作为NF-κB抑制剂的2H-色烯并[2,3-D]嘧啶-2,4(3H)-二酮的制作方法

本申请要求2015年12月29日提交的美国临时申请序列号62/272,408的优先权，该临时申请的全部内容以引用方式并入本文。

本发明尤其提供能够抑制nf-κb的化合物和药物组合物，以及使用所述化合物和组合物的方法。

背景技术：

nf-κb/rel(核因子κb)是包括p50/p105(nf-κb1)、p52/p100(nf-κb2)、p65(rela)、c-rel和relb的转录因子家族。这些分子可同源或异源二聚化，并且通常通过它们的抑制剂iκb而被隔离在细胞质中。在活化时，iκb被26s蛋白酶体降解并且nf-κb二聚体迁移到细胞核中以发挥转录活性。

nf-κb(p50/p65)和c-rel受经典ikkα/β/γ激酶复合物途径的调节，而relb和p52(nf-κb2)受经由ikkα/nik复合物的旁路途径调节。尽管存在这种相似性，但每个nf-κb家族成员在组织表达模式、受体信号反应和靶基因特异性方面都是不同的。这些差异在个体nf-κb/rel敲除小鼠所表现出的非冗余表型中是明显的。因此，靶向不同nf-κb/rel成员的治疗剂可能具有不同的生物学效应和毒性特征。

许多受体和刺激物可以活化nf-κb/rel，包括tcr/bcr、tnf受体超家族(例如cd40、tnfr1、tnfr2、baff、april、rank)、il-1/tlr受体和nod样受体、以及活化癌基因(例如src、ras、lmp-1、tax、v-flip)、活性氧自由基、放射剂和化疗剂。作为对这些刺激物的反应，nf-κb/rel调节细胞因子、趋化因子和在粘附、细胞周期、细胞凋亡和血管生成中起作用的分子的表达。因此，nf-κb/rel转录因子是许多人类病症(包括炎症、自身免疫疾病和癌症)的重要治疗靶点，而nf-κb/rel的小分子抑制剂可用作这些病症的治疗剂。

技术实现要素：

本发明涉及能够抑制nf-kb/rel的化合物。

本发明的一个实施方案是一种化合物。所述化合物具有式(i)的结构

其中：

a、b、c和d独立地选自碳和氮；

x、y和z独立地选自氧、硫和nr^a；

r1、r2、r3和r4独立地选自非原子、氢、卤素、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-oh、-or^a、-or^aor^b、-or^aor^bor^c、-or^a(c＝o)r^b、-o(c＝o)r^a、-o(c＝o)or^a、-o(c＝o)nr^ar^b、氰基、硝基、-cf3、-chf2、-ch2f、-cho、-cooh、-cor^a、-coor^a、-conr^ar^b、-conhconr^ar^b、-nr^ar^b、-nhcor^a、-nr^bcor^a、-csoh、-csr^a、-csor^a、-csnr^ar^b、-csnhcsnr^ar^b、-sh、-sr^a、-s(c＝o)r^a、-s(c＝o)or^a、-s(c＝o)nr^ar^b；

r5选自氢、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-r^aco、-r^anhco和-r^aoco；并且

r6、r^a、r^b和r^c独立地选自氢、羟基、胺、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基和c1-9杂环，

或者为其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种能够抑制nf-κb的化合物。所述化合物具有式(i)的结构：

其中：

a、b、c和d独立地选自碳和氮；

x、y和z独立地选自氧、硫和nr^a；

r1、r2、r3和r4独立地选自非原子、氢、卤素、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-oh、-or^a、-or^aor^b、-or^aor^bor^c、-o(c＝o)r^a、-o(c＝o)or^a、-o(c＝o)nr^ar^b、氰基、硝基、cf3、chf2、ch2f、-cho、-cooh、-cor^a、-coor^a、-conr^ar^b、-conhconr^ar^b、-nr^ar^b、-nhcor^a、-nr^bcor^a、-csoh、-csr^a、-csor^a、-csnr^ar^b、-csnhcsnr^ar^b、-sh、-sr^a、-s(c＝o)r^a、-s(c＝o)or^a、-s(c＝o)nr^ar^b；

r5选自氢、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-r^aco、-r^anhco和-r^aoco；并且

r6、r^a、r^b和r^c独立地选自氢、羟基、胺、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基和c1-9杂环，

或者为其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种能够抑制nf-κb的化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种能够抑制nf-κb的化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种药物组合物。所述药物组合物包含药学上可接受的载体和本文公开的任一化合物。

本发明的另一实施方案是一种抑制细胞中的nf-κb的方法。所述方法包括使所述细胞与本文公开的任一化合物接触。

附图说明

图1a示出来自10nm和0.33nmcd28refitc荧光偏振测定的结果的线图。图1b示出与特异性(cd28re)和非特异性(oct1)寡核苷酸的冷竞争的线图。图1c是示出代表性384孔板中荧光偏振信号分布的点图。

图2是示出通过emsa测得的由化合物6产生的rel/nf-κb抑制的线图。

图3a是示出化合物13的药代动力学数据的表格。图3b是示出静脉内化合物13在小鼠中随时间推移的平均血浆浓度的线图。

图4a是示出化合物20的药代动力学数据的表格。图4b是示出静脉内化合物20在小鼠中随时间推移的平均血浆浓度的线图。

图5a是示出化合物26的药代动力学数据的表格。图5b是示出静脉内化合物26在小鼠中随时间推移的平均血浆浓度的线图。

图6a是示出化合物42的药代动力学数据的表格。图6b是示出静脉内化合物42在小鼠中随时间推移的平均血浆浓度的线图。

图7a是示出化合物44的药代动力学数据的表格。图7b是示出静脉内化合物44在小鼠中随时间推移的平均血浆浓度的线图。

图8a是示出化合物46的药代动力学数据的表格。图8b是示出静脉内化合物46在小鼠中随时间推移的平均血浆浓度的线图。

具体实施方式

本文所用的术语的目的仅仅是描述具体实施方案，而不旨在进行限制。如在说明和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一个/一种”、“该/所述”包括复数个指代物，除非上下文清楚表明并非如此。

对于本文中数值范围的列举而言，明确考虑到其间的每个具有相同精度的中间数字。例如，对于6-9的范围，除了6和9以外还考虑数字7和8，对于6.0-7.0的范围，明确考虑到数字6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9和7.0。

术语“约”通常表示在指示值的±0.5％、1％、2％、5％或最多±10％以内。例如，“约10重量％”的量在其最广义上通常表示10重量％±10％，其表示9.0-11.0重量％。术语“约”可以替代地表示组内物理特性的偏差或平均值。

本发明的一个实施方案是一种化合物。所述化合物具有式(i)的结构：

其中：

a、b、c和d独立地选自碳和氮；

x、y和z独立地选自氧、硫和nr^a；

r1、r2、r3和r4独立地选自非原子、氢、卤素、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-oh、-or^a、-or^aor^b、-or^aor^bor^c、-or^a(c＝o)r^b、-o(c＝o)r^a、-o(c＝o)or^a、-o(c＝o)nr^ar^b、氰基、硝基、-cf3、-chf2、-ch2f、-cho、-cooh、-cor^a、-coor^a、-conr^ar^b、-conhconr^ar^b、-nr^ar^b、-nhcor^a、-nr^bcor^a、-csoh、-csr^a、-csor^a、-csnr^ar^b、-csnhcsnr^ar^b、-sh、-sr^a、-s(c＝o)r^a、-s(c＝o)or^a、-s(c＝o)nr^ar^b；

r5选自氢、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-r^aco、-r^anhco和-r^aoco；并且

r6、r^a、r^b和r^c独立地选自氢、羟基、胺、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基和c1-9杂环，

或者为其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

如本文所用，术语“化合物”是指通过一个或多个化学键连接的两个或更多个原子。在本发明中，“化学键”和“键”是可互换的并且包括但不限于共价键、离子键、氢键和范德华相互作用。本发明的共价键包括单键、双键和三键。本发明的化合物包括但不限于有机分子。构成本发明化合物的原子如果是通过本发明的化学键连接则是“键连的”。

本发明的有机化合物包括具有或不具有官能团的直链烃、支链烃和环状烃。当与诸如烷基、烯基、炔基或烷氧基的化学部分结合使用时，术语“cx-y”意指包括在链中含有x至y个碳的基团。例如，术语“cx-y烷基”意指取代或未取代的饱和烃基、包括在链中含有x至y个碳的直链烷基和支链烷基、包括卤代烷基诸如三氟甲基和2,2,2-三氟乙基等。术语“cx-y烯基”和“cx-y炔基”是指取代或未取代的不饱和脂族基团，其长度和可能的取代基与上述烷基类似，但分别含有至少一个双键或三键。

术语“独立选择”及其语法变体意指在本发明的化学结构(例如式i)中，如果结构中多于一个原子可以选自元素列表，那么这些原子可能是或可能不是相同的元素。类似地，如果结构中的多于一个化学部分可以从化学部分列表中选择，那么这些部分可能相同或可能不同。

