5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1h-1,2,3-三唑)苯甲酸类化合物及其制备方法和应用的制作方法

专利名称：：5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1h-1,2,3-三唑)苯甲酸类化合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
：本发明属于药物合成领域，具体涉及5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3_三唑)苯甲酸类化合物、其制备方法及其在抗HIV-I药物上的应用。
背景技术：
：艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种传染性疾病，它是人类历史上危害最深广、灾难最严重的传染病之一。对艾滋病致病机制的研究可以发现，HIV在其复制过程中，先后有三种酶，即逆转录酶，整合酶和蛋白酶的参与。自1987年FDA批准齐多夫定(AZT)用于临床以来，到2005年为止FDA—共批准了27种治疗艾滋病的新药上市。主要分为核苷类逆转录酶抑制剂、非核苷类逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和融合抑制剂。遗憾的是现在临床上使用的药物和治疗的手段(高效抗逆转录病毒疗法(HAART))只能抑制HIV的复制而不能彻底地根除，因而感染者必须终生服药。由于毒副作用以及抗药性的产生，常常使治疗失败。此外，组合治疗使用的药物价格非常昂贵，限制了它们在不发达国家的应用。由于存在上述问题，迫切需要新的抗艾滋病药物的出现。HIV整合酶是逆转录病毒复制过程中必不可少的一种酶，更重要的是人体内并没有发现相同功能的酶类似物存在，因此如果有一种药物能够选择性地抑制HIV整合酶，将不会破坏健康细胞，从而降低了毒性。因此，HIV整合酶是抗艾滋病药物设计的理想靶点。经过近二十年的研究，已经发现很多化合物具有不同程度的HIV整合酶抑制活性，包括羟基化芳香族化合物、核苷酸类、芳基二酮酸类及其他抑制剂。美国默克公司开发的Raltegravir(商品名Isentress)为首个FDA批准上市的针对HIV-1整合酶的抗逆转录病毒药物，它通过抑制病毒复制所需的HIV-I整合酶减缓HIV-I感染的发生(ClinicalTherapeutics,2008，30，1747—1765)。D，Angelo等人(J.Med.Chem.，1998，41，2843-2857)报道了苯乙烯喹啉类化合物可以作为HIV-I整合酶抑制剂。王存新等人(ActaPharmacologicaSinica2004，25，950-958)报道了苯乙烯喹啉类HIV-I整合酶抑制剂的构效关系。我们也报道了1，2，3-三唑取代的喹喏酮羧酸衍生物(Chin.J.Chem.，2009，27，953-962)、吡啶酮羧酸衍生物(Molecules,14,868-883)以及苯乙烯基磺酰胺衍生物(有机化学，2009，29，1105-1114)作为HIV-I整合酶抑制剂的例子。苯乙烯喹啉类HIV-I整合酶抑制剂的典型结构为8-羟基喹啉酸母体与多羟基苯环通过烯烃连接。通过该类化合物的构效关系的分析优化，在生物等排合理药物设计的基础上，设计合成了5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物作为HIV-I整合酶抑制剂，目前国内外尚未见报道。
发明内容本发明的目的是提供一种5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3_三唑)苯甲酸类化合物、其制备方法及其在抗HIV-I药物上的应用。该类化合物是基于对HIV-I整合酶抑制活性而特别地显示出抗HIV-1作用。本发明提供了式⑴表示的5-氯-2-羟基-3-(4_取代-1H_1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，R表示-Ph、-CH20H、-CH2Br、-CH2XR\_CH2XCH2R2或_CH2N(CH2R3)2，优选R表示-Ph、-ch2xch2r2或-ch2n(ch2r3)2,X为NH或0;R1表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，R4表示-H、-t-Bu、-N02、-Br、_C1、_F、_CH3、_0H、_0CH3、-Ph或_0CH2CCH，R4可以在邻位、间位或对位；R2或R3表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，R5表示-H、-t-Bu、-N02、-Br、_C1、_F、_CH3、-OH、_0CH3或_Ph，优选R5表示-F或-CH3，R5可以在邻位、间位或对位。本发明化合物对HIV-1整合酶具有显著的抑制作用，可以以化合物或者以治疗艾滋病药物有效成分的形式治疗由HIV-1引起的感染以及用于预防、治疗和延缓AIDS的发病。本发明所提供的5-氯-2-羟基-3-(4_取代-1H_1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物的制备方法，包括以下步骤(a)以式(II)表示的5-氯水杨酸与硝酸反应，反应温度0-60°C，反应时间12_24小时，得到式(III)表示的5-氯-3-硝基水杨酸；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(b)将式(III)化合物与无机还原剂在甲醇水溶液或盐酸中反应，反应温度0-50°C，反应时间10-30小时，得到式(IV)表示的5-氯-3-胺基水杨酸，所述无机还原剂为保险粉、铁粉、锌粉或氯化亚锡；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(IV)(c)将式(IV)化合物与叠氮化试剂反应，反应温度0-40°C，反应时间2-4小时，得到式(V)表示的5-氯-3-叠氮基水杨酸，所述叠氮化试剂为三甲基硅基叠氮和亚硝酸叔丁酯的混合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(V)(d)将式(V)化合物与式(VI)表示的端炔在催化剂和有机溶剂中反应，反应温度30-50°C，反应时间8-24小时，得到本发明所述的式(I)化合物，所述催化剂为抗坏血酸钠和五水硫酸铜的混合物，所述有机溶剂为乙腈、甲醇、乙醇水溶液或叔丁醇水溶液，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(VI)其中，R同前所述。