天冬氨酸蛋白酶抑制剂的制作方法

专利名称：天冬氨酸蛋白酶抑制剂的制作方法
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本申请要求享有2005年11月14日提交的美国临时申请60/736,564、2006年9月18日提交的美国临时申请60/845,291和2006年9月18日提交的美国临时申请60/845,331的优先权。上述申请的全部教导通过参考并入本文。
背景技术：
天冬氨酸蛋白酶类，包括肾素、β-分泌酶(BACE)、HIV蛋白酶、HTLV蛋白酶和疟原虫天冬氨酸蛋白酶(Plasmepsin)I和II，涉及许多疾病状态。在高血压中，存在升高水平的血管紧张素I，即血管紧张素原的肾素催化裂解的产物。广泛认为升高水平的β淀粉样蛋白，即BACE对淀粉样蛋白前体蛋白活性的产物，是造成阿尔茨海默氏病患者脑中存在的淀粉样蛋白斑块的原因。HIV和HTLV病毒依赖于它们各自用于病毒成熟的天冬氨酸蛋白酶。恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)利用疟原虫天冬氨酸蛋白酶I和II来降解血红蛋白。
在肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)中，生物活性肽血管紧张素II(AngII)是通过两步机制产生的。高度特异性的天冬氨酸蛋白酶肾素将血管紧张素原裂解为血管紧张素I(AngI)，然后血管紧张素I进一步被特异性较低的血管紧张素转化酶(ACE)加工为AngII。已知AngII对至少两种被称为AT1和AT2的受体亚型产生作用。然而AT1似乎传递AngII的大部分的已知功能，AT2的作用还不清楚。
RAAS的调节代表在心血管疾病的治疗中的主要进展(Zaman，M.A.等人Nature Reviews Drug Discovery 2002，1，621-636)。ACE抑制剂和AT1阻断剂已被公认为高血压的治疗药物(Waeber B.等人.，″Therenin-angiotensin systemrole in experimental and human hypertension″，in Berkenhager W.H.，Reid J.L.(eds)Hypertension，Amsterdam，Elsevier Science Publishing Co，1996，489-519；Weber M.A.，Am.J.Hypertens.，1992，5，247S)。另外，ACE抑制剂被用于肾保护(Rosenberg M.E.等人.，Kidney International，1994，45，403；Breyer J.A.等人.，Kidney International，1994，45，S156)、预防充血性心力衰竭(Vaughan D.E.等人.，Cardiovasc.Res.，1994，28，159；Fouad-Tarazi F.等人.，Am.J.Med.，1988，84(Suppl.3A)，83)和心肌梗塞(Pfeffer M.A.等人.，N Engl.J.Med.，1992，327，669)。
对肾素抑制剂开发的兴趣来自于肾素的特异性(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)。已知的肾素唯一的底物是血管紧张素原，它(在生理条件下)只能被肾素加工处理。相反，除了AngI之外，ACE也能裂解缓激肽，并能被糜蛋白酶(一种丝氨酸蛋白酶)绕过(Husain A.，J.Hypertens.，1993，11，1155)。因此，在患者中，ACE的抑制导致缓激肽累积，引起咳嗽(5-20％)和潜在的威胁生命的血管神经性水肿(0.1-0.2％)(Israili Z.H.等人.，Annals of InternalMedicine，1992，117，234)。糜蛋白酶不被ACE抑制剂所抑制。因此，在接受ACE抑制剂治疗的患者中，AngII的形成还是有可能的。另一方面，AT1受体的阻滞(例如，被氯沙坦阻滞)将其他AT-受体亚型过度暴露于AngII，AT1受体的阻滞将极大地增加其他AT-受体亚型的浓度。总之，肾素抑制剂不仅在安全性方面预期优于ACE抑制剂和AT1阻滞剂，而且在它们阻滞RAAS的功效方面也更重要。
因为肾素抑制剂的拟肽(peptidomimetic)特征使其没有足够的口服活性(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)，因此，只产生有限的使用肾素抑制剂的临床经验(Azizi M.等人.，J.Hypertens.，1994，12，419；Neutel J.M.等人.，Am.Heart，1991，122，1094)。由于这个问题以及制品的高成本，几种化合物的临床开发已经停止。看起来好象只有一种化合物进入临床试验(Rahuel J.等人.，Chem.Biol.，2000，7，493；Mealy N.E.，Drugs of the Future，2001，26，1139)。因此，还没有得到能以大规模制备的新陈代谢稳定、口服可利用和充分可溶的肾素抑制剂。最近，描述了第一种非肽的肾素抑制剂，它显示出高体外活性(Oefner C.等人.，Chem.Biol.，1999，6，127；专利申请WO 97/09311；Maerki H.P.等人.，Il Farmaco，2001，56，21)。本发明涉及非肽属性和低分子量的肾素抑制剂的预料之外的鉴定。本发明描述了口服有效的肾素抑制剂，该抑制剂在血压调节以外的适应症中也是有效的，其中组织的肾素-糜蛋白酶系统可被激活，导致局部功能病理生理性地改变，例如肾、心脏和血管的重建、动脉粥样硬化症和再狭窄。
本文中引用的所有文献通过参考并入本文中。
发明概述 本发明的一个实施方案是由结构式(I)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐
结构式(I)中的变量在以下段落中描述。
Z是-O-或-CH2-。
X1是共价键、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-。
Y1是共价键或C1-C10亚烷基、C1-C10亚烯基或C1-C10亚炔基，其各自任选地在一个或多个可取代的碳原子上被卤素、氰基、羟基、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基取代，条件是只有当X1是共价键时Y1才是共价键。
R1是a)(C3-C7)环烷基；或b)任选地被1-3个独立地选自下组的基团取代的苯基、杂芳基或双环杂芳基 1)氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基。
R2是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)(NH2)、-C(S)(NH2)、-C(O)(NHR9)、-C(S)(NHR9)或-NHC(O)H，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基、或直链或支链C1-C5烷氧基烷基。
R3是-H、-F、C1-C5烷基、-NHC(O)R10、-OH或-OR1，其中R10是C1-C3烷基，条件是当R3是-F或-OH 时，X1不是-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-，并且R1-Y1-X1不是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(O)SR9或-NHC(O)H。
Q是Q1、Q2、Q3、Q4、Q5或Q6
R4是-H或(C1-C3)烷基。
R5是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)双环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基或饱和杂环基(C1-C3)烷基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基；且 R6是a)-H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基或饱和杂环基(C1-C3)烷基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基、和卤代(C1-C3)烷氧基，条件是R5和R6不都是-H。
G是OH、NH2或NHR7。
R7是a)(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基或氨基羰基(C1-C6)烷基；或b)任选地被1-3个基团取代的苯基(C1-C2)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基、和卤代(C1-C3)烷氧基；或c)R5和R7一起是-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、或-(CH2)4-，其任选地被1或2个基团取代，该取代基团独立地选自氟、(C1-C8)烷基、卤代(C1-C8)烷基、(C3-C6)环烷基、卤代(C3-C6)环烷基、羟基(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、卤代(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、羟基化(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、(C1-C8)烷氧基、卤代(C1-C8)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基和杂环基。
本发明的另外一个实施方案是由结构式(I*)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐
结构式(I*)中的变量在以下段落中描述。
Z是-O-或-(CH2)q-，其中q是0-3。
X1是共价键、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-。
Y1是共价键或C1-C10亚烷基、C1-C10亚烯基或C1-C10亚炔基，其各自任选地在一个或多个可取代的碳原子上被卤素、氰基、硝基、羟基、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基取代，条件是只有当X1是共价键时Y1才是共价键。
R1是(C3-C7)环烷基、苯基、杂芳基或双环杂芳基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自 氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；和苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、和卤代(C1-C3)烷氧基、和氨基羰基。
R2是-NHC(＝NR12)(NH2)、-NHC(＝NR12)(NHR9)、

-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)(NH2)、-C(S)(NH2)、-C(O)(NHR9)、-C(S)(NHR9)或-NHC(O)H，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基、或直链或支链C1-C5烷氧基烷基，且R12是H、(C1-C6)烷基、苯基、杂芳基、氰基、硝基、-S(O)R9、-S(O2)R9、-S(O2)NHR9、-S(O2)NR9R9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)OR9、-C(S)OR9、-C(O)(NH2)、-C(O)(NHR9)。
R3是-H、-F、C1-C5烷基、-NHC(O)R10、-OH或-OR10，其中R10是C1-C3烷基，条件是当R3是-F或-OH时，X1不是-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-且R1-Y1-X1不是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(O)SR9或-NHC(O)H。
Q是Q1、Q2、Q3、Q4、Q5或Q6
R4是-H或(C1-C3)烷基。
R5是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、或任选地被1-3个基团取代的饱和杂环基(C1-C3)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基，其中s是1或2。
R6是a)-H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)双环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、或任选地被1-3个基团取代的饱和杂环基(C1-C3)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基； 或者b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基，条件是R5和R6不都是-H。
G是OH、NH2或NHR7。
R7是a)(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基或氨基羰基(C1-C6)烷基，或b)任选地被1-3个基团取代的苯基(C1-C2)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基、和卤代(C1-C3)烷氧基；或c)R5和R7一起是-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、或-(CH2)4-，其任选地被1或2个基团取代，该取代基团独立地选自氟、(C1-C8)烷基、卤代(C1-C8)烷基、(C3-C6)环烷基、卤代(C3-C6)环烷基、羟基(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、卤代(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、羟基化(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、(C1-C8)烷氧基、卤代(C1-C8)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、和杂环基。
本发明的另外一个实施方案是药物组合物，其含有药学上可接受的载体或稀释剂和此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(例如结构式(I)、结构式(I*)代表的化合物或其药学上可接受的盐)。该药物组合物用于治疗，例如，用于抑制受试者中的天冬氨酸蛋白酶介导的疾病。
本发明的另外一个实施方案是拮抗需要所述治疗的受试者中的一种或多种天冬氨酸蛋白酶的方法。该方法包括给受试者施用有效量的此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(例如结构式(I)、结构式(I*)代表的化合物或其药学上可接受的盐)。
本发明的另外一个实施方案是治疗受试者的天冬氨酸蛋白酶介导的疾病的方法。该方法包括给受试者施用有效量的此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(例如结构式(I)、结构式(I*)代表的化合物或其药学上可接受的盐)。
本发明的另外一个实施方案是此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(例如结构式(I)、结构式(I*)代表的化合物或其药学上可接受的盐)在制备用于拮抗需要所述治疗的受试者中的一种或多种天冬氨酸蛋白酶的药物中的用途。
本发明的另外一个实施方案是此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(例如结构式(I)、结构式(I*)代表的化合物或其药学上可接受的盐)在制备用于治疗受试者的天冬氨酸蛋白酶介导的疾病的药物中的用途。



图1是显示用10mg/kg化合物XL-7治疗的转基因大鼠的平均动脉血压变化的曲线图。
图2是显示转基因大鼠在口服10mg/kg化合物L-6a后随时间变化的血浆化合物L-6a平均浓度的曲线图。
图3是显示用10mg/kg化合物L-6a治疗的转基因大鼠的平均动脉血压变化的曲线图。
图4是由化合物L-6a的酒石酸盐样品获得的X-射线粉末衍射图。
发明详述 本发明涉及由结构式(I)、结构式(I*)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐。结构式(I)和结构式(I*)中的变量的值和特定值在以下段落中提供。对于结构式I Z是-O-或-CH2-。在一个具体实施方案中，Z是-CH2-。
X1是共价键、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-。在一个具体实施方案中，X1是共价键或-O-。
Y1是共价键或C1-C10亚烷基、C1-C10亚烯基或C1-C10亚炔基，其各自任选地在一个或多个可取代的碳原子上被卤素、氰基、羟基、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基取代，条件是只有当X1是共价键时Y1才是共价键。在一个具体实施方案中，Y1是C1-C5亚烷基，任选地在可取代的碳原子处被卤素、氰基、羟基、甲基、甲氧基、卤代(C1-C3)甲氧基取代。更具体而言，当X1是O时Y1是(C1-C2)亚烷基，或者当X1是共价键时Y1是(C2-C3)亚烷基。
R1是a)(C3-C7)环烷基；或b)苯基、杂芳基或双环杂芳基，其任选地被1-3个独立选择的由R11代表的基团取代。在一个具体实施方案中，R1是任选地被1-3个独立选择的由R11代表的基团取代的苯基。
R2是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)(NH2)、-C(S)(NH2)、-C(O)(NHR9)、-C(S)(NHR9)或-NHC(O)H。在一个具体实施方案中，R2是-OC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-C(O)R9、-C(O)(NHR9)或-NHC(O)H。
R3是-H、-F、C1-C5烷基、-NHC(O)R10、-OH或-OR10，其中R10是C1-C3烷基，条件是当R3是-F或-OH时，X1不是-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-且R1-Y1-X1不是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(O)SR9或-NHC(O)H。在一个具体实施方案中，R3是-H、-NHC(O)R10或-OH。
Q是Q1、Q2、Q3、Q4、Q5或Q6
在一个具体实施方案中，Q是Q1或Q2。更具体而言，Q是Q1。
R4是-H或(C1-C3)烷基在一个具体实施方案中，R4是-H。
R5和R6独立地是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基或饱和杂环基(C1-C3)烷基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基，条件是R5和R6不都是-H。在一个具体实施方案中，R5和R6-之一是-H或甲基，另一个如此处所述。更具体而言，R5是如此处所述，R6是-H或甲基。或者，R5和R6独立地是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、2-(环己基)乙基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基。在一个具体实施方案中，R5和R6之一是-H或甲基，另一个如此处所述。更具体而言，R5如此处所述且R6是-H或甲基。或者R5和R6独立地是(C1-C4)烷基、卤代(C1-C4)烷基、羟基(C1-C4)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基或羟基化的环己基甲基。在一个具体实施方案中，R5和R6之一是-H或甲基，另一个如此处所述。更具体而言，R5如此处所述且R6是-H或甲基。
G是-OH、-NH2或-NHR7。在一个具体实施方案中，G是NH2或NHR7。
R7是a)(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基或氨基羰基(C1-C6)烷基；或b)任选地被1-3个基团取代的苯基(C1-C2)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基、和卤代(C1-C3)烷氧基；或c)R5和R7一起是-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、或-(CH2)4-，其任选地被1或2个基团取代，该取代基团独立地选自氟、(C1-C8)烷基、卤代(C1-C8)烷基、(C3-C6)环烷基、卤代(C3-C6)环烷基、羟基(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、卤代(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、羟基化(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、(C1-C8)烷氧基、卤代(C1-C8)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、和杂环基。在一个具体实施方案中，R7是甲基或R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基或直链或支链C1-C5烷氧基烷基。在一个具体实施方案中，R9是直链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基。在另外一个具体实施方案中，R9是甲基或乙基。
R11是1)氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、和卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基。在一个具体实施方案中，R11是氯、氟或甲基。
在一个具体实施方案中，当R5和R7与介于它们之间的原子一起形成环或者当G是羟基时，R2是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9或-C(S)(NH2)，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基、或直链或支链C1-C5烷氧基烷基。
对于结构式(I*) Z是-O-或-(CH2)q-，其中q是0-3. X1是共价键、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-。
Y1是共价键或C1-C10亚烷基、C1-C10亚烯基或C1-C10亚炔基，其各自任选地在一个或多个可取代的碳原子处被卤素、氰基、硝基、羟基、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基取代，条件是只有当X1是共价键时Y1才是共价键。
R1是各自任选地被1-3个基团取代的(C3-C7)环烷基、苯基、杂芳基或双环杂芳基，该取代基团独立地选自 氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；和苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基。
R2是-NHC(＝NR12)(NH2)、-NHC(＝NR12)(NHR9)、

-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)(NH2)、-C(S)(NH2)、-C(O)(NHR9)、-C(S)(NHR9)或-NHC(O)H，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基、或直链或支链C1-C5烷氧基烷基，且R12是H、(C1-C6)烷基、苯基、杂芳基、氰基、硝基、-S(O)R9、-S(O2)R9、-S(O2)NHR9、-S(O2)NR9R9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)OR9、-C(S)OR9、-C(O)(NH2)、-C(O)(NHR9)。
R3是-H、-F、C1-C5烷基、-NHC(O)R10、-OH或-OR10，其中R10是C1-C3烷基，条件是当R3是-F或-OH时，X1不是-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-且R1-Y1-X1不是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(O)SR9或-NHC(O)H。
Q是Q1、Q2、Q3、Q4、Q5或Q6
R4是-H或(C1-C3)烷基。
R5是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、或任选地被1-3个基团取代的饱和杂环基(C1-C3)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基，其中s是1或2。
R6是a)-H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)双环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基或任选地被1-3个基团取代的饱和杂环基(C1-C3)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基； 或者b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基，条件是R5和R6不都是-H。
G是OH、NH2或NHR7。
R7是a)(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基或氨基羰基(C1-C6)烷基或b)苯基(C1-C2)烷基任选地被1-3个基团取代，该基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基；或c)R5和R7一起是-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、或-(CH2)4-，任选地被1或2个基团取代，该基团独立地选自氟、(C1-C8)烷基、卤代(C1-C8)烷基、(C3-C6)环烷基、卤代(C3-C6)环烷基、羟基(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、卤代(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、羟基化(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、(C1-C8)烷氧基、卤代(C1-C8)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基和杂环基。
在一个具体实施方案中，当R5和R7与介于它们之间的原子一起形成环时或者当G是羟基时，R2是-NHC(＝NR12)(NH2)、 -NHC(＝NR12)(NHR9)、

-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9或-C(S)(NH2)，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基或直链或支链C1-C5烷氧基烷基且R12是H、(C1-C6)烷基、苯基、杂芳基、氰基、硝基、-S(O)R9、-S(O2)R9、-S(O2)NHR9、-S(O2)NR9R9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)OR9、-C(S)OR9、-C(O)(NH2)、-C(O)(NHR9)。
在一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由结构式(II)或结构式(IIa)代表，或是由结构式(II)或结构式(IIa)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的药学上可接受的盐
结构式(II)和结构式(IIa)中的变量的值和具体值如以上结构式(I)和结构式(I*)所提供的。在一个具体实施方案中，R5和R6之一是-H或甲基，另一个如对于结构式(I)和结构式(I*)所述，结构式(II)和结构式(IIa)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。更具体而言，R6是-H或甲基，结构式(II)和结构式(IIa)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(III)-(VII)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(III)-(VII)中的变量的值和具体值如以上结构式(I)和结构式(I*)所提供的。在一个具体实施方案中，R5和R6之一是-H或甲基，另一个如对于结构式(I)和结构式(I*)所述；结构式(III)-(VII)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。更具体而言，R6是-H或甲基，结构式(III)-(VII)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(IIIa)-(VIIa)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(IIIa)-(VIIa)中的变量的值和具体值如以上结构式(I)和结构式(I*)所提供的。在一个具体实施方案中，R5和R6之一是-H或甲基，另一个如对于结构式(I)和结构式(I*)所述；结构式(IIIa)-(VIIa)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。更具体而言，R6是-H或甲基，结构式(IIIa)-(VIIa)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(VIII)-(XII)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐

n是0、1、2或3；结构式(VIII)-(XII)中的其余变量的值和具体值如以上结构式(I)和结构式(I*)所提供的。在一个具体实施方案中，R5和R6之一是-H或甲基，另一个如对于结构式(I)和结构式(I*)所述；结构式(VIII)-(XII)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。更具体而言，R6是-H或甲基，结构式(VIII)-(XII)的其余值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XIII)-(XVII)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐

由结构式(XIII)-(XVII)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的第一组值在以下段落中提供 R6是H或甲基； R11是氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基； n是0、1、2或3； m是2或3；且 结构式(XIII)-(XVII)中的其余变量的值和具体值如结构式(I)和结构式(I*)所述。
由结构式(XIII)-(XVII)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的第二组值在以下段落中提供 R5和R6之一是-H、(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；另一个是R6是-H或甲基；且 其余变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第一组值所述。
由结构式(XIII)-(XVII)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的第三组值在以下段落中提供 R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基； R6是-H或甲基； G是NH2或NHR7； R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-；且 其余变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第一组值所述。
由结构式(XIII)-(XVII)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的第四组值在以下段落中提供 R5是-H或甲基； R6是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基； G是NH2或NHR7； R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-；且 其余变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第一组值所述。
由结构式(XIII)-(XVII)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的第五组值在以下段落中提供 R9是甲基或乙基； R11是氯、氟或甲基；且 其余变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第一组值所述。
由结构式(XIII)-(XVII)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的第六组值在以下段落中提供 R9是甲基或乙基； R11是氯、氟或甲基；且 其余变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第一组值所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XVIII)-(XXII)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐

结构式(XVIII)-(XXII)中的变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第一组值所述。或者，结构式(XVIII)-(XXII)中的变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第二组值所述。在另外一个替代方案中，结构式(XVIII)-(XXII)中的变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第三组值所述。在另外一个替代方案中，结构式(XVIII)-(XXII)中的变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)的第四组值所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XXIII)-(XXV)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(XXIII)-(XXV)中的变量的值和具体值如结构式(XIII)-(XVII)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XXVI)-(XXVIII)的结构式所代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(XXVI)-(XXVIII)中变量的值和具体值如对于结构式(XIII)-(XVII)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XXIX)-(XXXI)的结构式代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(XXIX)-(XXXI)中变量的值和具体值如对于结构式(XIII)-(XVII)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XXXII)-(XXXIV)的结构式代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(XXXII)-(XXXIV)中变量的值和具体值如对于结构式(XIII)-(XVII)所述。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂由选自结构式(XXXV)-(XXXVII)的结构式代表，或是其药学上可接受的盐
结构式(XXXV)-(XXXVII)中变量的值和具体值如对于结构式(XIII)-(XVII)所述。
本发明的另外一个实施方案是由结构式(XXXVIIa-e)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂

R8是异丁基、环己基、环戊基、环丁基甲基或异丙氧基 其余变量的值和具体值如对于结构式(III)-(VII)所述。
本发明的另外一个实施方案是下列各种化合物或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐 本发明的另外一个实施方案是以下所列的各种化合物或其盐，特别是它们的药学上可接受的盐。














本发明的另外一个实施方案是以下所列的各种化合物或其盐，特别是它们的药学上可接受的盐 本发明的另外一个实施方案是以下各种化合物或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐 本发明的一个具体实施方案是以下各种化合物或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐 本发明的另外一个实施方案是以下所列的各种化合物或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐 本发明的另外一个实施方案是以下所列的各种化合物或其盐，特别是它们的药学上可接受的盐






























本发明的另外一个实施方案是由结构式(XL)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂
或其药学上可接受的盐，其中 R1是烷基、环烷基或环烷基烷基； R2是H或烷基； R3是F、Cl、Br、氰基、硝基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基或烷磺酰基；且 n是0、1、2，或3。
在另外一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂是以下化合物之一或其对映异构体或非对映异构体。还包括以下所有化合物的药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物及其对映异构体和非对映异构体

本发明的另外一个实施方案是由结构式(L)代表的天冬氨酸蛋白酶抑制剂
或其药学上可接受的盐，其中 R1是烷基、环烷基或环烷基烷基； R2是H或烷基； R3是F、Cl、Br、氰基、硝基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基或烷磺酰基；且 n是0、1、2，或3。
在一个具体实施方案中，本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂是以下化合物之一或其对映异构体或非对映异构体。还包括以下所有化合物的药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物及其对映异构体和非对映异构体



本发明的另外一个实施方案是由结构式(XXXVIII)代表的中间体及其盐(优选药学上可接受的盐)
E＝H或氮保护基。胺保护基包括本领域公知的氨基甲酸酯、酰胺和磺酰胺保护基(T.W.Greene和P.G.M.Wuts“Protective Groupsin Organic Synthesis”John Wiley & Sons，Inc.，New York 1999)。具体的胺保护基包括叔丁氧基碳或苄氧基羰基。
结构式(XXXVIII)中的其余变量如结构式(I)和结构式(I*)所述。
本发明的另外一个实施方案是由结构式(XXXIX)代表的中间体及其盐
E＝H或氮保护基；n是0，1，2或3；结构式(XXXIX)中的其余变量如结构式(I)和结构式(I*)所述。
本发明的另外一个实施方案是以下各种化合物或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐 本发明一个进一步的实施方案是以下各种化合物或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐 本发明的其他化合物以下面列出。还包括对映异构体或非对映异构体或其药学上可接受的盐。
当任何变量(例如，芳基、杂环基、R1、R2等)在化合物中发生不止一次时，其定义在每一次发生时的定义独立于任何其它次发生。
“烷基”意思是指具有指定碳原子数的饱和脂族支链或直链一或二价烃基团。因此，“(C1-C8)烷基”意思是指线性或有分支排列的具有1-8个碳原子的基团。“(C1-C6)烷基”包括甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基。
“亚烷基”意思是-[CH2]x-，其中x是正整数。x一般是1-10之间的正整数，更优选1-5，甚至更优选2-4，更优选2-3。亚烷基任选地在任意一个或多个可取代的碳原子(即与氢键合的碳原子)处被取代，其中氢被取代基取代。
“亚烯基”是其中至少一个连接相邻亚甲基的单键被双键代替的亚烷基。亚烯基任选地在任一个或多个可取代的碳原子(即与氢键合的碳原子)处被取代，其中氢被取代基取代。
“亚炔基”是其中至少一个连接相邻亚甲基的单键被双键代替的亚烷基。亚炔基任选地在任一个或多个可取代的碳原子(即与氢键合的碳原子)处被取代，其中氢被取代基取代。
“环烷基”意思是指具有指定碳原子数的饱和脂族环状烃基团。因此，(C3-C7)环烷基意思是指排列为环形式的具有3-8个碳原子的基团。(C3-C7)环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
卤代烷基和卤代环烷基包括单、多和全卤代烷基基团，其中卤素独立地选自氟、氯和溴。
饱和的杂环是4-、5-、6-和7-元杂环，含有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子，并且包括吡咯烷、哌啶、四氢呋喃、四氢吡喃、四氢噻吩、四氢噻喃、异

唑烷、1，3-二氧戊环、1，3-二硫戊环、1，3-二氧杂环己烷、1，4-二氧杂环己烷、1，3-二

烷、1，4-二

烷、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉1，1-二氧化物、四氢-2H-1，2-噻嗪1，1-二氧化物和异噻唑烷1，1-二氧化物。氧代取代的饱和杂环包括四氢噻吩1-氧化物、四氢噻吩1，1-二氧化物、硫代吗啉1-氧化物、硫代吗啉1，1-二氧化物、四氢-2H-1，2-噻嗪1，1-二氧化物和异噻唑烷1，1-二氧化物、吡咯烷-2-酮、哌啶-2-酮、哌嗪-2-酮和吗啉-2-酮。
“杂芳基”意思是指单价杂芳族单环和多环基团，含有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子。杂芳基环包括呋喃基、噻吩基、硫苯基、吡咯基、

唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异

唑基、异噻唑基、

二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、异氮杂茚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，8-萘啶基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，3，4-

二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基-1-氧化物、1，2，5-噻二唑基-1，1-二氧化物、1，3，4-噻二唑基、1，2，4-三嗪基、1，3，5-三嗪基、四唑基和蝶啶基。
双环杂芳基环是双环[4.4.0]和双环[4，3.0]稠环系统，其中至少一个环是芳族的，含有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子，并包括吲哚、喹啉、异喹啉、喹

啉、苯并噻吩、苯并呋喃、2，3-二氢苯并呋喃、苯并二氧杂环戊烯、苯并咪唑、吲唑、苯并异

唑、苯并

唑和苯并噻唑。
双环烷基环是稠合的、桥接的和螺环系统并包括双环[1.1.0]丁烷、双环[1.2.0]戊烷、双环[2.2.0]己烷、双环[3.2.0]庚烷、双环[3.3.0]辛烷、双环[4.2.0]辛烷、双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷、双环[3.2.1]辛烷、双环[3.2.2]壬烷、双环[3.3.1]壬烷、双环[3.3.2]癸烷和双环[3.3.3]十一烷、螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[3.3]庚烷、螺[2.4]庚烷、螺[3.4]辛烷和螺[2.5]辛烷。
“烷氧基”意思是指通过氧连接原子连接的烷基基团。“(C1-C4)-烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。
“芳族”意思是指不饱和的环烷基环系统。
“芳基”意思是指芳族单环或多环系统。芳基系统包括苯基、萘基、茚基、芴基、奥基和蒽基。
“杂”是指环系统所中至少一个碳原子成员被至少一个选自N、S和O的杂原子置换。杂环可以具有1、2、3或4个被杂原子置换的碳原子成员。
“氧代”是指＝O。当氧代基团是碳原子上的取代基时，它们形成羰基(-C(O)-)。当氧代基团是硫原子上的取代基时，它们形成亚磺酰基(亚砜-S(O)-)基团。当两个氧代基团是硫原子上的取代基时，它们形成磺酰基(砜-S(O)2-)基团。
对映异构体、非对映异构体和盐 公开的某些天冬氨酸蛋白酶抑制剂可以不同的互变异构形式存在。本发明包括所有这类形式，包括在结构上未作描述的形式。
公开的某些天冬氨酸蛋白酶抑制剂可以不同的立体异构形式存在。立体异构体是仅在它们的空间排列上不同的化合物。对映异构体是其镜像不可重叠的成对的立体异构体，最通常是因为它们含有不对称取代的碳原子，该碳原子起手性中心的作用。“对映异构体”意思是指一对彼此为镜像并且不可重叠的分子之一。非对映异构体是不以镜像相联系的立体异构体，最通常是因为它们含有两个或更多个不对称取代的碳原子。结构式中的符号“*”表示存在手性碳中心。“R”和“S”表示一个或多个手性碳原子周围的取代基的构型，因此，“R”和“S”表示围绕一个或多个手性碳原子周围的取代基的相对构型。当没有将手性中心定义为R或S并且手性中心处的构型未用其他手段定义时，可以存在任一构型，或者存在两种构型的混合物。
“外消旋体”或“外消旋混合物”意思是指等摩尔量的两种对映异构体的混合物，其中这类混合物不表现出旋光活性；即，它们不旋转偏振光的平面。
“几何异构体”意思是指与碳-碳双键、环烷基环或桥接双环系统有关的取代基原子的定向不同的异构体。碳-碳双键每侧的原子(除H以外)可以呈E(取代基在碳-碳双键的对侧)或Z(取代基定向于同侧)构型。
与碳环连接的原子(除H以外)可以呈顺式或反式构型。在“顺式”构型中，取代基在环平面的同侧；在“反式”构型中，取代基在环平面的对侧。将“顺式”和“反式”构型物的混合物指定为“顺式/反式”。
“R”、“S”、“S*”、“R*”、“E”、“Z”、“顺式”和“反式”表示相对于核心分子的构型。
基团或部分与化合物其余部分或另一基团或部分连接的点可以用

表示，它代表


或“——”。
可以通过异构体特异的合成将公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂制备为单独的异构体或从异构体混合物中解析。常规解析技术包括使用光学活性酸生成异构体对的每个异构体的游离碱的盐(然后分步结晶并再生游离碱)、使用光学活性胺生成异构体对的每个异构体的酸形式的盐(然后分步结晶并再生游离酸)、使用光学纯的酸、胺或醇生成异构体对的每个异构体的酯或酰胺(然后色谱分离并除去手性辅助剂)、或者使用各种公知的色谱方法解析起始材料或终产物的异构体混合物。
当命名或者用结构描述公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的立体化学时，命名的或者描述的立体异构体相对于其它立体异构体至少纯度为60％、70％、80％、90％、99％或99.9％重量。当命名或者用结构描述单一对映异构体时，描述或者命名的对映异构体的光学纯度至少为60％、70％、80％、90％、99％或99.9％重量。按重量的光学纯度百分数是对映异构体的重量相对于对映异构体的重量加它的光学异构体的重量的比值。
当命名或者用结构描述公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂而不指明立体化学，并且抑制剂具有至少一个手性中心时，应当理解该名称或结构包括不含相应的旋光异构体的抑制剂的一种对映异构体、抑制剂的消旋混合物以及相对于相应的旋光异构体富含一种对映异构体的混合物。
当命名或者用结构描述公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂而不指明立体化学，并且抑制剂具有至少两个手性中心时，应当理解该名称或结构包括不含另一非对映异构体的非对映异构体、不含另一非对映异构体对的非对映异构体对、非对映异构体的混合物、非对映异构体对的混合物、其中相对于其他非对映异构体富含一种非对映异构体的非对映异构体的混合物、以及相对于其他非对映异构体对富含一种非对映异构体对的非对映异构体对的混合物。
本发明包括天冬氨酸蛋白酶抑制剂化合物的药学上可接受的盐。例如，含有胺或其他碱性基团的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的酸性盐可以通过将该化合物与适当的有机酸或无机酸反应，产生药学上可接受的阴离子盐形式而制备。阴离子盐的例子包括乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、glyceptate、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐(glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、8-茶氯酸盐、甲苯磺酸盐和三乙碘化物盐。
含有羧酸或其它酸性官能团的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的盐可以通过与适当的碱反应而制备。这种药学上可接受的盐可以用提供药学上可接受的阳离子的碱制成，包括碱金属盐(特别是钠和钾)、碱土金属盐(特别是钙和镁)、铝盐和铵盐，以及由生理学上可接受的有机碱制成的盐，如三甲胺、三乙胺、吗啉、吡啶、哌啶、甲基吡啶、二环己胺、N，N’-二苄基乙二胺、2-羟基乙胺、二-(2-羟基乙基)胺、三-(2-羟基乙基)胺、普鲁卡因、二苄基哌啶、脱氢枞胺、N，N’-二脱氢枞胺、葡糖胺、N-甲基葡糖胺、三甲基吡啶、奎宁、喹啉和碱性氨基酸如赖氨酸和精氨酸。
当命名或者用结构描述公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐时，应当理解也包括天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐的溶剂化物或水合物。“溶剂化物”是指晶体形式，其中在结晶过程中溶剂分子并入晶格中。溶剂化物可以包括水或非水溶剂，如乙醇、异丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺和EtOAc。其中水是并入晶格中的溶剂分子的溶剂化物通常被称为“水合物”。水合物包括化学计量的水合物以及含有不同量水的组合物。
当命名或者用结构描述公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐时，应当理解该化合物，包括其溶剂化物，可以晶体形式、非晶体形式或其混合物的形式存在。天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物也可以表现为多晶型(即以不同晶体形式存在的能力)。这些不同的晶体形式一般被称为“多晶型物”。应当理解，当命名或者用结构描述时，公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂及其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物也包括它们的所有多晶型物。多晶型物具有相同的化学组成，但是在结晶固体状态的填积、几何排列及其他描述性性质方面不同。因此，多晶型物可具有不同的物理性质，如形状、密度、硬度、可变形性、稳定性和溶出性质。多晶型物一般表现出不同的熔点、IR谱和X-射线粉末衍射谱，可以用于鉴定。本领域技术人员应当理解，例如，通过改变或调节在固化化合物中使用的条件，可以产生不同的多晶型物。例如，温度、压力或溶剂的改变可导致不同的多晶型物。另外，在特定条件下，一种多晶型物可以自发地转变为另外一种多晶型物。
在合成过程中保护关注的任何分子上的敏感的或反应性的基团可能是必须的和/或期望的。代表性的常规保护基在T.W.Greene和P.G.M.Wuts“Protective Groups in Organic Synthesis”John Wiley & Sons，Inc.，New York 1999中描述。可以利用本领域公知的方法添加和去除保护基。
公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂适用于改善或治疗障碍或疾病，在该障碍或疾病中降低天冬氨酸蛋白酶产物的水平在治疗疾病状态或治疗其中感染剂依赖于天冬氨酸蛋白酶活性的感染中是有效的。在高血压中，存在升高水平的血管紧张素I(血管紧张素原的肾素催化裂解的产物)。认为升高水平的β-淀粉状蛋白(BACE对淀粉状蛋白前体蛋白作用的产物)是在阿尔茨海默氏病患者脑中存在淀粉状蛋白斑块的原因。病毒HIV和HTLV依赖于它们各自用于病毒成熟的天冬氨酸蛋白酶。恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)使用疟原虫天冬氨酸蛋白酶I和II降解血红蛋白。
公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂适用于改善或治疗障碍或疾病，在该障碍或疾病中降低肾素产物的水平在治疗疾病状态中是有效的。在高血压中，存在升高水平的血管紧张素I(血管紧张素原的肾素催化裂解的产物)。因此，本发明的化合物可用于治疗高血压、心力衰竭如(急性和慢性)充血性心力衰竭、左心室功能障碍、心脏肥大、心脏纤维化、心肌病(例如，糖尿病心肌病和梗塞后心肌病)、心肌病和室性心律失常、心房颤动；心房扑动；有害的血管重塑；心肌梗塞及其后遗症；动脉粥样硬化；狭心症(不稳定的或稳定的)；肾衰竭病症，如糖尿病肾病；肾小球肾炎；肾纤维化；硬皮病；肾小球硬化；微血管并发症，例如糖尿病视网膜病；肾血管性高血压；血管病；神经病；冠状血管疾病；蛋白尿；清蛋白尿；手术后高血压；代谢综合征；肥胖；血管成形术后再狭窄；眼血管并发症，例如眼内压升高、青光眼和视网膜病；异常血管生长；血管相关疾病，如新血管年龄相关黄斑变性；醛固酮过多症；焦虑状态；和认知障碍(FisherN.D.；Hollenberg N.K.Expert Opin.Investig.Drugs.2001，10，417-26)。
本发明的药物组合物可以，可替代地或除了公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂以外，还可以包含药学上可接受的公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的盐或该化合物或盐的前药或药物活性代谢产物以及用于它的一种或多种药学上可接受的载体。
本发明包括治疗或改善有此需要的受治疗者中天冬氨酸蛋白酶介导的障碍的治疗方法，该方法包括给有此需要的受治疗者施用有效量的此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的化合物或其药学上可接受的盐。
施用方法包括在治疗过程中在不同的时间或以组合形式同时施用有效量的(即，治疗有效量的)本发明的化合物或组合物。本发明的方法包括所有已知的治疗性处理方案。
“有效量”意思是指在受治疗者中引发期望的生物学反应的活性化合物物质的量。这类反应包括被治疗的疾病或障碍的症状的减轻。在这类治疗方法中公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的有效量是大约.01mg/kg/天至大约10mg/kg/天，优选大约0.5mg/kg/天至5mg/kg/天。
本发明包括公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂在制备用于治疗或改善有此需要的受治疗者中天冬氨酸蛋白酶介导的慢性障碍或疾病或感染的组合物中的用途，其中该组合物包含一种或多种公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂和任选的药学上可接受的载体的混合物。
“药学上可接受的载体”意思是指对于在本发明组合物的制剂中使用而言具有足够纯度和质量，并且当适当地给予动物或人时，不产生不良反应的化合物和组合物。
“天冬氨酸蛋白酶介导的障碍或疾病”包括与天冬氨酸蛋白酶表达升高或过量表达有关的障碍或疾病以及伴随这类疾病的状况。
本发明的实施方案包括以联合疗法(参见美国专利5821232，美国专利6716575，美国专利5663158，或Fossa，A.A.；DePasquale，M.J.；Ringer，L.J.；Winslow，R.L.“Synergistic effect on reduction inblood pressure with coadministration of a renin inhibitor或anangiotensin-converting enzyme inhibitor with an angiotensin II receptorantagonist”Drug Development Research 1994，33(4)，422-8)施用此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂，联合一种或多种用于治疗高血压的其它药剂，包括α-阻断剂、β-阻断剂、钙通道阻断剂、利尿剂、促尿钠排泄药、促尿盐排泄药、中枢作用的抗高血压药、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、双重ACE和中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管紧张素-受体阻断剂(ARB)、醛固酮合酶抑制剂、醛固酮-受体拮抗剂或内皮缩血管肽受体拮抗剂。
α-阻断剂包括多沙唑嗪、呱唑嗪、坦洛新和特拉唑嗪。
用于联合疗法的β-阻断剂选自阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、醋丁洛尔(acetutolol)、艾司洛尔、塞利洛尔、托利洛尔(taliprolol)、醋丁洛尔(acebutolol)、氧烯洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔、布拉洛尔、喷布洛尔、甲吲洛尔、卡替洛尔、纳多洛尔、卡维地洛、以及它们的药学上可接受的盐。
钙通道阻断剂包括二氢吡啶类(DHPs)和非二氢吡啶类。优选的DHP是氨氯地平、非洛地平、ryosidine、伊拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼鲁地平、尼莫地平、尼索地平、尼群地平和尼伐地平，以及它们的药学上可接受的盐。非二氢吡啶类是氟桂利嗪、普尼拉明、地尔硫卓、芬地林、戈洛帕米、米贝拉地尔、阿尼帕米、噻帕米和维拉帕米、以及它们的药学上可接受的盐。
利尿剂是，例如，噻嗪衍生物，选自阿米洛利、氯噻嗪、氢氯噻嗪、甲基氯噻嗪和氯噻酮(chlorothalidon)。
中枢起作用的抗高血压药包括可乐定、胍那苄、胍法辛和甲基多巴。
ACE抑制剂包括阿拉普利、贝那普利、贝那普利拉、卡拖普利、西罗普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、莫替普利、培哚普利、喹那普利、喹那普利拉、雷米普利、雷米普利拉、螺普利、替莫普利、群多普利和佐芬普利。优选的ACE抑制剂是贝那普利、依那普利、赖诺普利和雷米普利。
双重ACE/NEP抑制剂是，例如奥马曲拉、法西多曲和法西多曲拉(fasidotrilat)。
具体的ARBs包括坎地沙坦、依普罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、他索沙坦、替米沙坦和缬沙坦。
具体的醛固酮合酶抑制剂是阿拉曲唑、法倔唑和依西美坦。
具体的醛固酮-受体拮杭剂是螺内酯和依普利酮。
具体的内皮缩血管肽拮抗剂是，例如波生坦、恩拉生坦、阿曲生坦、达卢生坦、西他生坦和替唑生坦、以及它们的药学上可接受的盐。
本发明的实施方案包括以联合疗法施用此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其组合物，联合一种或多种用于治疗AIDS的其它药剂，包括逆转录酶抑制剂、非核苷类逆转录酶抑制剂、其它HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、附着和融合抑制剂、反义药物和免疫刺激剂。
具体的逆转录酶抑制剂是齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、替诺福韦和恩曲他滨。
具体的非核苷类逆转录酶抑制剂是奈韦拉平、地位韦啶和依法韦仑。
具体的HIV蛋白酶抑制剂是沙奎那韦、利托那韦、茚地那韦、奈非那韦、氨普奈韦、洛匹那韦、阿扎那韦和膦沙那韦。
具体的HIV整合酶抑制剂是L-870、810和S-1360。
具体的附着和融合抑制剂是恩夫韦地。
本发明的实施方案包括以联合疗法施用此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其组合物，联合一种或多种用于治疗阿尔茨海默氏病的其它药剂，包括他克林、多奈哌齐、利凡斯的明、加兰他敏和美金刚。
本发明的实施方案包括以联合疗法施用此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其组合物，联合一种或多种用于治疗疟疾的其它药剂，包括青蒿素、氯喹、卤泛群、羟氯喹、甲氟喹、伯氨喹、乙胺嘧啶、奎宁和磺胺多辛。
联合疗法包括共同施用此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂和所述其它药剂、依次施用此处公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂和其它药剂、施用含有天冬氨酸蛋白酶抑制剂和其它药剂的组合物或同时施用单独的含有天冬氨酸蛋白酶抑制剂和其它药剂的组合物。
本发明还包括制备组合物的方法，该方法包括将一种或多种公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂与任选的药学上可接受的载体混合；并且包括由该方法得到的那些组合物，该方法包括常规制药技术。
本发明的组合物包括眼、口、鼻、透皮、闭合或没有闭合的局部、静脉内(一次性推注和输注二者)、以及注射(腹膜内、皮下、肌内、肿瘤内或胃肠外)组合物。该组合物可以呈剂量单位，例如片剂、丸剂、胶囊、散剂、颗粒剂、脂质体、离子交换树脂、无菌眼用溶液或眼递送装置(例如促进即时释放、定时释放或持续释放的接触透镜等)、胃肠外溶液或悬浮液、定量气雾剂或液体喷雾剂、滴剂、安瓿、自动注射装置或检剂；用于眼给药、口服、鼻内给药、舌下给药、胃肠外给药或直肠给药，或通过吸入或吹入给药。
适合于口服的本发明的组合物包括固体形式例如丸剂、片剂、囊片、胶囊(各包括即时释放、定时释放和持续释放制剂)、颗粒剂和粉末剂；以及液体形式例如溶液、糖浆、酏剂、乳剂和悬浮液。适用于眼给药的剂型包括无菌溶液或眼递送装置。适用于胃肠外给药的剂型包括无菌溶液、乳剂和悬浮液。
可以以适合于每周一次或每月一次给药的形式施用本发明的组合物。例如，可以适用活性化合物的不溶性盐，以提供用于肌内注射的贮库制剂(例如，癸酸盐)或提供用于眼科给药的溶液。
含有本发明组合物的剂型含有治疗有效量的提供治疗效果和/或预防效果必需的活性成分。该组合物可含有大约5,000mg至大约0.5mg(优选地，大约1,000mg至大约0.5mg)的公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂或其盐形式，并且可以被构成适合于所选给药方式的任何形式。每天可以施用该组合物大约1至大约5次。可以使用每天给药或定期后给药。
对于口服给药，该组合物优选呈片剂或胶囊的形式，其含有，例如，500至0.5毫克的活性化合物。剂量将根据多种因素而变化，该因素与被治疗的特定患者(例如，年龄、体重、饮食和给药时间)、被治疗状况的严重程度、使用的化合物、给药方式和制剂的强度有关。
优选将口服组合物配制为均匀的组合物，其中活性成分被均匀地分散在整个混合物中，其可以被轻易地细分为剂量单位，该剂量单位含有等量的公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂。优选地，通过将公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(或其药学上可接受的盐)与一种或多种任选存在的药物载体(例如淀粉、糖、稀释剂、制粒剂、润滑剂、助流剂、粘合剂和崩解剂)、一种或多种任选存在的惰性药物赋形剂(例如水、二醇类、油类、醇类、调味剂、防腐剂、着色剂和糖浆)、一种或多种任选存在的常规制片成分(例如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸二钙和各种各样胶中的任意胶)和任选的稀释剂(例如水)混合，制备该组合物。
粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类(例如，葡萄糖和β-乳糖)、玉米甜味剂以及天然的和合成的胶类(例如，阿拉伯胶和黄蓍胶)。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、琼脂和膨润土。
片剂和胶囊代表有利的口服剂量单位形式。片剂可以使用标准技术进行糖包衣或薄膜包衣。片剂也可以被包衣或以其它方式被化合以提供延长的、控释治疗作用。该剂型可以包含内部剂量和外部剂量组分，其中外部组分呈内部组分上的包封形式。该两种组分可进一步被抵抗在胃中崩解(例如肠衣层)并允许内部组分完整进入十二指肠的层分开或被延迟或持续释放的层分开。可以使用各种各样的肠溶性和非肠溶性层或包衣材料(例如聚合酸、虫胶、乙酰醇和乙酸纤维素或其组合)。
还可以经由缓释组合物施用公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂；其中该组合物包含公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂和生物可降解的缓释载体(例如，聚合载体)或药学上可接受的非生物可降解的缓释载体(例如，离子交换载体)。
生物可降解的和非生物可降解的缓释载体是本领域中熟知的。将生物可降解的载体用于形成颗粒或基质，其保留活性剂并缓慢地降解/溶解在适合的环境(例如，水性、酸性和碱性等)中以释放该药剂。这类颗粒降解/溶解在体液中以释放其中的活性化合物。该颗粒优选是纳米颗粒(例如，直径为大约1至500nm，优选直径为大约50-200nm，最优选直径为大约100nm)。在制备缓释组合物的方法中，首先将缓释载体和公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂溶解或分散在有机溶剂中。将得到的混合物添加到含有任选表面活性剂的水溶液中，以产生乳剂。然后从乳剂中蒸发该有机溶剂，以提供颗粒的胶体悬浮液，其含有缓释载体和公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂。
可以掺入公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂用于口服或以液体形式通过注射给药，例如水溶液、适当调味的糖浆、水或油悬浮液、有香味的乳剂，使用食用油例如棉子油、芝麻油、椰子油或花生油等，或以酏剂或类似的药物载体。用于含水悬浮液的适合分散剂或悬浮剂包括合成的和天然的胶例如黄蓍胶、阿拉伯胶、藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和明胶。在适当调味的悬浮剂或分散剂中的液体形式还可以包括合成的和天然的胶。对于胃肠外给药，无菌悬浮液和溶液是符合需要的。当静脉内给药符合需要时，使用通常含有适合防腐剂的等渗制剂。
可以经由注射通过胃肠外施用公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂。胃肠外制剂可以由溶解在适合的惰性液体载体中或与其混合的活性成分组成。可接受的液体载体通常包括水性溶剂和其它有助于溶解度或保存的任选成分。这类水性溶剂包括无菌水、林格溶液或等渗盐水溶液。其它任选的成分包括植物油(例如花生油、棉籽油和芝麻油)，以及有机溶剂(例如丙酮缩甘油(solketal)、甘油和甲酰)。可以将无菌、非挥发性油用作溶剂或悬浮剂。通过将活性成分溶解或分散在液体载体中制备胃肠外制剂，从而最终剂量单位含有0.005％至10％重量的活性成分。其它添加剂包括防腐剂、等渗剂、增溶剂、稳定剂和疼痛减轻剂。可以制备可注射的悬浮液，在这种情况下可以使用适合的液体载体和悬浮剂等。
可以使用适合的鼻内载体，鼻内施用公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂。
还可以使用适合的局部透皮载体或透皮贴剂，局部施用公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂。
对于眼给药，组合物优选为眼科组合物的形式。眼科组合物优选被配制成眼滴剂制剂并填充在适合的容器中，以有利于对眼给药，例如配备有适合的吸移管的滴管。优选地，该组合物是无菌的和基于水的，使用纯化水。除了公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂以外，眼科组合物还可以包含一种或多种如下成分a)表面活性剂例如聚氧乙烯脂肪酸醋；b)增稠剂例如纤维素、纤维素衍生物、羧基乙烯基聚合物、聚乙烯基聚合物和聚乙烯基吡咯烷酮，典型地其浓度为大约0.05％至大约5.0％(wt/vol)；c)(除了将组合物贮藏在含有氮气并任选包含游离氧吸收剂例如Fe的容器中以外，或作为其可替代方案)，抗氧化剂例如丁基化羟基茴香醚、抗坏血酸、硫代硫酸钠或丁基化羟基甲苯，其浓度为大约0.00005至大约0.1％(wt/vol)；d)浓度为大约0.01至0.5％(wt/vol)的乙醇；以及e)其它赋形剂例如等渗剂、缓冲剂、防腐剂和/或pH控制剂。眼科组合物的pH合乎需要地是在4至8的范围内。
参考实施例进一步定义本发明，该实施例是举例说明性的，而不是限制性的。
可以根据上述一般合成方案合成本发明有代表性的化合物并在下面的实施例中举例说明它。制备所述方案和实施例中使用的各种原料的方法完全在本领域技术人员的知识范围内。
以下缩写具有指定的含义
纯化方法 制备型HPLC是指C-18柱上的制备型反相HPLC，用含有0.01％TFA的水/乙腈梯度洗脱，在Gilson 215系统上运行。
分析方法 LC-MS(3分钟) 柱Chromolith SpeedRod，RP-18e，50×4.6mm；流动相A0.01％TFA/水，B0.01％TFA/CH3CN；流速1mL/min；梯度 中间体制备例 制备例1 (S)-4-(3-氯苯基)-4-羟基-4-((R)-哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯(31)
步骤1.3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向搅拌的(R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-羧酸(233g，1.2mol)在THF(1.2L)中的溶液中加入羰基二咪唑(230g，1.42mol)。将混合物在冰水浴中搅拌1小时。加入三乙胺(207mL，1.41mol)和N，O-二甲基羟基胺盐酸盐(138g，1.42mol)在THF(900mL)中的悬浮液。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。tlc显示反应完成后，蒸发溶剂。将残余物溶解在CH2Cl2(1.2L)中，依次用0.5N HCl水溶液、饱和Na2CO3水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，蒸发，得到3-(甲氧基(甲基)-氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(250g，91％)，其不需纯化直接用于下一步中。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.44(s，9H)，1.60-1.78(m，2H)，1.90(m，1H)，2.65(m，1H)，2.75-2.85(m，2H)，3.16(s，3H)，3.71(s，3H)，4.05-4.19(m，2H)。MS(E/Z)273(M+H+)。
步骤2.3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向冷却到-78℃的1-溴-3-氯苯(15g，78.3mmol)在无水THF(150mL)中的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷中的溶液(31.3mL，78.34mmol)。在-78℃下搅拌反应混合物1小时，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(17.8g，65.3mmol)在无水THF(50mL)中的溶液。添加后，使混合物升温至室温并搅拌2小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液(250mL)猝灭，并用EtOAc萃取(3×150mL)。混合的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。残余物通过急骤柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc 5∶95)，得到3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12.9g，51％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.45(s，9H)，1.54-1.73(m，2H)，1.75(m，1H)，2.00(m，1H)，2.71-2.78(m，1H)，2.93(m，2H)，3.30-3.35(m，1H)，4.22(m，1H)，7.39-7.42(t，1H)，7.52(d，1H)，7.89(d，1H)，7.90(m，1H)。MS m/z 324(M+H+)。
步骤3.3-((S)-4-氨基-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向250mL圆底烧瓶中加入镁屑(0.528g，21.7mmol，1.16当量)和THF(10mL)。将烧瓶用N2冲洗，并且加热至100℃。加入小的碘晶体。在10分钟内将1-(3-溴丙基)-2，2，5，5-四甲基-1-氮杂-2，5-乙硅烷环戊烷(5.239g，18.7mmol，1.0当量)在THF(15mL)中的溶液逐滴添加到煮沸的THF混合物中。搅拌反应混合物并在回流下加热，直到大多数Mg被消耗(2.5h)，得到[3-(2，2，5，5-四甲基-1-氮杂-2，5-乙硅烷环戊-1-基)丙基]溴化镁溶液。
向250-mL圆底烧瓶中加入(3-氯苯基)((R)-N-Boc-哌啶-3-基)甲酮(0.800g，2.47mmol)和THF(10mL)。将烧瓶抽真空，再充满N2。用干冰-丙酮浴冷却该混合物3，通过插管加入[3-(2，2，5，5-四甲基-1-氮杂-2，5-乙硅烷环戊-1-基)丙基]溴化镁溶液。在搅拌过夜的同时使反应混合物缓慢升温至-8℃。该混合物用10％Na2CO3水溶液(10mL)猝灭，在室温下搅拌3小时，并用CH2Cl2(3x)萃取。混合的有机提取物用Na2SO4干燥并浓缩。粗产物通过反相HPLC(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，10％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，13分钟，然后为90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，3.5分钟，流速25mL/min)纯化，得到作为TFA盐的3-((S)-4-氨基-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.883g，72％)。LC-MS(3min)tR＝1.30min，m/z 383，385(MH+)，327，329；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.36(m，1H)，7.27-7.13(m，3H)，4.26(br s，1H)，3.89(d，J＝12.9Hz，1H)，2.82-2.68(m，2H)，2.44(br s，1H)，2.36(t，J＝12.2Hz，1H)，1.97-1.79(m，2H)，1.64-1.08(m，16H)，1.34(s)；13C NMR(100MHz，CD3OD)δ156.69，148.15，135.39，130.69，127.74，127.36，125.41，81.04，78.10，40.95，28.69，26.64，26.51，23.30. 步骤4.3-((S)-4-(甲氧基羰基氨基)-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向100-mL圆底烧瓶中加入3-((S)-4-氨基-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.8164g，1.64mmol，1.0当量)的TFA盐、DMAP(0.542g)、CH2Cl2(40mL)和三乙胺(6mL)。该混合物在冰浴中冷却，加入氯甲酸甲酯(0.550g，5.82mmol，3.5当量)在CH2Cl2(10mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至室温并搅拌过夜。在真空下除去溶剂后，残余物通过反相HPLC纯化(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，70％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，8min，然后90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，1.5min，流速25mL/min)，得到3-((S)-4-(甲氧基羰基氨基)-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.5020g，69％)。LC-MS(3min)tR＝1.91min，m/z 463(MNa+)，441(MH+)，343341；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.36(m，1H)，7.28-7.17(m，3H)，4.90(br s，2H)，4.37(d，J＝12.0Hz，1H)，3.97(d，J＝12.3Hz，1H)，3.64(s，3H)，3.16-3.04(m，2H)，2.58-2.49(m，2H)，1.98-1.86(m，2H)，1.76-1.70(m，1H)，1.61-1.56(m，1H)，1.45(s，9H)，1.48-1.13(m，5H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ157.60，155.31，146.51，134.31，129.36，126.72，125.96，123.76，80.08，77.65，52.21，46.45，44.91，44.56，40.91，35.97，28.42，25.33，25.25，24.34. 步骤5.(S)-4-(3-氯苯基)-4-羟基-4-((R)-哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯 3-((S)-4-(甲氧基羰基氨基)-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.0322g，0.073mmol)、CH3CN(30mL)和2N HCl水溶液(25mL)的混合物在室温下剧烈搅拌24小时。在真空中除去溶剂，得到(S)-4-(3-氯苯基)-4-羟基-4-((R)-哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯的盐酸盐，它在使用时不需进一步的纯化。LC-MS(3min)tR＝0.98min，m/z343，341(M+H+)，323。
下列化合物按照与上述方法类似的程序制备 制备例2 (R)-2-((3-氯-2-氟苯基)(哌啶-3-基)甲氧基)乙酰胺
步骤1.3-(3-氯-2-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-75℃下在45分钟内向搅拌的1-氯-2-氟-苯(13.0g，0.1mol)在THF(250mL)中的溶液中逐滴添加2.5M BuLi的己烷溶液(40mL，0.1mol)。在-75℃下额外搅拌30分钟后，在30分钟内逐滴添加3-(甲氧基(甲基)-氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(21.76g，0.08mol)在THF(100mL)中的溶液。使混合物从-70℃升温至0℃。该混合物用饱和NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc萃取(3x)，合并的有机层用Na2SO4干燥。除去溶剂，进行急骤柱色谱，用5％EtOAc的石油醚溶液洗涤，得到3-(3-氯-2-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(19.2g，70％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)1.45(s，9H)，1.63(m，2H)，1.76(m，1H)，2.06(m，1H)，2.87(m，1H)，3.15(m，1H)，3.25(m，1H)，3.9(m，1H)，4.2(m，1H)，7.18(m，1H)，7.60(m，2H)。MS(E/Z)342(M+H+)。
步骤2.3-((3-氯-2-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-(3-氯-2-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7.75g，22.7mmol)在MeOH(160mL)中的溶液中分次加入NaBH4(6.9g，182mmol)，使温度保持低于40℃。添加后，在室温下搅拌混合物3小时。Tlc显示初始材料消失。在真空中除去溶剂，将残余物在水和EtOAc之间分配。将有机层用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到3-((3-氯-2-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.35g，56％)，其不需纯化即用于下一步骤。MS(E/Z)344(M+H+)。
步骤3.3-((3-氯-2-氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0-5℃下向搅拌的NaH(0.608g，15.2mmol)在THF(100mL)中的悬浮液中逐滴添加3-((3-氯-2-氟苯基)(羟基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.35g，12.68mmol)在THF(30mL)中的溶液。反应混合物在室温下再搅拌1小时。逐滴添加溴乙酸乙酯(2.52g，15.2mmol)在THF(30mL)中的溶液，将混合物回流5小时。Tlc显示原始材料消失。将反应混合物倾入饱和NH4Cl水溶液中，用EtOAc萃取(3×100mL)，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，得到3-((3-氯-2-氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.368g，80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)0.861(m，2H)，1.25(m，6H)，1.38&1.43(s，9H)，1.59-2.10(m，3H)，2.75(m，1H)，3.80(s，1H)，3.96(m，2H)，4.18(m，2H)，4.62(m，1H)，7.12(m，1H)，7.33(m，2H)；MS(E/Z)430(M+1) 步骤4.3-((2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在室温下向3-((R)-(3-氯-2-氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)-甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(500mg，1.16mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入NH3(水)(28％，15mL)。所得澄清溶液在室温下搅拌过夜。在真空中除去溶剂和过量的氨，得到3-((2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(350mg，0.87mmol，75％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)1.45(s，9H)，1.56(m，1H)，1.90(m，1H)，2.95(m，2H)，3.55-3.85(m，3H)，4.15(m，1H)，4.56(m，1H)，7.22(m，1H)，7.42(m，2H)；MS(E/Z)401(M+H+)。需要时，可以通过制备HPLC分离非对映异构体。
步骤5.(R)-2-((3-氯-2-氟苯基)(哌啶-3-基)甲氧基)乙酰胺 将3-((2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(100mg，0.25mmol)在20％TFA/CH2Cl2(5mL)中的溶液在0℃下搅拌30分钟。加入饱和NaHCO3中和溶剂，用CH2Cl2萃取三次，用Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到(R)-2-((3-氯-2-氟苯基)(哌啶-3-基)甲氧基)乙酰胺(72mg，0.24mmol，98％)。MS(E/Z)301(M+H+) 制备例3 2-((3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)-N-乙基乙酰胺
步骤1.3-((3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 分次向3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，0.031mol)在乙醇中的溶液中加入NaBH4(4.71g，0.124mol)。当反应完成时，蒸馏出乙醇，向混合物中加水(100mL)和EtOAc(100mL)。分离有机相，水层用EtOAc萃取(3×50mL)。合并的有机相用水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到3-((3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(9.1g，90％)，其不需纯化即可使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.24-1.45(m，4H)，1.46(m，9H)，1.61-1.68(m，1H)，1.73-1.84(m，1H)，3.05-3.26(m，2H)，3.55-3.66(m，1H)，3.82-3.96(m，1H)，4.42(m，1H)，7.20(m，1H)，7.27-7.30(m，2H)，7.32(s，1H)。MS(E/Z)326(M+H+) 步骤2.3-((3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 在0-5℃下向NaH(0.608g，15.2mmol)在DMF(60mL)中的悬浮液中逐滴添加3-((3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(4.35g，12.68mmol)在DMF(30mL)中的溶液。混合物在室温下搅拌1小时。逐滴添加溴乙酸乙酯(2.52g，15.2mmol)在DMF(30mL)中的溶液，并将混合物加热至回流3小时。当反应完成时，将混合物倾入饱和NH4Cl水溶液中，用EtOAc萃取(3×100mL)。合并的有机层用Na2SO4干燥并真空浓缩，得到3-((3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(2.09g，40％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.23-1.27(m，3H)，1.43-1.45(m，9H)，3.95-3.99(m，3H)，4.12-4.17(m，4H)，4.32-4.38(d，1H)，7.14-7.17(m，1H)，7.26-7.28(m，3H)。MS(E/Z)412(M+H+)。
步骤3.3-((3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 向EtNH2在醇(30％重量，10mL)中的溶液中加入3-((3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(100mg，0.243mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。在真空下浓缩混合物，得到粗产物，通过制备tlc将其纯化(洗脱溶剂5∶1石油醚/EtOAc)，得到无色油状的3-((3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(57.9mg.58％)。MS(E/Z)411(M+H+)。
步骤4.2-((3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)-N-乙基乙酰胺 向搅拌的TFA的CH2Cl2溶液(20％v/v，5mL)中加入3-((3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(57.9mg，0.0141mmol)。利用tlc监测反应(洗脱溶剂5∶1石油醚/EtOAc)。当反应完成时，用饱和NaHCO3水溶液和水洗涤混合物，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到2-((3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)-N-乙基乙酰胺(40mg，91％)。MS(E/Z)311(M+H+)。
下列化合物利用与以上所述类似的方法制备 制备例4 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤13-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯向冷却至-78℃的3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(5.60g，17.29mmol)和(R)-2-甲基-CBS-