在该实施方案的一个方面中，

x、y和z独立地选自氧和硫；

r1选自-h、-f、-cl、-ome和-oet；

r2选自-h、-ch3、-oh、-ome、-oet、-me、-et、-npr、-o-npr、-oetnpr、-oc4h9、-oc5h11、-oc6h13、-oc7h15、-o-异丁基、-o-异戊基、-ocnh2nome、-ocnh2nocmh2mome、-ocnh2noh、-ocnh2nocmh2moh、ocnh2noet、-ocnh2nocmh2moet、-o-cnh2ncooh、-o-cnh2nconh2、-o-cnh2nconhme、

r3选自-h、-cl、-br、-f和-ome；

r4选自-h和-ome；

r5选自-h、-me、-et、-pr、-ipr、-ph、ibu和-nbu；

r6选自-h和-ch3；

m是2、3、4或5；并且n是2、3、4或5。

在该实施方案的另一方面，

x、y和z独立地选自氧和硫；并且

r6是氢。

优选地，

z是氧；

r1和r3选自氢、卤素、-cn和-cf3；

r2选自c1-9烷氧基、-ocnh2nome、-ocnh2nocmh2mome、-ocnh2noh、-ocnh2nocmh2moh、ocnh2noet、-ocnh2nocmh2moet、-o-cnh2ncooh、-o-cnh2nconh2、-o-cnh2nconhme和–oh；

r4选自氢、c1-9烷氧基和-oh；

m是2、3、4或5；并且n是2、3、4或5。

更优选地，

x和y是氧；并且

r4是氢。

在该实施方案的示例性方面，所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

在该实施方案的另一方面，r1和r2通过至少一个键连接。

在该实施方案的另一方面，r2和r3通过至少一个键连接。

根据权利要求1所述的化合物，其中r3和r4通过至少一个键连接。

本发明的另一实施方案是一种化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种能够抑制nf-κb的化合物。所述化合物具有式(i)的结构：

其中：

a、b、c和d独立地选自碳和氮；

x、y和z独立地选自氧、硫和nr^a；

r1、r2、r3和r4独立地选自非原子、氢、卤素、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-oh、-or^a、-or^aor^b、-or^aor^bor^c、-o(c＝o)r^a、-o(c＝o)or^a、-o(c＝o)nr^ar^b、氰基、硝基、cf3、chf2、ch2f、-cho、-cooh、-cor^a、-coor^a、-conr^ar^b、-conhconr^ar^b、-nr^ar^b、-nhcor^a、-nr^bcor^a、-csoh、-csr^a、-csor^a、-csnr^ar^b、-csnhcsnr^ar^b、-sh、-sr^a、-s(c＝o)r^a、-s(c＝o)or^a、-s(c＝o)nr^ar^b；

r5选自氢、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基、c1-9杂环、-r^aco、-r^anhco和-r^aoco；并且

r6、r^a、r^b和r^c独立地选自氢、羟基、胺、c1-9烷基、c1-9烯基、c1-9炔基、芳基和c1-9杂环，

或者为其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

在本发明中，能够抑制nf-κb的化合物可以作为直接或间接的nf-κb/rel抑制剂起作用。直接nf-κb/rel抑制剂是与nf-κb/rel直接结合并相互作用并抑制其dna结合和转录功能的化合物。间接nf-κb/rel抑制剂是与不用于nf-κb/rel的化合物结合或相互作用，从而对nf-κb/rel活性产生下游抑制效应的化合物。

在该实施方案的一个方面，

x、y和z独立地选自氧和硫；

r1选自-h、-f、-cl、-ome和-oet；

r2选自-h、-ch3、-oh、-ome、-oet、-et、-npr、-o-npr、-oetnpr、-oc4h9、-oc5h11、-oc6h13、-oc7h15、-o-异丁基、-o-异戊基、-ocnh2nome、-ocnh2nocmh2mome、-ocnh2noh、-ocnh2nocmh2moh、ocnh2noet、-ocnh2nocmh2moet、-o-cnh2ncooh、-o-cnh2nconh2、-o-cnh2nconhme、

r3选自-h、-cl、-br、-f和-ome；

r4选自-h和-ome；

r5选自-h、-me和-nbu；

r6选自-h和-ch3；

m是2、3、4或5；并且n是2、3、4或5。

在该实施例的另一方面，

x、y和z独立地选自氧和硫；并且

r6是氢。

优选地，

z是氧；

r1和r3选自氢、卤素、-cn和-cf3；

r2选自c1-9烷氧基、-ocnh2nome、-ocnh2nocmh2mome、-ocnh2noh、-ocnh2nocmh2moh、-ocnh2noet、-ocnh2nocmh2moet和–oh；

r4选自氢、c1-9烷氧基和-oh；

m是2、3、4或5；并且n是2、3、4或5。

更优选地，

x和y是氧；并且

r4是氢。

在该实施方案的示例性方面，所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

在该实施方案的另一方面，r1和r2通过至少一个键连接。

在该实施方案的另一方面，r2和r3通过键连接。

在该实施方案的另一方面，r3和r4通过键连接。

本发明的另一实施方案是一种能够抑制nf-κb的化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方案是一种能够抑制nf-κb的化合物。所述化合物选自：

及其结晶形式、水合物或药学上可接受的盐。

r1和r2、r2和r3以及r3和r4可以接合形成芳族环或非芳族环。该环可以是烃环或杂环环。

本发明的另一实施方案是一种药物组合物。所述药物组合物包含药学上可接受的载体和本文公开的任一化合物。所述药物组合物还可以包含本领域中使用的任何数量的其它助剂，例如缓冲剂、稳定剂、乳化剂、ph调节剂、表面活性剂和调味剂。

本发明的另一实施方案是一种抑制细胞中的nf-κb的方法。所述方法包括使所述细胞与本文公开的任一化合物接触。

如本文所用，术语“接触”意指使本发明的化合物紧密靠近本发明的细胞。这可以通过使用向哺乳动物递送药物的常规技术(例如尾静脉注射、静脉内注射、经口施用)来实现，或在体外情况下通过例如将本发明化合物提供给本发明的细胞所暴露的培养基来实现。

本发明的细胞包括表达nf-κb或任何nf-κb家族成员的癌性或非癌性、体外或体内的任何细胞类型。本发明的细胞包括但不限于人、猴、猿、仓鼠、大鼠或小鼠细胞。在一些实施方案中，本发明的细胞包括但不限于cho(例如，chok1、dxb-11cho、veggie-cho)、cos(例如，cos-7)、视网膜细胞、vero、cv1、肾细胞(例如，hek293、293ebna、msr293、mdck、hak、bhk)、hela、hepg2、wi38、mrc5、col0205、hb8065、hl-60、(例如，bhk21)、jurkat、daudi、a431(表皮)、cv-1、u937、3t3、l细胞、c127细胞、sp2/0、ns-0、mmt060562、塞尔托利细胞(sertolicell)、brl3a细胞、ht1080细胞、骨髓瘤细胞、肿瘤细胞和来源于任何前述细胞的任何细胞系。

定义

如本文所用，术语“脂族”意指由碳和氢原子构成的不含芳族环的基团。因此，脂族基团包括烷基、烯基、炔基和碳环基基团。

术语“烷基”意指不具有环结构的饱和脂族基团，包括直链烷基基团和支链烷基基团。本发明的烷基基团具有至少一个且至多二十个碳原子并且可以任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代。

术语“烷基”还指具有至少三个且至多二十个碳原子的环状烃环，其任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代。环状烃环可以是单环、二环、多环或桥环。烷基基团的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、戊基、新戊基、环丙基、环丁基、2-氯丁基、3-氟戊基、4-羟丁基、3-甲氧基丙基、2-甲氧基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基(异戊基)、2-氯-4-羟基丁基、5-氨基己基、2,2-二氟环丁基、1,3-二氟环己基、3-巯基己基(thiolhexyl)等。

术语“烯基”是指具有至少三个、至多二十个碳原子且具有至少一个双键(-c＝c-)的直链或支链烃链，其任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代。

术语“烯基”还指具有至少三个、至多二十个碳原子且具有至少一个双键(-c＝c-)的环状烃环，其任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代。烯基基团的实例包括但不限于乙烯基、氯乙烯基、丙烯基、亚丙烯基、烯丙基、1,4-丁二烯基、1,2-环丁烯基等。

术语“炔基”是指具有至少三个、至多二十个碳原子，具有至少一个三键，具有或不具有一个或多个双键并且任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代的直链或支链烃链。术语“烯基”还指具有至少一个三键，具有或不具有一个或多个双键(-c＝c-)并且任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代的环状烃环。炔基基团的实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。

术语“芳基”是指任选地被一个或多个选自卤素、氮、氧和硫的杂原子取代和/或任选地被一个或多个烷基、烯基或炔基取代的单环、二环或多环芳族烃环结构。芳基基团的实例包括但不限于苯基、萘基、羟基苯基、氯苯基、2-氯-4-氟苯基、甲基苯基、氰基萘基等。

术语“杂环”是指饱和或不饱和的单或多碳环结构，其中至少一个环的至少一个碳原子被氮、硫、磷或氧替代。术语“杂环”旨在涵盖完全饱和和不饱和的环系以及部分不饱和的环系，包括杂环的所有可能的异构体形式(例如，吡咯基包含1h-吡咯基和2h-吡咯基)。

单环杂环(例如4-、5-或6-元环)或二环(例如5/6、5/5、6/6系统)饱和杂环的实例包括但不限于四氢呋喃基、吡咯烷基、四氢噻吩基、二氢噁唑基、哌啶基、六氢嘧啶基、二噁烷基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基等。

部分饱和的单环、二环或三环杂环的实例包括但不限于吡咯啉基、咪唑啉基、吡唑啉基、2,3-二氢苯并呋喃基、1,3-苯并二氧戊环基、2,3-二氢-1,4-苯并二氧杂环己烯基、二氢吲哚基等。

