专利名称：低至中压液相色谱在放射性示踪剂纯化中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及制备放射性示踪剂的方法。特别地，本发明涉及用填充有固定相的容器来分离放射性示踪剂。
背景技术：
在放射性药物的制备中，为了临床上关注的化合物的成功(放射性)合成和后续安全给药，需要建立除去副产物如过量前体的策略。这类反应通常采用相对于所用的放射性标记试剂的量远远过量的非放射性有机前体。然后，在放射性标记的化合物施用于患者以进行诊断和/或治疗应用之前，必须从反应混合物除去过量的前体。为了临床上关注的化合物的成功(放射性)合成和后续的安全给药，需要建立除去副产物如过量前体的策略。这类反应通常采用相对于所用的放射性标记试剂的量远远过量的非放射性有机前体。然后，在放射性标记的化合物施用于患者以进行诊断和/或治疗应用之前，必须从反应混合物除去过量的前体。放射性标记的化合物的纯化通常通过固相萃取(SPE)或高压液相色谱(HPLC)实现。考虑到大多数临床使用的放射性同位素的半衰期，期望在给予患者之前尽快完成放射性合成和纯化。例如，18F的半衰期为110分钟，因而18F标记的靶向底物在临床使用的一小时内合成和纯化。考虑到这些时间限制，HPLC纯化通常耗时并繁琐。此外，这种技术需要专门的仪器，并不能作为用于盒式模块的一次性合成试剂盒的一部分。这需要在后续合成之前进行HPCL纯化和平衡。然而，对于每次制备运行，无法保证相同的HPLC条件，尤其是HPLC柱的条件。因此，无法保证过程的一致性。对于技术需求和时间消耗，SPE纯化要求则低得多，而且SPE柱筒(cartridge)也可作为用于盒式模块的一次性合成试剂盒的一部分。然而，用于纯化放射性标记的化合物的柱筒通常包含20mg-2g的固相材料。就这个量而言，全部副产物的完全除去通常是繁琐的，而且在很多情况下甚至是不可实现的。由于以上原因，在本领域中显然存在纯化策略的需求，其提供可重现地、快速且有效地从最终放射性标记化合物分离不期望的物质。本发明通过应用一次性纯化容器代替多通道(multi-rim)HPLC纯化步骤来解决上述技术问题。发明概述本发明一般地涉及将正相或反相快速色谱用于从任何种类副产物纯化放射性标记的化合物。所述快速色谱通过填充有固相材料的任何种类的一次性容器来进行。这些容器可通过管道与任何种类的冲刷系统(flush system)连接，因此可作为盒式模块上或属于非盒式模块的一次性放射性药物合成试剂盒的一部分。发明详述第一方面，本发明涉及制备放射性药物的方法，所述方法包括以下步骤
放射性标记前体分子；和·使用容器从过量的前体和副产物纯化放射性标记的示踪剂。任选地，进一步的化学转化可为所述方法的一部分。放射性示踪剂的纯化包括液相色谱步骤，其中所述液相色谱为低至中(low-to medium-)压液相色谱。在一优选实施方案中，所述低至中压液相色谱的压力为1_20巴，更优选1-10巴，甚至更优选1-5巴。放射性标记的化合物包含至少一种在以下组中选择的放射性同位素99mTc、mh、 吁严打、,严^巧严^竹、 、^、72Α8、76ΒΓ、89δΓ、15^、186κΘ、18 ^、212Μ、213Μ^ΖΓ、86γ、 90Y、67CU、64CU、192Ir、165Dy、177LU、mmSn、213Bi、212Bi、211At、225AC、223Ra、16i3Yb、68(;a 和 67Ga0在一优选实施方案中，所述放射性标记的示踪剂具有用于正电子发射断层扫描的放射性同位素。在更优选的实施方案中，所述放射性同位素选自包括18F、68fe的组。所述放射性示踪剂可用于CNS、心血管或肿瘤疾病的成像。在一优选实施方案中，所述放射性标记的示踪剂用于CNS病症成像，优选用于检测Αβ斑。这样的示踪剂包括芳基(或杂芳基)乙烯基苯胺衍生物，例如但不限于 4-[(E)-2-(4-{2-[242-[F-W]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺、4-[(E)-2-(6-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶_3_基)乙烯基]-N-甲基苯胺。所述容器为柱筒、柱或任何种类的圆柱体。所述容器由任何种类的金属、合金、塑料、玻璃、碳或上述物质的混合物制成。在一优选实施方案中，用于容器的材料选自以下组任何种类的塑料、玻璃或上述物质的混合物，更优选地选自USP级Vl塑料，甚至更优选地选自药用级聚乙烯或聚丙烯。所述容器填充有固定相。所述容器可包含另外的部分，例如但不限于多孔熔块(frit)、连接器和适配器。在一优选实施方案中，所述固定相选自包括硅胶、改性硅胶、氧化铝、树脂、聚合物、共聚物或者上述物质的混合物或层的组。