专利名称：治疗与gpr35和/或gpr35-herg复合物有关的病理病症的组合物和方法
治疗与GPR35和/或GPR35-HERG复合物有关的病理病症的
组合物和方法相关申请的交叉参考本申请根据35U.S.C.§ 119要求2010年7月20日提交的美国临时申请第61/365，861号的优先权，本文以该申请的内容为基础并通过引用全文纳入。序列表本申请包含通过EFS网站以电子方式提交给美国专利商标局的序列表，提交文本名为“20110712_SP10_204_ST25.txt”，具有37，594字节大小且在2011年7月13日创建。由于序列表的电子提交，电子提交的序列表作为37CFR §1.821 (c)需要的纸质拷贝和§ 1.821(e)需要的CRF。序列表所含信息在此通过引用纳入本文，并且在提交的国际申请中不超出本公开。
背景技术：
G蛋白偶联受体(GPCR)已经并且继续是最丰富的药物靶标家族之一。对此至少有两个关键的驱动因素(driver)。第一个驱动因素是数量持续增加的孤独受体被破解(deorphanize),其中一些与·人类疾病有关。示例是用于阿尔茨海默病的GPR3和用于糖尿病的GPR40。第二驱动个因素与这一近期认识有关:GPCR能引起丰富的细胞信号传导通路(如多效信号传导)，以及配体可产生活化受体的操作性偏好(operational bias)。这些通路偏好配体可以开启药物开发的新途径。GPR35 是在 1998 年首先鉴定的视紫质样 GPCR [B.F.0，Dowd, T.Nguyen, A.Marchese, R.Cheng, K.R.Lynch, H.H.Heng, L.F.Kolakowski Jr, S.R.George (1998)Discovery of three novel G-prote in-coup led receptor genes (发现三种新型 G 蛋白偶联受体基因)，Genomics47:310-313]。人GPR35基因编码309个氨基酸的蛋白。GPR35在多种哺乳动物组织中表达，例如胃肠组织、淋巴组织与中枢神经和周围神经组织。数个研究员报道了 GPR35参与胃癌的发展[S.0kumura, H.Baba, T.Kumada, K.Nanmoku, H.Nakaj ima, Y.Nakane, K.Hioki, K.1kenaka (2004) Cloning of aG-protein-coupled receptor that shows an activity to transform NIH3T3cellsand is expressed in gastric cancer cells (显不转化 NIH3T3 细胞活性且在胃癌细胞中表达的G蛋白偶联受体的克隆)，Cancer Sc1.95:131 - 135]，神经元兴奋性和突触释放的调节[J.Guo, D.J.Williams, H.L.Puhl III, S.R.1keda(2008) Inhibition of N-typecalcium channels by activation of GPR35, an orphan receptor,heterologouslyexpressed in rat sympathetic neurons (通过活化大鼠交感神经元中异源表达的孤独受体GPR35来抑制N型钙通道)，J.Pharmacol.Exp.Ther.324:342 _ 351]，伤害感受[H.0hshiro, H.Tona1-Kachi, K.1chikawa (2008)GPR35is a functional receptorin rat dorsal root ganglion neurons (GPR35是大鼠背根神经节神经元中的功能受体),Biochem.Biophys.Res.Commun.365:344 - 348.],短指智力低下综合征的发病机制[A.E.Shrimpton, B.R.Braddock, L.L.Thomson, C.K.Stein, J.J.Hoo (2004) Moleculardelineation of deletions on2q37.3in three cases with an Albright hereditaryosteodystrophy-like phenotype (奥尔布赖特遗传性骨营养不良样表型的三个病例中2q37.3删除的分子描绘)，Cl in.Genet.66:537 - 544]，和血压的调节[K.D.Min, M.Asakura, Y.Liao, K.Nakamaru, H.0kazaki, T.Takahashi, K.Fujimoto, S.1to, A.Takahashi, H.Asanuma, S.Yamazaki, T.Minamino, S.Sanada, 0.Seguchi, A.Nakano, Y.Ando, T.0tsuka, H.Furukawa, T.1somura, S.Takashima, N.Mochizuki, M.Kitakaze (2010)Identification of genes related to heart failure using global gene expressionprofiling of human failing myocardium (使用人衰竭心肌膜的全基因表达表征鉴定与心力衰竭有关的基因),Biochem.Biophys.Res.Commun.393:55 - 60.]。
至今报道了 GPR35的四种激动剂，包含犬尿喹啉酸、NPPB、托普司特(zaprinast)和溶血磷脂酸(LPA)。推测犬尿喹啉酸和LPA是GPR35的内源配体[J.Wang, N.Simonavicius, X.ffu, G.Swaminath, J.Reagan, H.Tian, L.Ling, (2006) Kynurenic acid asa ligand for orphan G protein-coupled receptor GPR35 (犬尿喹啉酸作为孤独 G 蛋白偶联受体 GPR35 的配体)，J.Biol.Chem.281:22021 - 22028; S.0ka, R.0ta, M.Shima, A.Yamashita, T.Sugiura(2010)GPR35is a novel lysophosphatidic acid receptor (GPR35是新型溶血憐脂酸受体).Biochem.Biophys.Res.Comm.395:232-237]。犬尿喹啉酸和LPA在表达GPR35的HEK293细胞和/或CHO细胞中引起数种细胞反应。例如，在表达GPR35的HEK-293细胞中，2-酰基LPA在表达GPR35的细胞中显著增强Ca2+反应，RhoA活化和ERK磷酸化。2-酰基LPA也诱导所述受体分子的内化。然而，犬尿喹啉酸或LPA是否是GPR35的天然激动剂仍然不清楚。hERG基因编码电压门控性钾通道(Kvll.1)的成孔α亚基。HERG通道在数种组织中表达，包含心肌细胞、神经元、胰腺β细胞、平滑肌和一些癌细胞。目前，hERG最广为人知是作为对动作电位复极重要的心脏中延时整流电流Ikr的主要成分。已知hERG通道的遗传突变造成遗传性长QT综合征(LQT)，这是一种可以造成患者突然死亡的疾病。能阻断hERG电流或抑制hERG通道蛋白运输的药物可以引起获得性LQT。相反，报道了 hERG通道蛋白的突变造成短QT综合征。除了在心肌细胞中起重要作用，越来越多的证据显示hERG通路表达水平在数种癌细胞中提高，包含白血病、结肠癌、胃癌、乳腺癌和肺癌细胞。不清楚为什么hERG通道在癌细胞中过量表达，但是提示了 hERG通道可能在癌细胞增殖中起作用。HERG通道有能在结构上适合多种通道阻断剂的独特孔区域(pore region)。比较大的内部空腔和通道的内部(S6)螺旋上存在特定芳族氨基酸残基(Y652和F656)是使hERG适合和结合不同药物的重要特征。除了多种hERG通道阻断剂，鉴定了 7种hERG通道激活剂，包含 RPR260243、NS1643、NS3623、PD-118057、PD-307243、卡马拉素和 A_935142(见Su, Z.等Biochem Pharm77:1383，2009)。这些hERG激活剂有多种化学结构并且通过不同机制增强hERG通道活性。这其中，卡马拉素(MTX)和A-935142能将电压依赖性通道活化变换成较少去极化电压。电生理研究显示10 μ MMTX能将半最大活化电压(V1/2)变换成大于25mV的超极化方向。hERG通道显示了在某些细胞类型中与一些其他受体形成信号转导复合物，所述其他受体包含β I整联蛋白受体和VEGFR-l(FLT-l)(如Pillozzi，S.等，(2007)Blood.110:1238 - 1250)。然而，文献中没有报道提示包含GPR35的hERG和GPCR能在物理