芳族单环、二环或三环杂环的实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,5-噻二唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、异苯并噻吩基、吲嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并吡唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹嗪基、酞嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基、蝶啶基、吡咯并吡啶基、噻吩并吡啶基、呋喃并吡啶基、异噻唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、噁唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、吡咯并吡嗪基、噻吩并吡嗪基、呋喃并吡嗪基、异噻唑并吡嗪基、噻唑并吡嗪基、异噁唑并吡嗪基、噁唑并吡嗪基、吡唑并吡嗪基、咪唑并吡嗪基、吡咯并嘧啶基、噻吩并嘧啶基、呋喃并嘧啶基、异噻唑并嘧啶基、噻唑并嘧啶基、异噁唑并嘧啶基、噁唑并嘧啶基、吡唑并嘧啶基、咪唑并嘧啶基、吡咯并哒嗪基、噻吩并哒嗪基、呋喃并哒嗪基、异噻唑并哒嗪基、噻唑并哒嗪基、异噁唑并哒嗪基、噁唑并哒嗪基、吡唑并哒嗪基、咪唑并哒嗪基、噁二唑并吡啶基、噻二唑并吡啶基、三唑并吡啶基、噁二唑并吡嗪基、噻二唑并吡嗪基、三唑并吡嗪基、噁二唑并嘧啶基、噻二唑并嘧啶基、三唑并嘧啶基、噁二唑并哒嗪基、噻二唑并哒嗪基、三唑并哒嗪基、异噁唑并三嗪基、异噻唑并三嗪基、吡唑并三嗪基、噁唑并三嗪基、噻唑并三嗪基、咪唑并三嗪基、噁二唑并三嗪基、噻二唑并三嗪基、三唑并三嗪基、咔唑基等。

术语“羰基”包括但不限于cho(醛基)、cooh(羧酸)、cor^a(酮)、coor^a(羧酸酯)、conr^ar^b(酰胺)、conhconr^ar^b(酰亚胺)、r^acox(酰基卤)和r^acoocor^b(酸酐)。

术语“卤素”包括但不限于氟、氯、溴、碘和砹。

在本发明中，术语“结晶形式”意指化合物的晶体结构。化合物可以以一种或多种结晶形式存在，这些结晶形式可以具有不同的结构、物理、药理学或化学特性。利用成核、生长动力学、团聚和破裂的变化来获得不同的结晶形式。

当克服相变能障时导致成核，从而允许颗粒从过饱和溶液中形成。晶体生长是由化合物沉积在晶体的现有表面上导致的晶体颗粒的扩大。成核和生长的相对速率决定了所形成的晶体的尺寸分布。成核和生长的热力学驱动力是过饱和，其被定义为与热力学平衡的偏差。团聚是指通过两个或更多个粘结在一起并形成较大晶体结构的颗粒(例如晶体)来形成较大的颗粒。

如本文所用，术语“水合物”意指在分子复合物中含有水的化合物的固体或半固体形式。相对于化合物，水通常是化学计量量的。

如本文所用，“药学上可接受的盐”是指本文公开的化合物的衍生物，其中通过制备其酸式盐或碱式盐来修饰化合物。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基例如胺的矿物或有机酸盐；酸性残基例如羧酸的碱性盐或有机盐；等等。例如，这些盐包括来自氨、l-精氨酸、甜菜碱、苯乙苄胺、苄星青霉素、氢氧化钙、胆碱、丹醇、二乙醇胺(2,2’-亚氨基双(乙醇))、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、2-氨基乙醇、乙二胺、n-乙基-葡萄糖胺、哈胺(hydrabamine)、1h-咪唑、赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟基乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟基乙基)-吡咯烷、氢氧化钠、三乙醇胺(2,2',2”-次氮基三(乙醇))、氨基丁三醇、氢氧化锌、乙酸、2.2-二氯-乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、l-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、2,5-二羟基苯甲酸、4-乙酰胺基-苯甲酸、(+)-樟脑酸、(+)-樟脑-10-磺酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、癸酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、乙二胺四乙酸、甲酸、富马酸、粘酸、龙胆酸、d-葡庚糖酸、d-葡萄糖酸、d-葡糖醛酸、谷氨酸、glutanticacid、戊二酸、2-氧代-戊二酸、甘油磷酸、甘氨酸、羟乙酸、己酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、dl-乳酸、乳糖酸、月桂酸、赖氨酸、马来酸、(-)-l-苹果酸、丙二酸、dl-扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘酸、烟酸、硝酸、辛酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸(双羟萘酸)、磷酸、丙酸、(-)-l-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-l-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸和十一碳烯酸的盐。其它药学上可接受的盐可以与来自诸如铝、钙、锂、镁、钾、钠、锌等的金属的阳离子形成。(pharmaceuticalsalts,berge,s.m.等人,j.pharm.sci.,(1977),66,1-19)。

本发明的药学上可接受的盐可以由本文公开的含有碱性或酸性部分的化合物通过常规化学方法合成。通常，这些盐可通过使得这些化合物的游离酸或碱形式与足量的合适碱或酸在水或有机稀释液如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇、乙腈或其混合物中反应而制备得到。

本发明的组合物包含与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体以及任选的一种或多种其它化合物、药物、成分和/或材料混合的一种或多种活性成分。无论选择何种施用途径，均通过本领域技术人员已知的常规方法将本发明的药剂/化合物配制成药学上可接受的剂型。参见例如remington，thescienceandpracticeofpharmacy(第21版，lippincottwilliamsandwilkins,philadelphia,pa.)。

药学上可接受的稀释剂或载体是本领域中所熟知的(参见例如remington，thescienceandpracticeofpharmacy(第21版，lippincottwilliamsandwilkins,philadelphia,pa.)和thenationalformulary(americanpharmaceuticalassociation,washington,d.c.))，并且包括糖(例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇)、淀粉、纤维素制剂、磷酸钙(例如磷酸二钙、磷酸三钙和磷酸氢钙)、柠檬酸钠、水、水溶液(例如盐水、氯化钠注射液、林格注射液、右旋糖注射液、右旋糖和氯化钠注射液、乳酸盐林格注射液)、醇(例如乙醇、丙醇和苯甲醇)、多元醇(例如甘油、丙二醇和聚乙二醇)、有机酯(例如油酸乙酯和甘油三酯)、可生物降解聚合物(例如聚丙交酯-聚乙交酯、聚(原酸酯)和聚(酸酐))、弹性体基质、脂质体(例如玉米、胚芽、橄榄、蓖麻、芝麻、棉籽和花生)、可可脂、蜡(例如栓剂蜡)、石蜡、硅酮、滑石、硅酸盐等。本发明药物组合物中使用的每种药学上可接受的稀释剂或载体在与制剂的其它成分相容且对受试者无害的意义上必须是“可接受的”。适用于选定剂型和预期施用途径的稀释剂或载体在本领域是熟知的，并且可以使用本领域的普通技术来确定用于所选剂型和施用方法的可接受的稀释剂或载体。

本发明的组合物可以任选地含有药物组合物中通常使用的其它成分和/或材料。这些成分和材料在本领域中是熟知的，并且包括(1)填充剂或增量剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；(2)粘结剂，诸如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、蔗糖和阿拉伯胶；(3)保湿剂，诸如甘油；(4)崩解剂，诸如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐、淀粉羟乙酸钠、交联羧甲基纤维素钠和碳酸钠；(5)溶解阻滞剂，诸如石蜡；(6)吸收促进剂，诸如季铵化合物；(7)润湿剂，诸如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(8)吸收剂，诸如高岭土和膨润土粘土；(9)润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇和月桂基硫酸钠；(10)助悬剂，诸如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂-琼脂和黄蓍胶；(11)缓冲剂；(12)赋形剂，诸如乳糖、奶糖、聚乙二醇、动物和植物油脂、油、蜡、石蜡、可可脂、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石、水杨酸盐、氧化锌、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末；(13)惰性稀释剂，诸如水或其它溶剂；(14)防腐剂；(15)表面活性剂；(16)分散剂；(17)控制释放剂或吸收延迟剂，诸如羟丙基甲基纤维素、其它聚合物基质、可生物降解聚合物、脂质体、微球体、单硬脂酸铝、明胶和蜡；(18)遮光剂；(19)佐剂；(20)润湿剂；(21)乳化剂和助悬剂；(22)增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯；(23)推进剂，诸如氯氟烃和挥发性未取代烃，诸如丁烷和丙烷；(24)抗氧化剂；(25)使制剂与预期接受者的血液等渗的试剂，诸如糖和氯化钠；(26)增稠剂；(27)包衣材料，诸如卵磷脂；和(28)甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。每种这样的成分或材料在与制剂的其它成分相容且对受试者无害的意义上必须是“可接受的”。适用于选定剂型和预期施用途径的成分和材料在本领域中是熟知的，并且可以使用本领域的普通技术来确定用于所选剂型和施用方法的可接受成分和材料。

适用于口服施用的本发明组合物可以是胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、粉剂、颗粒剂、水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂、水包油或油包水液体乳剂、酏剂或糖浆剂、锭剂、丸剂、药糖剂或糊剂。这些制剂可以通过本领域已知的方法，例如通过常规的衣锅包衣(pan-coating)、混合、制粒或冻干方法来制备。

