，ZurKenntnisdesNarciclasins.Chem.Ber.108:445-463;1975)。在5%Pd/C(20mol%)的存在下在latm下和各种溶剂中进行水仙环素全乙酸酯(2b)的氢化乙酸乙酯、乙醇、乙酸、己烷、四氩呋喃、吡啶和二曱基甲酰胺(Thompson,H.W.，etal.，Stereochemicalcontrolofreductions.5.Effectsofelectrondensityandsolventongrouphaptophilicity.J.Org.Chem.41:2903—2906;1976)，(0kamoto，T.，etal.，Lycoricidinolandlycoricidine.NewplantgrowthregulatorsinthebulbsofLycorisradiataHerb.Chem.Pharm.Bull.16:1860-1864;1968),(Immirzi，A.，etal.，Thecrystalandmolecularstructureofnarciclasinetetra-acetate.J.Amer.Chem.Soc.240-240;1972)。结果示于表I中。表I溶剂对水仙环素全乙酸酯(2b)氢化作用的影响，采用5%Pd/C(20mo"/0在latm下，25°C，2小时产物<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>'通过111NMR确定的数值，6用55mol。/。的Pd/C增加到57%，但是用lOOmol%的Pd/C降低到49%,'采用10。/。Pd/C(10。/。mol)的反应中分离的产率反式顺式异的比例通过力-NMR确定且基于100%的起始材料转化为产物。采用乙酸作为溶剂且小规模(约0.020g的水仙环素全乙酸酯)进行反应时，观察到最佳比例分别为51:47:2。该反应的放大显示差别^f艮大的结果。当将5g水仙环素在5%Pd/C(8mol。/。)的存在下在乙酸中氢化20小时时，仅回收到起始材料。当将lg水仙环素全乙酸酯利用10%Pd/C(25.8mol。/。)进行氢化时，在硅胶上色谦后分别分离出30%和62%产率的反式和顺式产物。当在10%Pd/C(10mol。/。)的存在下氢化水仙环素四乙酸酯(2b)(200mg)时溶剂体系二氯曱烷乙醇(l:l)获得了良好结果。色谦之后反式的产率为65%。通过在硅胶上柱色镨分离全乙酰基化的异构体(lb)、(3b)和(4b)。通过与真实样品的详细光语数据对比确定合成的反式异构体(lb)的结构(PettitG.R.,etal.,Antineoplastic162.ZephyranthesCandida.J.Nat.Prod.53:176-178;1990)。合成7-脱氧-反式-二氩-水仙环素(lc)的方法已开发出将2b氢化为lb的方法，寻找类似的方法以将7-脱氧-水仙环素(2c)互变为7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(lc)。这点通过最初将顺式二醇单元以其丙酮化物(2d)形式以良好产率(92%)保护得到实现。将剩余的羟基以其曱硅烷基醚(2f)形式保护，由此避免在尝试氢化水仙环素丙酮化物(2d)时已遇到的潜在问题。采用控制之中的甲硅烷基醚，利用全乙酸酯2b还原为反式-二氩全乙酸酯(lb)中最成功的条件尝试烯烃的氢化。在(2f)(0.05g)的乙醇/二氯甲烷(1:1)中在1atm下用10%Pd/C(10mol%)氬化获得了产率分别为56%:26%:10%的反式顺式异的可分离的混合物。但是，该反应在扩大时变化且当在2g级别下进行反应时反式的产率降低到27%。通过利用甲酸(60%)脱保护丙酮化物并随后用TBAF脱保护甲硅烷基醚以获得lc，获得合成的反式异构体(ld),发现其等同于7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(ld)的真实样品(Gabrielsen,B.，etal.