技术领域
本发明属于医药领域，涉及一种鹰嘴豆提取物及其制备方法。
背景技术：
鹰嘴豆是野豌豆族（Vicieae）鹰嘴豆属（Cicer），学名Cicer arietinum Linn.的一年生草本植物，因其籽粒形状酷似脱毛后的鹰头或鸡头而得名，中文的别名有桃豆、鸡头豆、鸡碗豆、羊头豆、脑豆子等，新疆俗称诺胡提。起源于西亚、地中海沿岸和埃塞俄比亚，世界各洲均有种植，是世界上栽培面积较大的食用豆类之一，在豆科植物中居第三位，其中亚洲栽培面积最大，其次是非洲[肖克来提·木尼拉. 中国民族医药杂志. 2003，6（11）：20.]。鹰嘴豆耐干旱、耐贫瘠、特别适合我国西北地区种植。我国新疆的鹰嘴豆资源主要有迪西和卡布里两种主要类型，卡布里类型粒大皮薄，主要供应高档市场；迪西类型粒小皮厚，主要供应中低档市场。鹰嘴豆不仅是一种十分珍贵的种质资源，而且属于高营养豆类植物，富含多种植物蛋白和多种氨基酸、维生素、粗纤维及钙、镁、铁等成份。鹰嘴豆因其独特的营养成分，不仅作为健康食品受到人们的青睐，而且鹰嘴豆在医学上也有广泛应用。据《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔分册》记载，长期食用鹰嘴豆对改善免疫功能、腰膝酸痛、食欲不振、病后体虚、糖尿病、高血脂及高血压、心脑血管疾病等均有良好的食疗作用。现代药理学研究结果表明，鹰嘴豆提取物具有：（1）降低血糖作用[凯塞尔·阿不都克热木，等. 中国中药杂志，2011，3（8）：1405.]；（2）降低血脂作用[何桂香，等. 中国临床康复，2005，9（7）：80.]；（3）防治雌激素缺失的围绝经期综合征和骨质疏松症[马海蓉，等. 中国发明专利申请，2011101414349.6]；（4）预防老年痴呆作用[竺平晖．中草药，2011，42（5）：969.]；（5）抗肿瘤作用[Moon YJ. Pharm Res，2008，25（9）：2158.]；（6）抗病毒作用[Han EH. Arch Pharm Res，2006，29（7）：570；Rice L. Prostate，2002，52（3）：201；Johnson TL. Evid Based Complement Alternat Med，2008，29（2）：16.]。
迄今已从鹰嘴豆中分离鉴定化合物包括：黄酮类，鹰嘴豆芽素A（biochanin A）、芒柄花素（formononetin）、毛蕊异黄酮（calycosin）、染料木素（genistein）、芒柄花苷（ononin）、三叶豆紫檀苷（trifolirhizin）、印度黄檀苷（sissotrin）[Zhao SH，et al. Food Chem，2009，114：869.]、鹰嘴豆芽素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖糖（biochanin A-7-O-β-D-glucopyranoside）[谭永霞，等. 中国国中药杂志，2007，32（16）：1650.]；三萜类化合物大豆精醇（soyasapoginol A）、大豆皂苷Bb（sayasaponon Bb）、β-香树脂醇（β-amyrin）[李晓静，等. 现代药物与临床，2010，25（3）：188.]、3-羟基-齐墩果-12-烯（3-hydroxy-olean-12-ene）[谭永霞，等. 中国国中药杂志，2007，32（16）：1650.]、22-[2,3-二氢-2,5-二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮基]-大豆皂苷βg[22-[2,3-hydro-2,5-dihydroxy-5-methyl-4H-pyran-4-one]-sayasaponon βg][Price KR，et al. J Sci Food Agric，1988，42：183.]；甾醇类、β-谷甾醇（β-sitosterol）、胡萝卜苷（Daucosterol）[Wu X，et al. Chin J Nat Med，2010，8（2）：91.]；尚分离鉴定了对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）、腺苷（adenosine）、1-乙基-α-L-半乳糖苷（1-etheyl-α-L-galactoside）、蔗糖（sucrose）[陈玲芳，等. 亚太传统医药，2012，8（7）：41]。经对现有技术文献检索，未见主要含有3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯的鹰嘴豆提取物及其制备方法的文献报道。
技术实现要素：
本案发明人在采用现代分离与鉴定技术系统研究鹰嘴豆化学成分的基础上，研究采用不同提取方法包括微波提取法、回流提取法、超声提取法、冷浸提取法和几种方法联合提取法和不同提取条件提取、不同大孔吸附树脂柱色谱分离制备主要成分为3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯的鹰嘴豆提取物，并研究主要成分含量和鉴别，因而完成了本发明。
本发明目的是克服现有技术的不足，提供一种化学成分和含量明确的鹰嘴豆提取物，本发明另一目的是提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法。
为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：
本发明的一种鹰嘴豆提取物是从鹰嘴豆中提取分离，其中含有70%-95%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯，通过以下方法制备得到：鹰嘴豆粗粉中加50%-90%乙醇提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，每次10分钟~210分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%~2%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置2小时~48小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，经大孔吸附树脂柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物。
本发明的一种鹰嘴豆提取物是从鹰嘴豆中提取分离，其中含有80%-95%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯，通过一个优选的以下方法制备得到：鹰嘴豆粗粉中加70%乙醇微波提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，微波提取温度70℃，微波提取功率400W，每次10分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置4小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物。
本发明的一种鹰嘴豆提取物是从鹰嘴豆中提取分离，其中含有80%-95%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯，通过一个优选的以下方法制备得到：鹰嘴豆粗粉中加70%乙醇回流提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，每次2小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物。
本发明的一种鹰嘴豆提取物中主要成分包括3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯。
本发明采用现代分离鉴定技术对一种鹰嘴豆提取物化学成分进一步分离，根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构为：3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯。
结构鉴定数据如下：
