1.一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)将产γ-聚谷氨酸的枯草芽孢杆菌接种到含有Span20的发酵培养基中进行发酵培养;
(2)在发酵培养5-7h,添加一定量的正十二烷;
(3)在发酵培养5-7h开始,每隔3-5h,添加一定量的H2O2;
(4)从发酵培养18-24h开始,流加蔗糖溶液、谷氨酸钠溶液和酵母粉溶液,流加至56-78h,发酵结束;
(5)分离提取发酵液中的γ-聚谷氨酸。
2.根据权利要求1所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,产γ-聚谷氨酸的枯草芽孢杆菌是于2014年5月20日保藏于波顿香料有限公司保藏中心的枯草芽孢杆菌PBS55,其保藏编号为CMCC3366。
3.根据权利要求1所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,产γ-聚谷氨酸的枯草芽孢杆菌是在种子培养基中活化培养而获得的,种子培养基包括如下组分:蛋白胨10-30g/L、酵母粉4-20g/L、氯化钠10-20g/L、硫酸镁0.5-4g/L、磷酸二氢钾1-8g/L和氯化铵2-10g/L,pH为6.0-8.0。
4.根据权利要求1所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,发酵培养基包括如下组分:蔗糖30-100g/L、蛋白胨10-30g/L、酵母粉5-20g/L、谷氨酸钠20-80g/L、硫酸镁0.5-3g/L和磷酸二氢钾2-5g/L,pH为6.5-7.5。
5.根据权利要求4所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,发酵培养基包括如下组分:蔗糖40-100g/L、蛋白胨15-20g/L、酵母粉6-12g/L、谷氨酸钠30-70g/L、硫酸镁1-2g/L和磷酸二氢钾2-3g/L,pH为6.8-7.2。
6.根据权利要求1所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,培养参数为:培养温度为34-38℃,搅拌转速300-400r/min,通气量1-2vvm,罐压0.04-0.1mPa。
7.根据权利要求1所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,Span20的添加量为1-10ml/L;所述步骤(2)中,正十二烷的添加量为10-60ml/L;所述步骤(3)中,H2O2的添加量为3-20ml/L。
8.根据权利要求7所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(1)中,Span20的添加量为2-6ml/L;所述步骤(2)中,正十二烷的添加量为20-40ml/L;所述步骤(3)中,H2O2的添加量为5-10ml/L。
9.根据权利要求1所述的一种高浓度γ-聚谷氨酸的发酵方法,其特征在于:所述步骤(4)中,蔗糖溶液的质量浓度为45-55%,流加速度为每小时6-12mL/L;酵母粉溶液的质量浓度为15-25%,流加速度为每小时3-6mL/L;谷氨酸钠溶液的质量浓度为45-55%,流加速度为每小时4-8mL/L。
10.一种高浓度γ-聚谷氨酸,其特征在于:所述高浓度γ-聚谷氨酸根据权利要求1-9任一项所述的发酵方法制得。