专利名称：治疗眼病的药用组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗眼病的药用组合物，其用于治疗伴随有眼压增加和/或视神经病变的眼病，如青光眼和眼内压过高。
青光眼和眼内压过高为在所有哺乳动物(例如，灵长目动物)中都有可能发生的眼病，并且还是难治的眼病，其特征为因眼内压力增加(眼压增加)或眼房水和眼内血液循环的自体调节机能障碍所致的视神经病。青光眼的症状包括眼痛、头痛、虹彩症状、角膜混浊性视力障碍、视敏度降低、眼充血、恶心、呕吐、心搏徐缓、出汗和视野异常。有时候，青光眼直到其晚期才产生症状。
眼压增加是因眼房水从眼睫毛上皮分泌到后房的分泌速率与眼房水主要通过巩膜静脉窦从前房排除的排除速率之间失衡造成的。许多情况下，这种失衡被认为是由于在眼角部分不循环的眼房水的流阻增加造成的。
照惯例，青光眼已被认为是由于因眼压增加的机械视神经病引起的。但是，按照最近令人信服的理论，青光眼被认为是眼房水在睫状体中的分泌、眼房水从眼角小梁到巩膜静脉窦的排除或者因视神经乳头处血液循环的自身调节机能障碍的神经血管紊乱引起的。因此，尽管眼压增加是其主要的机能障碍因子，但是与在视神经乳头处视神经乳头脆化或血原性紊乱有关的所有因子都被认为是危险因素。
最近，正常眼压青光眼已广为所知，并且眼压并不是诊断青光眼的绝对因素。然而，无论眼压高还是正常，为青光眼的主要危险因素的眼压的控制对青光眼的治疗是最重要的。
青光眼为一值得注意的疾病，并且在经历人口老化的发达国家中患青光眼的病人的数量逐年增加。在这些社会中，对青光眼药物的需求在未来将会增加。
目前，已知β-阻滞剂、前列腺素衍生物和碳酸盐脱氢酶抑制剂为青光眼药物。已知这些药物通过控制眼房水的分泌或排除具有降低眼压的效果。
最近，已报道了一种为腺苷A2受体激动剂的腺苷衍生物CGS-21680[2-((4-(2-羧乙基)苯基乙基)氨基)腺苷-5’-N-乙基糖醛酰胺]，它具有降低眼压的效果(J.Pharmacol.Exp.Ther.273,320-326(1995))。但是，其效果不令人满意，因此已迫切需要开发出更有效的药物。
一般来说，由于腺苷受体的亲和力与低血压效应相互关联，因此腺苷衍生物被认为具有通过与腺苷受体有关的血管舒张降低血压的效果(J.Pharmacol.Exp.Ther.274,882-888,1988和Eur.J.Pharmacol.196,69-76,1991)。例如，已报道，CGS-21680对腺苷A2受体具有亲和力，并具有降低血压的效果。还报道了，2-辛炔基腺苷对腺苷A2受体具有亲和力，具有降低血压的效果，并用作降血压药、局部缺血的心或脑疾病的预防药或药物、以及动脉硬化的预防药或药物(日本专利公告(kokoku)号1-33477和2-17526，日本专利号2774169和日本专利申请公开(kokai)号3-287537)。
鉴于前述，尽管在眼病治疗上还没有对其它腺苷衍生物进行研究，但是与CGS-21680类似，本发明人预测，对腺苷受体具有亲和力的其它腺苷衍生物可能具有降低眼压的效果。本发明人已对腺苷受体亲和力与降低眼压效果之间的关系进行了深入的研究。因此，它们发现，出人意料地，这些腺苷衍生物对腺苷受体的亲和力与降低眼压的效果不成比例；化合物物理性能的差异大大影响了吸收分布；而且无论它们具有的降低眼压的效果如何，对腺苷受体的亲和力不能用作筛选化合物的基础。因此，本发明人在降低眼压效果的基础上对许多腺苷衍生物进行了随机筛选。结果发现，与CGS-21680相比，在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物具有优良且长效降低眼压的效果；以及这些衍生物用作例如青光眼和眼内压过高的眼病的药物。在这些发现的基础上完成了本发明。
