本发明涉及肠膜蛋白的提取工艺,具体涉及一种肠膜蛋白制备的发酵工艺。
背景技术:
以往肠膜蛋白制作工艺不够完善,不能有效利用资源,造成原材料利用不充分,还产生大量废水,成本增高,效率低。
技术实现要素:
为了解决上述问题,本发明提供了一种肠膜蛋白制备的发酵工艺,工艺成熟,成本低,效率高。
为了达到上述目的,本发明采用了以下技术方案:一种肠膜蛋白制备的发酵工艺,具体在于以下步骤:
(1)酶解:先在肠衣废液中加入地衣芽孢杆菌蛋白酶,加酶量为每10l肠衣废液加酶2g,然后用碱液调整混合物的ph为9,升温至60℃,保温2小时,然后再加入水瓜蛋白酶,加酶量为每10l肠衣废液加酶2g,保温2小时,最后升温至70℃,保温2分钟,用100目不锈钢滤网过滤得到酶解液;
(2)吸附,过滤:将步骤(2)所得的酶解液降温至50℃后加入树脂,搅拌吸附10小时,用80目纤维布过滤袋将树脂滤出,收集滤液;
(3)洗涤、洗脱:①将盛有树脂的纤维布袋放入清水中清洗,直至无杂物为止;②将收集在纤维布袋中的树脂用浓度为10%的盐水溶液洗涤90分钟,洗去蛋白等杂质;③然后用浓度为18%的盐水溶液三次洗脱树脂,收集洗脱液;
(4)沉淀:①按酒精与洗脱液的体积比为1:1加入酒精,然后用塑料棒搅匀直至出现颗粒为止,此时酒精浓度为20%;②沉淀24小时后去除上清液,收集肝磷脂钠盐沉淀;(5)干燥:将步骤(4)得到的肝磷脂钠盐置于60℃温度条件下干燥24小时,取得固体,即得到肝磷脂钠盐;
(6)浓缩:将步骤(2)所得的滤液在真空浓缩机里面进行浓缩,浓缩体积至原来的1/4;(7)干燥:将浓缩后的液体进行喷雾干燥,其中进风温度为160℃,即得到肠膜蛋白粉。
本发明的优点是工艺完善,成本低,原材料利用率高,无浪费,节能减排,生产效率大大提高。
具体实施方式
实施例1
一种肠膜蛋白制备的发酵工艺,具体在于以下步骤:
(1)酶解:先在肠衣废液中加入地衣芽孢杆菌蛋白酶,加酶量为每10l肠衣废液加酶2g,然后用碱液调整混合物的ph为9,升温至60℃,保温2小时,然后再加入水瓜蛋白酶,加酶量为每10l肠衣废液加酶2g,保温2小时,最后升温至70℃,保温2分钟,用100目不锈钢滤网过滤得到酶解液;(2)吸附,过滤:将步骤(2)所得的酶解液降温至50℃后加入树脂,搅拌吸附10小时,用80目纤维布过滤袋将树脂滤出,收集滤液;(3)洗涤、洗脱:①将盛有树脂的纤维布袋放入清水中清洗,直至无杂物为止;②将收集在纤维布袋中的树脂用浓度为10%的盐水溶液洗涤90分钟,洗去蛋白等杂质;③然后用浓度为18%的盐水溶液三次洗脱树脂,收集洗脱液;
(4)沉淀:①按酒精与洗脱液的体积比为1:1加入酒精,然后用塑料棒搅匀直至出现颗粒为止,此时酒精浓度为20%;②沉淀24小时后去除上清液,收集肝磷脂钠盐沉淀;(5)干燥:将步骤(4)得到的肝磷脂钠盐置于60℃温度条件下干燥24小时,取得固体,即得到肝磷脂钠盐;
(6)浓缩:将步骤(2)所得的滤液在真空浓缩机里面进行浓缩,浓缩体积至原来的1/4;(7)干燥:将浓缩后的液体进行喷雾干燥,其中进风温度为160℃,即得到肠膜蛋白粉。