专利名称：：5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]-5-甲基-2,2-二苯基己酰胺的盐酸盐的制作方法
技术领域：
：本发明涉及5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基卜5-曱基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐及其制备方法、在该化合物制备中所用的中间体、包含该化合物的组合物及该化合物的用途。本发明也涉及5-3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基-5-曱基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐的衍生形式，包括其水合物、溶剂合物及多晶型物。
背景技术：
：胆碱能毒蕈碱受体是G-蛋白偶联受体超家族的成员且进一步被分成5种亚型，Mi至Ms。毒蕈碱受体亚型在体内广泛地且差异地表达。已克隆所有5种亚型的基因，其中，MpM2及M3受体的药理学特性已在动物及人组织中经充分表征。Mi受体在脑(皮质及海马)、腺体及交感神经与副交感神经的神经节中表达。M2受体在心脏、后脑、平滑肌中及自主神经系统的突触中表达。]\13受体在脑、腺体及平滑肌中表达。在气道中，刺激M3受体会引起气道平滑肌收缩，导致支气管收缩，而在唾液腺中，]\13受体刺激会增加流体及黏液分泌，导致唾液分泌增加。在平滑肌上表达的M2受体被认为具有促收缩作用而突触前M2受体可调节乙酰胆碱自副交感神经的释放。刺激在心脏中表达的M2受体会产生心动过緩。在津喘及COPD管理中使用短效及长效毒蕈碱拮抗剂；这些拮抗剂包括短效药剂Atrovent⑧(异丙托溴铵)及Oxivent⑧(氧托溴铵)及长效药剂Spiriva⑧(瘗托溴铵)。在吸入给予后，这些化合物导致支气管扩张。除改良肺量测定值外，在慢性阻塞性肺病(COPD)中使用抗毒蕈碱药使6健康状况改良并且使生命质量评分提高。由于毒蕈碱受体在体内广泛分布，故大量地全身性地使用毒萆碱拮抗剂会导致诸如口腔干燥、便秘、瞳孔散大、尿潴留(这些都主要经由阻断M3受体而介导)及心动过速(由阻断M2受体介导)的效应。通常报道的在吸入给予治疗剂量的当前临床使用的非选择性毒萆碱拮抗剂后的副作用是口腔干燥，虽然所报道的该副作用在强度上仅是轻微的，但是这确实限制了所给予吸入的药剂的剂量。因此，仍存在对改良M3受体拮抗剂的需求，这些拮抗剂应具有适宜药理学特性，例如在效能、药物动力学或作用持续时间方面。就此而言，本发明涉及新的M3受体拮抗剂。存在对具有适于通过吸入途径给予的药理学特性的M3受体拮抗剂的需求。
发明内容本发明涉及5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基卜5-甲基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐及其衍生形式。优选地，本发明涉及5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基卜5-甲基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐的晶体形式。优选地，本发明涉及5-3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基-5-甲基-2,2-二苯基己酰胺的盐酸盐的非溶剂化晶体形式。优选地，当使用CuKo^辐射(波长-1.5406埃)测量时，本发明的盐酸盐具有特征在于下列以2-e角表示的主要x-射线衍射图像峰的X-射线衍射图像<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>优选地，当使用CuKo^辐射(波长-1.5406埃)测量时，本发明的盐酸盐具有特征在于下列以2-0角表示的主要x-射线衍射图像峰的X-射线衍射图像2國e角r.59.111.213.'14.818.319.'优选地，当使用CuKo^辐射(波长-1.5406埃)测量时，本发明的盐酸盐具有特征在于下列以2-e角表示的主要x-射线衍射图像峰的x-射线衍射图像2-e角7.59.111.213.714.818.319.723.428.3目前已发现，本发明的盐酸盐是M3受体的拮抗剂，其特别适用于治疗M3-介导的疾病和/或状况，并显示良好效能，尤其当经由吸入途径给予时。本发明的盐酸盐特别适用于通过吸入途径给予。具体地说，本发明的盐酸盐可被配制用于使用干粉末吸入器来给予。本发明的盐酸盐具有包括固态稳定性以及与特定药物产品赋形剂兼容在内的特性，这使其优于其相应的游离碱。才艮据例々口7〉开于"HandbookofPharmaceuticalSalts,Properties,SelectionandUse.由Wiley-VCH出版，2002.由P.HeinrichStahl，CamilleGWermuth编辑，ISBN3-906390-26-8"中的那些用于制备盐的常规方法，本发明的盐酸盐可自5-3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基_5_曱基-2，2-二苯基己酰胺制备。5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基-5-曱基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐可以未溶剂化形式和溶剂化形式存在。本文所用术语"溶剂合物"描述包含本发明的盐酸盐及化学计算量的一种或多种药用可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子络合物。当所述溶剂为水时，使用术语"水合物"。本发明范围内涵盖络合物，诸如笼形物、药物-基质(drug-host)包合络合物，其中与上述溶剂化物对比，所述药物及基质是以化学计算量或非化学计算量存在。