因此，本发明提供了一种治疗眼病的药用组合物，其含有在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物作为活性组分。
本发明还提供了在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物用于制备治疗眼病的药用组合物的用途。
本发明还提供了一种治疗眼病的方法，包括给予在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物。
图2显示了当将2-(2-羟基-1-丙炔基)腺苷给予兔时在兔中2-(2-羟基-1-丙炔基)腺苷(●,■)抗眼压的效果。y轴代表眼压的变化(ΔIOP)，x轴代表给药后经过的时间(分钟)。
用于治疗本发明的眼病的药用组合物中的2-链炔基腺苷没有特别限制，只要所述衍生物在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分。2-链炔基腺苷衍生物的特定例子包括下式(1)所代表的化合物 [其中X代表可以具有取代基的烃基或酰基；Y代表经过取代的甲基、可以具有取代基的氨基甲酰基、或者可以酯化的羧基。]在式(1)中，X所代表的烃基优选为C1-C20烃基，并且可以为饱和烃基或不饱和烃基。具体例子包括烷基、链烯基、链炔基、环烷基、芳基、芳烷基和环烷基取代的烷基。烷基、链烯基和链炔基的例子包括C1-C20直链或支链烷基、链烯基和链炔基。烷基的具体例子包括直链烷基如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正辛基、正癸基、正十二烷基、正十四烷基；和支链烷基如异丙基、异丁基、叔丁基和2-乙基己基。链烯基的具体例子包括乙烯基、丙烯基和烯丙基。链炔基的具体例子包括乙炔基、丙炔基和丁炔基。环烷基的例子包括C3-C10环烷基，其中，优选C3-C8环烷基，例如环丙基、环戊基或环己基。芳基的例子包括C6-C14芳基，如苯基、甲苯基和萘基。芳烷基的例子包括C7-C14芳烷基，如苄基和苯乙基。环烷基取代的烷基的例子包括C3-C8环烷基取代的C1-C10烷基，例如环丙基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环丙基乙基、环戊基乙基、环己基乙基、环丙基丙基、环戊基丙基和环己基丙基。
在烃基上的取代基的例子包括羟基、叠氮基、氰基、氧取代烃基(烃氧基)、可以酯化的羧基、和下式(A)-(C)所示的基团 (其中R1代表烷基、芳基、芳烷基或卤代烷基；R2代表H、烷基、烷氧基或卤原子；R3和R4，彼此相同或不同，各自代表H、烷基、环烷基或芳基。)氧取代烃基(烃氧基)的例子包括烷氧基、环烷氧基和芳氧基。优选烷氧基为C1-C10烷氧基；优选环烷氧基为C3-C8环烷氧基；和优选芳氧基为C6-C14芳氧基。芳氧基的例子包括苯氧基、具有取代基如卤原子、烷基或烷氧基的取代苯氧基。
可以酯化的羧基的例子包括羧基、烷氧基羰基、环烷氧基羰基和芳氧基羰基。烷氧基、环烷氧基和芳氧基与上面所述的相似。
R1、R2、R3和R4各自所代表的烷基的例子包括C1-C10烷基。芳基的例子包括C6-C14芳基，例如苯基、甲苯基、萘基、卤代苯基和烷氧基苯基。芳烷基的例子包括C7-C14芳烷基，例如苯基取代的C1-C6烷基。卤代烷基的例子包括被1-3个卤原子如F、Cl、Br和I取代的C1-C10烷基。烷氧基的例子包括C1-C10烷氧基。环烷基的例子包括C3-C8环烷基。卤原子的例子包括F、Cl、Br和I。
X所代表的酰基的例子包括甲酰基、烷酰基、环烷基羰基和芳酰基。优选的烷酰基为C2-C11直链或支链烷酰基；优选的环烷基羰基为C4-C9环烷基羰基；优选的芳酰基为C7-C15芳酰基，如苯甲酰基、萘甲酰基、或者被卤原子、烷基或烷氧基取代的苯甲酰基。
