专利名称：一种蓝萼甲素的纯化方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种蓝萼甲素的纯化方法。
背景技术：
蓝萼甲素(glaucocalyxin A)为贝壳杉烯型的ニ職类化合物，CAS号79498-31-0，分子式C2tlH28O4,分子量332. 43，分子结构
H3C CH3 蓝萼香茶菜为唇形科香茶菜属植物，又叫香茶菜、山苏子、回菜花、倒根野苏。以全草入药，具有清热、除湿、解毒之功效，用于感冒、咽喉肿痛、扁桃体炎、胃炎、肝炎、乳腺炎、癌症(食道癌、贲门癌、肝癌、乳腺癌)。现在研究发现蓝萼香茶菜中含有大量ニ萜类成分，主要是蓝萼甲素成分，具有显著细胞毒活性。蓝萼甲素的纯化方法，一般采用有机试剂回流提取和硅胶柱分离相结合。如项昭保等人采用对蓝萼香茶菜80%こ醇提取物的こ酸こ酯部分进行色谱分离，分别为蓝萼甲素、蓝萼こ素等ニ萜类物质。再如专利(申请号201010264658. 5) “ー种蓝萼甲素的提取方法”，该方法蓝萼香茶菜地上部分并粉碎，在常压下用75 80%こ醇水溶液回流提取2 3次，毎次回流提取2 3小吋，浓缩提取液中加入硅胶并搅拌均匀，进行硅胶柱层析，无水こ醇重结晶，得蓝萼甲素晶体。如上所述，现有纯化蓝萼甲素的方法存在着纯化周期长、收率低而且方法繁琐。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种蓝萼甲素的纯化方法，该方法高效、快速。为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种蓝萼甲素的纯化方法，其特征在于以蓝萼香茶菜为原料，粉碎过2(Γ80目筛投入萃取釜，通入液态CO2和夹带剂进行超临界萃取，所得萃取物，采用高速逆流色谱法纯化，紫外检测器在线监测，收集目标成分，回收试剂，干燥即得。所述的超临界CO2萃取条件为萃取温度为35 50°C、压カ为25 30MPa、时间为2 4h，C02流量为2(T25L/h，以こ酸こ酯为夹带剂，夹带剂用量为原料量的f 3倍量，解析温度50飞0で、压カ5 lOMPa。所述的高速逆流色谱法纯化为取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、7jC,按Γ3: 3^10: Γ5: 3^8混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速70(Tl000rpm,同时泵入下相做固定相,建立动态平衡后,流速调节为l 4ml/min,用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分。本发明的积极效果是方法采用超临界CO2萃取和高速逆流色谱纯化结合，是ー种 高效、快速、清洁无污染的纯化方法，解决了硅胶柱分离收率低、操作复杂的的技术缺陷，又克服了制备液相处理量小的技术不足，适合高纯度的蓝萼甲素的制备。
具体实施例方式 实施例I:
萃取蓝萼香茶菜全草粉碎，过60目筛，取500g投入萃取釜中，通入处于超临界状态的CO2进行萃取，设定萃取釜參数萃取温度35°C，压カ为25MPa，通入CO2流量为20L/h，待萃取罐内环境稳定后，通入こ酸こ酯作为夹带剂，流量500ml/h，萃取3h，设置分离釜的温度50°C、压カ8MPa，解析得萃取物。纯化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按1:3:2:3混合，充分分层后，取上相注入满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速700rpm，同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得3. 5g，含量98. 5%。实施例2:
萃取蓝萼香茶菜全草粉碎，过80目筛，取500g投入萃取釜中，通入处于超临界状态的CO2进行萃取，设定萃取釜參数萃取温度45°C，压カ为30MPa，通入CO2流量为25L/h，待萃取罐内环境稳定后，通入こ酸こ酯作为夹带剂，流量500ml/h，萃取2h，设置分离釜的温度60°C、压カlOMPa，解析得萃取物。纯化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按2:5:4:5混合，充分分层后，取上相注入满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得4. lg，含量97. 1%。实施例3:
萃取蓝萼香茶菜全草粉碎，过40目筛，取500g投入萃取釜中，通入处于超临界状态的CO2进行萃取，设定萃取釜參数萃取温度40°C，压カ为27MPa，通入CO2流量为22L/h，待萃取罐内环境稳定后，通入こ酸こ酯作为夹带剂，流量400ml/h，萃取3h，设置分离釜的温度55°C、压カ7MPa，解析得萃取物。纯化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按3:10:5:7混合，充分分层后，取上相注入满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速lOOOrpm，同时泵入下相做固定相，建立动态平衡后，流速调节为lml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连 续制备，流分回收试剂，得3. 8g，含量95. 9%。
权利要求
1.一种蓝萼甲素的纯化方法，其特征在于以蓝萼香茶菜为原料，粉碎过2(T80目筛投入萃取釜，通入液态CO2和夹带剂进行超临界萃取，所得萃取物，采用高速逆流色谱法纯化，紫外检测器在线监测，收集目标成分，回收试剂，干燥即得。
2.根据权利要求I所述的蓝萼甲素的纯化方法，其特征在于所述的超临界CO2萃取条件为萃取温度为35 50°C、压力为25 30MPa、时间为2 4h，CO2流量为20 25L/h，以乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为原料量的广3倍量，解析温度5(T60°C、压力5 10MPa。
3.根据权利要求I所述的蓝萼甲素的纯化方法，其特征在于所述的高速逆流色谱法纯化为取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按广3:3 10:1飞:3 8混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速70(Tl000rpm,同时泵入下相做固定相,建立动态平衡后，流速调节为f4ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分。
全文摘要
本发明公开了一种蓝萼甲素的纯化方法。方法是以蓝萼香茶菜为原料，粉碎过20～80目筛投入萃取釜，通入液态CO2和夹带剂进行超临界萃取，所得萃取物，采用高速逆流色谱法纯化，紫外检测器在线监测，收集目标成分，回收试剂，干燥即得。本方法具有高效、快速、环保的优点，可工业化推广使用。
文档编号C07C45/78GK102850201SQ20121035666
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月24日 优先权日2012年9月24日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司