，Antiviral(RNA)activityofselectedAmaryllidaceaeisoquinolineconstituentsandsynthesisofrelatedsubstances.J.Nat.Prod.55:1569—1581;1992)。如下所述，纳斯他汀钠(11)的合成得到改进(88%总产率)且利用改进的反应顺序来合成7-脱氧-纳斯他汀钠(8)、7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钠(9)和反式-二氬-纳斯他汀钠(10)。由通过来自相同来源的水仙环素(2a)的园艺生产或还原获得的蜘蛛兰的球茎中分离出人类癌细胞系抑制性的异喹诺酮(isocarbostyril)前体。溶剂在使用之前蒸馏且将吡啶在氢氧化钾之上干燥和蒸馏。三种新的3，4-环状磷酸盐前药(8、9和10),其合成方法在下面进一步详细地讨论，对其评价以进一步开发作为抗癌药物。合成纳斯他汀钠(11)的方法利用磷酸二氢四丁基铵(O.075g,0.22mmol)和二环己基碳二亚胺(0.4g,1.94mmol)在吡啶(4ml)中进行从水仙环素(2a)(0.113g，0.368mmol)合成3，4-环状磷酸盐11，在约80°C下搅拌约最初24小时之后加入额外量的磷酸二氢四丁基铵(O.185g)和二环己基碳二亚胺(0.4g)。将反应搅拌约96小时，冷却并过滤以除去沉淀的二环己基脲(DCU)。加入水(IOOml)并将混合物过滤以除去任意残留的DCU。将母液浓缩到最小体积。将含水部分通过离子交换柱(钠形式)洗提。将UV活性部分结合并冻干(lypholize)以制得乳白色固体的磷酸盐11(88%产率)。除了通过钠形式的离子交换柱洗提含水部分之外，可以采用另一适宜盐形式(如钾或锂)来制备诸如纳斯他汀钾或纳斯他汀锂的化合物。合成3,4-环状磷酸盐7-脱氧纳斯他汀钠(8)、7-脱氡-反式-二氩-纳斯他汀钠(9)和反式-二氢-纳斯他汀钠(10)的方法通过溶解于吡啶(20ml)中并加入乙酸酐(20ml,2.4当量)，将从蜘蛛兰(H.littoralis)中分离的7-脱氧-水仙环素(2c)和7-脱氧-反式-二氬-水仙环素(lc)混合物乙酰化.室温下搅拌过夜，混合物緩慢变为溶液，且TLC(CH2C1广CH30H,2%)显示无起始材料。将冰水(200ml)加到反应混令物中，剧烈搅拌.形成乳白色沉淀物且在搅拌2小时之后收集，由此获得13.7g沉淀物。此后，通过用7:3甲苯-乙酸乙酯借助硅胶柱色镨洗提将全乙酸酯混合物(乙酰化产物)分离，由此产生下面的异喹诺酮12(60%回收率)和13(19%回收率)。随后在含水甲醇中用碳酸钾将2，3，4-三乙酰氧基-7-脱氧水仙环素(12)和2，3，4-三乙酰氧基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(13)二者脱保护，由此获得相应的三醇14和15，产率为72%。采用我们对于利用磷酸二氢四丁基铵和过量二环碳二亚胺在干燥吡啶中在氩气下在80°C下48小时合成纳斯他汀钠(ll)的工艺中的改进，合成3，4-环状磷酸盐8、9和10(Mondon，A.，etal.,Chem.Ber.1975,94，617)，(Pettit，G.R.，etal.，J.Nat.Prod.1986，49，995-1002)，(Pettit，G.R.，etal.，J.Nat.Prod.2003，66，92-96)。每种情形中，24小时之后粗产物的力-NMR显示反应仅完成50%。在此阶段加入额外的试剂并使反应进行到完成(进一步24小时)。在第一个24小时中将磷酸二氢四丁基铵的量从0.65当量增加到1当量并不会增加反应速度。将水加到反应混合物中以使二环己基脲(DCU)沉淀，并且将吡啶/水滤液浓缩以除去吡啶。将残余物的含水提取物通过Dowex50WX8-400离子交换柱(钠形式)。将UV响应部分结合并冻干，由此获得新的3，4-环状磷酸盐，其为7-脱氧-纳斯他汀钠(8，88%产率)，7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钠(9,65%产率)和反式-二氢-纳斯他汀钠(10，94%产率)。更优选的实施方案中，除去对-甲苯磺酸组分将磷酸盐11的产率相对于原始50%增加到88%。