Y所代表的甲基上的取代基的例子包括羟基、叠氮基、和下式(D)所代表的基团-NHR5(D)(其中R5代表H、基团 或基团-SO2-R8；R6代表O或S；R7代表H、烷基、氨基或烷基氨基；并且R8代表烷基或芳基。)式(D)中R7和R8所代表的烷基和芳基与前述R1-R4所代表的相同。优选的烷基氨基为C1-C10烷基氨基。
Y所代表的可以具有取代基的氨基甲酰基的例子包括下式(E)所代表的基团 (其中R9和R10，彼此可以相同或不同，各自代表H、烷基或环烷基。)式(E)中的烷基和环烷基与前述R1-R4所代表的相同。
Y所代表的可以酯化的羧基的例子包括，如上所述，羧基、烷氧基羰基、环烷氧基羰基和芳氧基羰基。
式(1)所代表的2-链炔基腺苷的例证化合物描述如下。
(1)X=烃，Y=-CH2OH2-(1-戊炔基)腺苷2-(1-己炔基)腺苷(化合物1)2-(1-庚炔基)腺苷2-(1-辛炔基)腺苷(化合物2)2-(1-十六碳炔基)腺苷2-(6-苯基-1-己炔基)腺苷2-(丁烯炔基)腺苷2-(2-环丁基-1-乙炔基)腺苷2-(2-环丙基-1-乙炔基)腺苷2-(2-环戊基-1-乙炔基)腺苷(化合物11)2-(2-环己基-1-乙炔基)腺苷(化合物12)2-(3-环丙基-1-丙炔基)腺苷2-(3-环戊基-1-丙炔基)腺苷(化合物13)2-(3-环己基-1-丙炔基)腺苷(化合物14)2-(4-环丙基-1-丁炔基)腺苷2-(4-环戊基-1-丁炔基)腺苷(化合物15)2-(4-环己基-1-丁炔基)腺苷2-(5-环丙基-1-戊炔基)腺苷(2)X=羟基取代的烃，Y=-CH2OH2-(3-羟基-1-丙炔基)腺苷(化合物4)2-(6-羟基-1-己炔基)腺苷2-(3-羟基-1-辛炔基)腺苷2-(3-羟基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷(化合物5)2-(3-羟基-3-甲基-1-丁炔基)腺苷2-[2-(1-羟基环己基)-1-乙炔基]腺苷2-[2-(1-羟基环丙基)-1-乙炔基]腺苷2-[3-(1-羟基环丙基)-1-丙炔基]腺苷2-[4-(1-羟基环丙基)-1-丁炔基]腺苷2-[5-(1-羟基环丙基)-1-戊炔基]腺苷(3)X=叠氮基或氰基取代的烃，Y=-CH2OH2-(6-叠氮基-1-己炔基)腺苷2-(5-氰基-1-戊炔基)腺苷(4)X=烃氧基取代的烃，Y=-CH2OH2-(3-甲氧基-1-丙炔基)腺苷2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷(化合物6)2-(3-丁氧基-1-丙炔基)腺苷2-(4-丙氧基-1-丁炔基)腺苷(化合物7)2-(4-辛氧基-1-丁炔基)腺苷(化合物8)2-(5-乙氧基-1-戊炔基)腺苷(化合物9)2-(3-苯氧基-1-丙炔基)腺苷2-(3-环己氧基-1-丙炔基)腺苷(化合物10)(5)X=羧基取代的烃，Y=-CH2OH2-(7-羧基-1-庚炔基)腺苷2-(5-羧基-1-戊炔基)腺苷2-(4-乙氧基羰基-1-丁炔基)腺苷(6)X=(A)-取代的烃，Y=-CH2OH2-(3-N-乙酰氨基-1-丙炔基)腺苷2-(3-N-苯甲酰氨基-1-丙炔基)腺苷2-(3-N-三氟乙酰氨基-1-丙炔基)腺苷(7)X=(B)-取代的烃，Y=-CH2OH2-(3-邻苯二甲酰亚氨基-1-丙炔基)腺苷2-(6-邻苯二甲酰亚氨基-1-己炔基)腺苷(化合物3)2-[3-(3-氯邻苯二甲酰亚氨基)-1-丙炔基]腺苷2-[3-(3-甲氧基邻苯二甲酰亚氨基)-1-丙炔基]腺苷(8)X=(C)-取代的烃，Y=-CH2OH2-(3-二甲氨基-1-丙炔基)腺苷2-(6-氨基-1-己炔基)腺苷(9)X=酰基，Y=-CH2OH2-(3-氧代-1-己炔基)腺苷2-(3-氧代-1-庚炔基)腺苷2-(3-氧代-1-辛炔基)腺苷2-(3-氧代-1-