专利名称：一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，涉及一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法。
背景技术：
蓝粤香茶菜 Rabdosia japonica (Burm. f. )Hara var. glau-cocalyxi (Maxin) Hara为唇形科香茶菜属植物，又名山苏子，广布于我国北方，长期以来，我国民间作为毛叶香茶菜用，具有健胃、清热解毒、活血、抗菌消炎和抗癌活性。蓝萼香茶菜还具有与剂量相关的心肌保护作用。其化学成分主要为二萜和三萜类化合物。沈晓丹等从蓝萼香茶菜中分离得到蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、齐墩果酸、熊果酸、海棠果醛、木栓酮等化合物。其中蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素属于贝壳杉烷型二萜类化合物，张滨等通过药理研究发现蓝萼甲素具有显著抑制ADP，AA, PAF等诱导的兔血小板聚集。 中国专利申请号200910044882. 0采用MTT法，用AM9、L0V0、6T_CEM、HL-60细胞株对蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素进行了细胞毒活性实验，发现它们均具有显著的细胞毒活性，可用于制备抗癌药物。中国专利申请号200910044883. 6采用乙肝表面抗原(HBsAg)诊断试剂盒和乙肝核心抗原(HBeAg)诊断试剂盒对上述蓝萼香茶菜二萜类化合物进行了抗乙肝表面抗原和乙肝核心抗原试验，发现它们均具有显著的抗乙肝病毒活性，可用于制备乙肝病毒的药物。现有技术中，从药材蓝萼香茶菜中提取二萜类化合物的方法多采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析的方法分离纯化，该方法存在分离周期长、成本高等缺陷。
发明内容
本发明所述蓝萼香茶菜总二萜是从蓝萼香茶菜叶中提取分离的二萜类化合物的混合物。本发明的目的是提供一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法，其特征在于将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，以乙醇或甲醇为提取溶媒进行提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭搅拌、过滤，脱色液浓缩至相对密度为1. 05-1. 12，再通过3000-10000道尔顿的中空纤维超滤膜，操作压力为0. 1-0. 3MPa，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，先用水洗脱，再以30-70%乙醇水溶液洗脱，洗脱用量为3-6BV，洗脱流速为0. 5-2BV/h，得到的洗脱液浓缩干燥即得蓝萼香茶菜总二蔽。所述提取溶媒乙醇或甲醇的体积百分比为60-95%，提取方法为回流提取、索氏提取、浸渍提取、渗漉提取、微波提取的一种或几种结合。所述活性炭为药用活性炭，加入量为药材量的0. 5-2%，脱色温度为50-60°C。本发明方法具有操作简单、能耗低、产品质量高等优点，适合工业化生产。
具体实施例方式实施例1
将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，称取Ikg置于提取罐中，加入6倍量的70%甲醇进行加热回流提取2小时，提取2次，合并两次提取液放冷，过滤，滤液加1%的药用活性炭加热搅拌， 过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为1. 08，再通过截留分子量为6000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压力为0. 2MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得蓝萼香茶菜总二萜，总二萜类的含量为76%，经HPLC检测，蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、 蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素的含量之和为46%。实施例2:
将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，称取Ikg置于提取罐中，加入10倍量的80%乙醇进行微波提取1小时，提取3次，合并三次提取液放冷，过滤，滤液加1. 5%的药用活性炭加热搅拌， 过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为1. 12，再通过截留分子量为10000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压力为0. IMPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得蓝萼香茶菜总二萜，总二萜类的含量为72%，经HPLC检测，蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素的含量之和为43%。实施例3:
将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，称取2kg置于提取罐中，加入7倍量的60%乙醇进行渗漉提取，至渗漉液色变淡，收集提取液放冷，过滤，滤液加2、的药用活性炭加热搅拌，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为1.05，再通过截留分子量为3000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压力为0. 3MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱， 饱和吸附后，依次用水、30%乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得蓝萼香茶菜总二萜，总二萜类的含量为61%，经HPLC检测，蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素的含量之和为40%。实施例4:
将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，称取5kg置于提取罐中，加入8倍量的95%甲醇进行索氏提取3小时，提取3次，合并三次提取液放冷，过滤，滤液加0. 5%的药用活性炭加热搅拌，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为1. 10，再通过截留分子量为4000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压力为0. 25MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、45%乙醇洗脱，收集45%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得蓝萼香茶菜总二萜，总二萜类的含量为65%，经HPLC检测，蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、 蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素的含量之和为48%。实施例5:
将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，称取5kg置于提取罐中，加入10倍量的75%甲醇进行浸渍提取12小时，过滤，滤渣再用8倍量的75%甲醇进行浸渍提取8小时，合并两次提取液放冷，过滤，滤液加1%的药用活性炭加热搅拌，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为1. 09， 再通过截留分子量为8000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压力为0. 15MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、50%乙醇洗脱，收集50%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得蓝萼香茶菜总二萜，总二萜类的含量为 73%，经HPLC检测，蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丙素、蓝萼丁素、蓝萼戊素、蓝萼己素的含量之和为44%。
权利要求
1.一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法，其特征在于将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，以乙醇或甲醇为提取溶媒进行提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭搅拌、过滤， 脱色液浓缩至相对密度为1.05-1. 12，再通过3000-10000道尔顿的中空纤维超滤膜，操作压力为0. 1-0. 3MPa，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，先用水洗脱，再以30-70%乙醇水溶液洗脱，洗脱用量为3-6BV，洗脱流速为0. 5-2BV/h，得到的洗脱液浓缩干燥即得蓝萼香茶菜总二萜。
2.如权利要求1所述的一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法，其特征在于所述提取溶媒乙醇或甲醇的体积百分比为60-95%，提取方法为回流提取、索氏提取、浸渍提取、渗漉提取、 微波提取的一种或几种结合。
3.如权利要求1所述的一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法，其特征在于所述活性炭为药用活性炭，加入量为药材量的0. 5-2%，脱色温度为50-60°C。
全文摘要
本发明公开了一种蓝萼香茶菜总二萜的制备方法，方法是采用溶剂提取和大孔树脂富集结合的方法从蓝萼香茶菜中提取制备总二萜类。其制备方法为将蓝萼香茶菜叶粉碎成粗粉，加入溶媒提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭脱色，脱色液通过3000-10000道尔顿的超滤膜，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，乙醇水溶液洗脱，得到的洗脱液浓缩干燥即得蓝萼香茶菜总二萜。本发明方法具有操作简单、能耗低、产品质量高等优点，适合工业化生产。
文档编号A61P31/20GK102327317SQ20111026398
公开日2012年1月25日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司