唑硼烷(oxazaborolidine)(1M，在甲苯中，9mL，9.00mmol)的溶液中逐滴添加儿茶酚硼烷(5.6mL，54.0mmol)。20分钟后，使反应温度升温至-15℃并搅拌过夜。在0℃下通过小心加水猝灭反应，并用醚稀释。得到的悬浮液通过Celite过滤，用醚洗涤。将滤液依次用1M NaOH水溶液(3×50mL)、1MHCl水溶液(3×50mL)、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。过滤溶液，滤液在真空下蒸发，残余物通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.44g)和3-((S)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.21g)。MS348(M+Na)+。
步骤23-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向60％油中的NaH(960mg，24.0mmol)在无水THF中的悬浮液中加入3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.429g，4.40mmol)在无水THF(10mL)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌30分钟，逐滴添加溴乙酸乙酯(2.204g，13.2mmol)在无水THF(10mL)中的溶液。将得到的悬浮液回流加热3小时，并再次冷却至0℃。加入如前等量的NaH，在室温下搅拌30分钟，然后加入相同量的溴乙酸乙酯，将混合物回流加热过夜。使反应混合物冷却至0℃，并通过小心加入NH4Cl水溶液使其猝灭。将混合物用EtOAc萃取(3x)。合并的有机相用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤。蒸发滤液，残余物通过硅胶急骤色谱法纯化，得到3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.62g)。MS412(M+H)+。
步骤33-((R)-(2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.50g，3.65mmol)溶解在7M NH3的MeOH溶液中，在室温下搅拌6小时。将混合物减压蒸发，以定量收率得到3-((R)-(2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。MS383(M+H)+。
步骤43-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.10g，2.60mmol)溶解在无水甲苯(30mL)中，并冷却至0℃。逐滴添加Red-Al(65％，在甲苯中，2.6mL，8.64mmol)。添加后，将反应物在室温下搅拌12小时，并通过缓慢加水猝灭。得到的混合物通过Celite过滤，用THF洗涤。减压蒸发滤液，得到粗产物1.05g。它不需进一步纯化用于下一步骤。
步骤53-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在30分钟内向冷却至0℃的3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.05g，约2.6mmol)、Et3N(3.96mL，2.85mmol)和DMAP(174mg，1.43mmol)在无水CH2Cl2(20mL)中的溶液中加入氯甲酸甲酯(1.35g，14.25mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液。将反应液搅拌过夜，在真空下蒸发。残余物通过硅胶急骤色谱法纯化，得到3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.65g)。MS427(M+H)+。
步骤62-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在室温下向搅拌的3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(91mg，0.21mmol)在CH2Cl2(3mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。搅拌混合物，直到完全除去Boc基团。在真空下除去溶剂，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，其为TFA盐。MS327(M+H)+。
下列化合物利用与以上所述类似的方法制备 制备例5 3-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)-N-甲基丙酰胺
步骤1.3-((3-氯苯基)(3-乙氧基-3-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 在-15～-5℃下向NaH(0.835g，0.0348mol)在DMF(50mL)中的浆液中逐滴添加3-((3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.8g，0.0116mol)在DMF(30mL)中的溶液，在室温下搅拌反应混合物大约1小时。在保持温度为-15～-5℃的同时将3-溴丙酸乙酯(4.2g，0.0232mol)在DMF(30mL)中的溶液逐滴添加反应混合物中，使混合物缓慢升温至室温，并搅拌过夜。反应液在冰浴中冷却，用饱和NH4Cl水溶液(80mL)猝灭。产物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，在NaSO4上干燥，并通过急骤色谱法纯化，得到3-((3-氯苯基)(3-乙氧基-3-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(2.0g，4.71mmol，41％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.12-1.37(m，4H)，1.45(s，9H)，1.47-1.75(m，3H)，1.82-1.93(m，1H)，2.50-2.58(m，4H)，3.43-3.52(m，2H)，3.80-4.01(m，2H)，4.07-4.17(m，3H)，7.13-7.23(m，1H)，7.25-7.27(m，3H)。MS(E/Z)426(M+H+)。
步骤2.3-((R)-(3-氯苯基)(3-(甲基氨基)-3-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 3-((3-氯苯基)(3-乙氧基-3-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(2.0g，4.71mmol)溶解在CH3NH2在CH3OH的溶液(180mL)中并在室温下搅拌过夜。通过HPLC分析确认反应完成后，在真空中除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化，得到所需的异构体纯化的产物3-((R)-(3-氯苯基)(3-(甲基氨基)-3-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.80g，1.95mmol，41％收率)。MS(E/Z)411(M+H+)。
步骤3.3-[S-(3-氯-苯基)-(哌啶-3R-基)-甲氧基]-N-甲基-丙酰胺的制备 将3-((R)-(3-氯苯基)(3-(甲基氨基)-3-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.80g，1.95mmol)溶解在20％的TFA在CH2Cl2中的溶液(20.6mL)中，在室温下搅拌大约1小时，直到反应完成。蒸发除去溶剂，粗产物通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)-N-甲基丙酰胺(542mg，1.75mmol，90％产率)。MS(E/Z)311(M+H+)。
下列化合物利用与以上所述类似的方法制备 制备例6 (S)-5-(3-氯苯基)-5-羟基-N-甲基-5-((R)-哌啶-3-基)戊酰胺
步骤1.3-((S)-5-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯苯基)-1-羟基戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在N2下搅拌的镁屑(1.32g，55mmol)和无水THF(10mL)的混合物用碘晶体和5％的叔丁基(4-氯丁氧基)二甲基硅烷(11.15g，50mmol)在THF(40mL)中的溶液处理。当反应开始时，以足以保持温和回流的速度逐滴添加剩余的氯化物溶液。添加后，反应混合物在回流下加热1小时，大多数镁被消耗。使反应混合物冷却至室温。
3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.62g，5mmol)在无水THF(20mL)中的溶液在N2下在干冰-丙酮浴中冷却。逐滴添加由以上制备的叔丁基-(4-氯-丁氧基)-二甲基-硅烷(50mL)衍生的格氏试剂。添加后，使混合物升温至室温并搅拌2小时(通过tlc监测)。用饱和NH4Cl水溶液(70mL)猝灭反应，用EtOAc萃取(3×40mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，用10∶90 EtOAc/己烷洗脱，得到3-((S)-5-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯苯基)-1-羟基戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.65g，65％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)0.02(s，6H)，7.30(d，2H)，0.85(s，9H)，1.47(s，9H)，1.92(m，3H)，2.52(m，3H)，3.56(m，2H)，3.63(m，2H)，3.97-4.21(m，2H)，4.36(m，1H)，7.16-7.25(m，3H)，7.36(m，1H)。MS(E/Z)512(M+H+) 步骤2.3-((S)-1-(3-氯苯基)-1，5-二羟基戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((S)-5-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯苯基)-1-羟基戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(511mg，1mmol)在CH3CN(10mL)中的溶液中一次性加入四丁基氟化铵(550mg，2mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌2小时。减压除去溶剂。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，使用EtOAc/己烷，得到3-((S)-1-(3-氯苯基)-1，5-二羟基戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(350mg，80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.05-1.42(m，6H)，1.46(s，9H)，1.52-1.79(m，4H)，1.94-2.03(m，2H)，2.55(m，2H)，3.56(m，2H)，3.97(m，1H)，4.36(m，1H)，7.20-7.25(m，3H)，7.37(s，1H)。MS(E/Z)398(M+H+) 步骤3.3-((S)-2-(3-氯苯基)-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向搅拌的保持在0℃的3-((S)-1-(3-氯苯基)-1，5-二羟基戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(200mg，0.5mmol)在丙酮(3mL)中的溶液中加入15％NaHCO3水溶液(2mL)，然后加入固体NaBr(10.3mg，0.1mmol)和TEMPO(1.56mg，0.01mmol)。然后在0℃下缓慢加入三氯异氰尿酸(231mg，1mmol)。使混合物升温至室温，搅拌3小时，并用2-丙醇(0.5mL)处理。使混合物通过celite过滤，真空浓缩滤液。残余物在水和EtOAc之间分配，水相用EtOAc萃取(3×20mL)。合并有机层，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并减压浓缩，得到3-((S)-2-(3-氯苯基)-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(160mg，81％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.12-1.45(m，3H)，1.46(s，9H)，1.58-1.81(m，6H)，2.22(m，2H)，2.42(m，2H)，2.56(m，2H)，4.05(m，1H)，4.36(m，1H)，7.16(m，1H)，7.27-7.32(s，1H)。MS(E/Z)394(M+H+)。
步骤4.3-((S)-1-(3-氯苯基)-1-羟基-5-(甲基氨基)-5-氧代戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((S)-2-(3-氯苯基)-6-氧代四氢-2H-吡喃-2-基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(60mg，0.153mmol)溶解在约30％的甲胺在甲醇中的溶液(3mL)中。将混合物在室温下搅拌2小时，然后减压浓缩，得到3-((S)-1-(3-氯苯基)-1-羟基-5-(甲基氨基)-5-氧代戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(60mg，93％)，其不需纯化直接使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.12-1.45(m，3H)，1.46(s，9H)，1.58-1.81(m，6H)，2.05-2.17(m，2H)，2.50-2.58(m，2H)，2.69(m，3H)，4.06(m，1H)，4.12-4.28(m，2H)，7.22-7.32(m，3H)，7.43(s，1H)。MS(E/Z)425(M+H+)。
步骤5.(S)-5-(3-氯苯基)-5-羟基-N-甲基-5-((R)-哌啶-3-基)戊酰胺 将3-((S)-1-(3-氯苯基)-1-羟基-5-(甲基氨基)-5-氧代戊基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(60mg，0.14mmol)溶解在20％(V/V)TFA/CH2Cl2溶液(3mL)中。反应混合物在室温下搅拌1小时，逐滴添加饱和碳酸氢钠，调节pH为～7-8。得到的混合物用CH2Cl2萃取(3×10mL)，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到5S-(3-氯-苯基)-5-羟基-5-(哌啶-3R-基)-戊酸甲酰胺(42mg，91％)，在不纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。MS(E/Z)325(M+H+) 下列化合物利用与以上所述类似的方法制备 制备例7 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙醇
步骤1.3-((R)-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.1964g，0.60mmol，1.0当量)和60％油中的NaH(0.753g，18.8mmol，31当量)在THF(15mL)中的混合物中添加(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(2.042g，8.5mmol，14当量)。得到的混合物于80℃加热19小时，然后用水猝灭，用EtOAc萃取并用Na2SO4干燥。除去溶剂后，粗产物不进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙醇 粗3-((R)-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯在CH3CN中的溶液(100mL)和2NHCl水溶液(100mL)在室温下剧烈搅拌2天。在真空中除去溶剂。，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙醇的盐酸盐，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。LC-MS(3min)tR＝1.05min m/z 272，270(M+H)+. 制备例8 3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-((3-氯-2-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((3-氯-2-氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)-甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.368g，10.2mmol)在MeOH(85mL)的溶液中分次加入NaBH4(3.18g，81.5mmol)，使温度保持低于40℃。添加后，混合物在室温下搅拌2～3小时。TLC显示原始材料消失。在真空中除去溶剂，残余物在水和EtOAc之间分配。有机层用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到3-((3-氯-2-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.5g，89％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.18(m，1H)，1.38-1.46(s，9H)，1.65(m，1H)，1.85(m，2H)，2.66(m，1H)，3.25(m，1H)，3.38(m，2H)，3.69(m，3H)，3.93(m，1H)，4.52(m，6H)；MS(E/Z)388(M+1) 步骤2.3-((3-氯-2-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0～-5℃下向3-((3-氯-2-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.5g，9mmol)在干CH2Cl2(50mL)的溶液中加入Et3N(3.2g，4.2mL，27mmol，4当量)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(1.23g，10.8mmol，1.2当量)在干CH2Cl2(20mL)中的溶液。添加后，使混合物逐渐升温至室温。TLC显示原始材料消失。加水(30mL)，用CH2Cl2(3×20mL)萃取混合物。合并的有机层用10％柠檬酸水溶液、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3R-3-[(3-氯-2-氟-苯基)-(2-甲基磺酰氧基-乙氧基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.13g，99％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.35(m，4H)，1.46(s，9H)，1.62(m，3H)，1.83(m，1H)，2.52-2.81(m，2H)，3.05(m，3H)，3.56(m，2H)，3.92(m，1H)，4.30(m，2H)，4.48(m，1H)，7.13(m，1H)，7.28(m，1H)，7.35(m，1H)；MS(E/Z)466(M+) 步骤3.3-((2-叠氮基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3R-3[(3-氯-2-氟-苯基)-(2-甲基磺酰氧基-乙氧基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4g，8.6mmol)溶解在无水DMF(30mL)中，加入固体NaN3(0.84g，12.9mmol)，反应混合物于80℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，加入EtOAc(100mL)。混合物用水洗涤(3×30mL)，用Na2SO4干燥，并蒸发。残余物在二氧化硅柱上分离，得到3-((2-叠氮基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.6g，73％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.24(m，1H)，1.38&1.46(s，9H)，1.67(m，3H)，1.83(m，1H)，2.58-2.81(m，2H)，3.32(m，2H)，3.45(m，2H)，3.92(m，1H)，4.20(m，1H)，4.50(m，1H)，7.13(t，1H)，7.34(m，2H)，8.02(s，1H)； 步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((2-叠氮基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.6g，6.31mmol)在EtOAc(50mL)中的溶液中加入湿润的Pd/C(0.1g)，并在用气球维持的氢气氛下将混合物搅拌过夜。反应混合物通过Celite垫过滤，除去溶剂，得到3-((2-氨基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，对其进行反相制备HPLC，得到3-((S)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(990mg，81％)和3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-2-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(792mg，65％)。MS(E/Z)387(M+H+)。
制备例9 3-((R)-(3-氟苯基)(2(甲氧基羰基氨基)乙氧基)-甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在室温和氮气下将1-溴-3-氟-苯(57.7g，0.33mol)在无水THF(480mL)中的溶液逐滴添加Mg(10.6g，0.44mol)中。将混合物于50-60℃搅拌1小时。得到的格氏试剂用于下一步骤。在-78℃和氮气下将格氏试剂逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(60g，0.22mol)在无水THF(600mL)中的溶液中。添加后，混合物在室温下搅拌1.5小时。用饱和NH4Cl溶液(300mL)猝灭混合物，用乙酸乙酯萃取(3×200mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(67.5g，100％)，在不纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。
步骤2.3-((R)-(3-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向1M R-CBS-

唑硼烷在甲苯的溶液(33mL，33mmol，0.15当量)和10M BH3在THF(22mL，0.22mol，1.0当量)的溶液中逐滴添加3-(3-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(67.5g，0.22mol)在无水THF(300mL)中的溶液。添加后，反应混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下小心逐滴添加甲醇(200mL)。减压除去溶剂，得到粗产物。将粗产物溶解在乙酸乙酯中，直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)，在旋转式蒸发器上除去溶剂，直到出现少量晶体。在搅拌下向上述溶液中加入石油醚(约300mL)，将其在室温下搅拌2小时，然后过滤，用石油醚洗涤晶体，再结晶，得到纯3-((R)-(3-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸R)-叔丁酯(26g，39％)。
步骤3.3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0-5℃下向NaH(4.8g，120mmol)在THF(400mL)中的悬浮液中逐滴添加3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(30.9g，100mmol)在无水THF(100mL)中的溶液，将反应混合物在室温下搅拌1小时。向上述混合物中逐滴添加溴乙酸乙酯(20.04g，13.40mL，120mmol)在无水THF(100mL)中的溶液，并将反应液加热至回流3-5小时。将反应混合物倾入饱和NH4Cl水溶液中，然后用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。有机层用水(3×100mL)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(29.88g 76％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤4.3-((R)-(3-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在温度低于40℃的条件下向3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(29.88g，75.9mmol)在MeOH(300mL)中的溶液中分次加入NaBH4(23g，605.2mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2-3小时。在真空中除去溶剂，得到的残余物在水和乙酸乙酯之间分配。有机层用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，得到3-((R)-(3-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(11g，41％)。
步骤5.3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-5-0℃下向3-((R)-(3-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(11g，31.16mmol)在dry CH2Cl2(140mL)中的溶液中加入Et3N(12.60g，16.68mL，124.65mmol，4当量)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(7.1g，4.72mL，62.32mmol，2当量)在干CH2Cl2(40mL)中的溶液。添加后，使其逐渐升温至室温。加水(100mL)。水层用CH2Cl2萃取(3×80mL)，合并的有机层用10％柠檬酸、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.8g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤6.3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.8g，32mmol)溶解于无水DMF(150mL)中，加入固体NaN3(6.1g，96mmol，3当量)，将反应混合物加热至80℃过夜。使反应混合物冷却至室温，然后加入乙酸乙酯(500mL)，有机相用水(3×100mL)和盐水(2×80mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤7.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12g，31.75mmol)和Pd(OH)2/C(1.2g)在MeOH(240ml)中的悬浮液在H2下搅拌1小时。过滤并减压蒸发混合物，得到所需的3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g)。
步骤8.3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，28.41mmol)和DMAP(1.8g，14.21mmol，0.5当量)在干CH2Cl2(150mL)的溶液中加入Et3N(8.62g，11.42mL，85.23mmol)。得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(10.95mL，142.05mmol，5当量)在干CH2Cl2(60mL)中的溶液。添加后，在0-5℃下搅拌反应混合物1-2小时。加水(80mL)猝灭反应。水层用CH2Cl2萃取(3×50mL)，合并的有机层用10％柠檬酸(2×80mL)和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，通过硅胶纯化，得到3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(11.3g，97％)。
下列化合物利用与以上所述类似的方法制备 3-((R)-(2，5-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(2，5-二氟苯基)溴化镁。
3-((R)-(3，4-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3，4-二氟苯基)溴化镁。
3-((R)-(3-氯-2-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3-氯-2-氟苯基)锂。
3-((R)-(5-氯-2-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(5-氯-2-氟苯基)锂。
3-((R)-(2-氟-5-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(2-氟-5-甲基苯基)溴化镁。
3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(3，4，5-三氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3，4，5-三氟苯基)溴化镁。
3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(硫基苯-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用硫基苯-2-基溴化镁。
3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(噻唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用噻唑-2-基锂。
3-((2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(4-甲基噻唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯，在步骤1中使用(4-甲基噻唑-2-基)锂。
制备例10 3-((R)-(2，3-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(2，3-二氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在N2保护下，将无水THF(300mL)中的1，2-二氟苯(22g，0.19mol)冷却至-78℃，缓慢逐滴添加2.5M n-BuLi的己烷溶液(76mL，0.19mol)。反应混合物在-78℃下搅拌1小时，缓慢逐滴添加在无水THF(200mL)中的3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(47.7g，0.175mol)。使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。混合物用饱和NH4Cl(300mL)猝灭，用乙酸乙酯萃取三次，并用Na2SO4干燥。除去溶剂并进行急骤柱色谱得到粗3-(2，3-二氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯3-(2，3-二氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(40g，70％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.51(m，1H)，7.34(m，1H)，7.19(m，1H)，4.19(d，1H)，3.96(m，1H)，3.23(m，1H)，3.04(t，1H)，2.85(m，1H)，2.06(m，1H)，1.75(m，1H)，1.62(m，4H)，1.44(s，9H)。
步骤2.3-((2，3-二氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 在使温度低于40℃的条件下，向3-(2，3-二氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，30.8mmol)在MeOH(200mL)中的溶液中分次加入NaBH4(9.3g，246mmol)。添加后，在室温下搅拌混合物2-3小时。在真空中除去溶剂，得到的残余物在水和乙酸乙酯之间分配。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到粗产物3-((2，3-二氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，99％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.22(m，1H)，7.08(m，2H)，4.85(t，1H)，3.94(d，0.5H)，3.78(d，1H)，3.55(m，0.5H)，3.28(d，1H)，2.65(m，1H)，1.90(m，2H)，1.68(m，3H)，1.44(d，9H)。
步骤3.3-((2，3-二氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 在0-5℃下向NaH(3.5g，88.4mmol)在THF(100mL)中的悬浮液中逐滴添加3-((2，3-二氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(9.6g，29.5mmol)在THF(50mL)中的溶液，在室温下搅拌反应混合物1小时。向上述混合物中逐滴添加溴乙酸乙酯(14.7g，88.4mmol)在THF(50mL)中的溶液，然后回流3-5小时。将反应混合物倾入饱和NH4Cl水溶液中，然后用乙酸乙酯萃取，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，得到3-((2，3-二氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(9.5g，79％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.22(m，1H)，7.08(m，2H)，4.62(d，2H)，4.33(d，2H)，4.18(q，3H)，3.95(m，4H)，3.82(d，2H)，2.77(m，4H)，1.88(m，3H)，1.44(s，9H)，1.26(t，3H)。
步骤4.3-((2，3-二氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 在使温度低于40℃的条件下，向3-((2，3-二氟苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(4g，9.7mmol)在MeOH(80mL)中的溶液中分次加入NaBH4(2.9g，77.4mmol)。添加后，在室温下搅拌混合物2-3小时。在真空中除去溶剂，得到的残余物在水和乙酸乙酯之间分配有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到3-((2，3-二氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(3.5g，97％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.12(m，3H)，4.52(q，1H)，4.11(m，1H)，3.69(m，3H)，3.41(m，3H)，2.65(m，1H)，2.02(m，1H)，1.65(m，1H)，1.42(d，9H)。
步骤5.3-((2，3-二氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 在-5-0℃下向3-((2，3-二氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯在干CH2Cl2(50mL)中的溶液中加入Et3N(5.2mL，37.6mmol)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(1.3g，11.3mmol)在干CH2Cl2(20mL)中的溶液。添加后，使反应液逐渐升温至室温。反应完成后加入50mL水，水层用CH2Cl2萃取，合并的有机层用10％柠檬酸、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3.-((2，3-二氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(4.2g，99％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.12(m，3H)，4.52(q，1H)，4.31(m，3H)，4.09(t，1H)，3.57(m，2H)，3.06(d，3H)，2.70(m，2H)，1.93(m，2H)，1.44(d，9H)。
步骤6.3-((2-叠氮基乙氧基)(2，3-二氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 将3-((2，3-二氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(4.2g，9.4mmol)和固体NaN3(0.92g，14.1mmol)在无水DMF(30mL)中的溶液加热至80℃过夜。使反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(80mL)稀释，有机相用水洗涤(30mL×3)，用Na2SO4干燥，并蒸发。将残余物在二氧化硅柱上分离，得到3-((2-叠氮基乙氧基)(2，3-二氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(3.4g，92％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.14(m，3H)，4.50(q，1H)，4.10(m，1H)，3.40(m，4H)，2.70(m，2H)，1.90(m，2H)，1.65(m，1H)，1.41(d，9H)。
步骤7.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(2，3-二氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((2-叠氮基乙氧基)(2，3-二氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯(3.4g，8.58mmol)在乙酸乙酯(50mL)的溶液中加入湿Pd/C(0.1g)。在充满氢的气球下将反应液搅拌过夜。反应混合物通过Celite垫过滤，除去溶剂。通过制备HPLC分离残余物，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(2，3-二氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3g，94％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.22(m，3H)，4.48(d，1H)，4.01(d，1H)，3.65(m，1H)，3.42(m，2H)，3.08(m，4H)，1.88(m，1H)，1.55(m，1H)，1.43(s，9H)。
步骤8.3-((R)-(2，3-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(2，3-二氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(195mg，0.402mmol)、DMAP(25.8mg，0.201mmol)和Et3N(0.18mL)在干CH2Cl2的溶液中加入氯甲酸甲酯(189mg，2.013mmol)，使混合物升温至室温并搅拌过夜。真空浓缩该混合物，得到粗产物3-((R)-(2，3-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(168mg，98％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.21(m，3H)，4.57(m，1H)，4.44(d，1H)，4.08(m，1H)，3.82(m，1H)，3.53(s，3H)，3.29(d，2H)，2.93(m，2H)，1.79(m，1H)，1.63(m，1H)，1.43(s，9H)，1.34(m，3H)。
制备例11 3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1-6.3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 按照制备例9的步骤1-6，在步骤1中使用(3-氯苯基)锂，获得3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
步骤7.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.3g，33.8mmol)在THF/H2O(20∶1，180mL/9mL)中的溶液中分次加入磷酸三苯酯(36.0g，135mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。减压除去溶剂，得到残余物经硅胶色谱法纯化，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10.4g，纯度HPLC＝75％)。
步骤8.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 按照制备例9的步骤8将3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯转化为3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
以下化合物按照与以上所述类似的方法制备 3-((R)-(3，5-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在制备例9的步骤1中使用(3，5-二氟苯基)锂。
制备例12 3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.5-氯-2-甲基苯胺 向2升烧瓶中加入4-氯-1-甲基-2-硝基苯(60g，0.35mol)在MeOH(1L)中的溶液，加入阮内镍(Raney Ni)，用H2置换烧瓶中的空气三次，将混合物在室温下搅拌3小时。过滤溶液并浓缩。将残余物溶解在CH2Cl2(500mL)中，溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，除去溶剂，得到5-氯-2-甲基苯胺(50g，0.35mol)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.02-6.93(d，2H)，6.70-6.60(d，2H)，3.67(s，2H)，2.14(s，3H)。
步骤2.2-溴-4-氯-1-甲苯 将5-氯-2-甲基苯胺(50g，0.355mol)溶解在HBr溶液(1.5M，100mL)中并冷却至0℃，逐滴添加NaNO2(27.6g，0.4mol)在水(200mL)中的溶液。添加后，将混合物搅拌1小时。在另一个烧瓶中，将CuBr(30g，0.21mol)添加到HBr溶液(1.5M，30mL)中并加热至60℃，然后将混合物添加到上述溶液中。将混合物加热至回流1小时，然后冷却至室温。用水(500mL)猝灭反应，水层用CH2Cl2萃取三次，用Na2SO4干燥，除去溶剂并通过柱色谱法纯化，得到2-溴-4-氯-1-甲基苯(53g，0.26mol)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.53(s，1H)，7.20-7.10(m，2H)，2.36(s，3H)。
步骤3.3-(5-氯-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向2-溴-4-氯-1-甲基苯(53g，0.26mol)在无水THF(600mL)的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷(103mL，0.26mol)中的溶液。在-78℃下搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(67g，0.246mol)在无水THF(300mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(500mL)猝灭混合物，用乙酸乙酯萃取(3×400mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(5-氯-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(86g)，在不纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。
步骤4-10.3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 对3-(5-氯-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯进行制备例9的步骤2-8，得到3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例13
步骤1.3-(3-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向1-溴-3-甲基苯(88.4g，0.52mol)在无水THF(550mL)中的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷中的溶液(210mL，0.52mol)。在-78℃下搅拌1小时后，逐滴添加3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(120g，0.44mol)在无水THF(500mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(500mL)猝灭混合物并用乙酸乙酯萃取(3×400mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(168g)，在不进行纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。
步骤2.3-((S)-羟基(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向3-(3-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(168g，0.55mol)在无水THF(600mL)中的溶液中逐滴添加1M R-CBS-

唑硼烷在甲苯中的溶液(82mL，82mmol，0.15当量)。在-15℃搅拌1小时后，逐滴添加10M BH3在THF中的溶液(60mL，0.60mol，1.1当量)。添加后，将反应混合物在-15℃下搅拌2小时。TLC指示原料消失。在-15℃下小心逐滴添加甲醇(400mL)。减压除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用AcOEt/己烷(1∶30→1∶15)洗脱，得到浅黄色油状物(95g，HPLC≥70％，比例≥3∶1)。将混合物溶解在乙酸乙酯中，直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)。在旋转蒸发器上除去溶剂，直到出现少量晶体。将溶液缓慢冷却至室温，放置1-2小时。向上述溶液中添加己烷(大约300mL)，然后过滤，用冷己烷洗涤晶体，重结晶两次，得到纯的异构体3-((S)-羟基(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20g，ee≥99％)。
步骤3.3-((R)-(氰基甲氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((S)-羟基(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(30.5g，0.1mol)在MeCN(300mL)中的溶液中添加NaH(12g，0.3mol)。将混合物在室温下搅拌1小时。使混合物冷却至-40℃，然后分次添加溴乙腈(35.7g，0.3mol)。将混合物在-20℃下连续搅拌0.5小时。用饱和NH4Cl猝灭反应。用CH2Cl2萃取混合物。有机层用Na2SO4干燥，浓缩。粗3-((R)-(氰基甲氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯不进行纯化用于下一步骤。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(氰基甲氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20g，0.04mol)溶解在无水THF(300mL)中，在氮气下将溶液加热至回流。逐滴添加BH3.Me2S(12mL，0.12mol)在THF中的溶液，并在回流下连续搅拌过夜。使得到的溶液冷却至室温，逐滴添加MeOH以猝灭过量的硼烷。蒸发溶液后，获得粗3-((R)-(2-氨基乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，其在不进行纯化的情况下使用。
步骤5.3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯和DMAP在无水CH2Cl2中的溶液中添加Et3N。将得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯在无水CH2Cl2中的溶液。添加后，在0-5℃搅拌反应混合物1-2小时。加水猝灭反应。水层用CH2Cl2萃取，合并的有机层用10％柠檬酸和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，通过制备TLC纯化，得到3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(3-(三氟甲基)苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3-(三氟甲基)苯基)溴化镁。
3-((R)-(2，5-二甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(2，5-二甲基苯基)溴化镁。
3-((R)-(3，5-二甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3，5-二甲基苯基)溴化镁。
3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(5-氟-2-甲基苯基)锂。
3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3-氯-4-氟苯基)溴化镁。
3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3-氯-5-氟苯基)溴化镁。
3-((R)-(3-氯-2，4-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3-氯-2，4-二氟苯基)锂。
制备例14 3-((R)-(2-(苄氧基)-3，5-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.2-(苄氧基)-1-溴-3，5-二氟苯 将2-溴-4，6-二氟-苯酚(10g，48mmol)、Bu4NBr(0.24g，0.72mol)和BnBr(8.22g，48mmol)混合在THF(100mL)中。向混合物中添加50％KOH(13.46g，240mmol)，加热至64℃并搅拌2小时。向混合物中加水，水层用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物2-(苄氧基)-1-溴-3，5-二氟苯(13.7g，96％)，其不进行纯化而直接使用。
步骤2.3-(2-(苄氧基)-3，5-二氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向2-(苄氧基)-1-溴-3，5-二氟苯(13.7g，46mmol)在无水THF(100mL)中的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷(18.4mL，46mmol)中的溶液。于-78℃搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10.43g，38.3mmol)在无水THF(40mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(100mL)猝灭混合物并用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用AcOEt/己烷(1∶20→1∶10)洗脱，得到3-(2-(苄氧基)-3，5-二氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(6.4g，32％)，为浅黄色油状物。
步骤3-6.3-((R)-(2-(苄氧基)-3，5-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 与制备例13步骤2-5类似地获得3-((R)-(2-(苄氧基)-3，5-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例15 3-((R)-(3-氟-5-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氟-5-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向100mL三颈烧瓶中充以Mg(638mg，26.6mmol)、小碘晶体。排出烧瓶中的气体，并再充以N2。添加1-溴-3-氟-5-甲基-苯(5g，26.6mmol)在无水THF中的溶液。搅拌反应混合物并加热至回流2小时。一旦大多数Mg消失，则将反应液冷却至-78℃。然后缓慢逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.45g，5.32mmol)在无水THF中的溶液，并将混合物搅拌过夜。用饱和NH4Cl溶液(30mL)猝灭混合物，并用乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物3-(3-氟-5-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.7g，99％)，其不进一步纯化而直接使用。
步骤2.3-((R)-(3-氟-5-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-(3-氟-5-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.7g，5.3mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中分次添加NaBH4(1.61g，42.3mmol)并搅拌过夜。加水(50mL)猝灭反应并真空蒸发直到除去MeOH。水层用EA萃取，用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。粗产物经色谱法纯化，得到3-((R)-(3-氟-5-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(730mg，42.9％)。
步骤3-5.3-((R)-(3-氟-5-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 与制备例13步骤3-5类似地得到3-((R)-(3-氟-5-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例16 3-((2，3-二氟-6-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.(2，3-二氟-5-甲基苯基)三甲基硅烷 在30分钟内向在冰水浴中冷却的二异丙胺(20.2g，0.2mol)在THF(500mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi在己烷(2.5M，80mL)中的溶液。将混合物在冰浴中搅拌30分钟然后冷却至-78℃。逐滴添加1，2-二氟-4-甲基苯(12.8g，0.1mol)在THF(80mL)中的溶液，20-30分钟后，逐滴添加TMSCl(21.6g，0.2mol)在THF(20mL)中的溶液。将混合物于-78℃搅拌2-3小时。向混合物中添加饱和NH4Cl(300mL)，用水(200mL)稀释，并用醚萃取。醚层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，除去溶剂，得到(2，3-二氟-5-甲基苯基)三甲基硅烷(26g，100％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。1H NMR(CDCl3)δ6.90(m，2H)，2.40(s，3H)，0.33(s，9H)。
步骤2.3-(2，3-二氟-6-甲基-4-(三甲基硅烷基)苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向(2，3-二氟-5-甲基苯基)三甲基硅烷(10g，0.05mol)在无水THF(100mL)中的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷中的溶液(20mL)。于-78℃搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.6g，0.05mol)在无水THF(60mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(100mL)猝灭混合物并用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到3-(2，3-二氟-6-甲基-4-(三甲基硅烷基)苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，将其通过硅胶柱色谱法纯化，用己烷(2g，10％)洗脱。1H NMR δ6.90(m，2H)，4.00(m，4H)，2.20(s，3H)，1.47(s，9H)，1.30(m，4H)，0.35(s，9H)。
步骤3.3-(2，3-二氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-(2，3-二氟-6-甲基-4-(三甲基硅烷基)苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2g，4.9mmol)在THF(20mL)中的溶液中添加在THF(5mL)中的TEAF(0.22g，1.5mmol)。将混合物搅拌4小时，之后添加盐水，用Et2O萃取混合物。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到3-(2，3-二氟-6-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1g，61％)。1H-NMRδ7.07(m，1H)，6.90(m，1H)，4.10(m，2H)，3.92(m，2H)，2.21(s，3H)，1.97(m，2H)，1.60(m，4H)，1.49(s，9H)，1.30(m，3H)。
步骤4-7.3-((2，3-二氟-6-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 与制备例15步骤2-5类似地得到3-((2，3-二氟-6-甲基苯基)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例17 按照制备例13步骤1-5，在步骤1中使用2-(甲氧基(甲基)氨甲酰)吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯和(3-氯苯基)锂，制备2-((S)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)-吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例18 3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-((R)-(苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3g，7.04mmol)在MeOH(60mL)中的溶液中添加湿Pd(OH)2/C(300mg)。在50psi氮气下于50℃搅拌反应混合物3小时。过滤悬浮液并真空浓缩滤液。粗产物通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.4g，51％)。1H NMR(CD3OD)δ7.40-7.22(m，5H)，4.20(m，1H)，4.01(m，1H)，3.81(m，1H)，3.6(s，3H)，3.27(m，3H)，2.84(m，2H)，1.8-1.5(m，2H)，1.45(s，9H)。MS ESI+ve m/z 393(M+1)。
制备例19 3-((R)-(3-氯苯基)(2-(2-氰基-3-甲基胍基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-((R)-(3-氯苯基)(2-((氰基亚氨基)(甲基硫基)甲基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将25mL烧瓶充以溶解于50mL MeCN中的3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3g，8.15mmol)和氰基二硫代碳亚胺酸二甲酯(1.2g，8.15mmol)，添加1mL Et3N，搅拌混合物过夜。真空蒸发混合物，残余物通过色谱法纯化，得到所需的3-((R)-(3-氯苯基)(2-((氰基亚氨基)(甲基硫基)甲基氨基)乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.2g，58％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.28(m，2H)，7.23(m，1H)，7.16(m，1H)，4.10(m，2H)，3.86(m，1H)，3.68(m，2H)，3.22(m，2H)，2.72(m，2H)，1.62(m，2H)，1.46(s，9H)，1.40-1.10(m，4H)。
步骤2.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(2-氰基-3-甲基胍基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将100mL烧瓶充以溶解于50mL MeNH2/EtOH溶液中的3-((R)-(3-氯苯基)(2-((氰基亚氨基)(甲基硫基)甲基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.2g，4.72mmol)并搅拌过夜。真空浓缩混合物，并在不进行任何进一步的纯化的情况下使用。
制备例20 3-((R)-(3-氯苯基)(2-(噻唑-2-基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(噻唑-2-基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将25mL烧瓶充以溶解于丙-2-醇(5mL)中的3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(100mg，0.27mmol)和2-溴-噻唑(22mg，0.135mmol)并在回流下搅拌96小时。真空下除去溶剂和过量的试剂，得到的残余物通过色谱法纯化，得到纯的3-((R)-(3-氯苯基)(2-(噻唑-2-基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(30mg，25％)。
制备例21 3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)-氮杂环庚烷-1-羧酸(R)-叔丁酯
类似于制备例13，在步骤1中使用3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，获得3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)氮杂环庚烷-1-羧酸(R)-叔丁酯。
以下化合物按照类似于以上所述的程序制备 3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)氮杂环庚烷-1-羧酸(R)-叔丁酯 制备例22 3-(1-(3-氟苯基)-4-(甲氧基羰基氨基)丁基)哌啶-1-羧酸(3S)-叔丁酯
步骤1.3-(溴(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯 将250mL圆底烧瓶装以0.4845g(1.56mmol，1.0当量)的3-((R)-(3-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯、0.7920g(2.39mmol，1.52当量)的四溴化碳和15mL CH2Cl2。用冰浴冷却烧瓶，然后在5分钟内分次添加0.6258g(2.38mmol，1.52当量)的三苯基膦。在搅拌过夜的同时使反应混合物缓慢升温至室温。通过LC-MS分析混合物显示两个具有相同质量的峰236[M-C4H8-Br]+，符合两种异构体的大约62∶38的混合物在16分钟色谱中分别为tR＝10.48min和10.93min。真空除去溶剂后，残余物通过ISCO纯化(40g硅胶柱，0％→30％乙酸乙酯/己烷，40min，流速40mL/min)，得到0.2470g(42％)3-(溴(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z236(M-C4H8-Br)。异构体1和2，MS ESI+ve m/z 236(M-C4H8-Br)，tR＝2.13，2.17min，在3分钟色谱法中。
步骤2.3-(4-氨基-1-(3-氟苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(3S)-叔丁酯 将100mL圆底烧瓶装以0.2470g(0.66mmol，1.0当量)的3-(溴(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(3R)-叔丁酯、10mL THF和7mL(0.70mmol，1.05当量)的0.1M THF中的Li2CuCl4。混合物在冰浴中冷却，然后通过导管添加由5.2900g 1-(3-溴丙基)-2，2，5，5-四甲基-1，2，5-氮杂二硅杂环戊烷和0.5366g镁屑在THF新鲜制备的(3-(2，2，5，5-四甲基-1，2，5-氮杂二硅杂环戊烷-1-基)丙基)溴化镁的THF溶液。得到的深紫色溶液在0℃下搅拌3小时。用10mL 10％Na2CO3猝灭反应混合物，通过过滤剂

545过滤用CH2Cl2洗涤，用K2CO3干燥。减压蒸发溶剂后，通过反相HPLC(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，10％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，13min，然后90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，6min，流速25mL/min)纯化粗产物，得到0.092g(30％)的3-(4-氨基-1-(3-氟苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(3S)-叔丁酯的TFA盐。异构体1和2，MS ESI+vem/z 351(M+H)，tR＝1.41，1.49min，在3分钟色谱法中。
步骤3.3-(1-(3-氟苯基)-4-(甲氧基羰基氨基)丁基)哌啶-1-羧酸(3S)-叔丁酯 将100mL圆底烧瓶装以0.092g 3-(4-氨基-1-(3-氟苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(3S)-叔丁酯的TFA盐、0.152g DMAP、10mL CH2Cl2和2mL DIPEA。用冰浴冷却混合物，然后添加氯甲酸甲酯(0.280g)在CH2Cl2(3mL)中的溶液。在搅拌过夜的同时使反应混合物缓慢升温至室温。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC(

