本发明涉及药物化学，具体涉及药物制备方法，尤其涉及一种制备大环内酯类药物索利霉素的制备新方法。
背景技术：
：索利霉素(英文名称solithromycin)是cempra制药公司开发的新一代大环内酯类抗生素药物，用于治疗社区获得性细菌性肺炎(cabp)，还可以应用于慢性阻塞性肺疾病(copd)、细菌性肺炎和一些感染治疗，该药物现处于iii期临床试验中。索利霉素是目前进入临床的第一个含氟取代的大环内酯药物。美国化学文摘号cas：760981-83-7，具有以下式i所示的化学结构：wo2009055557公开了以克拉霉素为起始原料制备索利霉素i的方法，如反应式1所示，克拉霉素依次通过酰基(如苯甲酰基bz)保护糖羟基；与具有空间位阻的羟基活化剂羰基二咪唑(cdi)反应生成中间体cl-1；与叠氮丁胺生成含叠氮的噁唑环中间体cl-2；在酸性条件下脱除其中一个糖基，形成中间体cl-3；使用氧化剂将脱除糖基后形成的羟基氧化，形成中间体cl-4；经氟化反应在邻位进行f取代，形成中间体cl-5；最后与芳香炔形成三氮唑，并且脱去糖羟基保护，形成索利霉素。国际专利申请wo2010048599对上述进行了一定的调整，在从cl-1制备cl-2过程中，采用4-氨基丁醇为原料，然后将羟基转化叠氮基团，再按原方法反应。该方法反应步骤长，对含叠氮中间体进行脱糖、氧化等反应操作危险，因为叠氮化合物都是容易爆炸且有毒的化合物；同时，叠氮中间体与炔类通过关环来产生五元环三氮唑的步骤中副反应较多。反应式1：wo2014145210为减少反应步骤，对上述方法进行改进，如反应式2所示。该方法直接引入自带侧链五元环三氮唑的原料，具体的反应步骤包括由克拉霉素制备中间体cl-1，与五元环三氮唑侧链对接，形成噁唑环中间体(其中cp为氨基、保护氨基、或者硝基)，再依次经过脱糖、氧化、氟化等步骤，最后根据cp基团采取相应的方法使其形成氨基，得到索利霉素i。该方法虽然无需引入叠氮基、以及与炔进行关环的步骤，减少了反应步骤，但是随着反应原料及部分中间体分子量的加大，降低了反应原料及部分中间体在有机反应中的溶解度，影响了反应后处理，而且侧链五元环三氮唑需要经受脱糖、氧化等步骤，容易产生较多的副反应。反应式2：广东东阳光药业有限公司的专利cn104650166公开了另一制备方法，如反应式3所示：采用先脱糖氧化后制备得到的中间体ii，然后采用先前五元环三氮唑侧链对接形成噁唑环，最后氟代形成目标化合物索利霉素。该方法避免了侧链五元环三氮唑经受脱糖、氧化步骤，减少了副反应的发生。但是由于脱糖、氧化后的化合物中间体ii比中间体cl-1溶解度差，导致反应困难，转化率低；而且，裸露氨基在脱保护的时候，会产生酰基迁移杂质，难以实施工业化生产。反应式3：因此，上述方法存在着诸多缺陷，不宜工业化生产，亟待改进。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计革除毒害性操作、减少副反应、提高反应收率、降低成本，利于环保，并适于工业化生产的制备索利霉素方法。为实现上述目的，本发明提供了一种制备索利霉素(式i)的方法，包括以下步骤：(1)制备化合物iii，方法一：化合物ii进行氟代反应，生成化合物iii，或方法二：化合物vii先进行氟代反应，再与羰基二咪唑(cdi)反应生成化合物iii；式中r为h或羟基保护剂，所述的羟基保护基为酰基保护基，优选苯甲酰(bz)基或乙酰基(ac)。所述氟代反应使用的氟代试剂选自n-氟代双苯磺酰胺(nfsi)、n-氟-苯二磺酰胺(nfobs)或1-氟-4-羟基-1,4-二氮二环[2,2,2]辛烷双四氢硼酸盐(nfth)亲电氟化剂。优选n-氟代双苯磺酰胺(nfsi)氟代试剂与化合物ii用量摩尔比1～2优选1:1.2～1.5氟代试剂与化合物vii用量摩尔比1～2优选1:1.2～1.5所述步骤(1)的氟代反应在-78℃～30℃温度下进行，优选-20～0℃反应时间0.5h～4h，优选2～3h。所述步骤(1)氟代反应使用的有机溶剂选自四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、甲苯、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯或乙酸异丙酯中的一种或者两种以上混合物。优选n,n-二甲基甲酰胺与四氢呋喃混合体系。具体的有机溶剂也可以是本领域人员能够轻易完成本发明的其他有机溶剂，并不局限于此。