十六碳炔基)腺苷(10)X=烃，Y=经过取代的甲基5’-叠氮基-5’-脱氧-2-(1-己炔基)腺苷5’-氨基-5’-脱氧-2-(1-己炔基)腺苷5’-氨基-5’-脱氧-2-(1-辛炔基)腺苷5’-甲酰氨基-5’-脱氧-2-(1-辛炔基)腺苷5’-乙酰氨基-5’-脱氧-2-(1-己炔基)腺苷5’-(N’-甲基脲基)-5’-脱氧-2-(1-辛炔基)腺苷5’-(N’-甲硫基脲基)-5’-脱氧-2-(1-己炔基)腺苷5’-甲磺酰氨基-5’-脱氧-2-(1-辛炔基)腺苷5’-对-甲苯磺酰氨基-5’-脱氧-2-(1-辛炔基)腺苷(11)X=烃，Y=氨基甲酰基2-(1-辛炔基)腺苷-4’-羧酰胺2-(1-丁炔基)腺苷-4’-甲基羧酰胺2-(1-己炔基)腺苷-4’-甲基羧酰胺(化合物16)2-(1-己炔基)腺苷-4’-丙基羧酰胺2-(1-辛炔基)腺苷-4’-环丙基羧酰胺(12)X=烃，Y=羧基2-(1-辛炔基)腺苷-4’-羧酸2-(1-己炔基)腺苷-4’-羧酸甲酯2-(1-己炔基)腺苷-4’-羧酸乙酯在属于前述基团(1)-(12)的化合物中，属于基团(1)、(2)、(4)、(7)和(11)的化合物为优选。X优选为可以被选自以下的基团取代的烷基环烷基、羟基环烷基、邻苯二甲酰亚氨基、羟基、烷氧基、环烷氧基和芳基。Y优选为羟甲基或烷基取代的氨基甲酰基。
为本发明组合物中的活性组分的2-链炔基腺苷衍生物，可是游离形式或酸加成盐形式。酸加成盐的例子包括无机酸盐如盐酸盐、硫酸盐和氢溴化物；和有机酸盐如草酸盐、柠檬酸盐和苹果酸盐。
大多数2-链炔基腺苷衍生物为已知的化合物，并且其所有衍生物可以通过已知方法容易地制备(参见日本专利申请公开(kokai)号62-99330、62-99395、5-163294、5-9197、5-9198和5-25195；EP429681；《欧洲药理学杂志》196,69-76(1991)；《药物化学杂志》35(2),241-252(1992)；《药物化学杂志》35(12),2253-2260(1992)；《药物化学杂志》35(15),2881-2890(1992)等)。
正如下面实验实施例所述，与前述CGS-21680相比，所述2-链炔基腺苷衍生物具有显著降低眼压的优良效果，并且所述效果长。而且，所述衍生物安全度高，因此它有益地作为需要将眼压控制到一低水平的眼病如青光眼的药物。此外，所述2-链炔基腺苷衍生物具有血管舒张效果和抑制血小板聚集的效果。因此，预料所述衍生物具有改善视神经乳头的血液循环的效果，该效果被认为对青光眼的治疗非常重要。
根据给药方法，本发明的组合物可制成口服或肠胃外投药的产品形式。口服产品的例子包括固体产品如粉末、颗粒、胶囊和片剂。肠道外投药产品的例子包括滴眼剂、眼软膏和注射剂。
通过将药用可接受的添加剂添加到所述2-链炔基腺苷衍生物中的常规方法制备这些产品。
在制备滴眼剂时，如果需要的话，可以向所述2-链炔基腺苷衍生物添加如氯化钠和甘油的等渗剂；如乙二胺四乙酸钠的稳定剂；如氯化苯甲烃铵和对羟基苯甲酸酯类的防腐剂；如聚山梨酯80的溶液佐剂；或者如磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硼酸、四硼酸钠(硼砂)、盐酸和氢氧化钠的pH调节剂，由此通过常规方法制备滴眼剂。
如果需要的话，可以将所述2-链炔基腺苷衍生物与如纯的羊毛脂、凡士林、液状石蜡和聚乙二醇的眼软膏基料捏合制备眼软膏。
在制备口服固体产品时，如果需要的话，可以将所述2-链炔基腺苷衍生物与如乳糖、淀粉、结晶纤维素、乳酸钙和磷酸氢钙的赋形剂、如蔗糖、羟丙基纤维素和聚乙烯基吡咯烷酮的粘合剂；如羧甲基纤维素钙的崩解剂；或者如硬脂酸镁和滑石粉的润滑剂混合，由此通过常规方法生产产品。这些固体产品可以用例如邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素和甲基丙烯酸·甲基丙烯酸甲酯共聚物的肠溶性基料包衣，由此生产肠溶性药物。