用于口服施用的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖锭剂、粉剂、颗粒剂等)可以例如通过将一种或多种活性成分与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体以及任选的一种或多种填充剂、增量剂、粘结剂、保湿剂、崩解剂、溶液阻滞剂、吸收促进剂、润湿剂、吸收剂、润滑剂和/或着色剂混合来制备。可以使用合适的赋形剂将类似类型的固体组合物用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂。片剂可以通过任选地与一种或多种辅助成分一起压制或模制来制备。压制片剂可以使用合适的粘结剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂、表面活性剂或分散剂来制备。模制片剂可以通过在合适的机器中模制而制成。片剂和其它固体剂型如糖锭剂、胶囊、丸剂和颗粒剂可以任选地被刻痕或制备成具有包衣和包壳(例如药物配制领域熟知的肠溶衣和其它包衣)。它们也可以配制成提供其中活性成分的缓慢释放或控制释放。它们可以通过例如经由细菌截留过滤器过滤来灭菌。这些组合物还可以任选地含有遮光剂并且其组成使得它们仅仅或优先地在胃肠道的某个部分中释放活性成分(任选地以延迟方式释放)。活性成分也可以是微胶囊形式。

用于口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型可以含有本领域中常用的合适的惰性稀释剂。除惰性稀释剂外，口服组合物还可包含佐剂，如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。混悬剂可含有助悬剂。

用于直肠或阴道施用的本发明组合物可以栓剂提供，该栓剂可以通过将一种或多种活性成分与一种或多种合适的无刺激性稀释剂或载体混合来制备，所述稀释剂或载体在室温下是固体但在体温下为液体，因此会在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。适合于阴道施用的本发明的药物组合物还包括阴道栓剂、棉塞、霜剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂，它们含有在本领域中被认为是适当的此类药学上可接受的稀释剂或载体。

用于局部或透皮施用的剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、霜剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂、贴剂、滴剂和吸入剂。一种或多种活性剂/一种或多种化合物可以在无菌条件下与合适的药学上可接受的稀释剂或载体混合。软膏剂、糊剂、霜剂和凝胶剂可以含有赋形剂。粉剂和喷雾剂可以含有赋形剂和推进剂。

适合于肠胃外施用的本发明的组合物可包含一种或多种试剂/一种或多种化合物与一种或多种药学上可接受的无菌等渗水溶液或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂或可以在临用前再重溶成无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌粉剂，它们可以含有抗氧化剂、缓冲液、使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质，或助悬剂或增稠剂。可以例如通过使用包衣材料、就分散剂而言通过维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。这些药物组合物还可以含有合适的佐剂，例如润湿剂、乳化剂和分散剂。还可能期望包含等渗剂。另外，可通过包含延迟吸收的试剂来获得可注射药物形式的延长吸收。

在一些情况下，为了延长药物(例如药物制剂)的效应，期望减缓药物从皮下或肌内注射的吸收。这可以通过使用具有不良水溶性的结晶或无定形材料的液体混悬剂来实现。

活性剂/药物的吸收速率取决于其溶解速率，而溶解速率又可取决于晶体大小和结晶形式。或者，肠胃外施用的药剂/药物的延迟吸收可以通过将活性剂/药物溶解或悬浮于油媒介物中来实现。可注射贮库形式可以通过在可生物降解聚合物中形成活性成分的微胶囊基质来制备。根据活性成分与聚合物的比率以及所用特定聚合物的性质，可以控制活性成分释放的速率。也通过将药物包裹在与身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备贮库可注射制剂。可注射材料可以例如通过经由细菌截留过滤器过滤来灭菌。

本发明的任何制剂均可以存在于单位剂量或多剂量密封容器例如安瓿和小瓶中，并且可以以在临用前仅需要添加无菌液体稀释剂或载体例如水以供注射的冻干状态储存。临时注射溶液剂和混悬剂可以由上述类型的无菌粉剂、颗粒剂和片剂来制备。

提供以下实施例以进一步说明本发明的方法。这些实施例只是说明性的，并不意图以任何方式限制本发明的范围。

实施例

实施例1

一般合成方案

本发明的nf-κb抑制剂可以通过本领域已知的任何合适的方法合成，或如下文进一步描述。

方案1.2

方案1.5

方案2.1

方案2.2

方案2.3

实施例2

化合物专用合成方案

9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：化合物1a，5-(2-羟基-3-甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮1a的制备

在圆底烧瓶中，将o-香草醛(1.52g，10.0mmol)和巴比妥酸(1.28g，10.0mmol)在乙醇(20ml)中的混合物搅拌并加热到30℃过夜。将反应混合物冷却至室温。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物1a(2.20g，8.4mmol，84％)。

步骤2：9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物1a(500mg，1.9mmol)在乙酸(15ml)和乙酸酐(2ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃。在80℃下10分钟后，混合物变得均质。将混合物在80℃下搅拌3小时。将混合物冷却至室温并搅拌过夜。在过夜搅拌期间发生沉淀。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物1(355mg，1.45mmol，77％)。

9-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：化合物2a，5-(3-乙氧基-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮2a的制备

在闪烁小瓶中，将3-乙氧基水杨醛(0.332g，2.0mmol)和巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)在乙醇(10ml)中的混合物搅拌并加热至40℃过夜。将反应混合物冷却至室温。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物2a(0.37g，1.3mmol，67％)。°

步骤2：9-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物2a(138mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃。在80℃下10分钟后，混合物在加热期间变得均质并保持均质。将混合物在80℃下搅拌1小时。将混合物冷却至室温。通过n2吹流从反应混合物中除去乙酸和乙酸酐以引起沉淀。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物2(62mg，0.24mmol，48％)。

7-氯-9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(5-氯-2-羟基-3-甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮3a的制备

在闪烁小瓶中，将5-氯-2-羟基-3-甲氧基苯甲醛(0.374g，2.0mmol)和巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)在乙醇(10ml)和水(5ml)混合物中的混合物搅拌并加热至25℃并持续2小时。将反应混合物冷却至室温。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物3a(0.51g，1.7mmol，86％)。

步骤2：7-氯-9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物3a(148mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续1.5小时。将混合物冷却至室温。通过n2吹流从反应混合物中除去乙酸和乙酸酐以引起沉淀。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物3(98mg，0.35mmol，70％)。

7-溴-9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(5-溴-2-羟基-3-甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮4a的制备

将5-溴-2-羟基-3-甲氧基苯甲醛(0.462g，2.0mmol)在乙醇(40ml)中的溶液添加到巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)在水(40ml)的溶液中。将混合物在室温下搅拌2天。随后，过滤反应混合物。收集橙色固体饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物4a(0.46g，1.34mmol，67％)。

步骤2：7-溴-9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物4a(170mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续30小时。将混合物冷却至室温。通过n2吹流从反应混合物中除去乙酸和乙酸酐以引起沉淀。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物4(145mg，0.45mmol，90％)。

7-氯-9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-氯-3-乙氧基-2-羟基苯甲醛5a的制备

在圆底底烧瓶中，将n-氯代琥珀酰亚胺(8.68g，65mmol)添加到3-乙氧基水杨醛(8.30g，50mmol)在thf(100ml)的溶液中。将混合物在室温下搅拌5小时。将反应用水(100ml)淬灭并用乙酸乙酯(150ml)萃取。将有机层依次用饱和nahco3水溶液、hcl水溶液(0.5m，150ml)洗涤，然后用盐水(150ml)洗涤。将有机层浓缩至干燥，得到化合物5a(9.60g，48mmol，96％)，其可以不经进一步纯化而用于下一步骤。

步骤2：5-(5-溴-2-羟基-3-甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮5b的制备

在闪烁小瓶中，将5a(0.40g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(7ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌2小时。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物5b(0.558g，1.88mmol，94％)。

步骤3：7-氯-9-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物5b(100mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续0.5小时。在80℃下10分钟后，混合物变得均质。在80℃下20分钟后，再次出现沉淀。30分钟后终止反应。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物5(58mg，0.20mmol，40％)。

8-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(2-羟基-4-甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮6a的制备

在闪烁小瓶中，将2-羟基-4-甲氧基苯甲醛(0.456g，3.0mmol)、巴比妥酸(0.384g，3.0mmol)、乙醇(10ml)和水(5ml)的混合物在室温下搅拌15小时。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物6a(0.695g，2.65mmol，88％)。

步骤2：8-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物6a(278mg，1.0mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续2小时。在80℃下10分钟后，混合物变得均质。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用乙醇洗涤，然后用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物6(148mg，0.60mmol，60％)。

7-氯-9-甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

步骤1：5-(5-氯-2-羟基-3-甲氧基亚苄基)-2-硫酮二氢嘧啶-4,6(1h,5h)-二酮7a的制备

在闪烁小瓶中，将5-氯-2-羟基-3-甲氧基苯甲醛(0.374g，2.0mmol)、2-硫代巴比妥酸(0.288g，3.0mmol)、乙醇(15ml)和水(5ml)的混合物在室温下搅拌15小时。随后，过滤反应混合物。收集橙色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物7a(0.47g，1.5mmol，75％)。

步骤2：7-氯-9-甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物7a(158mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续2小时。将混合物冷却至室温。过滤红色固体，用乙醇洗涤，然后用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物7(62mg，0.21mmol，42％)。

8-甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

步骤1：5-(2-羟基-4-甲氧基亚苄基)-2-硫酮二氢嘧啶-4,6(1h,5h)-二酮8a的制备。

在闪烁小瓶中，将2-羟基-4-甲氧基苯甲醛(0.456g，3.0mmol)、2-硫代巴比妥酸(0.288g，3.0mmol)、乙醇(10ml)和水(5ml)的混合物在室温下搅拌2小时。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物8a(0.761g，2.73mmol，91％)。