Luna5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，70％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，8min，然后90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，2min，流速25mL/min)纯化粗产物，得到0.0306g(38％)3-(1-(3-氟苯基)-4-(甲氧基羰基氨基)丁基)哌啶-1-羧酸(3S)-叔丁酯。异构体1和2，MS ESI+ve m/z 431(MNa+)，409(MH+)，tR＝1.91，1.98min，在3分钟色谱法中。
制备例23 3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-乙酰基哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和N2下向3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.320g，12.2mmol)在THF(30mL)中的溶液中添加15mL 3.0MTHF中的MeMgCl。0.5小时后，使混合物升温至室温4小时。然后用40mL 1N HCl猝灭反应混合物，用乙酸乙酯萃取(3×)，用Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂后，粗3-乙酰基哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯不进行进一步纯化而直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 250(M+Na)。
步骤2.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和N2下向如上所述获得的3-乙酰基哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯在THF(20mL)中的溶液中添加70mL THF中的0.5M(3-氯苯基)溴化镁。使混合物缓慢升温至12℃18小时。然后用10mL 10％Na2CO3猝灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取(3×)，用Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂后，粗产物通过反相HPLC纯化，得到2.5463g(62％，两步)3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 362(M+Na)。
步骤3.3-((R)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)-1-(3-氯苯基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.5463g，7.49mmol)、60％NaH(2.120g，53mmol)和(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(7.820g，32.7mmol)在THF中的混合物于80℃加热25小时，然后冷却至室温。然后用水猝灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取(3×)，用Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂后，粗3-((R)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)-1-(3-氯苯基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯不进行进一步的纯化而直接用于下一步骤中。
步骤4.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-羟基乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)-1-(3-氯苯基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯、四乙基氯化铵(7.600g，50.9mmol)在CH3CN中的混合物于45℃加热1小时，然后在室温下搅拌过夜。减压蒸发反应混合物，将残余物溶解于水并用Et2O萃取(3×)，用Na2SO4干燥。真空除去溶剂后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到1.000g(35％，两步)3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-羟基乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 406(M+Na)。
步骤5.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(1，3-二氧代异氮杂茚-2-基)乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-羟基乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.000g，2.6mmol)、苯邻二甲酰亚胺(1.490g，10.1mmol)、三苯基膦(4.130g，15.7mmol)和DIAD(3.430g，17.0mmol)在THF中的混合物在室温下搅拌40小时。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到0.6792g(51％)3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(1，3-二氧代异氮杂茚-2-基)乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z537(M+Na)。
步骤6.3-((R)-1-(2-氨基乙氧基)-1-(3-氯苯基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(1，3-二氧代异氮杂茚-2-基)乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.6792g，1.32mmol)和一水合肼(2.350g)在乙醇(20mL)中的混合物于100℃加热19小时，然后冷却至室温。滤出沉淀物，用CH2Cl2洗涤。减压蒸发滤液后，粗3-((R)-1-(2-氨基乙氧基)-1-(3-氯苯基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.410g，81％)不进行进一步纯化而用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 385(M+H)。
步骤7.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-1-(2-氨基乙氧基)-1-(3-氯苯基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.410g，1.07mmol)、DMAP(0.380g)、DIPEA(4mL)和氯甲酸甲酯(0.960g)在CH2Cl2中的混合物在室温下搅拌20小时。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。MSESI+ve m/z 465(M+Na)。
制备例24 3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1-2.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 利用类似于制备例20步骤1-2的程序，在步骤1中使用丙基溴化镁，获得3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
步骤3.3-((R)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向NaH(2.4g，60mmol)在干THF(20mL)中的悬浮液中添加3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7.34g，20mmol)在干THF(80mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后逐滴添加(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(14.3g，60mmol)在THF(100mL)中的溶液。添加后，将得到的混合物在回流下搅拌过夜。向反应混合物中逐滴添加饱和NH4Cl溶液，用EtOAc萃取(2×100mL)，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，得到3-((R)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.1g，10％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.35(s，1H)，7.22(m，3H)，4.05(m，2H)，3.81(m，2H)，3.31(m，2H)，2.42(t，3H)，2.06(m，3H)，1.85(m，2H)，1.58(m，2H)，1.44(s，9H)，1.41-1.01(m，7H)，0.92(s，9H)，0.095(s，6H)。
步骤4.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-羟基乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在室温下向3-((R)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.1g，2.1mmol)在MeCN(5mL)中的溶液中分次添加TBAF(1.1g，4.2mmol)。在50-60℃下搅拌反应混合物2-3小时。在真空中除去溶剂，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-羟基乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(750mg，87％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.31(s，1H)，7.24(m，2H)，7.17(m，1H)，4.21-3.90(m，2H)，3.80(m，2H)，3.37(m，2H)，2.31(m，1H)，2.05(m，3H)，1.88(m，4H)，1.56(m，1H)，1.44(s，9H)，1.38-1.10(m，2H)，0.95(t，3H)。
步骤5.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-5-0℃下向3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-羟基乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(750mg，1.82mmol)在干CH2Cl2(10mL)中的溶液中添加Et3N(550mg，5.46mmol)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(270mg，2.37mmol)在干CH2Cl2(5mL)中的溶液。添加后，使其逐渐升温至室温。在反应完全后，加水(20mL)。用CH2Cl2(3×30mL)萃取水层。合并的有机层用10％柠檬酸、饱和NaHCO3和盐水深入生活，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(900mg，99％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤6.3-((R)-1-(2-叠氮基乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(900mg，1.82mmol)溶解于无水DMF(15mL)中，添加固体NaN3(230mg，3.51mmol)，并将反应混合物加热至70℃过夜。使反应混合物冷却至室温，然后用乙酸乙酯(110mL)和(30mL)稀释，有机相用水洗涤(3×20mL)，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到3-((R)-1-(2-叠氮基乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(790mg，99％)。
步骤7.3-((R)-1-(2-氨基乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-1-(2-叠氮基乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(790mg，1.81mmol)在THF/H2O混合物(20∶1，10.5mL)中的溶液中添加PPh3(1.9g，7.25mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。减压除去溶剂得到残余物，通过硅胶柱色谱法纯化，得到3-((R)-1-(2-氨基乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(410mg，55％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ7.31(s，1H)，7.24(m，2H)，7.15(m，1H)，4.31-3.52(m，3H)，3.27(m，2H)，2.93(m，1H)，2.41-2.22(m，3H)，2.15-1.95(m，3H)，1.85(m，4H)，1.57(m，1H)，1.44(s，9H)，1.38-1.10(m，2H)，0.95(t，3H)。
步骤8.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-1-(2-氨基乙氧基)-1-(3-氯苯基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(410mg，1mmol)和DMAP(61mg，0.5mmol)在干CH2Cl2(3mL)中的溶液中添加Et3N(303mg，3mmol)。利用冰水浴将得到的混合物冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(472mg，5mmol)在干CH2Cl2(2mL)中的溶液。添加后，于0-5℃搅拌反应混合物1-2小时。反应完全后加水(5mL)并用CH2Cl2(3×15mL)萃取水层。合并的有机层用10％柠檬酸(2×10mL)和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(460mg，98％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
制备例25 1)与以上制备例1类似地获得3-((S)-1-(3-氟苯基)-1-羟基-4-(甲氧基羰基氨基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
2)与以上制备例1类似地获得3-((S)-1-(3-氯-2-氟苯基)-1-羟基-4-(甲氧基羰基氨基)丁基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例26 (R)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-2-羧酸
步骤1.(R)-2-(苄氧基甲基)吗啉 向搅拌的(R)-2-(苄氧基甲基)环氧乙烷(10.0g，60.9mmol)和NaOH(19.49g，487.2mmol)在H2O(46mL)和MeOH(18mL)的混合物中分次添加硫酸氢2-氨基乙酯(36.8g，255.8mmol)。添加后，在40℃下搅拌反应混合物2小时。冷却后，将混合物用NaOH(15.0g，375.0mmol)处理，然后用甲苯(70mL)处理，并在65℃下搅拌过夜。冷却混合物，用甲苯(27mL)和H2O(92mL)稀释。分离甲苯层，用CH2Cl2(2×50mL)萃取水层。浓缩合并的有机层，得到粗(R)-2-(苄氧基甲基)吗啉(～14g)，在不进行纯化的情况下使用。MS m/z 208(M+H+)。
步骤2.2-(苄氧基甲基)吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向粗(R)-2-(苄氧基甲基)吗啉(～14g)在丙酮(100mL)和H2O(30mL)的溶液中添加K2CO3(25.2g，182.7mmol)，然后添加(Boc)2O(14.6g，67.0mmol)。使得到的溶液升温至室温，搅拌至没有原料(～30min)，在真空下除去丙酮，用CH2Cl2(4×10mL)萃取水溶液。合并的有机层用H2O(10mL)洗涤，除去溶剂。残余物通过急骤柱色谱法纯化，得到2-(苄氧基甲基)吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯(8.33g，44％，2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)7.34(m，5H)，4.56(s，2H)，3.88(d，2H)，3.82(br，1H)，3.40(m，1H)，3.48(m，3H)，2.94(m，1H)，2.76(m，1H)，1.44(s，9H)；MS m/z 330(M+Na+)。
步骤3.2-(羟基甲基)吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯 向2-(苄氧基甲基)吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯(8.33g，27.1mmol)在EtOH中的溶液中添加Pd-C(湿，3.6g)，将得到的混合物在室温和H2气球下搅拌过夜。过滤后，在真空下除去溶剂，残余物通过急骤柱色谱法纯化，得到2-(羟基甲基)吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯(5.84g，99％)，为澄清的油。1H NMR(400MHz，CDCl3)3.88(d，2H)，3.82(br，1H)，3.64(d，1H)，3.56(m，3H)，2.94(m，1H)，2.76(m，1H)，1.90(br，1H)，1.44(s，9H)；MS m/z 218(M+H+)。
步骤4.(R)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-2-羧酸 将饱和NaHCO3水溶液(15mL)添加到2-(羟基甲基)-吗啉-4-羧酸(R)-叔丁酯(1.09g，5.0mmol)在丙酮(50mL)中的溶液中，搅拌并保持在0℃。添加固体NaBr(0.1g，1mmol)和TEMPO(0.015g，0.1mmol)。然后于0℃在20分钟内缓慢添加三氯异氰尿酸(2.32g，10.0mmol)。添加后，使混合物升温至室温并搅拌过夜。添加2-丙醇(3mL)，将得到的溶液在室温下搅拌30分钟，通过Celite垫过滤，在真空下浓缩，并用饱和Na2CO3水溶液(15mL)处理。将水溶液用EtOAc(5mL)洗涤，用6N HCl酸化，用EtOAc萃取(5×10mL)。合并的有机层用Na2SO4干燥，并除去溶剂，得到(R)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-2-羧酸(1.07g，92％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.20(br，1H)，4.12(d，1H)，4.02(d，1H)，3.84(m，1H)，3.62(m，1H)，3.04(m，2H)，1.44(s，9H)；MS m/z 232(M+H+)。
制备例27 利用类似于制备例1步骤1和2和制备例4所述的步骤，由(R)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-2-羧酸制备2-((S)-(3-氯-2-氟苯基)((R)-吗啉-2-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。
制备例A 2-氨基-3-环己基丙基氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基甲磺酸酯 将(S)-N-Boc-2-氨基-3-环己基丙醇(20g，0.078mol)在CH2Cl2(400mL)和三乙胺(19.6g，0.195mol)中的溶液冷却至-20℃。通过快速逐滴添加加入甲基磺酰氯(19.5g，0.171mol)，保持内部温度为-20℃。于-20℃搅拌反应混合物另外30分钟，然后于0℃搅拌1小时，然后用冰冷的水(200mL)猝灭。将混合物用CH2Cl2(3×100mL)萃取，用水洗涤(3×50mL)，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基甲磺酸酯(23.3g，90％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一反应中。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.93(m，1H)，4.60(d，J＝7.6Hz，1H)，3.67(m，2H)，3.12(s，3H)，1.87-1.50(m，5H)，1.45(s，9H)，1.40-0.72(m，8H)，MS(E/Z)336(M+H+)。
步骤2.1-叠氮基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基甲磺酸酯(23.3g，0.070mol)在无水DMF(300mL)中的溶液中添加固体NaN3(13.5g，0.21mol)。将反应混合物80℃加热过夜。冷却至室温后，用EtOAc(1200mL)和水(400mL)稀释反应溶液。分离有机相，用盐水洗涤(3×300mL)，用Na2SO4干燥，并蒸发。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到1-叠氮基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，为澄清油状物(13.6g，69％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.45(d，J＝8.0Hz，1H)，3.84(m，1H)，3.45(m，1H)，3.31(m，1H)，1.81-1.60(m，5H)，1.45(s，9H)，1.40-0.78(m，8H)。MS(E/Z)383(M+H+)。
步骤3.1-氨基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 用气球氢化1-叠氮基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(13.6g，0.048mol)和Pd/C(1.4g)在甲醇(200mL)中的混合物过夜。使混合物通过Celite垫过滤，并除去溶剂，得到1-氨基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(10.5g，86％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.52(d，J＝8.4Hz，1H)，3.68(m，2H)，2.73(dd，J＝13.6&4.4Hz，1H)，2.58(dd，J＝13.6&6.0Hz，1H)，1.81(m，1H)，1.65(m，4H)，1.42(s，9H)，1.40-1.00(m，6H)，1.00-0.70(m，2H)。MS(E/Z)257(M+H+)。
步骤4.1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向剧烈搅拌1-氨基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(10.5g，0.041mol)、K2CO3(10.2g，73.8mol)、H2O(60mL)和CH2Cl2(120mL)的双相溶液中加入1-[2-三甲基硅烷基)乙氧基羰基氧基]吡咯烷-2，5-二酮(TeocOSu)(11.14g，0.043mol)。将混合物在室温下搅拌2小时，然后反应液用盐水洗涤(3×20mL)，用Na2SO4干燥，滗析，除去溶剂，并在50g SiO2上分离，得到为澄清油状物的1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(8.5g，52％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)5.52(brs，1H)，4.42(brs，1H)，4.11(m，2H)，3.73(brs，1H)，3.30-3.03(m，2H)，1.81-1.50(m，5H)，1.43(s，9H)，1.42-1.02(m，6H)，1.02-0.76(m，4H)，0.03(s，9H)；MS(E/Z)401(M+H+)。
步骤5.(S)-2-(三甲基硅烷基)乙基2-氨基-3-环己基丙基氨基甲酸酯 将1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(8.5g，0.0213mol)溶解于最小体积的乙醚(120mL)中，并添加到对甲苯磺酸(4.46g，0.023mol)在25mL无水EtOH中的溶液中。将该溶液置于旋转蒸发器上，在室温下除去乙醚。然后将烧瓶降低至水浴中(温度60℃)，并在除去剩余溶剂的同时进行Boc基团的选择性脱保护。到2小时时反应完成，并且得到灰白色固体。将该物质冷却至室温并且溶解在100mL EtOH∶H2O混合物(1∶1，v/v)中。用己烷s∶EtOAc(5∶1，v/v，3×12mL)洗涤，用1N NaOH(pH＞10)碱化，用EtOAc(3×50mL)萃取。洗涤(3×5mL 1N NaOH，3×5mL盐水)合并的有机萃取物，干燥，滗析并除去溶剂，得到2-氨基-3-环己基丙基氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯的游离碱(5.24g，82％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)5.09(brs，1H)，4.14(t，J＝8.4Hz，2H)，3.23(m，1H)2.88(m，2H)，1.75-1.48(m，5H)，1.5-0.75(m，10H)，0.05(s，9H)。MS(E/Z)301(M+H+)。
制备例B 2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基甲磺酸酯(28g，83.6mmol)溶解于甲胺的乙醇溶液(大约30％重量，300mL)中。将反应液于50-60℃加热过夜并真空浓缩。将残余物溶解在EtOAc中，用盐水(2×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过急骤色谱法纯化(首先AcOEt∶Hex.＝2∶1，然后EtOAc∶MeOH＝1∶1)，得到纯的1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(10.6g，47％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.81(brs，1H)，3.89(m，1H)，2.77(m，2H)，2.54(s，3H)，2.44(m，2H)，1.78(m，1H)，1.67(m，4H)，1.44(s，9H)，1.50-1.10(m，6H)，1.00-0.77(m，2H)，0.05(s，9H)。MS(E/Z)271(M+H+)。
步骤2.1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向剧烈搅拌的1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(7.25g，0.027mol)、K2CO3(6.66g，0.048mol)、H2O(40mL)和CH2Cl2(80mL)的2-相溶液中添加1-[2-三甲基硅烷基)乙氧基羰基氧基]吡咯烷-2，5-二酮(TeocOSu)固体(7.3g，0.028mol)。在室温下搅拌2小时后，将反应液加至CH2Cl2(200mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(3×15mL)洗涤，然后用盐水(3×15mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩。在40g硅胶上通过柱色谱法纯化残余物，得到1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，为澄清的油(5.78g，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.50(d，J＝7.6Hz，1H)，4.15(t，J＝7.6Hz，2H)，3.89(m，1H)，3.56-2.95(m，2H)，2.92&2.90(s，3H)，1.82(m，1H)，1.66(m，4H)，1.41(s，9H)，1.50-1.10(m，6H)，1.00-0.70(m，4H)，0.01(s，9H)。MS(E/Z)415(M+H+)。
步骤3.(S)-2-(三甲基硅烷基)乙基2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸酯 将1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(5.78g，0.014mol)溶解于最小体积的乙醚(100mL)中并添加到TsOH(2.92g，0.0154mol)在20.0mL无水EtOH的溶液中。将该溶液置于旋转蒸发器上，在环境温度下除去Et2O。然后使烧瓶降低至水浴(温度60℃)中，并在除去剩余溶剂的同时进行Boc基团的选择性脱保护。到2小时时反应完成，并且得到灰白色固体，用己烷s∶EtOAc(5∶1，v/v，3×10mL)洗涤，用1N NaOH(pH＞10)碱化，并用乙醚(3×50mL)萃取。合并的有机萃取物用1N NaOH(3×5mL)和盐水(3×5mL)洗涤，干燥，滗析并除去溶剂，得到2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯的游离碱(3.5g，80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.15(t，J＝8.4Hz，2H)，3.10(m，3H)，2.91(s，3H)，1.78-1.56(m，5H)，1.50-1.00(M，6H)，1.00-0.70(m，4H)，0.01(s，9H)。MS(E/Z)315(M+H+)。
制备例C (2S，3S)-3-氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯
步骤1.(2S，3R)-1-环己基-3-羟基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 向(S)-2-环己基-1-((S)-环氧乙-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.63g，2.5mmol)和三乙胺(0.65mL，5mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中添加Pd/C(0.1g)，在30psi压力和室温下氢化该混合物过夜。过滤混合物并浓缩滤液，得到(2S，3R)-1-环己基-3-羟基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.44g，70％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.48(brs，1H)，3.78(m，2H)，2.30(brs，1H)，1.82(m，1H)，1.66(m，4h)，1.45(s，9H)，1.40-1.00(m，6H)，1.10(d，J＝6.4Hz，3H)，1.00-0.70(m，2H)；MS(E/Z)272(M+H+)。
步骤2.(2S，3R)-1-环己基-3-(甲基磺酰氧基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 在0至-5℃下向(2S，3R)-1-环己基-3-羟基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.44g，1.62mmol)在干CH2Cl2(10mL)中的溶液中添加Et3N(0.71g，7mmol，4当量)。在相同温度下逐滴添加甲磺酰氯(0.8g，7mmol，2当量)在干CH2Cl2(5mL)中的溶液。使混合物逐渐升温至室温。TLC显示原料消失。加水(30mL)。水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取。合并的有机层用10％柠檬酸水溶液、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到(2S，3R)-1-环己基-3-(甲基磺酰氧基)丁-2-基-氨基甲酸叔丁酯(0.46g，81％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤3.(2S，3S)-3-叠氮基-1-环己基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(2S，3R)-1-环己基-3-(甲基磺酰氧基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.46g，1.32mmol)溶解于无水DMF(10mL)中，添加固体NaN3(0.26g，4mmol)，将反应混合物加热至80℃过夜。使反应混合物冷却至室温，用EtOAc(100mL)和水(30mL)稀释。有机相用水洗涤(3×30mL)，用Na2SO4干燥，并蒸发。通过硅胶柱色谱法分离残余物，得到(2S，3S)-3-叠氮基-1-环己基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.215g，55％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.38(d，J＝9.2Hz，1H)，3.72(m，1H)，3.60(m，1H)，1.82(m，1H)，1.67(m，4h)，1.44(s，9H)，1.40-1.00(m，6H)，1.28(d，J＝6.4Hz，3H)，1.00-0.75(m，2H)；MS(E/Z)297(M+H+)。
步骤4.(2S，3S)-3-氨基-1-环己基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(2S，3S)-3-叠氮基-1-环己基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.215g，0.73mmol)在甲醇(10mL)中的溶液添加到湿Pd/C(0.1g)上，用气球氢化过夜。反应混合物通过Celite垫过滤并除去溶剂，得到(2S，3S)-3-氨基-1-环己基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.153g，78％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤5.(2S，3S)-3-(叔丁氧基羰基)氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯 在0℃下向(2S，3S)-3-氨基-1-环己基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.153g，0.57mmol)和Et3N(0.19mL，1.42mmol)在甲醇(5mL)中的混合物中逐滴添加CBZCl(0.116g，0.68mmol)在甲醇(3mL)中的溶液。使混合物升温至室温，搅拌2小时，蒸发除去甲醇，用水(15mL)稀释，用EtOAc萃取(3×10mL)。合并的有机层用盐水洗涤(15mL)，干燥并蒸发，得到(2S，3S)-3-(叔丁氧基羰基)氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯(0.117g，51％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(400MHz，CDCl3)7.32(m，5H)，5.37(brs，1H)，5.09(s，2H)，4.36(brs(1H)，3.76(m，2H)，1.82(m，1H)，1.66(m，4H)，1.44(s，9H)，1.35-1.10(m，6H)，1.07(d，J＝6.4Hz，3H)，1.00-0.78(m，2H)；MS(E/Z)405(M+H+)。
步骤6.(2S，3S)-3-氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯 将(2S，3S)-3-(叔丁氧基羰基)氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯(0.117g，0.29mmol)溶解在2N HCl的甲醇(10mL，20mmol)溶液中。在40-50℃下搅拌混合物2小时。真空浓缩混合物，得到(2S，3S)-3-氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯的盐酸盐(0.077g，78％)。
按照上述程序由(1S，R)-(2-环己基-1-环氧乙烷基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯开始制备(2R，3S)-3-氨基-4-环己基丁-2-基氨基甲酸苄酯。
制备例D 3-氨基-5，5-二甲基己基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-1-(甲基氨甲酰)-3，3-二甲基丁基氨基甲酸叔丁酯 向(S)-2-(叔丁氧基氨基羰基氨基)-4，4-二甲基戊酸(1.0g，4.08mmol)和甲胺盐酸盐在DMF(10mL)中的溶液中添加DIEA(2.1mL，12.2mmol)，然后添加HBTU(1.55g，4.08mmol)。在室温下搅拌得到的溶液，直到没有原料(约2h)。用EtOAc(10mL)稀释溶液，用1NHCl水溶液(2×5mL)、饱和NaHCO3水溶液(10mL)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥。除去溶剂后，通过急骤柱色谱法纯化粗产物，得到(S)-1-(甲基氨甲酰)-3，3-二甲基丁基氨基甲酸叔丁酯(1.05g，quant.)，为澄清油。MS m/z 281(M+Na+)。
步骤2.(S)-4，4-二甲基-1-(甲基氨基)戊-2-基氨基甲酸叔丁酯 在0℃下向(S)-1-(甲基氨甲酰)-3，3-二甲基丁基氨基甲酸叔丁酯(1.05g，4.08mmol)在甲苯(10mL)中的溶液中逐滴添加Red-Al(65wt％，在甲苯中，3.73mL，12.2mmol)。使溶液缓慢升温至室温并搅拌过夜。用冰水猝灭溶液，通过Celite过滤，并除去溶剂，得到(S)-4，4-二甲基-1-(甲基氨基)戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.79g，79％)，为澄清油。MS m/z 245(M+H+)。
步骤3.(S)-2-叔丁基羧基氨基-4，4-二甲基戊基甲基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 向(S)-4，4-二甲基-1-(甲基氨基)戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.79g，3.24mmol)在丙酮(10mL)和水(3mL)的溶液中添加K2CO3(1.34g，9.72mmol)，然后添加Teoc-OSu(0.84g，3.24mmol)。在室温下搅拌得到的混合物，直到没有原料(～1h)。真空除去丙酮，含水残余物用CH2Cl2(4×5mL)萃取，浓缩合并的有机层，通过急骤柱色谱法纯化粗残余物，得到(S)-2-叔丁基羧基氨基-4，4-二甲基戊基甲基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.74g，59％)，为澄清的油。MS m/z 389(M+H+)。
步骤4.3-氨基-5，5-二甲基己基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 向(S)-2-叔丁基羧基氨基-4，4-二甲基戊基甲基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.74g，1.90mmol)在醚(7mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸(0.37g，1.92mmol)在1.5mL乙醇(1.5mL)中的溶液。借助醚(1mL)完成对甲苯磺酸的转移。将溶液置于旋转蒸发器上，在室温下减压除去醚。然后，通过继续抽空，使浴温升至60-65℃ 20分钟，期间气体选出明显。3-氨基-5，5-二甲基己基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯的甲苯磺酸盐的固体残余物在不进行纯化的情况下用于下一步骤中。MS m/z 289(M+H+)。
制备例E (S)-2-氨基-3-(顺式-4-氟环己基)丙基甲基氨基甲酸苄酯
步骤1.(S)-1-(甲氧基羰基)-2-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-乙基氨基甲酸叔丁酯 在0℃下向TBSCl(12.7g，85mmol)在二氯甲烷(20mL)的溶液中逐滴添加2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-羟基-环己基)-丙酸甲酯(17g，56mmol)和咪唑(7.68g，113mmol)在二氯甲烷(200mL)中的混合物。在室温下搅拌5小时后，用水和盐水洗涤反应混合物。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到(S)-1-(甲氧基羰基)-2-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)乙基氨基甲酸叔丁酯(21g，91％)，在不进行进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.08(d，6H)，0.89(d，9H)，1.45(s，9H)，1.51(m，4H)，1.58(m，1H)，1.68(t，4H)，1.85(d，1H)3.71(d，3H)，3.91(m，1H)，4.34(m，1H)，4.86(m，1H)。
步骤2.(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙-1-醇 在0℃下向(S)-1-(甲氧基羰基)-2-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-环己基)乙基氨基甲酸叔丁酯(25g，60mmol)在EtOH(500mL)的溶液中分次添加NaBH4(18g，480mmol)。将混合物在室温下搅拌6小时然后蒸发。残余物在水(200mL)和EtOAc(2×200mL)之间分配。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发，得到(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙-1-醇(23g，收率98％)。1H NMR(CDCl3，400MHZ)δ0.08(d，6H)，0.89(d，9H)，1.30(m，4H)，1.40(t，2H)，1.45(s，9H)，1.61(m，1H)，1.58(m，1H)，1.68(t，4H)，1.85(d，1H)3.50(m，1H)，3.65(m，1H)，3.73(m，1H)，3.91(s，1H)，4.53(s，1H)。
步骤3.(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-1-甲基磺酰氧基丙烷 向(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-环己基)丙-1-醇(23g，59mmol)在CH2Cl2(250mL)中的溶液中添加Et3N(15g，148mmol)。使反应混合物冷却至-20℃，逐滴添加MsCl(14.9g，131mmol)在CH2Cl2(40mL)中的溶液。返回室温后再搅拌1小时，此时TLC显示没有原料，加水(100mL)，用CH2Cl2(2×150mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并蒸发，得到粗(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基-甲硅烷基氧基)环己基)-1-甲基磺酰氧基丙烷(30g)，在不进行进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤4.(S)-1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将粗(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-1-甲基磺酰氧基丙烷(30g)在甲胺醇溶液(300mL)中的溶液在回流下加热过夜。在真空中除去溶剂，通过二氧化硅色谱法纯化残余物，获得为固体的(S)-1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(15g，63％，两步)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.08(d，6H)，0.89(d，9H)，1.25(t，3H)，1.45(s，9H)，1.61(m，2H)，1.82(t，2H)，2.01(d，1H)，2.56(d，2H)，2.80(d，2H)，2.95(t，2H)，3.49(m，1H)，3.61(m，1H)，3.90(s，1H)，5.35(d，1H)，7.15(m，1H)。
步骤5.(S)-1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 在-20℃下向(S)-1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(112g，209mmol)和Et3N(52.8g，522mmol)在CH2Cl2(1200mL)中的混合溶液中逐滴添加氯甲酸苄酯(39g，230mmol)在CH2Cl2(40mL)中的溶液。另外搅拌2小时后，加水(400mL)，用CH2Cl2(2×200mL)萃取混合物。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并蒸发。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，得到粗(S)-1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(90g)，其为油状物，是两种异构体混合物。通过制备HPLC分离异构体。1H NMR(CDCl3，400MHZ)δ＝0.08(s，6H)，0.89(s，9H)，1.28(m，4H)，1.40(d，9H)，1.59(m，4H)，2.96(d，3H)，3.05(d，1H)，3.15(d，1H)，3.45(t，3H)，3.90(s，1H)，5.12(d，2H)，7.33(m，5H)。
步骤6.(S)-1-(反式-4-羟基环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 在50℃下用4M nBu4NF/THF(50mL)处理(S)-1-(反式-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(18g，34mmol)。加水(30mL)，用EtOAc(3×100mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并蒸发，得到粗(S)-1-(反式-4-羟基环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(9g，64％)，通过二氧化硅色谱法纯化。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.41(d，9H)，1.65(m，6H)，1.95(m，3H)，2.98(d，3H)，3.10(m，1H)，3.52(m，1H)，3.90(m，1H)，5.13(d，2H)，7.33(m，5H)。
步骤7.(S)-1-(顺式-4-氟环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(S)-1-(反式-4-羟基环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(3g，7mmol)、Et3N(12mL，88mmol)、NEt3(HF)3(4.71mL，29mmol)和过氟丁烷磺酰氟(5.21mL，29mmol)的混合物于50℃在THF(70mL，1mmol/10mL)中搅拌，直到HPLC显示完全转化。用水猝灭反应混合物，用EtOAc(2×100mL)萃取，用MgSO4干燥并蒸发。然后通过制备HPLC纯化残余物，得到(S)-1-(反式-4-氟环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.16g，40％)，为白色固体。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.41(d，9H)，1.68(m，6H)，1.96(m，3H)，2.98(d，3H)，3.20(m，1H)，3.52(m，1H)，3.90(m，1H)，5.13(d，2H)，7.33(m，5H)。
步骤8.(S)-2-氨基-3-(顺式-4-氟环己基)丙基甲基氨基甲酸苄酯 将(S)-1-(反式-4-氟环己基)-3-(N-(苄氧基羰基)-N-甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(550mg，1.3mmol)在TFA/CH2Cl2(20mL，v/v 20％)中的溶液在室温下搅拌1小时，用饱和NaHCO3水溶液猝灭，直到观察不到气体析出，用CH2Cl2(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，获得(S)-2-氨基-3-(顺式-4-氟环己基)丙基甲基氨基甲酸苄酯(400mg，收率95％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.42(m，4H)，1.64(m，4H)，2.98(d，3H)，3.21(m，1H)，3.50(m，1H)，3.90(m，1H)，5.13(d，2H)，7.33(m，5H)。
制备例F (S)-2-氨基-3-(反式-4-氟环己基)丙基甲基氨基甲酸苄酯
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(反式-4-氟环己基)丙基-(甲基)氨基甲酸苄酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(顺式-4-羟基环己基)-丙基(甲基)氨基甲酸苄酯(1g，2.38mmol)、碱Et3N(5mL，28mmol)、氟化物源NEt3(HF)3(1.9mL，9.52mmol)和全氟丁烷磺酰氟(2.1mL，9.52mmol)的混合物在带盖小瓶或烧瓶中在THF(24mL，1mmol/10mL)中在50℃下搅拌，直到LC显示完全转化。用水猝灭反应混合物，用EtOAc萃取(2×100mL)，用MgSO4干燥，并蒸发。通过制备HPLC纯化残余物，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(反式-4-氟环己基)丙基-(甲基)氨基甲酸苄酯(200mg，20％)，为白色固体。
步骤2.(2-氨基-3-(4-氟-环己基)-丙基)-甲基-氨基甲酸苄酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(反式-4-氟环己基)-丙基(甲基)氨基甲酸苄酯(200mg，0.47mmol)在TFA/CH2Cl2(15mL，v/v 20％)中的溶液在室温下搅拌1小时，然后添加饱和NaHCO3水溶液猝灭，直到气体析出停止。用CH2Cl2(2×50mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，获得(S)-2-氨基-3-(反式-4-氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸苄酯(140mg，收率93％)。1HNMR(CDCl3，400MHZ)δ1.42(m，4H)，1.64(m，4H)，2.98(d，3H)，3.21(m，1H)，3.50(m，1H)，3.90(m，1H)，5.13(d，2H)，7.33(m，5H)。
制备例G 2-氨基-3-(3-降金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1a-c.3-(3-降金刚烷基)丙酸 将250-mL烧瓶将以3-降金刚烷基甲醛(3.3g，22mol)、Ph3PCHCO2Me(9.2g，27.5mmol，1.25当量)和CHCl3(100mL)。将混合物加热至回流18小时。使澄清溶液冷却至环境温度并蒸发。粘稠残余物吸收于4∶1己烷s/EtOAc(200mL)中，并通过硅胶垫过滤。该垫用额外的4∶1己烷s/EtOAc(200mL)洗涤，蒸发滤液。在120g二氧化硅上通过急骤色谱法分离产物，用己烷中的0-17％EtOAc洗涤。获得3-(3-降金刚烷基)丙烯酸(E)-甲酯(4.13g，0.2mmol，90％)。
向500-mL压力瓶中装以3-(3-降金刚烷基)丙烯酸(E)-甲酯(7.8g，37.8mmol)、10％Pd/C(1.8g)和(MeOH)100mL。该瓶适合Parr氢化振荡器，用H2加压至50psi，抽空。填充/抽空步骤重复三次，将装置用50psi H2加压并振荡3小时。此时之后，tlc分析显示没有残余的烯酸酯。混合物通过celite垫过滤。用过的催化剂用另外的甲醇洗涤，蒸发合并的滤液，以定量收率得到3-(3-降金刚烷基)丙酸甲酯(7.8g，37.8mmol)。
将3-(3-降金刚烷基)丙酸甲酯(7.8g，37.8mmol)溶解在THF(150mL)中，使溶液冷却至0℃。向其中添加1.0M LiOH水溶液(148mL)。在0℃下剧烈搅拌双相反应混合物。3小时后，产生均质的溶液，LC-MS分析显示没有剩余的酯。通过逐滴添加浓缩盐酸使溶液的pH降至约为4。将混合物转移至分液漏斗中，分离层。水层用EtOAc(4×30mL)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到3-(3-降金刚烷基)丙酸(7.15g，36.8mmol)，为粘性固体。
步骤2.(S)-4-苄基-3-(3-(3-降金刚烷基)丙酰)

唑烷-2-酮 将3-(3-降金刚烷基)丙酸(7.15g，36.8mmol，1.0当量)溶解在THF(70mL)中，使溶液冷却至0℃。向搅拌的溶液中添加N-甲基吗啉(4.25mL，38.7mmol，1.05当量)和氯甲酸异丁酯(4.52mL，38.7mmol，1.05当量)。快速形成白色沉淀物，将含有3-(降金刚烷基)丙酸(异丁基碳酸)酐的混合物在0℃下搅拌0.5小时。向分离的500-mL三颈烧瓶装以S-(-)-4-苄基

唑烷酮(8.5g，47.8mmol，1.35当量)和THF(100mL)。将混合物冷却至-78℃，并在10分钟内添加nBuLi(19.1mL 2.5M溶液)。将其在-78℃下搅拌0.5小时。第一溶液通过Celite垫快速过滤，将得到的澄清滤液通过导管转移到去质子化的

唑烷酮溶液中。在-78℃下搅拌0.5小时后，LC-MS分析显示混合物酐被消耗。用盐水猝灭混合物，使其升温至室温。将混合物转移到分液漏斗中。分离有机层并蒸发。急骤色谱法(120g SiO2，0-27％EtOAc在己烷中)得到(S)-4-苄基-3-(3-(3-降金刚烷基)丙酰)

唑烷-2-酮。
步骤3a-d.(S)-1-((S)-4-苄基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-(3-降金刚烷基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 通过向烘箱干燥的50-mL烧瓶中装以干THF(10mL)和二异丙胺(152mg，1.5mmol，1.5当量)产生LDA的溶液。将混合物冷却至-0℃，在5分钟内逐滴添加nBuLi(2.5M，0.6mL，1.5mmol，1.5当量)。将混合物搅拌0.5h并冷却至-78℃。将(S)-4-苄基-3-(3-(3-降金刚烷基)丙酰)

唑烷-2-酮(335mg，1.0mmol，1.0当量)在THF(9mL)中的液冷却至-78℃并通过导管添加到LDA的溶液中。将混合物搅拌0.5小时。向一个单独的烧瓶中装以tBuCO2N＝NCO2tBu(345mg，1.5mmol，1.5当量)和THF(9mL)并冷却至-78℃。借助导管将该溶液转移到烯醇化物溶液中。将得到的混合物在-78℃下搅拌0.5小时。分析显示原料被消耗。用HOAc(0.5mL)猝灭混合物，使之升温至室温。将溶液转移到分液漏斗中，并用水和盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤。通过在SiO2上的急骤色谱法纯化产物，用0-37％己烷中的EtOAc洗脱。这产生1-((S)-1-((S)-4-苄基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-(3-降金刚烷基)-1-氧代丙-2-基)肼-1，2-二羧酸二叔丁酯(477mg，0.82mmol，82％)。
将Boc保护的肼溶解在3∶1CH2Cl2/TFA(20mL)中并搅拌4小时。LC-MS分析显示只存在所需产物。蒸发混合物，得到作为TFA盐的(S)-4-苄基-3-((S)-3-(3-降金刚烷基)-2-肼基丙酰)

唑烷-2-酮，其直接用于下一步骤中。
将肼TFA盐溶解在EtOH(10mL)中，并转移到Parr氢化振荡器中。添加PtO2(56mg，0.25mmol，0.3当量)，用H2使容器加压至60psi，抽空。重复填充/抽空操作三次，然后用60psi H2给装置加压并振荡4小时。此时后，在LC/MS中不再观察到肼。将混合物过滤并蒸发，得到粗(S)-3-((S)-2-氨基-3-环戊基丙酰)-4-苄基

唑烷-2-酮，其在不进行纯化的情况下使用。
将来自前一步骤的粗(S)-3-((S)-2-氨基-3-环戊基丙酰)-4-苄基

唑烷-2-酮溶解在1∶1的乙腈/10％K2CO3水溶液(20mL)中。添加Boc2O(327mg，1.5mmol，1.8当量)，并搅拌混合物4小时。LC-MS显示游离胺被消耗。在真空中除去乙腈，用EtOAc(2×20mL)萃取产物。合并的有机萃取物用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。急骤色谱法得到(S)-1-((S)-4-苄基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-(3-降金刚烷基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(148mg，0.32mmol)。
步骤4a-e.2-氨基-3-(3-降金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 将(S)-1-((S)-4-苄基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-(3-降金刚烷基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(2.0g，4.23mmol)溶解在THF中并使溶液冷却至0℃。添加甲醇(250μL)，随后添加LiBH4(2.0M，在THF中，8.6mL，4.0当量)溶液。在0℃下搅拌混合物，直到LC-MS分析指示原料已被消耗。添加饱和NH4Cl水溶液猝灭过量的LiBH4，将内容物转移到分液漏斗中。分离层，水层用EtOAc萃取，合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。保护的残余物通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化，用0-29％己烷中的EtOAc洗脱。获得1-(3-降金刚烷基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.24g，＞98％)。
将1-(3-降金刚烷基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(75mg，0.25mmol，1.0当量)溶解在CH2Cl2中并冷却至0℃。添加三乙胺(101mg，1.0mmol，4.0当量)，随后添加甲磺酰氯(58mg，0.50mmol，2.0当量)。搅拌混合物直到LC.MS分析显示原料被消耗。通过添加饱和NH4Cl水溶液猝灭混合物，将内容物转移到分液漏斗中。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(3-降金刚烷基)甲磺酸酯，其直接用于下一步骤中。
将粗甲磺酸酯溶解在33wt％甲胺的乙醇溶液(20mL)中。将混合物加热至回流过夜。蒸发溶液，残余物在EtOAc中吸收。溶液用饱和NaHCO3和盐水洗涤，并蒸发，得到粗1-(3-降金刚烷基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，其直接用于下一步骤。
将粗胺溶解在1∶1乙腈/10％K2CO3水溶液(20mL)中。添加TeocOSu(97mg，0.375mmol，1.5当量)，并搅拌混合物4小时。LC-MS显示游离胺被消耗。在真空中除去乙腈，含水残余物用EtOAc(2×20mL)萃取。合并的有机萃取物用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。将产物通过二氧化硅上的急骤色谱法分离，用0-27％EtOAc洗脱。分离出2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(3-降金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙基酯(36mg，0.080mmol，步骤4b-d的收率为32％)。
将2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(3-降金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯(36mg，0.080mmol，1.0当量)溶解在MeOH(5mL)中。添加甲苯磺酸水合物(16mg，0.088mmol，1.1当量)，在65℃真空下除去溶剂，得到2-氨基-3-(3-降金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。该物质在不进行纯化的情况下使用。
制备例H (2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.2-(碘甲基)四氢-2H-吡喃 用4-溴苯磺酰氯(14.3g，74.9mmol)处理(四氢-2H-吡喃-2-基)甲醇(7.91g，68.1mmol)、Et3N(14mL，102mmol)和催化DMAP的CH2Cl2溶液。2小时后用水猝灭反应。有机层用1M HCl和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。粗物质通过硅胶色谱法纯化(EtOAc/Hex)，得到油状物((四氢-2H-吡喃-2-基)甲基4-溴苯磺酸酯(16g)。
((四氢-2H-吡喃-2-基)甲基4-溴苯磺酸酯(16g，48mmol)在丙酮(250mL)中的溶液用碘化钠(73g，48mmol)处理。将溶液于40℃加热24小时。使反应液冷却至室温并减压除去丙酮。将残余物溶解在己烷和水中。水层用己烷萃取三次。合并的有机萃取物用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶，用己烷洗脱数次。除去溶剂后，分离出油状物2-(碘甲基)四氢-2H-吡喃(10g)。13C NMR(400MHz，CDCl3)77.2，68.8，31.7，25.6，23.2，10.0。
步骤2.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙酸(2S)-甲酯 在-78℃下向(R)-2，5-二氢-3，6-二甲氧基-2-异丙基吡嗪在THF中的溶液中逐滴添加n-BuLi(16mL，2.5M，在己烷中)。将混合物搅拌1小时并添加2-(碘甲基)四氢-2H-吡喃在THF(6mL)中的溶液。将反应瓶转移到-20℃冰箱中，搅拌72小时。用饱和NH4Cl水溶液猝灭反应，并用醚萃取水溶液。合并的有机层用Na2SO4干燥。减压除去溶剂，粗产物通过硅胶色谱法纯化(EtOAc/Hex)。将产物溶解在乙腈(50mL)和2M HCl水溶液(50mL)中并在室温下搅拌4小时。蒸发溶剂，将粗物质再溶解在水(100mL)和THF(100mL)中。使溶液冷却至0℃，分次添加K2CO3(23g，166mmol)，然后添加二碳酸二叔丁酯(22.6g，104mmol)。使混合物升温至室温，并搅拌数次。水层用EtOAc萃取(3x)。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(EtOAc/Hex)，得到2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙酸(2S)-甲酯(6.61g)。MS m/z310(M+Na)。
步骤3.(2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙酸(2S)-甲酯(3.88g，13.52mmol)溶解在4N HCl的二

烷溶液(4mL)中。脱保护完全后蒸发溶剂。将粗物质重新溶解在CH2Cl2中并用NaHCO3水溶液中和。水层用CH2Cl2萃取(3x)。合并的有机层用Na2SO4干燥并过滤。除去溶剂后，粗2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙酸(2S)-甲酯在不进行任何进一步纯化的情况下使用。MS m/z 188(M+1)。
在-78℃下，用氢化锂铝(8mL，1M在THF)处理在THF(16mL)中的2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙酸(2S)-甲酯(1.84g，7.74mmol)，其处理速度使得温度保持低于-65℃。使反应液升温至室温。完成后，将反应液冷却至0℃并通过逐滴加水来猝灭，避免温度升至2℃以上，然后将浆液额外搅拌1小时。通过与1M NaOH水溶液搅拌30分钟分散乳液，使其升温至室温。添加Celite并搅拌。使浆液通过celite并用二乙醚洗涤数次。浓缩滤液，得到油状物(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-1-醇，其在不进行进一步纯化的情况下使用。(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-1-醇在THF(20mL)和水(20mL)中的溶液冷却至0℃。添加碳酸钾(3.2g，23.2mmol)，然后添加二碳酸二叔丁酯(2.2g，10.06mmol)。随后使反应液升温至室温并搅拌2小时。水层用EtOAc萃取3次。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并过滤。除去溶剂后，粗物质通过硅胶色谱法纯化(EtOAc/Hex)，得到油状物(2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.41g)。MS m/z 282(M+Na)。
步骤4.(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 在0℃下，在CH2Cl2(50mL)中的(2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.41g，5.44mmol)用Et3N(2.3mL，16.3mmol)处理，然后用甲磺酰氯(1.1mL，13.6mmol)处理。搅拌反应液1小时，用水猝灭。有机层用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。除去溶剂后，粗物质利用硅胶色谱法纯化(EtOAc/Hex)，得到固体(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙基甲磺酸酯(0.90g)。MS m/z 360(M+Na)。
将甲磺酸酯(0.90g，2.66mmol)和叠氮钠(0.89g，13.3mmol)溶解在DMF(30mL)中。将混合物于60℃加热4小时。将反应物用冰水(100mL)处理，用EtOAc萃取(3x)。有机层用MgSO4干燥并过滤。减压除去溶剂，产物在不进行任何进一步纯化的情况下使用。在-78℃下，用LiAlH4(3.1mL，1M在THF)处理叠氮化物(约2.66mmol)在THF(20mL)中的溶液。在数小时内使反应液升温至0℃。通过在0℃下添加盐水猝灭反应。向乳液中添加Celite并搅拌数小时，之后通过celite床过滤。蒸发溶剂得到(2S)-1-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，其在不进行进一步纯化的情况下使用。MS m/z259(M+1)。
将胺溶解在CH2Cl2(13mL)和水(5mL)中。用K2CO3(2.20g，15.9mmol)和1-[2-三甲基硅烷基)乙氧基羰基氧基]吡咯烷-2，5-二酮(1.24g，4.79mmol)处理该溶液。搅拌反应液1小时。分离层，用水洗涤有机层。除去溶剂后将粗物质溶解于二乙醚(2mL)和乙醇(30mL)中。该溶液用对甲苯磺酸(0.53g，2.71mmol)处理并置于具有60℃水浴的旋转蒸发器上。除去溶剂。添加额外的溶剂，并如上所述除去，直到完全除去Boc基团。将粗物质重新溶解在CH2Cl2中并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。水层用CH2Cl2萃取(3x)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(10％MeOH/CH2Cl2)，得到油状物(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.62g)。MS m/z 303(M+1)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 (2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，在第一步中使用(四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇。
制备例I (2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-(三甲基硅烷基氧基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1.苯邻二甲酰亚胺钾 向配备有回流浓缩器的三颈圆底烧瓶中装入苯邻二甲酰亚胺(80g，0.54mole)和无水乙醇(1600mL)。温和煮沸混合物大约15分钟或者直到苯邻二甲酰亚胺不再溶解。将热溶液从任何固体上滗析到特别制备的30.5g(0.54mol)氢氧化钾溶液中。立即分离苯邻二甲酰亚胺钾沉淀物。将混合物搅拌并快速冷却至室温，抽吸过滤沉淀物。向醇母液中添加第二份苯邻二甲酰亚胺(80g)，重复整个过程。合并两次收获的晶体，用丙酮(200mL)洗涤以除去所有未改变的苯邻二甲酰亚胺。获得风干的苯邻二甲酰亚胺钾(170g，92％)。
步骤2.2-(2，2-二乙氧基乙基)异氮杂茚-1，3-二酮 向配备有高效搅拌器和回流浓缩器的三颈圆底烧瓶中装入苯邻二甲酰亚胺钾(150g，0.81mol)和2-溴-1，1-二乙氧基-乙烷(196g，1.0mol)和DMF(500mL)。启动搅拌器，并在保持150℃的油浴中加热混合物约3-4小时。减压除去溶剂DMF。残余物通过柱色谱法纯化，得到纯的2-(2，2-二乙氧基乙基)异氮杂茚-1，3-二酮(185g，收率87％)。1HNMR(400MHz，MeOD)1.16(t，6H)，3.48-3.60(m，2H)，3.68-3.75(m，2H)，3.76-3.89(d，2H)，4.89(t，1H)，7.68-7.75(m，2H)，7.85-7.96(m，2H)。MS(E/Z)264(M+H+)。
步骤3.2-(1，3-二氧代异氮杂茚-2-基)乙醛 将2-(2，2-二乙氧基乙基)异氮杂茚-1，3-二酮(40.00g，0.15mol)溶解在85％甲酸(150mL)中并在室温下搅拌混合物2小时。tlc分析指示完全转化为醛后(用于显示的2，4-DNP染色)，除去溶剂，将得到的固体在150mm托真空下干燥，得到2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)乙醛(27g，95％)。
步骤4.(2S，3S)-3-环己基-2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)-3-羟基丙醛 将2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)乙醛(2.04g，10.7mmol)溶解于最小量的无水N-甲基吡咯烷酮(5.0mL)中。完全溶解需要加热。让溶液冷却至室温并添加环己烷甲醛(5.60g，50mmol)。使溶液冷却至0℃并一次添加固体L-脯氨酸(0.40g，3.4mmol)。在0℃下搅拌反应液1小时，将橙色混合物保存在冰箱(6℃)中36小时。粗反应物在5∶1 Et2O/己烷(100mL)和水(20mL)中吸收。分离层，水相混合物用5∶1 Et2O/己烷(3×10mL)萃取。合并的有机层用水(5×10mL)和盐水(3×10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，滗析并除去溶剂，得到粗(2S，3S)-3-环己基-2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)-3-羟基丙醛(4.55g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤5.2-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基)异氮杂茚-1，3-二酮 将粗(2S，3S)-3-环己基-2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)-3-羟基丙醛(3.22g，10.7mmol，根据理论收率计算)溶解在无水THF(20mL)中。使溶液冷却至0℃。依次以单份添加乙酸(5.5mL，90mmol)、甲胺溶液(33％，在EtOH中，5.0mL，40.0mmol)和NaHB(OAc)3(8.80g，40.0mmol)。除去冰浴，在室温下搅拌混合物2小时。除去溶剂，粗2-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基)异氮杂茚-1，3-二酮(6.45g)直接用于下一步骤中。
步骤6.(2R，3S)-3-环己基-2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)-3-羟基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 将粗2-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基)异氮杂茚-1，3-二酮(3.38g，10.7mmol)溶解在THF(20mL)中。添加K2CO3(13.8g，100mmol)的水(40mL)溶液，然后添加Boc2O(10.9g，50mmol)。在室温下搅拌该双相系统1小时。用Et2O(2×30mL)萃取反应液。合并的有机萃取物用饱和NaHCO3水溶液(40mL)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱色谱法纯化，得到纯的(2R，3S)-3-环己基-2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)-3-羟基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.02g，22.9％)。1H NMR(400MHz，MeOD)7.70-7.95(m，4H)，4.05-4.50(m，3H)，3.20-3.45(m，1H)，2.80-2.86(s，3H)，1.10-1.80(m，11H)，1.00-1.10(s，9H)。MS(E/Z)417.3(M+H+)。
步骤7.(2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-羟基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 将(2R，3S)-3-环己基-2-(1，3-二氧代异二氢氮茚-2-基)-3-羟基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.20mmol)溶解于最小体积的EtOH(12mL)中，添加一水合肼(85％，在EtOH中，0.35mL，6.00mmol)。于55℃加热溶液45分钟，然后使反应温度升高至回流2小时。生成白色固体。使反应液冷却至室温，添加Et2O(50mL)，过滤反应液。将滤液除去溶剂，残余物在Et2O(15mL)中搅拌1小时，并过滤。将滤液除去溶剂，得到(2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-羟基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，收率87％)，其纯度足以直接用于下一步骤中。MS(E/Z)287(M+H+)。
步骤8.(2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-(三甲基硅烷基氧基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 向粗(2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-羟基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，1.05mmol)在无水THF的溶液中添加吡啶(846μL，10.50mmol)和TMSCl(663μL，5.25mmol)。将混合物加热至60℃并保持20分钟，然后用饱和NaHCO3水溶液(5mL)猝灭，用EtOAc(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用NaSO4干燥并浓缩，得到(2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-(三甲基硅烷基氧基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，收率93.1％)。1H NMR(400MHz，MeOD)0.13(s，9H)，0.80-1.40(m，6H)，1.40(s，9H)，1.50-2.10(m，5H)，2.90(s，3H)，3.15-3.50(m，4H)。MS(E/Z)359.0(M+H+)。
制备例J 2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(1-氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.4-((1-羟基环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向250-mL圆底烧瓶中装以4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(7.0g，25.6mmol)和THF(150mL)。使溶液冷却至0℃，借助注射泵在30分钟内添加1，5-双(溴镁)戊烷(0.5M，在THF中，64mL，32.6mmol，1.25当量)的溶液。3小时后，LC-MS分析显示起始酯被消耗，并且指示形成了所需4-((1-羟基环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯和4(2-羟基庚基)-2，2-二甲基