3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯：1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ 5.16（1H，br s，H-12），4.95（1H，br s，H-1'')，4.74（1H，d，J = 7.0 Hz，H-1'），3.94（1H，m，H-4'），3.91（1H，m，H-24a），3.89（1H，m，H-5''），3.65（1H，br s，H-2''），3.53（1H，m，H-3''），3.51（1H，m，H-6'a），3.47（1H，m，H-6'b），3.41（1H，m，H-2'），3.38（1H，m，H-5'），3.35（1H，m，H-3'），3.23（1H，m，H-3），3.23（1H，m，H-22），3.14（1H，t，J = 9.3 Hz，H-4''），3.07（1H，t，J = 10.8 Hz，H-24b），1.99（1H，br d，J = 13.2 Hz，H-18），1.79（1H，m，H-2a），1.79（1H，m，H-11a），1.78（1H，m，H-11b），1.70（1H，m，H-2b），1.67（1H，m，H-15a），1.67（1H，m，H-19a），1.65（1H，m，H-16a），1.51（1H，m，H-1a），1.51（1H，m，H-6a），1.47（1H，m，H-9），1.45（1H，m，H-7a），1.30（1H，m，H-7b），1.30（1H，m，H-21a），1.28（1H，m，H-6b），1.28（1H，m，H-21b），1.13（1H，m，H-16b），1.13（3H，s，H-23），1.09（3H，d，J = 6.0 Hz，H-6'')，1.05（3H，s，H-27），0.97（3H，s，H-30），0.93（1H，m，H-15b），0.90（1H，m，H-1b），0.88（1H，m，H-19b），0.88（3H，s，H-26），0.84（1H，m，H-5），0.84（3H，s，H-29），0.80（3H，s，H-25），0.75（3H，s，H-28）；13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ144.01（C-13），121.46（C-12），100.20（C-1''），99.96（C-1'），89.99（C-3），75.57（C-2'），74.59（C-3'），74.50（C-5'），73.97（C-22），72.35（C-4''），70.55（C-4'，2''），69.21（C-3''），67.93（C-5''），62.28（C-24），59.75（C-6'），55.10（C-5），46.80（C-9），45.96（C-19），44.51（C-18），42.98（C-4），41.60（C-14），41.16（C-21），40.00（C-8），38.03（C-1），36.88（C-17），35.78（C-10），32.58（C-7，29），30.12（C-20），28.21（C-30），27.82（C-16），25.64（C-2），25.41（C-15），24.89（C-27），23.14（C-11），22.16（C-23），20.26（C-28），17.81（C-6，6''），16.50（C-26），15.33（C-25）；HR ESI-MSm/z 789.6038 [M+Na]+（计算值C42H70O12Na相对分子质量789.4765）。
3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯：1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ 5.16（1H，br s，H-12），4.49（1H，d，J = 7.0 Hz，H-1'），3.85（1H，br d，J = 10.7 Hz，H-24a），3.57（1H，m，H-4'），3.51（1H，m，H-6'a），3.48（1H，m，H-6'b），3.34（1H，m，H-5'），3.28（1H，m，H-2'），3.23（1H，m，H-3），3.23（1H，m，H-22），3.23（1H，m，H-3'），3.16（1H，t，J = 10.9 Hz，H-24b），2.00（1H，m，H-2a），1.99（1H，br d，J = 14.6 Hz，H-18），1.80（1H，m，H-11a），1.79（1H，m，H-11b），1.66（1H，m，H-2b），1.66（1H，m，H-15a），1.66（1H，m，H-16a），1.66（1H，m，H-19a），1.50（1H，m，H-1a），1.52（1H，m，H-6a），1.45（1H，m，H-9），1.40（1H，m，H-7a），1.33（1H，m，H-6b），1.30（1H，m，H-21a），1.28（1H，m，H-7b），1.28（1H，m，H-21b），1.13（1H，m，H-16b），1.10（3H，s，H-23），1.05（3H，s，H-27），0.97（3H，s，H-30），0.93（1H，m，H-15b），0.86（1H，m，H-1b），0.86（1H，m，H-19b），0.88（3H，s，H-26），0.84（3H，s，H-29），0.83（1H，m，H-5），0.83（3H，s，H-25），0.75（3H，s，H-28）；13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ144.02（C-13），121.51（C-12），103.68（C-1'），89.38（C-3），75.41（C-5'），74.00（C-22），73.37（C-3'），71.89（C-2'），68.63（C-4'），62.34（C-24），60.42（C-6'），55.40（C-5），46.93（C-9），45.99（C-19），44.52（C-18），42.88（C-4），41.59（C-14），41.17（C-21），40.00（C-8），38.29（C-1），36.91（C-17），35.86（C-10），32.63（C-7，29），30.15（C-20），28.24（C-30），27.85（C-16），25.45（C-2，15），24.95（C-27），23.16（C-11），22.21（C-23），20.29（C-28），18.18（C-6），16.52（C-26），15.28（C-25）；HR ESI-MS m/z 743.7032 [M+Na]+（计算值C36H60O8Na相对分子质量743.4186）。
3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯：1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ 6.33（1H，br d，J = 9.9 Hz，H-11），5.52（1H，d，J= 10.3 Hz，H-12），4.96（1H，br s，H-1'')，4.76（1H，d，J = 8.8 Hz，H-1'），3.89（1H，m，H-5''），3.84（1H，d，J = 8.9 Hz，H-24a），3.66（1H，br s，H-2''），3.53（1H，m，H-3'），3.53（1H，m，H-4'），3.53（1H，m，H-6'a），3.52（1H，m，H-6'b），3.42（1H，m，H-2'），3.38（1H，m，H-3''），3.35（1H，m，H-5'），3.24（1H，m，H-3），3.24（1H，m，H-3'），3.20（1H，m，H-22），3.13（1H，m，H-4''），3.11（1H，m，H-24b），2.31（1H，d，J = 14.2 Hz，H-19a），1.86（1H，br s，H-9），1.79（1H，m，H-1a），1.72（1H，m，H-16a），1.66（1H，d，J = 14.4 Hz，H-19b），1.59（1H，m，H-6a），1.50（1H，m，H-15a），1.42（1H，m，H-16b），1.37（1H，m，H-21a），1.34（1H，m，H-6b），1.30（2H，m，H-7），1.30（1H，m，H-21b），1.23（1H，m，H-2a），1.14（3H，s，H-23），1.10（3H，d，J = 5.5 