专利名称：一种有效霉醇胺合成过程中中间产物有效霉烯胺溴化物的分离纯化方法
技术领域：
本发明属于生物化工技术领域，特别是涉及一种有效霉醇胺合 成过程中的中间产 物有效霉烯胺溴化物的分离纯化方法。
背景技术：
有效霉醇胺是假氨基糖类化合物酶抑制剂的核心结构。许多假氨基糖酶抑制剂类 药物，如降糖药阿卡波糖、伏格列波糖的结构中，都含有有效霉醇胺的衍生物。目前，有效霉 醇胺的生产和应用越来越受到人们的重视。有效霉醇胺也是生物农药有效霉素的组成结 构，用微生物酶解的方法裂解有效霉素的C-N键，得到有效霉烯胺与有效霉胺，再由有效霉 烯胺通过化学合成法得到有效霉醇胺，有效霉醇胺成为合成高附加值的医药或农药等中间 体，特别是能成为生产双糖酶抑制剂作为糖尿病治疗药的阿卡波糖、伏格列波糖等医药中 间体。由有效霉素裂解产物有效霉烯胺合成有效霉醇胺，现有技术通常需要先制备纯化的 有效霉烯胺，然后合成有效霉醇胺。如日本武田制药制备有效霉醇胺的专利认为必须制备 纯化的有效霉烯胺，不进行有效霉烯胺的纯化制备有效霉醇胺，溴化后该工序物质无法控 制，有效霉醇胺更无法分离。然而，有效霉烯胺的纯化难度高，先纯化有效霉烯胺再合成有 效霉醇胺的工艺过程相对复杂。
发明内容
本发明针对上述现有技术存在的不足，提出了一种有效霉醇胺合成过程中的中间 产物有效霉烯胺溴化物的分离纯化方法。以有效霉素利用生物裂解及化学合成制备有效 霉醇胺过程中，生物裂解得到有效霉烯胺与有效霉胺进行氨基保护后，有效霉烯胺保护物 能溴化而有效霉胺保护物不能溴化，而且有效霉烯胺的溴化产物和有效霉胺氨基保护物两 者存在极性差异。与本发明相关，由有效霉素裂解产物有效霉烯胺合成有效霉醇胺时，主 要有以下一些反应过程有效霉素裂解产物氨基的保护反应，保护物的溴化反应，有效霉 烯胺溴化物与有效霉胺氨基保护产物的分离纯化，以及有效霉烯胺溴化物的氢解开环反 应，最后生成有效霉醇胺的结晶产物。所述的有效霉烯胺溴化物为1-羟甲基-6、7、8三羟 基-9-溴-3-氧代-2-氧杂-4-氧杂双环[3、3、1]壬烷；所需分离的氨基保护产物为叔丁 氧羰基有效霉胺。本发明简化了由有效霉素裂解产物有效霉烯胺合成有效霉醇胺的工艺流 程，有利于工艺过程的控制和最终产物有效霉醇胺纯度的提高。本发明解决技术问题所采取的技术方案是一种有效霉醇胺合成过程中中间产物 有效霉烯胺溴化物的分离纯化方法，其由下列步骤组成(I)YPR大孔树脂的再生对已装柱的YPR大孔树脂，先用3倍树脂体积的碱性丙 酮溶液进行再生，再用去离子水洗脱至呈中性；所述碱性丙酮溶液是以质量比计含有2% 氢氧化钠的80%丙酮水溶液；(2)溴化物的溶解对由有效霉烯胺与有效霉胺氨基保护反应所生成的保护物进行的溴化反应结束后，将溴化产物蒸去甲醇，然后用去离子水溶解，得到溴化物水溶液；(3)溴化物水溶液的进柱溴化物水溶液以lBV/h的流速进入YPR大孔树脂柱吸 附，收集泄漏液；⑷YPR大孔树脂柱的洗脱用去离子水洗脱YPR大孔树脂，收集洗脱液，洗脱速度 为1 2BV/h，洗脱用去离子水用量为2倍树脂体积；(5)洗脱液收集蒸浓合并泄漏液与洗脱液进行减压蒸浓，得到纯化后的有效霉 烯胺溴化物。本发明是由有效霉素裂解产物有效霉烯胺合成有效霉醇胺过程中的关键工艺，在 有效霉素裂解产物有效霉烯胺与有效霉胺氨基的保护反应以及然后进行的保护物的溴化 反应结束后，分离除去有效霉烯胺溴化物即1-羟甲基-6、7、8三羟基-9-溴-3-氧代-2-氧 杂-4-氧杂双环[3、3、1]壬烷中的杂质，其中特别是有效霉胺氨基保护产物即叔丁氧羰基 有效霉胺。分析有效霉烯胺溴化物1-羟甲基_6、7、8三羟基-9-溴-3-氧代-2-氧杂-4-氧 杂双环[3、3、1]壬烷与有效霉胺氨基保护产物叔丁氧羰基有效霉胺的极性差异，我们提出 采用大孔树脂吸附的方法去除这类物质，选择了 型号的大孔树脂，大孔树脂对上述溴 化物不吸附，收集洗脱泄漏液即有效霉烯胺溴化物。由于所获得的有效霉烯胺溴化物的纯度高，将有效霉烯胺溴化物进行氢解开环反 应，反应转化率高，且最终产物有效霉醇胺的纯度也得以提高。本发明工艺合理，流程短，操作简便。所述大孔树脂柱可再生重复使用，溴化 物的洗脱剂为去离子水，由于大孔树脂对该溴化物不会吸附，洗脱收率很高，而杂质则 全部被树脂吸附去除，树脂饱和后用碱性丙酮溶液再生即可。本发明采用后，后续氢解开环 反应产物有效霉醇胺粗品纯度达到了 75 85%，转化率达到70%左右，再经分离纯化结晶 后，有效霉醇胺达到以下指标外观白色或微黄色结晶，旋光度+18° 24°，薄层层析一 个斑点，水分彡0.5%，含量彡95 %。