唑烷酮-3-羧酸(4S)-叔丁酯的大约4∶1的混合物。用水猝灭过量的格氏试剂并分离层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。在二氧化硅上进行急骤色谱法，用0-29％EtOAc洗脱，得到4-((1-羟基环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯。
步骤2.4-((1-氟环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((1-羟基环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(2.70g，8.63mmol)溶解在CH2Cl2中，使溶液冷却至-78℃。通过注射器添加DAST(2.78g，17.2mmol，2.0当量)，搅拌溶液过夜，同时升温至室温。LC-MS显示起始醇被消耗。添加饱和NaHCO3水溶液并搅拌混合物1小时。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。得到的溶液用m-CPBA(1.5g，8.6mmol)处理并搅拌3小时。之后，氟化作用产生的烯烃副产物被消耗。通过添加10％Na2S2O3水溶液(50mL)猝灭过量的m-CPBA。分离层，有机层用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。在二氧化硅上进行急骤色谱法，用0-29％的己烷中的EtOAc洗脱，得到4-((1-氟环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(725mg)。
步骤3.1-(1-氟环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将4-((1-氟环己基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(1.1g，3.50mmol，1.0当量)溶解在甲醇(30mL)中。向该混合物中添加樟脑磺酸(202mg，0.875mmol，0.5当量)，在室温下搅拌该溶液3小时。之后，原料被消耗。添加饱和NaHCO3水溶液，在真空中除去甲醇。含水残余物用EtOAc(3×10mL)萃取，合并的有机萃取物用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。在二氧化硅上进行急骤色谱法，用0-47％的己烷中的EtOAc洗脱，得到1-(1-氟环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(275mg)。
步骤4.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(1-氟环己基)丙基甲磺酸酯 将1-(1-氟环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(275mg，1.0mmol，1.0当量)溶解在CH2Cl2中，并使混合物冷却至0℃。向该溶液中添加甲磺酰氯(230mg，2.0mmol，2.0当量)和三乙胺(304mg，3.0mmol，3.0当量)。在0℃下搅拌混合物0.5小时。之后LC/MS显示原料被消耗。将混合物转移到分液漏斗中，添加1.0M HCl水溶液。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。粗(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(1-氟环己基)丙基甲磺酸酯直接用于下一步骤中。
步骤5.1-(1-氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将粗(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(1-氟环己基)丙基甲磺酸酯和(n-Bu)4N+I-(249mg，1.0mmol)溶解于33％甲胺的乙醇溶液(50mL)中。将混合物加热至50℃17小时。使溶液冷却至室温，在真空中除去挥发性物质。将残余物溶解在醚中，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。得到粗1-(1-氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。
步骤6.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(1-氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 将粗1-(1-氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯和TeocOSu(137mg，0.5mmol)溶解于1∶1的CH3CN/10％K2CO3水溶液(20mL)中。将混合物搅拌2小时。之后所有游离胺都被消耗。在真空中除去CH3CN，含水残余物用EtOAc(3×10mL)萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。在二氧化硅上进行急骤色谱法，用0-27％的己烷中的EtOAc洗脱，得到2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(1-氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯(70mg)。
制备例K 1-(对硝基苯氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯
步骤1.1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向搅拌的2-氨基-3-环己基丙基氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯(4.61g，15.4mmol)、二

烷(50mL)和10％K2CO3水溶液(50mL)的混合物中添加固体Boc2O(3.50g，15.4mmol)。在室温下搅拌混合物18小时。在旋转蒸发器上除去二

烷，用醚(175mL)萃取含水残余物。醚层用5％HCl水溶液(50mL)、饱和NaHCO3水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤，并用MgSO4干燥。除去溶剂得到1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基-氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(6.55g，quant)，为黄色的油。
步骤2.1-氨基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向搅拌的1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(6.55g，15.4mmol)在MeCN(100mL)中的溶液中添加Et4NF(7.5g，50mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜并在60℃下搅拌7小时。浓缩混合物并使油状残余物在EtOAc(175mL)中吸收。混合物用水(2×50mL)和盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥。除去溶剂得到1-氨基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(3.39g，80％)，其为浆液。
步骤3.1-(对硝基苯氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向搅拌的1-氨基-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(0.65g，2.54mmol)在MeCN(20mL)和THF(5mL)中的溶液中添加粉末状的NaHCO3(0.43g，5.08mmol)，然后在10分钟内逐滴添加对硝基苯基氯甲酸酯(0.51g，5.08mmol)在MeCN(20mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，通过Celite垫过滤并浓缩，余下白色固体。该物质在40-g二氧化硅柱上通过色谱法纯化，用己烷中的0-100％EtOAc梯度洗脱，得到1-(对硝基苯氧基羰基氨基)-3-环己基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(0.67g，67％)，为灰白色固体。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 (2S)-1-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，在步骤1中使用(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。
制备例L (S)-3-环己基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙基氨基甲酸酯)甲基氨基)丙-2-基)氨基甲酸4-硝基苯酯
向100-mL圆底烧瓶中装以二异丙基乙胺(820mg，6.34mmol，2.0当量)、(S)-2-氨基-3-环己基丙基甲基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(996mg，3.17mmol，1.0当量)和CH2Cl2(30mL)。使得到的溶液冷却至0℃，并添加4-硝基苯基氯甲酸酯(733mg，3.64mmol，1.15当量)在CH2Cl2(20mL)中的溶液，添加速度使得内部温度不超过5℃。1小时后通过LC-MS检查一份样品，显示没有未反应的原料。用水猝灭反应，并分离层。有机层用5％K2CO3水溶液(2×40mL)、0.25MHCl水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发。通过在二氧化硅上的急骤色谱法除去过量的4-硝基苯基-氯甲酸酯，用CH2Cl2中的0-10％的甲醇洗脱。获得(S)-3-环己基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙基氨基甲酸酯)-甲基氨基)丙-2-基)氨基甲酸4-硝基苯酯(990mg，65％)。MS ESI+ve m/z 503(M+Na+)。
制备例M 2-氨基-3-环己基丙基(乙基)-氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.3-环己基-1-(乙基氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向3-环己基-1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.17g，4.3mmol)和TEA(2.4mL，17.2mmol)在无水DMF中的溶液中添加2.0M EtNH2在EtOH(6.5mL，13mmol)中的溶液，然后添加HBTU(1.96g，5.2mmol)。得到的溶液在室温下搅拌3小时。减压浓缩反应物，将残余物溶解在EtOAc(50mL)中。然后用1MNaOH(4次)、1M HCl(3次)、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤混合物，用Na2SO4干燥，并过滤。浓缩残余物得到3-环己基-1-(乙基氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(444mg，34％)。MS ESI+vem/z 299(M+H)。
步骤2.1-环己基-3-(乙基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下，在20分钟内向3-环己基-1-(乙基氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(444mg，1.49mmol)在无水甲苯中的溶液中添加Red-Al(65％，1.39g，1.36mL，4.47mmol)。添加后，在室温下搅拌反应液过夜。使反应液冷却至0℃并用Na2SO4·10H2O猝灭。将得到的混合物搅拌2-3小时，通过Celite过滤，用THF(200mL)洗涤。干燥并浓缩滤液，得到粗产物1-环己基-3-(乙基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(338mg，45％，两步)。MS ESI+ve m/z 285(M+H)。
步骤3.2-(N-叔丁氧基羰基)氨基-3-环己基丙基(乙基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 向1-环己基-3-(乙基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(338mg)和TeocOSu(386mg，1.49mmol)在THF中的溶液中添加TEA(0.6mL)。将得到的溶液在室温下搅拌30分钟并蒸发。残余物通过硅胶色谱法纯化，得到2-(N-叔丁氧基羰基)氨基)-3-环己基丙基-(乙基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯(287mg，45％，两步)。
步骤4.2-氨基-3-环己基丙基(乙基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 向2-(N-叔丁氧基羰基)氨基)-3-环己基丙基(乙基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯(116mg，0.27mmol)在Et2O(10mL)中的溶液中添加EtOH(1mL)中的TSA(51mg，0.30mmol)。在室温下除去溶剂并在真空下加热至60℃30分钟，得到为TsOH盐的2-氨基-3-环己基丙基(乙基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 329(M+H)。
制备例N (2S，3R)-2-氨基-1-环己基戊-3-基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙酸 向(S)-2-氨基-3-环己基丙酸的盐酸盐(5.00g，24.07mmol)和TEA(15mL)在THF(150mL)中的溶液中添加Boc2O(5.51g，25.28mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。减压除去有机溶剂。将残余物溶解在EtOAc中，用1M HCl、饱和NaHCO3水溶液、10％柠檬酸和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙酸(6.30g，96％)。MS ESI+ve m/z 272(M+H)。
步骤2.3-环己基-1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙酸(12.1g，44.53mmol)和N，O-二甲基羟胺盐酸盐(5.62g，57.89mmol)在无水DMF(200mL)中的溶液中添加TEA(20mL，145mmol)、HOBt(6.62g，48.98mmol)、HBTU(18.58g，48.99mmol)。将悬浮液在室温下搅拌2小时并减压浓缩。将残余物溶解在EtOAc(200mL)中，用1M NaOH(3×100mL)、H2O、1M HCl(3×100mL)、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，过滤。浓缩滤液，得到酰胺3-环己基-1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(13.04g，93％)。MS ESI+ve m/z 337(M+Na)。
步骤3.1-环己基-3-氧代戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在-20℃下向3-环己基-1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(5.23g，16.66mmol)在无水甲苯(80mL)中的溶液中缓慢添加EtMgBr(3M，在Et2O中，16.7mL，49.97mmol)。使反应液升温至0℃，在该温度下搅拌2小时。在0℃下用1M HCl猝灭反应并用EtOAc萃取。有机相用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，浓缩，得到1-环己基-3-氧代戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。该产物在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 306(M+Na)。
步骤4.1-环己基-3-羟基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下向1-环己基-3-氧代戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯在THF/MeOH(60/15mL)中的溶液中小心添加NaBH4(630mg，16.66mmol)。20分钟后添加饱和NH4Cl水溶液以猝灭反应，并用EtOAc萃取，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩，得到1-环己基-3-羟基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(4.77g，96％，比例为40∶60)，为白色固体。MS ESI+ve m/z 286(M+H)。
步骤5.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-1-环己基戊-3-基4-甲苯磺酸酯 在0℃下，在2分钟内向1-环己基-3-羟基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.067g，3.74mmol)、催化量的DMAP和吡啶(0.651g，8.24mmol)的混合物中添加CH2Cl2(4mL)中的TsCl(0.856g，4.49mmol)。将得到的溶液在室温下搅拌过夜。反应混合物用EtoAc稀释，用1MHCl、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。浓缩滤液，并通过硅胶色谱法纯化，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-1-环己基戊-3-基4-甲苯磺酸酯，为白色固体。MS ESI+ve m/z 462(M+Na)。
步骤6.1-环己基-3-(甲基氨基)戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在压力密封的容器中将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-1-环己基戊-3-基4-甲苯磺酸酯(640mg，1.46mmol)在33％MeNH2(在EtOH中)(0.02M)的溶液加热至60℃1小时。减压除去溶剂，得到1-环己基-3-(甲基氨基)戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 299(M+H)。
步骤7.1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)戊-2-基氨基甲酸(2S)-叔丁酯 向1-环己基-3-(甲基氨基)戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯在THF(20mL)中的溶液中添加TeocOSu(398mg，1.53mmol)，随后添加TEA(0.5mL)。在室温下搅拌反应混合物30分钟，并浓缩。残余物通过硅胶色谱法部分纯化，得到1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)戊-2-基氨基甲酸(2S)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 465(M+Na)。
步骤8.2-氨基-1-环己基戊-3-基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 将1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)戊-2-基氨基甲酸(2S)-叔丁酯(137mg，0.14mmol)溶解在Et2O(5mL)中，添加溶解在EtOH中的无水TSA(24mg，0.14mmol)。利用60℃热浴30分钟在真空中除去溶剂，得到2-氨基-1-环己基戊-3-基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 343(M+H)。
制备例O (2S，3R)-2-氨基-1-环己基戊-3-基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(2S，3R)-3-叠氮基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯 向S-2-(叔丁氧基羰基氨基)-1-环己基戊-3-基4-甲苯磺酸酯(544mg，1.24mmol)混合物在无水DMF中的溶液中添加NaN3(241mg，3.71mmol)。将得到的溶液加热至80℃2小时。使反应液冷却至室温并用EtOAc稀释。用H2O、盐水洗涤混合物，用Na2SO4干燥，并过滤。浓缩滤液并通过硅胶色谱法纯化，得到(2S，3R)-3-叠氮基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(第二级分)和3-叠氮基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(第一级分)(LC-MS显示比例为40∶60)。将混合级分连续进行硅胶色谱法，分离纯的(2S，3R)-3-叠氮基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯。MS ESI+ve m/z 311(M+H)。
步骤2.(2S，3R)-3-氨基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(2S，3R)-3-叠氮基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(64mg，0.21mmol)和10％Pd/C在甲醇(20mL)中的溶液在40psi下氢化1小时。滤出催化剂，浓缩滤液，得到(2S，3R)-3-氨基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(55mg，93％)。MS ESI+ve m/z 285(M+H)。
步骤3-4.(2S，3R)-2-氨基-1-环己基戊-3-基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 按照类似于制备例N步骤7-8的程序，在步骤7中使用(2S，3R)-3-氨基-1-环己基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯，制备(2S，3R)-2-氨基-1-环己基戊-3-基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 329(M+H)。
制备例P 2-氨基-3-环己基-2-甲基丙基氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-2-氨基-3-环己基-2-甲基丙酸 用PtO2(200mg)催化，将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-2-甲基-3-苯基丙酸(1.95g，6.98mmol)在H2(50psi)下在TFA/H2O(30/30mL)中氢化过夜。滤出催化剂并浓缩，以定量收率得到(S)-2-氨基-3-环己基-2-甲基丙酸。MS ESI+ve m/z 186(M+H)。
步骤2.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基-2-甲基丙酸 将(S)-2-氨基-3-环己基-2-甲基丙酸溶解在1M NaOH(50mL)和THF(30mL)中，向该搅拌的溶液中添加Boc2O(1.60g，7.33mmol)，2小时后添加另一份Boc2O(3.20g，14.66mmol)。将反应液再搅拌12小时，用己烷萃取，以除去过量的Boc2O。将分离的水相用柠檬酸酸化，用EtOAc萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基-2-甲基丙酸(1.99g，100％)。MS ESI+ve m/z 186(M+H)。
步骤3.1-氨基-3-环己基-2-甲基-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向1-氨基-3-环己基-2-甲基-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(0.814g，2.85mmol)和TEA(1.2mL，8.55mmol)在无水DMF(30mL)中的溶液中添加0.8M NH3在THF(14mL)中的溶液，随后添加HBTU(1.297g，3.42mmol)。在室温下搅拌得到的溶液48小时。减压浓缩除去大多数DMF，将残余物溶解在EtOAc(50mL)中，用1MNaOH(3次)、1M HCl(3次)、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩，得到1-氨基-3-环己基-2-甲基-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(811mg，100％)。该产物在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 285(M+H)。
步骤4.1-氨基-3-环己基-2-甲基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 1-氨基-3-环己基-2-甲基-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下，在20分钟内向1-氨基-3-环己基-2-甲基-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(811mg，2.85mmol)在无水甲苯(15mL)中的溶液中添加Red-Al(65％，2.66g，2.6mL，8.55mmol)。添加后，在室温下搅拌反应液过夜。使反应液冷却至0℃，并用Na2SO4·10H2O猝灭。搅拌得到的混合物2-3小时，通过Celite过滤，用THF(200mL)洗涤。干燥并浓缩滤液，得到粗产物1-环己基-3-(乙基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(860mg)。MS ESI+ve m/z 271(M+H)。
步骤5-6.2-氨基-3-环己基-2-甲基丙基氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 使用类似于制备例M步骤3-4的程序，在步骤3中使用1-环己基-3-(乙基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，获得2-氨基-3-环己基-2-甲基丙基氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 315(M+H)。
制备例Q 2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)氮丙啶-1-羧酸(S)-叔丁酯
步骤1.2-氨基-3-羟基丙酸(R)-甲酯盐酸盐 在0℃下向(R)-2-氨基-3-羟基丙酸(105g，1mol)在甲醇(1200mL)中的溶液中逐滴添加亚硫酰氯(87.6mL，142.8g，1.2mol)。添加后，回流加热反应混合物12小时。蒸发挥发物，得到固体2-氨基-3-羟基丙酸(R)-甲酯盐酸盐(155g，收率100％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.51(brs，2H)，4.08(s，1H)，3.79(m，2H)，3.71(s，3H)。
步骤2.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-羟基丙酸(R)-甲酯 向搅拌的2-氨基-3-羟基丙酸(R)-甲酯盐酸盐(155g，1mol)在CH2Cl2(1200mL)中的悬浮液中添加DIEA(194g，1.5mol)。向上述混合物中逐滴添加Boc2O(218g，1mol)在CH2Cl2(800mL)中的溶液，搅拌反应混合物过夜。用1N HCl水溶液(600mL)、饱和NaHCO3(500mL)和盐水(500mL)洗涤溶液。然后将溶液干燥，过滤，并蒸发，得到油状物2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-羟基丙酸(R)-甲酯(245g，收率96％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.29(brs，1H)，4.35(s，1H)，3.91(dd，J＝18，3.2Hz，2H)，3.77(s，3H)，2.37(brs，1H)，1.44(s，9H)。
步骤3.2，2，3，3，10，10-六甲基-8-氧代-4，9-二氧杂-7-氮杂-3-硅杂十一烷-6-羧酸(R)-甲酯 向2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-羟基丙酸(R)-甲酯(27.5g，0.126mol)在DMF(250mL)中的溶液中添加咪唑(25.7g，0.378mol)，然后添加TBSCl(20.9g，0.139mol)，搅拌反应混合物4小时。在真空中除去溶剂，并溶解在EtOAc(300mL)中。用饱和NH4Cl(2×100mL)洗涤溶液，然后用饱和NaHCO3(100mL)和盐水(100mL)洗涤。然后将有机层干燥，过滤，在真空中除去溶剂，得到油状物2，2，3，3，10，10-六甲基-8-氧代-4，9-二氧杂-7-氮杂-3-硅杂十一烷-6-羧酸(R)-甲酯(40g，收率95％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.34(brs，1H)，4.35(m，1H)，4.05(dd，J＝13.2，3.6Hz，1H)，3.82(dd，J＝14，4.4Hz，1H)，1.45(s，9H)，3.73(s，3H)，0.86(s，9H)，0.02(s，6H)。
步骤4.1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下向2，2，3，3，10，10-六甲基-8-氧代-4，9-二氧杂-7-氮杂-3-硅杂十一烷-6-羧酸(R)-甲酯(40g，0.12mol)在MeOH(500mL)中的溶液中分次添加NaBH4(38g，1mol)。在室温下搅拌混合物2小时，然后在真空下除去溶剂。残余物在水(200mL)和EtOAc(2×200mL)之间分配。有机层用饱和NaHCO3水溶液洗涤，然后用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发，获得醇1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(36g，收率98％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.15(brs，1H)，3.78(m，2H)，3.68(m，2H)，2.25(brs，1H)，1.45(s，9H)，0.89(s，9H)，0.07(s，6H)。
步骤5.1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在15分钟内，向溶解于9∶1THF/CH3CN(600mL)中并冷却至0℃的Ph3P(19.65g，75mmol)的溶液中逐滴添加DIAD(14.7mL，75mmol)。搅拌30分钟后，在15分钟内逐滴添加1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(15.25g，50mmol)在THF(100mL)中的溶液。使反应混合物升温至室温并搅拌24小时。加水(100mL)蒸发挥发物后，进一步用水(100mL)稀释残余物，用EtOAc(2×100mL)萃取。有机层用饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发，然后通过二氧化硅色谱法纯化，得到油状物1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(7.8g，收率54％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.82(dd，J＝16.4，4.4Hz，1H)，3.64(dd，J＝16.4，4.8Hz，1H)，2.55(m，1H)，2.26(d，J＝6Hz 1H)，2.06(d，J＝3.6Hz 1H)，1.45(s，9H)，0.89(s，9H)，0.07(s，6H)。
制备例R 2-氨基-3-环戊基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯
步骤1.1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-环戊基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向100mL的三颈圆底烧瓶中装以Mg粉(720mg，30mmol)，然后在用加热枪加热烧瓶的同时逐滴添加溴环戊烷(3.73g，25mmol)在THF(25mL)中的溶液。搅拌2小时后，大多数Mg被消耗。在-78℃下将环戊基溴化镁添加到CuBr-SMe2(307.5mg，1.5mmol)在THF(80mL)中的悬浮液中，将铜酸盐搅拌30分钟，并添加1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(2.87g，10mmol)在Et2O(30mL)中的溶液。搅拌2小时后，用饱和NaHCO3(2×20mL)和盐水(30mL)洗涤反应混合物。有机层用MgSO4干燥，蒸发溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物，获得油状物1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-环戊基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(2.9g，收率81％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.60(brs，1H)，3.58(m，3H)，1.81(m，3H)，1.60(m，3H)，1.50(m，3H)，1.44(s，9H)，1.10(m，2H)，0.89(s，9H)，0.04(s，6H)。
步骤2.1-环戊基-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下用1M Bu4NF/THF(24.3mL)处理1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-环戊基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(2.9g，8.1mmol)1小时。用水(30mL)稀释反应液，用EtOAc(3×40mL)萃取。有机层用饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发，得到粗1-环戊基-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，其在不进一步纯化的情况下使用。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.60(brs，1H)，3.68(m，2H)，3.52(m，1H)，1.81(m，3H)，1.60(m，3H)，1.50(m，3H)，1.44(s，9H)，1.09(m，2H)。
步骤3.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环戊基丙基甲磺酸酯 向1-环戊基-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯在CH2Cl2(30mL)中的溶液中添加Et3N(3.2mL，24.3mmol)。使反应混合物冷却至0℃，随后逐滴添加CH2Cl2(10mL)中的MsCl(1.1g，9.7mmol)。再搅拌2小时后，加水(30mL)并用CH2Cl2(2×30mL)萃取混合物。有机层用饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发，得到粗(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环戊基丙基甲磺酸酯，其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.59(brs，1H)，4.27(dd，J＝10，3.2Hz，1H)，4.17(dd，J＝10，4Hz，1H)，3.86(m，1H)，3.02(s，3H)，1.81(m，3H)，1.60(m，3H)，1.50(m，3H)，1.46(s，9H)，1.09(m，2H)。
步骤4.1-环戊基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环戊基丙基甲磺酸酯在甲胺醇溶液(30mL)中的溶液回流加热过夜。在真空中除去溶剂，通过二氧化硅色谱法纯化残余物，获得固体1-环戊基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(900mg，收率43％，三步)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.66(brs，1H)，3.92(brs，1H)，3.17(m，1H)，2.90(m，1H)，2.69(s，3H)，1.81(m，3H)，1.60(m，3H)，1.49(m，3H)，1.44(s，9H)，1.10(m，2H)。
步骤5.1-环戊基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下向1-环戊基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯和Et3N(1.5mL，10.6mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物中逐滴添加CbzCl(720mg，4.22mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液。再搅拌2小时后，加水(30mL)，并用CH2Cl2(2×10mL)萃取反应液，有机层用饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发，然后通过硅胶色谱纯化，获得油状物1-环戊基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(550mg，收率40％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.33(m，5H)，5.16(s，2H)，4.57(brs，1H)，3.83(brs，1H)，3.40(m，1H)，3.15(m，1H)，2.96(s，3H)，1.81(m，3H)，1.60(m，3H)，1.49(m，3H)，1.43(s，9H)，1.10(m，2H)。
步骤6.2-氨基-3-环戊基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯 在5℃下将1-环戊基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(550mg)在TFA/CH2Cl2(10mL，20％v/v)中的溶液搅拌2小时。用饱和NaHCO3水溶液中和反应液并用CH2Cl2(3×30mL)萃取。合并的萃取物用饱和盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到2-氨基-3-环戊基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯(420mg)，其在不进一步纯化的情况下使用。
制备例S 2-氨基-3-环庚基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 步骤1-4.1-环庚基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 按照类似于制备例R步骤1-4的程序，在步骤1中使用环戊基溴化镁，获得1-环庚基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。MSESI+ve m/z 285(M+H)。
步骤5-6.2-氨基-3-环庚基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用与制备例M步骤3-4所述类似的程序由1-环庚基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯制备2-氨基-3-环庚基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.0(s，9H)，0.95(t，2H)，1.12(m，2H)，1.41(m，6H)，1.53(m，5H)，1.62(m，3H)，2.94(s，3H)，3.39(m，2H)，4.11(t，2H)。MS ESI+ve m/z 329(M+H)。
以下化合物按照类似于以上所述的程序制备 2-氨基-5，5-二甲基己基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯，在步骤1中使用新戊基氯化镁。
2-氨基-4，4-二甲基己基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯，在步骤1中使用(2，2-二甲基丁基)溴化镁。
2-氨基-3-环戊基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯，在步骤1中使用环戊基溴化镁。
制备例T 2-氨基-3-(4-甲基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-2-氨基-3-(4-甲基环己基)丙酸 向250mL Parr振荡器容器中装以1.0g(5.6mmol)(S)-2-氨基-3-对甲苯基丙酸、63mg(0.28mmol，5mol％)PtO2和10mL 1∶1 TFA∶水。将容器置于加压到50psi的Parr氢化振荡器中，振荡2天。通过LC/MS分析混合物指示约1∶1的顺式反式异构体混合物。将内容物通过Celite垫过滤，用额外的水洗涤用过的催化剂。蒸发澄清的滤液，得到粗的(S)-2-氨基-3-(4-甲基环己基)丙酸的TFA盐，其直接用于下一步骤中。
步骤2.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-甲基环己基)丙酸 将粗(S)-2-氨基-3-(4-甲基环己基)丙酸TFA盐溶解在20mL二

烷和30mL 0.67M NaOH中。通过添加固体KOH然后添加二碳酸二叔丁酯(3.03g，13.9mmol，1.05当量)使溶液的pH升高至＞14。添加额外600mg二碳酸二叔丁酯，将混合物搅拌过夜。之后所有游离胺被消耗。使混合物冷却至0℃，通过添加饱和柠檬酸使溶液的pH降至＜4。使用旋转蒸发器除去溶剂，用5×25mL EtOAc萃取产物。合并的有机萃取物用Na2SO4干燥，过滤并蒸发，产生粗(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-甲基环己基)丙酸，其为粘稠固体，在不进一步纯化的情况下使用。
步骤3.1-(甲基氨基)-3-(4-甲基环己基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-甲基环己基)丙酸(2.080g，7.29mmol，1.0当量)、EDC(3.308g，2.37当量)、HOBT(1.752g，1.78当量)、DIEA(7.6mL，6当量)和33％wt.甲胺在EtOH(2.771g，4当量)的CH2Cl2(80mL)溶液中的混合物在室温下搅拌21小时。在真空中除去溶剂，添加200mL 1NHCl。用EtOAc萃取混合物三次，用盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物，得到1.0167g(47％)的1-(甲基氨基)-3-(4-甲基环己基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 321(M+Na)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ6.27(br s，1H)，4.91(br s，1H)，4.11-4.07(m，1H)，2.80，2.79(d，J＝4.8Hz，3H)，1.85-1.20(m，21H)，0.88，0.85(d，J＝6.4Hz，3H)。
步骤4.1-(甲基氨基)-3-(4-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃和N2下，向1-(甲基氨基)-3-(4-甲基环己基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.0075g，3.38mmol，1.0当量)在THF(40mL)中的溶液中添加7mL(7mmol，2.1当量)的1.0M LiAlH4的THF溶液。在室温下搅拌混合物19小时，然后小心添加十水合硫酸钠(6.45g，20mmol)以猝灭过量的LiAlH4。过滤混合物，并用醚洗涤固体。在真空中除去溶剂后，粗1-(甲基氨基)-3-(4-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.04g)在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MSESI+ve m/z 285(M+H)。
步骤5-6.(S)-2-氨基-3-(4-甲基环己基)-丙基甲基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用与制备例M步骤3-4所述类似的程序，由1-(甲基氨基)-3-(4-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯制备(S)-2-氨基-3-(4-甲基环己基)-丙基甲基氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 329(M+1)。
制备例U 2-氨基-3-(1-甲基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.1-溴-1-甲基环己烷 将16.73g的1-甲基环己醇和50mL的48wt.％氢溴酸在水中的混合物在室温下搅拌3天。用己烷萃取反应混合物，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥。减压蒸发萃取物，得到24.365g(94％)的1-溴-1-甲基环己烷，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。13C NMR(CDCl3，100MHz)δ71.78，43.01，35.28，25.18，23.48. 步骤2.2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙酸甲酯 将1-溴-1-甲基环己烷(7.200g，3.0当量)，三丁基氢化锡(8mL，2.2当量)、2-(苄氧基羰基氨基)丙烯酸甲酯(3.120g，13.26mmol，1.0当量)和2，2’-偶氮二异丁腈(0.370g，0.17当量)在苯(30mL)中的混合物于100℃加热6小时。减压蒸发反应混合物后，粗2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙酸甲酯在不进行进一步纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 356(M+Na)。
步骤3.2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙酸 2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙酸甲酯、10.00g的KOH、100mL的MeOH和20mL水的混合物在室温下剧烈搅拌17小时。减压蒸发甲醇后，用水稀释残余物，并用Et2O萃取(2×)。水相用100mL的2N HCl处理，用EtOAc萃取(3×)并用Na2SO4干燥。减压蒸发萃取物，得到1.5150g(36％，两步)的2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙酸。MS ESI+ve m/z 320(M+H)。
步骤4.1-羟基-3-(1-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 将0.510g(1.60mmol)的2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙酸、5mL THF和10mL的1.0M BH3·THF在THF中的混合物在0℃下搅拌2小时。使混合物升温至室温16小时。然后用冰浴冷却反应混合物，并用20mL MeOH和2mL HOAc猝灭。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物，得到0.3655g(75％)1-羟基-3-(1-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸苄酯。MS ESI+ve m/z 328(M+Na)。
步骤5.2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙基甲磺酸酯 将0.3607g(1.18mmol)1-羟基-3-(1-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸苄酯、0.4mL(2.87mmol，2.43当量)三乙胺、0.1mL(1.29mmol，1.09当量)甲磺酰氯在CH2Cl2(10mL)中的混合物在0℃下搅拌1.5小时。用冰水猝灭反应混合物，用CH2Cl2萃取，用NaHCO3水溶液洗涤，并用Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂后，粗2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙基甲磺酸酯在不进行进一步纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 406(M+Na)。
步骤6.1-(甲基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 将2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙基甲磺酸酯在16mLTHF的溶液和10mL 33％wt.甲胺的EtOH的混合物于70℃加热3小时。冷却至室温后，减压蒸发反应混合物。粗1-(甲基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸苄酯在不进行进一步纯化的情况下直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 319(M+H)。
步骤7.1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(4-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将如上所述获得的1-(甲基氨基)-3-(1-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸苄酯、K2CO3(5.06g)、TeocOSu(0.80g，3.08mmol，2.6当量)、H2O(20mL)和CH2Cl2(100mL)的混合物在室温下剧烈搅拌3小时。用CH2Cl2(2×)萃取反应混合物，并用Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物，得到0.2479g(45％，三步)的1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(4-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 485(M+Na)。
步骤8.2-氨基-3-(1-乙基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 向250mL圆底烧瓶中装以0.2479g(0.54mmol)1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(4-甲基环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯、0.2784g 10％Pd/C和20mL MeOH。在氢气球下在室温下搅拌反应混合物5小时。然后使混合物通过过滤剂