所述步骤(1)的氟代反应可以在碱促进下进行，所述的碱为无机碱，选自碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、叔丁醇钾、叔丁醇锂、甲醇钠、乙醇钠,钠氢或nahmds中的一种或者两种以上混合物，优选叔丁醇钾。实现本方案的碱也可以是本领域人员能够轻易完成本发明的其他碱，并不局限于此。(2)化合物iii与化合物iv(1-(4-氨基丁基)-4-(3-保护氨基苯基)-1h-1，2，3-三氮唑)五元环三氮唑的侧链氨对接，形成噁唑环化合物v，见下式：其中cp为氨基、保护氨基、或者硝基，当cp为氨基时化合物v即为索利霉素i；当cp为保护氨基时，所述保护氨基选自boc-nh、bsmoc-nh、trityl-nh或meotrityl-nh，实现本方案的氨基保护基也可以是本领域人员能够轻易完成本发明的其他氨基保护基，并不局限于此。所述步骤(2)在有机溶剂中进行，所述有机溶剂选自四氢呋喃、乙腈、n,n-二甲氨基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷、甲苯中的一种或者两种以上混合物，优选乙腈。所述反应溶剂用量为：溶剂(ml):化合物iii重量(g)＝5～30:1，优选5～7:1。所述步骤(2)也可以在上述有机溶剂与水(如乙腈：水＝1～10：1)优选2:1(ml)的混合体系下反应，(时间0.5h～16h，温度50℃～100℃)：化合物iii重量(g):化合物v＝5～30:1，优选7:1。化合物v糖单元羟基保护基r在反应中可以自行脱除，无需进一步采取脱保护方法。而单独使用有机溶剂得到的产物可以采取常规的脱糖羟基保护的方案；将反应后产物置于质子溶剂中，在室温至回流条件下即可脱去酰基保护得到化合物v，所述的质子溶剂选自醇或水或两种以上混合物；所述醇选自甲醇、乙醇、异丙醇；优选甲醇；醇:水体积比为1～10:1，优选2:1。(时间0.5h～16h，温度20℃～100℃，溶剂(ml):化合物iii重量(g)＝5～30:1，优选7:1)。所述步骤(2)的反应在有机碱促进下进行，所述的有机碱选自1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(dbu)、二环己基碳二亚胺(dcc)、n,n-二甲基吡啶胺(dmap)、三亚乙基二胺(dabco)或1,5-二氮杂双环[4.3.0]-5-壬烯(dbn)中的一种或者两种以上混合物。优选dbu。所述化合物iii与化合物iv的摩尔比为1:1～3。优选1:1～2步骤(2)的反应温度为0℃～100℃，优选50℃～60℃。步骤(2)的反应产物v：当所述化合物v的cp为氨基时，化合物v即为索利霉素i。当所述化合物v的cp为保护氨基或为硝基时，化合物v进行相应的脱保护氨基或还原硝基后形成氨基，得到索利霉素i。见下式：所述步骤(2)，当cp为保护氨基时，所述保护氨基选自boc-ny、bsmoc-nh、trityl-nh或meotrityl-nh时，采用酸解反应脱保护氨基，(温度20℃～50℃，时间0.5h～10h)。所述酸解反应的酸选自盐酸、硫酸、三氟乙酸或氢溴酸中一种或几种；实现本方案的脱氨基保护的方法也可以是本领域人员能够轻易完成本发明的其他方法，并不局限于此。所述步骤(2)，当cp为硝基时，采用催化加氢还原硝基为氨基，制成索利霉素，所述的催化加氢催化剂为钯碳或雷尼镍，优选钯碳；加氢催化剂用量与化合物v的质量比为5％～20％，优选5％，加氢的压力为常压至10mpa。优选常压。反应溶剂选自醇类、酯类或醚类；优选醇类，所述的醇类溶剂选自甲醇、乙醇或异丙醇优选甲醇；酯类溶剂选自乙酸乙酯或乙酸异丙酯优选乙酸乙酯，醚类溶剂选自乙醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃或2-甲基四氢呋喃优选四氢呋喃。(其他条件温度20℃～80℃，时间1h～10h)。实现本方案的硝基还原也可以是本领域人员能够轻易完成本发明的其他还原硝基方法，并不局限于此。所述化合物ii通过下列方法制备：r为糖羟基保护基以克拉霉素为起始物料，对糖羟基进行酰基保护；然后在酸性条件下脱去一糖单元；在三光气或者光气作用下，保护双羟基，形成碳酸酯；然后氧化羟基形成羰基，氧化反应可以采用氯铬酸吡啶盐(pcc)或者斯文氧化来实现；最后在羰基二咪唑(cdi)的作用下形成化合物ii，合成路线如下所示：具体的，如当糖羟基保护基r为苯甲酰基时制备化合物ii：(1)制备化合物a在500ml反应瓶中加入克拉霉素(50g，0.067mol)、三乙胺(18.75ml，0.135mol，2当量)、乙酸乙酯(350ml)搅拌混合。