在更优选的实施方案中，所述固定相选自包括二氧化硅、氧化铝A、氧化铝B、氧化铝N、硅酸镁、氧化镁、氧化锆、C30、C18、tC18、C8、C4、C2、tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基 (CN)、二醇、羟基磷灰石、纤维素、石墨碳和聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物或其共聚物的组。将IOyg-IOOg的所述固定相填充于所述容器中。在一优选实施方案中，将 100mg-50g的所述固定相填充于所述容器中。在更优选的实施方案中，将2g-20g的所述固定相填充于所述容器中。甚至更优选地，将3. 5g-10g的所述固定相填充于所述容器中。相同或不同尺寸的、填充有相同或不同固定相的一个或多个容器可用于所述方法。填充有固定相的容器可与管道、注射器、针、阀或其他容器相连接。用于纯化过程的液相选自以下组有机溶剂，水，盐、酸、碱或添加剂的水溶液及上述物质的混合物。在一优选实施方案中，所述液相选自包括以下物质的组戊烷、己烷、 庚烷、辛烷、环戊烷、环己烷、异辛烷、甲苯、对二甲苯、氯苯、苯、二乙醚、二异丙醚、叔丁基甲醚、硝基甲烷、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、三乙胺、吡啶、氨、丙酮、四氢呋喃、乙酸乙酯、
4乙酸甲酯、乙腈、异丙醇、乙醇、甲醇、乙酸、三氟乙酸、水、盐溶液、缓冲液及上述物质的混合物。所述液相采用本领域技术人员已知的方式通过容器。在一优选实施方案中，所述液相经由泵、注射器、注射泵、气流、真空或它们的组合通过容器。不同种类的检测器可与本发明的方法组合。优选的检测器为UV检测器、放射性检测器、光散射检测器、电导检测器、耐火指数检测器。第二方面，本发明涉及自动化制备放射性药物的方法，所述方法包括以下步骤·放射性标记前体分子；和·使用容器从过量的前体和副产物纯化放射性标记的示踪剂。任选地，进一步的化学转化可为所述方法的一部分。放射性示踪剂的纯化包括液相色谱步骤，其中所述液相色谱为低至中压液相色谱。在一优选实施方案中，所述液相色谱的压力为1-20巴，更优选为1-10巴。放射性标记的化合物包含至少一种在以下组中选择的放射性同位素99mTc、mh、 吁严打、,严^巧严^竹、 、^、72Α8、76ΒΓ、89δΓ、15^、186κΘ、18 ^、212Μ、213Μ^ΖΓ、86γ、 90Y、67CU、64CU、192Ir、165Dy、177LU、mmSn、213Bi、212Bi、211At、225AC、223Ra、16i3Yb、68(;a 和 67Ga0在一优选实施方案中，所述放射性标记的示踪剂具有用于正电子发射断层扫描的放射性同位素。在更优选的实施方案中，所述放射性同位素选自包括18F、68fei的组。所述容器为柱筒、柱或任何种类的圆柱体。所述容器由任何种类的金属、合金、塑料、玻璃、碳或上述物质的混合物制成。在一优选实施方案中，用于容器的材料选自以下组任何种类的塑料、玻璃或上述物质的混合物，更优选地选自USP级Vl塑料，甚至更优选地选自药用级聚乙烯或聚丙烯。所述容器填充有固定相。所述容器可包含另外的部分，例如但不限于多孔熔块、连接器和适配器。在一优选实施方案中，所述固定相选自包括硅胶、改性硅胶、氧化铝、树脂、聚合物、共聚物或者上述物质的混合物或层的组。在更优选的实施方案中，所述固定相选自包括二氧化硅、氧化铝A、氧化铝B、氧化铝N、硅酸镁、氧化镁、氧化锆、C30、C18、tC18、C8、C4、C2、tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基 (CN)、二醇、羟基磷灰石、纤维素、石墨碳和聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物或其共聚物的组。将IOyg-IOOg的所述固定相填充于所述容器中。在一优选实施方案中，将 100mg-50g的所述固定相填充于所述容器中。在更优选的实施方案中，将2g-20g的所述固定相填充于所述容器中。相同或不同尺寸的、填充有相同或不同固定相的一个或多个容器可用于所述方法。填充有固定相的容器可与管道、注射器、针、阀或其他容器相连接。用于纯化过程的液相选自以下组有机溶剂，水，盐、酸、碱或添加剂的水溶液及上述物质的混合物。在一优选实施方案中，所述液相选自包括以下物质的组戊烷、己烷、 庚烷、辛烷、环戊烷、环己烷、异辛烷、甲苯、对二甲苯、氯苯、苯、二乙醚、二异丙醚、叔丁基甲醚、硝基甲烷、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、三乙胺、吡啶、氨、丙酮、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙腈、异丙醇、乙醇、甲醇、乙酸、三氟乙酸、水、盐溶液、缓冲液及上述物质的混合物。