这点是能使新的磷酸盐8、9和10以极佳产率获得的主要改进之一。针对人类癌细胞系和鼠科动物P388淋巴细胞性白血病的小型组(minipanel)来评价环状磷酸盐前药和母体化合物。参见表2。表2水溶性、人类癌细胞系和鼠科动物P388淋巴细胞性白血病抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>癌细胞系评价的结果证实了7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(lc)和反式-二氢-水仙环素(la)的强癌细胞生长抑制活性。相应的3，5-环状磷酸盐在采用的实验条件下抑制活性较小。但是，预期磷酸盐基团的分解在体内非常有效，且这种抗癌评价目前是正在进行中的，作为这些新抗癌药物候选者的进一步基础性研发的一部分(Pettit，G.R.，etal"J.Nat.Prod.2003，66,92-96)，(Dowlati，A.，etal.，CancerResearch2002，62，3408-3416)，(Dziba，J.M.，etal.，Thyroid2002，12,1063-1070),(Eikesdal，H.P.，etal.，CancerLett.2002，178,209—217)，(Prise,V.，etal.，Int.J.Oncology2002，21，717-726),(Hill，S.A.，etal.，Int.J.Cancer2002，102，70-74)。7-脱氣-水仙环素(2c)为了获得7-脱氧-水仙环素(2c)，向2，3，4-三乙酰氧基-7-脱氧-水仙环素(12，4.36g)在CH30H-(99ml)H20-(lml)CH3OH(30ml)中的溶液中加入碳酸钾(0.124g),在室温下搅拌16小时，同时分离白色沉淀物。用乙酸(2ml)中和混合物，搅拌15分钟并浓缩到最小体积。收集无色的产物(2.18g,72%),从乙酸-甲醇中重结晶获得细的针状物熔点205-210°C(dec.)。7-脱氣-纳斯他汀钠(8)将7-脱氧-水仙环素(2c，0.2g，0.69mmol)在吡啶(8ml)中的溶液加热到80。C，并加入磷酸二氢四丁基铵(O.15g，0.45mmo1，0.65当量)，随后加入二环己基碳二亚胺(0.8g，5.6当量)。使反应在80。C下进行24小时。反应混合物组成的^NMR分析显示为起始材料与产物的50:50混合物。加入磷酸二氢四丁基铵(O.15g)，之后加入DCCI(0.8g)，并且使反应继续进行另一24小时。在这一点上，反应混合物中样品的^NMR分析显示反应结束。将反应混合物冷却并加入水(IOOml)。收集沉淀的二环己基脲(DCU)并将吡啶-水母液浓缩到最小体积。随后将含水部分通过钠形式的离子交换柱(Dowex50W8-400)。将UV响应部分结合且冻干，由此获得无色固体的磷酸盐8:227mg(88%);熔点255°C(dec.)。合成7-脱氧-纳斯他汀前药8a和8b的方法将7-脱氧-纳斯他汀钠(8，52mg)溶解于水(lml)中，并将溶液通过具有各种阳离子的Dowex50WX8-400柱子。例如，可以分别使用含有锂或钾阳离子的柱子。随后将UV-活性部分结合并冻干，由此获得白色固体的相应纳斯他汀盐，如下7-脱氧-纳斯他汀锂(10a)34mg，熔点250。C(dec.)。7-脱氣-纳斯他汀钾(10b)43mg，熔点230-235T(dec.)。7-脱氣-反式-二氢-水仙环素(lc)该化合物如下来制备。将2,3，4-三乙酰氧基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(13,0.14g)在9:1含水乙醇中用碳酸钾(0.003g)皂化，并如上获得醇2c所述那样进行，由此获得无色固体的三醇lc;89mg(91%产率)；熔点〉300。C(dec.)。7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钠(9)在吡啶(6ml)中采用磷酸二氩四丁基铵(O.21g，0.62咖o1，1.2当量)和二环己基碳二亚胺(0.54g，2.62mmol，5.13当量)进行7-脱氣-反式-二氢-水仙环素(lc，0.15g,0.51aifflol)向纳斯他汀9的转化，且如合成纳斯他汀8(参见如上)所概括的那样(包括额外的磷酸二氢四丁基铵(0.21g，1.2当量)和DCCI(0.54g))分离磷酸盐.