545过滤，用MeOH洗涤。减压蒸发滤液，得到0.1799g(100％)2-氨基-3-(1-甲基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 329(M+H)。
制备例V 2-氨基-3-(1-金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用与以上制备例G步骤2-4类似的程序，由三环[3.3.1.13，7]癸烷-1-丙酸制备2-氨基-3-(1-金刚烷基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。
制备例W 2-氨基-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1.2-氯-1-甲氧基双环[2.2.2]辛-5-烯-2-腈 将1-甲氧基-1，4-环己二烯(15.0g，0.14mol)和2-氯丙烯腈(17.5g，0.20mol)在苯中的溶液回流加热15小时。除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，得到2-氯-1-甲氧基双环[2.2.2]辛-5-烯-2-腈(14.0g，52％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ6.44-6.23(m，2H)，3.51(s，3H)，2.69-2.50(m，2H)，2.27-1.41(m，5H)。
步骤2.1-甲氧基双环[2.2.2]辛-5-烯-2-酮 将2-氯-1-甲氧基双环[2.2.2]辛-5-烯-2-腈(14.0g，71mmol)和Na2S.9H2O(34.0g，142mmol)在乙醇(175mL)中的溶液在回流下加热14小时。将溶液倾入H2O中并用醚萃取三次。合并的萃取物用饱和NH4Cl水溶液、H2O和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，浓缩为残余物。粗产物通过柱色谱法纯化，得到1-甲氧基双环[2.2.2]辛-5-烯-2-酮(5.7g，57％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ6.46(dd，1H)，6.22(d，1H)，3.50(s，3H)，2.94(m，1H)，2.11(m，2H)，1.53-1.92(m，4H)。
步骤3.1-甲氧基双环[2.2.2]辛-2-酮 向1-甲氧基双环[2.2.2]辛-5-烯-2-酮(16.5g，0.11mol)在MeOH(250mL)中的溶液中添加阮内镍(3.3g)。在40℃和45psi下在H2气氛下搅拌反应混合物2-3小时(8.0g，40％)。过滤得到的混合物，真空浓缩滤液，产生1-甲氧基双环[2.2.2]辛-2-酮(15.0g，90％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.33(s，3H)，2.32(d，2H)，2.09(m，1H)，1.49-1.95(m，8H)。
步骤4.1-甲氧基双环[2.2.2]辛烷 向氢氧化钾(17g，250mmol)和85％水合肼(11.5g，186mmol)在乙二醇(220mL)的溶液中添加1-甲氧基双环[2.2.2]辛-2-酮(11.0g，71.4mmol)。在1小时中将混合物加热至195℃，并再加热1小时。然后对烧瓶进行蒸馏，在195℃下1小时的时间内收集到大约20mL(两层)液体。随后在3小时内向反应液中逐滴添加水(215mL)，得到第二部分的馏出物(大约180mL)。合并的馏出物用醚(3×80mL)萃取，有机相用Na2SO4干燥，除去挥发物，产生1-甲氧基双环[2.2.2]辛烷(4.5g，45％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.14(s，3H)，1.63-1.59(m，6H)，1.58-1.51(m，6H)，1.47(m，1H)。
步骤5.1-溴双环[2.2.2]辛烷 在0℃下向搅拌的1-甲氧基双环[2.2.2]辛烷(4.0g，28mmol)和乙酰溴(6.2g，50.4mmol)的混合物中添加10滴氯化锡。搅拌0.5小时后升温至20-25℃并在相同温度下持续搅拌3小时。冷却至0℃后，加水(30mL)，搅拌混合物10分钟。然后将混合物倾入水(150mL)中，并用醚(100mL×3)萃取。合并醚层，用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到1-溴双环[2.2.2]辛烷(4.0g，75％)，其在不纯化的情况下用于下一步骤。1H NMR(CDCl3)δ2.23(m，6H)，1.95(m，1H)，1.81-1.63(m，6H)，1.52(m，1H)。
步骤6.2-(苄氧基羰基氨基)-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙酸甲酯 将2-(苄氧基羰基氨基)丙烯酸甲酯(2.05g，0.0095mol，1当量)、1-溴双环[2.2.2]辛烷(1.8g，0.0095mol，1当量)和AIBN(0.312g，0.0019mol，0.2当量)溶解于苯(30mL)中并加热至回流。然后添加Bu3SnH(5.53g，0.019mol，2当量)。在室温下搅拌得到的混合物14小时。除去溶剂，通过制备TLC纯化残余物(EtOAc/石油醚＝1∶9)，得到泡沫状2-(苄氧基羰基氨基)-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙酸甲酯(480mg，15％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.35(m，5H)，5.13(m，2H)，4.42(m，1H)，3.73(s，3H)，1.8-1.1(m，15H)，1.28(m，1H)。
步骤7.1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸苄酯 将2-(苄氧基羰基氨基)-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙酸甲酯(720mg，2.087mmol，1eq.)溶解在15mL MeOH中。分次添加NaBH4(631mg，16.7mmol，8eq.)。将混合物搅拌1.5小时。添加饱和NaHSO3水溶液(20mL)，并用NaHSO3(s)将混合物的pH调节为7-8。蒸发混合物，用EtOAc(20mL×5)萃取。合并有机相并蒸发，得到油状物1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸苄基酯，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 318(M+H)。
步骤8.2-(苄氧基羰基氨基)-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙基甲磺酸酯 在0-5℃下向1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸苄酯(668mg，2.1mmol，1eq.)、TEA(638mg，6.3mmol，3eq.)在CH2Cl2(100mL)中的溶液中逐滴添加MsCl(289mg，2.52mmol，1.2eq.)。将得到的混合物搅拌2小时。然后将混合物倾入水(20mL)中，用CH2Cl2(20mL×4)萃取。合并有机相并蒸发，得到油状物2-(苄氧基羰基氨基)-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙基甲磺酸酯(1.1g，粗品)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤9.1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 将2-(苄氧基羰基氨基)-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙基甲磺酸酯(830mg，2.1mmol)溶解在15mL NH2Me的MeOH溶液中并在30-40℃搅拌过夜。浓缩混合物，得到油状物1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(1.0g，粗品)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 331(M+H)。
步骤10.1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-(N-甲基-N-叔丁氧基羰基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 向1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(695mg，2.1mmol，1当量)和TEA(636mg，6.3mmol，3当量)在CH2Cl2(50mL)中的溶液中逐滴添加Boc2O(681mg，3.15mmol，1.5当量)。将得到的混合物搅拌过夜。向混合物中加水(20mL)。用CH2Cl2(20mL×4)萃取混合物，合并有机相并浓缩。通过制备TLC(EtOAc/石油醚＝1∶4)纯化残余物，得到白色泡沫状1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-(N-甲基-N-叔丁氧基羰基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(250mg，28％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.32(m，5H)，5.09(m，2H)，3.85(m，1H)，2.85(s，3H)，2.76(d，2H)，1.44(s，9H)，1.52-1.13(m，15H)。
步骤11.2-氨基-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 1-(双环[2.2.2]辛-1-基)-3-(N-甲基-N-叔丁氧基羰基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(250mg，0.58mmol)和Pd(OH)2(20％，60mg)在12Ml无水MeOH中的混合物在20psi H2下氢化2小时。TLC(EtOAc/石油醚＝1∶2)指示反应完全。然后过滤混合物并蒸发，得到油状物2-氨基-3-(双环[2.2.2]辛-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，87％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
制备例X (±)3-苄基7-叔丁基3，7-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-3，7-二羧酸酯
步骤1.5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸苄酯 将1，2，3，6-四氢吡啶(5.0g，60.15mmol)和三乙胺(16.77mL，2当量)在CH2Cl2(50mL)中的溶液冷却至0℃(冰水浴)，然后缓慢添加氯甲酸苄酯(9.7mL，1.1当量)。30分钟后，使反应混合物缓慢升温至室温并搅拌4小时。用醚(300mL)稀释混合物，用5％HCl水溶液(2×50mL)、饱和NaHCO3水溶液(40mL)和盐水(40mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩后，得到5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸苄酯(9.93g，78％收率)。
MS ESI+ve m/z 218(M+1)。
步骤2.7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸苄酯 将5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸苄酯(9.93g，45.76mmol)在CH2Cl2(75mL)中的溶液冷却至0℃。添加固体间氯过苯甲酸(77％，15.38g，1.5当量)。10分钟后，使反应混合物缓慢升温至室温。1小时后形成白色沉淀物。再搅拌1小时后反应完全。用醚(300mL)稀释混合物，用5％NaOH水溶液(2×40mL)、25％Na2S2O3水溶液(3×20mL)和盐水(30mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩后，通过急骤色谱法纯化残余物，得到7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸苄酯(7.87g，74％收率)。MS ESI+ve m/z 234(M+1)。
步骤3.反式-4-叠氮基-3-羟基哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-叠氮基-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯 将7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸苄酯(6.78g，29.1mmol)、叠氮钠(3.78g，2当量)和氯化铵(1.56g，1当量)溶解于甲醇(100mL)和水(20mL)中。将混合物于65℃加热18小时。使混合物冷却至室温并在真空下除去甲醇。含水残余物用醚(3×120mL)萃取。合并的醚层用盐水洗涤(30mL)，用Na2SO4干燥。浓缩得到区域异构体(regioisomer)的混合物反式-4-叠氮基-3-羟基哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-叠氮基-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯(8.07g，quant.)，它在不进一步纯化的情况下使用。MS ESI+ve m/z 277(M+1)。
步骤4.反式-4-叠氮基-3-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-叠氮基-4-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯 将反式-4-叠氮基-3-羟基哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-叠氮基-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯(8.07g，29.1mmol)和吡啶(6mL，2.55当量)溶解于CH2Cl2(20mL)中并冷却至0℃。添加固体p-TsCl(11.1g，2.1当量)。5分钟后，使反应混合物缓慢升温至室温并搅拌过夜。用醚(300mL)稀释混合物，用5％HCl(3×35mL)、饱和NaHCO3水溶液(40mL)、盐水(30mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩后，通过急骤色谱法纯化残余物(120g硅胶柱，0-50％EtOAc在己烷中的梯度)，得到反式-4-叠氮基-3-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-叠氮基-4-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯的混合物(12.18g，97％)。MS ESI+vem/z 431(M+1)。
步骤5.反式-4-氨基-3-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-氨基-4-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯 向CuSO4·5H2O(642mg，0.5当量)在甲醇(30mL)中的0℃溶液中添加NaBH4(200mg，1.05当量)。向搅拌的黑色悬浮液中添加反式-4-叠氮基-3-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-叠氮基-4-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯(2.21g，5.14mmol)在甲醇(20mL)中的溶液。在1小时内分四次添加额外的NaBH4(578mg，3当量)。使反应混合物通过Celite垫过滤并浓缩。用CH2Cl2(70mL)稀释残余物，用水(15mL)、饱和NH4Cl水溶液(2×10mL)、盐水(15mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩得到反式-4-氨基-3-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-氨基-4-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯(1.34g，64％)。产物在不进一步纯化的情况下用于下一步骤。MS ESI+ve m/z 405(M+1)。
步骤6.(±)3-苄基7-叔丁基3，7-二氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3，7-二羧酸酯 将区域异构体反式-4-氨基-3-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯和反式-3-氨基-4-(甲苯磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸苄酯(274mg，0.678mmol)和DIEA(177μL，1.5当量)溶解于甲醇(8mL)中并在CEM微波反应器中加热至80℃20分钟。浓缩反应混合物，并将其重新溶解在CH2Cl2(10mL)中。添加(Boc)2O(150mg，1当量)并在室温下搅拌混合物过夜。浓缩反应混合物并通过急骤色谱法纯化(40g硅胶柱，0-45％EtOAc在己烷中的梯度)，得到(±)3-苄基7-叔丁基3，7-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-3，7-二羧酸酯(227mg，quant)。MS ESI+ve m/z 355(M+Na)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 3-苄基6-叔丁基3，6-二氮杂-双环[3.1.0]己烷-3，6-二羧酸酯，在步骤1中使用2，5-二氢-1H-吡咯。
制备例Y 3-氨基-4-(环丁基甲基)哌啶-1-羧酸(±)-(3S，4R)-苄酯
步骤1.3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-(环丁基甲基)哌啶-1-羧酸(±)-反式-苄酯 将(±)-3-苄基7-叔丁基3，7-二氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3，7-二羧酸酯(62mg，0.187mmol)、CuI(8mg，0.2当量)和搅拌棒置于100-mL烧瓶中。抽出烧瓶中的空气并回充N2气(3x)。添加干THF(5mL)，并使混合物冷却至-40℃。缓慢添加在THF(620μL，3当量，约0.89M)中的(环丁基甲基)溴化镁。8分钟后，使反应混合物缓慢升温至室温。20分钟后，反应混合物变黑。进一步搅拌2小时后，反应完全。加入饱和NH4Cl水溶液溶液(5mL)猝灭反应。反应混合物在EtOAc(50mL)和饱和NH4Cl水溶液(20mL)之间分配。水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的EtOAc层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩后，通过Gilson纯化残余物，得到(±)-反式-苄基3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-(环丁基甲基)哌啶-1-羧酸酯(14mg，19％收率)。MSESI+ve m/z 425(M+Na)。
步骤2.3-氨基-4-(环丁基甲基)哌啶-1-羧酸(±)-反式-苄酯 将(±)-反式-苄基3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-(环丁基甲基)哌啶-1-羧酸酯(14mg，0.035mmol))溶解在1∶12N HCl/乙腈水溶液(8mL)中并在室温下搅拌过夜。反应混合物用5％NaOH水溶液碱化至大约pH＝9。在真空下除去乙腈。含水残余物用CH2Cl2(3×20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤(10mL)，用Na2SO4干燥。浓缩得到(±)-反式-苄基3-氨基-4-(环丁基甲基)哌啶-1-羧酸酯(8.9mg，85％收率)。粗产物在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 303(M+Na)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)3-氨基-4-异丁基吡咯烷-1-羧酸(±)-反式-苄酯，在步骤1中使用6-叔丁基3，6-二氮杂-双环[3.1.0]己烷-3，6-二羧酸(±)-3-苄酯和异丁基溴化镁。
制备例Z (S)-2-氨基-3-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基-(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1a-e.(±)-叔丁基((1r，2R，4S)-2-氟-4-(碘甲基)环戊基氧基)二甲基硅烷 将(1S，3r，5R)-6-氧杂-双环[3.1.0]己-3-基甲醇(2.73g，24.0mmol，1.0当量))、NEtiPr2(6.8g，48.0mmol，2.0当量)和DMAP(2.9g，24mmol，1.0当量)溶解于CH2Cl2中并使溶液冷却至0℃。添加特戊酰氯(5.80g，48.0mmol，2.0当量)，并搅拌混合物2小时。将混合物转移到分液漏斗中，用饱和NH4Cl、盐水洗涤溶液，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。将粗环氧酯通过二氧化硅急骤色谱法纯化，用己烷中的0-27％EtOAc洗脱。获得4.1g(86％收率)环氧酯。
将上述环氧化物(4.1g，20.7mmol)溶解在10mL NEt3(HF)3中将混合物加热至117℃17小时。之后将混合物冷却至环境温度，通过添加10％K2CO3猝灭过量的HF。用EtOAc稀释混合物，分离层。有机层用0.5M HCl、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。粗氟醇(4.53g)在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。
粗氟醇(4.53g，＞20mmol)、TBSCl(6.23g，42mmol，2.0当量)和咪唑(5.72g，84.0mmol，4.0当量)溶解于10mL DMF中。将混合物在环境温度下搅拌16小时。之后在真空中除去溶剂。残余物在Et2O和水之间分配。分离层，有机层用0.5M HCl、盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并蒸发。使该溶液冷却至0℃，并添加LiAlH4在THF(1.0M，21mL，1.0当量)中的溶液。1小时后，通过逐滴添加盐水猝灭过量的LiAlH4，通过添加约10g Celite分散得到的浆液。使混合物通过Celite垫过滤，并蒸发，产生1.20g(5.2mmol，25％收率)所需的醇。
将上述醇(1.10g，4.4mmol，1.0当量)、PPh3(1.45g，5.5mmol，1.25当量)和咪唑(1.0g，14.7mmol，3.3当量)溶解在THF中。在20分钟内分次添加碘(1.4g，5.5mmol，1.25当量)。除去溶剂，混合物通过二氧化硅垫过滤，用Et2O洗脱。蒸发滤液，通过在二氧化硅上的急骤色谱法纯化碘化物，用己烷中的0-7％EtOAc洗脱，这得到1.31g(83％收率)(±)-叔丁基((1r，2R，4S)-2-氟-4-(碘甲基)环戊基氧基)二甲基硅烷. 步骤2a-c.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1r*，3S*，4S*)-3-氟-4-羟基环戊基)丙酸(S)-甲酯 将(R)-2-异丙基-3，6-二甲氧基-2，5-二氢吡嗪(134g，7.24mmol，1.5当量)溶解在9mL THF中，使溶液冷却至-78℃。在15分钟内添加2.5M nBuLi(2.9mL，7.24mmol，1.5当量)溶液，将得到的溶液搅拌0.5小时。添加(±)-叔丁基((1r，2R，4S)-2-氟-4-(碘甲基)环戊基氧基)二甲基硅烷(1.73g，4.83mmol，1.0当量)在THF(9mL)中的溶液。在-78℃下搅拌将混合物2小时，然后升温至-20℃，并在该温度下搅拌过夜。用水猝灭混合物，用盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。将得到的混合物溶解在60mL 1∶1的CH3CN∶2.0M HCl中。在环境温度下搅拌5小时后，蒸发混合物，并重新溶解在30mL CH3CN中，向其中加入30mL 10％K2CO3，随后加入3.3g(15mmol，3.0当量)的二碳酸二叔丁酯，快速搅拌混合物1小时。之后蒸发溶液。将黄色残余物溶解在EtOAc中，用10％K2CO3、0.5M HCl、盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。所需保护的氨基酸通过在二氧化硅上急骤色谱法纯化，用0-41％EtOAc洗脱。得到1114mg(3.63mmol，75％收率)2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1r*，3S*，4S*)-3-氟-4-羟基环戊基)丙酸(S)-甲酯。
步骤3.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯 将2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1r*，3S*，4S*)-3-氟-4-羟基环戊基)丙酸(S)-甲酯(798mg，2.35mmol，1.0当量)、C4F9SO2F(1425mg，4.7mmol，2.0当量)、NEt3(HF)3(1138mg，7.1mmol，3.0当量)和NEt3(1427mg，14.1mmol，6.0当量)溶解在THF中，并在环境温度下搅拌混合物19小时。通过添加10％K2CO3猝灭过量的HF。用EtOAc稀释混合物，并分离层。用0.5M HCl、盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。通过在二氧化硅上进行急骤色谱法纯化二氟化物，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。得到423mg(1.24mmol，53％收率)的纯2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯。
步骤4a-f.(S)-2-氨基-3-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将氢氧化锂水合物(48mg，1.14mmol，3.0当量)溶解在1.0mL水中。添加到2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯(116mg，0.379mmol，1.0当量)在10mL THF中的溶液中。将溶液搅拌2小时。通过添加10％柠檬酸(约2mL)猝灭混合物，用水和EtOAc稀释混合物。分离层，，有机层用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。将得到的酸溶解在THF(10mL)中，冷却至0℃，添加硼烷(1.0M，在THF中，3.0mL，8.0当量)。在0℃下搅拌混合物3小时。用EtOAc稀释混合物，并添加0.25M HCl。分离层，有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，通过硅胶垫过滤，并蒸发。得到88mg所需的氨基醇。
将氨基醇(88mg，0.28mmol，1.0当量)、甲苯磺酰氯(420mg，2.21mmol，7.9当量)和DABCO(50mg，0.445mmol，1.6当量)溶解于吡啶中，在环境温度下搅拌混合物48小时。蒸发混合物，将残余物在EtOAc/0.5M HCl中吸收。分离层，有机层用0.5M HCl、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。粗甲苯磺酸酯通过在二氧化硅上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。得到的甲苯磺酸酯直接用于下一步骤中。
将上述甲苯磺酸酯溶解在20mL 33％NH2Me的EtOH溶液中。将混合物加热至45℃3小时。蒸发混合物，将残余物溶解在Et2O中，用K2CO3、盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。粗胺在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。
将上述胺溶解在10mL 1∶1乙腈/10％K2CO3水溶液中。加入TeocOSu(64mg，0.275mmol)，搅拌混合物4小时。在真空中除去乙腈，用2×20mL EtOAc萃取产物。合并的有机萃取物用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。通过在二氧化硅上进行急骤色谱法并用0-29％EtOAc洗脱分离产物。分离被保护的胺(35mg，0.075mmol，27％收率，四步)。
按照与制备例M步骤4类似的程序，在步骤4中使用(S)-1-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，获得2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((1s，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯。
制备例A1 (S)-2-氨基-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1-5.(±)-叔丁基((1r，2R，4R)-2-氟-4-(碘甲基)环戊基氧基)二甲基硅烷 利用与制备例Z步骤1-5类似的程序，在步骤1中使用(1S，3s，5R)-6-氧杂-双环[3.1.0]己烷-3-基甲醇，获得(±)-叔丁基((1r，2R，4R)-2-氟-4-(碘甲基)环戊基氧基)二甲基硅烷。
步骤6.(2S，5R)-2-(((1r*，3R*，4R*)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-4-氟环戊基)甲基)-5-异丙基-3，6-二甲氧基-2，5-二氢吡嗪 将(R)-2-异丙基-3，6-二甲氧基-2，5-二氢吡嗪(1.2g，1.5当量)在干THF(30mL)中的溶液冷却至-78℃。逐滴添加n-BuLi(1.6M，在己烷中，4.08mL，1.5当量)。于-78℃搅拌1小时后，逐滴添加(±)-叔丁基((1r，2R，4R)-2-氟-4-(碘甲基)环戊基氧基)二甲基硅烷(1.56g，4.36mmol)在干THF(8mL)中的溶液。在-78℃下再搅拌混合物2小时。使混合物缓慢升温至室温，用饱和NH4Cl溶液(30mL)猝灭，用二乙醚(2×150mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤并浓缩后，通过ISCO(40g柱，在己烷中的0～25％EtOAc)纯化残余物，得到(2S，5R)-2-(((1r*，3R*，4R*)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-4-氟环戊基)甲基)-5-异丙基-3，6-二甲氧基-2，5-二氢吡嗪(1.81g，定量收率)，为澄清的油。MS ESI+ve m/z 415(M+1)。
步骤7.2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r*，3R*，4R*)-3-氟-4-羟基环戊基)丙酸(S)-甲酯 将(2S，5R)-2-(((1r*，3R*，4R*)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-4-氟环戊基)甲基)-5-异丙基-3，6-二甲氧基-2，5-二氢吡嗪(500mg，1.21mmol)溶解在1N HCl溶液和乙腈(50mL)的1∶1混合物中。将混合物在室温下搅拌3小时。向残余物中添加K2CO3(840mg，5当量)和CbzOSu(903mg，3当量)。将混合物溶解在1∶1的水和乙腈(50mL)中，在室温下搅拌过夜。减压蒸发除去乙腈。用EtOAc(3×20mL)萃取含水残余物。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，通过ISCO(40g柱)纯化残余物，得到274mg(67％收率)2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r*，3R*，4R*)-3-氟-4-羟基环戊基)丙酸(S)-甲酯。MS ESI+ve m/z 362(M+Na)。1H NMR(CDCl3)δ7.35(m，5H)，5.34(s，1H)，5.10(s，2H)，4.82(d，1H)，4.39-4.19(m，2H)，3.73(s，3H)，2.43-2.24(m，2H)，2.09-1.38(m，6H)。19F NMR(CDCl3)δ-175.92. 步骤8.2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯 将2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r*，3R*，4R*)-3-氟-4-羟基环戊基)丙酸(S)-甲酯(135mg，0.398mmol)在CH2Cl2(6mL)中的溶液冷却至-78℃，然后缓慢添加DAST(100μL，2当量)。1小时后，使反应混合物缓慢升温至室温并搅拌过夜。添加饱和NaHCO3溶液(10mL)以猝灭反应。分离混合物。用CH2Cl2(25mL)萃取水相。浓缩合并的有机层，并通过制备HPLC纯化，得到55mg(41％收率)2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯。MS ESI+ve m/z 364(M+Na)。1H NMR(CDCl3)δ7.35(m，5H)，5.33(d，1H)，5.10(s，2H)，4.89(m，1H)，4.76(m，1H)，4.37(td，1H)，3.74(s，3H)，2.30-2.07(m，2H)，1.99(m，1H)，1.80-1.60(m，3H)。19F NMR(CDCl3)δ-199.81。
步骤9.(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基甲磺酸酯 将2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙酸(S)-甲酯(218mg，0.64mmol)在干THF(8mL)中的溶液冷却至0℃。缓慢添加2.0M LiBH4在THF(640μL，2eq.)中的溶液。20分钟后，使反应混合物缓慢升温至室温。搅拌2小时后，使混合物冷却至0℃，用5％HCl(10mL)猝灭，用EtOAc(20mL)稀释。分离后，用EtOAc(2×10mL)萃取水相。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，将粗产物重新溶解在CH2Cl2(6mL)和吡啶(1.5mL)中。依次加入DMAP(40mg，0.5当量)和甲磺酰氯(174μL，13.5当量)。在室温下搅拌过夜后，用EtOAc(35mL)稀释混合物，用5％HCl(2×12mL)、饱和NaHCO3溶液(12mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，通过ISCO(12g柱，己烷中的5％-80％EtOAc)纯化残余物，得到187mg(75％收率)(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基甲磺酸酯，为澄清的油。MS ESI+ve m/z 393(M+1)。1H NMR(CDCl3)δ7.34(m，5H)，5.09(s，2H)，5.01(m，1H)，4.83(d，2H)，4.20(m，2H)，3.94(m，1H)，2.96(s，3H)，2.46-1.92(m，3H)，1.67(m，4H)。
19F NMR(CDCl3)δ-196.74。
步骤10.(S)-1-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)-3-(N-甲基-N-叔丁氧基羰基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 将(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基甲磺酸酯(187mg，0.478mmol)、33％甲胺在乙醇(2mL)和乙醇(2mL)中混合，并在CEM微波炉中90℃加热20分钟。然后浓缩混合物，重新溶解在CH2Cl2(6mL)中。加入(Boc)2O(200mg，2当量)和Et3N(164μL，1当量)。在室温下搅拌混合物3小时。然后浓缩混合物，并通过制备HPLC纯化残余物，得到72mg(35％收率，两步)(S)-1-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)-3-(N-甲基-N-叔丁氧基羰基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯，为澄清的油。MS ESI+ve m/z 449(M+Na)。
步骤11.(S)-2-氨基-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 (S)-1-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)-3-(N-甲基-N-叔丁氧基羰基氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(72mg，0.169mmol)、PdCl2(催化量，约15mg)与甲醇(20mL)混合。将混合物置于Parr氢化振荡器中在30psiH2气氛下30分钟。过滤、浓缩混合物，得到51mg(定量收率)粗(S)-2-氨基-3-((1r，3R，4S)-3，4-二氟环戊基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。
制备例B1 2-氨基-3-(4，4-二氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.L-酪氨酸甲酯 在0℃下向L-酪氨酸(45.3g，0.25mol)在CH3OH(680mL)中的溶液中逐滴添加SOCl2(44.6g，0.375mol)。添加后，使混合物升温至室温，然后回流过夜。浓缩反应混合物，得到L-酪氨酸甲酯(49.2g，100％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤2.L-N-Boc-酪氨酸甲酯 在0℃下向Boc2O(60g，0.275mol)在CH2Cl2(700mL)中的溶液中逐滴添加L-酪氨酸甲酯(49.2g，0.25mol)和Et3N(63.1g，0.625mol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液。在室温下搅拌3小时后，浓缩混合物，得到粗酯，通过柱纯化。得到纯的L-N-Boc-酪氨酸甲酯(68.1g，92％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ6.96(d，2H)，6.73(d，2H)，5.88(s，1H)，5.00(d，1H)，4.53(m，1H)，3.71(s，3H)，3.00(m，2H)，1.42(s，9H)。MS ESI+ve m/z 296(M+1)。
步骤3.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-羟基环己基)丙酸(S)-甲酯 向N-Boc-酪氨酸甲酯(68.1g，0.231mol)在甲醇(1200mL)中的溶液中添加Rh/C(13.6g，5％，在湿碳上)，并在55-60℃和55psi下氢化过夜。用Celite滤出催化剂，浓缩滤液，得到油状物2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-羟基环己基)丙酸(S)-甲酯(59.5g，85.6％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.90(m，1H)，4.34(m，1H)，3.97(m，1H)，3.72(s，3H)，3.52(m，1H)，2.00-0.80(m，11H)，1.43(s，9H)。MS ESI+ve m/z303(M+1)。
步骤4.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氧代环己基)丙酸(S)-甲酯 在-65℃下向草酰氯(49.5g，0.39mol)在干CH2Cl2(480mL)中的溶液中逐滴添加干DMSO(60.8g，0.78mol)在干CH2Cl2(200mL)中的溶液大约0.5-1小时。然后向上述混合物中逐滴添加2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-羟基环己基)丙酸(S)-甲酯(59.5g，0.197mol)在干CH2Cl2(600mL)中的溶液大约0.5-1小时。在-50--30℃下搅拌4-6小时。反应完成后，逐滴添加158mL Et3N，并使混合物升温至室温。向溶液中添加饱和NaHCO3，用EtOAc萃取，用H2O、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过急骤色谱法纯化残余物，得到2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氧代环己基)丙酸(S)-甲酯(39.5g，67％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ5.00(d，J＝8.0H，1H)，4.39(m，1H)，3.74(s，3H)，2.40-1.30(m，11H)，1.44(s，9H)。MS ESI+ve m/z 301(M+1)。
步骤5.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4，4-二氟环己基)丙酸(S)-甲酯 在0℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氧代环己基)丙酸(S)-甲酯(29.9g，0.1mol)在干苯(600mL)的溶液中逐滴添加DAST(32.5g，0.2mol)溶液。添加后，将混合物在N2气氛下加热至回流2-3小时。用饱和NaHCO3(400mL)和EtOAc(300mL)处理混合物。用EtOAc萃取水相，合并的有机层用盐水洗涤(300mL)，用Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，得到粗2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4，4-二氟环己基)丙酸(S)-甲酯(28.6g，89％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ4.93(brs，1H)，4.35(m，1H)，3.74(s，3H)，2.30-1.10(m，11H)，1.44(s，9H)。MS ESI+ve m/z 322(M+1)。
步骤6.1-(4，4-二氟环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在0℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4，4-二氟环己基)丙酸(S)-甲酯(28.6g，0.089mol)在EtOH(600mL)中的溶液中分次添加NaBH4(27.1g，0.713mol)，同时保持温度为0-5℃。将混合物在室温下搅拌2-3小时，然后蒸发。残余物在水和EtOAc之间分配。有机层用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到1-(4，4-二氟环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(25.7g，99％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.61(d，J＝7.6Hz，1H)，3.70(m，1H)，3.50(m，1H)，2.45-1.10(m，11H)，1.44(s，9H)。MSESI+ve m/z 295(M+1)。
步骤7-10.2-氨基-3-(4，4-二氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用类似于制备例S步骤3-6的程序，在步骤3中使用1-(4，4-二氟环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，获得2-氨基-3-(4，4-二氟环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。1H NMR(CD3OD，400M Hz)δ4.17(t，2H)，3.15(m，1H)，2.93(s，3H)，2.61(dd，1H)，2.36(dd，1H)，2.12-1.16(m，11H)，1.00(t，2H)，0.04(s，9H)。MSESI+ve m/z 351(M+1)。
制备例C1 (S)-2-氨基-3-((S)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(244mg，0.63mmol)在无水DCM(6mL)中的溶液中添加吡啶(2mL)和催化量的DMAP，使溶液冷却至0℃。添加TsCl(360mg，1.88mmol)，在室温下搅拌过夜。用EtOAc(40mL)稀释反应混合物并用1N HCl(两次，50ml+20ml)洗涤，随后用H2O、NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤。蒸发后，在硅胶柱上纯化残余物，用己烷中的0-20％EtOAc洗脱，得到4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(317mg，收率93％)。MS ESI+ve m/z 564(M+Na)。
步骤2.4-((R)-5-叔丁氧基-2-((甲基氨基)甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(300mg，0.55mmol)溶解在30％MeNH2的EtOH溶液(60mL)中，在压力密封的容器中将溶液加热至70℃2小时。冷却至室温后，减压除去溶剂，得到4-((R)-5-叔丁氧基-2-((甲基氨基)甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(212mg，95％)。MS ESI+ve m/z 401(M+H)。
步骤3.2，2-二甲基-4-(((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-5-叔丁氧基-2-((甲基氨基)甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(212mg，0.53mmol)在无水MeOH的溶液中添加NaOMe的MeOH溶液(33％，0.4mL)。将得到的溶液搅拌24小时。减压除去溶剂，将残余物溶解在EtOAc(50mL)中，用1M HCl、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到2，2-二甲基-4-(((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(160mg，92％)。MS ESI+ve m/z 564(M+Na)。
步骤4.(S)-1-羟基-3-((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 向2，2-二甲基-4-(((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(230mg，0.70mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加p-TSA(30mg，0.17mmol)，在室温下搅拌过夜。添加TEA(1mL)，然后添加Boc2O(30mg)。将反应混合物另外搅拌30分钟。在真空下除去溶剂，得到粗产物(S)-1-羟基-3-((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 287(M+H)。
步骤5-8.(S)-2-氨基-3-((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用类似于制备例Z步骤4c-4f的程序，在步骤4c中使用(S)-1-羟基-3-((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，获得(S)-2-氨基-3-((R)-1-甲基-6-氧代哌啶-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 344(M+H)。
制备例D1 2-氨基-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.1-氨基-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在50-60℃下搅拌2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)氮丙啶-1-羧酸(S)-叔丁酯(5g，17.42mmol)在NH3/MeOH(50mL)中的溶液48小时。反应完成后，真空浓缩混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，得到1-氨基-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(2.5g，47％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.67(m，3H)，2.88(d，2H)，2.71(s，3H)，1.44(s，9H)，0.88(s，9H)，0.0(s，6H)。
步骤2.1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(5-氯戊酰氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将1-氨基-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1g，3.29mmol)吸收在10mL CH2Cl2中并冷却至0℃。向其中添加Et3N(0.731g，7.24mmol)，然后添加5-氯-戊酰氯(0.557g，3.62mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌4小时。在反应完成后，加入饱和NaCl溶液。用EA萃取有机层，用Na2SO4干燥，并减压浓缩。过柱纯化残余物，得到1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(5-氯戊酰氨基pentanamido)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.2g，86％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.31(s，1H)，5.04(d，1H)，3.65(m，3H)，3.53(m，2H)，3.40(m，2H)，2.18(t，2H)，1.78(m，4H)，1.43(s，9H)，0.88(s，9H)，0.0(s，6H)。
步骤3.1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在将1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(5-氯戊酰氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(500mg，1.18mmol)在DMF(10mL)中的溶液冷却至0℃后，加入NaH(52mg，1.30mmol)。将反应混合物搅拌4小时。使混合物吸收到EtOAc中，用饱和NaCl溶液洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩，粗1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯在不纯化的情况下用于下一步骤(370mg，81％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.25(d，1H)，4.04-3.81(m，2H)，3.67-3.20(m，4H)，2.36(m，2H)，1.78(m，4H)，1.41(s，9H)，0.88(s，9H)，0.0(s，6H)。
步骤4.1-羟基-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 向1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(370mg，0.96mmol)在CH3CN(3mL)中的悬浮液中添加TBAF(750mg，2.88mmol)。在50-60℃下搅拌反应混合物1小时。真空浓缩反应混合物，然后加入EA。用盐水、水洗涤该溶液，并再次浓缩，得到粗1-羟基-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(260mg 100％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤5-8.2-氨基-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 按照类似于制备例S步骤3-6的程序，在步骤3中使用1-羟基-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，获得2-氨基-3-(2-氧代哌啶-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ4.15(t，2H)，3.21-3.37(m，7H)，2.94(s，3H)，2.39(m，2H)，1.80(m，4H)，0.99(t，2H)，0.0(s，9H)。
制备例E1 2-氨基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸(R)-叔丁酯
步骤1.2-(苄氧基羰基氨基)-3-(4-氯丁酰氨基)丙酸(R)-甲酯 将3-氨基-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(R)-甲酯盐酸盐(4.0g，0.014mol)在甲醇(80mL)中的溶液冷却至0℃。向该混合物中加入Et3N(3.3g，31mmol)，然后加入4-氯丁酰氯(2.3g，15.0mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌4小时。用饱和盐水(200mL)猝灭反应，用CH2Cl2萃取有机层，用1N HCl、饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥并浓缩，得到粗2-(苄氧基羰基氨基)-3-(4-氯丁酰氨基)丙酸(R)-甲酯(5.0g)，其不经过进一步纯化用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.45-7.35(m，5H)6.01(s，1H)，5.84(d，1H)，5.11(d，2H)，4.42(t，5H)，3.68-3.50(m，6H)，2.32(t，2H)，2.08(t，2H)。
步骤2.1-(4-氯丁酰氨基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(R)-苄酯 向2-(苄氧基羰基氨基)-3-(4-氯丁酰氨基)丙酸(R)-甲酯(5.0g，14mmol)在100mL无水MeOH中的溶液中添加NaBH4(12.9g，0.33mol)，将混合物在室温下搅拌过夜。用NaHCO3调节反应混合物的pH，蒸发混合物近干，然后用EtOAc萃取。有机层用水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到1-(4-氯butanamido)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(R)-苄酯(3.9g，收率85％)，其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.37-7.30(m，5H)5.13(d，2H)，3.77(m，1H)，3.57(m，4H)，2.32(t，2H)，2.08(t，2H)。
步骤3.1-羟基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙-2-基氨基甲酸(R)-苄酯 将1-(4-氯丁酰氨基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(R)-苄酯(3.9g，11.9mmol)在DMF中的溶液冷却至0℃，然后加入NaH(0.72g，17.9mmol)。在室温下搅拌混合物4小时。在高真空下除去DMF，将残余物吸收到EtOAc中，用1N HCl、饱和NaHCO3、NaCl洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到1-羟基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙-2-基氨基甲酸(R)-苄酯(1.1g，收率33％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.39-7.27(m，5H)，5.45(d，1H)，5.10(d，1H)，4.70(s，2H)，3.72(m，1H)，3.54-3.40(m，4H)，3.20-3.17(m，1H)，2.40(t，2H)，2.07(t，2H)。
步骤4-7.2-氨基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸(R)-叔丁酯 按照类似于制备例W步骤8-11的程序，在步骤8中使用1-羟基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙-2-基氨基甲酸(R)-苄酯，获得2-氨基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基(甲基)氨基甲酸(R)-叔丁酯。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.32(s，1H)3.48(s，2H)，3.35(m，1H)，3.23(s，3H)，2.91(s，2H)，2.79(d，1H)，2.42(m，1H，)，2.07(m，4H)，1.45(s，9H)。
制备例F1 2，2-二甲基-4-(((S)-四氢呋喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯
步骤1.(2S，4R)-1-叔丁基2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯 向HMDS在无水THF(200mL)中的溶液中逐滴添加2.5M nBuLi的己烷溶液(130mL)，并在-78℃下搅拌混合物1小时。向于-78℃搅拌的N-Boc焦谷氨酸酯(80g，0.311mol)在无水THF(1600mL)中的溶液中添加上述二(三甲基甲硅烷基)氨基锂在THF中的溶液。在-78℃下搅拌反应混合物1小时，添加在THF(200mL)中的3-溴丙烯(38.47g，0.318mol)，并继续搅拌2小时。在-78℃下用饱和氯化铵溶液(600mL)猝灭反应混合物，用EtOAc萃取(3×500mL)。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干。通过柱色谱法分离粗产物，得到2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸(2S，4R)-1-叔丁基酯(15g，16％)。1H NMR(CD3OD)δ5.4-5.3(m，1H)，5.1-5.0(m，2H)，4.6-4.5(m，1H)，4.3-4.2(m，2H)，2.8-2.6(m，2H)，2.2-2.1(m，2H)，1.5-1.4(s，9H)，1.3-1.2(t，3H)。
步骤2.(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯 向(2S，4R)-1-叔丁基2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯(30g，0.1mol)在MeOH/H2O(700/70mL)中的溶液中添加NaBH4(25g，0.66mol)，得到的混合物在室温下搅拌1小时，并用饱和NH4Cl水溶液(300mL)猝灭。在真空下除去有机溶剂，用EA(3×250mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤(250mL)，用无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发，得到粗(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(22g，85％)。其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。1H NMR(CD3OD)δ5.8-5.7(m，1H)，5.1-5.0(m，2H)，4.9-4.8(d，1H)，3.7-3.5(m，4H)，2.2-2.0(m，2H)，1.7-1.5(m，2H)，1.5-1.4(s，9H)。
步骤3.4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.8g，26.2mmol)溶解在丙酮(150mL)中，然后加入BF3·Et2O(2.62mmol)。反应混合物冷却至0℃，并加入2，2-二甲氧基丙烷(4.1g，39.4mmol)。得到的混合物在室温下搅拌1小时，加入TEA(0.5mL)，并再搅拌5分钟，之后减压蒸发。将残余物溶解在Et2O(300mL)中，依次用1N HCl(80mL)、饱和NaHCO3水溶液(80mL)、盐水(80mL)洗涤，并干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(7.5g，96％)。其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。1H NMR(CD3OD)δ1.4-1.5(m，13H)，1.5-1.6(d，6H)，1.6-1.9(m，2H)，2.0-2.1(m，1H)，3.3-3.5(m，2H)，3.6-3.8(m，2H)，3.8-3.9(m，2H)，4.1-4.2(m，1H)，5.0-5.1(m，2H)，5.7-5.8(m，1H)。
步骤4.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(11.5g，38.4mmol)、咪唑(7.84g，115.2mmol)和DMAP(234mg，1.92mmol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液中逐滴添加TBSCl(8.68g，57.6mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌过夜。加水(100mL)，水层用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(9g，57％)。
步骤5.4-((S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-4-羟基丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在-78℃下用O3流处理4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(15g)在干CH2Cl2(250mL)中的溶液，直到反应混合物变蓝。然后用O2冲洗系统，以除去过量的臭氧。加入Me2S，使混合物升温至室温。在真空中除去溶剂，得到粗产物(12g)。将粗产物溶解在250mL干THF中。让得到的混合物冷却至0℃，之后加入LiAlH4。搅拌30分钟后，用40mLH2O、然后用120mL 1N NaOH猝灭反应。得到的白色浆液通过celite过滤，澄清、无色的滤液用无水Na2SO4干燥。过滤然后真空浓缩得到粗产物，通过急骤柱纯化，得到纯的产物4-((S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-4-羟基丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(5.2g，34％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.06(s，6H)，0.89(s，9H)，1.46(s，12H)，1.50(m，3H)，1.53(m，3H)，3.09(m，1H)，3.49(m，2H)，3.50(m，2H)，3.7(m，2H)，3.90(m，1H)。
步骤6.4-((S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-4-(甲基磺酰氧基)丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0℃下向4-((S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-4-羟基丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯和TEA在CH2Cl2中的溶液中逐滴添加MsCl溶液。将混合物搅拌2小时。用水洗涤混合物，并用Na2SO4干燥。馏出有机相，得到粗产物4-((S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-4-(甲基磺酰氧基)丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(6.2g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.06(s，6H，0.89(s，9H)，1.46(s，12H)，1.50(s，3H)，1.53(m，3H)，2.94(s，3H)，3.49(m，2H)，3.50(m，2H)，3.7(m，2H)，3.9(m，1H)。
步骤7.2，2-二甲基-4-(((S)-四氢呋喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-4-(甲基磺酰氧基)丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(6.2g)在200mL THF的溶液中添加TEAF。在回流下搅拌反应混合物12小时。用EA稀释混合物，用水反萃取的EA洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，过滤，并浓缩。通过急骤柱纯化粗产物，得到纯的产物2，2-二甲基-4-(((S)-四氢呋喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(2.4g，67％)。
制备例G1 (S)-1-羟基-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯
步骤1.4-((R)-2-(烯丙基氧基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0℃下向4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(30g，100mmol，1eq)在无水THF(600mL)中的溶液中分次添加NaH(60％，16g，400mmol，4当量)。将混合物于0℃下搅拌10分钟，然后在15分钟内逐滴添加烯丙基溴(48g，400mmol，4当量)。于0℃搅拌30分钟后，使混合物升温至室温并搅拌16小时。用NH4Cl水溶液猝灭反应，并用EA萃取混合物(3x)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶柱色谱法(PE∶EA＝100∶1→60∶1)进行纯化，得到4-((R)-2-(烯丙基氧基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(26.15g，77.0％)。
步骤2.2，2-二甲基-4-(((R，Z)-2，3，4，7-四氢氧杂环庚烯-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-2-(烯丙基氧基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(700mg，2.06mmol，1当量)在无水CH2Cl2中的溶液中添加第二代Grubbs催化剂((1，3-二-(2，4，6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(苯基亚甲基)(三环己基膦)钌)(173mg，0.21mol，0.1eq)。将得到的混合物搅拌并加热至回流4小时。减压除去溶剂，得到粗产物。通过硅胶柱色谱法(PE∶EA＝100∶1)纯化，得到2，2-二甲基-4-(((R，Z)-2，3，4，7-四氢氧杂环庚烯-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(563mg，88％)。
步骤3.2，2-二甲基-4-((R)-氧杂环庚烷-3-基甲)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将2，2-二甲基-4-(((R，Z)-2，3，4，7-四氢氧杂环庚烯-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯溶解在EtOH中，然后加入阮内镍。该混合物在室温下氢化3小时。滤出催化剂，减压浓缩滤液，得到2，2-二甲基-4-((R)-氧杂环庚烷-3-基甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(408mg，72％)。
步骤4.(S)-1-羟基-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 向2，2-二甲基-4-((R)-氧杂环庚烷-3-基甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(160mg，0.51mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加p-TSA(30mg，0.17mmol)，在室温下搅拌2小时。加入TEA(1mL)，随后加入1滴Boc2O。再搅拌反应混合物30分钟。在真空下除去溶剂，得到粗产物(S)-1-羟基-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 296(M+Na)。
制备例H1 (S)-1-氨基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙基4-甲苯磺酸酯 将上述粗醇溶解在吡啶(3mL)中，向该搅拌的溶液中添加催化量的DMAP和TsCl(117mg，0.61mmol)。1小时后加入另一份TsCl(30mg)并再搅拌1.5小时。用EtOAc稀释反应液，用1M HCl、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，干燥，过滤，并浓缩，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙基4-甲苯磺酸酯。MS ESI+ve m/z 450(M+Na)。
步骤2.(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将NaN3(47mg，0.72mmol)和(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙基4-甲苯磺酸酯(103mmol，0.24mmol)在无水DMF中的溶液加热至80℃2小时。冷却至室温后，用EtOAc稀释反应液，并用H2O、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，得到(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。MS ESI+ve m/z 321(M+Na)。
步骤3.(S)-1-氨基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 上述(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯利用10％Pd/C催化在MeOH中在H2(40psi)下氢化1小时。滤出催化剂并浓缩，得到(S)-1-氨基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(55mg，83％，两步)。MS ESI+ve m/z 273(M+H)。
制备例I1 (S)-1-氨基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1.(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 在-78℃下向(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(83mg，0.28mmol)在无水THF(5mL)中的溶液中添加1.0MLHMDS在THF中的溶液(1.1mL，1.12mmol)，然后在该温度下搅拌30分钟。向该混合物中添加MeI(237mg，104μL，1.67mmol)，然后升温至0℃，放置12h和-20℃。用饱和NH4Cl水溶液猝灭反应混合物，用EtOAc萃取(30mL)，将分离的有机相用H2O(2×10mL)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。浓缩滤液，通过硅胶上的急骤色谱法纯化得到的浆液(用梯度系统洗脱，己烷中的0-30％EtOAc)，得到(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。MS ESI+ve m/z 321(M+Na)。
步骤2.(S)-1-氨基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 上述(S)-1-叠氮基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯利用10％Pd/C催化在MeOH中在H2(40psi)下氢化1小时。滤出催化剂并浓缩，得到(S)-1-氨基-3-((S)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(76.8mg，96％，2步)。MS ESI+ve m/z 287(M+H)。
制备例J1 (S)-2-氨基-3-(氧杂环庚烷-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.氧杂环庚烷-4-酮 在500mL双颈圆底烧瓶中装以加液漏斗和蒸馏装置，用干冰-丙酮冷却。将KOH(30g，0.54mol)、水(50mL)和卡必醇(150mL)的混合物加热至70℃，然后逐滴添加N-甲基-N-亚硝基-对甲苯磺胺(107g，0.5mol)在醚(500mL)中的溶液，收集重氮甲烷的醚溶液。在0℃下向四氢-吡喃-4-酮(25g，0.25mol)在醚(150mL)中的溶液中逐滴添加1M CH2N2的醚溶液(500mL)。添加后，逐滴添加甲醇(125mL)。立即发生氮的活跃产生。使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用少数几滴乙酸破坏剩余的重氮甲烷。减压除去溶剂，得到氧杂环庚烷-4-酮(20g，70％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。1H NMR(CDCl3)δ1.82(m，2H)，2.66(m，4H)，3.82(m，4H)。
步骤2.氧杂环庚烷-4-醇 在保持温度低于40℃的同时向氧杂环庚烷-4-酮(20g，0.175mol)在MeOH(350mL)中的溶液中添加NaBH4(13g，0.35mol)。添加后，在室温下搅拌反应混合物2-3小时。在真空中除去溶剂，得到残余物，在水和EtOAc之间分配。水层用EtOAc(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，真空浓缩，得到氧杂环庚烷-4-醇(13g，64％)，在不进一步纯化的情况下将其直接用于下一步骤。1H NMR(CDCl3)δ1.45-2.01(m，6H)，2.33(brs，1H)，3.51-4.03(m，5H)。
步骤3.4-溴氧杂环庚烷 在0-5℃下向氧杂环庚烷-4-醇(13g，0.112mol)和PPh3(35g，0.134mol)在CH2Cl2(250mL)的溶液中添加CBr4(52g，0.157mol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液。添加后，在室温下搅拌反应混合物过夜.减压除去溶剂，得到残余物。添加醚(300mL)，形成白色沉淀。滤出固体，真空浓缩滤液。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，得到4-溴-氧杂环庚烷(8.0g，40％)。1H NMR(CDCl3)δ1.65(m，1H)，1.96(m，1H)，2.06-2.33(m，4H)，3.55(m，1H)，3.72(m，3H)，4.41(m，1H)。
步骤4-9.(S)-2-氨基-3-(氧杂环庚烷-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 按照与制备例S步骤1-6类似的程序，在步骤1中使用叔氧杂环庚烷-4-基溴化镁，获得(S)-2-氨基-3-(氧杂环庚烷-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。1H NMR(CDCl3)δ0.04(s，9H)，1.02(t，3H)，1.13-1.53(m，8H)，1.61-1.87(m，5H)，2.93(s，3H)，3.03-3.18(m，3H)，3.53-3.81(m，4H)，4.16(m，2H)。
制备例K1 2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸 向圆底烧瓶中，将Et3N(303g，3mol)逐滴添加到搅拌的Boc2O(261.6g，1.2mol)和2-氨基-戊二酸5-甲酯(161g，1mol)在水(800ml)和二

烷(800ml)中的溶液中。18小时后用石油醚(2×1000ml)萃取溶液，水相在冰上冷却，通过缓慢添加10％柠檬酸溶液小心酸化至pH3。然后将尿烷萃取到EtOAc(3×1000ml)中，合并的萃取物用盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤并减压浓缩，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸(238g，91.2％)，其在不进一步纯化的情况下使用。
步骤2.4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲酯 在-10℃下向搅拌的(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸(35.2g，0.135mol)在THF(500mL)中的溶液中添加N-甲基吗啉(15mL，0.135mol)，随后添加氯甲酸乙酯(14.72g，0.135mol)。10分钟后一次加入NaBH4(15.37g，0.405mol)。然后在0℃下在20分钟内逐滴添加MeOH(1200mL)。将溶液另外搅拌20分钟，然后用1MKHSO4中和。除去有机溶剂，用EtOAc(3×500ml)萃取水层。合并的有机相依次用1M KHSO4(300mL)、H2O(300mL)、5％NaHCO3水溶液(300mL)洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到残余物，通过柱色谱法纯化，得到所需的(S)-甲基4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸酯(24g，72％) 步骤3.4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲酯(24g，97.2mmol)和异丙烯基甲醚(88.8g，854.6mmol)溶解在丙酮(2000mL)中，在室温下添加BF3·Et2O(0.82mL，5.84mmol)。在室温下搅拌混合物1小时。通过添加Et3N(11.6mL)猝灭反应。反应溶液用饱和NaHCO3水溶液(200mL)洗涤并蒸发，获得油状物4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(25.1g，90％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤4.(S)-3-(3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基

唑烷-4-基)丙酸 将氢氧化钠水溶液(195mL，4.0M，在H2O中，0.261mol，3.0当量)加至4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(25.1g，0.087mol)的溶液中，得到混浊反应混合物在23℃下搅拌3.5小时。将混合物减压浓缩至大约50mL体积，然后在0.5M HCl(360ml)和EtOAc(2×360ml)之间分配。合并的有机层用Na2SO4干燥并过滤。减压浓缩滤液，得到(S)-3-(3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基

唑烷-4-基)丙酸(21.6g，91％)，其在不进行进一步纯化的情况下使用。
步骤5.2，2-二甲基-4-(3-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-氧代丙基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向2000mL烧瓶中装以(S)-3-(3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基

唑烷-4-基)丙酸(21.6g，79mmol)和750mL干THF。使溶液冷却至0℃，然后相继加入三乙胺(23.94g，237mmol，3.0当量)和新戊酰氯(9.76mL，79mmol，1.0当量)。在0℃下搅拌溶液4小时。之后添加(R)-4-苄基-2-

唑烷酮(13.26g，75.2mmol，0.95当量)和干燥的LiCl(3.68g，86.4mmol，1.1当量)，并搅拌反应液13小时，同时升温至环境温度。之后添加560mL 0.5M HCl，混合物转移到分液漏斗中并分离层。水层用EtOAc萃取(3×370mL)，合并的有机层用10％K2CO3(2×370mL)和盐水(2×370mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，并蒸发。粗物质通过急骤色谱法纯化，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。得到26.3g(81％)2，2-二甲基-4-(3-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-氧代丙基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为澄清浆液。
步骤6.4-((R)-5-叔丁氧基-2-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-羰基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0℃下，将1.0M TiCl4的CH2Cl2溶液(8.55mL，0.7当量)添加到CH2Cl2(100mL)中，然后加入1.0M TiCl(Oi-Pr)3的己烷溶液(4.28mL，0.35当量)，并搅拌5分钟，加入DIPEA(2.87mL，1.35当量)并搅拌15分钟。加入2，2-二甲基-4-(3-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-氧代丙基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(5.28g，12.22mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液。在0℃下搅拌反应混合物1小时。向该溶液中添加丙烯酸叔丁酯(2.22mL，1.25当量)，搅拌该混合物48小时，同时升温至室温。浓缩混合物，在EtOAc(300mL)和1％HCl溶液(100mL)之间分配。有机层有饱和NaHCO3溶液(60mL)、盐水(60mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，通过ISCO(120g柱，己烷中的0～35％EtOAc梯度)纯化残余物，得到4.12g(60％)4-((R)-5-叔丁氧基-2-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-羰基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为淡黄色固体。MS ESI+ve m/z 583(M+Na)。
步骤7.4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-叔丁氧基-2-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-羰基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(4.12g，7.36mmol)溶解在4∶1的THF和甲醇(200mL)中并冷却至0℃。缓慢加入硼氢化钠(557mg，2当量)。10分钟后使混合物缓慢升温至室温。将混合物在室温下搅拌2小时。浓缩混合物，再溶解于EtOAc(300mL)中，用1％HCl溶液(100mL)、盐水(60mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，通过(40g柱，己烷中的10-65％EtOAc梯度，利用茚三酮染色核实TLC)纯化残余物)，得到2.86g 4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为白色固体。MS ESI+m/v 410(M+Na)。
步骤8.4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(244mg，0.63mmol)在无水DCM(6mL)中的溶液中添加吡啶(2mL)和催化量的DMAP，使溶液冷却至0℃。加入对甲苯磺酸氯(360mg，1.88mmol)并在室温下搅拌过夜。用EtOAc(40mL)稀释反应混合物，用1N HCl(2x，50ml+20ml)洗涤，随后用H2O、NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。蒸发溶剂后，用硅胶柱纯化残余物，用己烷中的0-20％EtOAc洗脱，得到4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(317mg，收率93％)。
步骤9.4-((R)-5-羟基-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在-78℃和N2下向4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(317mg，0.58mmol)在无水DCM(8mL)中的溶液中逐滴添加DiBAlH(1M，在己烷中，1.75mL，1.75mmol)。添加后，再搅拌反应混合物30分钟。用MeOH(2mL)猝灭反应，随后用50％罗谢尔盐水溶液，并搅拌2小时。得到的溶液用DCM(3×20mL)萃取，浓缩合并的有机相，溶解在THF/MeOH(10mL，4/1，v/v)中，冷却至0℃，加入NaBH4(11mg，0.29mmol)，并在该温度下搅拌30分钟。用NH4Cl水溶液猝灭反应，然后用EtOAc(3×20mL)萃取，合并的有机相用H2O、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩，得到粗产物4-((R)-5-羟基-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(255mg，92％)。其在不进一步纯化的情况下使用。
步骤10.2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0℃和N2下向4-((R)-5-羟基-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(254mg，0.54mmol)在无水DMF(8mL)中的溶液中添加NaH(43mg，1.08mmol)。在该温度下搅拌1小时后，用NH4Cl水溶液猝灭反应，然后蒸发至干。将残余物溶解在EtOAc和H2O中，分离的有机相用EtOAc萃取。合并的有机相用H2O、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。用硅胶柱纯化残余物，得到2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(136mg，84％)。
下列化合物利用与以上所述类似的程序制备 4-((R)-5-(环己基氧基)-5-氧代-2-((R)-2-氧代-4-苯基

唑烷-3-羰基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，在步骤5中使用(R)-4-苯基-2-

唑烷酮，在步骤6中使用丙烯酸环己酯。
4-((R)-5-乙氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，在步骤5中使用(R)-4-苯基-2-

唑烷酮，在步骤6中使用丙烯酸乙酯。
制备例L1 2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷
步骤1.2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸(2S，4R)-1-叔丁酯 向HMDS在无水THF(200mL)中的溶液中逐滴添加2.5Mn-BuLi的己烷溶液(130mL)，并在-78℃下搅拌混合物1小时。向于-78℃搅拌的(S)-1-叔丁基2-乙基5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯(80g，0.311mol)在无水THF(1600mL)中的溶液中添加THF中的二(三甲基甲硅烷基)氨基锂。在-78℃下搅拌反应混合物1小时后，加入在THF(200mL)中的3-溴丙烯(38.47g，0.318mol)，继续搅拌2小时。反应混合物在-78℃下用饱和氯化铵溶液(600mL)猝灭，用EtOAc(3×500mL)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干。通过柱色谱法分离粗产物，得到(2S，4R)-1-叔丁基2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯(15g，16％)。
步骤2.(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯 向2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸(2S，4R)-1-叔丁酯(30g，0.1mol)在MeOH/H2O(700/70mL)中的溶液中添加NaBH4(25g，0.66mol)，得到的混合物在室温下搅拌1小时，并用饱和NH4Cl水溶液(300mL)猝灭。在真空下除去有机溶剂，用EtOAc(3×250mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤(250mL)，用无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发，得到粗(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(22g，85％)。其在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤中。
步骤3.4-(((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.8g，26.2mmol)在丙酮(150mL)中的溶液中添加PTSA(0.45g，2.62mmol)。使反应混合物冷却至-20℃，然后加入2，2-二甲氧基丙烷(4.1g，39.4mmol)。搅拌得到的混合物，并升温至室温1小时。然后加入TEA(0.5mL)并再搅拌5分钟。减压除去溶剂。将残余物溶解在Et2O(300mL)中，相继用1N HCl(80mL)、饱和NaHCO3水溶液(80mL)、盐水(80mL)洗涤，干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(7.5g，96％)。其在不进行进一步纯化的情况下使用。
步骤4.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(11.5g，38.4mmol)、咪唑(7.84g，115.2mmol)和DMAP(234mg，1.92mmol)在CH2Cl2(200mL)的溶液中逐滴添加TBSCl(8.68g，57.6mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌过夜。反应液用水洗涤(100mL)，水层用CH2Cl2(3×100mL)萃取，合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(9g，57％)。
步骤5.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-羟基戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(26g，63mmol)在THF(200mL)中的溶液在冰浴中冷却，随后逐滴添加10M BH3.SMe2(6.3mL)。搅拌5小时后小心加入10％NaOH溶液(32mL)，随后加入30％H2O2(32mL)。反应混合物在室温下搅拌16小时。反应混合物用二乙醚(500mL)稀释，水层用二乙醚(3×250mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-羟基戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(19.6g，72％)。
步骤6.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-(甲基磺酰氧基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0-5℃下向4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-羟基戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(32g，74.2mmol)和Et3N(22.5g，226mmol)在CH2Cl2(400mL)中的溶液中添加MsCl(10.1g，89mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌1小时。反应液用水洗涤(200mL)，水层用CH2Cl2(3×150mL)萃取。合并的有机层用10％柠檬酸(60mL)、饱和NaHCO3(60mL)和盐水(100mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-(甲基磺酰氧基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(37.7g，100％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤7.2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-(甲基磺酰氧基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(37.7g，74.2mmol)在THF(1000mL)中的溶液中分次添加四乙基氟化铵水合物(41g，185.5mmol)。反应混合物在回流下搅拌过夜。用EtOAc(1000mL)稀释混合物，用水(300mL)和盐水(500mL)洗涤。有机相用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(12.0g，54％)。
制备例M1 (S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯
步骤1.四氢-2H-吡喃-3-醇 在氮气氛和0℃下向3，4-二氢-2H-吡喃(126g，1.5mol)在干THF(1350mL)的溶液中添加B2H6在Me2S(10M，75mL，0.75mol)中的溶液。在该温度下搅拌混合物3小时，然后在25℃下再搅拌2小时。使混合物升温至40-45℃，加入NaOH水溶液(3N，390mL)和H2O2(30％，270mL)。搅拌2小时后，用饱和盐水猝灭反应。过滤混合物，用EtOAc(3×300mL)萃取滤液。有机相用Na2S2O3水溶液(3×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到四氢-2H-吡喃-3-醇(72.8g，48％)。1H NMR(CD3OD)δ3.7-3.6(m，4H)，3.6-3.5(m，1H)，3.4-3.3(m，1H)，1.9-1.7(m，2H)，1.6-1.5(m，2H)。
步骤2.二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮 向四氢-2H-吡喃-3-醇(30g，0.29mol)在干CH2Cl2(900mL)中的溶液中加入

分子筛(30g)和PCC(94.9g，0.44mol)。将混合物在室温下搅拌过夜。当反应结束时，通过celite过滤混合物，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮(23g，76％)。1H NMR(CD3OD)δ3.9(s，2H)，3.8-3.7(t，2H)，3.7-3.6(m，4H)，2.5-2.4(m，2H)，2.0-1.9(m，2H)。
步骤3.3-(二氢-2H-吡喃-3(4H)-亚基)丙-1-醇 在0℃和氮气氛下向