具体实施例方式实施例1大孔树脂装柱70L，用质量比为2%氢氧化钠和80%丙酮水溶液进行再生，用 量210L，流速2BV/h，后用去离子水洗到中性，去离子水用量为2 3倍树脂体积。用溴化反 应结束后蒸干甲醇得到的产物溴化物6. 8kg，用去离子水溶解成150L，进行大孔树脂吸附， 有效霉胺氨基保护产物叔丁氧羰基有效霉胺等杂质被树脂吸附。收集泄漏液，再用2倍树 脂体积的去离子水进行清洗残留在树脂上的溴化物得140L，合并泄漏液与清洗液共290L， 进行减压蒸浓，共得纯化后的溴化物5. 8kg。纯化后的溴化物进行氢解开环，得开环物即有 效霉醇胺粗品850g，经液相色谱仪检测主峰面积为82%。有效霉醇胺粗品再经分离结晶制 备最终产物有效霉醇胺白色晶体830g，液相色谱仪检测主峰面积为99. 3%，产品主成份含 量 98. 1%。实施例2大孔树脂装柱70L，用质量比为2%氢氧化钠和80%丙酮水溶液进行再生，用 量210L，流速2BV/h，后用去离子水洗到中性，去离子水用量为2 3倍树脂体积。用溴化反 应结束后蒸干甲醇得到的产物溴化物6. 5kg，用去离子水溶解成150L，进行大孔树脂吸附，有效霉胺氨基保护产物叔丁氧羰基有效霉胺等杂质被树脂吸附。收集泄漏液，再用2倍树 脂体积的去离子水进行清洗残留在树脂上的溴化物得140L，合并泄漏液与清洗液共290L， 进行减压蒸浓，共得纯化后的溴化物5. 5kg。纯化后的溴化物进行氢解开环，得开环物即有 效霉醇胺粗品858g，经液相色谱仪检测主峰面积为82. %。有效霉醇胺粗品再经分离结晶 制备最终产物有效霉醇胺白色晶体828g，液相色谱仪检测主峰面积为99. 5%，产品主成份 含量98. 2%o
实施例3YI3R大孔树脂装柱70L，用质量比为2%氢氧化钠和80%丙酮水溶液进行再生，用 量210L，流速2BV/h，后用去离子水洗到中性，去离子水用量为2 3倍树脂体积。用溴化反 应结束后蒸干甲醇得到的产物溴化物6. 3kg，用去离子水溶解成150L，进行大孔树脂吸附， 有效霉胺氨基保护产物叔丁氧羰基有效霉胺等杂质被树脂吸附。收集泄漏液，再用2倍树 脂体积的去离子水进行清洗残留在树脂上的溴化物得140L，合并泄漏液与清洗液共290L， 进行减压蒸浓，共得纯化后的溴化物5. 4kg。纯化后的溴化物进行氢解开环，得开环物即有 效霉醇胺粗品854g，经液相色谱仪检测主峰面积为82. 3%。有效霉醇胺粗品再经分离结晶 制备最终产物有效霉醇胺白色晶体821g，液相色谱仪检测主峰面积为99. 4%，产品主成份 含量98. 3%o
权利要求
一种有效霉醇胺合成过程中中间产物有效霉烯胺溴化物的分离纯化方法，其特征在于，由下列步骤组成(1)YPR大孔树脂的再生对已装柱的YPR大孔树脂，先用3倍树脂体积的碱性丙酮溶液进行再生，再用去离子水洗脱至呈中性；所述碱性丙酮溶液是以质量比计含有2％氢氧化钠的80％丙酮水溶液；(2)溴化物的溶解对由有效霉烯胺与有效霉胺氨基保护反应所生成的保护物进行的溴化反应结束后，将溴化产物蒸去甲醇，然后用去离子水溶解，得到溴化物水溶液；(3)溴化物水溶液的进柱溴化物水溶液以1BV/h的流速进入YPR大孔树脂柱吸附，收集泄漏液；(4)YPR大孔树脂柱的洗脱用去离子水洗脱YPR大孔树脂，收集洗脱液，洗脱速度为1～2BV/h，洗脱用去离子水用量为2倍树脂体积；(5)洗脱液收集蒸浓合并泄漏液与洗脱液进行减压蒸浓，得到纯化后的有效霉烯胺溴化物。
全文摘要
本发明涉及一种有效霉醇胺合成过程中的中间产物有效霉烯胺溴化物的分离纯化方法。以有效霉素利用生物裂解及化学合成制备有效霉醇胺过程中，生物裂解得到有效霉烯胺与有效霉胺进行氨基保护后，有效霉烯胺保护物能溴化而有效霉胺保护物不能溴化，而且有效霉烯胺的溴化产物和有效霉胺氨基保护物两者存在极性差异，采用在水相中利用YPR大孔树脂进行吸附分离的办法，去除有效霉烯胺溴化物中的杂质有效霉胺氨基保护物。本发明简化了由有效霉素裂解产物有效霉烯胺合成有效霉醇胺的工艺流程，有利于工艺过程的控制和最终产物有效霉醇胺纯度的提高。
文档编号C07C213/08GK101830814SQ20101017387
公开日2010年9月15日 申请日期2010年5月13日 优先权日2010年5月13日
发明者姚萍华, 常宏, 裘国寅 申请人:浙江钱江生物化学股份有限公司