上述步骤(a)中反应温度为0-10°C。上述步骤(b)中所述无机还原剂为保险粉。上述步骤(d)中式(V)化合物与式(VI)化合物的物质的量比为113上述步骤(d)中所述抗坏血酸钠和五水硫酸铜的物质的量比为471。本发明合成方法的反应路线如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>与现有技术相比，本发明的有益效果为首次设计并化学合成了5-氯-2-羟基-3_(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物。本发明方法使用工业上普通的试剂和常规的生产条件，反应条件温和，步骤简单。本发明的5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物作为HIV-I整合酶抑制剂的应用，具有明显的整合酶抑制活性，部分化合物的IC5tl达到1.6ug/mL,因此该类化合物是较强的HIV-I整合酶抑制剂，有望作为抗HIV-I创新药物进行深入研究和开发，具有显著的科学意义和应用前景。具体实施例方式实施例1:5_氯-2-羟基-3-(4_苯基-1H_1，2，3-三唑)苯甲酸(1)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(a)3-硝基-5-氯水杨酸的制备冰浴中，往装有温度计的IOOmL三口圆底烧瓶中先后加入5-氯水杨酸(1.59g，9.21mmol)和6mL浓硫酸，搅拌直至完全溶解。接着往恒压滴液漏斗中加入1.24mL浓硫酸和0.52mL浓硝酸，振荡使其混合均勻。然后开始滴加，控制滴速，使体系温度不超过10°C，滴加大约持续15min。滴加完毕后移去冰浴，继续室温搅拌4h左右直到TLC检测反应完全。将此溶液倒入装有冰水的烧杯中，搅拌，有大量白色沉淀析出。抽虑，水洗，60°C真空干燥得固体1.92g。产率96%；熔点:162-164°Co(b)3-氨基-5-氯水杨酸的制备冰浴中，在Ar保护的250mL斜三口圆底烧瓶中加入3-硝基-5-氯水杨酸(2.176g，1Ommol)和33mL甲醇，搅拌溶解，然后再加入33mL水和保险粉(8.94g，52.6mmol)，室温搅拌直至反应完全。反应持续约12h左右。抽滤，水洗，真空干燥得白色固体715.4mg。产率38%。熔点242-2440C；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.84(d,1H,Ar-H),6.93(d,1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=185.6[Μ-ΗΓ.(c)3-叠氮基-5-氯水杨酸的制备冰浴中，在装有50mL乙腈的100mL圆底烧瓶中，加入3-氨基-5-氯水杨酸(938mg，5mmol)，搅拌溶解。然后加入t-Bu0N0(7.5mmol,975uL)，随后滴加TMSN3(6mmol，755uL)，搅拌约0.5h，移去冰浴，室温继续搅拌大约2h，反应完毕。减压脱去大约一半溶剂，即析出大量沉淀，抽虑，石油醚洗涤，水洗，真空干燥得暗红色固体938.3mg，产率88%。熔点138-140°C；NMR(400MHz，DMS0-d6)87.35(d,1H,Ar-H),7.54(d,1H,Ar-H),12.41(bs,1H,-C00H)；13CNMR([D6]DMS0)8115.6，122.9，125.8，125.9，129.3，153.7，171.2；MS(ESI):m/z=211.6[M-H]_；IR(KBr)v=3439.6,2195,2135,1676,1464,1292,1232,1171cm-1.((1)5-氯-2-羟基-3-(4-苯基-111-1，2，3-三唑)苯甲酸的制备恒温水浴锅(温度为25°C)中，往配有机械搅拌的250mL斜三口圆底烧瓶中分别加入3-叠氮-5-氯水杨酸(427.2mg，2mmol)，苯乙炔(2.5mmol)、10mL叔丁醇以及10mL水(11)，搅拌均勻。随后分别加入抗坏血酸钠(200mg，lmmol，50%eq.)、CuS04*5H20(50mg，0.2mmol,10%eq.)，剧烈搅拌。反应持续8_12h，等完毕后静置，即析出大量沉淀，然后加入水洗涤，抽滤。石油醚洗涤，60°C真空干燥得产物，产率69%。熔点260-262°C；NMR(400MHz,DMS0_d6)87.36(t,1H,J=7.2Hz,Ar-H),7.47(t，2H，J=7.6Hz，Ar-H)，7.77(d，2H，Ar-H)，7.95(d，2H，Ar-H)，9.12(s，1H，Ar-H)；MS(ESI):m/z=313.8[M-HF；IR(KBr)v=3437，1637，1469，1418，1270，1088，903，757，533CHT1.实施例2:5_氯-2-羟基-3-(4-羟甲基-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸(2)的制备(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为炔丙醇，其它步骤同实施例1，产率52%。熔点175_177°C；NMR(400MHz,DMS0_d6)84.60(s,2H,0CH2),7.71(d,1H,Ar-H),7.72(d,1H,Ar-H),8.58(s,1H,Ar-H)；13CNMR(DMS0-d6)855.4,117.7，122.2，124.2，125.8，126.6，129.4，148.1，157.3，169.7；MS(ESI):m/z=267.5[M-H]_；IR(KBr)v=3435，1635，1471，1421，1384，1270，1121，930，535，420CHT1.