专利名称：一种黄蝉花辛的制备方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，特别涉及一种黄蝉花辛的制备方法。
背景技术：
黄蝉花辛(Allamandicin)又叫黄蝉花内酷，CAS号51838-83-6，分子式C15H16O7,分子量308. 28，分子结构
H COOCHj
CH(OH)CHi黄蝉花辛为片状结晶物，熔点117 118°C，有抗淋巴细胞白血病P388和人体鼻咽 癌(KB)细胞活性。黄蝉为夾竹桃科黄蝉属植物，产于热带美洲，原产于巴西。药材主产于福建、广西。该物种为中国植物图谱数据库收录的有毒植物，其毒性为植株乳汁有毒。人畜中毒，症状表现为心跳加快，循环系统和呼吸系统障碍。妊娠动物食之会流产。常用于癣疥、灭孑孓。现代医学研究发现，黄蝉药材中含有大量内酷成分如黄蝉花辛、黄蝉花定和黄蝉花素等，具有细胞毒活性。通过文献检索，制备黄蝉花辛的方法，一般采用常规提取，再用硅胶柱分离。如kupchan等以软枝黄蝉的根为原料，采用こ醇提取分离出黄蝉花辛等成分。如上所述，传统提取分离方法存在技术缺陷是分离过程复杂繁琐，使用有机试剂种类多，收率低，环境污
染严重等。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种黄蝉花辛的制备方法，该方法高效、环保。为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种黄蝉花辛的制备方法，其特征在于以黄蝉根为原料，干燥，粉碎过2(Γ80目筛投入萃取釜，在温度为4(T50°C、压カ为15 25MPa，通入液态CO2进行超临界萃取，在温度5(T60°C、压カ6 10MPa从分离釜中解析萃取物，所得萃取物采用高速逆流色谱法纯化，紫外检测器在线监测，收集目标成分，回收试剂即得。所述的高速逆流色谱法纯化为取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、7JC,按4、: 2飞:5、: 2飞混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速70(Tl000rpm,同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后,流速调节为l 4ml/min,用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分。本发明的优势在于方法采用超临界CO2萃取，无溶剂污染，提取效率高，纯化步骤采用高速逆流色谱法分离，制备周期短，操作简单，而且样品不损失，制备量大，无污染。
具体实施例方式 实施例I:
黄蝉根干燥后粉碎，过60目筛，取Ikg投入萃取釜中，通入液态CO2进行萃取，设定萃取 釜參数萃取温度40°C，压カ为20MPa，通入CO2流量为25L/h，动态萃取3h，设置分离釜中温度50 0C、压カ6MPa，解析萃取物。取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、水，按4:3:7:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速SOOrpm，同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂得黄蝉花辛，经高效液相检测，含量98. 1%。实施例2:
滇姜花干燥后粉碎，过80目筛，取Ikg投入萃取釜中，通入液态CO2进行萃取，设定萃取釜參数萃取温度45°C，压カ为15MPa，通入CCV流量为20L/h，动态萃取3h，设置分离釜温度60 0C、压カ8MPa，解析得萃取物。取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、水，按9:5:9:5混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速900rpm，同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后，流速调节为lml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂得黄蝉花辛，经高效液相检测，含量99. 1%。
权利要求
1.一种黄蝉花辛的制备方法，其特征在于以黄蝉根为原料，干燥，粉碎过2(T80目筛投入萃取釜，在温度为4(T50°C、压力为15 25MPa，通入液态CO2进行超临界萃取，在温度5(T60°C、压力6 10MPa从分离釜中解析萃取物，所得萃取物采用高速逆流色谱法纯化，紫外检测器在线监测，收集目标成分，回收试剂即得。
2.根据权利要求I所述的黄蝉花辛的制备方法，其特征在于所述的高速逆流色谱法纯化为取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按4 9:2 5:5 9:2飞混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速70(Tl000rpm，同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后，流速调节为f4ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分。
全文摘要
本发明公开了一种黄蝉花辛的制备方法。方法是以黄蝉根为原料，干燥，粉碎过20~80目筛投入萃取釜，在温度为40~50℃、压力为15~25MPa，通入液态CO2进行超临界萃取，在温度50~60℃、压力6~10MPa从分离釜中解析萃取物，所得萃取物再用高速逆流色谱法纯化，紫外检测器在线监测，收集目标成分，回收试剂即得。采用本方法制备黄蝉花辛，提取效率高，纯化步骤简单，生产过程清洁无污染，适合工业化生产。
文档编号C07D493/20GK102850373SQ20121035672
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月24日 优先权日2012年9月24日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司