在制备注射剂时，如果需要的话，与如盐酸、氢氧化钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的pH调节剂；或例如氯化钠的等渗剂一起，将所述2-链炔基腺苷衍生物溶于注射水中。将所得溶液进行无菌过滤，然后放入安瓿中。此外，该溶液可以与甘露糖醇或明胶混合，然后在真空下冷冻干燥，其中在使用时将所得产品制成注射剂。
为本发明组合物中活性组分的2-链炔基腺苷衍生物的剂量适宜地根据患者的年龄、体重和病理条件以及组合物的产品形式来决定。含有量为0.0001-10％(w/v)的所述衍生物的滴眼剂或眼软膏优选每天滴注或涂敷几次。当为口服剂或注射剂时，衍生物的日剂量对成人而言通常为0.001-1000mg，所述日剂量优选以单次量给药，或者以每天几次的均分剂量给药。
总共100g将上述配方混合，由此制备眼软膏，并将所得眼软膏放入铝制滴眼管(每管5g)中。制剂实施例3口服剂2-(1-辛炔基)腺苷(化合物2)25mg马铃薯淀粉 15mg结晶纤维素 20mg羟丙基纤维素 5mg硬脂酸镁 2mg乳糖 适量总共150mg(每片)根据上述配方将2-(1-辛炔基)腺苷、马铃薯淀粉、结晶纤维素、羟丙基纤维素和乳糖混合，并向所得混合物中加入水。接着将混合物捏合，然后通过带有筛的冲压件造粒。将所得颗粒干燥之后，将硬脂酸镁添加到干燥颗粒中，由此生产片剂。制剂实施例4注射剂2-(1-辛炔基)腺苷(化合物2)0.25g聚山梨酯80 5g氯化钠 8g注射水 适量总共1000mL根据上述配方制备注射剂，所得注射剂经无菌过滤，然后放入玻璃安瓿(每个安瓿2mL)中。
合成实施例(1)化合物5:2-(3-羟基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷在有钯催化剂的情况下将2-碘腺苷和1-苯基-2-丙炔-1-醇经过已知的交叉偶联反应(J.Med.Chem.35,241-252(1992))，由此合成粗产物。将该产物用硅胶提纯，由此获得2-(3-羟基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷。1H-NMR(DMSO-d6,ppm):8.43(1H,s),7.55-7.32(7H,m),6.27(1H,d,J=5.9Hz),5.86(1H,d,J=5.9Hz),5.60(1H,d,J=5.9Hz),5.47(1H,d,J=4.9Hz),5.18-5.15(2H,m),4.50(1H,q,J=4.9Hz),4.14-4.11(1H,m),3.96-3.93(1H,m),3.70-3.53(2H,m)(2)化合物6:2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷将炔丙醇溶于DMF，并将60％的氢化钠加入所得溶液。在室温下将混合物搅拌反应1小时。反应结束之后，向反应混合物中加入乙基溴，并使混合物在室温下反应过夜，由此获得3-乙氧基丙炔。
向含有3-乙氧基丙炔的反应混合物中加入6-氯-2’,3’,5’-三乙酰基-2-碘嘌呤核糖核苷，并在有钯催化剂的情况下将混合物经过已知的交叉偶联反应以及在有浓氨水的情况下进行胺化作用和脱酰作用(EP429681)，由此合成粗产物。将该产物用硅胶提纯，由此获得2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷。mp:120-127℃(3)化合物10:2-(3-环己氧基-1-丙炔基)腺苷将环己醇溶于THF，并将60％的氢化钠加入所得溶液。在室温下将混合物搅拌反应1小时。反应结束之后，向反应混合物中加入DMF和炔丙基溴，并使混合物在室温下反应1小时，然后在80℃下反应2小时，由此获得3-环己氧基丙炔。
