经修饰的级联核糖核蛋白及其用途的制作方法

文档序号:13678807阅读:来源:国知局
技术特征:
1.一种人工融合体,其包含:(i)至少一个成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)相关蛋白质亚基,和(ii)核酸酶或其突变体或活性部分。2.如权利要求1所述的人工融合体,其中所述CRISPR相关蛋白质亚基选自:Cas6、Cas5、Cse1、Cse2和Cas7。3.如权利要求1-2中的任一项所述的人工融合体,其中所述人工融合体进一步包含核定位信号。4.如权利要求1-3中的任一项所述的人工融合体,其中所述核酸酶包含FokI或经修饰的FokI。5.如权利要求4所述的人工融合体,其中所述经修饰的FokI为KKRSharkey或ELDSharkey或其组合。6.如权利要求1-5中的任一项所述的人工融合体,其中所述CRISPR相关蛋白质亚基为Cse1。7.一种核酸分子,其编码如权利要求1-6中的任一项所述的人工融合体。8.一种表达载体,其包含如权利要求7所述的核酸分子。9.一种级联蛋白质复合物,其包含如权利要求1-6中的任一项所述的人工融合体。10.一种核糖核蛋白复合物,其包含如权利要求1-6中的任一项所述的人工融合体和CRISPRRNA(crRNA)分子。11.一种真核细胞,其包含如权利要求10所述的核糖核蛋白复合物。12.一种在体外修饰、可视化靶核酸,或激活或抑制靶核酸的转录的方法,其包含使所述的靶核酸与如权利要求10所述的核糖核蛋白复合物接触。13.如权利要求12所述的方法,其中所述的修饰的方法为结合和/或切割所述靶核酸。14.如权利要求12-13中的任一项所述的方法,其中所述靶核酸为双链DNA(dsDNA)。
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