所述液相采用本领域技术人员已知的方式通过容器。在一优选实施方案中，所述液相经由泵、注射器、注射泵、气流、真空或它们的组合通过容器。不同种类的检测器可与本发明的方法组合。优选的检测器为UV检测器、放射性检测器、光散射检测器、电导检测器、耐火指数检测器。所述方法为用于制备放射性标记的示踪剂的自动化方法。在一实施方案中，所述纯化过程是与放射性示踪剂的自动化合成组合的独立自动化程序。在另一实施方案中，所述纯化过程被纳入放射性示踪剂的自动化合成。在一优选实施方案中，合成器用于制备放射性示踪剂，并且所述纯化过程在合成器中进行。更优选地，制备和纯化过程在无任何手动操作条件下进行。在一优选实施方案中，通过“中压色谱”合成和纯化放射性示踪剂在本领域技术人员已知的用于制备放射性示踪剂的“盒式模块”上进行，例如但不限于GE tracerlab MX (Coincidence FDG)、GE Fastlab、IBA Synthera0 优选地，用于“中压色谱，，的容器为一次性盒(或试剂盒)的一部分。第三方面，本发明涉及用于制备放射性药物的方法的一次性试剂盒，所述方法包括以下步骤 放射性标记前体分子；和·使用容器从过量的前体和副产物纯化放射性标记的示踪剂。任选地，进一步的化学转化可为所述方法的一部分。所述试剂盒包括用于合成放射性示踪剂的材料和用于纯化的容器，其中所述容器如上文定义。本发明进一步涉及以下内容1.制备放射性示踪剂的方法，所述方法包括使用低至中压液相色谱的纯化步骤， 其中使用一个或多于一个填充有固定相的容器。2.根据第1条的方法，其中所述放射性示踪剂为正电子发射放射性示踪剂。3.根据第1-2条的方法，其中使用选自硅胶、改性硅胶、氧化铝、树脂、聚合物、凝胶或者上述物质的混合物或层的固定相。4.根据第1-3条的方法，其中使用填充有固定相的容器，所述固定相选自包括二氧化硅、氧化铝A、氧化铝B、氧化铝N、硅酸镁、氧化镁、氧化锆、C30、C18、tC18、C8、C4、C2、 tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基(CN)、二醇、羟基磷灰石、纤维素、石墨碳、聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物、聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物或上述物质的混合物的组。5.根据第1-4条的方法，其中所述容器填充有IOyg-IOOg的所述固定相。6.根据第1-5条的方法，其中所述容器填充有2g_20g的所述固定相。7.根据第1-6条的方法，其中用于所述液相色谱的溶剂选自有机溶剂，水，盐、酸或碱或添加剂的水溶液及上述物质的混合物。8.根据第1-7条的方法，其中所述容器被纳入放射性示踪剂的自动化合成。9.用于制备放射性示踪剂的试剂盒，其具有用于中低压液相色谱的容器。
10.根据第9条的试剂盒，其在放射性示踪剂的制备中单次使用。
图1 粗4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺的中压色谱的色谱图。图2 粗产物混合物(a，b)和“中压色谱”纯化后的产物(c，d)的分析HPLC色谱图 (Atlantis T3 ； 150*4. 6mm ；3ym ;Merck Waters ；40-90% MeCN，在 5mM KH2PO4 中，pH2. 2)。图3 :tracerlab MX合成的设定(由Coincidence软件拷贝图片并调整)。图4 粗4-[(E)-2-(6-{2-[242-[F_18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶_3_基) 乙烯基]-N-甲基苯胺的中压色谱的色谱图。图5 粗产物混合物(a，b)和“中压色谱”纯化后的产物(c，d)的分析HPLC色谱图(Chromolith SpeedRod ；Merck ；0-95% MeCN，在 IOmMNii2HPO4 中，pHL 4)。图6 :Eckert&Ziegler modular lab 上的粗 4_[F_18]氟苄基)(三苯基)溴化鳞的中压色谱的色谱图，上为Y信号，下为UV信号。图7 粗产物混合物(a，b)和“中压色谱”纯化后的产物(c，d)的分析HPLC色谱图(Zorbax SB-C18 ；Agilent ；50% MeCN，在 0. IM 甲酸铵中)。图8 用于4-[￠)-2-(4-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺合成的iTracerlab MX的设定(出自coincidence FDG软件)图9 :MX合成的粗产物通过“纯化柱筒”之前的分析HPLC(样品来自反应器)；上为放射性；下为UV信号320nm图10 :MX合成和基于柱筒的纯化后的4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基) 乙氧基]乙氧基}苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺的分析HPLC ；上为放射性；下为UV信号 320nm