盐(69g，1.5当量)在干THF(1100mL)的悬浮液中加入n-BuLi(2.5M，111mL，0.413mol)。搅拌溶液1小时，随后添加二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮(11.5g，0.115mol)。在室温下继续搅拌过夜。用饱和NH4Cl水溶液猝灭混合物，然后过滤。滤液用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，该粗产物通过柱色谱法纯化，得到3-(二氢-2H-吡喃-3(4H)-亚基)丙-1-醇(11.2g，69％)。1HNMR(CD3OD)δ4.2-3.9(d，2H)，)，3.8-3.5(m，4H)，2.4-2.2(m，4H)，5.3-5.2(d，1H)，2.1-1.8(s，1H)，1.8-1.6(m，2H)。
步骤4.3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇 向化合物3-(二氢-2H-吡喃-3(4H)-亚基)丙-1-醇(11.2g，0.0789mol)在甲醇(200mL)中的溶液中添加Pd(OH)2/C(1.12g)。除去反应瓶中的气体，充入H2。当反应结束时，混合物通过celite过滤，滤饼用MeOH(2×10mL)洗涤。合并的有机层用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(10.35g，收率91％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CD3OD)δ3.9-3.8(m，1H)，3.7-3.6(m，2H)，3.5-3.4(m，1H)，3.3(m，1H)，3.1-2.9(t，1H)，2.6-2.4(m，1H)，2.3-1.8(m，3H)，1.6-1.4(m，4H)，1.3-1.0(m，2H)。
步骤5.3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙醛 向3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(10.35g，0.0719mol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液中添加Dess-Martin Periodinane(61.24g，0.1438mol)。将混合物在室温下搅拌。当反应结束时，将溶液倾入Et2O(300mL)中，加入无水K2CO3(19.84g，0.1438mol)。过滤混合物，滤液用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，该粗产物通过柱色谱法纯化，得到3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙醛(8.25g，80％)。
步骤6.1-((2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)肼-1，2-二羧酸二苄酯 在0℃下向搅拌的3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙醛(8.25g，0.058mol)和偶氮二羧酸二苄酯(94％，12.3g，0.041mol)在MeCN(250mL)中的溶液中添加(R-脯氨酸)(0.47g，0.0041mol)。在0℃下搅拌混合物15小时后，加入乙醇(100mL)和NaBH4(1.56g，0.041mol)，并将混合物在0℃下搅拌40分钟。通过缓慢添加10％柠檬酸水溶液(15ml)猝灭反应，真空浓缩整个溶液。该残余物用EtOAc(200ml)稀释，用饱和盐水(1×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，该粗产物通过柱色谱法纯化，得到1-((2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)肼-1，2-二羧酸二苄酯(14.68g，81％)。
步骤7.(2S)-2-肼基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇 向1-((2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)肼-1，2-二羧酸酯(14.68g，0.0332mol)在甲醇(250mL)中的溶液中添加Pd(OH)2/C(1.47g)。除去反应瓶中的气体，充以H2。当反应结束时，混合物通过celite过滤，滤饼用MeOH(2×20mL)洗涤。合并的有机溶剂用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到(2S)-2-肼基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(5.79g，94％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤。
步骤8.(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇 向(2S)-2-肼基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(5.79g，0.033mol)在MeOH(100mL)中的溶液中加入阮内镍。除去烧瓶中的气体，并装备氢膨胀的气球。将该烧瓶浸入盛有水的超声浴中，在室温下超声处理4小时，直到原料被完全消耗。然后使混合物通过celite过滤，滤饼用MeOH(2×30mL)洗涤。减压去除得到(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(5.4g，90％)。
步骤9.(S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 在0℃下向2-氨基-3-(四氢-吡喃-3-基)-丙-1-醇(5.4g，0.034mol)和Et3N(10.23g，0.101mol)在CH2Cl2(54mL)中的溶液中添加Boc2O(8.829g，0.041mol)。在室温下搅拌2小时后，浓缩混合物，得到(S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(9.7g)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一反应中。1H NMR(CD3OD)δ1.2-1.3(m，3H)，1.3-1.5(m，10H)，1.6-1.7(m，3H)，1.8-1.9(m，1H)，2.6-2.7(s，1H)，3.0-3.1(m，1H)，3.3-3.4(m，1H)，3.5-3.7(m，3H)，3.8-3.9(m，2H)，4.6-4.8(d，1H)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 (S)-1-羟基-3-(四氢呋喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，在步骤1中使用2，3-二氢呋喃，在步骤2中使用Dess-Martin Periodiane氧化。
1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，按照步骤3-9，在步骤3中使用四氢吡喃-4-酮。
制备例N1 (S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(S)-叔丁基-2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸酯(9g，30.1mmol)溶解在80％CH3CO2H(90ml)中。在50℃下搅拌溶液1.5小时，并减压蒸发至干。将残余物溶解在Et2O(150ml)中，用饱和NaHCO3(4×100mL)洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂，得到油状物(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.2g，79.5％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤2.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基甲磺酸酯 在0℃下向(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.2g，23.9mmol)和三乙胺(7.25g，71.8mmol)在CH2Cl2中的溶液中逐滴添加甲磺酰氯(5.5g，47.8mmol)。反应混合物在室温下搅拌，直到原料消失。用冰冷的水猝灭反应，用CH2Cl2(3×100ml)萃取。合并的有机层用水(3×50ml)洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基甲磺酸酯(9g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤3.(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 向MeNH2的乙醇溶液(100mL)中添加(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(9g，26.7mmol)。将混合物在30-40℃下搅拌过夜。当反应完成时，浓缩溶液，得到(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(10g)，其在不进行纯化的情况下用于进一步的反应。
步骤4.1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将固体1-[2-三甲基硅烷基)乙氧基羰基氧基]吡咯烷-2，5-二酮(9.5g，36.7mmol)加入剧烈搅拌的(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(10g，36.7mmol)、K2CO3(15.1g，110.1mmol)、H2O(50mL)和CH2Cl2(100mL)的双相溶液中。在室温下搅拌反应液2小时后，使反应液吸收到65mL CH2Cl2中。溶液用NaHCO3水溶液(3×50mL)和盐水(3×50mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥。有机层在真空下浓缩，得到粗产物，通过柱色谱法纯化，得到1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯(6g，46.2％)。
步骤5.(S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 向1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯(6g，14.4mmol)在Et2O(100mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸(2.8g，14.4mmol)在13.0mL无水EtOH中的溶液。将该溶液置于旋转蒸发器上，在环境温度下除去Et2O。然后将烧瓶降至60℃水浴中，蒸发剩余的溶剂2小时，得到白色固体。使固体冷却至室温并溶解在80mL EtOH∶H2O的1∶1混合物中。用5∶1的己烷∶EA(3×10mL)洗涤，用1N NaOH(pH＞10)碱化，并用Et2O(3×50mL)萃取。合并的Et2O萃取物用盐水洗涤(3×5mL)，用Na2SO4干燥，在真空下浓缩，得到(S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯3.3g(72％)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 (S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，按照步骤2-5，在步骤2中使用(S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。
(S)-2-氨基-3-(四氢呋喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，按照步骤2-5，在步骤2中使用(S)-1-羟基-3-(四氢呋喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。
2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯，按照步骤2-5，在步骤2中使用1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。
(S)-2-氨基-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，按照步骤2-5，在步骤2中使用(S)-1-羟基-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。
制备例O1 (S)-2-氨基-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-羧酸 向装备有热电偶的500mL圆底烧瓶中装以(2S，6R)-2，6-二甲基-四氢吡喃-4-酮(10.2g，0.08mol，1.0当量)、对甲苯基磺酰甲基异氰(20.2g，0.103mol，1.3当量)、tBuOH(10.0g，0.135mol，1.7当量)和DME(300mL)。混合物在冰/盐水浴中冷却，使内部温度低于0℃，以保持反应温度低于10℃的速度分次加入KOtBu(22.3g，0.199mol，2.5当量)。将混合物加热至35℃，搅拌16小时。之后将混合物冷却至环境温度，并加入大约100mL Et2O。混合物通过Celite床过滤，滤饼用额外的Et2O洗涤。蒸发得到的橙色溶液。粘性残余物吸收到Et2O中，得到的溶液通过Celite过滤并蒸发，产生10.0g粗腈。将该物质置于含有200mL 2.25M KOH的烧瓶中。将混合物加热至回流17小时。然后使混合物冷却至环境温度并转移到分液漏斗中。水层用3×50mL CH2Cl2萃取，并置于烧瓶中，冷却至0℃。通过添加浓HCl使pH降至＜2。将得到的浆液转移到分液漏斗中，用4×50mL EtOAc萃取。合并的有机部分用盐水洗涤，然后添加到含有约1g活性碳的烧瓶中，搅拌混合物1小时。之后通过Celite垫过滤，并蒸发，产生(2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-羧酸，为棕褐色固体。
步骤2.((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇 将上述酸(2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-羧酸(2.10g，13.3mmol，1.0当量)溶解在THF中，使溶液冷却至0℃。向其中添加BH3(1.0M，在THF中，20mL，20mmol，1.5当量)的溶液。混合物在0℃下搅拌1.5小时。通过逐滴添加饱和NH4Cl猝灭过量的BH3。将混合物转移到分液漏斗中，并分离层。水层用3×20mL EtOAc萃取，合并的有机萃取物用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化粗醇，用0-49％EtOAc洗脱。得到1.67g(87％收率)的((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇。
步骤3.(2S，4r，6R)-4-(碘甲基)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃 将((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇(1.67g，11.6mmol，1.0当量)、PPh3(3.64g，13.9mmol，1.2当量)和咪唑(2.36g，34.7mmol，3.0当量)溶解于67mL THF中，溶液冷却至0℃。在0.5小时内以每份大约0.5g的量分次加入碘(3.67g，14.5mmol，1.25当量)。搅拌1小时后，加入额外的1.62g的PPh3和1.83g的I2，并搅拌混合物1小时。除去溶剂，混合物通过二氧化硅垫过滤，用Et2O洗脱。蒸发滤液，通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化碘化物，用己烷中的0-7％EtOAc洗脱。得到1.69g(57％收率)的(2S，4r，6R)-4-(碘甲基)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃。
步骤4.2-(苄氧基羰基氨基)-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸(S)-甲酯 将(R)-2-异丙基-3，6-二甲氧基-2，5-二氢吡嗪(3.20g，17.4mmol，2.6当量)溶解在70mL THF中，溶液冷却至-78℃。在15分钟内添加2.5M nBuLi(10.8mL，17.4mmol，2.6当量)的溶液，得到的溶液搅拌0.5小时。加入(2S，4r，6R)-4-(碘甲基)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃(1.69g，6.56mmol，1.0当量)的溶液。混合物在-78℃下搅拌2小时，然后升温至-20℃，并在该温度下搅拌过夜。用水猝灭混合物，用盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。将得到的混合物溶解在300mL 1∶1CH3CN∶2.0M HCl中。在环境温度下搅拌2小时后，蒸发混合物，并再溶解于100mL CH3CN中。向其中添加200mL 10％K2CO3，随后添加8.5g(35mmol，5.2当量)CBzOSu，快速搅拌混合物1小时。之后蒸发溶液。将黄色残余物溶解在EtOAc中，用10％K2CO3、0.5M HCl、盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。所需的受到保护的氨基酸通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化，用0-29％EtOAc洗脱。从该操作中分离出2-(苄氧基羰基氨基)-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸(S)-甲酯(2.57g)，其中污染有大约20％的CBzNHCH2CO2Me，在下一步中使用。
步骤5.(S)-1-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸苄酯 将(S)-甲基2-(苄氧基羰基氨基)-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸酯(2.57g，7.4mmol，1.0当量)和MeOH(0.5mL)添加到THF(50mL)中，使混合物冷却至0℃。加入固体LiBH4(481mg，22mmol，3.0当量)，搅拌混合物2小时。在0℃下搅拌混合物直到LC/MS分析显示原料被消耗。之后通过添加饱和NH4Cl猝灭过量的LiBH4，将内容物转移到分液漏斗中。分离层，水层用EtOAc萃取，合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。(S)-1-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸苄酯在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。
步骤6.(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙基4-溴苯磺酸酯 将(S)-1-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸苄酯、DMAP(1.12g，9.2mmol)和NEtiPr2(2.1g，14.7mmol)溶解于40mL CH2Cl2中，混合物冷却至0℃。加入对溴苯磺酰氯(2.35g，9.2mmol)，搅拌混合物2.5小时并升温至环境温度。通过添加饱和NH4Cl猝灭混合物，将混合物转移到分液漏斗中，有机层用盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙基4-溴苯磺酸酯通过在二氧化硅上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-27％EtOAc洗脱。
步骤7-8.(S)-1-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 按照与制备例U步骤6-7类似的程序，在步骤6中使用(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙基4-溴苯磺酸酯，获得(S)-1-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯。
步骤9.(S)-2-氨基-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将(S)-1-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(540mg，1.13mmol)和10％Pd/C(200mg)在45psi H2下振摇3小时。之后LC/MS显示完全除去CBz基团。过滤该混合物并蒸发，得到388mg(S)-2-氨基-3-((2S，4r，6R)-2，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-4-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。
制备例P1 2-氨基-4-(1-甲氧基环戊基)丁基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.4-(2-(1-羟基环戊基)乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(1.02g，3.55mmol，1.0当量)溶解在50mL THF中并冷却至-10℃。添加1.0M BrMg(CH2)4MgBr溶液(7.1mL，2.0当量)，搅拌混合物2小时。之后加入第二份BrMg(CH2)4MgBr，搅拌混合物1小时。通过添加饱和NH4Cl猝灭混合物，将混合物转移到分液漏斗中，有机层用盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到粗4-(2-(1-羟基环戊基)乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯。
步骤2.4-(2-(1-甲氧基环戊基)乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-(2-(1-羟基环戊基)乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯添加到NaH的悬浮液(568mg，14.2mmol，4.0当量)中，搅拌混合物0.5小时。加入甲基碘(2.106g，14.2mmol，4.0当量)，在环境温度下搅拌混合物48小时。通过小心加水猝灭过量的NaH。蒸发混合物，然后吸收到EtOAc中。溶液用水洗涤，然后用盐水洗涤，并蒸发。通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化醚，用己烷中的0-41％EtOAc洗脱。得到1170mg(3.4mmol，95％收率，两步)所需的4-(2-(1-甲氧基环戊基)乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯。
步骤3.1-羟基-4-(1-甲氧基环戊基)丁-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将上述4-(2-(1-甲氧基环戊基)乙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(1170mg，3.5mmol，1.0当量)溶解在40mL甲醇中。加入樟脑磺酸(417mg，1.8mmol，0.5当量)，在环境温度下搅拌混合物4小时。通过添加大约1mL NEt3猝灭混合物，蒸发反应液。将残余物吸收到EtOAc中，用盐水洗涤，然后用MgSO4干燥，通过硅胶垫过滤，并蒸发。得到1.03g(3.5mmol，100％收率)所需的1-羟基-4-(1-甲氧基环戊基)丁-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。
步骤2-5.2-氨基-4-(1-甲氧基环戊基)丁基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用与制备例S步骤3-6类似的程序，在步骤3中使用1-羟基-4-(1-甲氧基环戊基)丁-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，获得2-氨基-4-(1-甲氧基环戊基)丁基(甲基)-氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯。
制备例Q1 2-氨基-3-(4-氧代环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯
步骤1.2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙酸(S)-甲酯 在0℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-羟基环己基)丙酸(S)-甲酯(96.56g，0.32mol)在CH2Cl2(500mL)中的溶液中添加咪唑(43.52g，0.64mol)，随后添加TBSCl(72g，0.48mol)。添加后，在室温下搅拌混合物过夜。用水处理反应混合物，并用CH2Cl2萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙酸(S)-甲酯(133g，收率100％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ0.08(d，6H)，0.89(d，9H)，1.45(s，9H)，1.51(m，4H)，1.58(m，1H)，1.68(t，4H)，1.85(d，1H)3.71(d，3H)，3.91(m，1H)，4.34(m，1H)，4.86(m，1H)。
步骤2.1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在室温下向2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙酸(S)-甲酯(133g，0.32mol)在1500mL甲醇中的溶液中添加NaBH4(73g，1.92mol)。在室温下搅拌4小时后，蒸发溶液以除去甲醇。剩余的溶液用水(800mL)处理，用EtOAc(500mL x 3)萃取。合并的有机层用水(300mL)洗涤，干燥，过滤，并蒸发，得到所需的1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(102g，收率82％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.08(d，6H)，0.89(d，9H)，1.30(m，4H)，1.40(t，2H)，1.45(s，9H)，1.61(m，1H)，1.58(m，1H)，1.68(t，4H)，1.85(d，1H)，3.50(m，1H)，3.65(m，1H)，3.73(m，1H)，3.91(s，1H)，4.53(s，1H)。
步骤3.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙基甲磺酸酯 在-20℃下向1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(101.6g，0.263mol)和Et3N(66.3g，0.656mol)在CH2Cl2(500mL)中的溶液中添加MsCl(66.1g，0.577mol)，在室温下搅拌1小时。用水(300mL)处理反应混合物，用CH2Cl2(3×100mL)萃取。有机层用Na2SO4干燥并蒸发，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙基甲磺酸酯(121g，99％)。
步骤4.1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙基甲磺酸酯(121g，0.26mol)溶解在甲胺醇溶液(1000mL)中，加热至50-60℃过夜。除去溶剂，通过二氧化硅柱纯化残余物，得到粗1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(57g，55％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.08(d，6H)，0.89(d，9H)，1.25(t，3H)，1.45(s，9H)，1.61(m，2H)，1.82(t，2H)，2.01(d，1H)，2.56(d，2H)，2.80(d，2H)，2.95(t，2H)，3.49(m，1H)，3.61(m，1H)，3.90(s，1H)，5.35(d，1H)，7.15(m，1H)。
步骤5.1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 在-20℃下向1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(57g，0.142mol)和Et3N(28.8g，0.285mol)在CH2Cl2(600mL)中的溶液中添加CbzCl(26.6g，0.156mol)，在室温下搅拌1小时。反应混合物用水(200mL)处理，用CH2Cl2(3×100mL)萃取。有机层用Na2SO4干燥并蒸发。在二氧化硅柱上分离残余物，得到纯的异构体1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(5.5g)和含有混合异构体的部分(33g，总收率51％)。混合异构体1HNMR(CDCl3，400MHz)δ0.02(d，6H)，0.88(s，9H)，1.16-1.29(m，5H)，1.41(d，9H)，1.60(m，5H)，1.83(m，1H)，2.95(t，3H)，3.00-3.40(m，1H)，3.49(m，1H)，3.89(m，2H)，5.11(s，2H)，7.34(m，5H)。
步骤6.2-氨基-3-(4-羟基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯 将1-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.2g，2.25mmol)溶解在2MHCl MeOH(10mL)中，在30℃下搅拌1小时。除去溶剂，得到粗2-氨基-3-(4-羟基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯，其直接用于下一步骤。
步骤7.1-(4-羟基环己基)-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将2-氨基-3-(4-羟基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯(1.25g，3.9mmol)溶解在10mL CH2Cl2中，添加Et3N，混合物冷却至0℃，并逐滴添加在5mL CH2Cl2中的Boc2O。反应混合物在室温下搅拌2小时。向混合物中加入50mL CH2Cl2，用10％柠檬酸溶液(20mL)洗涤，然后用饱和NaHCO3、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。过滤后，除去溶剂，得到1-(4-羟基环己基)-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.1g，2.62mmol)。
步骤8.1-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)-3-(4-氧代环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将DMSO(0.82g，10.47mmol)在10mL干CH2Cl2中的溶液在N2保护下冷却至-78℃，随后缓慢逐滴添加草酰氯(0.664g，5.23mmol)。添加后，在-65℃下搅拌混合物2小时，然后逐滴添加1-(4-羟基环己基)-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.1g，2.62mmol)的溶液。添加后，在-30℃下搅拌混合物3小时。用Et3N(4mL)猝灭反应并搅拌10分钟，然后加入饱和NaHCO3(10mL)。水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取三次。CH2Cl2层用10％柠檬酸溶液(20mL)洗涤，随后用饱和NaHCO3、盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥。过滤后，除去溶剂，得到粗产物(1g)，通过制备TLC纯化，得到1-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)-3-(4-氧代环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(500mg，1.2mmol)。
步骤9.2-氨基-3-(4-氧代环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯 将1-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)-3-(4-氧代环己基)丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(300mg，0.72mmol)溶解在5mL 20％TFA/CH2Cl2中并在室温下搅拌1小时。除去溶剂，得到粗(S)-苄基2-氨基-3-(4-氧代环己基)丙基(甲基)氨基甲酸酯，在不进一步纯化的情况下将其直接用于下一步骤。
以下化合物与以上所述类似地制备 2-氨基-3-(4-羟基环己基)丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯，步骤1-步骤6。
制备例R1 1-氨基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸 向(S)-2-氨基-5-甲氧基-5-氧代戊酸(100g，621mmol)和NaHCO3(133.5g，1.55mol)在水(1.6L)中的溶液中添加Boc2O(162.5g，745mmol)在1，4-二

烷(1.6L)中的溶液。将混合物在室温下搅拌32小时，然后过滤，用Et2O(500mL)洗涤。水层用1N HCl水溶液酸化至pH＝2，并用二氯甲烷和丙-2-醇(1∶3，1Lx2)萃取。萃取物用盐水洗涤(500mL)，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到油状物(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸(112g，收率84％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.69(s，3H)，4.33(m，1H)，2.475(m，2H)，2.23(m，1H)，2.05(m，1H)，1.445(s，9H)。
步骤2.4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲酯 在-78℃下向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸(26.1g，0.1mol)在THF(500mL)中的溶液中逐滴添加BH3·Me2S(80mL，0.8mmol)，然后在室温下搅拌3小时。小心添加甲醇终止反应。蒸发并且三次蒸馏甲醇后，将残余物溶解在EtOAc中，用1MNaHCO3和盐水洗涤。获得油状物4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲酯(12g，收率49％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。
步骤3.4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(AS)-叔丁酯 将4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲基酯(12g，48.6mmol)和异丙烯甲醚(44.4g，427.3mmol)溶解在丙酮(200mL)中，在室温下添加BF3·Et2O(0.41mL，2.92mmol)并搅拌1小时。通过添加Et3N(5.8mL)终止反应。反应溶用100mL饱和NaHCO3洗涤并蒸发，获得油状物4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(10g，收率72％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。步骤4.4-(3-甲氧基-2，2-二甲基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在30分钟内向-78℃的LiHMDS(139.3mmol)在THF(100mL)中的溶液中添加4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(10g，34.82mmol)在THF(50mL)中的溶液。在-78℃下搅拌混合物1小时，加入甲基碘(24.7g，174.1mmol)。在-78℃下继续搅拌1小时，然后在室温下搅拌反应液过夜。通过添加饱和NH4Cl终止反应。通过用EtOAc萃取获得4-(3-甲氧基-2，2-二甲基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(1∶50→1∶10)洗脱，得到黄色油(7g，63％)。
步骤5.4-(3-羟基-2，2-二甲基丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-(3-甲氧基-2，2-二甲基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(7g，22.21mol)在THF中的溶液中添加LiAlH4(1.27g，33.31mol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。加水并用EtOAc萃取，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物4-(3-羟基-2，2-二甲基丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(6.6g，100％)，其为油，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.69(m，4H)，3.32(m，1H)，1.82(m，1H)，1.54(s，3H)，1.48(s，9H)，1.42(s，3H)，1.22(m，1H)，0.91(m，3H)，0.72(s，2H)。
步骤6.4-(3-甲氧基-2，2-二甲基丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向NaH(2.76g，69mmol)在DMF(100mL)中的悬浮液中逐滴添加4-(3-羟基-2，2-二甲基丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(6.6g，23mmol)在DMF(150mL)中的溶液。搅拌反应混合物2小时后，逐滴添加MeI(6.53g，46mmol)。用NH4Cl(100mL)猝灭混合物，用EtOAc(100mL x 2)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。获得油状物4-(3-甲氧基-2，2-二甲基丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(6.4g，93％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。
步骤7.1-羟基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯将4-(3-甲氧基-2，2-二甲基丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(6.4g，21.3mmol)溶解在70％CH3COOH中。将溶液加热至50-60℃并搅拌2小时。蒸发反应溶液，得到油状物1-羟基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(7.8g，100％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.69(m，3H)，3.32(s，3H)，3.01(m，2H)，2.11(s，7H)，1.48(m，10H)，1.23(m，22H)，0.91(m，18H)。
步骤8.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-4，4-二甲基戊基甲磺酸酯 将1-羟基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(7.8g，30mmol)在二氯甲烷(150mL)和Et3N(10.4mL，75mmol)中的溶液冷却至-20℃，通过快速逐滴添加加入MsCl(6.9g，60mmol)，并保持内部温度为-20℃。在室温下搅拌反应混合物1小时。用水(100mL)猝灭反应，用CH2Cl2(3×100mL)萃取，用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到油状物(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-4，4-二甲基戊基甲磺酸酯(10.1g，100％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤9-10.1-氨基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 按照与制备例H1步骤2-3类似的程序，在步骤2中使用(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-4，4-二甲基戊基甲磺酸酯，获得1-氨基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.69(m，1H)，3.48(s，1H)，3.32(m，3H)，3.11(m，2H)，2.61(m，2H)，1.62(s，3H)，1.48(s，9H)，1.42(m，2H)，0.91(d，6H)。
制备例S1 2-氨基-5-甲氧基戊基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 2-氨基-5-甲氧基戊基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯 利用与制备例R1步骤5-7和制备例S步骤3-6类似的程序获得，制备例R1步骤5中开始于4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯。
制备例T1 1-氨基-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(R)-叔丁酯
步骤1.1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)氮丙啶-1-羧酸(S)-叔丁酯(5.0g，17.4mmol)、苯酚(4.92g，52.3mmol)、K2CO3(24g，174mmol)和150mL乙腈混合并加热至回流48小时。过滤混合物，并真空浓缩滤液。将残余物溶解在100mL EA中，用水(50mL×2)、盐水(50mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。真空浓缩溶液，得到粗产物，通过急骤柱纯化，得到1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯(2.0g，5.2mmol，收率30％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.0(s，6H)，0.87(s，9H)，1.45(s，9H)，3.71(dd，1H)，3.85(dd，1H)，3.98(d，2H)，4.05(s，1H)，6.93(m，3H)，7.28(m，2H)。MS ESI+vem/z 382(M+1)。
步骤2-3.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-苯氧基丙基甲磺酸酯 按照与制备例R步骤2-3类似的程序，在步骤2中使用1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(S)-叔丁酯，获得(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-苯氧基丙基甲磺酸酯。MS ESI+ve m/z 345(M+1)。
步骤4-5.1-氨基-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(R)-叔丁酯 按照与制备例H1步骤2-3类似的程序，在步骤2中使用(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-苯氧基丙基甲磺酸酯，获得1-氨基-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(R)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 267(M+1)。
制备例U1
步骤1.(1R*，2R*)-2-溴环己醇 向环己烯(10g，0.122mol)在THF(100mL)和H2O(100mL)中的溶液中添加NBS(31g，0.134mol)，搅拌反应混合物2-3小时。添加20％KHSO4水溶液(20mL)，搅拌溶液20分钟。添加EtOAc并分离有机层，用Na2S2O3水溶液洗涤，直到溶液由红色变为无色。将有机相干燥，过滤，蒸馏除去溶剂。残余物(1R*，2R*)-2-溴环己醇(22g，85％)在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25-1.40(m，3H)，1.60-1.85(m，3H)，2.08-2.16(m，1H)，2.28-2.48(m，1H)，3.53-3.63(m，1H)，3.82-3.94(m，1H)。
步骤2.((1R*，2R*)-2-溴环己基氧基)(叔丁基)二甲基硅烷 向(1R*，2R*)-2-溴环己醇(27g，0.151mol)和咪唑(24.9g，0.366mol)在DMF(500mL)中的溶液中添加TBSCl(24.9g，0.166mol)，在室温下搅拌反应混合物过夜。加水，用EtOAc萃取三次。将合并的有机层干燥，过滤，并浓缩，得到((1R*，2R*)-2-溴环己基氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(32g，72％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.05-1.05(d，6H)，0.90(s，9H)，1.20-1.40(m，3H)，1.60-1.85(m，3H)，1.98-2.10(m，1H)，2.25-2.40(m，1H)，3.63-3.73(m，1H)，3.85-3.97(m，1H)。
步骤3.2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙酸甲酯 将((1R*，2R*)-2-溴环己基氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(17.8g，0.061mol)、2-苄氧基羰基氨基-丙烯酸甲酯(8g，0.037mol)、AIBN(1.22g，0.019mol)的苯溶液加热至回流。5分钟后，添加n-Bu3SnH(19.8mL，0.074mol)。然后将得到的混合物在回流下搅拌14小时。减压除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，得到2-(苄氧基羰基氨基)-3-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙酸甲酯(6.5g，24％)。
步骤4-7.1-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-甲基-(N-叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯 按照与制备例W步骤4-7类似的程序，在步骤4中使用2-(苄氧基羰基氨基)-3-(反式-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙酸甲酯，制备1-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-甲基-(N-叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯。MS ESI+ve m/z535(M+1)。
步骤8.2-氨基-3-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 在N2气流下向1-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)-3-(N-甲基-(N-叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸苄酯(420mg)在MeOH(8mL)中的溶液中添加Pd(OH)2(1g)。溶液在0℃下氢化1小时。过滤Pd(OH)2，浓缩滤液，得到产物2-氨基-3-((1S*，2R*)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，95％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ0.05(s，6H)，0.88(d，9H)，1.10-1.50(m，4H)，1.44(s，9H)，1.50-1.78(m，4H)，1.80-1.98(m，1H)，2.80(s，3H)，3.10-3.40(m，2H)，3.55-3.90(m，3H)，5.10(s，2H)，7.30-7.40(m，5H)。MS ESI+ve m/z 401(M+1)。
制备例V1 (2R，3S)-2-氨基-3-环戊基-3-(三甲基硅烷基氧基)丙基(甲基)-氨基甲酸叔丁酯 按照与上述制备例I步骤1-8类似的程序，在步骤4中使用环戊甲醛，获得(2R，3S)-2-氨基-3-环戊基-3-(三甲基硅烷基氧基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。
制备例D2 4-(((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯
步骤1.4-((R)-5-(环己基氧基)-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-(环己基氧基)-5-氧代-2-((R)-2-氧代-4-苯基

唑烷-3-羰基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(8.12g，13.9mmol，1.0当量)溶解在THF∶MeOH(150mL)的4∶1混合物中，将溶液冷却至0℃。在20分钟内以每份大约200mg的量分次添加固体NaBH4(1.05g，27.8mmol，2.0当量)。在0℃下搅拌溶液4小时。在此期间加入另外两份500mg的NaBH4。之后LC/MS分析显示原料被消耗。通过添加10％柠檬酸猝灭过量的氢化物试剂。用大约100mL EtOAc稀释混合物，并分离有机层。水层用额外的EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。醇通过二氧化硅(120g)上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-41％EtOAc洗脱。得到5.2g(90％收率)4-((R)-5-(环己基氧基)-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为澄清浆液。MS ESI+ve m/z 436(M+Na)。
步骤2.4-((R)-5-(环己基氧基)-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-(环己基氧基)-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(4.97g，12.0mmol，1.0当量)、DMAP(1.47mg，12.0mmol，1.0当量)和甲苯磺酰氯(9.2g，48.2mmol，4.0当量)溶解于吡啶(100mL)中，搅拌溶液18小时。在真空中除去吡啶，将残余物吸收到EtOAc/0.5M HCl中。分离层，有机层用10％K2CO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。甲苯磺酸酯通过二氧化硅(12g)上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。得到6.66g(98％收率)4-((R)-5-(环己基氧基)-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为白色固体。MS ESI+vem/z 590(M+Na)。
步骤3.4-(((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-(环己基氧基)-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(309mg，0.545mmol，1.0当量)溶解在17mL THF中，使溶液冷却至0℃。通过注射器加入甲基溴化镁(3.0M，在THF中，1.64mL，3.0当量)。LC/MS分析显示大约15％转化为单-甲苯磺酸酯。加入额外0.55mL MeMgBr溶液，使混合物升温至环境温度并搅拌过夜。LC/MS分析显示完全转化为单-甲苯磺酸酯。将混合物加热至回流24小时。此时之后，观察到完全转化为环化产物。使混合物冷却至环境温度，并用水猝灭。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。吡喃衍生物通过二氧化硅(12g)上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-41％EtOAc洗脱。得到138g(78％收率)4-(((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为澄清浆液。MS ESI+ve m/z 350(M+Na)。
制备例E2 4-(((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯
步骤1.4-((R)-4-(1-羟基环丙基)-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-乙氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(1.82g，3.55mmol)和Ti(Oi-Pr)4溶解在THF(30mL)中，在环境温度下搅拌。在6小时内通过注射泵加入EtMgBr(3.0M，5.91mL，17.8mmol，5.0当量)的溶液，得到的混合物搅拌过夜。将混合物用50％罗谢尔盐溶液处理，用EtOAc稀释。分离层，水层用额外的EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。得到的粗4-((R)-4-(1-羟基环丙基)-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。
步骤2.4-(((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-4-(1-羟基环丙基)-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)丁基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯溶解在30mL THF中，添加MeMgBr(7.0mL 3.0M溶液，2.0当量)，将混合物加热至回流56小时。冷却至环境温度后，通过加水猝灭混合物，并将混合物转移到分液漏斗中。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。吡喃衍生物通过二氧化硅(40g)上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。得到1.05g(91％收率)4-(((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 348(M+Na)。
制备例F2 (S)-2-氨基-3-((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将4-(((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(3.0g，9.17mmol)和樟脑磺酸(2.2g，9.17mmol，1.0当量)溶解于200mL MeOH中，在环境温度下反应3小时。用饱和NaHCO3溶液猝灭混合物，在真空中除去甲醇，用EtOAc稀释混合物。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。得到1.70g(65％)(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 310(M+Na)。
步骤2.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)丙基4-甲苯磺酸酯 将(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-羟基丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.70g，5.92mmol)和甲苯磺酰氯(4.5g，23.7mmol，4.0当量)溶解于吡啶(30mL)中，在室温下搅拌混合物17小时。在真空中除去吡啶，残余物在EtOAc和1.0M HCl之间分配。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)丙基4-甲苯磺酸酯通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。蒸发部分，直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 464(M+Na)。
步骤3.(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)丙基4-甲苯磺酸酯溶解在100mL 33％NH2Me的乙醇溶液中。将混合物加热至50℃3小时。此时之后LC/MS分析显示生成所需的胺。蒸发溶液，将残余物吸收到EtOAc中，用10％K2CO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯在不进一步纯化的情况下直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 301(M+1)。
步骤4.1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯溶解在25mL乙腈和10％K2CO3(25mL)中，随后添加Teoc-OSu(1.54g，5.92mmol)。将混合物在环境温度下搅拌1小时。在真空中除去乙腈，用EtOAc稀释混合物。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。(S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯通过二氧化硅上的急骤色谱法纯化，用己烷中的0-41％EtOAc洗脱。蒸发用茚三酮染色的部分，得到1.5g(60％收率，三步)1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯，为澄清浆液。MSESI+ve m/z 467(M+Na)。
步骤5.(S)-2-氨基-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]oct-6-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]oct-6-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯(250mg，0.565mmol)和对甲苯磺酸水合物(132mg，0.694mmol，1.22当量)在甲醇中加热至回流7小时。然后冷却并蒸发溶液。将残余物吸收到EtOAc/10％K2CO3中。分离层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。得到的(S)-2-氨基-3-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯在不进一步纯化的情况下直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 343(M+1)。
下列化合物利用与以上所述类似的程序制备 1)(S)-2-氨基-3-((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，在步骤1中使用4-(((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯。
实施例1 (3R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺(I-58A)
步骤1.(2S)-2-((3R)-3-((3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 将2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(34.7mg，0.129mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶液在冰浴中冷却，添加CDI(25mg，1.2mmol)和DIEA(83.2mg，0.11mL，0.645mmol)。将混合物在室温下搅拌0.5小时，添加2-((3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)-N-乙基乙酰胺(40mg，0.129mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗(2S)-2-((3R)-3-((3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，收率75.6％)。MS(E/Z)607(M+H+)。
步骤2.(R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺 在搅拌下向TFA在CH2Cl2(20％，v/v，5mL)中的溶液中添加(2S)-2-((3R)-3-((3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(60.3mg，0.099mmol)。反应后进行tlc(洗脱溶剂为5∶1石油醚/EtOAc)。当反应完成时，依次用饱和NaHCO3水溶液和水洗涤混合物，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到产物，通过制备HPLC纯化，得到3R-[R-(3-氯-苯基)-乙基氨甲酰甲氧基-甲基]-哌啶-1-羧酸(1S-环己基甲基-2-甲基氨基-乙基)-酰胺(14mg)。1H NMR(400MHz，MeOD)1.30-1.65(m，14H)，1.77-1.89(m，7H)，2.68(s，3H)，2.89-2.97(m，2H)，3.03-3.12(m，2H)，3.23-3.34(m，4H)，3.69-3.84(m，3H)，4.08-4.23(m，3H)，7.22-7.26(m，1H)，7.33-7.41(m，3H)。MS(E/Z)507(M+H+)。
下列化合物利用与以上所述类似的程序制备 下列化合物利用与实施例1所述类似的程序制备，不同之处是在步骤2中使用Et4N+F-使Teoc保护基脱保护 (R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)-N-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺I*-30a (R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)-N-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺I*-31a (R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-(乙基氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)-N-((2S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺I*-61a 4)2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-154a 5)2-((R)-(3，5-二氟苯基)((R)-1-((S)-1-((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-155a 6)2-((R)-((R)-1-((S)-1-((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲甲酸酯I*156a 7)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-((R)-6，6-二甲基-四氢-2H-吡喃-3-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-157a 8)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-158a 9)2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-159a 10)2-((R)-(3，5-二氟苯基)((R)-1-((S)-1-((R)-4-氧杂螺[2.5]辛-6-基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲甲酸酯I*-160a 下列化合物利用与实施例1所述类似的程序制备，不同之处是在步骤2中使用4M HCl/二

烷使Boc保护基脱保护 1)(R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-(2-氰基-3-甲基胍基)乙氧基)甲基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺I*-126(a) 实施例2 (S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯
步骤1.(S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯 向(2R，3S)-2-氨基-3-环己基-3-(三甲基硅烷基氧基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(79.8mg，0.223mmol)在无水CH2Cl2(2mL)中的溶液中添加DIEA(190μL，1.12mmol)和CDI(36.2mg，0.223mmol)。将混合物在0℃下搅拌45分钟，一次性添加(S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-羟基-4-((R)-哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯(80.0mg，0.223mmol)，并使混合物升温至室温并搅拌过夜。用水猝灭反应，用CH2Cl2(3×20mL)萃取。用盐水洗涤并浓缩有机萃取物，得到粗产物，其通过制备HPLC纯化，得到(S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(70mg，46.8％)。MS(E/Z)671(M+H+)。
步骤2.(S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯 将(S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸酯(70mg，0.104mmol)冷却至0℃，并且添加20％的TFA在CH2Cl2(5mL)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌大约20分钟，用饱和NaHCO3水溶液猝灭。分离有机层，用CH2Cl2(3x)萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，然后真空浓缩，得到粗产物，其通过制备HPLC纯化，得到(S)-4-(2-氯-3-氟苯基)-4-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(50mg，收率84％)。1H NMR(400MHz，MeOD)0.90-1.87(m，18H)，1.87-2.08(m，2H)，2.10-2.22(s，1H)，2.60-2.72(t，1H)，2.72(s，3H)，2.75-2.85(t，1H)，2.90-3.10(m，3H)，3.40-3.47(m，1H)，3.60(s，3H)，3.90-4.05(d，1H)，4.05-4.15(m，1H)，4.25-4.40(d，1H)，7.10-7.20(s，1H)，7.32-7.41(t，1H)，7.50-7.60(t，1H)。MS(E/Z)571.35(M+H+)。
下列化合物利用与以上所述类似的程序制备 下列化合物利用与以上所述类似的程序制备，不同之处在于将步骤2中用来除去Boc基团的酸性条件替换为在存在下进行氢化来除去Cbz保护基 下列化合物利用与以上实施例2所述类似的程序制备 下列化合物利用与以上实施例2所述类似的程序制备，不同之处是在步骤2中利用Et4N+F-将Teoc保护基脱保护 1)(S)-4-(3-氟苯基)-4-羟基-4-((3R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯I*-54a 2)(S)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟基-4-((3R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯I*-139a 3)(S)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟基-4-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯I*-142a 实施例3 2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 向在冰浴中冷却的(S)-2-氨基-3-环己基丙基甲基氨基甲酸叔丁酯(65mg，0.24mmol)和CDI(40mg，0.24mmol)在无水CH2Cl2(5mL)中的溶液中添加DIEA(104mg，0.81mmol)。添加后，将混合物在0℃下搅拌1小时，逐滴添加2-((R)-(3-氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(50mg，0.16mmol)在无水CH2Cl2(5mL)中的溶液。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。反应完成后，在真空中除去溶剂。通过制备tlc纯化产物，得到所需的2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的异构体(50mg，52％收率)。MS(E/Z)607(M+H+)。
步骤2.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(20mg，0.03mmol)和20％的TFA在CH2Cl2中的溶液(2mL)的混合物在室温下搅拌1小时，直到反应完成。蒸发除去溶剂，通过制备HPLC纯化粗产物，得到2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(7.5mg，44％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)0.90(m，1H)，1.04(m，1H)，1.11-1.45(m，8H)，1.51(m，1H)，1.71(m，7H)，2.71(s，3H)，2.91(m，2H)，3.06(m，1H)，3.23(m，3H)，3.61(s，3H)，3.81(m，1H)，4.07(m，2H)，7.03(m，2H)，7.09(m，1H)，7.36(m，1H)。MS(E/Z)507(M+H+)。
下列化合物利用与以上所述类似的程序制备 下列化合物利用与以上实施例3所述类似的程序制备 下列化合物利用与以上实施例3所述类似的程序制备，不同之处是在步骤2中利用Et4N+F-将Teoc保护基脱保护 下列化合物利用与以上实施例3所述类似的程序制备，不同之处是在步骤2中使用H2和Pd/C或Pd(OH)2将Cbz保护基脱保护 1)2-((R)-((R)-1-((S)-1-环戊基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-5a 2)2-((R)-((R)-1-((S)-1-环戊基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(5-氟-2-甲基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-24a 3)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环戊基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-29a 4)2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(4-羟基环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-51a 5)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(4-氧代环己基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-80a 6)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(4-羟基环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯I*-102a 下列化合物利用与以上实施例3所述类似的程序制备，不同之处是在步骤2中使用20％TFA/CH2Cl2(V/V)将Teoc保护基脱保护 实施例4 (S)-4-((R)-1-((S)-2-氨基-3-环己基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(I-9A)
步骤1.(S)-4-((R)-1-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯 向搅拌的(S)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟基-4-((R)-哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯盐酸盐(31.6mg，0.08mmol)和(S)-4-硝基苯基2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基氨基甲酸酯(45mg，0.105mmol)在MeCN(1mL)和CH2Cl2(1mL)中的悬浮液中添加DIEA(80μL，0.45mmol)。在室温下搅拌混合物3天，用醚(90mL)稀释，用5％HCl水溶液(20mL)、1M NaOH水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，并用MgSO4干燥。除去溶剂留下白色固体(61mg)，将其加到2-g二氧化硅SPE柱上。依次用0、25、50、75、100％己烷中的EtOAc(各15mL)洗脱柱，得到五个级分。合并级分4和5并浓缩，得到油状物(S)-4-((R)-1-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(35mg)。
步骤2.(S)-4-((R)-1-((S)-2-氨基-3-环己基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯 将(S)-4-((R)-1-((S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(35mg，0.055mmol)溶解在MeCN(5mL)中，添加5％HCl水溶液(5mL)。在室温下搅拌混合物两天。添加固体K2CO3，搅拌1小时后在旋转蒸发器上回收MeCN。含水残余物用CH2Cl2(2×50mL)萃取，用盐水洗涤合并的有机萃取物，用Na2SO4干燥。除去溶剂留下白色固体，将其通过制备HPLC纯化，得到作为TFA盐的(S)-4-((R)-1-((S)-2-氨基-3-环己基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(28mg)。
以下化合物利用与以上所述类似的程序制备 以下化合物利用与以上实施例4所述类似的程序制备，区别是在步骤2中使用20％TFA/CH2Cl2(V/V)将Boc保护基脱保护 以下化合物利用与以上实施例4所述类似的程序制备，区别是在步骤2中使用20％TFA/CH2Cl2(V/V)将Teoc保护基脱保护 以下化合物利用与以上实施例4所述类似的程序制备 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-((1r，3S，4R)-3，4-二氟环戊基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 实施例5 (S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(I-23a)
步骤1.(S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯 向搅拌的(S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-羟基-4-((R)-哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯(25mg，0.066mmol)和(S)-3-环己基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙基氨基甲酸酯)甲基氨基)丙-2-基)氨基甲酸4-硝基苯酯(42mg，0.088mmol)在MeCN(1mL)和CH2Cl2(1mL)中的溶液中添加DIEA(0.06mL，0.34mmol)。在室温下搅拌混合物3天，用醚(90mL)稀释，用5％HCl水溶液(20mL)、1M NaOH水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂留下白色固体(61mg)，将其加至2-g二氧化硅SPE柱上。依次用0、25、50、75、100％己烷中的EtOAc(各15mL)洗脱柱，得到五个级分。合并级分3、4和5并浓缩，得到油状物(S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(48mg，定量)。
步骤2.(S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯 向搅拌的(S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯(48mg，0.066mmol)在MeCN(2mL)中的溶液中添加Et4N+F-(200mg，1.3mmol)。将得到的溶液在室温下搅拌2天，直接加到制备HPLC上，得到(S)-4-(3-氯-2，4-二氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯的TFA盐(34mg，74％)，其为浆液。
以下化合物利用与以上所述类似的程序制备 以下化合物利用与以上所述类似的程序制备，区别是将步骤2中使用Et4N+F-除去Teoc保护基替换为在PdCl2存在下氢化以除去Cbz保护基 以下化合物利用与实施例5所述类似的程序制备 以下化合物利用与实施例5所述类似的程序制备，区别是在步骤2中使用20％TFA/CH2Cl2(V/V)将Boc保护基脱保护 I*-120a-2-((R)-((R)-1-((S)-1-(4，4-二氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 以下化合物利用与实施例5所述类似的程序制备，区别是在步骤2中使用H2和PdCl2将Cbz保护基脱保护 I*-11a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((3R*，4S*)-4-异丁基吡咯烷-3-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 I*-44a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((3S*，4R*)-4-(环丁基甲基)哌啶-3-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 以下化合物利用与实施例5所述类似的程序制备，区别是在步骤2中使用20％TFA/CH2Cl2(V/V)将Teoc保护基脱保护 实施例6 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯(I-53A)
步骤1.2-(三甲基硅烷基)乙基(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙醇的盐酸盐、1-环己基-3-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基甲基氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-4-硝基苯酯(0.3724g，0.78mmol，1.3当量)和DIEA(2mL，12mmol，20当量)在CH2Cl2中的混合物在室温下搅拌17小时。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，70％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，8min，然后90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，7min，流速25mL/min)，得到0.1880g(51％，三步)(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。LC-MS(3min)tR＝2.52min，m/z 612，610(MH+)。
步骤2.(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-((4-硝基苯氧基)羰基氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.1880g，0.3mmol，1.0当量)、DMAP(0.150g，1.2mmol，4当量)、DIEA(1mL，6mmol，20当量)和4-硝基苯基氯甲酸酯(0.1346g，0.67mmol，2.2当量)在CH2Cl2(6mL)中的混合物在室温下搅拌24小时。反应混合物不进行进一步纯化而直接用于下一步骤中。LC-MS(3min)tR＝2.68min，m/z 777，775(MH+)。
步骤3.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯 将如上所述获得的(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-((4-硝基苯氧基)羰基氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯在CH2Cl2中的溶液(1mL，约0.044mmol)和2.0M NH3的EtOH溶液(4mL)在室温下搅拌19小时。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物(

Luna 5μC 18(2)100A，250×21.20mm，5微米，70％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，8min，然后90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，6min，流速25mL/min)，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯(0.0250g，87％)。LC-MS(3min)tR＝2.36min，m/z 655，653(MH+)。
步骤4.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯(0.0250g，0.038mmol)和三氟乙酸(1mL)在CH2Cl2(5mL)中的混合物在室温下搅拌3小时。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，10％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，13min，流速25mL/min)，得到作为TFA盐的2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯(0.0205g，86％)。LC-MS(3min)tR＝1.49min，m/z 511，509(MH+)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.28-7.12(m，4H)，4.20(d，J＝13.2Hz，1H)，4.11-3.99(m，3H)，3.95(d，J＝8.8Hz，1H)，3.87(d，J＝13.2Hz，1H)，3.40-3.28(m，2H)，2.96(dd，J＝12.6，3.2Hz，1H)，2.84(dd，J＝12.6，10.2Hz，1H)，2.73-2.63(m，2H)，2.61(s，3H)，1.71-0.75(m，18H)。
以下化合物利用与如上所述类似的程序制备 以下化合物利用与如上所述类似的程序制备，区别在于在步骤1中使用(R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲醇 实施例7 (S)-4-乙酰氨基-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯(I-24A)
将(S)-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯的富马酸盐(0.0658g)、乙腈(8mL)和浓H2SO4(20滴)的混合物在室温下搅拌4天。用DIEA中和混合物并在真空中除去溶剂。通过反相HPLC(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，10％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，13min，流速25mL/min)纯化粗产物，得到(S)-4-乙酰氨基-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯的TFA盐(0.0062g)和(R)-4-乙酰氨基-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯的TFA盐(0.0192g)。
(S)-4-乙酰氨基-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯的TFA盐的数据为LC-MS(3min)tR＝1.40min，m/z 578，580(MH+)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.88(s，1H)，7.26-7.14(m，4H)，4.11(d，J＝12.0Hz，1H)，4.04-3.97(m，1H)，3.78(d，J＝12.3Hz，1H)，3.52(s，3H)，3.03-2.96(m，3H)，2.89(dd，J＝12.6，10.2Hz，1H)，2.62(s，3H)，1.98(s，3H)，2.39-0.73(m，24H)。
(R)-4-乙酰氨基-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯的TFA盐的数据为LC-MS(3min)tR＝1.36min，m/z 578，580(MH+)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.79(s，1H)，7.24-7.12(m，4H)，4.05-3.99(m，2H)，3.83(d，J＝12.6Hz，1H)，3.51(s，3H)，3.07-2.94(m，3H)，2.83(dd，J＝12.6，10.0Hz，1H)，2.60(s，3H)，1.93(s，3H)，2.37-0.74(m，24H)。
以下化合物利用与如上所述类似的程序制备 实施例8 I*-19a-2-((R)-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 利用与实施例2步骤1类似的程序，在步骤1中使用2-((R)-苯基((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，获得2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。
步骤2.2-((R)-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(5mg，.008mmol)在EtOH(2mL)中的溶液与10％Pd/C(5mg)一起在H2下搅拌过夜。通过Celite过滤该混合物。在真空中除去溶剂后，将残余物直接用于下一步骤中。
步骤3.2-((R)-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯在20％(V/V)CH2Cl2(1mL)中的溶液搅拌1小时。减压蒸发该溶液，通过制备HPLC纯化残余物，得到2-((R)-((R)-1-((1S，2R)-1-环己基-1-羟基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(1.01mg)。
实施例9 I*-38a-2-((R)-((R)-1-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((R)-2-(N-叔丁氧基羰基)氨基-3-苯氧基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在0℃下将DIEA(66mg，0.52mmol)添加到1-氨基-3-苯氧基丙-2-基氨基甲酸(R)-叔丁酯(68.7mg，0.26mmol)在2mL无水二氯甲烷的溶液中。搅拌混合物1.5小时后，添加2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(84mg，0.26mol)在2mL无水二氯甲烷中的溶液。搅拌反应混合物过夜。真空浓缩反应混合物以除去溶剂，通过制备TLC纯化残余物，得到粗2-((R)-((R)-1-((R)-2-(N-叔丁氧基羰基)氨基-3-苯氧基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(152mg)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤2.2-((R)-((R)-1-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在0℃下将20％TFA在CH2Cl2中的溶液(2mL)添加到2-((R)-((R)-1-((R)-2-(N-叔丁氧基羰基)氨基-3-苯氧基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(150mg，0.24mmol)中。搅拌反应液1小时并真空浓缩。通过制备HPLC纯化残余物，得到2-((R)-((R)-1-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(70mg，56％)。
除了使用氢气以外，利用与如上所述类似的程序制备以下化合物。
I*-35A-2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 I*-14a-2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-5-甲氧基-4，4-二甲基戊基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 实施例10 I*-8a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-5，5-二甲基-1-(甲基氨基)己-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.5，5-二甲基-1-(N-甲基-N-(三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)己-2-基氨基甲酸(S)-丙-1-烯-2-基酯 向2-氨基-5，5-二甲基己基(甲基)氨基甲酸(S)-2-(三甲基硅烷基)乙酯(34mg，0.113mmol，1.0当量)和K2CO3(50mg，0.362mmol，3.0当量)中添加CH2Cl2并将溶液冷却至0℃。加入氯甲酸异丙烯酯(41mg，0.339mmol，3.0当量)，使混合物升温至环境温度并搅拌3小时。过滤溶液，蒸发，并在真空中除去残余的溶剂，得到5，5-二甲基-1-(N-甲基-N-(三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)己-2-基氨基甲酸(S)-丙-1-烯-2-基酯，其在不进一步纯化的情况下使用。
步骤2.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-5，5-二甲基-1-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)己-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将得到的5，5-二甲基-1-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)己-2-基氨基甲酸(S)-丙-1-烯-2-基酯溶解在THF(5mL)中，添加2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(40mg，0.1227mmol，1.1当量)，将混合物加热至50℃过夜。反应完成后用0.5M HCl、盐水洗涤溶液，然后用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发，得到粗2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-5，5-二甲基-1-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)己-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，其直接用于下一步骤。
步骤3.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-5，5-二甲基-1-(甲基氨基)己-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-5，5-二甲基-1-(N-甲基-N-(2-三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)己-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯溶解在CH3CN中，并用75mg(0.504mmol，4.5当量)TEAF处理，将混合物加热至55℃3小时。蒸发溶液并通过制备HPLC纯化，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-5，5-二甲基-1-(甲基氨基)己-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。
实施例11 I*-130a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((2S，3R)-1-环己基-3-(甲基氨基)戊-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((2S，3R)-1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)戊-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 向4-硝基酚氯甲酸酯(14mg，0.068mmol)和(2S，3R)-2-氨基-1-环己基戊-3-基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(23mg，0.068mmol)在无水DCM中的溶液中添加TEA(12μL，0.88mmol)。在室温下搅拌得到的溶液5分钟。添加2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(26mg，0.82mmol)在DCM(2mL)中的溶液，随后添加TEA(0.5mL)，然后再搅拌30分钟。在真空中除去溶剂，通过制备HPLC纯化浆液，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((2S，3R)-1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)戊-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(17mg)。MS ESI+ve m/z 695(M+H)。
步骤2.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((2S，3R)-1-环己基-3-(甲基氨基)戊-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((2S，3R)-1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)戊-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(17mg)溶解在DCM/TFA(4/1mL)中并搅拌30分钟。浓缩后通过制备HPLC纯化浆液，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((2S，3R)-1-环己基-3-(甲基氨基)戊-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐(11.9mg)。
实施例12 I*-114a-2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟-2-羟基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟-2-羟基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 按照与实施例3步骤1类似的程序，在步骤1中使用2-((R)-(2-(苄氧基)-3，5-二氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯和2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯，获得2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟-2-羟基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。
步骤2.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟-2-羟基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟-2-羟基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(100mg，0.131mmol)溶解在MeOH(1mL)中，向其中加入Pd/C(20mg)。将反应混合物在室温及30psi下搅拌2小时。过滤悬浮液并真空浓缩滤液。通过制备HPLC纯化残余物，得到2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟-2-羟基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(20mg，28％)。
实施例13 I*-2a-2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 利用类似于实施例3步骤1的程序，在步骤1中使用2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯和2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-苄酯，获得2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。
步骤2.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在H2下向100mL烧瓶中装以溶解于MeOH(35mL)中的2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(苄氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(230mg，0.35mmol)和Pd(OH)2(45mg)并搅拌1小时。待反应完成后，过滤混合物。蒸发溶液，得到粗产物(120mg)，将其通过制备HPLC纯化，获得目标分子(50.2mg，29％)。
实施例14 I*-105a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-((1R，2S)-2-羟基环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(1-((1R*，2S*)-2-羟基环己基)-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 按照与实施例3步骤1类似的程序，在步骤1中使用2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯和2-氨基-3-((1R，2S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)环己基)丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，获得2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(1-((1R*，2S*)-2-羟基环己基)-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。
步骤2.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-((1R*，2S*)-2-羟基环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(1-((1R*，2S*)-2-羟基环己基)-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(30mg，0.04mmol)溶解在HCL/CH3OH溶液(3mL，2M)中。在室温下搅拌反应混合物1小时。反应完成后真空浓缩产物并通过制备HPLC纯化，得到所需的产物2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-((1R*，2S*)-2-羟基环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(3mg，14％)和副产物I*-104a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((R)-1-((1R*，2S*)-2-羟基环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(4.5mg，21％)。
实施例15 I*-127a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(N′-氰基-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)氨基甲亚胺酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.氰基二硫代碳亚氨酸钾 在-2-0℃下向胺氰胺(21g，0.5mol)和二硫化碳(58.5g，46mL，0.77mol)在无水EtOH(62.5mL)中的混合物中逐滴添加氢氧化钾(56.2g，1mol)在EtOH(210mL)中的溶液。将混合物保持在相同温度下3小时。然后过滤沉淀物，用冷EtOH洗涤，干燥，得到氰基二硫代碳亚氨酸钾(68g，70％)。
步骤2.氰基二硫代碳亚氨酸二甲酯 向氰基二硫代碳亚氨酸钾(19.4g，0.1mmol)在100mL甲醇和150mL水的溶液中逐滴添加硫酸二甲酯基(15.1g，0.12mol)。将混合物在室温下放置过夜。分离沉淀物，从IPA-异丙醚中重结晶，得到氰基二硫代碳亚氨酸二甲酯(11g，75％)。
步骤3.2-((氰基亚氨基)(甲基硫基)甲基氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯 向2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(1.08g，4mmol)在CH3CN(15mL)和Et3N(3mL)中的溶液中添加氰基二硫代碳亚氨酸二甲酯(642mg，4.4mmol)。将混合物加热至回流4小时。浓缩反应混合物，得到残余物，将其过柱纯化，得到2-((氰基亚氨基)(甲基硫基)甲基氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(450mg，31％)。
步骤4.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(N′-氰基-N-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)氨基甲亚胺酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 向2-((氰基亚氨基)(甲基硫基)甲基氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(200mg，0.543mmol)在DMF(8mL)和Et3N(0.5mL)的溶液中添加2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(178mg，0.543mmol)。将混合物于100-110℃加热48小时。用乙酸乙酯(100mL)稀释反应混合物，用水(30mL x 4)洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到残余物，过柱纯化，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(N′-氰基-N-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)氨基甲亚胺酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(8mg，2％)。
步骤5.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(N′-氰基-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)氨基甲亚胺酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-(N′-氰基-N-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)氨基甲亚胺酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(8mg，0.0124mmol)溶解在4N HCl/二噁烷的溶液(5mL)中。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过制备HPLC纯化残余物，得到产物(4mg，59％)。
实施例16 I*-11a-2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基硫代甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基硫代甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在0-5℃下向2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(326mg，1mmol)、DIEA(258mg，2mmol)和2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(270mg，1mmol)在乙酸乙酯(6mL)中的溶液中逐滴添加二咪唑-1-基-甲硫酮(194mg，1mmol)在乙酸乙酯(4mL)中的溶液。添加后，使混合物升温至室温3-4小时，用水洗涤(20mL)和盐水(20ml)洗涤混合物，有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物，通过制备TCL纯化，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基硫代甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯。MS ESI+ve m/z638(M+H)。
步骤2.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基硫代甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(N-甲基-N-(叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基氨基硫代甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(640mg，0.1mmol)溶解在20％(V/V)TFA/CH2Cl2溶液(5mL)中。在室温下搅拌反应混合物1小时，逐滴添加饱和碳酸氢钠的溶液，调节pH至7-8。用CH2Cl2(3×15mL)萃取得到的混合物，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，真空浓缩。通过制备HPLC纯化残余物，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨基硫代甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(10mg，19％)。
实施例17 I*-10a-2-((S)-环己基((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将(0.120g)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的富马酸盐、HCO2NH4(1.200g)和10％Pd/C(0.150g)在MeOH中的混合物在室温下搅拌3天。过滤混合物，沉淀物通过