步骤2：8-甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物8a(150mg，0.54mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续2小时。将混合物冷却至室温。过滤红色固体，并在饱和nahco3水溶液中重悬1小时。再次过滤红色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物8(84mg，0.32mmol，60％)。

2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮9a的制备

在闪烁小瓶中，将水杨醛(0.122g，1.0mmol)、巴比妥酸(0.128g，1.0mmol)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌1小时。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物9a(0.761g，2.73mmol，91％)。

步骤2：2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物9a(116mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续2小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物9(43mg，0.20mmol，40％)。

7-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(2-羟基-5-甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮10a的制备

在闪烁小瓶中，将2-羟基-5-甲氧基苯甲醛(0.304g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌3小时。随后，过滤反应混合物。收集到红色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物10a(0.42g，1.60mmol，80％)。

步骤2：7-甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物10a(131mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续3小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物10(110mg，0.20mmol，90％)。

8-羟基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(2,4-二羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮11a的制备

在闪烁小瓶中，将2,4-二羟基苯甲醛(0.276g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)和乙醇(8ml)的混合物在室温下搅拌15小时。随后，过滤反应混合物。收集橙色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物11a(0.447g，1.8mmol，90％)。

步骤2：8-羟基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物11a(124mg，0.5mmol)在乙酸(3ml)和乙酸酐(1ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续18小时。将混合物冷却至室温并搅拌过夜。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物11(85mg，0.37mmol，74％)。

8-甲基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-(2-羟基-4-甲基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮12a的制备

在闪烁小瓶中，将2-羟基-4-甲基苯甲醛(0.272g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌3小时。随后，将乙酸乙酯(5ml)添加到反应混合物中以洗涤未反应的2-羟基-4-甲基苯甲醛。过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物12a(0.461g，1.87mmol，94％)。

步骤2：8-甲基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物12a(123mg，0.5mmol)在乙酸(2.5ml)和乙酸酐(0.25ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续5小时。将混合物冷却至室温并搅拌过夜。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物12(100mg，0.44mmol，88％)。

8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：4-乙氧基-2-羟基苯甲醛的制备13a的制备

将2,4-二羟基苯甲醛(3.04g，20mmol)、乙基溴(2.29g，21mmol)、碳酸钾(2.90g，21mmol)、nai(2.98g，20mmol)和18-冠-6(0.528g，2mmol)在丙酮(15ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并持续15小时。将混合物冷却至室温并用1mhcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯(50ml)萃取混合物。将有机层用水(50ml)洗涤两次，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到4-乙氧基-2-羟基苯甲醛(3.01g，18.1mmol，90％)和2,4-二乙氧基苯甲醛(0.134g，0.7mmol，3.4％)。

步骤2：5-(4-乙氧基-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮13b的制备

在闪烁瓶中，将2-羟基-4-乙氧基苯甲醛(0.498g，3.0mmol)、巴比妥酸(0.384g，3.0mmol)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌2小时。过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物13b(0.68g，2.46mmol，82％)。

步骤3：8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物13b(276mg，1.0mmol)在乙酸(5.0g)和乙酸酐(0.612g，6mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续3小时。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物13(177mg，0.68mmol，68％)。

6,8-二甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：2,4,6-三甲氧基苯甲醛14a的制备

在圆底烧瓶中，将pocl3(7.3ml，80mmol)添加到1,3,5-三甲氧基苯(8.41g，50mmol)在dmf(15ml)的混合物中。通过缓慢添加pocl3将反应混合物的温度保持在30℃以下。添加pocl3后，将混合物仍在室温下再搅拌1小时。将反应混合物添加到冷的饱和nahco3溶液中。调节溶液的ph以保持在7以上。发生期望产物的沉淀。将灰白色产物过滤并用nahco3水溶液冲洗，然后用0.5mhcl水溶液冲洗，然后用水冲洗。收集灰白色固体并在室温下真空干燥，得到14a(9.60g，48mmol，98％)。

步骤2：2-羟基-4,6-二甲氧基苯甲醛14b

在圆底烧瓶中将14a(5.88g，30mmol)在二氯甲烷(40ml)中的溶液冷却至0℃(冰+盐水浴)。向溶液中添加bcl3(45ml1m己烷溶液，45mmol)。经1小时使反应混合物缓慢温热至室温。反应1.5小时后，tlc分析表明留有痕量的起始物。将另外的bcl3(10ml的1m己烷溶液，10mmol)添加到混合物中。将混合物在室温下再搅拌1小时。随后，将反应混合物用1m(100ml)hcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层依次用1mhcl水溶液和盐水洗涤，然后经mg2so4干燥。将有机层浓缩并进行色谱分离，得到14b(5.44g，29.8mmol，99％)。

步骤3：5-(2-羟基-4,6-二甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮14c的制备

在闪烁小瓶中，将4,6-二甲氧基水杨醛(0.364g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌4.5小时。过滤反应混合物。收集橙色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到含有4,6-二甲氧基水杨醛、5-(2-羟基-4,6-二甲氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮和5-(6,8-二甲氧基-2,4-二氧代-2,3,4,5-四氢-1h-色烯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮的混合物。将混合物通过以下方式纯化：(1)用热乙酸乙酯洗涤以除去4,6-二甲氧基水杨醛；(2)在nahco3水溶液中乙酸乙酯洗涤后获得重悬固体。过滤悬浮液以获得黄色滤饼。将黄色滤饼在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物14c(56mg，0.19mmol，9.6％)。

步骤4：6,8-二甲氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物14c(56mg，0.19mmol)在乙酸(2ml)和乙酸酐(0.2ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续5小时。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物14(35mg，0.13mmol，67％)。

7-甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

步骤1：5-(2-羟基-5-甲氧基亚苄基)-2-硫酮二氢嘧啶-4,6(1h,5h)-二酮15a的制备

在闪烁小瓶中，将2-羟基-5-甲氧基苯甲醛(0.456g，3.0mmol)、2-硫代巴比妥酸(0.432g，2.0mmol)、乙醇(10ml)和水(5ml)的混合物在室温下搅拌15小时。随后，过滤反应混合物。收集红色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物15a(0.716g，2.57mmol，86％)。

步骤2：7-甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物15a(139mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续4小时。将混合物冷却至室温。过滤波尔多红色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物15(85mg，0.33mmol，65％)。

8-羟基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

步骤1：5-(2,4-二羟基亚苄基)-2-硫酮二氢嘧啶-4,6(1h,5h)-二酮16a的制备

在闪烁小瓶中，将2,4-二羟基苯甲醛(0.414g，3.0mmol)、2-硫代巴比妥酸(0.432g，2.0mmol)、乙醇(10ml)和水(5ml)的混合物在室温下搅拌5小时。随后，过滤反应混合物。收集红色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物16a(0.697g，2.60mmol，88％)。

步骤2：8-羟基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物16a(132mg，0.5mmol)在乙酸(4.5ml)和乙酸酐(0.5ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续4小时。将混合物冷却至室温。过滤橙色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物16(115mg，0.47mmol，93％)。

8-甲基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

步骤1：5-(2-羟基-4-甲基亚苄基)-2-硫酮二氢嘧啶-4,6(1h,5h)-二酮17a的制备

在闪烁瓶中，将2-羟基-4-甲氧基苯甲醛(0.272g，3.0mmol)、2-硫代巴比妥酸(0.288g，2.0mmol)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌13小时。将乙酸乙酯(5ml)添加到反应混合物中以洗涤未反应的2-羟基-4-甲氧基苯甲醛。随后，过滤反应混合物。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到所需产物17a(0.437g，1.67mmol，83％)。

步骤2：8-甲基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物17a(131mg，0.5mmol)在乙酸(2.5ml)和乙酸酐(0.25ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续7小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用nahco3水溶液洗涤，然后用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物17(33mg，0.13mmol，27％)。

6,8-二甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

步骤1，5-(2-羟基-4,6-二甲氧基亚苄基)-2-硫酮二氢嘧啶-4,6(1h,5h)-二酮18a的制备

在闪烁小瓶中，将4,6-二甲氧基水杨醛(0.364g，2.0mmol)、2-硫代巴比妥酸(0.288g，2.0mmol)和水(15ml)的混合物搅拌并升温至50℃并持续30分钟。将混合物冷却至室温并持续15小时。过滤反应混合物。收集橙色固体滤饼并重悬于乙酸乙酯(20ml)中。过滤悬浮液以除去乙酸乙酯和未反应的4,6-二甲氧基水杨醛。将来自乙酸乙酯的橙色固体重悬于饱和nahco3水溶液中。过滤悬浮液并用水洗涤。将来自饱和nahco3水性悬浮液的橙色固体在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物18a(0.202g，0.65mmol，33％)。

步骤2：6,8-二甲氧基-2-硫酮-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备

在闪烁瓶中，将化合物18a(154mg，0.5mmol)在乙酸(2.7ml)和乙酸酐(0.3ml)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续4小时。将混合物冷却至室温。过滤红色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物18(85mg，0.29mmol，58％)。

8-丙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：4-正丙氧基-2-羟基苯甲醛19a的制备

将2,4-二羟基苯甲醛(0.76g，5.5mmol)、1-碘丙烷(1.02g，6mmol)、碳酸钾(7.60g，5.5mmol)和18-冠-6(0.132g，0.5mmol)在丙酮(12ml)中的悬浮液搅拌并加热至65℃并持续15小时。将混合物冷却至室温并用1mhcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯(50ml)萃取混合物。将有机层用水(50ml)洗涤两次，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到4-正丙氧基-2-羟基苯甲醛19a(0.747g，3.85mmol，77％)。