上相互作用形成信号转导复合物。强烈需要新的药物治疗以治疗有或易患与GPR35、hERG或GPR35-hERG复合物有关的病理病症或疾病的对象。特别地，相对于那些现有可用的药物，仍需要有一种或多种改善属性(如安全表征、功效或物理属性)的新药物。
发明内容
公开了组合物和方法以预防和/或治疗与GPR35和/或GPR35_hERG复合物病理生理学相关的疾病。例如，公开了一类具有式(I)、(II)或(III)所示结构的化合物，包含所述化合物的药学上可接受的盐:
权利要求
1.一种具有式(I)、(II)或(III)所示结构的化合物或其药学上可接受的盐
2.如权利要求I所述的式(I)、(II)和(III)化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述式(I)化合物是选自下组的化合物
3.一种筛选hERG特异性调节剂的方法，所述方法包含步骤(a)单个化合物与表达hERG的细胞和不表达hERG的细胞组成的两种不同类型细胞一起孵育； (b)用无标记生物传感器细胞试验监测各细胞类型上所述化合物诱导的细胞反应； (c)在所述化合物存在下，孵育无标记生物传感器hERG激活剂与表达hERG的细胞； (d)在所述化合物存在下，监测表达hERG的细胞上无标记生物传感器hERG激活剂诱导的细胞反应；和 (e)生成指示所述化合物是否为hERG调节剂的所述化合物的生物传感器指数。
4.一种鉴定GPR35-hERG复合物干扰分子的方法，所述方法包含 a)使包含GPR35-hERG复合物的组合物接触检测试剂；和 b)测试GPR35-hERG相互作用。
5.一种筛选GPR35特异性调节剂的方法，所述方法包含步骤 (a)提供表达GPR35的细胞； (b)使所述细胞接触化合物；和 (C)使用无标记生物传感器细胞试验来表征所述化合物。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述化合物是有选自下组化学结构的GPR35调节剂
7.如权利要求I所述的式⑴、(II)或(III)化合物或有如权利要求6中任一化学结构的化合物或其药学上可接受的盐在生产防止或治疗对象的药物或者用在防止或治疗对象的药物中的应用，其中所述对象有与GPR35病理生理学相关的疾病。
8.一种筛选GPR35-hERG信号转导复合物调节剂的方法，所述方法包含步骤 (a)测定化合物是否是GPR35特异性调节剂或hERG特异性调节剂或两者都不是；和 (b)测定所述化合物是否是GPR35-hERG信号转导复合物调节剂， 其中步骤(b)可以包含 (i)提供包含GPR35-hERG复合物的细胞； ( )使所述细胞接触所述化合物；和 (iii)通过使用一种或多种合适的试验表征所述化合物。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述化合物是具有选自下组化学结构的GPR35-hEGR信号转导复合物调节剂
10.如权利要求I所述的式(I)、(II)或(III)化合物或有如权利要求6中任一化学结构的化合物或其药学上可接受的盐在生产防止或治疗对象的药物或者用在防止或治疗对象的药物中的应用，其中所述对象有与GPR35-hEGR信号转导复合物病理生理学相关的疾病。
11.一种包含一种或多种GPCR和hERG的经分离G蛋白偶联受体(GPCR)-hERG复合物。
12.一种鉴定GPR35-hERG复合物结合分子的方法，所述方法包含 a)使如权利要求11所述的化合物接触测试分子；和 b)测定所述测试分子是否结合所述GPR35-hERG复合物。
13.—种如权利要求11所述鉴定的分子在生产治疗对象的药物中的应用，其中所述对象有与GPR35-hERG复合物病理生理学相关的疾病。
14.一种试剂盒，所述试剂盒包含表达GPR35-hERG的工程改造细胞系和操作细胞系的说明书。
15.一种工程改造细胞，所述细胞包含外源GPR35基因和外源hERG基因。
全文摘要
公开了组合物和方法以预防和/或治疗与GPR35和/或GPR35-hERG信号转导复合物病理生理学相关的疾病。例如，公开了防止和/或治疗对象中与GPR35病理生理学相关疾病的化合物。
文档编号C07D207/34GK103237791SQ201180045246
公开日2013年8月7日 申请日期2011年7月15日 优先权日2010年7月20日
发明者邓华云, 方晔, 贺明谦, H·胡, 钮渭钧, 孙海燕 申请人:康宁股份有限公司