也包括在内的是包括两种或更多种可以以化学计算量或非化学计算量存在的有机和/或无机组分的药物的络合物。所得络合物可以是离子化的、部分离子化的或非离子化的。有关这些络合物的综述，参见Haleblian的JPharmSci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。本发明范围内也涵盖本发明的盐酸盐的多晶型物及晶体形态/惯态。术语"本发明的盐酸盐"包括5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基1-5-甲基-2,2-二苯基己酰胺的盐酸盐及其衍生形式。本发明的盐酸盐是有价值的药物活性化合物，其适于治疗及预防其中涉及毒革碱受体或其中对该受体的拮抗可带来益处的多种疾病，尤其是过敏性及非过敏性气道疾病(例如哮喘、COPD…)，且也适于治疗其他疾病，例如炎症性肠病、肠易激综合征、憩室病、运动病、胃溃疡，肠放射学检查，以及下列疾病的对症治疗BPH(良性前列腺增生症)、NSAID诱导的胃溃疡、尿失禁(包括尿急、尿频、急迫性尿失禁、膀胱过动症、夜尿症及下泌尿道症状)、睫状肌麻痹、散瞳症及帕金森氏病。根据本发明，本发明的盐酸盐可给予动物(优选哺乳动物，尤其是人类)作为用于治疗和/或预防的药物。其可以自身形式给予、以彼此间的混合物形式给予或以药物制剂形式给予，该药物制剂包含有效剂量的本发明盐酸盐作为活性组分以及常规的药学上无毒的赋形剂和/或添力口剂。本发明的盐酸盐可经冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发千燥以提供固体块状、粉末状、或薄膜状晶体或无定形物质。微波或射频干燥法可用于此目的。本发明的盐酸盐可单独给予或与其他药物组合给予且通常与一种或多种药用可接受的赋形剂联合作为制剂给予。本文所用术语"赋形剂"描述任一不同于本发明盐酸盐的成分。赋形剂的选择将在很在程度上取决于具体给予方式。本发明的盐酸盐可直接给予至血流、肌肉或内部器官中。用于肠胃外给予的适宜手段包括静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内及皮下给予。用于肠胃外给予的适宜装置包括针式(包括微型针)注射器、无针式注射器及输注技术。肠胃外制剂通常是水溶液，其可包含赋形剂(例如盐、碳水化合物)及緩沖剂(优选至3至9的pH值)，但对于某些应用，其可能更适合配制为无菌非水溶液或配制为干燥形式以同适宜介质(例如无菌、无热源的水)联合使用。肠胃外制剂在无菌条件下的制备(例如通过冷冻干燥法)可容易地使用本领域技术人员所熟知的标准制药技术完成。肠胃外给予的制剂可被配制为即时释放和/或调节释放制剂。调释制剂包括緩释、持续释放、脉冲释放、控释、靶向释放和程序性释放10制剂。因此，可将本发明的盐酸盐配制为固体、半固体或触变性液体，用于以植入的贮库制剂形式给药来提供活性化合物的调节释放。这些制剂的实例包括经药物涂覆的支架和PGLA聚(dl-乳酸-共-乙醇酸)(PGLA)微球体。本发明的盐酸盐也可经局部给予至皮肤或黏膜，即经皮或透皮给予。用于此目的的典型制剂包括凝胶剂、水凝胶剂、洗剂、溶液、乳骨、软骨、朴粉、敷料、泡沫体、膜剂、皮肤贴剂、糯米纸嚢剂、植入物、海绵、纤维、绷带及微乳。也可使用脂质体。典型载体包括乙醇、水、矿物油、液状石蜡、白凡士林、甘油、聚乙二醇及丙二醇。也可掺入渗透促进剂-参见例如Finnin及Morgan的JPharmSci，88(10)，955-958(1999年10月)。其他局部给予手段包括通过电造孔法、离子电渗疗法、声透法(phonophoresis)、超声促渗法(sonophoresis)及微型针或无针(例如，PowderjectTM、Bioje"TM等)注射来递送。局部给予的制剂可被配制为即时释放和/或调节释放制剂。调释制剂包括緩释、持续释放、脉冲释放、控释、靶向释放和程序性释放制剂。本发明的盐酸盐也可经鼻内给予或通过吸入给予，这些给予所用典型形式为来自干粉吸入器的干燥粉剂(单独、作为混合物(例如，含乳糖的干燥掺合物、或作为混合的组分颗粒例如，与磷脂例如磷脂酰胆碱混合)或作为来自加压容器、泵、喷雾器、雾化器(优选是使用电流体力学生成细雾的雾化器)或喷洒器的气雾剂，其中使用或不使用适宜推进剂，例如l，l,l,2-四氟乙烷或l，l，l，2，3，3，3-七氟丙烷。对于鼻内使用，该粉剂可包含生物黏附剂，例如，脱乙酰壳多糖或环糊精。加压容器、泵、喷雾器、雾化器或喷洒器含有本发明化合物的溶液或悬浮液，其中包括例如乙醇、乙醇水溶液或用于活性物质的分散、增溶或延长释放的适宜其它试剂、作为溶剂的推进剂和任选的表面活性剂(例如三油酸山梨坦、油酸或低聚乳酸)。在干燥粉剂或悬浮液制剂中使用之前，将该药物产品微粉化至适宜通过吸入递送的尺寸(通常小于5微米)。这可通过任何适当粉碎方法例如螺旋气流粉碎、流化床气流粉碎、形成纳米粒的超临界流体处理、高压均化或喷雾干燥而实现。用于吸入器或吹入器中的胶嚢(例如通过明胶或羟丙基甲基纤维素制成的)、泡眼包装及药筒可经配制而包含本发明的盐酸盐的粉末混合物、适宜的粉末基质(例如乳糖或淀粉)和性能改良剂(例如/-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸镁)。乳糖可为无水的或呈单水合物的形式，优选为后者。其他适宜赋形剂包括葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖o适用于使用电流体力学生成细雾的喷雾器中的溶液制剂每次喷射可包含1微克至20毫克的本发明的盐酸盐，并且喷射体积可在l微升至IOO微升之间变化。典型制剂可包含本发明的盐酸盐、丙二醇、无菌水、乙醇及氯化钠。可用于替代丙二醇的备选溶剂包括甘油及聚乙二醇。适宜矫味剂(例如薄荷醇及左薄荷醇)或甜味剂(例如糖精或糖精钠)可添加至那些欲以吸入/鼻内方式给予的本发明制剂中。吸入/鼻内方式给予的制剂可使用例如PGLA被配制为即时释放和/或调节释放制剂。