分批加入苯甲酸酐(22.5g，0.1mol，1.5当量)。加毕，于室温下(20-25℃)搅拌24h。检测克拉霉素反应完全后，减压蒸除溶剂(温度＜45℃)。残留物中加入500ml冰甲醇，冰浴下(0-5℃)搅拌0.5h，抽滤。滤饼用冰甲醇(100ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得化合物a白色固体56g。(2)制备化合物b于1000ml反应瓶中加入上步反应所得化合物a(56g，0.0657mol)、乙醇(300ml)、水(300ml)混合搅拌。缓慢滴加浓盐酸(56ml，0.672mol，10当量)，约0.5h滴毕。搅拌反应1h后，取样检测化合物a反应完全。将反应液置冰浴(0℃-5℃)冷却，于10℃以下用氨水调节ph至9～10，有白色固体析出。继续搅拌0.5h，抽滤。滤饼用水(500ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得到化合物b白色固体42g。所得固体用乙酸乙酯：石油醚＝1：4混合溶剂77℃重结晶，得到白色固体37g。(3)制备化合物c于500ml三口烧瓶中加入上步反应产物化合物b(19.3g，0.0268mol)、吡啶(17.7g，0.2265mol，8当量)、二氯甲烷(150ml)，氮气置换，冰盐浴(-20～-5℃)冷却下搅拌溶清。同时将三光气(9.6g，0.0322mol，1.2当量)溶于50ml二氯甲烷中，待反应液冷却至-10℃后，滴加上述三光气的二氯甲烷溶液，控温不超过5℃。约1h滴毕，滴毕自然升温至(20-25℃)搅拌反应1h，取样检测中间体b反应完全后，将反应液倒入300ml冰盐水中，分液，水相用二氯甲烷(100ml×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，抽滤旋干，得化合物c粗品22.9g，无需纯化即可直接用于下一步反应。(4-1)pcc氧化法制备化合物d在250ml反应瓶中加入上步反应所得化合物c(8g，0.0111mol)、二氯甲烷(100ml)搅拌溶解，分批加入氯铬酸吡啶盐(pcc，7.16g，0.0333mol，3当量)。加毕，室温搅拌反应24h。取样检测化合物c反应完全后，反应液经硅藻土过滤，滤液依次用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)，饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，40℃旋干，得到化合物d粗品7.8g，无需纯化即可直接用于下一步反应。(4-2)斯文氧化法制备化合物d在250ml三口反应瓶中加入dmso(二甲亚砜)(2.7g，0.03459mol，3当量)、二氯甲烷(50ml)，氮气置换，置于干冰-丙酮浴冷却。待反应液冷却至-70℃后，滴加草酰氯(2.92g，0.023mol，2当量)，控温不超过-65℃。约30min滴毕，保温-65～-70℃搅拌反应1h。滴加化合物c(8.3g，0.01153mol)的二氯甲烷(30ml)溶液，控温不超过-65℃。约45min滴毕，保温反应1.5h。加入三乙胺(11.64g，0.1153mol，10当量)。加毕，撤出干冰浴，自然升温至室温。加入二氯甲烷稀释反应液，依次用1n盐酸，饱和碳酸氢钠水溶液，饱和食盐水洗涤。无水硫酸钠干燥，抽滤，40℃旋干得到化合物d粗品8.7g，无需纯化即可直接用于下一步反应。(5)制备化合物应为ⅶ在250ml反应瓶中加入上步产物化合物d(9.7g，0.0135mol)、丙酮(60ml)搅拌溶解。加入dbu(1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯)(5.27g，0.03377mol，2.5当量)。加毕，室温搅拌24h。取样检测化合物d反应完全后，减压蒸除溶剂，残留物用二氯甲烷(60ml)溶解，用0.5n的磷酸二氢钾溶液调节至ph＝7～9，分液。水相用二氯甲烷(50ml×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，40℃旋干，得化合物ⅶ粗品6.88g，无需纯化即可直接用于下一步反应。