步骤2：5-(2-羟基-4-丙氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮19b的制备

在圆底烧瓶中，将19a(0.66g，4.0mmol)、巴比妥酸(0.512g，4.0mmol)、乙醇(15ml)和水(20ml)的混合物在室温下搅拌15小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(30ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物19b(0.777g，2.68mmol，67％)。

步骤3：8-丙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁瓶中，将化合物19b(145mg，0.5mmol)在乙酸(2.5g)和乙酸酐(0.31g，3mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续15小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物19(42mg，0.15mmol，30％)。

7-氯-8-丙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-氯-2,4-二羟基苯甲醛的制备

在闪烁瓶中，将2,4-二羟基苯甲醛(1.38g，10mmol)溶于乙醚(18ml)中。将混合物置于n2氛围下并冷却至0℃。向混合物中添加磺酰氯(0.91ml，11mmol)。将混合物在0℃下在n2氛围下保持30分钟。将反应混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯(20ml)萃取。将有机层用盐水洗涤，浓缩并进行色谱分离，得到5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.55g，3.2mmol，32％)和3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.233g，1.34mmol，13.4％)

步骤2：5-氯-2-羟基-4-丙氧基苯甲醛的制备

将5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.517g，3.0mmol)、1-碘丙烷(0.501g，3mmol)、碳酸钾(0.414g，3.0mmol)和18-冠-6(0.079g，0.3mmol)在丙酮(10ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并持续15小时。将混合物冷却至室温并用1mhcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯(30ml)萃取混合物。将有机层用饱和nahco3水溶液(30ml)洗涤，用水(30ml)洗涤，然后用盐水(30ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到5-氯-2-羟基-4-丙氧基苯甲醛(0.41g，1.91mmol，63％)。

步骤3：5-(5-氯-2-羟基-4-丙氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮20a的制备

在圆底烧瓶中，将5-氯-2-羟基-4-丙氧基苯甲醛(0.41g，1.91mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(15ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌5小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(20ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物20a(0.59g，1.82mmol，95％)。

步骤4：7-氯-8-丙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物20a(162mg，0.5mmol)在乙酸(2.5g)和乙酸酐(0.31g，3mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续6小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物20(126mg，0.40mmol，80％)。

8-(正己氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：4-(正己氧基)-2-羟基苯甲醛的制备

将2,4-二羟基苯甲醛(0.828g，6.0mmol)、1-碘己烷(1.40g，6.6mmol)、碳酸钾(0.497g，3.6mmol)和18-冠-6(0.158g，0.6mmol)在丙酮(15ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并持续15小时。将混合物冷却至室温并用1mhcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯(50ml)萃取混合物。将有机层用水(50ml)洗涤两次，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到4-(正己氧基)-2-羟基苯甲醛(0.973g，4.38mmol，73％)。

步骤2：5-(4-(正己氧基)-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮21a的制备

在圆底烧瓶中，将4-(正己氧基)-2-羟基苯甲醛(0.444g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(15ml)和水(15ml)的混合物在室温下搅拌3小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(30ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物21a(0.564g，1.70mmol，85％)。

步骤3：8-(正己氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物21a(332mg，1.0mmol)在乙酸(3.0g)和乙酸酐(0.51g，5mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续5小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物21(148mg，0.46mmol，46％)。

9-氯-8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：3-氯-2,4-二羟基苯甲醛的制备

在闪烁瓶中，将2,4-二羟基苯甲醛(1.38g，10mmol)溶于乙醚(18ml)中。将混合物置于n2氛围下并冷却至0℃。向混合物中添加磺酰氯(0.91ml，11mmol)。将混合物在0℃下在n2氛围下保持30分钟。将反应混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯(20ml)萃取。将有机层用盐水洗涤，浓缩并进行色谱分离，得到5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.55g，3.2mmol，32％)和3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.233g，1.34mmol，13.4％)

步骤2：3-氯-2-羟基-4-乙氧基苯甲醛的制备

将3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.465g，2.7mmol)、碘乙烷(0.421g，2.7mmol)、碳酸钾(0.226g，1.62mmol)和18-冠-6(0.071g，0.27mmol)在丙酮(10ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并持续15小时。将混合物冷却至室温并用1mhcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯(30ml)萃取混合物。将有机层用饱和nahco3水溶液(30ml)洗涤，用水(30ml)洗涤，然后用盐水(30ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到3-氯-2-羟基-4-乙氧基苯甲醛(0.217g，1.08mmol，40％)和3-氯-2,4-二乙氧基苯甲醛(0.057g，0.25mmol，9.4％)。

步骤3：5-(3-氯-4-乙氧基-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮22a的制备

在圆底烧瓶中，将3-氯-2-羟基-4-乙氧基苯甲醛(0.217g，1.08mmol)、巴比妥酸(0.139g，1.08mmol)、乙醇(10ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌10小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(20ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物22a(0.30g，0.97mmol，90％)。

步骤4：9-氯-8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁瓶中，将化合物22a(155mg，0.5mmol)在乙酸(1.5g)和乙酸酐(0.306g，3mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续16小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物22(127mg，0.40mmol，80％)。

8-异丁氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：2-羟基-4-异丁氧基苯甲醛的制备

将2,4-二羟基苯甲醛(0.76g，5.5mmol)、1-碘-2-甲基丙烷(1.196g，6.5mmol)、碳酸钾(0.828g，6.0mmol)和18-冠-6(0.132g，0.5mmol)在丙酮(10ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并持续3天。将混合物冷却至室温并用1mhcl水溶液淬灭。用乙酸乙酯(50ml)萃取混合物。将有机层用水(50ml)洗涤两次，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到2-羟基-4-异丁氧基苯甲醛(0.425g，2.2mmol，40％)。

步骤2：5-(2-羟基-4-异丁氧基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮23a的制备

在圆底烧瓶中，将2-羟基-4-异丁氧基苯甲醛(0.388g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(5ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌5小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(30ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物23a(0.563g，1.85mmol，92％)。

步骤3：8-异丁氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物23a(152mg，0.5mmol)在乙酸(1.5g)和乙酸酐(0.31g，3mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续6小时。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，并进行色谱分离(meoh:dcm，5:95)，得到化合物23(17mg，0.06mmol，12％)。

3-(正丁基)-8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：1-丁基嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮的制备

在圆底烧瓶中，将丙二酸二甲酯(6.60g，50mmol)添加到正丁基脲(5.80g，50mmol)和乙醇钠(21％的乙醇溶液，19.43g，60mmol)的混合物中。添加丙二酸二甲酯后，将反应混合物置于氮气下并加热至回流。回流1小时后，反应混合物变成粘稠悬浮液。将乙醇(15ml)添加到混合物中。将混合物在回流下搅拌18小时的总反应时间。在反应结束时，过滤固体(收获物1)。收集滤液并浓缩以引起沉淀。过滤第二固体收获物。将合并的固体收获物1和收获物2溶于水(100ml)中，并用1mhcl水溶液酸化，以引起期望产物的沉淀。将来自收获物2的滤液残余物浓缩并进行色谱分离以得到期望的产物。将合并的所需产物(7.103g，38mmol，77％)真空干燥。

步骤2：1-丁基-5-(4-乙氧基-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮24a的制备

在圆底烧瓶中，将2-羟基-4-乙氧基苯甲醛(0.498g，3.0mmol)、1-丁基嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮(0.555g，5.0mmol)、乙醇(10ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌15小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(30ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼，用乙酸乙酯:己烷(20:80)的混合物洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物24a(0.7939g，1.39mmol，80％)。

步骤3：3-(正丁基)-8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物24a(0.498mg，0.5mmol)在乙酸(3.5g)和乙酸酐(0.765g，7.5mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续15小时。混合物在80℃下15分钟后变得均质。将混合物冷却至室温。过滤黄色固体，并进行色谱分离(meoh:dcm，5:95)，得到化合物24(102mg，0.32mmol，21％)。

7-氯-8-丙基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：4-氯-3-丙基苯酚的制备

在闪烁小瓶中，将3-正丙基苯酚(1.36g，10mmol)溶于乙醚(10ml)中。用冰/盐水浴冷却混合物。历经2分钟向混合物中添加磺酰氯(0.91ml，11mmol)。将混合物在-10℃至0℃下保持1小时。将混合物用水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将有机层浓缩并进行色谱分离，得到4-氯-3-丙基苯酚(1.156g，6.8mmol，68％)、2-氯-3-丙基苯酚(0.097g，0.57mmol，5.7％)和6-氯-3-丙基苯酚(0.156g，0.92mmol，9.2％)。

步骤2：5-氯-2-羟基-4-丙基苯甲醛的制备

在闪烁小瓶中，将4-氯-3-丙基苯酚(0.857g，5mmol)、无水氯化镁(0.712g，7.5mmol)、多聚甲醛(0.90g，30mmol)和三乙胺(1.01g，10mmol)在无水乙腈(10ml)中的混合物加热至70℃并持续15小时。将反应混合物冷却至室温，然后过滤。将白色滤饼用1mhcl水溶液(50ml)和乙酸乙酯(80ml)洗涤。倾倒出滤液。分离有机层并用盐水洗涤。将有机层浓缩并进行色谱分离，得到5-氯-2-羟基-4-丙基苯甲醛(0.612g，3.1mmol，61％)。

步骤3：5-(5-氯-2-羟基-4-丙基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮的制备

在圆底烧瓶中，将5-氯-2-羟基-4-丙基苯甲醛(0.397g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(10ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌15小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(40ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。将黄色固体滤饼用乙酸乙酯:己烷(5:95)洗涤，收集并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物25a(0.41g，1.32mmol，66％)。