调释制剂包括緩释、持续释放、脉冲释放、控释、乾向释放和程序性释放制剂。当使用千粉吸入器和气溶胶时，剂量单元通过可递送计量数量的阀来确定。本发明的单元通常被设定以给予计量剂量或含0.001毫克至IO毫克的本发明盐酸盐的"喷雾"。全天剂量通常介于0.001毫克至40毫克之间，可以单次剂量给予或更经常地作为分开的剂量于一天内给予。本发明的盐酸盐特别适于通过吸入给予。具体地说，本发明的盐酸盐适于与乳糖一起配制成干燥粉剂且因此可使用干粉吸入器给予。本发明的盐酸盐可经直肠或阴道(例如以栓剂、阴道栓或灌肠剂的形式)给予。可可脂是常规栓剂基质，但适当时可使用多种替代物。经直肠/阴道给予的制剂可被配制为即时释放和/或调节释放制剂。调释制剂包括緩释、持续释放、脉冲释放、控释、靶向释放和程序性释放制剂。本发明的盐酸盐也可直接施用至眼或耳，通常呈在等渗且pH经调节的无菌盐水中的微粉化悬浮液或溶液的滴剂形式。其他适合经眼及耳施用的制剂包括软骨、可生物降解的(例如可吸收凝胶海绵、胶原)及不可生物降解的(例如聚硅氧烷)植入物、糯米纸嚢剂、透镜及微粒或嚢泡系统(例如类脂质体(niosome)或脂质体)。可将诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如，羟基丙基甲基纤维素、羟基乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多糖聚合物(例如，琼脂糖树胶(gelangum))的聚合物与防腐剂(例如，苯扎氯铵)一起掺入。这些制剂也可通过离子电渗疗法递送。释制剂包括緩释、持续;放、脉冲释放、控释、^向释放或程序性释放制剂。本发明的盐酸盐可与可溶性大分子实体(例如，环糊精及其适宜的衍生物或包含聚乙二醇的聚合物)组合，以改善其溶解度、溶解速率、遮味情况、生物利用度和/或稳定性，供以上述任何给予方式使用。举例而言，已发现药物-环糊精络合物通常可用于大多数剂型和给予途径。包合络合物和非包合络合物都可使用。除了与药物直接复合外，环糊精也可用作辅助添加剂，即作为载体、稀释剂或增溶剂。最常用于这些目的是a-、p-和y-环糊精，其实例可参见国际专利申请笫WO91/11172号、第WO94/02518号和第WO98/55148号。由于例如基于治疗特定疾病或状况的目的，可能需要给予活性化合物的组合，因此本发明涵盖将方便地两种或更多种药物组合物(其中至少一种包含本发明的盐酸盐)组合成适宜共同给予这些組合物的药盒(kit)形式。因此，本发明的药盒包含两种或更多种单独的药物组合物(根据本发明，其中至少有一种包含本发明的盐酸盐)和用于分别保存这些组合物的装置(例如容器、分开的瓶子或分开的箔包装)。这类药盒的实例是用于片剂、胶嚢及诸如此类的包装的常见泡眼包装。本发明药盒尤其适用于施用不同剂型(例如，肠胃外)、适用于以不同剂量间隔施用单独的组合物或适用于相互滴定单独的组合物。为有助于依从性，该药盒通常包含用药说明，并可能提供有所谓的记忆辅助器。对于给予人类患者，本发明的盐酸盐的总日剂量通常介于0.001毫克至5000毫克之间，当然需视给予方式而定。例如，静脉内日剂量可仅需要在0.001毫克至40毫克之间。该总日剂量可以单个剂量或分开剂量给予且可按医师判断超出本文所给的典型范围。这些剂量是基于具有约65公斤至70公斤体重的一般人类受试者。医师能够轻易地确定用于体重超出此范围的受试者(例如婴儿及老年人)的剂量。为了避免产生疑问，本文中提及的"治疗"包括治愈性治疗、緩解性治疗及预防性治疗。根据本发明的另一实施方式，本发明的盐酸盐或其组合物也可作为与一种或多种被同时给予患者的其他治疗剂的组合使用，以获得某些特别期望的治疗最终结果，例如治疗病理生理学相关疾病过程的方法，其包括但不限于(i)支气管收缩、(ii)发炎、(iii)过敏、(iv)组织破坏、(v)体征及症状，例如呼吸暂停、咳嗽。本文所用术语"共同给予"、"共同给药"和"与…組合"在涉及本发明的盐酸盐与一种或多种其他治疗剂时，欲意指且确实意指且包括下列含义向需要治疗的患者同时给予本发明的盐酸盐与治疗剂的这类组合，此时这些組分配制在一起成单一剂型，该剂型基本上同时向该患者释放所述组分，向需要治疗的患者基本上同时给予本发明的盐酸盐与治疗剂的这类组合，此时这些组分彼此分离地配制成单独的剂型，所述剂型基本上同时由该患者服用，随之所述组分基本上同时向该患者释放，向需要治疗的患者依次给予本发明的盐酸盐与治疗剂的这类组合，此时这些组分彼此分离地配制成单独的剂型，所述剂型以连续次数由该患者服用，在每次给予间有明显的时间间隔，随之所述组分在14基本上不同的时间向该患者释放；以及*向需要治疗的患者依次给予本发明的盐酸盐与治疗剂的这类组合，此时这些组分配制在一起成单一剂型，所述剂型以受控方式释放这些组分，根据所述方式所述组分同时和/或在不同时间向该患者同时、连续和/或重叠地给药，其中每一部分可通过相同或不同途径给予。可与式(I)化合物或其药用可接受的盐、衍生形式或组合物组合使用的其他治疗剂的适宜实例包括但决不限于(a)5-脂肪加氧酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪加氧酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂，(b)白三烯拮抗剂(LTRA),其包括LTBpLTC4、LTD4ALTE4拮抗剂，(c)组胺受体拮抗剂，其包括H1及H3拮抗剂，(d)用于减充血药用途的ar及a2-肾上腺素受体激动剂血管收缩药拟交感神经药，(e)短效或长效P2激动剂，(f)PDE抑制剂，例如PDE3、PDE4及PDE5抑制剂，(g)茶碱，(h)色甘酸钠，(i)COX抑制剂，非选择性COX-l或COX-2抑制剂(NSAID)和选择性COX-l或COX-2抑制剂(NSAID)，(j)口用及吸入用糖皮质激素，(k)对内源性炎症性实体有活性的单克隆抗体，(1)抗肿瘤坏死因子(抗-TNF-a)药剂，(m)黏附分子抑制剂，其包括VLA-4拮抗剂，(n)激肽-Br及Br受体拮抗剂，(o)免疫抑制剂，(p)基质金属蛋白酶(MMP)的抑制剂，(q)速激肽NKt、NK2及NK3受体拮抗剂，(r)弹性蛋白酶抑制剂，(s)腺苷Ah受体激动剂，(t)尿激酶的抑制剂，(u)作用于多巴胺受体的化合物，例如D2激动剂，(v)NFKB途径的调节剂，例如IKK抑制剂，(w)细胞因子4言号途径的调节剂，例如p38MAP激酶或syk激酶，(x)可归类为黏液溶解药或止咳药的药剂，(y)抗生素，(z)HDAC抑制剂，(aa)PI3激酶抑制剂，以及，(bb)CXCR2拮抗剂。