(6)制备化合物ii在250ml三口烧瓶中，加入上步反应所得中间体vii(6.88g，0.0102mol)、dmf(40ml)，氮气置换，搅拌溶清。将反应液冷却至-25℃，分批加入氢化钠(0.814g，0.0204mol，2当量)。加毕，于-20℃～-25℃保温搅拌1h。滴加羰基二咪唑cdi(5.02g，0.0306mol，3当量)的dmf(二甲基甲酰胺)(20ml)溶液，控温不超过-10℃。滴毕，于-10～-15℃保温搅拌1h。取样检测反应完全后，往反应液中滴加冰水(120ml)，控温不超过10℃，有固体析出。滴毕，搅拌15min，抽滤，滤饼用水(50ml×2)淋洗。滤饼用乙酸乙酯(50ml)溶解，饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干。柱层析纯化(200-300目硅胶，柱型号：25×500m，洗脱液为甲醇：二氯甲烷＝1:10)，得到化合物ii白色固体3.6g。本发明提供的制备索利霉素的方法革除了现有技术中易爆及危险的叠氮中间体氧化、氟代反应，反应操作更安全；尤其惊喜的是在制备噁唑环和五元环三氮唑时，由于反应物溶解度较高，使反应物的转化率高，副反应少，降低生产成本，有利于环保，适宜工业化生产，有较大的应用价值。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。本文中涉及到多种物质的添加量、含量及浓度，其中所述的百分含量，除特别说明外，皆指质量百分含量。本文的实施例中，如果对于反应温度或操作温度没有做出具体说明，则该温度通常指室温(20-25℃)。在本发明的化合物结构式中，羟基保护基bzo-是苯甲酰氧基，这是本领域技术人员熟知的。一、试剂试剂：本发明实施例中使用的反应物和催化剂均为化学纯，可直接使用或根据需要经过简单纯化；有机溶剂等均为分析纯，直接使用。试剂均购自中国医药(集团)上海化学试剂公司。二、检测方法1hnmr核磁共振仪采用bruker-400mhz.质谱仪为液质联用仪(lcms)，型号：agilent6120b，检测器：dad，流动相a为水，流动相b为1％甲酸水溶液。检测条件：时间(min)ab流速(ml/min)压力(bar)080201.04003020801.04003110901.04004010901.0400实施例1中间体ii的制备：①制备化合物a在500ml反应瓶中加入克拉霉素(50g，0.067mol)、三乙胺(18.75ml，0.135mol，2当量)、乙酸乙酯(350ml)搅拌混合。分批加入苯甲酸酐(22.5g，0.1mol，1.5当量)。加毕，于室温下(20-25℃)搅拌24h。检测克拉霉素反应完全后，减压蒸除溶剂(温度＜45℃)。残留物中加入500ml冰甲醇，冰浴下(0-5℃)搅拌0.5h，抽滤。滤饼用冰甲醇(100ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得化合物a白色固体56g。esi[m+1]:852②制备化合物b于1000ml反应瓶中加入上步反应所得化合物a(56g，0.0657mol)、乙醇(300ml)、水(300ml)混合搅拌。缓慢滴加浓盐酸(56ml，0.672mol，10当量)，约0.5h滴毕。搅拌反应1h后，取样检测中间体a反应完全。将反应液置冰浴(0-5℃)冷却，于10℃以下用氨水调节ph至9～10，有白色固体析出。继续搅拌0.5h，抽滤。滤饼用水(500ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得到白色固体42g。所得固体用乙酸乙酯：石油醚＝1：4混合溶剂重结晶，得到化合物b白色固体37g。esi[m+1]:694。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.06(d,j＝7.1hz,2h),7.57(d,j＝7.4hz,1h),7.45(d,j＝7.8hz,2h),5.12(dd,j＝11.1,2.3hz,1h),5.04(m,1h),4.75(d,j＝7.6hz,1h),3.94(s,1h),3.73～3.75(m,2h),3.53～3.58(m,1h),3.43～3.57(m,1h),2.93(s,3h),2.86～2.90(m,1h),2.48～2.68(m,2h),2.28(s,6h),1.97～1.99(m,1h),1.87～1.92(m,1h),1.60～1.65(m,1h),1.37～1.47(m,3h),1.19～1.33(m,9h),1.04～1.08(m,9h),0.81(t,j＝7.4hz,3h)。