Hz，H-6''），0.99（1H，m，H-15b），0.98（1H，m，H-2b），0.94（1H，m，H-1b），0.93（1H，m，H-5），0.93（3H，s，H-30），0.91（3H，s，H-28），0.88（3H，s，H-27），0.76（3H，s，H-25），0.72（3H，s，H-29），0.63（3H，s，H-26）；13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ136.96（C-18），134.41（C-13），125.77（C-11），125.66（C-12），100.24（C-1''），99.96（C-1'），90.15（C-3），75.61（C-2'），75.24（C-22，3'），74.58（C-5'），74.52（C-3''），72.37（C-4''），70.57（C-2''），69.24（C-4'），67.94（C-5''），61.97（C-24），59.79（C-6'），54.54（C-5），53.35（C-9），43.71（C-21），43.04（C-4），41.41（C-8），40.41（C-17），39.83（C-14），39.33（C-10），37.34（C-1），36.81（C-19），32.64（C-16），32.11（C-30），32.01（C-7），31.68（C-20），28.95（C-2），24.95（C-29），23.56（C-15），22.09（C-23），19.85（C-27），18.04（C-28），17.82（C-6，6''），17.60（C-25），16.06（C-26）；HR ESI-MS m/z 787.4895 [M+Na]+（计算值C42H68O12Na相对分子质量787.4608）。
化学结构式如下：
本发明采用高效液相色谱法测定一种鹰嘴豆提取物中3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯的含量。本发明采用薄层色谱法鉴别一种鹰嘴豆提取物中3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯。
本发明提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：鹰嘴豆粗粉中加50%-90%乙醇提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，每次10分钟~210分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%~2%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置2小时~48小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，经大孔吸附树脂柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物。
本发明提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法，该方法所述的提取为方法采用微波提取法、回流提取法、超声提取法、冷浸提取法和几种方法联合提取法。
本发明提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法，该方法所述的大孔吸附树脂为非极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂。
本发明提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法，该方法从鹰嘴豆中提取分离的提取物主要成分包括3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯。
本发明提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法，一种优选的方法包括以下步骤：鹰嘴豆粗粉中加50%-90%乙醇微波提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，微波提取温度70℃，微波提取功率400W，每次10分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置4小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物。
本发明提供一种鹰嘴豆提取物的制备方法，一种优选的方法包括以下步骤：鹰嘴豆粗粉中加50%-90%乙醇回流提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，每次2小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物。
本发明的一种鹰嘴豆提取物优点为主要化学成分明确，其中3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯的含量70~95%，含量高，这是以前技术尚未报道的。
本发明的一种鹰嘴豆提取物制备方法优点为工艺简单，操作方便，技术易掌握，能耗小，溶剂可回收循环使用，生产成本低。
本发明还提供用本发明的一种鹰嘴豆提取物以及药学上可接受的载体或赋形剂制备的药物制剂。这些药物制剂选自以下剂型：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、泡腾片剂、舌下片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、微球剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、膏剂、口服液、混悬剂、溶液剂、气雾剂、注射剂，注射乳剂、冻干粉针，还可以根据需要制备成缓释或控释制剂。
本发明的含有一种鹰嘴豆提取物药物制剂，在制备药物制剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体来自：抗氧剂、鏊合剂、表面活性剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、溶剂、缓释材料、肠溶材料、pH调节剂、矫味剂、色素等，常用载体如：甘露糖醇、右旋糖苷、乳糖、葡萄糖、山梨醇、木糖醇、注射用水、注射用乙醇、氯化钠、硅衍生物、纤维素、纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐温80、琼脂、碳酸钙、聚乙二醇、环糊精、磷脂类材料、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙等。
以下通过具体实施例对本发明作进一步的说明，并非对本发明的限定，依照本领域公知的现有技术，本发明的实施方式并不限于具体实施例。
具体实施方式
实施例1
HPLC法测定一种鹰嘴豆提取物中3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯含量的方法
色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为40%体积甲醇、25%体积乙腈和35%体积2%冰乙酸溶液（体积比）；流速：1.0 mL·min-1；蒸发光散射检测器检测。理论塔板数按3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯计算应不低于6000。
溶液的制备
对照品溶液的制备
精密称取3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯对照品适量，加甲醇制成每1 mL含3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯80 μg溶液。
供试品溶液的制备
取一种鹰嘴豆提取物10 mg，精密称定，加甲醇溶解，转移至100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
样品测定方法