545，用MeOH洗涤。减压蒸发溶剂后，将粗2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯不进一步纯化而直接用于下一步骤。MS ESI+ve m/z 489(M+H)。
步骤2.2-((S)-环己基((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 向250mL Parr振荡容器中装以2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯、0.1595g 5％Rh/Al2O3和MeOH。将该容器置于Parr氢化振荡器上，加压至60psi。振摇反应容器27小时后，将内容物通过HPLC过滤器过滤，并用MeOH洗涤。减压蒸发滤液，通过反相纯化残余物，得到2-((S)-环己基((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐。MS ESI+ve m/z 495(M+H)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ4.04-3.89(m，3H)，3.53(s，3H)，3.58-2.64(m，9H)，2.60(s，3H)，1.72-0.77(m，29H)。
实施例18 I*-57a-2-((1R)-(2-氟苯基)((3R)-1-(1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((1R)-(2-氟苯基)((3R)-1-(1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 向2-((1R)-(3-氯-2-氟苯基)((3R)-1-(1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯TFA盐(12mg，0.018mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加HCO2NH4(1.2g)和10％Pd/C(50mg)。将混合物在室温下搅拌1小时。滤出催化剂并浓缩，利用制备HPLC纯化残余物，得到作为TFA盐的2-((1R)-(2-氟苯基)((3R)-1-(1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(1.84mg，16％)。
除了使用氢气以外，利用与以上所述类似的程序制备以下化合物 I*-21a-2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，按照实施例18，步骤1，使用2-((R)-(3-氯苯基)((r)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-氧杂环庚烷-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 I*-74a-2-((R)-((3R)-1-((S)-1-(3-降金刚烷基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，按照实施例18，步骤1，使用2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(3-降金刚烷基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 实施例19 I*-3a-2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((S)-1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在H2下向50mL烧瓶中装以溶解于MeOH(5mL)中的2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(100mg，0.15mmol)和Pd(OH)2(20mg)。搅拌0.5小时后，过滤混合物，蒸发，得到粗2-((R)-((R)-1-((S)-1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(20mg，21％)，其在不进一步纯化的情况下使用。
步骤2.2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在圆底烧瓶中，2-((R)-((R)-1-((S)-1-(N-甲基-N-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基)氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(20mg，0.03mmol)和TEAF(15mg，0.07mmol)溶解在15mL MeCN中。将溶液在回流下搅拌1小时。真空浓缩混合物并通过制备HPLC纯化，得到2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(6.24mg，42％)。
实施例20 I*-45a-(R)-3-((R)-(3-氯苯基)(4-(甲基氨基)-4-氧代丁氧基)甲基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺
步骤1.3-((R)-(3-氯苯基)(3-氰基丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0-5℃下向NaH(763mg，19.1mmol)和3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.55g，4.77mmol)在CH3CN(20mL)中的悬浮液中逐滴添加4-溴丁腈(3.17g，21.5mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液，在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物倾入饱和NH4Cl水溶液中，添加乙酸乙酯(50mL)。有机层用水(3×20mL)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备HPLC纯化残余物，得到3-((R)-(3-氯苯基)(3-氰基丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.44g，21％收率)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.38-7.28(m，3H)，7.22(m，1H)，4.22(m，1H)，4.02(d，1H)，3.86(d，1H)，3.34(m，2H)，2.77(q，2H)，2.56(t，2H)，1.62(m，1H)，1.59(m，1H)，1.43(s，9H)，1.35-1.25(m，3H)，1.12(d，1H)。
步骤2.4-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)丁酸甲酯 将3-((R)-(3-氯苯基)(3-氰基丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(200mg，0.51mmol)溶解在20mL CH3OH中，在-78℃下在30分钟内将HCl鼓泡到混合物中。在室温下搅拌混合物过夜，然后在回流下再搅拌6小时。除去溶剂，用饱和NaHCO3处理残余物，用乙酸乙酯(20mL)萃取混合物。有机层在NaSO4上干燥并蒸发，得到粗4-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)丁酸甲酯，其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤(75mg，46％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.35(m，3H)，7.25(m，1H)，3.56(m，3H)，3.31-3.25(m，5H)，2.96(m，2H)，2.41(m，2H)，2.02(m，1H)，1.84(m，2H)，1.60(m，1H)，1.38-1.19(m，2H)，0.95(d，1H)。
步骤3.4-((R)-((R)-1-((S)-1-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-环己基丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)丁酸甲酯 在冰浴中向2-氨基-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(165mg，0.61mmol)和DIEA(3mL)在无水CH2Cl2(10mL)中的溶液中添加CDI(98mg，0.61mmol)。添加后，将混合物在0℃下搅拌1小时，然后加入在无水CH2Cl2(2mL)中的4-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)丁酸甲酯(165mg，0.51mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。用水(10mL)洗涤反应混合物，用CH2Cl2(15mL x 2)萃取水层，用饱和盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤，然后蒸发，得到残余物，通过制备TLC纯化，得到4-((R)-((R)-1-((S)-1-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-环己基丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)丁酸甲酯(70mg，22％收率)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.34-7.28(m，3H)，7.19(t，1H)，4.25(d，1H)，4.11(d，1H)，3.95(m，2H)，3.64(t，3H)，3.27(m，1H)，3.10(m，1H)，2.87(s，2H)，2.69(m，2H)，2.43(t，1H)，1.84(t，2H)，1.72-1.52(m，6H)，1.45(d，9H)，1.39-1.22(m，10H)，1.14(d，1H)，0.97(d，2H)，0.85(t，1H)。
步骤4.(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(4-(甲基氨基)-4-氧代丁氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 将4-((R)-((R)-1-((S)-1-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-环己基丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)丁酸甲酯(70mg，0.11mmol)溶解在CH3NH2/C2H5OH(20mL)中，在室温下搅拌过夜。反应完成后，在真空中除去溶剂。通过制备TLC纯化产物，得到(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(4-(甲基氨基)-4-氧代丁氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，71％收率)，其直接用于下一步骤中。
步骤5.(R)-3-((R)-(3-氯苯基)(4-(甲基氨基)-4-氧代丁氧基)甲基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺 将(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(4-(甲基氨基)-4-氧代丁氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.08mmol)溶解在20％(V/V)TFA/CH2Cl2溶液(10mL)中。反应混合物在室温下搅拌1小时，逐滴添加饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝7-8。得到的混合物用CH2Cl2(3×15mL)萃取，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过制备HPLC纯化残余物，得到(R)-3-((R)-(3-氯苯基)(4-(甲基氨基)-4-氧代丁氧基)甲基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺(3.30mg，收率8％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.30-7.34(m，3H)，7.20(d，1H)，4.30(d，1H)，4.05(m，1H)，3.97(m，2H)，2.76(m，3H)，2.69(s，3H)，2.53(s，3H)，2.27(m，3H)，1.83(m，3H)，1.71(m，5H)，1.13-1.28(m，10H)，0.89(m，4H)。
实施例21 I*-25a-(R)-3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基)乙基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺
步骤1.3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-羟基乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.4395g，1.29mmol)、60％NaH(1.320g，33mmol)和碘乙酸乙酯(5.237g，24.5mmol)在THF(20mL)中的混合物90℃加热18小时然后冷却至室温。然后用饱和盐水猝灭反应混合物，用乙酸乙酯萃取(3×)，用Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到0.0775g(14％)3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。MS ESI+ve m/z 450(M+Na)。
步骤2.2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-哌啶-3-基)乙氧基)乙酸乙酯 将3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)乙基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.0580g，0.136mmol)、2N HCl(50mL)和CH3CN(50mL)的混合物在室温下剧烈搅拌24小时。减压蒸发反应混合物后，粗产物2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-哌啶-3-基)乙氧基)乙酸乙酯不进一步纯化直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 328(M+H)。
步骤3.2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)乙氧基)乙酸乙酯 将2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-哌啶-3-基)乙氧基)乙酸乙酯、1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-4-硝基苯酯(0.096g，0.20mmol)和DIPEA(1mL)在CH2Cl2中的混合物在室温下搅拌24小时。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到0.0425g(47％，两步)2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)乙氧基)乙酸乙酯。MS ESI+ve m/z 668(M+H)。
步骤4.(S)-2-((R)-3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基)乙基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)乙氧基)乙酸乙酯(0.0185g)和33％wt.甲胺的乙醇溶液(10mL)的混合物在室温下搅拌3天。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到0.0035g(S)-2-((R)-3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基)乙基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 653(M+H)。
步骤5.(R)-3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基)乙基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺 将(S)-2-((R)-3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基)乙基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.0035g)和0.5M Et4NF在CH3CN(6mL)中的混合物于80℃加热1.5小时，然后在室温下搅拌过夜。在真空中除去溶剂后，通过反相HPLC纯化残余物，得到(R)-3-((R)-1-(3-氯苯基)-1-(2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基)乙基)-N-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基)哌啶-1-甲酰胺的TFA盐。MS ESI+ve m/z 509(M+H)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.31-7.14(m，4H)，4.17(s，2H)，4.20-3.98(m，3H)，3.02(dd，J＝12.6，3.2Hz，1H)，2.89(dd，J＝12.3，10.5Hz，1H)，2.65(s，3H)，2.38(s，3H)，1.41(s，3H)，2.69-0.83(m，20H)。
实施例22 I*-87a-1-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)丙-2-基氨基甲酸甲酯
步骤1.3-((R)-(3-氯苯基)(2，2-二甲氧基丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.2234g，0.68mmol)、60％NaH(1.460g，36.5mmol)和1-溴-2，2-二甲氧基丙烷(7.760g，42.4mmol)在THF(20mL)中的混合物于80℃加热3天，然后冷却至室温。然后用水猝灭反应混合物，用乙酸乙酯萃取(3×)，用Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂后，粗产物3-((R)-(3-氯苯基)(2，2-二甲氧基丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯不进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2.1-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)丙-2-酮 将如上所述获得的3-((R)-(3-氯苯基)(2，2-二甲氧基丙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯、2NHCl(100mL)和CH3CN(100mL)的混合物在室温下剧烈搅拌22小时。减压蒸发反应混合物后，粗1-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)丙-2-酮不进一步纯化直接用于下一步骤。MS ESI+ve m/z 284(M+H)。
步骤3.(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将如上所述获得的1-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)丙-2-酮、1-环己基-3-(甲基((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丙-2-基氨基甲酸(S)-4-硝基苯酯(0.390g，0.81mmol)和DIPEA(2.5mL)在CH2Cl2中的混合物在室温下搅拌16小时。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到0.0487g(11.4％，三步)(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 624(M+H)。
步骤4.(2S)-2-((3R)-3-((1R)-(2-氨基丙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将(S)-2-((R)-3-((R)-(3-氯苯基)(2-氧代丙氧基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.0487g，0.078mmol，1.0当量)、NaBH3CN(0.0296g，0.471mmol，6.0当量)、NH4OAc(0.2550g，3.31mmol，42当量)和4A分子筛(0.0555g)在MeOH(1mL)中的混合物在室温下搅拌22小时。用MeOH稀释反应混合物并通过过滤剂

545过滤。减压蒸发滤液，得到0.2405g粗(2S)-2-((3R)-3-((1R)-(2-氨基丙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 625(M+H)。
步骤5.(S)-2-((R)-3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)丙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 将如上所述获得的粗(2S)-2-((3R)-3-((1R)-(2-氨基丙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.1340g)、DMAP(0.151g)、DIPEA(2mL)和氯甲酸甲酯(0.483g)在CH2Cl2中的混合物在室温下搅拌2天。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到(S)-2-((R)-3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)丙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯。MS ESI+ve m/z 705(M+Na)。
步骤6.1-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)丙-2-基氨基甲酸甲酯 将(S)-2-((R)-3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)丙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-甲酰氨基)-3-环己基丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯和TFA(2mL)在CH2Cl2(5mL)中的混合物在室温下搅拌3小时。减压蒸发反应混合物后，通过反相HPLC纯化粗产物，得到1-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)丙-2-基氨基甲酸甲酯的TFA盐。MS ESI+ve m/z 539(M+H)。
式(XL)化合物的一般合成方案 本发明的式(XL)的化合物可以如下合成将由以下结构代表的吡喃中间体
与由以下结构代表的哌啶中间体偶联
在下述方案中描述
由谷氨酸酯制备吡喃中间体 可以利用以下合成方案由谷氨酸酯制备吡喃中间体
由焦谷氨酸酯制备吡喃中间体 也可以利用以下合成方案由焦谷氨酸酯制备吡喃中间体
哌啶中间体的制备 可以利用以下合成方案制备哌啶中间体
或者，可以利用以下合成方案制备哌啶中间体
按照上述方案合成公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的具体条件在以下的操作/实施例中提供。
制备例28 3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将(R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-羧酸(25g，0.11mol，1.0当量)、N，O-二甲基羟胺盐酸盐(10.5g，0.14mol，1.25当量)和EDCI·HCl(26.3g，0.14mol，1.25当量)和二异丙基乙胺(48mL，0.28mol，2.5当量)溶解于溶剂(400mL)中并在室温下搅拌过夜。用EtOAc稀释反应混合物，用5％HCl水溶液(2×150mL)、饱和NaHCO3水溶液(150mL)、盐水(100mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。浓缩产生3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(24.42g，82％)，为澄清的油。粗产物在不进一步纯化的情况下用于下一步骤。MS ESI+ve m/z 295(M+Na)。1HNMR(CDCl3)4.19-4.00(m，2H)，3.77(m，3H)，3.12(s，3H)，2.79(m，2H)，2.64(m，1H)，1.89(m，1H)，1.71-1.52(m，2H)，1.51-1.33(m，10H)。
步骤2.3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向1-溴-3-氯苯(100g，0.52mol)在无水THF(550mL)中的溶液中逐滴添加2.5Mn-BuLi在己烷中的溶液(210mL，0.52mol)。于-78℃搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(120g，0.44mol)在无水THF(500mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用猝灭混合物with饱和NH4Cl溶液(500mL)用EtOAc萃取(3×400mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(178g)，其不进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3.3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(178g，0.55mol)在无水THF(600mL)中的溶液中逐滴添加1MR-CBS-

唑硼烷在甲苯中的溶液(82mL，82mmol，0.15当量)。于-15℃搅拌1小时后，逐滴添加10M BH3在THF中的溶液(60mL，0.60mol，1.1当量)。添加后，在-15℃下搅拌反应混合物2小时。在-15℃下小心逐滴添加甲醇(400mL)。减压除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用AcOEt/己烷(1∶30→1∶15)洗脱，得到浅黄色油(95g，HPLC纯度≥70％，异构体比例≥3∶1)。将混合物溶解在EtOAc中直到醇恰好溶解(约5mL/1g)，在旋转蒸发器上除去溶剂，直到出现少量晶体。让溶液缓慢冷却至室温并放置1-2小时。向上述溶液中添加己烷(约300mL)然后过滤，用冷己烷洗涤晶体，从AcOEt-己烷中重结晶两次，得到纯的异构体3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20g，ee≥99％)。
步骤4.3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0-5℃下向NaH(7.44g，161mmol)在无水DMF(50mL)中的悬浮液中逐滴添加3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(17.45g，54mmol)在无水DMF(100mL)中的溶液，将反应混合物在室温下搅拌1小时。在0-5℃下向上述混合物中逐滴添加溴乙酸乙酯(17.82g，11.87mL，107mmol)在无水DMF(100mL)中的溶液。添加后，在室温下搅拌反应混合物2-3小时。将反应混合物倾入饱和NH4Cl和EtOAc水溶液(1000mL)中。用水(3×200mL)和盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，得到3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(14g，64％收率)。
步骤5.3-((R)-(3-氯苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在使温度低于40℃的同时向3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(14g，34mmol)在MeOH(200mL)中的溶液中分次添加NaBH4(10.35g，272mmol)。添加后，在室温下搅拌混合物2-3小时。在真空中除去溶剂，得到残余物，将其在水和EtOAc之间分配。用H2O和盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到粗3-((R)-(3-氯苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12.50g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤6.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-5-0℃下向3-((R)-(3-氯苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12.50g，34mmol)在干CH2Cl2(150mL)中的溶液中添加Et3N(13.74g，18.3mL，136mmol，4当量)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(7.75g，5.16mL，68mmol，2当量)在干CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，使其逐渐升温至室温。反应完成后加水(100mL)。水层用CH2Cl2(3×80mL)萃取，合并的有机层用10％柠檬酸、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(15g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤7.3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(15g，34mmol)溶解于无水DMF(150mL)中，添加固体NaN3(6.7g，102mmol，3当量)，并将反应混合物加热至80℃过夜。使反应混合物冷却至室温，然后添加EtOAc(500mL)，用水(3×100mL)和盐水(2×80mL)洗涤有机相，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.3g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤8.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.3g，33.8mmol)溶解在THF/H2O(20∶1，180mL/9mL)中，分次添加三苯基膦(36.0g，135mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。减压除去溶剂，得到残余物，经硅胶色谱法纯化，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10.4g，纯度HPLC＝75％)。
步骤9.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7.7g，21mmol，HPLC＝75％)和DMAP(1.27g，10mmol，0.5当量)在干CH2Cl2(120mL)中的溶液中添加Et3N(6.38g，8.45mL，63mmol)。将得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(8.1mL，104.5mmol，5当量)在干CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，于0-5℃搅拌反应混合物1-2小时。用水(80mL)猝灭反应。用CH2Cl2(3×50mL)萃取水层，用10％柠檬酸(2×80mL)和盐水洗涤合并的有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.4g，HPLC≥98％，五步的总收率为41％)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)3-((R)-(3，5-二氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤2中使用(3，5-二氟苯基)锂。
或者，3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯可以通过以下程序制备
步骤13-((R)-(2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯苯基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备 将3-((R)-(3-氯苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.971g，2.36mmol)溶解在7M NH3/MeOH(20mL)中，并在室温下搅拌过夜。减压除去溶剂，得到3-((R)-(2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(902mg，100％)，在不进一步纯化的情况下将其用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 383(M+H)+. 步骤23-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)-哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备 在0℃下，在10分钟内向3-((R)-(2-氨基-2-氧代乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(902mg，2.36mmol)在无水甲苯(30mL)中的溶液中缓慢添加Red-

(65％甲苯中的溶液，1.4mL，7.07mmol)。添加后，在室温下搅拌溶液过夜。使反应冷却至0℃，并用Na2SO4·10H2O猝灭。将得到的混合物搅拌2-3小时，通过

过滤，并用THF(200mL)洗涤。将滤液干燥并浓缩，得到粗产物3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(776mg，89％)。MS ESI+ve m/z 369(M+H)+. 制备例29 3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(5-氟-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向2-溴-4-氟-1-甲基苯(10.6g，0.056mol)在无水THF(150mL)中的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷中的溶液(22mL，0.056mol)。在-78℃下搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，0.037mol)在无水THF(120mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl(100mL)溶液猝灭混合物，用EtOAc(3×80mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(5-氟-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10.5g，收率88％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤2.3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向3-(5-氟-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10.5g，0.0336mol)在无水THF(150mL)中的溶液中逐滴添加1MR-CBS-

唑硼烷在甲苯中的溶液(3mL，3mmol，0.09当量)。在-15℃下搅拌1小时后，逐滴添加10M BH3在THF中的溶液(17mL，0.0336mol，1当量)。添加后，在-15℃下搅拌反应混合物2小时。在-15℃下小心逐滴添加甲醇(80mL)。减压除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用AcOEt/己烷(1∶30→1∶15)洗脱，得到浅黄色油(95g，HPLC≥70％，比例≥3∶1)。将混合物溶解在最小体积的EtOAc中，在旋转蒸发器上除去溶剂直到出现晶体。使溶液冷却至室温并放置1-2小时。向溶液中添加己烷然后过滤，用冷己烷洗涤晶体，并额外重结晶两次，得到纯的异构体3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.2g，ee≥99％)。1H NMR(CDCl3)7.1(m，2H)，6.85(m，1H)，4.7(m，1H)，2.3(s，3H)，1.45(s，9H)，1.25(m，4H)。
步骤3.3-((R)-(氰基甲氧基)(5-氟-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.2g，0.0037mol)在MeCN(20mL)中的溶液中添加NaH(0.27g，0.011mol)。将混合物搅拌1小时，随后冷却至-40℃，并分次添加溴乙腈(1.3g，0.011mol)。在-20℃下搅拌混合物0.5小时。用H2O猝灭反应。用CH2Cl2萃取混合物。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，得到目标分子3-((R)-(氰基甲氧基)(5-氟-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.2g，90％)。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(5-氟-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(氰基甲氧基)(5-氟-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.8g，0.005mol)在无水THF(20ml)中的溶液在氮气下加热至回流。逐滴添加BH3.Me2S在THF中的溶液，并在回流下继续搅拌过夜。当得到的溶液冷却至室温时，逐滴添加MeOH以猝灭反应。在溶液蒸发后，通过柱色谱法纯化粗产物，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(5-氟-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.2g，收率66％)。
步骤5.3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(5-氟-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.1g，8.5mmol)和DMAP(0.54g)在干CH2Cl2(45mL)中的溶液中添加Et3N(2.58g，3.6mL)。使得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(4.0g，43mmol，5当量)在干CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，将反应混合物在0-5℃下搅拌1-2小时。用水(50mL)猝灭反应。用CH2Cl2(3×30mL)萃取水层，用10％柠檬酸(2×50mL)和盐水洗涤合并的有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(400mg，HPLC≥98％)。1H NMR(CDCl3)7.2(m，1H)，7.1(m，1H)，6.9(m，1H)，4.4(m，1H)，4.1(m，1H)，3.7(m，1H)，3.6(s，3H)，3.2(m，2H)，2.9(m，2H)，2.3(s，3H)，1.75(m，1H)，1.6(m，1H)，1.4(s，9H)，1.25(m，2H)。
制备例30 3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氯-5-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在用N2冲洗的2L三颈烧瓶中，将Mg(26.5g，1.1mol)加温至50℃，逐滴添加1-溴-3-氯-5-氟苯(157g，0.75mol)在无水THF(1L)中的溶液，然后将混合物在室温下搅拌2小时。在-78℃和氮气下向3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(120g，0.441mol)在无水THF(1.1L)中的溶液中逐滴添加上述格氏试剂。使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(500mL)猝灭混合物，用EtOAc(3×400mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到3-(3-氯-5-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(163g)，其不进行进一步纯化直接使用。
步骤2.3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将10M在THF中的H3B.S2Me(47.7mL，0.477mol)和1M在甲苯中的R-CBS-

唑硼烷(72mL，0.072mol)的混合物溶解于100mL无水THF中并冷却至-15℃。向上述溶液中逐滴添加在400mL无水THF中的3-(3-氯-5-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，并于-15℃搅拌2小时。用甲醇(500mL)猝灭反应。减压除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物。用EtOAc/己烷将产物重结晶三次，得到3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(55g，0.156mol)。1HNMR(CDCl3，400MHz)7.10(s，1H)，7.04-6.90(dd，2H)，4.46-4.30(d，1H)，4.05-2.40(m，5H)，1.74(s，1H)，1.60(s，1H)，1.53-1.31(m，11H)，1.30-1.14(m，1H)。
步骤3.3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(55g，0.156mol)在乙腈(1.2L)中的溶液冷却至0℃，分次添加NaH(19.2g，0.48mol，60％，在油中)，然后在室温下搅拌混合物1小时。将混合物冷却至-20℃并逐滴添加溴乙腈(57.7g，0.48mol)。0.5小时后，添加额外的NaH(19.2g，0.48mol，60％，在油中)和溴乙腈(57.7g，0.48mol)。TLC显示80％的原料反应。用饱和NH4Cl溶液(200mL)猝灭反应，加水(1L)。减压除去乙腈，添加CH2Cl2(1L)，用CH2Cl2(3×500mL)反萃取水层，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(90g)，其在不进一步纯化的情况下用于下一步骤。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-5-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在N2保护下将3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(90g)在无水THF(1.3L)中的溶液加热至回流，随后逐滴添加10M在THF中的H3B.SMe2(70mL，0.7mol)。将混合物回流搅拌过夜。用MeOH(500mL)猝灭反应，并在真空中除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-5-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(24g，0.062mol)。
步骤5.3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-5-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(24g，0.062mol)在干CH2Cl2(300mL)中的溶液和Et3N(31.4g，43mL)在冰水浴中冷却至0℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(11.8g，0.124mol)在干CH2Cl2(100mL)中的溶液。添加后，将反应混合物在0-5℃下搅拌1-2小时。加水(200mL)猝灭反应。用CH2Cl2(3×100mL)萃取水层，用10％柠檬酸(2×80mL)和盐水洗涤合并的有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(19g，0.043mol)。1H NMR(CD3OD)7.17(s，1H)，7.16-7.08(m，1H)，7.07-7.00(m，1H)，4.20-4.00(m，2H)，3.90-3.78(d，1H)，3.61(s，3H)，3.28-3.20(m，2H)，2.92-2.68(dd，2H)，1.52-1.74(m，2H)，1.42(s，9H)，1.35-1.10(m，3H)。
制备例31 3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在氮气和室温下将1-溴-3-氟-苯(57.7g，0.33mol)在无水THF(480mL)中的溶液逐滴添加到Mg(10.6g，0.44mol)上。将混合物在50-60℃下搅拌1小时。得到的格氏试剂用于下一步。在-78℃和氮气下将格氏试剂逐滴添加到3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(60g，0.22mol)在无水THF(600mL)中的溶液中。添加后，在室温下搅拌混合物1.5小时。用饱和NH4Cl溶液(300mL)猝灭混合物，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(67.5g，100％)，在不纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。
步骤2.3-((R)-(3-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯在-15℃和氮气下，向1M在甲苯中的R-CBS-

唑硼烷(33mL，33mmol，0.15当量)和10在THF中的M BH3(22mL，0.22mol，1.0当量)的溶液中逐滴添加3-(3-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(67.5g，0.22mol)在无水THF(300mL)中的溶液。添加后，反应混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下小心逐滴添加甲醇(200mL)。减压除去溶剂，得到粗产物。将粗产物溶解在EtOAc中直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)，在旋转蒸发器上除去溶剂，直到出现少量晶体。在搅拌下向上述溶液中添加石油醚(大约300mL)，在室温下搅拌2小时，然后过滤，用石油醚洗涤晶体并重结晶，得到纯的R)-3-((R)-(3-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(26g，39％)。
步骤3.3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0-5℃下向NaH(4.8g，120mmol)在THF(400mL)中的悬浮液逐滴添加3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(30.9g，100mmol)在无水THF(100mL)中的溶液，将反应混合物在室温下搅拌1小时。向上述混合物中逐滴添加溴乙酸乙酯(20.04g，13.40mL，120mmol)在无水THF(100mL)中的溶液，将反应液加热至回流3-5小时。将反应混合物倾入饱和NH4Cl水溶液中，然后用EtOAc(3×100mL)萃取。有机层用水(3×100mL)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(29.88g 76％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤4.3-((R)-(3-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在使温度低于40℃的同时，向3-((R)-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(29.88g，75.9mmol)在MeOH(300mL)中的溶液中分次添加NaBH4(23g，605.2mmol)。添加后，在室温下搅拌混合物2-3小时。在真空中除去溶剂，得到残余物，将其在水和EtOAc之间分配。用H2O和盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，得到3-((R)-(3-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(11g，41％)。
步骤5.3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-5-0℃下向3-((R)-(3-氟苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(11g，31.16mmol)在干CH2Cl2(140mL)中的溶液中添加Et3N(12.60g，16.68mL，124.65mmol，4当量)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(7.1g，4.72mL，62.32mmol，2当量)在干CH2Cl2(40mL)中的溶液。添加后，使其逐渐升温至室温。加水(100mL)。用CH2Cl2(3×80mL)萃取水层，用10％柠檬酸、饱和NaHCO3和盐水洗涤合并的有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.8g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤6.3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(13.8g，32mmol)溶解于无水DMF(150mL)中，添加固体NaN3(6.1g，96mmol，3当量)，将反应混合物加热至80℃过夜。使反应混合物冷却至室温，然后添加EtOAc(500mL)，用水(3×100mL)和盐水(2×80mL)洗涤有机相，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤7.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在H2下搅拌3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(12g，31.75mmol)和Pd(OH)2/C(1.2g)在MeOH(240ml)中的悬浮液1小时。使混合物过滤并减压蒸发，得到所需的3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g)。
步骤8.3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，28.41mmol)和DMAP(1.8g，14.21mmol，0.5当量)在干CH2Cl2(150mL)中的溶液中添加Et3N(8.62g，11.42mL，85.23mmol)。将得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(10.95mL，142.05mmol，5当量)在干CH2Cl2(60mL)中的溶液。添加后，将反应混合物在0-5℃下搅拌1-2小时。加水(80mL)以猝灭反应。用CH2Cl2(3×50mL)萃取水层，用10％柠檬酸(2×80mL)和盐水洗涤合并的有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，其通过硅胶纯化，得到3-((R)-(3-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(11.3g，97％)。
制备例32 3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.5-氯-2-甲基苯胺 向2L烧瓶中装以4-氯-1-甲基-2-硝基苯(60g，0.35mol)在MeOH(1L)中的溶液，添加阮内镍，三次将烧瓶中的空气替换为H2，在室温下搅拌混合物3小时。过滤溶液并浓缩。将残余物溶解在CH2Cl2(500mL)中，用盐水洗涤溶液，用Na2SO4干燥。除去溶剂，得到5-氯-2-甲基苯胺(50g，0.35mol)。1H NMR(CDCl3，400MHz)7.02-6.93(d，2H)，6.70-6.60(d，2H)，3.67(s，2H)，2.14(s，3H)。
步骤2.2-溴-4-氯-1-甲苯 将5-氯-2-甲基苯胺(50g，0.355mol)溶解在HBr溶液(1.5M，100mL)并冷却至0℃，逐滴添加NaNO2(27.6g，0.4mol)在水(200mL)中的溶液。添加后，将混合物搅拌1小时。在另外一个烧瓶中，将CuBr(30g，0.21mol)添加到HBr溶液(1.5M，30mL)中并加热至60℃，然后将混合物加至上述溶液中。将混合物加热至回流1小时，然后冷却至室温。用水(500mL)猝灭反应，用CH2Cl2萃取水层3次，用Na2SO4干燥，除去溶剂，通过柱色谱法纯化，得到2-溴-4-氯-1-甲基苯(53g，0.26mol)。1H NMR(CDCl3，400MHz)7.53(s，1H)，7.20-7.10(m，2H)，2.36(s，3H)。
步骤3.3-(5-氯-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向2-溴-4-氯-1-甲基苯(53g，0.26mol)在无水THF(600mL)中的溶液中逐滴添加2.5Mn-BuLi在己烷中的溶液(103mL，0.26mol)。于-78℃搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(67g，0.246mol)在无水THF(300mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(500mL)猝灭混合物，用EtOAc萃取(3×400mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(5-氯-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(86g)，在不纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。
步骤4.3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将10M在THF中的BH3.Me2S(25.4mL，0.254mol)和1M在甲苯中的R-CBS-

唑硼烷(38mL，0.038mol)的混合物溶解于100mL无水THF中，并冷却至-15℃。向上述溶液中逐滴添加在200mL无水THF中的3-(5-氯-2-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，并在-15℃下搅拌2小时。用甲醇(300mL)猝灭反应。减压除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，得到3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(32g)，其含有30％的异构体。
步骤5.3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-25℃下向NaH(5.64g，0.141mol)在DMF(70mL)和THF(70mL)混合溶剂中的悬浮液中逐滴添加3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(16g，47mmol)在无水THF(100mL)中的溶液，将反应混合物在室温下搅拌1小时。在-10--5℃下向上述混合物中逐滴添加溴乙酸乙酯(15.6g，94mmol)在无水THF(70mL)中的溶液。添加后，在室温下搅拌反应混合物2-3小时。用饱和NH4Cl溶液(100mL)猝灭反应，添加EtOAc(500mL)。有机层用水(5×50mL)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱法纯化残余物，得到3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(8g，18.8mmol)。
步骤6.3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在保持温度低于40℃的同时，向3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(8g，18.8mmol)在MeOH(300mL)中的溶液中分次添加NaBH4(5.6g，0.15mol)。添加后，将混合物搅拌过夜。在真空中除去溶剂，得到残余物，将其分配在水和EtOAc之间。用H2O和盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，并蒸发，得到粗3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤7.3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-5-0℃下向3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-羟基乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7g，18.3mmol)在干CH2Cl2(100mL)中的溶液中添加Et3N(54g，10mL，0.73mmol)。然后在相同温度下逐滴添加MsCl(4.2g，36.5mmol)在干CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，使其逐渐升温至室温。用10％柠檬酸溶液(30mL)、NaHCO3和盐水洗涤反应混合物，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(8.4g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤8.3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(5-氯-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲基磺酰氧基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(8.4g，18.3mmol)溶解在无水DMF(150mL)，添加固体NaN3(3.56g，54.8mmoL)，将反应混合物加热至60℃过夜。让反应混合物冷却至室温并用EtOAc(500mL)稀释，用水(5×50mL)和盐水(100mL)洗涤有机相，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(5-氯-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7g)。
步骤9.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(5-氯-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(2-叠氮基乙氧基)(5-氯-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7g，17.1mmoL)溶解在EtOAc(300mL)中，添加0.8gPd(OH)2，并将瓶中的空气转换为H2三次，在室温下搅拌反应液3小时。过滤溶液并浓缩，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(5-氯-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(6.2g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤10.3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(5-氯-2-甲基苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(6.2g，16.2mmol)和DMAP(0.2g，1.62mmol)在干CH2Cl2(70mL)中的溶液中添加Et3N(8g，81mmol)。将得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(3.1g，32.4mmol)在干CH2Cl2(30mL)中的溶液。添加后，在0-5℃下搅拌反应混合物1-2小时。用水猝灭反应。用CH2Cl2(3×30mL)萃取水层，用盐水洗涤合并的有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，其首先通过柱色谱法纯化，然后通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.5g)。1H NMR(CD3OD，400MHz)7.30(s，1H)，7.20-7.10(d，2H)，4.81(s，1H)，4.46-4.30(d，1H)，4.29-4.15(d，1H)，3.95-3.83(d，1H)，3.62(s，3H)，3.30(s，4H)，2.90-2.65(dd，2H)，2.30(s，3H)，1.70(s，1H)，1.59(s，1H)，1.41(s，9H)，1.35-1.20(m，3H)。
制备例W1 2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸 向圆底烧瓶中，将Et3N(303g，3mol)逐滴添加到搅拌的Boc2O(261.6g，1.2mol)和2-氨基-戊二酸5-甲酯(161g，1mol)在水(800ml)和二噁烷(800ml)中的溶液中。18小时后用石油醚(2×1000ml)萃取溶液，在冰上冷却水相，通过缓慢添加10％柠檬酸溶液小心酸化至pH3。然后将尿烷萃取到EtOAc(3×1000ml)中，用盐水洗涤合并的萃取物，然后干燥(Na2SO4)，过滤并减压浓缩，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸(238g，91.2％)，其在不进一步纯化的情况下使用。
步骤2.4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲酯 在-10℃下向搅拌的(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酸(35.2g，0.135mol)在THF(500mL)中的溶液中添加N-甲基吗啉(15mL，0.135mol)，随后添加氯甲酸乙酯(14.72g，0.135mol)。10分钟后一次加入NaBH4(15.37g，0.405mol)。然后在0℃下在20分钟内向混合物中逐滴添加MeOH(1200mL)。将溶液额外搅拌20分钟，然后用1M KHSO4中和。除去有机溶剂，用EtOAc(3×500ml)萃取水层。依次用1M KHSO4(300mL)、H2O(300mL)、5％NaHCO3水溶液(300mL)洗涤合并的有机相，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到残余物，其通过柱色谱法纯化，得到所需的4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲基酯(24g，72％)。
步骤3.4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-(叔丁氧基羰基氨基)-5-羟基戊酸(S)-甲酯(24g，97.2mmol)和异丙基甲酯(88.8g，854.6mmol)溶解在丙酮(2000mL)中，并在室温下添加BF3·Et2O(0.82mL，5.84mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。通过添加Et3N(11.6mL)猝灭反应。用饱和NaHCO3水溶液(200mL)洗涤反应溶液并蒸发，获得作为油的4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(25.1g，90％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤4.(S)-3-(3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基

唑烷-4-基)丙酸 将氢氧化钠水溶液(195mL，4.0M，在H2O中，0.261mol，3.0当量)加至4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(25.1g，0.087mol)的溶液中，得到的混浊反应混合物在23℃下搅拌3.5小时。将混合物减压浓缩至大约50mL体积，然后在0.5M HCl(360ml)和EtOAc(2×360ml)之间分配。合并的有机层用Na2SO4干燥并过滤。减压浓缩滤液，得到(S)-3-(3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基

唑烷-4-基)丙酸(21.6g，91％)，其在不进行进一步纯化的情况下使用。
步骤5.2，2-二甲基-4-(3-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-氧代丙基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向2000mL烧瓶中装以(S)-3-(3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基

唑烷-4-基)丙酸(21.6g，79mmol)和750mL干THF。使溶液冷却至0℃，然后相继加入三乙胺(23.94g，237mmol，3.0当量)和新戊酰氯(9.76mL，79mmol，1.0当量)。在0℃下搅拌溶液4小时。之后添加(R)-4-苄基-2-

唑烷酮(13.26g，75.2mmol，0.95当量)和干燥的LiCl(3.68g，86.4mmol，1.1当量)，并搅拌反应液13小时，同时升温至环境温度。之后添加560mL 0.5M HCl，混合物转移到分液漏斗中并分离层。水层用EtOAc萃取(3×370mL)，合并的有机层用10％K2CO3(2×370mL)和盐水(2×370mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，并蒸发。粗物质通过急骤色谱法纯化，用己烷中的0-29％EtOAc洗脱。得到26.3g(81％)2，2-二甲基-4-(3-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-氧代丙基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为澄清浆液。
步骤6.4-((R)-5-叔丁氧基-2-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-羰基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0℃下，将1.0M TiCl4的CH2Cl2溶液(8.55mL，0.7当量)添加到CH2Cl2(100mL)中，然后加入1.0M TiCl(Oi-Pr)3的己烷溶液(4.28mL，0.35当量)，并搅拌5分钟，加入DIPEA(2.87mL，1.35当量)并搅拌15分钟。加入2，2-二甲基-4-(3-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-基)-3-氧代丙基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(5.28g，12.22mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液。在0℃下搅拌反应混合物1小时。向该溶液中添加丙烯酸叔丁酯(2.22mL，1.25当量)，搅拌该混合物48小时，同时升温至室温。浓缩混合物，在EtOAc(300mL)和1％HCl溶液(100mL)之间分配。有机层有饱和NaHCO3溶液(60mL)、盐水(60mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，通过ISCO(120g柱，己烷中的0～35％EtOAc梯度)纯化残余物，得到4.12g(60％)4-((R)-5-叔丁氧基-2-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-羰基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为淡黄色固体。MS ESI+ve m/z 583(M+Na)。
步骤7.4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-5-叔丁氧基-2-((R)-4-甲基-2-氧代

唑烷-3-羰基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(4.12g，7.36mmol)溶解在4∶1的THF和甲醇(200mL)中并冷却至0℃。缓慢加入硼氢化钠(557mg，2当量)。10分钟后使混合物缓慢升温至室温。将混合物在室温下搅拌2小时。浓缩混合物，再溶解于EtOAc(300mL)中，用1％HCl溶液(100mL)、盐水(60mL)洗涤，并用Na2SO4干燥。过滤和浓缩后，通过(40g柱，己烷中的10-65％EtOAc梯度，利用茚三酮染色核实TLC)纯化残余物)，得到2.86g 4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，为白色固体。MS ESI+m/v 410(M+Na)。
步骤8.4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-5-叔丁氧基-2-(羟基甲基)-5-氧代戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(244mg，0.63mmol)在无水DCM(6mL)中的溶液中添加吡啶(2mL)和催化量的DMAP，使溶液冷却至0℃。加入对甲苯磺酸氯(360mg，1.88mmol)并在室温下搅拌过夜。用EtOAc(40mL)稀释反应混合物，用1N HCl(2x，50ml+20ml)洗涤，随后用H2O、NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并过滤。蒸发溶剂后，用硅胶柱纯化残余物，用己烷中的0-20％EtOAc洗脱，得到4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(317mg，收率93％)。
步骤9.4-((R)-5-羟基-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在-78℃和N2下向4-((R)-5-叔丁氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(317mg，0.58mmol)在无水DCM(8mL)中的溶液中逐滴添加DiBAlH(1M，在己烷中，1.75mL，1.75mmol)。添加后，再搅拌反应混合物30分钟。用MeOH(2mL)猝灭反应，随后用50％罗谢尔盐水溶液，并搅拌2小时。得到的溶液用DCM(3×20mL)萃取，浓缩合并的有机相，溶解在THF/MeOH(10mL，4/1，v/v)中，冷却至0℃，加入NaBH4(11mg，0.29mmol)，并在该温度下搅拌30分钟。用NH4Cl水溶液猝灭反应，然后用EtOAc(3×20mL)萃取，合并的有机相用H2O、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩，得到粗产物4-((R)-5-羟基-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(255mg，92％)。其在不进一步纯化的情况下使用。
步骤10.2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0℃和N2下向4-((R)-5-羟基-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(254mg，0.54mmol)在无水DMF(8mL)中的溶液中添加NaH(43mg，1.08mmol)。在该温度下搅拌1小时后，用NH4Cl水溶液猝灭反应，然后蒸发至干。将残余物溶解在EtOAc和H2O中，分离的有机相用EtOAc萃取。合并的有机相用H2O、盐水洗涤，并用Na2SO4干燥，过滤，并蒸发。用硅胶柱纯化残余物，得到2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(136mg，84％)。
制备例X1 2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷
步骤1.(2S，4R)-1-叔丁基2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯 向HMDS在无水THF(200mL)中的溶液中逐滴添加2.5M在己烷中的n-BuLi(130mL)，并将混合物在-78℃下搅拌1小时。向于-78℃搅拌的(S)-1-叔丁基2-乙基5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯(80g，0.311mol)在无水THF(1600mL)中的溶液中添加在THF中的二(三甲基甲硅烷基)氨基锂。在-78℃下搅拌反应混合物1小时后，添加在THF(200mL)中的3-溴丙烯(38.47g，0.318mol)，并继续搅拌2小时。在-78℃下用饱和氯化铵溶液(600mL)猝灭反应混合物，用EtOAc(3×500mL)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干。通过柱色谱法分离粗产物，得到(2S，4R)-1-叔丁基2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯(15g，16％)。
步骤2.(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯 向(2S，4R)-1-叔丁基2-乙基4-烯丙基-5-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸酯(30g，0.1mol)在MeOH/H2O(700/70mL)中的溶液中添加NaBH4(25g，0.66mol)，在室温下搅拌得到的混合物1小时，并用饱和NH4Cl水溶液(300mL)猝灭。在真空下除去有机溶剂，用EtOAc(3×250mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤(250mL)并用无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发，得到粗(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(22g，85％)。它在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。
步骤3.4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向(2S，4R)-1-羟基-4-(羟基甲基)庚-6-烯-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.8g，26.2mmol)在丙酮(150mL)中的溶液中添加PTSA(0.45g，2.62mmol)。使反应混合物冷却至-20℃，然后加入2，2-二甲氧基丙烷(4.1g，39.4mmol)。搅拌得到的混合物，并使其升温至室温1小时。然后添加TEA(0.5mL)并再搅拌5分钟。减压除去溶剂。将残余物溶解在Et2O(300mL)中，依次用1N HCl(80mL)、饱和NaHCO3水溶液(80mL)、盐水(80mL)洗涤，并干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(7.5g，96％)。它在不进一步纯化的情况下使用。
步骤4.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-2-(羟基甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(11.5g，38.4mmol)、咪唑(7.84g，115.2mmol)和DMAP(234mg，1.92mmol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液中逐滴添加TBSCl(8.68g，57.6mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。用水(100mL)洗涤反应液并用CH2Cl2(3×100mL)萃取水层，合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(9g，57％)。
步骤5.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-羟基戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 将4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)戊-4-烯基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(26g，63mmol)在THF(200mL)中的溶液冰浴中冷却，随后逐滴添加10M BH3.SMe2(6.3mL)。搅拌5小时后，小心添加10％NaOH溶液(32mL)，随后是30％H2O2(32mL)。将反应混合物在室温下搅拌6小时。用二乙醚(500mL)稀释反应混合物，并用二乙醚(3×250mL)萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-羟基戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(19.6g，72％)。
步骤6.4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-(甲基磺酰氧基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 在0-5℃下向4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-羟基戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(32g，74.2mmol)和Et3N(22.5g，226mmol)在CH2Cl2(400mL)中的溶液中添加MsCl(10.1g，89mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌1小时。用水(200mL)洗涤反应液并用CH2Cl2(3×150mL)萃取水层。合并的有机层用10％柠檬酸(60mL)、饱和NaHCO3(60mL)和盐水(100mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-(甲基磺酰氧基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(37.7g，100％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤7.2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯 向4-((R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5-(甲基磺酰氧基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(37.7g，74.2mmol)在THF(1000mL)中的溶液中分次添加四乙基氟化铵水水合物(41g，185.5mmol)。在回流下搅拌反应混合物过夜。将混合物用EtOAc(1000mL)稀释，用水(300mL)和盐水(500mL)洗涤。有机相用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(12.0g，54％)。
制备例Y1 (S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯
步骤1.(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯的制备 向2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯(643mg，2.15mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加p-TSA(37mg，0.22mmol)，然后在室温下搅拌溶液12小时。添加TEA(2mL)随后是Boc2O(46mg，0.21mmol)。添加后，将溶液再搅拌30分钟。减压除去有机溶剂，得到，粗产物(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。它在不进一步纯化的情况下用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 260(M+1)。
步骤2.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基4-甲苯磺酸酯的制备 将上述粗产物(S)-1-羟基-3-(R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯溶解在无水DCM(22mL)。向该溶液中添加吡啶(2mL)和TsCl(1.230g，6.45mmol)。室温下搅拌4小时后，添加另外一批吡啶(3mL)和TsCl(0.700g，3.67mmol)并再搅拌12小时。用EtOAc(80mL)稀释反应混合物，用1N HCl(75mL)洗涤，随后用H2O(2×30mL)、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。得到的浆液在硅胶上通过急骤色谱法纯化(用梯度体系洗脱在己烷中的0-35％EtOAc)，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基4-甲苯磺酸酯，670mg，收率75％，两步。MS ESI+ve m/z 436(M+Na)。
步骤3.(S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基4-甲苯磺酸酯(132mg，0.32mmol)和NaN3(62mg，0.95mmol)在无水DMF中的溶液在N2气氛下加热至80℃1.5小时，冷却至室温，并用EtOAc稀释，用H2O(3×20mL)洗涤，随后用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。得到的浆液在硅胶上通过急骤色谱法纯化(用梯度体系洗脱在己烷中的0-30％EtOAc)，得到(S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯58mg，收率64％。MS ESI+ve m/z 307(M+Na)。
步骤4(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 (S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(146mg，0.51mmol)的氢化在MeOH(10mL)、10％Pd/C(25mg)中在40psi H2下进行2小时。过滤后，获得114mg(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，收率86％。MS ESI+vem/z 259(M+H)。
制备例Z1 (S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1.(S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 在-78℃下向(S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(30mg，0.11mmol)在无水THF(4mL)中的溶液中添加1.0M LHMDS在THF中的溶液(253μL，0.25mmol)，然后在该温度下搅拌30分钟。向该混合物中加入MeI(125μL，0.22mmol)，然后升温至0℃，在冰箱中放置12小时。用饱和NH4Cl水溶液猝灭反应混合物，用EtOAc(30mL)萃取，分离的有机相用H2O(2×10mL)、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并过滤。浓缩滤液，得到的浆液在硅胶上通过急骤色谱法纯化(用梯度体系洗脱在己烷中的0-30％EtOAc)，得到(S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯31mg，收率100％。MS ESI+ve m/z 321(M+Na)。
步骤2.(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 (S)-1-叠氮基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸酯(62mg，0.51mmol)的氢化在EtOAc(20mL)、10％Pd/C(15mg)中在40psi H2下进行2小时。过滤后获得52mg(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，收率91％。MS ESI+ve m/z273(M+H)。
实施例28 2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯.TFA盐 将3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.247g，5.26mmol)在DCM/TFA混合溶剂(24mL，3∶1，v/v)中的溶液在室温下搅拌30分钟。在真空中除去溶剂，以定量收率产生2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯的TFA盐。MS ESI+ve m/z 327(M+H)。
步骤2.(S)-2-(N-(叔丁氧基羰基)氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(4-硝基苯基)酯 向(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(20.8mg，0.081mmol)在无水DCM(9mL)中的溶液中添加氯甲酸4-硝基苯酯(17.1mg，0.085mmol)，随后添加TEA(12.2mg，17μL，0.12mmol)。将得到的溶液在室温下搅拌5分钟(通过LC-MS监测)并稀释至12mL。一份氨基甲酸酯混合溶液(2mL)不进行纯化用于下一步骤。
步骤3.2-((R)-((R)-1-((S)-2-(Boc-氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯 向(S)-2-(N-(叔丁氧基羰基)氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(4-硝基苯基)酯溶液(2mL，0.013mmol)中添加2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯的TFA盐(7.0mg，0.016mmol)，随后添加过量的TEA(0.3mL)。将混合物搅拌30分钟，然后在真空中除去溶剂。得到的油经制备HPLC纯化，得到2-((R)-((R)-1-((S)-2-(Boc-氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯5mg，收率63％。MS ESI+ve m/z611(M+H)。
步骤4.2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯TFA盐 将2-((R)-((R)-1-((S)-2-(Boc-氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯(5mg，0.008mmol)溶解在DCM/TFA(3/1mL)中。将溶液搅拌30分钟并浓缩。粗混合物经制备HPLC纯化，得到2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯TFA盐2.8mg，收率54％。1H NMR(CD3OD)7.36-7.32(m，3H)，7.23(d，J＝7.6Hz，1H)，4.20(br d，J＝13.6Hz，1H)，4.04(d，J＝8.8Hz，1H)，3.89-3.78(m，3H)，3.64(s，3H)，3.48-3.42(m，2H)，3.37(m，1H)，3.28-3.24(m，5H)，3.15(dd，J＝10.8，9.2Hz，1H)，2.92(m，2H)，1.97(m，1H)，1.78(m，2H)，1.68-1.54(m，4H)，1.45-1.07(m，5H)。MSESI+ve m/z 511(M+H)。
式(XL)的下列化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤2中使用2-((R)-(3-氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐。
2)2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯-5-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤2中使用2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐。
3)2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(3，5-二氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤2中使用2-((R)-(3，5-二氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐。
4)2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(5-氯-2-甲基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤2中使用2-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐。
5)2-((R)-((R)-1-((S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)(5-氟-2-甲基苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤2中使用2-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐。
6)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-2-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤1中使用(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。
7)2-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)((R)-1-((S)-2-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，在步骤1中使用(S)-1-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，在步骤2中使用2-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的三氟乙酸盐。
式(L)化合物的一般合成方案 本发明的化合物可以如下合成将由以下结构代表的吡喃中间体
与由以下结构代表的哌啶中间体偶联
在下列方案中描述
由谷氨酸酯制备吡喃中间体 可以利用以下合成方案由谷氨酸酯制备吡喃中间体
由焦谷氨酸酯制备吡喃中间体 也可以利用以下合成方案由焦谷氨酸酯制备吡喃中间体
哌啶中间体的制备 可以利用以下合成方案制备哌啶中间体
或者，可以利用以下合成方案制备哌啶中间体
按照上述方案合成公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的具体条件在下面的实施例中提供。
制备例33 3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向1-溴-3-甲基苯(88.4g，0.52mol)在无水THF(550mL)中的溶液中逐滴添加2.5M n-BuLi在己烷中的溶液(210mL，0.52mol)。在-78℃下搅拌1小时后，逐滴添加3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(120g，0.44mol)在无水THF(500mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(500mL)猝灭混合物并用EtOAc萃取(3×400mL)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(168g)，在不进行纯化的情况下将其直接用于下一步骤中。
步骤2.3-((S)-羟基(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向3-(3-甲基苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(168g，0.55mol)在无水THF(600mL)中的溶液中逐滴添加1MR-CBS-

唑硼烷在甲苯中的溶液(82mL，82mmol，0.15当量)。在-15℃搅拌1小时后，逐滴添加10M BH3在THF中的溶液(60mL，0.60mol，1.1当量)。添加后，将反应混合物在-15℃下搅拌2小时。TLC指示原料消失。在-15℃下小心逐滴添加甲醇(400mL)。减压除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用AcOEt/己烷(1∶30→1∶15)洗脱，得到浅黄色油状物(95g，HPLC≥70％，比例≥3∶1)。将混合物溶解在EtOAc中，直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)。在旋转蒸发器上除去溶剂，直到出现少量晶体。将溶液缓慢冷却至室温，放置1-2小时。向上述溶液中添加己烷(大约300mL)，然后过滤，用冷己烷洗涤晶体，重结晶两次，得到纯的异构体3-((S)-羟基(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20g，ee≥99％)。
步骤3.3-((R)-(氰基甲氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((S)-羟基(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(30.5g，0.1mol)在MeCN(300mL)中的溶液中添加NaH(12g，0.3mol)。将混合物在室温下搅拌1小时。使混合物冷却至-40℃，然后分次添加溴乙腈(35.7g，0.3mol)。将混合物在-20℃下连续搅拌0.5小时。用饱和NH4Cl猝灭反应。用CH2Cl2萃取混合物。有机层用Na2SO4干燥，浓缩。粗3-((R)-(氰基甲氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯在不进行纯化的情况下用于下一步骤。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(氰基甲氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20g，0.04mol)溶解在无水THF(300mL)中，在氮气下将溶液加热至回流。逐滴添加BH3.Me2S(12mL，0.12mol)在THF中的溶液，并在回流下连续搅拌过夜。使得到的溶液冷却至室温，逐滴添加MeOH以猝灭过量的硼烷。蒸发溶液后，获得粗3-((R)-(2-氨基乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，其在不进行纯化的情况下使用。
步骤5.3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯和DMAP在无水CH2Cl2中的溶液中添加Et3N。将得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯在无水CH2Cl2中的溶液。添加后，在0-5℃下搅拌反应混合物1-2小时。加水猝灭反应。水层用CH2Cl2萃取，合并的有机层用10％柠檬酸和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，通过制备TLC纯化，得到3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(间甲苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯。
制备例34 3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氯-4-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在室温及氮气下将4-溴-2-氯-1-氟-苯(31.3g，0.15mol)在无水THF(150mL)中的溶液逐滴添加到THF(50mL)中的Mg(4.8g，0.2mol)中。将混合物于50-60℃搅拌1小时，此时大多数镁被消耗。得到的格氏试剂用于下一步。在-78℃及氮气下将格氏试剂逐滴添加到3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(27.2g，0.1mol)在无水THF(300mL)中的溶液中。添加后，在室温下搅拌混合物1.5小时。用饱和NH4Cl溶液(300mL)猝灭混合物，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-氯-4-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(31.5g，92％)，其不进行纯化直接用于下一步。
步骤2.3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯在-15℃及氮气下向1M在甲苯中的R-CBS-