③制备化合物c于500ml三口烧瓶中加入上步反应产物化合物b(19.3g，0.0268mol)、吡啶(17.7g，0.2265mol，8当量)、二氯甲烷(150ml)，氮气置换，冰盐浴(-20～-5℃)冷却下搅拌溶清。同时将三光气(9.6g，0.0322mol，1.2当量)溶于50ml二氯甲烷中，待反应液冷却至-10℃后，滴加上述三光气的二氯甲烷溶液，控温不超过5℃。约1h滴毕，滴毕自然升温至(20-25℃)搅拌反应1h，取样检测中间体b反应完全后，将反应液倒入300ml冰盐水中，分液，水相用二氯甲烷(100ml×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，抽滤，40℃旋干，得化合物c粗品22.9g，无需纯化即可直接用于下一步反应。esi[m+1]:720。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.06(d,j＝7.8hz,2h),7.56(t,j＝7.4hz,1h),7.45(t,j＝7.8hz,2h),5.02～5.09(m,2h),4.73(d,j＝7.6hz,1h),4.68(s,1h),3.72(d,j＝2.5hz,1h),3.54～3.60(m,1h),3.43～3.48(m,2h),2.91(s,3h),2.80～2.87(m,1h),2.54～2.64(m,2h),2.28(s,6h),1.76～1.89(m,3h),1.43～51.51(m,3h),1.39～1.41(m,1h),1.38(s,3h),1.20～1.32(m,9h),1.10～1.17(m,3h),1.05(d,j＝7.1hz,3h),0.82(t,j＝7.4hz,3h),0.70(d,j＝7.5hz,3h)。④-1pcc(氯铬酸吡啶盐)氧化法制备化合物d在250ml反应瓶中加入上步反应所得化合物c(8g，0.0111mol)、二氯甲烷(100ml)搅拌溶解，分批加入氯铬酸吡啶盐(pcc，7.16g，0.0333mol，3当量)。加毕，室温搅拌反应24h。取样检测中间体c反应完全后，反应液经硅藻土过滤，滤液依次用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)，饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干，得到化合物d粗品7.8g，无需纯化即可直接用于下一步反应。esi[m+1]:718。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.03(d,j＝7.8hz,2h),7.57(t,j＝7.4hz,1h),7.44(t,j＝7.8hz,2h),4.95～5.05(m,2h),4.60(s,1h),4.54(d,j＝7.6hz,1h),4.19(d,j＝7.8hz,1h),3.59～3.71(m,2h),2.80～2.93(m,3h),2.64(s,3h),2.26(s,6h),1.78～1.85(m,2h),1.65(dd,j＝14.5,2.7hz,1h),1.51～1.56(m,1h),1.48(s,3h),1.25～1.34(m,9h),1.17(d,j＝6.8hz,3h),1.13(d,j＝7.0hz,3h),0.96(d,j＝7.5hz,3h),0.86(t,j＝7.4hz,3h).④-2斯文氧化法制备化合物d在250ml三口反应瓶中加入dmso(2.7g，0.03459mol，3当量)、二氯甲烷(50ml)，氮气置换，置于干冰-丙酮浴冷却。待反应液冷却至-70℃后，滴加草酰氯(2.92g，0.023mol，2当量)，控温不超过-65℃。30min滴毕，保温-65～-70℃搅拌反应1h。滴加中间体c(8.3g，0.01153mol)的二氯甲烷(30ml)溶液，控温不超过-65℃。45min滴毕，保温反应1.5h。加入三乙胺(11.64g，0.1153mol，10当量)。加毕，撤出干冰浴，自然升温至室温。加入二氯甲烷稀释反应液，依次用1n盐酸，饱和碳酸氢钠水溶液，饱和食盐水洗涤。无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干得到粗品化合物d8.7g，无需纯化即可直接用于下一步反应。