一种寡核苷酸染液及其应用与用法的制作方法

文档序号:12098012阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种寡核苷酸染液,所述染液包含四个寡核苷酸探针:

第一个寡核苷酸探针为YMPNS-CentC69-1,5′端由FAM修饰,其核苷酸序列为:

5′-CCCAATCCACTACTTTAGGTCCAAAACTCATGTTTGGGGTGGTTTCGCGCAATTTCGTT-3′;

第二个寡核苷酸探针为MKnob-2,5′端由FAM修饰,其核苷酸序列为:

5′-GAAGGCTAACACCTACGGATTTTTGACCAAGAAATGGTCTCCACCAGAAATCCAAAAAT-3′;

第三个寡核苷酸探针为YMPNS-MR68-3,5′端由TAMRA修饰,其核苷酸序列为:

5′-CTCTCGTGCGAATACAATGCCCTCAATATCATAGAAACACTATTCCTTTAGTGTGAATA-3′;

第四个寡核苷酸探针为(ACT)10,5′端由TAMRA修饰,其核苷酸序列为:

5′-ACTACTACTACTACTACTACTACTACTACTACTACT-3′。

2.根据权利要求1所述的寡核苷酸染液,其特征在于:所述寡核苷酸染液包括YMPNS-CentC69-1、MKnob-2、YMPNS-MR68-3、(ACT)10和2×SSC,其中YMPNS-CentC69-1、MKnob-2、YMPNS-MR68-3、(ACT)10四种探针组成探针混合液;所述寡核苷酸染液按体积比计,探针混合液︰2×SSC=22︰25;所述探针混合液由体积比YMPNS-CentC69-1:MKnob-2:YMPNS-MR68-3:(ACT)10=20:4:15:5混合所得,其中YMPNS-CentC69-1、MKnob-2、YMPNS-MR68-3、(ACT)10混合前均为1.0μg/μl的水溶液。

3.一种权利要求1或2所述寡核苷酸染液的应用,其特征在于:用于玉米及其亲缘物种中染色体快速鉴定。

4.一种权利要求1或2所述寡核苷酸染液的应用,其特征在于:用于制备商品化染液。

5.根据权利要求4所述的寡核苷酸染液的应用,其特征在于:所述商品化染液为试剂盒及其由试剂盒衍生的其它商品。

6.一种权利要求3所述寡核苷酸染液的应用的使用方法,所述寡核苷酸染液用于玉米及其亲缘物种中染色体快速鉴定,其特征在于:将寡核苷酸染液加8μl在每张不经变性的染色体制片上,并加入2.5μl50%w/v硫酸葡聚糖水溶液于37℃培养箱进行杂交2小时,然后在42℃2×SSC中洗5分钟,用DAPI套染后在荧光显微镜下进行观察。

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