步骤4：7-氯-8-丙基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物25a(0.308mg，1.0mmol)在乙酸(2.5g)和乙酸酐(0.612g，6.0mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续6小时。将混合物冷却至室温并搁置过夜。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物25(250mg，0.86mmol，86％)。

3-丁基-7-氯-8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：1-丁基-5-(5-氯-4-乙氧基-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮26a的制备

在圆底烧瓶中，将5-氯-4-乙氧基-2-羟基苯甲醛(0.295g，1.475mmol)、巴比妥酸(0.192g，1.5mmol)、乙醇(20ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌3.5小时。浓缩反应混合物以通过蒸发将体积减少30％。乙醇蒸发后，将水(50ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集橙色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物26a(0.463g，1.26mmol，85％)。

步骤2：3-丁基-7-氯-8-乙氧基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮化合物26的制备

在闪烁小瓶中，将化合物26a(0.367mg，1.0mmol)在乙酸(2.5g)和乙酸酐(0.51g，5.0mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续15小时。将混合物冷却至室温并搁置过夜。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物26(278mg，0.80mmol，80％)。

7-氟-8-甲基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：5-氟-2-羟基-4-甲基苯甲醛27a的制备

在闪烁小瓶中，将4-氟-3-甲基苯酚(1.26g，10.0mmol)、无水mgcl2(1.42g，15mmol)、多聚甲醛(1.50g，50mmol)和三乙胺(2.02g，20mmol)在无水乙腈(15ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并持续8小时。将混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液(20ml)淬灭并用乙酸乙酯萃取。将有机层用mgso4干燥，经硅胶过滤，浓缩并进行色谱分离，得到化合物27a(1.05g，6.8mmol，68％)。

步骤2：5-(5-氟-2-羟基-4-甲基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮的制备

在圆底烧瓶中，将27a(0.308g，2.0mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(10ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌5小时。反应5小时后，将水(50ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物27b(0.3424g，1.29mmol，65％)。

步骤3：7-氟-8-甲基-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物27b(0.264mg，1.0mmol)在乙酸(4ml)和乙酸酐(0.51g，5.0mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续5小时。将混合物冷却至室温并搁置过夜。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物27(189mg，0.77mmol，77％)。

8-乙氧基-7-氟-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1：3-乙氧基-4-氟苯酚28a的制备

在闪烁瓶中，将4-氟间苯二酚(0.512g，4.0mmol)、k2co3(0.607g，4.4mmol)、18-冠-6(0.106g，0.4mmol)、碘乙烷(0.686g，4.4mmol)在丙酮(5ml)中的混合物加热至50℃过夜。将混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液(20ml)淬灭，用乙酸乙酯(30ml)萃取。将有机层浓缩并进行色谱分离，得到28a(0.349g，2.34mmol，56％)。

步骤2：4-乙氧基-5-氟-2-羟基苯甲醛28b的制备

在闪烁小瓶中，将28a(0.68g，4.3mmol)、无水mgcl2(0.613g，6.45mmol)、多聚甲醛(0.774g，25.8mmol)和三乙胺(0.868g，8.6mmol)在无水乙腈(10ml)中的悬浮液搅拌并加热至70℃并保持4小时。将混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液(20ml)淬灭并用乙酸乙酯(30ml)萃取。将有机层用mgso4干燥，经硅胶过滤，浓缩并进行色谱分离，得到化合物28b(0.70g，3.48mmol，81％)。

步骤3：5-(4-乙氧基-5-氟-2-羟基亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮28c的制备

在圆底烧瓶中，将28b(0.184g，1.0mmol)、巴比妥酸(0.128g，1.0mmol)、乙醇(10ml)和水(10ml)的混合物在室温下搅拌6小时。反应6小时后，将水(50ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物28c(0.263g，0.89mmol，89％)。

步骤4：8-乙氧基-7-氟-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁瓶中，将化合物28c(0.147mg，0.5mmol)在乙酸(2ml)和乙酸酐(0.204g，2mmol)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续4小时。将混合物冷却至室温并搁置过夜。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物28(130mg，0.48mmol，96％)。

化合物29至36的合成遵循针对化合物28所述的相同方案。

化合物37至38的合成遵循针对化合物20所述的相同方案。

化合物39至48的合成遵循针对化合物22所述的相同方案。

8-乙氧基-2h-硫代色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮

8-乙氧基-2h-硫代色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

步骤1，2,4-二氯-6-((3-乙氧基苯基)硫代)嘧啶-5-甲醛49a的制备

在闪烁小瓶中，将2,4,6-三氯嘧啶甲醛(0.422g，2mmol)溶于无水thf(5ml)中。将混合物冷却到-30℃。向冷混合物中添加三乙胺(0.242g，2.4mmol)和3-乙氧基苯硫酚(0.308g，2mmol)。将混合物在-30℃下保持3小时。3小时后，过滤混合物。将滤饼用乙醚冲洗。对含有所需产物的滤液进行浓缩。在氮气流下在搁置时使产物结晶。将浅黄色固体过滤并真空干燥，得到49a(0.331g，1.0mmol，50％)。

步骤2，8-乙氧基-2h-硫代色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，缓慢并小心地添加化合物49a(0.331g，1.0mmol)以浓缩98％h2so4(4ml)。将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中添加etoac(25ml)和水(25ml)。发生沉淀。过滤橙色固体，用水洗涤并真空干燥，得到化合物49(0.137g，0.5mmol，50％)。

化合物50-52的合成遵循针对化合物22所述的相同方案。

6-((9-氯-2,4-二氧代-3,4-二氢-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-8-基)氧基)己酸

步骤1，6-(2-氯-4-甲酰基-3-羟基苯氧基)己酸甲酯53a的制备

在闪烁小瓶中，将3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.69g，4mmol)、k2co3(0.552g，4.0mmol)、18-冠-6(0.106g，0.4mmol)和6-溴己酸甲酯(0.919g，4.4mmol)在丙酮(5ml)中的悬浮液在65℃下加热并搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液酸化并用乙酸乙酯(50ml)萃取两次。将有机层用水(50ml)洗涤两次，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到化合物53a(0.25g，0.83mmol，20.7％)。

步骤2，6-(2-氯-4-甲酰基-3-羟基苯氧基)己酸53b的制备

将化合物53a(0.25g，0.83mmol)在meoh(3ml)和1mnaoh水溶液(5ml)中的混合物升温至60℃并保持2小时。将混合物冷却至室温。向混合物中添加1mhcl水溶液(8ml)中，然后用乙酸乙酯(20ml)萃取。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到化合物53b(0.192g，0.67mmol，81％)。

步骤3，6-(2-氯-3-羟基-4-((2,4,6-三氧代四氢嘧啶-5(2h)-亚基)甲基)苯氧基)己酸53c的制备

在圆底烧瓶中，将化合物53b(0.192g，0.67mmol)、巴比妥酸(0.103g，0.8mmol)、iproh(6ml)和水(6ml)的混合物在室温下搅拌24小时。将水(30ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物53c(0.22g，0.55mmol，83％)。

步骤4，6-((9-氯-2,4-二氧代-3,4-二氢-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-8-基)氧基)己酸的制备

在闪烁小瓶中，将化合物53c(0.22g，0.55mmol)在乙酸(1.62g)和乙酸酐(0.283g)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续2天。将混合物冷却至室温并搁置3小时。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物53(161mg，0.43mmol，78％)。

化合物54-59的合成遵循针对化合物53所述的相同方案。

4-((9-氯-2,4-二氧代-3,4-二氢-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-8-基)氧基)乙酸丁酯

步骤1，6-(2-氯-4-甲酰基-3-羟基苯氧基)乙酸丁酯60a

在闪烁小瓶中，将3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(0.5175g，3mmol)、khco3(0.49g，4.9mmol)、nai(0.45g，3mmol)、18-冠-6(0.132g，0.5mmol)和6-溴丁酸甲酯(0.585g，3.0mmol)在丙酮(5ml)中的悬浮液在70℃下加热并搅拌4天。将反应混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液酸化并用乙酸乙酯(25ml)萃取。将有机层用水(25ml)洗涤，然后用盐水(25ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到化合物60a(0.182g，0.64mmol，21.2％)。

步骤2，4-(2-氯-3-羟基-4-((2,4,6-三氧代四氢嘧啶-5(2h)-亚基)甲基)苯氧基)乙酸丁酯60b的制备

在闪烁小瓶中，将化合物60a(0.182g，0.64mmol)、巴比妥酸(0.089g，0.7mmol)、iproh(3ml)和水(3ml)的混合物在室温下搅拌24小时。将水(10ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌10分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物60b(0.209g，0.53mmol，82％)。

步骤3，4-((9-氯-2,4-二氧代-3,4-二氢-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-8-基)氧基)乙酸丁酯的制备

在闪烁瓶中，将化合物60b(0.209g，0.55mmol)在乙酸(1.65g)和乙酸酐(0.281g)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续4.5小时。将混合物冷却至室温并搁置3小时。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物60(108mg，0.28mmol，52％)。

8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮

步骤1，2-羟基-4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯甲醛61a的制备

在闪烁小瓶中，将2,4-二羟基苯甲醛(0.552g，4mmol)、k2co3(0.552g，4.0mmol)、18-冠-6(0.106g，0.4mmol)和1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(90-95％纯度，0.61g，3.0mmol)在丙酮(5ml)中的悬浮液在80℃下加热并搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液酸化并用乙酸乙酯(25ml)萃取。将有机层用水(25ml)洗涤，然后用盐水(25ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到化合物61a(0.35g，1.46mmol，36.4％)。