esi[m+1]:718。⑤制备化合物ⅶ在250ml反应瓶中加入上步产物化合物d(9.7g，0.0135mol)、丙酮(60ml)搅拌溶解。加入dbu(5.27g，0.03377mol，2.5当量)。加毕，室温搅拌24h。取样检测化合物d反应完全后，减压蒸除溶剂，残留物用二氯甲烷(60ml)溶解，用0.5n的磷酸二氢钾溶液调节至ph＝7～9，分液。水相用二氯甲烷(50ml×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干，得化合物ⅶ粗品6.88g，无需纯化即可直接用于下一步反应。esi[m+1]:674。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.01(d,j＝8.1hz,2h),7.55(t,j＝7.6hz,1h),7.43(t,j＝7.6hz,2h),6.55(s,1h),4.99～5.04(m,1h),4.54(dd,j＝9.6,2.7hz,1h),4.51(d,j＝7.6hz,1h),4.15(d,j＝8.3hz,1h),3.59～3.64(m,2h),3.13～3.16(m,1h),2.92～2.96(m,1h),2.85(s,3h),2.33～2.36(m,1h),2.26(s,6h),1.99(s,3h),1.86～1.95(m,2h),1.77～1.82(m,2h),1.50～1.56(m,1h),1.40～1.48(m,3h),1.36(s,3h),1.26～1.30(m,9h),1.15(d,j＝6.8hz,3h),0.95(d,j＝7.4hz,3h),0.89(t,j＝7.3hz,3h)。⑥制备化合物ⅱ在250ml三口烧瓶中，加入上步反应所得化合物vii(6.88g，0.0102mol)、dmf(40ml)，氮气置换，搅拌溶清。将反应液冷却至-25℃，分批加入氢化钠(0.814g，0.0204mol，2当量)。加毕，于-20～-25℃保温搅拌1h。滴加羰基二咪唑cdi(5.02g，0.0306mol，3当量)的dmf(20ml)溶液，控温不超过-10℃。滴毕，于-10～-15℃保温搅拌1h。取样hplc检测反应完全后，往反应液中滴加冰水(120ml)，控温不超过10℃，有固体析出。滴毕，搅拌15min，抽滤，滤饼用水(50ml×2)淋洗。滤饼用乙酸乙酯(50ml)溶解，饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干。柱层析纯化(200-300目硅胶，柱型号：25×500m，洗脱液为甲醇：二氯甲烷＝1:10)，得到白色固体3.6g，即为化合物ii。esi[m+1]:768。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.08(s,1h),8.03(d,j＝7.1hz,2h),7.56(t,j＝7.4hz,1h),7.44(t,j＝7.8hz,2h),7.35～7.36(m,1h),7.06～7.07(m,1h),6.76(s,1h),5.66(dd,j＝9.8,3.2hz,1h),4.99～5.04(m,1h),4.51(d,j＝7.6hz,1h),4.15(d,j＝8.8hz,1h),3.55～3.66(m,3h),3.08～3.23(m,3h),2.90(s,1h),2.80～2.97(m,2h),2.78(m,3h),2.28～2.34(m,4h),2.25(s,6h),2.17(d,j＝3.1hz,1h),1.81(s,3h),1.76(s,3h),1.59～1.68(m,4h),1.40～1.48(m,3h),1.36(s,3h),1.22～1.35(m,15h),1.15(d,j＝6.7hz,3h),0.95(t,j＝7.3hz,3h)。实施例2氟代反应制备化合物iii其中糖羟基保护基为乙酰基将2.05克乙酰基保护的化合物ii(2.90mmol)溶解在20毫升dmf/thf的混合溶液中(9:1)，-20℃条件下，分批加入0.39克叔丁醇钾(3.48mmol)，加毕，混合物-20℃搅拌0.5个小时，然后加入1.01克nfsi(n-氟代双苯磺酰胺)(3.19mmol)，加毕，继续-20℃反应两个小时。取样hplc检测反应完毕，加入少量水淬灭反应，用50毫升乙酸乙酯稀释反应液，然后用饱和食盐水多次洗涤(6*50毫升)，无水硫酸钠干燥，过滤旋干得到粗品(可直接用于下一步)。