使产物的含水提取物通过Dowex50WX8-400(钠形式)的离子交换柱，并且如上所述将UV荧光部分结合和冻干(参见，8),在曱醇(15ml，加热)中制备钠盐溶液，收集不可溶的材料，并将滤液浓缩为产物(O.124g，65%);熔点297。C(dec.)。合成7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀前药lla和lib的方法将7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钠(9，30mg)溶解于水(1ml)中，并将溶液通过具有各种阳离子的Dowex50WX8-400柱子.将UV-活性部分结合并冻干，由此获得白色固体的相应纳斯他汀盐，7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀锂(9a)25.4mg，熔点253°C(dec.)。7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钾(9b)23.2mg，熔点287°C(dec.)。反式-二氢-纳斯他汀钠(10)如制备磷酸盐9(参见上面)所述的那样，利用磷酸二氢四丁基铵(60mg，0.176mmo1，和60mg，用于滞后的添加)与二环己基碳二亚胺(O.18g，0.87mmo1，和0.18g，用于第二次添加)，在吡咬(2ml)中实现了从反式-二氢-水仙环素(la,57mg，0.184mmol)合成3，4-环状砩酸盐10(我们组在1992年由水仙环素合成出反式-二氢-水仙环素，依据Mondon和Krohn.19所述的方法)，(Mondon,A.，etal.，Chem.Ber.，1975，108，445-463)。将含水部分从离子交换柱(Dowex50WX8-400,钠形式)中洗提，获得了无色固体的反式-二氢-纳斯他汀(10)(86mg,94%产率)，熔点〉300。C。合成反式-二氢-纳斯他汀前药10a和10b的方法将反式-二氢-纳斯他汀钠(10，0.010g)溶解于水(lml)中，并将溶液通过具有各种阳离子的Dowex50WX8-200柱子。将UV-活性部分结合并冻干，由此获得白色固体的相应反式-二氢-纳斯他汀盐。反式-二氢-纳斯他汀锂(10a)8mg，熔点275°C(dec.)。反式-二氢-纳斯他汀钾(10b)7.1mg，熔点230-235°C(dec.)。权利要求1、一种合成纳斯他汀钠的方法，其包括下列步骤a)将水仙环素在吡啶中与磷酸二氢四丁基铵和二环己基碳二亚胺反应以形成反应混合物；b)将额外的磷酸二氢四丁基铵加到步骤a)的反应混合物中；c)将步骤b)的反应混合物冷却；d)将步骤c)的冷却的反应混合物过滤以获得沉淀物和第一滤液；e)将水加到滤液中以形成母液；f)将步骤e)的母液通过钠形式离子交换柱洗提以获得第二滤液；g)将步骤f)的第二滤液的UV-活性部分冻干，由此产生纳斯他汀钠。2、权利要求l的方法，其中步骤a)借助搅拌在约80。C下进行约24小时，且步骤b)借助搅拌进行约96小时。3、权利要求2的方法，其中步骤e)进一步包括将步骤d)中形成的滤液再次过滤，4、一种合成纳斯他汀钾或纳斯他汀锂的方法，其包括下列步骤a)将水仙环素在吡啶中与磷酸二氢四丁基铵和二环己基碳二亚胺反应以形成反应混合物；b)将额外的磷酸二氢四丁基铵加到步骤a)的反应混合物中；c)将步骤b)的反应混合物冷却；d)将步骤c)的冷却的反应混合物过滤以获得沉淀物和第一滤液；e)将水加到滤液中以形成母液；f)将步骤e)的母液通过钾形式或锂形式离子交换柱洗提以获得第二滤液；g)将步骤f)的第二滤液的UV-活性部分冻干，由此产生纳斯他汀钠。