实施例实施例1 4-[ (E) -2-(4-{2_[2_(2_[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}_苯基)
乙烯基]-N-甲基苯胺的合成和纯化
权利要求
1.制备放射性示踪剂的方法，所述方法包括使用低至中压液相色谱的纯化步骤，其中使用一个或多于一个填充有固定相的一次性容器。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述放射性示踪剂为正电子发射放射性示踪剂。
3.根据权利要求1-2所述的方法，其中使用选自硅胶、改性硅胶、氧化铝、树脂、聚合物、凝胶或者上述物质的混合物或层的固定相。
4.根据权利要求1-3所述的方法，其中使用填充有固定相的容器，所述固定相选自包括二氧化硅、氧化铝A、氧化铝B、氧化铝N、硅酸镁、氧化镁、氧化锆、C30、C18、tC18、C8、C4、 C2、tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基(CN)、二醇、羟基磷灰石、纤维素、石墨碳、聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物、聚苯乙烯/ 二乙烯基苯共聚物或上述物质的混合物的组。
5.根据权利要求1-4所述的方法，其中所述容器填充有IOyg-IOOg的所述固定相。
6.根据权利要求1-5所述的方法，其中所述容器填充有2g-20g的所述固定相。
7.根据权利要求1-6所述的方法，其中用于所述液相色谱的溶剂选自有机溶剂，水， 盐、酸或碱或添加剂的水溶液及上述物质的混合物。
8.根据权利要求1-7所述的方法，其中所述容器被纳入放射性示踪剂的自动化合成。
9.根据权利要求1-8所述的方法，其中所述放射性示踪剂在盒式模块上制备，其中所述低至中压色谱为所述方法的一部分。
10.根据权利要求9所述的方法，其中将所述容器装配在所述盒上。
11.根据权利要求1-10所述的方法，其用于制备F-18标记的芳基(或杂芳基)乙烯基苯胺衍生物。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述F-18标记的芳基(或杂芳基)乙烯基苯胺衍生物选自4-[(E)-244-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基) 乙烯基]-N-甲基苯胺、4-[(E)-2-(6-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)乙烯基]-N-甲基苯胺。
13.制备4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺的方法，所述方法包括以下步骤 亲核放射性氟化； 任选地，将保护基转化； 将粗产物填装至用于低至中压色谱的容器； 用溶剂混合物洗涤所述容器，所述溶剂混合物适合于从所述容器洗脱副产物，其中所述溶剂以1-10巴流经所述容器； 用溶剂混合物2从所述容器洗脱纯化的4-[(E)-2-(4-{2-[242-[F-18]氟乙氧基) 乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺，所述溶剂混合物2适合于从所述容器洗脱4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺，其中所述溶剂以1-10巴流经所述容器。
14.用于制备放射性示踪剂的试剂盒，其具有用于中低压液相色谱的容器。
15.根据权利要求14所述的试剂盒，其在放射性示踪剂的制备中单次使用。
全文摘要
本发明涉及制备放射性示踪剂的方法。特别地，本发明涉及用填充有固定相的容器来分离放射性示踪剂。
文档编号C07B59/00GK102471177SQ201080031248
公开日2012年5月23日 申请日期2010年7月6日 优先权日2009年7月10日
发明者H·西本艾歇尔, K·格雷厄姆, M·贝恩特 申请人:拜耳医药股份有限公司