唑硼烷(13.8mL，13.8mmol，0.15当量)和10M在THF中的BH3(9.2mL，92.4mmol，1.0当量)的溶液中逐滴添加3-(3-氯-4-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(31.5g，92.4mmol)在无水THF(300mL)中的溶液。添加后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下小心逐滴添加甲醇(200mL)。减压除去溶剂，得到粗产物。将粗产物溶解在EtOAc中直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)，在旋转蒸发器上除去溶剂直到出现少量晶体。在搅拌下向上述溶液中添加石油醚(大约300mL)，在室温下搅拌2小时，然后过滤，用石油醚洗涤晶体，重结晶6次，得到3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(10g，32％，93％e.e.)。1HNMR(CD3OD，400MHZ)7.44(d，1H)，7.25(d，1H)，7.20(t，1H)，4.34(d，1H)，4.20(s，1H)，3.93(d，1H)，2.68(m，2H)，1.62(m，2H)，)，1.41(s，9H)，1.32(m，2H)，1.21(m，1H)。
步骤3.3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(5.1g，15mmol)在CH3CN(150mL)中的溶液中添加NaH(1.8g，45mmol)。搅拌混合物1小时。然后使混合物冷却至-40℃，逐滴添加溴乙腈(5.4g，45mmol)。使混合物逐渐升温至0℃。重复添加NaH和溴乙腈三次。用H2O猝灭混合物，用CH2Cl2萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到粗3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(6.5g，100％)。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-4-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.28g，6mmol)溶解在无水THF(50mL)中，将溶液在氮下加热至回流。逐滴添加10M BH3.Me2S(1.8mL，18mmol)在THF中的溶液，并在回流下连续搅拌过夜。使得到的溶液冷却至0℃，逐滴添加CH3OH以猝灭反应。溶剂的蒸发产生粗3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-4-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(2g，收率87％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤5.3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-4-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1g，2.6mmol)和DMAP(79mg，0.62mmol)在干CH2Cl2(20mL)中的溶液中添加Et3N(657mg，6.5mmol)。使得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(1.22g，13mmol，5当量)的溶液。添加后，在室温下搅拌反应混合物1-2小时。加水(20mL)猝灭反应。水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取，合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，其通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(3-氯-4-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(50mg，收率4.3％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)7.27(m，1H)，7.12(m，2H)，4.30(s，1H)，3.91(d，2H)，3.66(s，3H)，3.10-3.40(m，5H)，2.90(m，1H)，1.75(s，1H)，1.55(d，1H)，1.46(s，9H)，1.33(m，2H)，1.04(m，1H)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)3-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(5-氟-2-甲基苯基)溴化镁。
2)3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，在步骤1中使用(3-氯-5-氟苯基)溴化镁。
制备例35 3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(乙氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氯-5-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在室温和氮气下将1-溴-3-氯-5-氟-苯(31.5g，0.15mol)在无水THF(120mL)中的溶液逐滴添加到Mg(5.4g，0.22mol)上。将混合物在50-60℃下搅拌1小时，直到大多数镁被消耗。得到的格氏试剂用于下一步。在-78℃和氮气下将格氏试剂逐滴添加到3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20.4g，0.075mol)在无水THF(200mL)中的溶液中。添加后，在室温下搅拌混合物1.5小时。用饱和NH4Cl溶液(300mL)猝灭混合物，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-氯-5-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(25g，98％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤2.3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向1M在甲苯中的R-CBS-

唑硼烷(11mL，11mmol，0.15当量)和10M在THF中的BH3(7.3mL，73mmol，1.0当量)的溶液中逐滴添加3-(3-氯-5-氟苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(25g，73mmol)在无水THF(50mL)中的溶液。添加后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下小心逐滴添加甲醇(100mL)。减压除去溶剂，得到粗产物。将粗产物溶解在EtOAc中，直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)，用旋转蒸发器除去溶剂直到出现少量晶体。在搅拌下向上述溶液中添加石油醚(大约300mL)，在室温下搅拌2小时，然后过滤，用石油醚洗涤晶体，并且重结晶数次，得到纯3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(9.2g，37％)。1H NMR(DMSO，400MHz)7.44(d，1H)，7.38(s，1H)，7.30(d，1H)，4.48(t，1H)，4.20(brs，1H)，3.98(d，1H)，2.73(s，2H)，1.70(s，2H)，1.48(s，10H)，1.36-1.39(m，2H)。
步骤3.3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.5g，10.2mmol)在CH3CN(140mL)中的溶液中添加NaH(1.2g，30.6mmol)。将混合物搅拌1小时。然后使混合物冷却至-20℃，逐滴添加溴乙腈(3.6g，30.6mmol)。使混合物逐渐升温至0℃。以相同的方式添加另外一批NaH和溴乙腈。用H2O猝灭混合物，用CH2Cl2萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到粗3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.4，100％)。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-5-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.4g，10.2mmol，粗)溶解在无水THF(60mL)中，将溶液下氮气下加热至回流。逐滴添加10M BH3.Me2S(3mL，30.6mmol)在THF中的溶液，并在回流下继续搅拌过夜。使得到的溶液冷却至0℃，逐滴添加，CH3OH猝灭反应。蒸发溶剂，得到粗产物，经二氧化硅柱纯化，得到3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-5-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.1g，收率28％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤5.3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(乙氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯-5-氟苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.1g，2.85mmol)在干CH2Cl2(20mL)中的溶液中添加Et3N(2mL)。使得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸乙酯(615mg，5.7mmol)在干CH2Cl2(2mL)中的溶液。添加后，在室温下搅拌反应混合物1-2小时。加水(20mL)以猝灭反应。水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取，合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(乙氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.3mg，100％)。1H NMR(CD3OD，400MHz) 7.01(d，2H)，6.87(d，1H)，4.32(m，2H)，4.09(m，2H)，3.92(m，2H)，3.33(m，5H)，1.75(s，1H)，1.55(m，1H)，1.43(s，9H)，1.34(m，2H)，1.23(t，3H)，1.09(t，1H)。
制备例36 3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯
步骤1.3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-78℃和氮气下向1-溴-3-氯苯(100g，0.52mol)在无水THF(550mL)中的溶液中逐滴添加2.5Mn-BuLi在己烷中的溶液(210mL，0.52mol)。于-78℃搅拌1小时后，逐滴添加3-(甲氧基(甲基)氨甲酰)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(120g，0.44mol)在无水THF(500mL)中的溶液。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。用饱和NH4Cl溶液(500mL)猝灭混合物，用EtOAc(3×400mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(178g)，其在不纯化的情况下直接用于下一步骤。
步骤2.3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在-15℃和氮气下向3-(3-氯苯甲酰基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(178g，0.55mol)在无水THF(600mL)中的溶液中逐滴添加1MR-CBS-

唑硼烷在甲苯中的溶液(82mL，82mmol，0.15当量)。于-15℃搅拌1小时后，逐滴添加10M BH3在THF中的溶液(60mL，0.60mol，1.1当量)。添加后，在-15℃下搅拌反应混合物2小时。在-15℃下小心逐滴添加甲醇(400mL)。减压除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用EtOAc/己烷(1∶30→1∶15)洗脱，得到浅黄色油(95g，HPLC≥70％，比例≥3∶1)。将混合物溶解在EtOAc中直到醇恰好溶解(大约5mL/1g)，利用旋转蒸发器除去溶剂，直到出现少量晶体。将溶液缓慢冷却至室温，放置1-2小时。向上述溶液中添加己烷(大约300mL)，然后过滤，用冷己烷洗涤晶体，并额外重结晶两次，得到纯3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(20g，ee≥99％)。
步骤3.3-((R)-(3-氯苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 在0℃下向3-((R)-(3-氯苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(32.5g，0.1mol)在MeCN(325mL)中的溶液中添加NaH(12g，0.3mol)。将混合物在室温下搅拌1小时。使混合物冷却至-40℃，然后分次添加溴乙腈(35.7g，0.3mol)。将混合物在室温下搅拌0.5小时。反应完成后，用饱和NH4Cl猝灭。用CH2Cl2萃取混合物。有机层用Na2SO4干燥，浓缩。粗3-((R)-(3-氯苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯不进行进一步的纯化用于下一步骤。
步骤4.3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 将3-((R)-(3-氯苯基)(氰基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(23g，0.04mol)溶解在无水THF(300mL)中，将溶液在氮气下加热至回流。逐滴添加BH3.Me2S(12mL，0.12mol)在THF中的溶液，继续在回流下搅拌过夜。让得到的溶液冷却至室温，逐滴添加MeOH以猝灭反应。蒸发溶液后，获得粗3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯，其不进行纯化用于下一步骤。
步骤5.3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(2-氨基乙氧基)(3-氯苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(7.7g，21mmol)和DMAP(1.27g，10mmol，0.5当量)在干CH2Cl2(120mL)中的溶液中添加Et3N(6.38g，8.45mL，63mmol)。使得到的混合物在冰水浴中冷却至0-5℃，逐滴添加氯甲酸甲酯(9.88g，8.1mL，104.5mmol，5当量)在干CH2Cl2(50mL)中的溶液。添加后，在0-5℃下搅拌反应混合物1-2小时。用水(80mL)猝灭反应。水层用CH2Cl2(3×50mL)萃取，合并的有机层用10％柠檬酸(2×80mL)和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩为粗产物，通过制备HPLC纯化，得到3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.4g，五步的总收率为41％)。
步骤6.3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯 向3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(3g，7.04mmol)在MeOH(60mL)中的溶液中添加湿Pd(OH)2/C(300mg)。在50℃和50psi的氢下搅拌反应混合物3小时。过滤悬浮液，滤液在真空下浓缩氢。通过制备HPLC纯化粗产物，得到3-((R)-(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)(苯基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(1.4g，51％)。1H NMR(CD3OD)7.40-7.22(m，5H)，4.20(m，1H)，4.01(m，1H)，3.81(m，1H)，3.6(s，3H)，3.27(m，3H)，2.84(m，2H)，1.8-1.5(m，2H)，1.45(s，9H)。MS ESI+ve m/z 393(M+1)。
制备例A2 以下化合物利用与以上制备例W1所述类似的程序制备 1)4-((r)-5-(环己基氧基)-5-氧代-2-((R)-2-氧代-4-苯基

唑烷-3-羰基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，在步骤5中使用(R)-4-苯基-2-

唑烷酮，在步骤6中使用丙烯酸环己酯。
2)4-((R)-5-乙氧基-5-氧代-2-(甲苯磺酰基氧基甲基)戊基)-2，2-二甲基

唑烷-3-羧酸(S)-叔丁酯，在步骤5中使用(R)-4-苯基-2-

唑烷酮，在步骤6中使用丙烯酸乙酯。
3)2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸(S)-苄酯，在步骤1中使用氯甲酸苄酯。
制备例B2 (S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯
步骤1.四氢-2H-吡喃-3-醇 在氮气氛和0℃下向3，4-二氢-2H-吡喃(126g，1.5mol)在干THF(1350mL)中的溶液中添加B2H6在Me2S中的溶液(10M，75mL，0.75mol)。在该温度下搅拌将混合物3小时，然后在25℃下再搅拌2小时。使混合物升温至40-45℃，添加NaOH水溶液(3N，390mL)和H2O2(30％，270mL)。搅拌2小时后用饱和盐水猝灭反应。过滤混合物，滤液用EtOAc(3×300mL)萃取。有机相用Na2S2O3水溶液(3×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到四氢-2H-吡喃-3-醇(72.8g，48％)。1H NMR(CD3OD)3.7-3.6(m，4H)，3.6-3.5(m，1H)，3.4-3.3(m，1H)，1.9-1.7(m，2H)，1.6-1.5(m，2H)。
步骤2.二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮 向四氢-2H-吡喃-3-ol(30g，0.29mol)在干CH2Cl2(900mL)中的溶液中添加

分子筛(30g)和PCC(94.9g，0.44mol)。将混合物在室温下搅拌过夜。当反应结束时，将混合物通过celite过滤，用Na2SO4干燥，真空浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮(23g，76％)。1H NMR(CD3OD)3.9(s，2H)，3.8-3.7(t，2H)，3.7-3.6(m，4H)，2.5-2.4(m，2H)，2.0-1.9(m，2H)。
步骤3.3-(二氢-2H-吡喃-3(4H)-亚基)丙-1-醇 在0℃和氮气氛下向

盐(69g，1.5eg)在干THF(1100mL)的悬浮液中加入n-BuLi(2.5M，111mL，0.413mol)。搅拌溶液1小时，随后添加二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮(11.5g，0.115mol)。在室温下继续搅拌过夜。用饱和NH4Cl水溶液猝灭混合物，然后过滤。滤液用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，粗产物通过柱色谱法纯化，得到3-(二氢-2H-吡喃-3(4H)-亚基)丙-1-醇(11.2g，69％)。1H NMR(CD3OD)δ4.2-3.9(d，2H)，)，3.8-3.5(m，4H)，2.4-2.2(m，4H)，5.3-5.2(d，1H)，2.1-1.8(s，1H)，1.8-1.6(m，2H)。
步骤4.3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇 向化合物3-(二氢-2H-吡喃-3(4H)-亚基)丙-1-醇(11.2g，0.0789mol)在甲醇(200mL)中的溶液中添加Pd(OH)2/C(1.12g)。除去反应瓶中的气体，充入H2。继续搅拌，直到原料消失。当反应结束时，混合物通过celite过滤，滤饼用MeOH(2×10mL)洗涤。合并的有机层用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(10.35g，收率91％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。1H NMR(CD3OD)δ3.9-3.8(m，1H)，3.7-3.6(m，2H)，3.5-3.4(m，1H)，3.3(m，1H)，3.1-2.9(t，1H)，2.6-2.4(m，1H)，2.3-1.8(m，3H)，1.6-1.4(m，4H)，1.3-1.0(m，2H)。
步骤5.3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙醛 向3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(10.35g，0.0719mol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液中添加Dess-Martin Periodinane(61.24g，0.1438mol)。将混合物在室温下搅拌。当反应结束时，将溶液倾入Et2O(300mL)中，加入无水K2CO3(19.84g，0.1438mol)。过滤混合物，滤液用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，该粗产物通过柱色谱法纯化，得到3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙醛(8.25g，80％)。
步骤6.1-((2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)肼-1，2-二羧酸二苄酯 在0℃下向搅拌的3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙醛(8.25g，0.058mol)和偶氮二羧酸二苄酯(94％，12.3g，0.041mol)在MeCN(250mL)中的溶液中添加(R-脯氨酸)(0.47g，0.0041mol)。在0℃下搅拌混合物15小时后，加入乙醇(100mL)和NaBH4(1.56g，0.041mol)，并将混合物在0℃下搅拌40分钟。通过缓慢添加10％柠檬酸水溶液(15ml)猝灭反应，真空浓缩整个溶液。该残余物用EtOAc(200ml)稀释，用饱和盐水(1×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，该粗产物通过柱色谱法纯化，得到1-((2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)肼-1，2-二羧酸二苄酯(14.68g，81％)。
步骤7.(2S)-2-肼基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇 向1-((2S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基)肼-1，2-二羧酸酯(14.68g，0.0332mol)在甲醇(250mL)中的溶液中添加Pd(OH)2/C(1.47g)。除去反应瓶中的气体，充以H2。继续搅拌，直到原料消失。当反应结束时，混合物通过celite过滤，滤饼用MeOH(2×20mL)洗涤。合并的有机溶剂用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到(2S)-2-肼基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(5.79g，94％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤。
步骤8.(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇 向(2S)-2-肼基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(5.79g，0.033mol)在MeOH(100mL)中的溶液中加入阮内镍。除去烧瓶中的气体，并装备氢膨胀的气球。将该烧瓶浸入盛有水的超声浴中，在室温下超声处理4小时，直到原料被完全消耗。然后使混合物通过celite过滤，滤饼用MeOH(2×30mL)洗涤。减压去除得到(2S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-1-醇(5.4g，90％)。
制备例C2 (S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯
步骤1.(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 将(S)-叔丁基-2，2-二甲基-4-(((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)

唑烷-3-羧酸酯(9g，30.1mmol)溶解在80％CH3CO2H水溶液(90ml)中。在50℃下搅拌溶液1.5小时并减压蒸发至干。将残余物溶解在Et2O(150ml)中，用饱和NaHCO3(4×100mL)洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂，得到油状物(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.2g，79.5％)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤2.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基甲磺酸酯 在0℃下向(S)-1-羟基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(6.2g，23.9mmol)和三乙胺(7.25g，71.8mmol)在CH2Cl2的溶液中逐滴添加甲磺酰氯(5.5g，47.8mmol)。在室温下搅拌反应混合物直到原料消失。用冰冷的水猝灭反应，并用CH2Cl2(3×100ml)萃取。用水(3×50ml)洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，得到(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基甲磺酸酯(9g)，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。
步骤3.(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯 向MeNH2的乙醇溶液(100mL)中加入(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(9g，26.7mmol)。将混合物在30-40℃下搅拌过夜。当反应完成时，浓缩溶液，得到(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(10g)，其在不进行纯化的情况下用于进一步的反应。
步骤4.1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯 将固体1-[2-三甲基硅烷基)乙氧基羰基氧基]吡咯烷-2，5-二酮(9.5g，36.7mmol)添加到剧烈搅拌的(S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(10g，36.7mmol)、K2CO3(15.1g，110.1mmol)、H2O(50mL)和CH2Cl2(100mL)的双相溶液中。在室温下搅拌反应液2小时后，使反应液吸收到65mL CH2Cl2中。用NaHCO3水溶液(3×50mL)和盐水(3×50mL)洗涤溶液，然后用Na2SO4干燥.有机层在真空下浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱法纯化，得到1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯(6g，46.2％)。
步骤5.(S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯 向1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基氨基甲酸(S)-叔丁酯(6g，14.4mmol)在Et2O(100mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸(2.8g，14.4mmol)在13.0mL无不EtOH中的溶液。将该溶液置于旋转蒸发器上，在环境温度下除去Et2O。然后将烧瓶降至60℃水浴中，在2小时内蒸发剩余的溶剂，得到白色固体。使固体冷却至室温并溶解在80mL 1∶1EtOH∶H2O混合物中。用5∶1己烷∶EA(3×10mL)洗涤，用1N NaOH(pH＞10)碱化，并用Et2O(3×50mL)萃取。合并的Et2O萃取物用盐水洗涤(3×5mL)，用Na2SO4干燥，在真空下浓缩，得到(S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯3.3g(72％)。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)(S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯，在步骤2中使用(S)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。
实施例29 甲基2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将3-((R)-(3-氯苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.86g，11.4mmol)溶解在20％(V/V)TFA/CH2Cl2的溶液(10mL)中。反应混合物在室温下搅拌1小时。在真空中除去溶剂，得到作为TFA盐的甲基2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯(4.8g，100％)，其在不进行纯化的情况下直接用于下一步骤。
步骤2.甲基2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸酯 在0℃下，向(S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(1.9g，6mmol)和DIPEA(3.87g，30mmol)在无水CH2Cl2(20mL)中的溶液中添加CDI(1.26g，7.8mmol)。添加后，将混合物在0℃下搅拌1小时，然后添加在无水CH2Cl2(20mL)中的作为TFA盐的2-((R)-(3-氯苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(2.8g，6.6mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。反应完成后，在真空中除去溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化产物，用石油醚/EtOAc(5∶1→2∶1)洗脱，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(3.0g，75％收率)。
步骤3.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯.三氟乙酸盐 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(2.9g，4.34mmol)和TEAF(1.42g，9.6mmol)溶解在CH3CN(40mL)中。反应混合物在回流下加热20分钟。然后真空浓缩混合物。通过制备HPLC纯化残余物，得到作为TFA盐的2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(2.23g，83％)。
下列化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(间甲苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 2)2-((R)-(3-氯-4-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 3)2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸乙酯 4)2-((R)-(5-氯-2-甲基苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 实施例30 2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.(S)-1-(N-甲基-N-(三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸(4-硝基苯基)酯 用4-硝基苯基氯甲酸酯(0.4950g，2.45mmol，1.05当量)和0.600g(7.14mmol，3当量)NaHCO3处理(S)-2-氨基-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(0.7350g，2.32mmol，1.0当量，约7％非对映异构体杂质)在CH3CN(50mL)中的溶液。在室温下搅拌反应液3小时。利用

545过滤混合物。减压蒸发滤液，得到1.1647g(100％)(S)-1-(N-甲基-N-(三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸(4-硝基苯基)酯，在不进行纯化的情况下将其用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 504(M+Na)。
步骤2.2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将3-((R)-(3-氯-5-氟苯基)(2-(甲氧基羰基氨基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(0.1915g，0.43mmol)在TFA(4mL)和CH2Cl2(6mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。在真空中除去溶剂后，2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐不进一步纯化直接用于下一步骤中。MS ESI+ve m/z 345，347(M+1)。
将2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐(0.43mmol，1.0当量)、(S)-1-(N-甲基-N-(三甲基硅烷基乙氧基羰基)氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨基甲酸(4-硝基苯基)酯(0.2710g，0.56mmol，1.3当量)和DIEA(4mL)在CH2Cl2中的混合物在室温下搅拌19小时。在真空中除去溶剂后，将粗产物通过反相HPLC(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，70％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3CO2H，8min，然后90％CH3CN/H2O，0.1％CF3CO2H，2min，流速25mL/min)纯化，得到0.2840g(96％)产物，为非对映异构体的混合物。MS ESI+ve m/z 687，689(M+1)。进一步通过手性HPLC(CHIRALPAK AD-H，1cm

x 25cm，10％在己烷中的IPA，含0.025％二乙胺，流速4mL/min)分离该混合物，得到四个级分，比例为49.8(tR＝11.00min)∶4.8(tR＝12.77min)∶43.3(tR＝13.97min)∶2.1(tR＝16.23min)。其中，两个主要级分[2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(11min)和2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(13.97min)，在胺手性中心处归为S构型，另外两个次要级分[2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((3R)-1-((R)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯异构体1(12.77min)和2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((3R)-1-((R)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯异构体2(16.23min)，在胺手性中心处归为R构型，这是基于这种二胺的立体选择性合成。3-吡喃部分的手性中心最终通过第三级分的对称合成而确定。然而，对于两个次要级分，3-吡喃部分的手性中心没有通过对称合成证实。
步骤3.2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(0.0948g)在TFA(5mL)和CH2Cl2(10mL)中的溶液在室温下搅拌2.5小时。在真空中除去溶剂后，粗产物通过反相HPLC(

Luna 5μC 18(2)100A，250×21.20mm，5微米，10％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3CO2H，13min，流速25mL/min)纯化，得到0.0928g 2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐。
2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯、2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((3R)-1-((R)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯异构体1、2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((3R)-1-((R)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯异构体2如上所述制备。
以下化合物按照与以上所述类似的程序制备 1)2-((R)-(3，5-二氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 2)2-((R)-(3，5-二氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 3)2-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 4)2-((R)-(5-氟-2-甲基苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 5)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 实施例31 2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯和2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-(3-氟苯基)((3R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 在冰浴中向2-(三甲基硅烷基)乙基(S)-2-氨基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙基(甲基)氨基甲酸酯(300mg，0.95mmol)和CDI(154mg，0.95mmol)在无水CH2Cl2(20mL)中的溶液中添加DIEA(612mg，4.7mmol)。添加后，将混合物在0℃下搅拌1小时，然后添加到{2-[(3-氟-苯基)-哌啶-3-基-甲氧基]-乙基}-氨基甲酸甲酯(245mg，0.79mmol)在无水CH2Cl2(25mL)中的溶液中。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。反应完成后，在真空中除去溶剂。通过制备TLC纯化产物，得到2-((R)-(3-氟苯基)((3R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(258mg，50％收率)。
步骤2.2-((R)-(3-氟苯基)((3R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 用TEAF(192mg，0.87mmol)处理2-((R)-(3-氟苯基)((3R)-1-((S)-1-(N-甲基-2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(258mg，0.40mmol)在MeCN(25mL)中的溶液，在回流下搅拌1小时。真空浓缩混合物，通过制备HPLC纯化，得到作为三氟乙酸盐的2-((R)-(3-氟苯基)((3R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(162mg，81％收率)。
步骤3.2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯和2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 用1M NaOH(2mL，2x)洗涤作为三氟乙酸盐的2-((R)-(3-氟苯基)((3R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯在CH2Cl2(5mL)中的溶液。用CH2Cl2(1mL，3x)萃取水层，合并的有机部分用水、盐水洗涤，并用硫酸钠干燥。蒸发滤液，得到游离碱。通过手性HPLC(CHIRALPAKAD-H，1cm

x 25cm，10％IPA，在含0.025％二乙胺的己烷中，流速4mL/min)分离粗产物，得到两种异构体2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(78.57mg，tR＝20.70min)和2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(90.9mg，tR＝29.63min)。
步骤4.2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯富马酸盐 用富马酸(16.3mg，0.14mmol)处理2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(71.2mg，0.14mmol)的乙醇溶液。在真空中除去溶剂，将残余物再溶解于水中。利用干冰-丙酮浴冷冻溶液，置于冻干机中，得到2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯富马酸盐(87.46mg)，为白色固体。
步骤5.2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯富马酸盐 用富马酸(19.8mg，0.17mmol)处理2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(87.2mg，0.17mmol)的乙醇溶液。在真空中除去溶剂，将残余物再溶解于水中。利用干冰-丙酮浴冷冻溶液，置于冻干机中，得到2-((R)-(3-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯富马酸盐(106.8mg)，为白色固体。
实施例32 2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯
步骤1.2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯(0.0027g)、HCO2NH4(0.7350g)和10％Pd/C(0.0545g)在MeOH中的混合物在室温下搅拌3小时。过滤混合物，沉淀物通过过滤剂

545过滤并且用MeOH洗涤。减压蒸发溶剂后，通过反相HPLC(

Luna 5μC18(2)100A，250×21.20mm，5微米，10％→90％CH3CN/H2O，0.1％CF3COOH，13min，流速25mL/min)纯化粗产物，得到2-((R)-((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐。MS ESI+ve m/z 491(M+1)。
实施例33 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯富马酸盐
步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯 用10mL 1N NaOH处理2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的TFA盐(2.2300g，3.49mmol)。用CH2Cl2(4×)萃取混合物并用K2CO3干燥，在真空中除去溶剂后，将残余物溶解于Et2O中，并通过HPLC过滤器过滤。减压蒸发滤液，在真空中干燥残余物，得到1.6806g(3.20mmol，92％)2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，为游离碱。1H NMR(CD3OD，400MHz)7.27-7.13(m，4H)，4.05(br d，J＝13.5Hz，1H)，3.92(d，J＝9.1Hz，1H)，3.89-3.83(m，2H)，3.79-3.70(m，2H)，3.53(s，3H)，3.32-3.26(m，1H)，3.18-3.13(m，4H)，3.01(dd，J＝10.8，10.0Hz，1H)，2.88-2.75(m，2H)，2.53-2.44(m，2H)，2.29(s，3H)，1.78-1.47(m，6H)，1.30-1.03(m，6H)。
步骤2.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯富马酸盐 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的游离碱(1.6806g，3.20mmol)和富马酸(0.3713g，3.20mmol)溶解在EtOH中，减压蒸发溶液。将残余物溶解于H2O中，在干冰-丙酮浴中冷冻，通过冻干干燥，得到2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的富马酸盐，为白色粉末。1H NMR(CD3OD，400MHz)7.27-7.13(m，4H)，6.59(s，1.76H)，4.04(br d，J＝12.0Hz，1H)，3.99-3.96(m，1H)，3.92(d，J＝9.1Hz，1H)，3.82-3.73(m，3H)，3.53(s，3H)，3.35-3.28(m，1H)，3.18-3.12(m，4H)，3.03(dd，J＝10.8，10.0Hz，1H)，2.97(dd，J＝12.6，3.5Hz，1H)，2.93-2.78(m，3H)，2.62(s，3H)，1.79-1.48(m，6H)，1.45-1.02(m，6H)。
实施例34 2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯L-酒石酸盐 步骤1.2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯L-酒石酸盐 将2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的游离碱(0.28g，0.53mmol)和L-酒石酸(84.4mg，0.56mmol，99.5％)溶解在乙醇(5mL)中，得到澄清溶液。在真空中除去溶剂至干，在35℃下将残余物再溶解在95％乙醇∶MeCN(3∶97v/v)(10.5mL)中。添加晶种，在35℃下将得到的溶液搅拌2小时，然后缓慢冷却至室温，并搅拌48小时。过滤得到的白色晶体，用MeCN(2×5mL)洗涤，得到1∶1的2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯的L-酒石酸盐(0.31g，84％)。选择的1H NMR(CD3OD，400MHz，)7.36(m，3H)，7.22(d，1H)，4.40(s，2H)，4.18-4.00(m，3H)，3.86(m，3H)，3.62(s，3H)，3.40(m，1H)，3.24(m，3H)，3.18-2.84(m，5H)，2.72(s，3H)，1.90-1.08(m，12H)；mp＝122-127℃.MS ESI+ve m/z 525(M+1)。
图1中示出了两批1∶1的2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(甲基氨基)-3-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯L-酒石酸盐的X-射线粉末衍射。
以下是本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂。化合物名称借助

8.0和9.0版(CambridgeSoft Corporation，100CambridgePark Drive，Cambridge，MA 02140USA)产生。当化合物名称中未定义手性中心处的立体化学时，表示制备的样品含有该中心处的异构体的混合物。
式(I*)的化合物的表 式(I)的化合物的表 以下是本发明的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的实施例。当在化合物名称中未定义手性中心处的立体化学时，这表明制备的样品含有该中心处异构体的混合物。
式(XL)化合物的表 式(L)的化合物的表 对于包括化合物XL1-8和X-1-10的表，注释“a”和“b”具有以下含义 a.LC-MS(3分钟)法 柱Chromolith SpeedRod，RP-18e，50×4.6mm；流动相A0.01％TFA/水，B0.01％TFA/CH3CN；流速1mL/min；梯度 b.d4-MeOH用作1H NMR溶剂。
药理学方法 体外活性研究 公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂具有酶抑制性质。尤其是，它们抑制天然酶肾素的作用。后者从肾脏进入血液中，在血液中它发挥裂解血管紧张素原的作用，释放十肽血管紧张素I，血管紧张素I然后在血液、肺、肾和其它器官中被血管紧张素转化酶裂解，形成八肽血管紧张素II。该八肽既直接通过与其受体结合，引起动脉血管收缩，又间接通过从肾上腺释放钠离子保留性激素醛固酮，伴随细胞外液容量增加，来增加血压。可将该增加归因于血管紧张素II的作用。肾素酶活性的抑制剂使得血管紧张素I的产生减少。作为结果，产生较少量的血管紧张素II。该活性肽激素的浓度降低是肾素抑制剂降血压作用的直接原因。
荧光测定 通过测量内部猝灭的肽底物荧光增加的试验，在实验上证实了肾素抑制剂在体外的作用。该肽的序列对应于人血管紧张素原的序列。使用了下面的试验方案。所有反应都在平底白色不透明微量滴定板中进行。将192μL测定缓冲液(50mM BES，150mM NaCl，0.25mg/mL牛血清白蛋白，pH7.0)中的4μL等分试样的400μM肾素底物(DABCYL-γ-Abu-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Thr-EDANS)添加到不同浓度的DMSO中的4μL试验化合物中，终浓度为10μM至1nM。接下来，添加测定缓冲液中的100μL胰蛋白酶激活的重组人肾素(最终酶浓度为0.2-2nM)，并通过吸移混合溶液。使用Perkin-Elmer Fusion平板读数器，在室温测量495nm(在340nm发射)处的荧光增加历时60-360分钟。然后测定作为时间函数的荧光增加的曲线图的线性部分的斜率，并将该斜率用于计算相对于未抑制的对照的百分比抑制。将百分比抑制值作为抑制剂浓度的函数作图，并从该数据与四参数方程式的拟合中测定IC50。将该IC50定义为相对于不含抑制剂的对照样品，减少产物形成50％的特定抑制剂的浓度。在体外系统中，公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂在大约5×10-5M至大约10-12M的最小浓度下，表现出抑制活性。特定的天冬氨酸蛋白酶抑制剂在大约10-7M至大约10-12M的最小浓度下，表现出抑制活性。(WangG.T.等人.Anal.Biochem.1993，210，351；Nakamura，N.等人.J.Biochem.(Tokyo)1991，109，741；Murakami，K.等人.AnalBiochem.1981，110，232)。
血浆测定 通过在存在所述化合物的情况下观察到的血浆肾素活性(PRA)水平的降低，在实验上证实了人血浆中肾素抑制剂的体外作用。孵育混合物包含在最终体积为250μL的95.5mM N，N-双(2-羟基乙基)-2-氨基乙磺酸，pH 7.0，5mM EDTA，0.1mM硫酸新霉素，1mg/mL叠氮化钠，1mM苯甲磺酸氟，2％DMSO和87.3％的合并混合性别人血浆中，用EDTA稳定。对于具有低PRA(小于1ng/ml/hr)的血浆批次，添加约2pM的重组人肾素以达到3-4ng/ml/hr的PRA。在37℃进行血浆中内源性血管紧张素原的裂解90分钟并使用Diosorin PRA试剂盒，通过竞争性放射免疫测定法，测定产物血管紧张素I。将含有2％DMSO的未抑制的孵育物和含有2μM异戊酰-Phe-Nle-Sta-Ala-Sta-OH的完全抑制的对照用于产生每个抑制剂浓度的抑制百分比并将剂量-反应数据拟合成四参数模型，从该模型中测定被定义为发生50％抑制时的抑制剂浓度的IC50值。
结果 对本发明的化合物进行了体外酶活性研究，数据在下面显示 化合物I-1a至I-76a对于肾素(荧光测定)具有大约5,000nM至大约0.001nM的IC50。其中许多化合物具有大约50nM至大约0.001nM的IC50；另外一些为大约5nM至大约0.001nM。
*表示低于50nM；**表示低于20nM；***表示低于10nM；****表示低于1nM；#表示大于50nM；NA＝未获得 式(XL)的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的体外IC50和PRA数据 *表示低于50nM；**表示低于20nM；***表示低于10nM；****表示低于1nM。
对化合物L-1、L-2a、L-2b、L-3a、L-3b、L-3c、L-3d、L-4a，L-4b、L-5a、L-5b、L-6a、L-6b、L-7、L-8、L-9和L-10进行体外酶活性研究，数据显示在下表中。
式(L)的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的体外IC50和PRA数据 *表示低于50nM；**表示低于20nM；***表示低于10nM；****表示低于1nM。
体内活性研究 在钠缺失的、血压正常的食蟹猴和在钠缺失的、血压正常的比格狗中，单次口服和静脉内给予试验化合物后，评价了选择性肾素抑制剂的心脏和系统血液动力学功效。通过自由运动、有意识的动物中遥测术，监测动脉血压。
食蟹猴在研究中使用六只雄性幼稚的食蟹猴，体重2.5至3.5kg。在实验前至少4周，用盐酸氯胺酮(15mg/kg，肌肉内)和盐酸甲苯噻嗪(0.7mg/kg，肌肉内)将猴麻醉，并将传感器(型号#TL11M2-D70-PCT，Data Sciences，St.Paul，MN)植入其腹腔。将压力导管经由股动脉插到下腹部主动脉中。将双潜能导联以导联II形状放置。在恒温(19-25℃)、湿度(＞40％)和光照条件(12小时光和暗循环)下圈养动物，每天进食一次并允许其自由获得水。通过在实验前喂以它们低钠饮食(0.026％，Expanded Primate Diet 829552MP-VENaCl(P)，Special Diet Services，Ltd.，UK)7天，使动物钠缺失，并在给予试验化合物前-40小时和-16小时时，给予呋塞米(3mg/kg，肌内，AventisPharmaceuticals)。
对于口服给药，将肾素抑制剂配制在0.5％甲基纤维素中，剂量水平为10和30mg/kg(5mL/kg)，通过婴儿喂养管进行。对于静脉内给药，将硅橡胶导管经由股静脉插到后腔静脉中。将导管经由系绳和旋转接头与递送泵连接。通过连续输注(1.67mL/kg/h)或通过一次性推注(2分钟内3.33mL/kg)给予试验化合物(剂量水平为0.1-10mg/kg，以5％葡萄糖配制)。
使用DataquestTM A.R.T.(Advanced Research Technology)软件，分别在500Hz和50Hz连续记录动脉血压(收缩、舒张和平均)和体温。由阶段性血压描记法产生心率。在记录期间，将猴保持在没有人存在的单独房间中，以避免继发于应激的血压变化。将所有数据表示为平均值±SEM。通过ANOVA，考虑剂量和时间因素，与载体组对比，评价肾素抑制剂对血压的作用。
比格狗在研究中使用非幼稚比格狗(每种性别2只)，体重在9-11kg之间。将每只动物皮下植入遥测术传感器(Data Sciences)并将血压导管插到左股动脉内。还将心电图导联皮下穿过至适合的解剖区域。在恒温和光照条件下圈养动物，每天喂食一次并允许它自由获得水。通过在实验前10天开始，以低钠饮食(＜4meq/天，来自Hill’s Pet Products的犬罐装Prescription Diet canine h/d和来自Bio-Serv Inc.，Frenchtown，NJ的干颗粒的混合物)喂养它们而产生钠缺失状态，并在施用试验化合物前-40和-16小时时，给予呋塞米(3mg/kg肌肉内；Aventis Pharmaceuticals)。
对所有禁食过夜的动物，以30mg/kg(4mL/kg，配制在0.5％甲基纤维素中)的剂量水平，通过口胃管饲法经口给予肾素抑制剂。给药后4小时给予食物。在一些实验中，以1、3和6mg/kg(2、6和20mg/mL，配制在无菌盐水中)的增加剂量水平，通过静脉内一次性推注给予肾素抑制剂。在给药前至少80分钟和给药后3小时，接着在给药后每10分钟历时5小时和每30分钟历时16小时，连续收集心血管参数。使用来自DSI(Data Sciences International)的DataquestTM ART(2.2版)软件包，收集遥测的心血管数据。
双转基因大鼠还在双转基因大鼠中体内评价了肾素抑制剂的功效，该转基因大鼠被工程改造以表达人肾素和人血管紧张素原(Bohlender J，Fukamizu A，Lippoldt A，Nomura T，Dietz R，Menard J，Murakami K，Luft FC，Ganten D.High human renin hypertension intransgenic rats.Hypertension 1997，29，428-434)。化合物7的体内活性按照以下步骤测定。
在6周龄双转基因大鼠(dTGRs)中进行实验。较早详细描述了该模型。简言之，用于产生转基因动物的人肾素构建体组成整个基因组人肾素基因(10个外显子和9个内含子)，具有3.0kB的5′-启动子区域和1.2kB的3′额外序列。人血管紧张素原构建体组成整个人血管紧张素原基因(5个外显子和4个内含子)，具有1.3kB的5′-侧序列和2.4kB 3′-侧序列。大鼠购自RCC Ltd(Füllinsdorf，瑞士)。在4周龄时手术植入无线遥测传感器。该遥测系统提供24小时收缩压、平均压、舒张动脉压(分别为SAP，MAP，DAP)和心率(HR)的记录。在第42天开始，将动物转移到遥测笼中。获得24小时遥测读数。然后在随后的连续4天(第43-46天)经口对大鼠给药。连续监测大鼠并允许它自由接触标准的0.3％-钠大鼠粮食和饮用水。
结果 化合物XL-7在双转基因大鼠体内的活性在图1中显示。如图1所示，化合物XL-7在10mg/kg剂量时表现出显著的降低双转基因大鼠血压的作用。
化合物L-6a在双转基因大鼠体内的活性在图2和3中显示。如图2所示，化合物L-6a在口服后在大鼠血浆中容易检测到，化合物L-6a的血浆浓度在24小时期限内保持相对较高，证明它具有出色的口服生物利用度和代谢稳定性。另外，如图3所示，化合物L-6a在10mg/kg剂量时也表现出显著的降低双转基因大鼠血压的作用。
权利要求
1.由以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
Z是-O-或-CH2-
X1是共价键、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-；
Y1是共价键或C1-C10亚烷基、C1-C10亚烯基或C1-C10亚炔基，其各自任选地在一个或多个可取代的碳原子处被卤素、氰基、羟基、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基取代，条件是只有当X1是共价键时Y1才是共价键；
R1是a)(C3-C7)环烷基；或b)苯基、杂芳基、或双环杂芳基，其任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自
1)氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，它们各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
R2是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)(NH2)、-C(S)(NH2)、-C(O)(NHR9)、-C(S)(NHR9)或-NHC(O)H，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基、或直链或支链C1-C5烷氧基烷基；
R3是-H、-F、C1-C5烷基、-NHC(O)R10、-OH或-OR10，其中R10是C1-C3烷基，条件是当R3是-F或-OH时，X1不是-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-且R1-Y1-X1不是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(O)SR9或-NHC(O)H；
Q是Q1、Q2、Q3、Q4、Q5或Q6
R4是H或(C1-C3)烷基；
R5和R6独立地是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)双环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基，或饱和杂环基(C1-C3)烷基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基，条件是R5和R6不都是H；
G是OH、NH2或NHR7；
R7是a)(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、或氨基羰基(C1-C6)烷基；或b)任选地被1-3个基团取代的苯基(C1-C2)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基；或c)R5和R7一起是-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、或-(CH2)4-，其任选地被1或2个基团取代，该取代基团独立地选自氟、(C1-C8)烷基、卤代(C1-C8)烷基、(C3-C6)环烷基、卤代(C3-C6)环烷基、羟基(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、卤代(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、羟基化(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、(C1-C8)烷氧基、卤代(C1-C8)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基和杂环基。
2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物由以下结构式代表
3.权利要求2的化合物，其中R5和R6之一是-H或甲基，另一个是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基或饱和杂环基(C1-C3)烷基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基。
4.权利要求3的化合物，其中R6是-H或甲基。
5.权利要求3的化合物，其中R5是-H或甲基。
6.权利要求2的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
7.权利要求6的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R11是氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
n是0、1、2或3；且
m是2或3。
8.权利要求7的化合物，其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
9.权利要求7的化合物，其中
R6是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R5是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R6和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
10.权利要求8的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
11.权利要求9的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
12.权利要求7的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
13.权利要求12的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
14.权利要求8的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
15.权利要求4的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
16.权利要求15的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R11是氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
n是0、1、2或3；且
m是2或3。
17.权利要求16的化合物，其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
18.权利要求17的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
19.权利要求16的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
20.权利要求19的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
21.权利要求20的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
22.权利要求4的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
23.权利要求22的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R11是氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
n是0、1、2或3；且
m是2、3或4。
24.权利要求23的化合物，其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
25.权利要求24的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
26.权利要求23的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
27.权利要求26的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
28.权利要求27的化合物，其中该化合物为选自下组的结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
29.权利要求4的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
30.权利要求29的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R11是氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
n是0、1、2或3；且
m是2或3。
31.权利要求30的化合物，其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基或R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
32.权利要求31的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
33.权利要求30的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
34.权利要求33的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
35.权利要求34的化合物，其中该化合物为选自下组的结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
36.权利要求4的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
37.权利要求36的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R11是氟、氯、溴、氰基、硝基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；或2)苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
n是0、1、2或3；且
m是2、3或4。
38.权利要求37的化合物，其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
39.权利要求38的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
40.权利要求37的化合物，其中该化合物为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
R5是(C1-C7)烷基、卤代(C1-C7)烷基、羟基(C1-C7)烷基、环己基甲基、卤代环己基甲基、羟基化的环己基甲基、2-(环己基)乙基、(C1-C2)烷基环己基甲基、二(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的(C1-C2)烷基环己基甲基、羟基化的二(C1-C2)烷基环己基甲基、(3-降金刚烷基)甲基或(四氢吡喃基)甲基；
R6是-H或甲基；
G是NH2或NHR7；
R7是甲基，或者R5和R7一起是任选地被C1-C4烷基或环己基取代的-(CH2)3-。
41.权利要求40的化合物，其中
R9是甲基或乙基；且
R11是氯、氟或甲基。
42.权利要求41的化合物，其中该化合物为选自下组的结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
43.(S)-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯；
(S)-4-(3-氯-5-氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯；
(S)-4-(3-氯-5-氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯；
(S)-4-(3-氯-2-氟苯基)-4-((R)-1-((S)-1-(反式-4-氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-羟丁基氨基甲酸甲酯；
(S)-4-乙酰氨基-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)丁基氨基甲酸甲酯；
(S)-4-(3-氯苯基)-4-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)-4-丙酰氨基丁基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-((R)-1-((S)-1-氨基-3-环己基丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-((R)-1-((2S，3R)-3-氨基-1-环己基丁-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(3-氯苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-((3R)-1-((2S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)(2，3-二氟苯基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-1-(3-氯苯基)-1-((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)乙氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-(3-氯-2-氟苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-(3-氯-2-氟苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-(3-氯-5-氟苯基)((R)-1-((S)-1-环己基-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(反式-4-氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；
2-((R)-(3-氯-2-氟苯基)((R)-1-((S)-1-(反式-4-氟环己基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯；和
2-((R)-(3-氯苯基)((R)-1-((S)-1-(3-降金刚烷基)-3-(甲基氨基)丙-2-基氨甲酰)哌啶-3-基)甲氧基)乙基氨基甲酸甲酯，或上述任一化合物的药学上可接受的盐。
44.一种药物组合物，其含有药学上可接受的载体或稀释剂和权利要求1-44任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
45.权利要求44的药物组合物，其进一步含有α-阻断剂、β-阻断剂、钙通道阻断剂、利尿剂、促尿钠排泄药、促尿盐排泄药、中枢作用的抗高血压药、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、双重ACE和中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管紧张素-受体阻断剂(ARB)、醛固酮合酶抑制剂、醛固酮-受体拮抗剂或内皮缩血管肽受体拮抗剂。
46.一种拮抗有此需要的受试者中的一种或多种天冬氨酸蛋白酶的方法，包括给受试者施用有效量的权利要求1-43中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
47.权利要求46的方法，其中所述天冬氨酸蛋白酶是肾素。
48.一种治疗受试者中的天冬氨酸蛋白酶介导的疾病的方法，包括给受试者施用有效量的权利要求1-43中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
49.权利要求48的方法，其中所述疾病是高血压、充血性心力衰竭、心脏肥大、心脏纤维化、梗塞后心肌病、肾病、血管病和神经病、冠状血管疾病、手术后高血压、血管成形术后再狭窄、眼内压升高、青光眼、异常血管生长、醛固酮过多症、焦虑状态、或认知障碍。
50.权利要求48的方法，其进一步包括施用一种或多种另外的药剂，该药剂选自α-阻断剂、β-阻断剂、钙通道阻断剂、利尿剂、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、双重ACE和中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管紧张素-受体阻断剂(ARB)、醛固酮合酶抑制剂、醛固酮-受体拮抗剂和内皮缩血管肽受体拮抗剂。
51.权利要求50的方法，其中所述天冬氨酸蛋白酶是β-分泌酶。
52.权利要求50的方法，其中所述天冬氨酸蛋白酶是疟原虫天冬氨酸蛋白酶。
53.权利要求50的方法，其中所述天冬氨酸蛋白酶是HIV蛋白酶。
54.由以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐
其中
Z是-O-或-(CH2)q-、其中q是0-3；
X1是共价键、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-；
Y1是共价键或C1-C10亚烷基、C1-C10亚烯基或C1-C10亚炔基，其各自任选地在一个或多个可取代的碳原子上被卤素、氰基、硝基、羟基、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基或卤代(C1-C3)烷氧基取代，条件是只有当X1是共价键时Y1才是共价键；
R1是(C3-C7)环烷基、苯基、杂芳基或双环杂芳基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自
氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基和(C1-C6)烷磺酰基；和苯基、杂芳基、苯氧基、杂芳基氧基、苯硫基、杂芳基硫基、苄基、杂芳基甲基、苄氧基和杂芳基甲氧基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)-烷氧基、卤代(C1-C3)烷氧基和氨基羰基；
R2是-NHC(＝NR12)(NH2)、-NHC(＝NR12)(NHR9)、
-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(S)OR9、-NHC(O)SR9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)(NH2)、-C(S)(NH2)、-C(O)(NHR9)、-C(S)(NHR9)或-NHC(O)H，其中R9是直链或支链C1-C5烷基、直链或支链C1-C5卤代烷基、(C3-C4)环烷基、或直链或支链C1-C5烷氧基烷基，且R12是H、(C1-C6)烷基、苯基、杂芳基、氰基、硝基、-S(O)R9、-S(O2)R9、-S(O2)NHR9、-S(O2)NR9R9、-C(O)R9、-C(S)R9、-C(O)OR9、-C(S)OR9、-C(O)(NH2)、-C(O)(NHR9)；
R3是-H、-F、C1-C5烷基、-NHC(O)R10、-OH或-OR10，其中R10是C1-C3烷基，条件是当R3是-F或-OH时，X1不是-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-，且R1-Y1-X1不是-OC(O)(NH2)、-OC(S)(NH2)、-SC(S)(NH2)、-SC(O)(NH2)、-OC(O)(NHR9)、
-OC(S)(NHR9)、-SC(S)(NHR9)、-SC(O)(NHR9)、-NHC(O)OR9、
-NHC(S)OR9、-NHC(S)SR9、-NHC(O)SR9或-NHC(O)H；
Q是Q1、Q2、Q3、Q4、Q5或Q6
R4是-H或(C1-C3)烷基；
R5是a)H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、或任选地被1-3个基团取代的饱和杂环基(C1-C3)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基；或b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基，或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基，其中s是1或2；
R6是a)-H、(C1-C10)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、卤代(C1-C10)烷基、羟基(C1-C10)烷基、卤代(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、卤代的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、羟基化的二(C1-C2)烷基(C4-C10)环烷基烷基、(C4-C10)二环烷基(C1-C3)烷基、(C8-C12)三环烷基(C1-C3)烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、卤代(C1-C5)烷硫基(C1-C5)烷基、或任选地被1-3个基团取代的饱和杂环基(C1-C3)烷基，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基；
或者b)苯基(C1-C2)烷基、苯氧基甲基或杂芳基(C1-C2)烷基，其各自任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、溴、氰基、硝基、羟基、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C4-C7)环烷基烷基、(C2-C6)烯基、(C5-C7)环烷基烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C6)环烷基(C2-C4)炔基、卤代(C1-C6)烷基、卤代(C3-C6)环烷基、卤代(C4-C7)环烷基烷基、卤代(C2-C6)烯基、卤代(C3-C6)炔基、卤代(C5-C7)-环烷基炔基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、(C4-C7)环烷基烷氧基、卤代(C1-C6)烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基、卤代(C4-C7)环烷基烷氧基、(C1-C6)烷磺酰基和氨基羰基，条件是R5和R6不都是-H；
G是OH、NH2或NHR7；且
R7是a)(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C4-C10)环烷基烷基、(C1-C5)烷氧基(C1-C5)烷基、或氨基羰基(C1-C6)烷基；或b)苯基(C1-C2)烷基，其任选地被1-3个基团取代，该取代基团独立地选自氟、氯、氰基、(C1-C3)烷基、卤代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基和卤代(C1-C3)烷氧基；或c)R5和R7一起是-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、或-(CH2)4-，其任选地被1或2个基团取代，该取代基团独立地选自氟、(C1-C8)烷基、卤代(C1-C8)烷基、(C3-C6)环烷基、卤代(C3-C6)环烷基、羟基(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、卤代(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、羟基化(C3-C6)环烷基(C1-C2)烷基、(C1-C8)烷氧基、卤代(C1-C8)烷氧基、(C3-C6)环烷氧基、卤代(C3-C6)环烷氧基和杂环基。
全文摘要
本发明涉及天冬氨酸蛋白酶抑制剂。本发明的某些天冬氨酸蛋白酶抑制剂为以下结构式代表的化合物或其药学上可接受的盐。本发明还涉及含有所公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的药物组合物。本发明进一步涉及拮抗有此需要的受试者中一种或多种天冬氨酸蛋白酶的方法，以及使用所公开的天冬氨酸蛋白酶抑制剂治疗受试者的天冬氨酸蛋白酶介导的疾病的方法。
文档编号C07D211/22GK101356156SQ200680050114
公开日2009年1月28日 申请日期2006年11月13日 优先权日2005年11月14日
发明者J·J·鲍德温, D·A·克莱尔蒙, C·泰斯, S·卡卡蒂安, L·W·迪拉德, A·V·伊什切恩科, 晶 苑, 徐振荣 申请人:生命医药公司