实施例3:5_氯-2-羟基-3-(4-苯氧甲基-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸(3)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为苯基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率69%。熔点230_232°C；1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ=5.23(s,2H,OCH2),6.93-6.97(t,1H,Ar-H),7.07(d,2H,Ar-H)，7.28-7.32(m,2H,Ar-H)，7.91(d,1H,Ar-H)，8.01(d,1H,Ar-H)，8.69(s,1H,Ar-H)；13CNMR(DMSO-Cl6)δ61.2,115.2，121.4，122.4，126.8，130.0，130.3，130.5，143.4，153.5，158.5，170.8；MS(ESI):m/z=343.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3438，2927，1638，1472，1422，1243，1080，533CHT1·实施例4:3-{[4-(4-叔丁基苯氧基)甲基]-1Η-1，2，3_三唑}_5_氯_2_羟基苯甲酸⑷的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为对叔丁基苯基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率48%。熔点226-2280C；1HNMR(400MHz，DMS0_d6)δ1.24(s,9H,C-CH3),5.19(s，2H，OCH2),6.98(d,2H,J=8.8Hz,Ar-H)，7.29(d,2H,J=8.8Hz,Ar-H)，7.83(d,1H,Ar-H)，7.89(d,1H,Ar-H)，8.74(s，1H,Ar-H)；13CNMR(DMS0-d6)δ31.8,34.2,61.4,114.7,120.2,126.3,126.6,126.7,128.4,130.1，143.3，143.5，155.4，156.3；MS(ESI):m/z=399.7[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3436，2961，2927，2868，1633，1513，1467，1424，1368，1295，1242，1185，1116，1031，897，829，728,55301^.实施例5:5-氯-2-羟基-3-{[4-(4-硝基苯氧基)甲基]-1Η-1，2，3_三唑}苯甲酸(5)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为对硝基苯基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率71%。熔点>300°C；1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ5.41(s，2H，OCH2),7.31(d，2H，J=8.4Hz,Ar-H)，7.75(d，2H，Ar-H),8.23(d,2H,J=8.8Hz，Ar-H),8.90(s,1H,Ar-H)；13C匪R(DMS0_d6)δ62.3,115.8,118.0,121.8,126.3，126.4，126.6，129.9，141.5，141.9，157.3，163.8，169.7；MS(ESI):m/z=388.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3438，1637，1511，1469，1402，1339，1264，1263，1112，887，536CHT1·实施例6:5-氯-2-羟基-3-{[4-(4-溴苯氧基)甲基]-1Η-1，2，3_三唑}苯甲酸(6)的制备ΛZ分&HOOCN.NOHΝ(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为对溴苯基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率91%。熔点234-236°C；1HNMR(400MHz,MeOH_d4)δ5.19(s，2H，OCH2),6.95(d，2H，J=8.8Hz,Ar-H)，7.38(d，2H，J=8.4Hz,Ar-H),7.83(s,1H,Ar-H),8.00(s,1H,Ar-H),8.57(s,1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=421.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3437，2925，1639，1488，1469，1424，1384，1241，1173，1102，1074，1024，886，817，776，727，527cm_1.实施例75-氯-2-羟基-3-(4-(萘氧基)甲基)-1H-1，2，3_三唑)苯甲酸(7)的制备ι/=τ。忍HOOC^f^N、NOHΝ(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为萘基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率91%。