根据本发明，优选的是式(I)化合物与下列药剂的组合-H3拮抗剂，-卩2激动剂，-PDE44中制剂，-类固醇，尤其是糖皮质激素，-腺苷A2a受体激动剂，-细胞因子信号途径的调节剂，例如p38MAP激酶或syk激酶，或，-白三烯拮抗剂(LTRA),其包括LTB4、LTC4、LTD4及LTE4的拮抗剂。根据本发明，更优选的是式(I)化合物与下列药剂的组合-糖皮质激素，尤其是全身性副作用减少的吸入用糖皮质激素，其包括泼尼松、泼尼松龙、氟尼缩松、曲安奈德、丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸氟替卡松、环索奈德和糠酸莫米松，或-卩2激动剂，尤其包括沙丁胺醇、特布他林、班布特罗、非诺特罗、沙美特罗、福莫特罗、妥洛特罗以及它们的盐。应了解，本文所有提及的治疗包括治愈性治疗、緩解性治疗和预防性治疗。以下阐述内容涉及本发明的盐酸盐可考虑的治疗应用。如下文进一步阐述，本发明的盐酸盐具有与M3受体相互作用的能力并因此治疗应用范围广泛，这是因为所述盐酸盐在所有哺乳动物的生理中起重要作用。因此，本发明的又一方面涉及本发明的盐酸盐或其组合物，其用于治疗其中有M3受体参与的疾病、障碍和状况。更具体地说，本发明也涉及本发明的盐酸盐，其用于治疗选自下列的疾病、障碍及状况慢性或急性支气管收缩、慢性支气管炎、小气道阻塞和肺气肿，*任何类型、病因或发病机理的阻塞性或炎症性气道疾病，尤其是选自下列的阻塞性或炎症性气道疾病慢性嗜酸细胞性肺炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、包括慢性支气管炎、肺气肺或与COPD相关或不相关的呼吸困难的COPD、特征在于不可逆的进行性气道阻塞的COPD、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、由其他药物治疗所致的气道高度反应性加重以及与肺动脉高血压相关的气道疾病，*任何类型、病因或发病机理的支气管炎，尤其是选自下列的支气管炎急性支气管炎、急性喉气管支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性支气管炎、格鲁布性支气管炎、干性支气管炎、感染性哮喘性支气管炎、增生性支气管炎、葡萄球菌性或链球菌性支气管炎和肺泡性支气管炎，參任何类型、病因或发病机理的哮喘，尤其是选自下列的哮喘异位性哮喘、非异位性哞喘、过敏性哞喘、异位性支气管性IgE介导的哮喘、支气管哮喘、特发性哮喘、真哮喘、由病理生理学紊乱所致的内源性哮喘、由环境因素所致的外源性哮喘、未知原因或隐性原因的特发性哮喘、非异位性哮喘、支气管性哮喘、肺气肿性哮喘、运动诱发性哮喘、过敏原诱发性哮喘、冷空气诱发性哮喘、职业性哮喘、由细菌、真菌、原生动物或病毒感染所致的感染性哞喘、非过敏性哮喘、初发性哞喘、喘鸣型婴儿综合征和细支气管炎，急性肺损伤，*任何类型、病因或发病机理的支气管扩张症，尤其是选自下列的支气管扩张症柱状支气管扩张症、囊状支气管扩张症、梭状支气管扩张症、毛细支气管扩张症、嚢性支气管扩张症、干性支气管扩张症和滤泡性支气管扩张症。本发明的再一方面也涉及本发明的盐酸盐用于制备具有M3拮抗剂活性的药物的用途。具体地说，本发明涉及本发明的盐酸盐或其衍生形式用于制备可治疗M3受体介导的疾病和/或状况(尤其是以上所列举的疾病和/或状况)的药物的用途。结果，本发明提供使用有效量的本发明盐酸盐或其組合物来治疗包括人类在内的哺乳动物的特别令人感兴趣的方法。更精确地说，本发明提供用于在包括人类在内的哺乳动物中治疗M3受体介导的疾病方:':;包括给予该哺乳动物有效量的;发"盐酸盐。'。、、、具体实施例方式实施例l:5-^K3-羟基-苯氧基)-氮杂环丁烷-l-基卜5-曱基-2,2-二苯基-己酰胺的盐酸盐向5-3-(3-羟基-苯氧基)-氮杂环丁烷-1-基-5-甲基-2，2-二苯基-己酰胺(3.5克，7.8毫摩尔)的曱醇(30毫升)溶液中添加1.25M的HC1的曱醇(6.3毫升，7.8毫摩尔)溶液。在室温下搅拌溶液3小时，然后置于水浴中6小时。由于未观察到沉淀物，在减压下浓缩溶液以除去一些溶剂(l7毫升)，并在室温下搅拌所得溶液16小时以获得沉淀物。过滤悬浮液，用甲醇(10毫升)洗涤并在40。C在真空烘箱中干燥，获得呈白色固体形式的5-[3-(3-羟基-苯氧基)-氮杂环丁烷-1-基1-5-曱基-2，2-二苯基-己酰胺的盐酸盐2.55克(67%)。通过差示扫描量热测定法(DSCM吏用PerkinElmerDiamond差示扫描量热测定计测定实施例l的熔点。在50微升通风铝盘中以20。C/分钟将样品自室温加热至300。C。DSC曲线显示于图3中。熔点由在18218.7。C的强吸热证实(自215.3。C开始)。粉末X-射线衍射法使用配有自动换样器、e-e测角计、自动光束发散狭缝和PSDVantec-l检测器的Bruker-AXSLtd.04粉末乂-射线衍射仪测量粉末乂-射线衍射图像。通过将样品放置在低背景硅晶片样品支架上来准备样品以待分析。旋转样本，同时使用在40千伏/35毫安下运作的X-射线管用CuKal乂-射线(波长=1.5406埃)照射。在2。至55°的20范围内使用设定为0.2秒钟计数/0.018。步长以连续模式运行的测角计实施分析。测量所得的图案显示在图l中。