粗品经过柱层析纯化(硅胶200-300目，青岛黄海)，4l乙酸乙酯为洗脱剂，得到1.57克泡沫状白色固体iiib，应为iii！(收率74.7％)。esi(m+1)＝724实施例3对接反应制备化合物v将1.33克化合物iii(1.84mmol)和2.44克i(7.36mmol)溶解在20毫升乙腈/水混合液中(10:1)，加热回流过夜。第二天，将反应液冷却至室温，直接旋干，残余物经过柱层析(硅胶200-300目，青岛黄海)(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得到v粗品(直接用于下一步)。实施例4脱保护反应制备索利霉素i将上步制备的v粗品溶解在20毫升的二氯甲烷中，零度滴加10毫升三氟乙酸，室温搅拌3个小时。反应液旋干，残余物经过柱层析纯化(硅胶200-300目，青岛黄海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)得到1.26克索利霉素i。ms＝423[(m+2)/2]实施例5化合物iii的cp为氨基直接制备索利霉素将化合物iii(0.94g，0.0012mol)，1-(4-氨基丁基)-4-(3-氨基苯基)-1h-1，2，3-三氮唑(0.83g,0.0036mol,3eq),乙腈(10ml)，水(1ml)混合。在氮气保护下，于55-60℃下加热反应12h。旋干反应液,柱层析纯化(硅胶200-300目，青岛黄海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，得到索利霉素白色固体，0.5g，ms＝423[(m+2)/2]。实施例6化合物iii的cp为硝基直接制备索利霉素将化合物iii(0.94g，0.0012mol)，1-(4-氨基丁基)-4-(3-硝基苯基)-1h-1，2，3-三氮唑(0.94g,0.0036mol,3eq),乙腈(10ml)，水(1ml)混合。在氮气保护下，于55℃-60℃下加热反应6h。40℃旋干反应液,得到粗品。柱层析纯化(硅胶200-300目，青岛黄海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)得到硝基化合物v，白色固体0.5g于反应瓶中加入上述硝基化合物v(0.4g，0.00046mol)，甲醇20ml，醋酸2滴，5％钯碳(0.04g，10％wt)，氢气置换，室温搅拌反应16h。取样检测中间体i反应完全后，滤除钯碳，滤饼用甲醇(20ml)淋洗，滤液旋干，得到粗品。柱层析纯化(硅胶200-300目，青岛黄海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，得到索利霉素白色固体0.1g。ms＝423((m+2)/2)。实施例8制备化合物iii化合物vii(6.74g，0.01mol)溶于dmf:thf＝9:1混合溶剂(40ml)中，氮气置换。将反应液冷却至-25℃。加入钠氢(1g，0.025mol，2.5eq)。加毕，于-20℃～-25℃反应1h。分批加入nfsi(5g，0.015mol，1.5eq)。加毕，于-20℃～-25℃反应1h。取样检测原料反应完全后，滴加冰水90ml，控温不超过10℃，有固体析出。滴毕，搅拌15min，抽滤，冰水淋洗。滤饼溶于50ml乙酸乙酯中，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤，旋干，得到浅黄色固体粗品6.67g，ms＝692。粗品不经纯化直接下一步反应。上述粗品(6.67g，0.0096mol)溶于40mldmf中，氮气置换。将反应液冷却至-25℃。加入钠氢(0.77g，0.0193mol，2eq)。加毕，于-20℃～-25℃反应1h。滴加cdi的dmf溶液(4.84g，0.0288mol，3eq)30ml。滴毕，于-20℃～-25℃反应1h。取样检测原料反应完全后，滴加冰水90ml，控温不超过10℃，有固体析出。滴毕，搅拌15min，抽滤，冰水淋洗。滤饼溶于50ml乙酸乙酯中，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤，40℃旋干，得到粗品浅黄色固体6.6g，ms＝786。柱层析纯化(硅胶200-300目，青岛黄海)(石油醚：丙酮＝6：1+1％三乙胺)得到白色固体化合物vii6g。当前第1页12