向含有3-环己氧基丙炔的反应混合物中加入6-氯-2’,3’,5’-三乙酰基-2-碘嘌呤核糖核苷，并在有钯催化剂的情况下将混合物经过已知的交叉偶联反应以及在有浓氨水的情况下进行胺化作用和脱酰作用(EP429681)，由此合成粗产物。将该产物用硅胶提纯，由此获得2-(3-环己氧基-1-丙炔基)腺苷。1H-NMR(DMSO-d6,ppm):8.42(1H,m),7.47(2H,s),5.85(1H,d,J=5.9Hz),5.45(1H,d,J=5.9Hz),5.19-5.16(2H,m),4.56-4.52(1H,m),4.38(2H,s),4.15-4.11(1H,m),3.97-3.94(1H,m),3.69-3.35(3H,m),1.90-1.18(9H,m)实验实施例1(实验方法)使用2-(1-辛炔基)腺苷、2-(3-羟基-1-丙炔基)腺苷和CGS-21680[2-((4-(2-羧乙基)苯乙基)氨基)腺苷-5’-N-乙基糖醛酰胺]作为受试化合物。将每种化合物溶于15％的二甲亚砜水溶液(下文将该溶液称之为“滴眼基料”)，由此获得受试溶液。2-(1-辛炔基)腺苷和2-(3-羟基-1-丙炔基)腺苷的量分别为0.03％(W/V)和0.1％(W/V)。CGS-21680在所得溶液中的量为0.1％(w/v)。将该滴眼基料用作对照。
实验中使用新西兰白色雄兔(Tokyo Jikken Dobutsu)(重量2.2-3.1kg)。将这些兔子装在盒型固定装置中并用于实验。
在没有麻醉下使用扁平肺活量计(Alcon,PTG)测定每只兔子的眼压。在测定眼压之前，将0.4％盐酸丁氧普鲁卡因(Benoxil 0.4％滴眼剂，Santen制药有限公司的产品)滴注到每只兔子的眼中，由此将角膜表面麻醉。在给药之前，间隔15分钟测定几次每只兔子的眼压，直到眼压稳定。眼压稳定之后，测定3次眼压，并使用其平均值作为正常眼压。
接着，向每只兔子的左眼或者右眼分别滴注每种受试溶液(50μL)每次。在滴注受试化合物之后的第15、30、45、60、90、120、150和180分钟测定眼压。同时，测定没有滴注受试溶液的另一只眼的眼压。每种受试化合物使用6只兔子。就对照而言，将滴眼基料滴注到兔子眼中，并以上述的相似方式测定眼压。
测定结果通过平均值±标准误差显示。按照Dunnett测定通过多重比较进行显著性测验。(测定结果)结果显示在
图1和2中。当滴注滴眼基料时，兔子的眼压不变化至任意显著程度，然而当分别滴注受试化合物时，兔子的眼压随剂量依赖性地降低。由这些图看出，与CGS-21680相比，2-(1-辛炔基)腺苷和2-(3-羟基-1-丙炔基)腺苷具有降低眼压的优良效果。此外，这些化合物具有长期持续的降低眼压效果。实验实施例2(实验方法)使用表1中所示的化合物作为受试化合物。将每种化合物溶于含聚山梨酯80的生理盐水(下文将该盐水称之为“滴眼基料A”)中或含聚山梨酯80的硼酸缓冲水溶液(pH7.0)(下文将该溶液称之为“滴眼基料B”)中(每一基料中聚山梨酯80的含量5mg/mL)，由此获得受试溶液。所得溶液中每种化合物的量为0.1％(W/V)。使用滴眼基料作为对照。
测定中使用日本白色雄兔(Kitayama Labes有限公司)(重量2.1-3.2kg)。将这些兔子装在盒型固定装置中并用于测定。
在没有麻醉下使用30型标准肺活量计(Mentor的产品)测定每只兔子的眼压。在测定眼压之前，将0.4％盐酸丁氧普鲁卡因(Benoxil 0.4％滴眼液，Santen制药有限公司的产品)滴注到每只兔子的眼中，由此将角膜表面麻醉。定期测定几次每只兔子的眼压。眼压稳定之后，测定3次眼压，并使用其平均值作为眼压。