熔点231-233°C；1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ5.44(s，2H，OCH2),7.42-7.53(m，4H，Ar-H),7.85(d,1Η,Ar-H),7.91(d,1Η,Ar-H)，8.04(d,1Η,Ar-H)，8.13(d,1H,Ar-H)8.82(s,1H,Ar-H)；13CNMR(DMS0-d6)δ62.0，106.4，120.9，122.0，122.2，125.4，125.8，126.6，126.7，126.8，126.9，127.9，130.2，130.5，134.5，143.4，153.8，154.0，170.8；MS(ESI):m/z=393.7[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3437，2926，1634，1509，1468，1399，1270，1240，1098，1069，790，770,571cm-1.实施例8:5-氯-2-羟基-3-{[4-(4-炔丙氧基)苯氧基甲基]-1H_1，2，3_三唑}苯甲酸⑶的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为1，4-双炔丙氧基苯，其它步骤同实施例1，产率42%。熔点217_219°C；1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ3.51(t,1H,=C—H)，4.72(d，2H，J=2.4Hz,=C-CH2),5.17(s，2H，OCH2),6.94(d，2H，J=8.8Hz,Ar-H),7.02(d，2H，J=8.8Hz,Ar-H)，7.76(s，2H,Ar-H)，8.80(s,1H,Ar-H)；13CNMR(DMS0-d6)δ56.4,61.9,78.4,80.0,116.1,116.3,116.4,116.5,117.6,122.1，126.0，126.1，126.5，129.7，143.0，152.0，153.1，157.6，169.6；MS(ESI):m/z=397.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3436，1637，1507，1469，1424，1384，1206，1109，1031，824，722，526CHT1·实施例9:5-氯-2-羟基-3-{[4-(3-炔丙氧基)苯氧基甲基]-1Η-1，2，3_三唑}苯甲酸(9)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为1，4-双炔丙氧基苯，其它步骤同实施例1，产率80%。熔点210-211°C；1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ3.53(t,1H,=C—H)，4.78(d，2H，J=2.4Hz,=C-CH2),5.22(s，2H，OCH2),6.60(t,1Η,Ar-H),6.71(d，2H，Ar-H),7.22(t,1H,Ar-H)7.77(d,2H,Ar-H)，8.82(s,1H,Ar-H)；13CNMR(DMS0-d6)δ56.0,61.6,78.7,79.8,102.5,108.1,117.8,122.2,126.2,126.3，126.5，129.8，130.5，142.8，157.5，159.0，159.8，169.7；MS(ESI):m/z=397.6[M-H]“；IR(KBr)ν=3437，2925，2854，1636，1469，1467，1424，1380，1261，1176，1151，1044,810,722,684,529cm_10实施例10:5-氯-2-羟基-3-{[4-(2-炔丙氧基)苯氧基甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(10)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为1，2-双炔丙氧基苯，其它步骤同实施例1，产率56%。熔点206-208°C；1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ=3.50(t,1H,=C_H)，4·78(d，2H，J=2.4Hz,=C-CH2)，5.23(s，2H，OCH2)，6.93-6.99(m,2H,Ar-H)，7.05-7.08(m,1H,Ar-H)，7.22-7.25(m,1H,Ar_H)，7.78(s，2H，Ar-H),8.82(s,1H,Ar-H)；13C匪R(DMS0_d6)δ56.6,62.1,78.6,79.9，114.8,115.3,117.9，121.6，121.9，122.3，126.2，126.3，126.5，129.8，142.9，147.4，148.6，157.4，169.7；MS(ESI):m/z=397.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3437，2926，2854，1637，1502，1468，1424，1383，1253，1201，1126，1021，898，812，740，529cm—1.实施例11:3-(4-苄氧基甲基-1!1-1，2，3-三唑)-5-氯-2-羟基苯甲酸(11)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率85%。熔点225-227°C；1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ4.59(s,2Η,OCH2Ar),4.69(s,2H,OCH2Ar),7.31-7.38(m,5H,Ar-H)，7.93(d,2H,Ar-H)，8.68(s,1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=357.8[Μ-ΗΓ，359.8[M+H]+，HRMS:m/z[M-H]_calcdforC17H14N3O4Cl:358·06001；found:358·0590；IR(KBr)ν=3436，1638，1471，1454，1422，1366，1316，1238，1073，736，701，538cm1.