具有强度和峰位置(角20误差是+/-O.l度)的所得粉末X-射线衍射图像显示于表1中表l<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>通过单晶x-射线衍射法测定晶体结构在室温下，使用BrukerSMARTAPEX单晶X-射线衍射仪及MoKa辐射，通过单晶X-射线衍射法测量实施例1的晶体结构。对来自若干啄光系列的强度求积分1,其中每一曝光覆盖co为0.3。，啄光时间为30秒钟且总数据集超过半球。使用多扫描法2，校正吸收的数据。晶体结构已通过在SpaceGroupP2卩!2,中使用SHELXS-973的直接法成功获得，并可使用SHELXL-97"通过最小二乘法来修正。1.SMARTv5.622(控制)及SAINTv6.02(积分)软件，BrukerAXS公司，Madison,WI1994。2.SADABS，用于定标及才交正平面检测器数据的程序，G.M.Sheldrick，G6ttingen大学，1997(基于R.H.Blessing,1995，A51，33-38的方法)。3.SHELXS-97，晶体结构解析程序。G.M.SheWrick，德国G6ttingen大学，1997，97-2版。4.SHELXL-97,晶体结构》务正程序。G.M.Sheldrick，德国G6ttingen大学，1997，97画2版。来自实施例l晶体结构的粉末X-射线衍射图像的计算4吏用AccdrysMSModelliiigTM[3.0版I的"ReflexPowderDiffraction"模块计算实施例l的单晶结构的2e角及相对强度。相关模拟参数是波长1.5406埃(CuKa)极化因子=0.5假-沃伊特(Pseudo-Voigt)曲线(U=0.01、V=-0.001、W=0.002)计算图案代表实施例l的纯净相的图案，这是因为其衍生自单晶结构。测量图案与计算图案的比较显示在图2中并证明主体为单晶结构。峰强度之间的微细差异可归因于测量图案中的优选取向效应。图2显示了实施例1的PXRD图案(顶部单晶结构的测量图案，底部单晶结构的计算图案)。制备例1:5-〖3-f3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基1-5-曱基-2,2-二苯基己酰胺将5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基卜5-甲基-2，2-二苯基-己腈(0.16克，0.38毫摩尔，l当量)、叔戊醇(1.8毫升，12毫升/克)和KOH(0.41克，7.26毫摩尔，20当量)的悬浮液加热至80。C达2天，随之，HPLC显示反应完成。将反应冷却至环境温度，然后在水与TBME之间分配，含水层使用HCl水溶液酸化至pH8,分离所述层并浓缩有机层以提供呈无色油形式的5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基卜5-曱基-2，2-二苯基己酰胺0.11克(68%)。力醒R(400MHz，CDC13)S:1.10(s，6H)，1.22-1.34(m，2H)，2.42-2.55(m，2H)，3.28-3.40(m，2H)，3.65-3.88(m,2H),4.70-4.80(m，1H)，5.55-5.70(brs,2H)，6.23-6.36(m，2H)，6.45-6.53(m，1H)，7.037.12(m，1H)，7.19-7.39(m，10H);LRMSESIm/z44M+H广制备例2:5-〖3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基卜5-甲基-2,2-二苯在环境温度及氮气气氛下向甲磺酸(200毫升，5毫升/克)中添加5-3-(3-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基1-5-甲基-2，2-二苯基-己腈(40克，90.8毫摩尔，l当量)，然后添加DL-甲硫氨酸(40.6克，272毫摩尔，3当量)，产生溶液。在环境温度下搅拌溶液3天并在30。C下搅拌溶液1天，之后添加另外的DL曱硫氨酸(5.42克，36毫摩尔，0.4当量)并在30。C下再维持2天，随之HPLC显示反应完成(〈5。X)SM)。基-己腈使用i-PrOAc(400毫升)稀释混合物，然后小心地使用水(400毫升)稀释混合物。混合所得层15分钟，然后分离。使用lMNaOH(400毫升)洗涤有机层，然后4吏用水(2x200毫升)洗涤有机层，之后用MgS04干燥并在减压下和40。C下浓缩成白色固体。在约5。C下在曱苯(160毫升，4毫升/克)中重新悬浮该固体l小时，然后过滤，用冷甲苯(80毫升，2毫升/克)洗涤并在50。C下在真空烘箱中干燥2天，以获得呈白色固体形式的5-3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基卜5-甲基-2，2-二苯基-己腈29.3克(76%)。HPLC分析显示〉98。/。面积。匪R(300MHz，CDC13)5:0.98(s，6H)，1.35-1.44(m，2H)，2.41-2.52(m，2H)，3.18-3.26(m，2H)，3.48-3.57(m，2H)，4.65-4.74(m，1H)，6.26-6.29(m，1H)，6.32-6.37(m，1H)，6.43-6.47(m，1H)，7.12(t，J8.2Hz，1H)，7.25-7.44(m，10H)制备例3:543-(3-曱氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基，-5-曱基-2，2-二苯基-己腈在N2气氛下，向在水浴冷却的THF(700毫升)中分批添加ZrCU(80.4克，0.35摩尔，2.1当量)，同时维持温度低于15。C，产生棕色悬浮液。然后在冰/MeOH浴中进一步冷却混合物，随后经l小时添加MeMgCl(3M在THF中，493毫升，1.48摩尔，9当量)，同时维持温度在0。C以下。