5、具有下列结构的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>6、具有下列结构的化合物7、具有下列结构的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>8、一种合成反式-二氢-水仙环素的方法，其包括下列步骤a)将水仙环素在乙酸酐和吡咬中反应以制得2，3,4，7-0-四乙酰氧基-水仙环素；b)将2，3，4，7-0-四乙酰氧基-水仙环素与水乙酸和钯催化剂反应；c)将步骤b)的产物过滤以产生包含2，3，4，7-0-四乙酰氧基-反式-二氬-水仙环素和2，3，4，7-0-四乙酰氧基-顺式-二氢-水仙环素的滤液；d)将滤液干燥；e)通过柱色镨将滤液纯化；f)将步骤e)中获得的2，3，4，7-0-四乙酰氧基-反式-二氢-水仙环素溶解于甲醇和水中，并且加入碳酸钾以产生反应混合物；g)将步猓f)的反应混合物浓缩并通过柱色谱纯化，由此获得反式-二氢-水仙环素，9、一种合成反式-二氢-水仙环素的方法，其包括下列步骤a)将水仙环素在乙酸酐和吡咬中反应以制得2，3，4，7-0-四乙酰氧基-水仙环素；b)将2，3，4，7-0-四乙酰氧基-水仙环素在乙醇/二氯甲烷和钯催化剂的混合物中反应；c)将步骤b)的产物过滤以产生包含2，3，4，7-0-四乙酰氧基-反式-二氢-水仙环素和2，3，4，7-0-四乙酰氧基-顺式-二氢-水仙环素的滤液；d)将滤液干燥；e)通过柱色谙将滤液纯化；f)将步骤e)中获得的2,3，4,7-0-四乙酰氧基-反式-二氢-水仙环素溶解于曱醇和水中，并且加入碳酸钾以产生反应混合物；g)将步骤f)的反应混合物浓缩并通过柱色镨纯化，由此获得反式-二氢-水仙环素。10、一种合成7-脱氧-反式-二氢-水仙环素的方法，其包括下列步骤a)将7-脱氧水仙环素和Ts0H在DMF和2'，2'-二甲氧基丙烷中反应以形成第一反应混合物；b)将笫一反应混合物搅拌；c)将第一反应混合物倒入水和乙酸乙酯中以产生有机相和含水相；d)将有机相干燥、过滤、随后浓缩以制得3,4-异亚丙基-7-脱氧-水仙环素；e)将3，4-异亚丙基-7-脱氧-水仙环素与咪唑反应，并且除去DMF，由此制得2-[叔丁基-1,1-二甲基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-水仙环素；f)将2-[叔丁基-l，l-二甲基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-水仙环素在乙醇和二氯甲烷中与钯催化剂反应以形成第二反应混合物；g)将第二反应混合物搅拌，随后将第二反应混合物通过硅胶柱并用乙酸乙酯洗提以形成滤液；h)将溶剂从滤液中除去以形成第一固体；i)利用己烷/乙酸乙酯在柱色i脊中将第一固体分离为其组分，由此产生(1)2-[叔丁基-l，l-二曱基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素，(2)2-[叔丁基-l，l-二甲基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-顺式-二氢-水仙环素，和(3)2-[叔丁基-1，1-二曱基甲硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-异-二氢-水仙环素；j)将2-[叔丁基-1，1-二甲基曱硅烷基]氧基-3，4-异亚丙基-7-脱氧-反式-二氢-水仙环素在四氢呋喃和甲酸中利用加热进行反应，由此制得7-脱氧-反式-二氢-水仙环素。全文摘要本发明涉及化合物水仙环素(2a)和7-脱氧-水仙环素(2c)的用途，其通过从药用植物水仙种(石蒜科)中分离而获得，作为新合成方法中的前体，其中将这些化合物的每一种选择性氢化以制得反式-二氢-水仙环素(1a)和7-脱氧-反式-二氢-水仙环素(1c)。本文中也描述了由水仙环素(2a)制备纳斯他汀钠(11)的新合成方法。本文中还描述了一些新的3，4-环状磷酸盐前药，包括7-脱氧纳斯他汀钠(8)、7-脱氧-反式-二氢-纳斯他汀钠(9)和反式-二氢-纳斯他汀钠(10)。文档编号C07D413/08GK101102769SQ200680002361公开日2008年1月9日申请日期2006年1月17日优先权日2005年1月14日发明者G·R·派提特,N·迈勒迪申请人:亚利桑那董事会，代表亚利桑那州立大学行事的亚利桑那州法人团体