实施例12:3-[4-(4-甲基苄氧基)甲基-1H-1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(12)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为对甲基苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率63%。熔点193-195°C；1HNMR(400MHz，DMS0_d6)δ2.31(s,3H,Ar-CH3),4.53(s,2H,OCH2Ar),4.65(s,2H,OCH2)，7.17(d,2H,J=7.6Hz,Ar-H)，7.25(d,2H,J=8Hz,Ar-H)，7.87(s,1H,Ar-H)，7.93(s，1H,Ar-H)，8.64(s,1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=371.8[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3436，1636，1471，1421，1271，1087，899，526CHT1.实施例13:3-[4-(3-甲基苄氧基)甲基-1Η-1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(13)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为间甲基苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率69%。熔点190-192°C；1H匪R(400MHz，DMS0-d6)δ2.30(s，3H，Ar-CH3)，4.55(s，2H，OCH2Ar)，4.67(s，2H，OCH2)，7.10-7.18(m,3H,Ar-H)，7.25(t,1H,Ar-H)，7.86(s,1H,Ar-H)，7.93(s,1H,Ar-H)，8.64(s，1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=371.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3436，2925，2862，1637，1472，1423，1385，1269，1239，1151，1084，1023，891，777，707，526CHT1.实施例14:3-[4-(2-甲基苄氧基)甲基_1Η_1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(14)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为邻甲基苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率54%。熔点195-197°C；1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ2.27(s,3H,Ar-CH3),4.58(s,2H,OCH2Ar),4.68(s,2H,OCH2)，7.18(m,3H,Ar-H)，7.32(s,1H,Ar-H)，7.86(s,1H,Ar-H)，7.93(s,1H,Ar-H)，8.63(s，1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=371.8[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3437，1637，1471，1422，1241，1084，892，745，528CHT1.实施例15:3-[4-(4-氟苄氧基)甲基-1Η-1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(15)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为对氟苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率51%。熔点201-203"C；1H匪R(400MHz，DMS0-d6)δ4.60(s，2H，OCH2Ar)，4.72(s，2H，OCH2)，7.05-7.09(m，2H,Ar-H)，7.39(t,2H,Ar-H)，7.85(s,1H,Ar-H)，8.02(s,1H,Ar-H)，8.52(s,1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=343.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3437，1638，1511，1471，1420，1226，1077，888，826，570CHT1.实施例16:3-[4-(3-氟苄氧基)甲基-1Η-1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(16)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为间氟苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率67%。熔点204-206°C；1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ4.61(s,2H,OCH2Ar),4.70(s,2H,OCH2),7.12(s,1H,Ar-H)，7.17-7.19(m,2H,Ar-H)，7.40(d,1H,Ar-H)，7.92(s,1H,Ar-H)，8.02(s,1H,Ar-H)，8.63(s,1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=375.8[M-H]“；IR(KBr)ν=3437,1638,1471,1421,1269,1085,605cm_1.实施例17:3-[4-(2-氟苄氧基)甲基_1Η_1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(17)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为邻氟苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率53%。