向Zr/格氏溶液中緩慢添加预先制成的5-[3-(3-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基-5-氧代-2，2-二苯基-戊腈(70克，0.164摩尔，l当量)溶于THF(210毫升，3毫升/克)中的溶液，同时控制放热使温度在(TC以下。在0。C下维持所得椋色悬浮液6.5小时，之后添加Me-THF(700亳升)，然后小心地使用NH4Cl水溶液(使用400毫升饱和NH4Cl+500毫升水预先制得)淬灭反应。分离后，使用水(3x350毫升)洗涤有机层，用MgSO4干燥并在40。C下和减压下将溶剂换成EtOH，产生终体积为210毫升(3亳升/克)的沉淀物。在环境温度下搅拌悬浮液18小时，然后在冰浴中冷却l小时，过滤，用EtOH(140毫升，2毫升/克)洗涤并在45。C下在真空供箱中干燥5小时，以获得呈白色固体形式的5-[3-(3-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基卜5-甲基-2,2-二苯基-己腈43.1克(60%)。HPLC分析显示>99%面积。lH画R(400MHz,CDC13)S:0.90-1.03(m，6H),1.31-1.44(m，2H)，2.41-2.56(m，2H)，3.07-3.24(m，2H)，3.42-3.54(m，2H)，3.77(s，3H)，4.63-4,74(m，1H)，6.28-6.38(m，2H),6.48-6.55(m,1H),7.26-7.49(m，11H);LRMSAPC1m/z441[M+H十制备例4:5-〖3"3-曱氧基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基卜5-氧代-2,2-二苯基-戊腈在室温下，向4-氰基-4，4-二苯基-丁酸(300克，1.13摩尔，l当量)于EtCN(3,0升，3毫升/克)中的悬浮液中添加DMAP(13.M克，O.ll摩尔，O.l当量)、3-(3-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷半-草酸盐(253.5克，1.13摩尔，l当量)，然后添加WSCDI(325.2克，1.68摩尔，l.S当量)，产生轻微起泡现象，10。C放热并溶解为溶液。2小时后，通过HPLC认为反应完成(未检测到胺)。添加2MHC1(1.2升，4毫升/克)并搅拌双相混合物10分钟，之后分离，并使用2MNaOH(1.5升，5毫升/克)和水(2x1.5升)洗涤有机层。在减压和40。C下浓缩溶液至干燥，并使用MeOH置换。重复该操作以除去所有的EtCN，并让所得体积为2.5升的热甲醇溶液(8.33毫升/克)冷却，产生粘稠的悬浮液。在水浴中冷却悬浮液2小时，然后过滤，使用MeOH(600毫升，2毫升/克)洗涤并在45r下和真空下干燥固体18小时，以获得呈白色固体形式的5-[3-(3-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基卜5-氧代-2，2-二苯基-戊腈347克(72%)。HPLC分析显示〉98。/。面积。&匪R(300MHz,d6-dmso)S:2.07-2.16(m，2H)，2.69-2.77(m，2H),3.70-3.78(m,1H),3.72(s，3H),3.94-4.00(m，1H)，4.21-4.29(m，1H)，4.42-4.45(m，1H)，4.92-5.00(m，1H)，6.36-6.42(m，2H)，6.54-6.59(m,1H),7.16-7.23(m，1H)，7.30-7.40(m，2H)，7.41-7.46(m，8H)制备例5:3-(3-曱氧基苯氧基)氮杂环丁烷半-草酸盐向适宜的氢化容器中添加1-二苯曱基-3-(3-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷(300克，0.87摩尔，l当量)、Pd(OH)2(20重量。/0，在碳上)(60克，20重量。/。)和EtOH(6升，20毫升/克)。将混合物置于60psiH2下并在室温下搅拌直至48小时后反应完成(HPLC，<5%SM)。在Arbocel上过滤反应混合物并使用大量EtOH洗涤，然后在40。C下和减压下浓缩至1.2升的体积(4毫升/克)。在环境温度下向所得溶液中分批添加草酸(39.11克，0.43毫摩尔，0.5当量)，产生粘稠的悬浮液和15。C放热，在室温下搅拌混合物3天。在冰浴中冷却悬浮液2小时，然后过滤，使用EtOH(600毫升，2毫升/克)洗涤并在50。C下和真空下干燥固体18小时以获得呈白色固体形式的3-(3-曱氧基苯氧基)氮杂环丁烷半-草酸盐165克(85%)。HPLC分斗斤显示>96%面积。制备例6:1-二苯曱基-3-(3-曱氧基苯氧基)氮杂环丁烷在室温下向甲磺酸l-二苯甲基-氮杂环丁烷-3-基酯(1169克，3.68摩尔，l当量)在EtCN(2,33升，2毫升/克)中的溶液中添加K2C03(610.6克，4.42摩尔，1.2当量)。向所得浆液中添加预先制成的3-曱氧基苯酚(548.3克，4.42摩尔，1.2当量)在EtCN(3.50升，3毫升/克)中的溶液并在N2气氛下加热混合物至80。C，保持18小时，随之观测到反应完成(HPLC显示，<5%甲磺酸l-二苯甲基-氮杂环丁烷-3-基酯)。冷却至环境温度后，添加1MNaOH(5.85升，5毫升/克)并搅拌所得溶液约15分钟，之后进行分离。分配所得层并使用1MNaOH(3.51升，3毫升/克)和盐水(116克NaCl溶于5.58升水中，5毫升/克)洗涤有机层。将有机层置于常压蒸馏条件下并通过浓缩至低体积(2毫升/克)且然后依次添加MeOH而将溶剂换成MeOH,获得4毫升/克的悬浮液，NMR未检测到EtCN。冷却悬浮液至0。C,保持3小时，然后过滤，使用MeOH(2.5升)洗涤并在50。C下和真空下干燥固体18小时以获得944克(74%)的呈白色固体的PF1261660。HPLC分析显示〉99。/o面积。