分别向每只兔子的一只眼中滴注0.1％的每种测定化合物溶液(50μL)，同时向另一只眼中滴注滴眼基料(50μL)。在滴注受试化合物之前60分钟内；就在滴注前0分钟，以及滴注后30、60、90、120、150、180、240、300、360、420和480分钟测定两只眼的眼压。每种受试化合物使用2-6只兔子。就对照而言，将滴眼基料滴注到每只兔子的双眼中，并以上述的相似方式测定眼压。
就每种受试化合物而言，在以下值的基础上评价降低眼压的效果时间与滴注受试化合物的眼的眼压和滴注滴眼基料的眼的眼压之差的变化的曲线下的面积(下文将该面积缩写为AUC(mmHg.min))；和滴注受试化合物的眼的眼压和滴注滴眼基料的眼的眼压之差的最大值(下文将该值缩写为Emax(mmHg))。(测定结果)每种受试化合物的AUC和Emax分别示于表1中。这些结果证实，相对其正常眼压而言，滴注各种受试化合物(0.1％)降低了兔子的眼压，并且降低眼压的效果延长。与此相反，当滴注滴眼基料时，兔子的眼压不变化至任意显著程度。由这些结果看出，这些化合物具有显著长期持续的降低眼压效果。
表1向眼压正常的兔子滴注受试化合物之后降低眼压的效果受试化合物AUC(mmHg.分钟)Emax(mmHg)滴眼基料化合物1-1236.0-4.6B化合物2-1093.5-4.2A化合物3-1471.0-6.3A化合物4-955.6 -4.3A化合物5-1185.6-4.8A化合物6-1538.3-5.3A化合物7-1828.5-4.9B化合物8-1683.0-5.4B化合物9-1117.5-3.7B化合物10 -945.9 -4.3A化合物11 -1532.7-4.4B化合物12 -1670.2-6.0B化合物13 -1053.9-5.9B*化合物14 -1053.2-4.0B化合物15 -1086.0-5.6B化合物16 -1838.3-6.0ACGS-21680 -508.1 -2.5A滴眼基料A -30.4 -0.4滴眼基料B -31.5 -0.2n=6(*n=2)化合物1:2-(1-己炔基)腺苷化合物2:2-(1-辛炔基)腺苷化合物3:2-(6-邻苯二甲酰亚氨基-1-己炔基)腺苷化合物4:2-(3-羟基-1-丙炔基)腺苷化合物5:2-(3-羟基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷化合物6:2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷化合物7:2-(4-丙氧基-1-丁炔基)腺苷化合物8:2-(4-辛氧基-1-丁炔基)腺苷化合物9:2-(5-乙氧基-1-戊炔基)腺苷化合物10:2-(3-环己氧基-1-丙炔基)腺苷化合物11:2-(2-环戊基-1-乙炔基)腺苷化合物12:2-(2-环己基-1-乙炔基)腺苷化合物13:2-(3-环戊基-1-丙炔基)腺苷化合物14:2-(3-环己基-1-丙炔基)腺苷化合物15:2-(4-环戊基-1-丁炔基)腺苷化合物16:2-(1-己炔基)腺苷-4’-甲基羧酰胺实验实施例3实验方法向6周龄雄性和雌性SD大鼠(每组6只)以521、729、1020、1429或2000mg/kg的单剂量口服2-(1-辛炔基)腺苷。对所得大鼠和口服溶剂的对照组大鼠观察2周。
向9月龄雄性和雌性猎兔犬(每组2只)以50、150或450mg/kg的单剂量口服2-(1-辛炔基)腺苷。对所得犬和口服空胶囊的对照组犬观察2周。实验结果推定2-(1-辛炔基)腺苷抗所述大鼠和犬的LD50值分别为2000mg/kg以上和450mg/kg以上，它们分别为最大剂量。
本发明的组合物具有降低眼压的长效和优良效果，并且该组合物可用作治疗例如青光眼和眼内压过高的眼病的药用组合物。
权利要求
1．一种治疗眼病的药用组合物，其含有在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物作为活性组分。