熔点208-210°C；1H匪R(400MHz，DMS0-d6)δ4.62(s,2H,OCH2Ar),4.67(s,2H,OCH2),7.18-7.21(m,2H,Ar-H)，7.33-7.38(m,1H,Ar-H)，7.45-7.49(m,1H,Ar-H)，7.73(d,2H,Ar-H)，8.71(s，1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=375.7[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3444，1639，1466，1420，1237，1184，1080，759CHT1.实施例18:3-[4-(2-溴苄氧基)甲基-1Η-1，2，3_三唑]_5_氯_2_羟基苯甲酸(18)的制备CiBrH。。々NdT。^0OHN(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为邻溴苄基炔丙基醚，其它步骤同实施例1，产率48%。熔点189-191°C；1H匪R(400MHz，DMS0-d6)δ4.63(s，2H，OCH2Ar)，4.75(s，2H，OCH2)，7.23-7.27(m，1H,Ar-H)，7.40(t,1H,Ar-H)，7.53(d,2H,Ar-H)，7.60(d,2H,Ar-H)，7.83(d,2H,Ar-H)，8.71(s，1H,Ar-H)；MS(ESI):m/z=435.7[M-H]437.6[M+2-H]439.6[M+4-H]“；IR(KBr)ν=3437，1638，1469，1422，1239，1094，888，527CHT1.实施例19:5-氯-2-羟基_3-(4-苯胺基甲基)-1!1-1，2，3-三唑)苯甲酸(19)的制备ClΛ^0HOOCNv^NOHN(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N-炔丙基苯胺，其它步骤同实施例1，产率90%。熔点177-179°C；1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ4.38(s,2H,NCH2),6.ll(s，lH，N-H),6.53-6.56(m,1Η,Ar-H)，6.69(d,2H,Ar-H)，7.06-7.09(m,2H,Ar-H)，7.75(s,2H,Ar-H)，7.76(s,2H,Ar-H),8.62(s，1Η,Ar-H)；13CNMR(DMS0-d6)δ39.0,112.9,116.6,117.8，124.2，125.6，126.6，129.3，129.4，146.0，148.8，157.1，169.7；MS(ESI):m/z=342.6[Μ_ΗΓ；IR(KBr)ν=3436，2926，2854，2361，2344，1637，1578，1507，1472，1420，1385，1270，1094，898，810，750，728，695，533cm_1.实施例205-氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(4_甲基苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(20)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二对甲基苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率66%。熔点144-146°C；1H匪R(400MHz，DMS0-d6)δ2.32(s,6Η,Ar-CH3),4.18(s,4H,Ar-CH2),4.29(s，2H，N-CH2)，7.26(d,2H,J=7.2Hz,Ar-H)，7.41(d,2H,J=7.2Hz,Ar-H)，7.81(s,1H,Ar-H)，7.82(s，1H,Ar-H)，8.89(s,1H,Ar-H)；13CNMR(DMSO-Cl6)δ21.3,46.5,56.3,117.8,126.2,126.4,128.1,129.2,129.5,129.7，129.8，130.0，130.4，131.3，138.9，139.0，157.5，169.5；MS(ESI):m/z=474.8[M-H]476.9[M+H]+；IR(KBr)ν=3437，2926，2854，1637，1502，1468，1424，1383，1253，1201，1126，1021，898，812，740，529CHT1·实施例21:5_氯-2-羟基_3-[4-(队^二苄基胺甲基)-1!1-1，2，3-三唑]苯甲酸(21)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>HOOC^f^Nv,NV/OHN(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率47%。1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ4.21(s,4H,Ar-CH2),4.32(s,2H,N-CH2),7.44-7.54(m,10H,Ar-H),7.77(d,1H,J=2.8Hz,Ar-H),7.86(s,1H,J=2.8Hz,Ar-H)，8.93(s，1H,Ar-H).实施例22:5-氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(2_氟苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(22)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二邻氟苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率66%。