步骤2，5-(2-羟基-4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)三酮61b的制备

在闪烁小瓶中，将化合物61a(0.35g，1.46mmol)、巴比妥酸(0.224g，1.75mmol)、乙醇(10ml)和水(10ml)的混合物搅拌并加热至40℃至50℃并持续15分钟，并将它们在室温下搅拌过夜。将水(30ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌15分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物61b(0.434g，1.24mmol，85％)。

步骤3，8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁小瓶中，将化合物61b(0.263g，0.75mmol)在乙酸(2.25g)和乙酸酐(0.383g)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃并持续6小时。浓缩混合物以除去其体积的约50％，然后冷却至室温并搁置3小时。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物61(189mg，0.57mmol，76％)。

实施例62-65的化合物的合成遵循针对化合物61所述的相同方案。

9-氯-8-(4-甲氧丁氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮

步骤1，3-氯-2-羟基-4-(4-甲氧基丁氧基)苯甲醛66a的制备

在闪烁小瓶中，将3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(1.725g，10mmol)、k2co3(1.38g，10mmol)、18-冠-6(0.264g，1.0mmol)和1-溴-4-甲氧基丁烷(0.835g，5.0mmol)在丙酮(10ml)中的悬浮液在70℃下加热并搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液酸化并用乙酸乙酯(50ml)萃取。将有机层用水(50ml)洗涤，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到化合物66a(0.898g，3.47mmol，34.7％)。

步骤2，5-(3-氯-2-羟基-4-(4-甲氧基丁氧基)亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮66b的制备

在圆底烧瓶中，将化合物66a(0.498g，1.5mmol)、巴比妥酸(0.256g，2.0mmol)、乙醇(6ml)和水(6ml)的混合物在室温下搅拌过夜。将水(15ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌15分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物66b(0.466g，1.34mmol，89.6％)。

步骤3，9-氯-8-(4-甲氧基丁氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)二酮的制备

在闪烁瓶中，将化合物66b(0.369g，1.0mmol)在乙酸(2.1g)和乙酸酐(0.51g)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃至90℃并过夜。浓缩混合物以除去其体积的约50％，然后冷却至室温并搁置3小时。过滤黄色固体，在40℃至50℃下干燥，得到化合物66(300mg，0.86mmol，86％)。

实施例67-70的化合物的合成遵循针对化合物66所述的相同方案。

化合物71-74的合成遵循针对以下化合物75所述的相同方案。

7-氟-8-(3-(2-甲氧基乙氧基)丙氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮

步骤1，4-氟-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)丙氧基)苯酚75a的制备

在闪烁瓶中，将4-氟间苯二酚(1.28g，10mmol)、k2co3(1.38g，10mmol)、18-冠-6(0.264g，1.0mmol)和1-溴-3-(2-甲氧基乙氧基)丙烷(0.985g，5.0mmol)在丙酮(10ml)中的悬浮液在70℃下加热并搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液酸化并用乙酸乙酯(50ml)萃取。将有机层用水(50ml)洗涤，然后用盐水(50ml)洗涤。将有机层经mgso4干燥，浓缩并进行色谱分离，得到化合物75a(0.921g，3.74mmol，37.4％)。

步骤2，5-氟-2-羟基-4-(3-(2-甲氧基乙氧基)丙氧基)苯甲醛75b的制备

在闪烁小瓶中，将化合物75a(0.478g，1.96mmol)、无水mgcl2(0.279g，2.93mmol)、多聚甲醛(0.12g，4mmol)和三乙胺(0.296g，2.93mmol)在无水乙腈(5ml)中的悬浮液搅拌并加热至60℃并保持2小时。将混合物冷却至室温，用1mhcl水溶液(15ml)淬灭并用乙酸乙酯萃取。将有机层用mgso4干燥，经硅胶过滤，浓缩并进行色谱分离，得到化合物75b(0.34g，1.25mmol，64％)。

步骤3，5-(5-氟-2-羟基-4-(3-(2-甲氧基乙氧基)丙氧基)亚苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h))-三酮75c的制备

在圆底烧瓶中，将化合物75b(0.140g，0.51mmol)、巴比妥酸(0.079g，0.62mmol)、乙醇(3ml)和水(3ml)的混合物在室温下搅拌过夜。将水(15ml)添加到反应混合物中。将反应物在室温下搅拌15分钟，然后过滤。收集黄色固体滤饼并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物75c(0.189g，0.49mmol，97％)。°

步骤4，7-氟-8-(3-(2-甲氧基乙氧基)丙氧基)-2h-色烯并[2,3-d]嘧啶-2,4(3h)-二酮的制备

在闪烁瓶中，将化合物75c(0.172g，0.45mmol)在乙酸(1.58g)和乙酸酐(0.226g)的混合物中的悬浮液搅拌并加热至80℃至90℃并持续5小时。浓缩混合物以除去其体积的约50％，然后冷却至室温并搁置3小时。过滤黄色固体，用水洗涤并在40℃至50℃下真空干燥，得到化合物75(144mg，0.39mmol，88％)。

nmr光谱法

使用标准400mhznmr进行nmr光谱法。

实施例3

材料和方法

荧光偏振(fp)测定

为了鉴定直接nf-κb抑制剂，使用il-2基因的启动子区中的c-rel同型二聚体和cd28应答元件(cd28re)来开发荧光偏振(fp)筛选测定。将5'-荧光素标记的双链cd28re寡核苷酸探针(10nm)与rel蛋白(128nm)在反应缓冲液(20mmtris(ph7.5)、100mmnacl、0.5ug/mlpolydidc、1％np-40、0.1％bsa)中混合。将20μl混合物添加到384孔板的每个孔中，添加目标化合物(25μm)，并将板在室温下孵育30分钟。使用fusion^tm通用微孔板分析仪(perkinelmer,pe)测量每个反应孔的各向异性值。进行一系列滴定实验以优化待用于fp测定中的c-rel蛋白和fitc-cd28re探针浓度。图1a中示出针对10nm和0.33nm的代表性数据。图1b示出与特异性和非特异性寡核苷酸的冷竞争的结果。图1c示出代表性384孔板中的fp信号的分布。

对于图1a中示出的10nm和0.33nmfp测定，最大信号与背景(s/b)比在8-11的范围内，这表明可靠的测定。单独dna探针的背景值为约20mp，并且c-rel-cd28re反应的信号为约200mp。

电泳迁移率变动测定(emsa)

在96孔板中，在室温下在含有10nmc-rel蛋白和0.5ng磷光体标记的cd28re寡核苷酸的1xdna结合缓冲液(10mmtris、40mmnacl、1mmedta、4％甘油)中进行dna结合反应(20μl)10分钟。将连续稀释的测试化合物添加到每个孔中，并进一步孵育15分钟，然后加载到天然的5％聚丙烯酰胺凝胶上。电泳在160v下进行2.5小时。使用磷光成像仪(phospho-imager)量化放射性信号。通过使用磷光成像仪定量emsa中的rel/nf-κb抑制的强度来确定实施例1至75的化合物的ic50。对于图2中的化合物6示出本发明的emsa数据的实例。

nf-κbgfp测定

nfκb/jurkat/gfp转录报告基因细胞系获自sbisystembiosciences。nf-κb/jurkat/gfp^tm报告基因细胞(5×10⁵个细胞)以1百万个细胞/ml的浓度涂铺到24孔板的每个孔中。添加tnf-α(5ng/ml)。经由连续稀释将化合物添加到对应的孔中。24小时后，将100μl细胞转移到uv板(96孔，无盖，w/uv透明平底，corning，ny，目录号3635)的孔中并在synergy^tmht多检测微量培养板读取器(biotech，winooski，vermont)中测量gfp荧光的强度(激发485+/-20，发射528+/-20)。绘制测得的gfp的强度相对于tnf-α的量的图线。

化合物在cd-1小鼠中的药代动力学研究

研究持续时间为两周，包括适应部分和存活(in-life)部分。每种化合物研究三只雄性小鼠。经由尾静脉以单剂量静脉内施用5mg/kg目标化合物。在第一次剂量之前确定体重。剂量媒介物由100％peg400和2meqnaoh构成。在给药后0.0833、0.25、0.5、2、4和8小时收集血液样品。使用k2edta作为抗凝剂从血液中产生血浆。

实施例4

emsa和nf-κbgfp测定结果

实施例5

药代动力学分析

化合物13、20、26、42、44和46的药代动力学参数分别在图3-8中示出。

文献

1.aly,h.m.andkamal,m.m.(2012).efficientone-potpreparationofnovelfusedchromeno[2,3-d]pyrimidineandpryano[2,3-d]pyrimidinederivatives.europeanjournalofmedicinalchemistry47:18-23。

2.blythin,d.j.,domalski,m.s.,kim,y.c.,kuo,j.,andliu,j.-h.(1981).simplesyntheticrouteto“oxa-deaza-flavins”(2h-[1]-benzopyrano[2,3-d]pyrimidine-2,4(3h)-diones).heterocycles16(2):203-207。

3.美国专利no.4,272,535。

4.国际申请号pct/us2007/074233。

本申请中引用的所有文献据此引用方式并入本文，就如同在本文中全部引用一样。

尽管本文已经描述了本发明的说明性实施方案，但应当理解的是，本发明不限于所描述的这些实施方案，并且本领域技术人员可以在不脱离本发明的范围或精神的情况下做出各种其它改变或修改。