精密吸取对照品溶液5和20 μl，供试品溶液10 μl，按色谱条件进样，测定，用外标两点法计算3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯的含量。
实施例2
薄层色谱法鉴别一种鹰嘴豆提取物中3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯。
溶液的制备
对照品溶液的制备
精密称取3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品适量，分别加甲醇制成每1 mL含3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯各1 μg溶液。
供试品溶液的制备
取一种鹰嘴豆提取物100 μg，精密称定，加甲醇溶解，转移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
薄层色谱法
精密吸取供试品溶液、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品溶液各1 μl，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯对照品溶液8 μl，分别点于同一十八烷基硅烷键合硅胶薄层板上，以85%体积甲醇和15%体积2%冰乙酸溶液（体积比）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
实施例3
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加50%乙醇800 L，超声提取一次，超声提取频率40 kHz，超声提取功率500 W，提取时间30分钟，滤过，残渣加50%乙醇回流提取二次，每次加50%乙醇800 L，每次1小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置48小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂HPD200柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物148 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有87.23%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例4
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加90%乙醇800 L微波提取一次，微波提取温度70℃，微波提取功率400W，提取时间10分钟，滤过，残渣加90%乙醇回流提取二次，每次加90%乙醇800 L，每次1小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置36小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物171 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有90.26%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例5
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加70%乙醇冷浸提取二次，每次加70%乙醇800 L，每次210分钟，分次滤过，残渣加70%乙醇800 L回流提取一次，提取时间2小时，滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加2%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置12小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂HPD200柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物138 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有80.55%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例6
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加70%乙醇超声提取三次，每次加70%乙醇800 L，超声提取频率40 kHz，超声提取功率500 W，每次1小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加2%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置4小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂HPD200柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物163 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有74.25%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例7
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加70%乙醇冷浸提取三次，每次加70%乙醇800 L，每次210分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂HPD600柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物95 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有71.24%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例8
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加50%乙醇冷浸提取三次，每次加50%乙醇800 L，每次210分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀经大孔吸附树脂HPD400柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物114 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有86.21%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例9
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加50%乙醇回流提取三次，每次加50%乙醇800 L，每次2小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物168 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有93.96%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例10
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加50%乙醇微波提取三次，每次加50%乙醇800 L，微波提取温度70℃，微波提取功率400W，每次10分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置4小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物169 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有88.25%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例11