1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ4.02(s,4Η,Ar-CH2),4.12(s,2H,N-CH2),7.17-7.48(m,8H,Ar-H)，7.85(s,1H,Ar-H)，7.92(s,1H,Ar-H)，8.77(s,1H,Ar-H).实施例23:5_氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(3_氟苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(23)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二间氟苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率52%。1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ4.01(s,4H,Ar-CH2),4.13(s,2H,N-CH2),7.20-7.65(m,8H,Ar-H)，7.85(s,1H,Ar-H)，7.94(s,1H,Ar-H)，8.76(s,1H,Ar-H).实施例24:5_氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(4_氟苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(24)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二对氟苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率48%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ4.13-4.15(s，br,6H,Ar-CH2,N-CH2),7.24-7.56(m,8H,Ar-H)，7.79(s,1H,Ar-H)，7.86(s,1H,Ar-H)，8.86(s,1H,Ar-H).实施例25:5-氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(2_甲基苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(25)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二邻甲基苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率48%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ2.11(s，6Η，2CH3)，4·02—4.15(s,br,6H,Ar-CH2,N-CH2)，7.24-7.58(m,8H,Ar-H)，7·81(s，1H,Ar-H)，7·91(s，1Η,Ar-H)，8.95(s,1H,Ar-H).实施例26:5-氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(3_甲基苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(26)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二间甲基苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率45%。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ2.34(s，6Η，2CH3)，4.33-4.35(s,br,6H,Ar-CH2,N-CH2),7.24-7.58(m,8H,Ar-H)，7·81(s，1H,Ar-H)，7·91(s，1Η,Ar-H)，8.95(s,1H,Ar-H).实施例27:5-氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(2_氯苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(27)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二邻氯苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率54%。1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ3.90(s,4Η,Ar-CH2),3.98(s,2H,N-CH2),7.28-7.71(m,8H,Ar-H)，7.88(s,1H,Ar-H)，7.98(s,1H,Ar-H)，8.67(s,1H,Ar-H).实施例28:5-氯-2-羟基-3-{4_[N，N-二(2_溴苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(28)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二邻溴苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率56%。1HNMR(400MHz，DMS0-d6)δ3.82(s,4Η,Ar-CH2),3.93(s,2H,N-CH2),7.18-7.70(m,8H,Ar-H)，7.88(s,1H,Ar-H)，7.97(s,1H,Ar-H)，8.65(s,1H,Ar-H).实施例29:5_氯-2-羟基-3-{4-[N，N-二(4_硝基苄基)胺甲基]-1H-1，2，3_三唑}苯甲酸(29)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>(a)、(b)、(c)步骤同实施例1。