专利名称：缓冲溶质的过滤前调节的制作方法
缓冲溶质的过滤前调节本文中报道了在切向流过滤前用于过滤前调节溶质浓度以获得大量的药物活性蛋白质成分的方法。
背景技术：
多肽在当今的药物产业中起着重要的作用。用于产生重组多肽的表达系统是众所周知的。对于人类应用，每种药物物质都需要满足不同的标准。为了确保生物药物剂对人类的安全性，必须除去例如可能造成严重伤害的核酸、病毒和宿主细胞蛋白质。为了满足管理规定，在生产方法后必须进行一个或多个纯化步骤。其中，纯度、通量和产量在确定合适的纯化方法中起着重要的作用。归因于它们的化学和物理性质，例如分子量和结构域结构，包括二级修饰，免疫球蛋白的下游处理是必需的。例如，浓缩的溶液不仅对于配制的药物，而且对于下游处理 (DSP)中的中间物都是必需的，以获得用于经济处理和应用储存的小体积。此外，快速浓缩方法有利于确保平滑处理并缩短运行时间。在本文中，使用切向流过滤(TFF)方法。Saxena, A.，等人报道了用于分离和纯化蛋白质的基于膜的技术(Adv. Colloid Interfacial Sci. 145(2009) 1-22) 在 WO 2009/01(^69 中报道了可变切向流过滤方法。Mignard，D.，等人报道了在蛋白质的横向流超滤期间的阻塞(J. Membr. Sci. 186(2001) 133-143) Van Reis, R.，等人，J. Membr. Sci. 1 (1997) 19-29 报道了膜分离的优化简图。Donnan, F. G.，Z. Elektrochem. 17(1911)572-581 报道了在基于膜的方法期间，含蛋白质溶液的热力学非理想特性。Moner等人(J. Pharm. Sci. 93(2004)2332-2342)报道了在多种蛋白质浓度下的不同蛋白质透析期间，包含氯化物、组氨酸和乙酸的带电溶质的浓缩。发明概述本文报道的一个方面是用于浓缩免疫球蛋白溶液的超滤方法，包括以下步骤a)提供具有pH值并具有第一浓度S+或S—的缓冲物质的免疫球蛋白溶液，b)调节缓冲物质的第一浓度至第二浓度S’并维持pH值，从而如果缓冲物质是阳离子/中性对，那么用等式2计算第二浓度S’，如果缓冲物质是中性/阴离子对，那么用等式3计算第二浓度S’， C)通过切向流过滤浓缩b)的溶液， 其中等式2为
权利要求
1.用于浓缩免疫球蛋白溶液的方法，包括以下步骤a)提供免疫球蛋白溶液，其具有PH值、具有第一免疫球蛋白浓度和具有第一浓度S+或 S—的缓冲物质，b)调节所述缓冲物质的第一浓度至第二浓度S’并维持pH值，从而如果所述缓冲物质是阳离子/中性对，那么用等式2计算所述第二浓度S’，或者如果所述缓冲物质是中性/阴离子对，那么用等式3计算所述第二浓度S’，c)用切向流过滤浓缩b)的溶液至第二免疫球蛋白浓度， 其中等式2为
2.根据权利要求1的方法，其特征在于所述缓冲物质是组氨酸并且所述第二浓度是用等式2计算的。
3.根据权利要求1或2中任一项的方法，其特征在于所述第一浓度为大约20mM。
4.权利要求3的方法，其特征在于所述第二浓度为24mM到37mM。
5.权利要求1或2中任一项的方法，其特征在于所述第一浓度为大约46mM。
6.权利要求5的方法，其特征在于所述第二浓度为52mM到72mM。
7.权利要求1的方法，其特征在于所述缓冲物质是乙酸盐并且所述浓度是用等式3计算的。
8.权利要求7的方法，其特征在于所述第一浓度为20mM。
9.权利要求8的方法，其特征在于所述第二浓度为8到19mM。
10.权利要求7的方法，其特征在于所述第一浓度为45mM。
11.权利要求10的方法，其特征在于所述第二浓度为41mM到48mM。
12.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述免疫球蛋白是抗P选择蛋白抗体或者抗A β抗体。
13.用于产生免疫球蛋白的方法，包括a)培养包含编码所述免疫球蛋白的核酸的细胞，b)从步骤a)的培养基或细胞中回收所述免疫球蛋白，c)纯化所述免疫球蛋白，d)用根据权利要求1-12中任一项的方法浓缩所述免疫球蛋白并从而产生免疫球蛋白。
全文摘要
本文报道了具有过滤前溶质浓度调节的切向流过滤方法，以确保切向流过滤后溶液组分的确定浓度。
文档编号C07K1/34GK102574912SQ201080042449
公开日2012年7月11日 申请日期2010年8月27日 优先权日2009年9月29日
发明者E·罗森伯格, G·温特, S·黑普比尔迪克勒, W·库恩 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司