缩略语rt-室温Me-甲基SM-原料h—、时mins:分钟d-天本发明盐酸盐的体外活性效能测定在用NFAT-P-内酰胺酶基因转染的CHO-K1细胞中测定1\!3效能。用NFAT—p-Lac—Zeo质粒转染重组表达人毒蕈碱M3受体的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞。在含Glutamax-l的DMEM中生长细胞，DMEM补充有25mMHEPES(LifeTechnologies32430-027)，其包含10%FCS(胎牛血清；SigmaF誦7524)、1nM丙酮酸钠(SigmaS-8636)、NEAA(非必需氨基酸；Invitrogen11140-035)和200微克/毫升Zeocin(Invitrogen25R250國01)。hM^P-Lac分析方案当细胞达到80-90%汇合时，在37。C下和在含有5。/。CO;j的气氛下，将不含酶的细胞解离液(Lifetechnologies13151-014)与细胞一起培养5分钟，收获细胞以用于分析。在温热的生长培养基中收集分离的细胞，并在2000rpm下离心10分钟，在PBS(磷酸盐緩冲盐水；LifeTechnologies14190-094)中洗涤并如刚刚前文所迷再次离心。在生长培养基(组分如上文所述)中，以2xl()S细胞/毫升再次悬浮这些细胞。向384孔黑色透明底板(GreinerBioOne781091-PFI)的每一孔中添加20微升该细胞悬浮液。所用分析緩沖液是补充有0.05%PluronicF-127(Sigma9003-11画6)和2.5%DMSO的PBS。在37。。/5%C02T，使用80nM氨甲酰基胆碱(AldrichN240-9)与细胞一起培养4小时，刺激毒蕈碱M3受体信号，并在培养期结束时使用TecanSpectraFluor+平板读数器(X-激发波长405纳米、发射波长450納米和503纳米)监测。在4小时培养期开始时，向分析物中添加欲测试的化合物，将化合物活性测量为对氨甲酰基胆碱诱导的信号的浓度依赖性抑制。绘制抑制曲线并使用4-参数S形曲线拟合产生ICso值，使用Cheng-Prusoff校正法将其转化成Ki值并将其转化成本分析中的氨曱酰基胆碱的Kd植。豚鼠气管分析在升高浓度的C02中挑出重量为350-450克的雄性Dunkin-Hartley豚鼠，之后对腔静脉放血。在室温下自喉至进入胸腔的点切除气管，然后置于新鲜且充氧的改良的Krebs緩冲液(Krebs包含10jiM普萘洛尔、10nM胍乙啶和3fiM吲味美辛)。通过剪断气管肌对面的软骨来打开气管。切成约3-5个软骨环宽的条。在条的一端，将棉线连在软骨上，用于连接到力转换器，且在另一端处作一个棉线环圏，以将组织锚定于器官浴槽中。这些条放在充满了经充气的温热(37。C)改良的Krebs的5毫升器官浴槽中。泵流速设定为1.0毫升/分钟并连续洗涤组织。将组织置于1000mg的初始张力下。15和30分钟后重新拉紧组织，然后容许其平衡30-45分钟。使组织经受下列参数的电场刺激(EFS):10秒脉冲串/2分钟，0.1毫秒脉沖宽度，10赫兹和10-30伏。在规定范围内，每10分钟升高电压5伏，直至可观察到对于各组织的最大收缩反应。然后，在实验的整个剩余部分使用各组织的该正好最大电压。在对EFS平衡20分钟后，停止泵并在15分钟后在8-10分钟时间内获得对照读数(4-5个反应)。然后在30xKi下，以大剂量向每个组织中添加化合物(在过滤结合分析中在CHO细胞中表达的人M3受体上测定)，并培养2小时。然后使用快速洗恢复流速至l毫升/分钟。在实验结束时，使用组胺(lnM)激发组织以测定生存力。使用Notocord⑧软件自动采集实验期间所获取的读数。考虑对EFS响应的抑制的测量值，将原始数据转化成百分比响应。在开始洗出后，记录组织自经诱导的抑制态恢复25%所需的时间并将其用作化合物作用持续时间的量度。组织生存力将实验的持续时间限定至化合物冲出后16小时。通常在11=2至5下测试化合物以评价作用持续时间。或者，也可使用以下豚鼠气管分析自雄性Dunkin-Hartley豚鼠(重量3S04S0克)移除气管，且在移除勦附结締组织后，在气管肌对面的软骨中做一切口并制备3-5个软骨环宽的气管条。在l克的初始张力下，在5毫升组织浴槽中将气管条悬浮在包含3fiM吲哚'美辛和""lOji]V^^乙啶的温热(37。C)且充气的(95Vo02/5%C02)Krebs溶液中浸泡。组织放置在平行铂金属丝电极(约l公分间隙)之间。使用蠕动泵，在组织浴槽中维持新鲜Krebs溶液(具有上述成分)的恒定的l毫升/分钟的流速。容许组织平衡l小时，自平衡期开始后15分钟和30分钟重新拉紧组织至1克。在平衡结束时，使用下列参数电场刺激(EFS)组织10伏，IO赫兹，O.l毫秒脉沖宽度，IO秒脉沖串/2分钟。在各组织中，在10伏-30伏范围内构建电压响应曲线(所有其他刺激参数保持恒定)以测定正好最大刺激。使用这些刺激参数，EFS响应是100。/。经神经介导的和100。/。胆碱能的，这是ljiM河豚毒素或lfiM阿托品引起的阻断所证实的。然后以2分钟间隔重复刺激组织直至响应可重现。在添加研究化合物前20分钟停止蠕动泵并将最后10分钟内的平均抽搐收缩记作对照响应。向组织浴槽中添加研究化合物，其中每个组织接受单一浓度化合物并容许其平衡2小时。添加后2小时，记录对EFS响应的抑制并对来自同一动物的气管条使用一系列化合物浓度来产生ICs。曲线。然后快速洗涤组织并重新建立使用Krebs溶液的l毫升/分钟灌注。再刺激这些组织16小时并记录EFS响应的恢复。16小时结束时，向浴槽中添加10jiM组胺以证实组织生存力。自ICs。曲线鉴定拮抗剂的所述正好最大浓度(经测试的浓度显示响应>70%抑制但小于100%)并在接受该浓度的组织中计算经诱导的抑制恢复25%所需的时间(T25)。通常在11=2至5下测试化合物以评价作用持续时间。权利要求1.5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]-5-甲基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐。2.5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-l-基l-5-曱基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐的非溶剂化晶体形式。3.根据权利要求2的化合物，当使用CuKo^辐射(波长-1.5406埃)测量时，其具有特征在于以2-0角表示的下列主要X-射线衍射图像峰的X-射线衍射图像<table>tableseeoriginaldocumentpage2</column></row><table>4.一种药物组合物，其至少包含有效量的根据权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式。5.根据权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式或组合物，其用作药物。6.根据权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式或组合物，其用于治疗选自下列的疾病、障碍和状况參慢性或急性支气管收缩、慢性支气管炎、小气道阻塞和肺气肿,*任何类型、病因或发病机理的阻塞性或炎症性气道疾病，尤其是选自下列的阻塞性或炎症性气道疾病慢性嗜酸细胞性肺炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、包括慢性支气管炎、肺气肿或与COPD相关或不相关的呼吸困难的COPD、特征在于不可逆的进行性气道阻塞的COPD、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、由其他药物治疗所致的气道高度反应性加重和与肺动脉高血压相关的气道疾病，參任何类型、病因或发病机理的支气管炎，尤其是选自下列的支气管炎急性支气管炎、急性喉气管支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性支气管炎、格鲁布性支气管炎、千性支气管炎、感染性哞喘性支气管炎、增生性支气管炎、葡萄球菌性或链球菌性支气管炎和肺泡性支气管炎，*任何类型、病因或发病机理的哮喘，尤其是选自下列的哮喘异位性哮喘、非异位性哮喘、过敏性哮喘、异位性支气管性IgE介导的哮喘、支气管哮喘、特发性哮喘、真哮喘、由病理生理学紊乱所致的内源性津喘、由环境因子所致的外源性哮喘、未知原因或隐性原因的特发性哮喘、非异位性哞喘、支气管性哮喘、肺气肿性哞喘、运动诱发性津喘、过敏原诱发性哮喘、冷空气诱发性哮喘、职业性哮喘、由细菌、真菌、原生动物或病毒感染所致的感染性哮喘、非过敏性哞喘、初发性哞喘、喘鸣型婴儿综合征和细支气管炎，急性肺损伤，*任何类型、病因或发病机理的支气管扩张症，尤其是选自下列的支气管扩张症柱状支气管扩张症、嚢状支气管扩张症、梭状支气管扩张症、毛细支气管扩张症、嚢性支气管扩张症、干性支气管扩张症和滤泡性支气管扩张症。7.权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式或组合物在制备药物中的用途，该药物具有M3拮抗剂活性。8.权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式或组合物在制备药物中的用途，该药物用于治疗疾病、障碍及状况，所述疾病、障碍及状况选自权利要求6中所述的疾病、障碍及状况。9，使用M3拮抗剂治疗哺乳动物的方法，所述哺乳动物包括人类，所述方法包括使用有效量的根据权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式或组合物治疗所述哺乳动物。10.根据权利要求9的方法，其中所述疾病、障碍或状况选自权利要求7中所述的疾病、障碍及状况。11.权利要求1至3任一项的化合物或其衍生形式和治疗剂的组合，所述治疗剂选自(a)5-脂肪加氧酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪加氧酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂，(b)白三烯拮抗剂(LTRA),其包括LTB4、LTC4、LTD4及LTE4拮抗剂，(c)组胺受体拮抗剂，其包括H1和H3拮抗剂，(d)用作减充血药的011-和012-肾上腺素受体激动剂血管收缩药拟交感神经药，(e)短效或长效p2激动剂，(f)PDE抑制剂，例如PDE3、PDE4和PDE5抑制剂，(g)茶碱，(h)色甘酸钠，(i)COX抑制剂，非选择性和选择性COX-l或COX-2抑制剂(NSAID),(j)经口和吸入型糖皮质激素，(k)对内源性炎症性实体有活性的单克隆抗体，(1)抗肿瘤坏死因子(抗-TNF-a)药剂，(m)勒附分子抑制剂，其包括VLA-4拮抗剂，(n)激肽-Br及Br受体拮抗剂，(o)免疫抑制剂，(p)基质金属蛋白酶(MMP)的抑制剂，(q)速激肽NKt、NK2和NK3受体拮抗剂，(r)弹性蛋白酶抑制剂，(s)腺苷A2a受体激动剂，(t)尿激酶的抑制剂，(u)作用于多巴胺受体上的化合物，例如D2激动剂，(v)NFKB途径的调节剂，例如IKK抑制剂，(w)细胞因子信号途径的调节剂，例如p38MAP激酶或syk激酶，(X)可归类为黏液溶解药或止咳药的药剂，(y)抗生素，(z)HDAC抑制剂，(aa)PI3激酶抑制剂，以及，(bb)CXCR2拮抗剂。全文摘要本发明涉及5-[3-(3-羟基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]-5-甲基-2，2-二苯基己酰胺的盐酸盐或其衍生形式及其作为药物的用途。文档编号C07D205/04GK101641327SQ200880008581公开日2010年2月3日申请日期2008年3月6日优先权日2007年3月16日发明者K·詹姆斯,P·A·格罗索普申请人:辉瑞有限公司