(d)原料为N，N-二对硝基苄基丙炔胺，其它步骤同实施例1，产率56%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δ3.89(s,br,6H,Ar-CH2,N-CH2),7.72(d，4H，J=8.4Hz，Ar-H)，7.80(s，1H，Ar-H)，7.86(s，1H，Ar-H)，8.20(d，4H，J=8.4Hz，Ar-H)，8.65(s，1H,Ar-H)·实施例30整合酶链转移反应抑制活性测定反应在96孔板中进行，总体积为50μL，反应缓冲液为25mmol/LPIPES,pH7.0，5%glycerol，0.lg/LBSA。将待测样品和800ng整合酶在反应缓冲体系中37°C孵育20min，随后，加入终浓度为IOmmol/L的MnCl2U.5pmol供体DNA和15pmol靶DNA,在37°C反应Ih0加入51.5μL结合缓冲液(10mmol/LTris-HCl,pH7.6，2mol/LNaCl,20mmol/LEDTA,0.1%Tween20)和1.5μL磁珠，混勻后20°C孵育15min。将微孔板置于磁珠收集器上90s，弃上清。PBST洗板3次。加入100μL以PBS15000稀释的碱性磷酸酶标记的地高辛抗体，37°C孵育30min，PBST洗板3次，将磁珠转移至新的微孔板中，加入100μL显色底物(0.lmol/LNa2CO3,pH9.5,6.7mmol/LPNPP,2mmol/LMgCl2)，测定405nm处OD值。设置不加入样品的DMSO阴性对照，以25μmol/L的baicalein为阳性对照，计算样品抑制率和IC5tl值。(详细方法见H.Q.Heetal.ActaPharmacologicaSinica2008，29(3)397-404.)IlJ定结果见表1。表1本发明化合物对HIV整合酶的抑制活性测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>a本发明化合物在4ug/mL时的抑制率。权利要求一种结构式为(I)的5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物其中，R表示-Ph、-CH2OH、-CH2Br、-CH2XR1、-CH2XCH2R2或-CH2N(CH2R3)2，X为NH或O；R1表示其中，R4表示-H、-t-Bu、-NO2、-Br、-Cl、-F、-CH3、-OH、-OCH3、-Ph或-OCH2CCH，R4可以在邻位、间位或对位；R2或R3表示其中R5表示-H、-t-Bu、-NO2、-Br、-Cl、-F、-CH3、-OH、-OCH3或-Ph，R5可以在邻位、间位或对位。FSA00000027252300011.tif,FSA00000027252300012.tif,FSA00000027252300013.tif2.根据权利要求1的化合物，其特征在于R表示_Ph、-CH2XCH2R2或-CH2N(CH2R3)2。3.根据权利要求2的化合物，其特征在于R2或R3表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>其中，R5表示-F或-CH3。4.根据权利要求1所述的5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤(a)以式(II)表示的5-氯水杨酸与硝酸反应，反应温度0-60°C，反应时间12-24小时，得到式(III)表示的5-氯-3-硝基水杨酸；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(b)将式(III)化合物与无机还原剂在甲醇水溶液或盐酸中反应，反应温度0-50°C，反应时间10-30小时，得到式(IV)表示的5-氯-3-胺基水杨酸，所述无机还原剂为保险粉、铁粉、锌粉或氯化亚锡；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(IV)(c)将式(IV)化合物与叠氮化试剂反应，反应温度0-40°C，反应时间2-4小时，得到式(V)表示的5-氯-3-叠氮基水杨酸，所述叠氮化试剂为三甲基硅基叠氮和亚硝酸叔丁酯的混合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(V)(d)将式(V)化合物与式(VI)表示的端炔在催化剂和有机溶剂中反应，反应温度30-50°C，反应时间8-24小时，得到如权利要求1所述的式(I)化合物，所述有机溶剂为乙腈、甲醇、乙醇水溶液或叔丁醇水溶液，所述催化剂为抗坏血酸钠和五水硫酸铜的混合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(VI)其中，R同权利要求1所述。5.根据权利要求4的方法，其特征在于步骤(a)中反应温度为0-10°C。6.根据权利要求4的方法，其特征在于步骤(b)中所述无机还原剂为保险粉。7.根据权利要求4的方法，其特征在于步骤(d)中式(V)化合物与式(VI)化合物的物质的量比为113。8.根据权利要求4的方法，其特征在于步骤(d)中所述抗坏血酸钠和五水硫酸铜的物质的量比为471。9.权利要求1所述的5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物在制备HIV-I整合酶抑制剂中的应用。全文摘要本发明涉及式(I)表示的5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物及其制备方法和应用。其中R的定义如说明书中所述。其制备方法是以5-氯水杨酸为原料，经过硝化、还原、叠氮化，再与端炔反应，得到相应的5-氯-2-羟基-3-(4-取代-1H-1，2，3-三唑)苯甲酸类化合物。本发明化合物对HIV-1整合酶具有抑制作用，部分化合物的IC50达到1.6μg/mL，因此该类化合物是较强的HIV-1整合酶抑制剂，有望开发成为新的抗HIV病毒药物。文档编号C07D249/06GK101812028SQ20101010871公开日2010年8月25日申请日期2010年2月5日优先权日2010年2月5日发明者刘称福,曾程初,杨城文,盛望,胡利明申请人:北京工业大学