2．如权利要求1的药用组合物，其中所述2-链炔基腺苷衍生物为下式(1)所代表的化合物 其中X代表可以具有取代基的烃基或酰基；Y代表取代的甲基、可以具有取代基的氨基甲酰基、或者可以酯化的羧基。
3．如权利要求2的药用组合物，其中X所代表的烃基优选为C1-C20烃基，并且在所述烃基上的取代基为羟基、叠氮基、氰基、氧代烃基(烃氧基)、可以酯化的羧基、和下式(A)、(B)或(C)所示的基团 其中R1代表烷基、芳基、芳烷基或卤代烷基；R2代表H、烷基、烷氧基或卤原子；R3和R4，彼此相同或不同，各自代表H、烷基、环烷基或芳基。)
4．如权利要求2或3的药用组合物，其中Y所代表的甲基上的取代基为羟基、叠氮基、和下式(D)所代表的基团-NHR5(D)(其中R5代表H、基团 或基团-SO2-R8；R6代表O或S；R7代表H、烷基、氨基或烷基氨基；并且R8代表烷基或芳基；和Y所代表的可以具有取代基的氨基甲酰基为下式(E)所代表的基团 其中R9和R10，彼此可以相同或不同，各自代表H、烷基或环烷基。
5．如权利要求2的药用组合物，其中，在式(1)中，X为可以被选自以下的基团取代的烷基环烷基、邻苯二甲酰亚氨基、羟基、烷氧基、环烷氧基和芳基；并且Y为羟甲基或烷基取代的氨基甲酰基。
6．如权利要求2的药用组合物，其中式(1)所代表的化合物选自由以下化合物组成的组2-(1-己炔基)腺苷，2-(1-辛炔基)腺苷，2-(6-邻苯二甲酰亚氨基-1-己炔基)腺苷，2-(3-羟基-1-丙炔基)腺苷，2-(3-羟基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷，2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷，2-(4-丙氧基-1-丁炔基)腺苷，2-(4-辛氧基-1-丁炔基)腺苷，2-(5-乙氧基-1-戊炔基)腺苷，2-(3-环己氧基-1-丙炔基)腺苷，2-(2-环戊基-1-乙炔基)腺苷，2-(2-环己基-1-乙炔基)腺苷，2-(3-环戊基-1-丙炔基)腺苷，2-(3-环己基-1-丙炔基)腺苷，2-(4-环戊基-1-丁炔基)腺苷和2-(1-己炔基)腺苷-4’-甲基羧酰胺。
7．如权利要求1的药用组合物，其中所述眼病为伴随眼压增加和/或视神经病的疾病。
8．如权利要求1的药用组合物，其中所述眼病为青光眼或眼内压过高。
9．如权利要求1的药用组合物，为滴眼剂。
10．如权利要求1的药用组合物，为眼软膏。
11．在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物用于制备治疗眼病的药用组合物的用途。
12．如权利要求11的用途，其中在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物为权利要求2-6任一中所述的化合物。
13．一种治疗眼病的方法，包括给予在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物。
14．如权利要求13的方法，其中在腺嘌呤碱的2-位上具有乙炔基部分的2-链炔基腺苷衍生物为权利要求2-6任一中所述的化合物。
全文摘要
本发明涉及治疗眼病的药用组合物,它含有在腺嘌呤碱的2－位上具有乙炔基部分的2－链炔基腺苷衍生物作为活性组分。由于这些组合物具有降低眼压的长效且明显的效果,因此它们可用作伴随眼压增加或视神经衰竭的眼病如青光眼和眼内压过高的药物。
文档编号C07H19/167GK1315862SQ99810424
公开日2001年10月3日 申请日期1999年8月31日 优先权日1998年9月1日
发明者远藤和树, 畔蒜藤一, 细川友和, 三泽美和, 绀野隆 申请人:雅玛山酱油株式会社, 东亚荣养株式会社