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加70%乙醇微波提取三次，每次加70%乙醇800 L，微波提取温度70℃，微波提取功率400W，每次10分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置4小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物182 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有94.23%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例12
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加90%乙醇微波提取三次，每次加90%乙醇800 L，微波提取温度70℃，微波提取功率400W，每次10分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置4小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物125 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有80.16%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例13
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加70%乙醇回流提取三次，每次加70%乙醇800 L，，每次2小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物176 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有94.88%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例14
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加90%乙醇冷浸提取三次，每次加90%乙醇800 L，每次210分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加2%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置24小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂HPD400柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物109 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有70.18%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例15
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加50%乙醇超声提取三次，每次加50%乙醇800 L，超声提取频率40 kHz，超声提取功率500 W，每次30分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1.5%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置36小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，经大孔吸附树脂HPD100柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物137 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有76.34%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例16
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加90%乙醇超声提取三次，每次加90%乙醇800 L，超声提取频率40 kHz，超声提取功率500 W，每次30分钟，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加0.5%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置48小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物145 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有89.50%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例17
鹰嘴豆粗粉100 Kg，加90%乙醇回流提取三次，每次加90%乙醇800 L，每次2小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇，残留物加1%氢氧化钾75%乙醇溶液50 L使溶解，室温放置2小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水1000 L，混匀，经大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为50 L，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆提取物154 g。采用实施例1的方法测定，鹰嘴豆提取物中含有81.14%重量的3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯；采用实施例2的方法测定，供试品色谱中，对与3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯、3β-O-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-12-烯和3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-22β,24-二羟基-齐墩果-11,13-二烯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例18
一种鹰嘴豆提取物用药学上可接受的载体或赋形剂制备的药物制剂。这些药物制剂选自以下剂型：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、泡腾片剂、舌下片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、微球剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、膏剂、口服液、混悬剂、溶液剂、气雾剂、注射剂，注射乳剂、冻干粉针，还可以根据需要制备成缓释或控释制剂，在制备药物制剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体来自：抗氧剂、鏊合剂、表面活性剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、溶剂、缓释材料、肠溶材料、pH调节剂、矫味剂、色素等，常用载体如：甘露糖醇、右旋糖苷、乳糖、葡萄糖、山梨醇、木糖醇、注射用水、注射用乙醇、氯化钠、硅衍生物、纤维素、纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐温80、琼脂、碳酸钙、聚乙二醇、环糊精、磷脂类材料、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙。上述制备工艺均为本领域常规操作，在此不加赘述。