本发明涉及3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类似物和衍生物作为抗菌和抗真菌活性的发现，药物化学研究和制备方法。本发明还涉及该类化合物作为抗菌和抗真菌等疾病药物的应用。
背景技术：
：由于大量抗菌药品滥用，所用有效的抗菌药物都有可能出现耐药菌株,对多种抗菌药物呈现耐药性,如产生了称之为“超级细菌”的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(mrsa)，耐万古霉素肠球菌（vre）等。感染“超级细菌”的蔓延已构成对人类健康的严重威胁，因此研发出新的对耐药菌具有活性的抗菌药已经是迫在眉睫。检索全部文献，还没有发现有关3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类具有抗菌和抗真菌活性用途的报道。其它不同结构，只是在结构母核具有相似性的化合物所发明的生物活性研究专利有：wo2008062026、ep2086947和us20130252951，这些专利所发明化合物与本发明化合物结构不同，只是在母核结构具有相似性，其生物活性及应用适应症也是与本发明无关，它们都是用于抗炎治疗；us20160022742所发明化合物与本发明化合物不同，只是在母核结构具有相似性，其生物活性及应用也是与本发明无关，是用于肝功能紊乱治疗。综上所述，迄今为止检索全部文献，在化学结构、合成和治疗作用应用方面，本发明以结构通式i所表示的化合物结构3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物、这些化合物的抗菌和抗真菌生物活性应用的专利发明和文章还没见报道。技术实现要素：本发明的目的是提供一种3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物的化学合成与制备，具有下列结通式及前药，并提供它们的制备、药理活性实验方法及药理活性应用。本发明的目的是这样实现的，其分子式结构如下：其中结构式i所述的m+为：li+、k+、na+、ca+/2,mg+/2,cu+/2和fe+/2之一，可通过杂环酚羟基和各种碱及碱金属反应成盐，例如金属li、金属na、金属k、碳酸钠、氢化钠、氢氧化钠、氢氧化钾等无机碱、有机碱形成酚盐或复盐；结构式i所述含有氮原子具有碱性可通过和酸，如盐酸、硫酸、硝酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸、草酸等反应形成无机酸盐、有机酸盐或复盐。其中结构式i所述的3-(2,4-二氟苯基)--5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物，结构式i所述的r为h、任意取代的芳环基、脂环基和/或芳环与脂环稠合组合基，可为结构式ii中取代基1、2、3、4、5、6、7、8和9之一，其中化学结构8和9芳环所稠脂环为三碳、四碳或五碳脂环。其中结构式ii所述的x可不存在、可分别为相同或不相同取代基，为任意取代的氢、卤素、羟基、巯基、氰基、羰基、取代羰基、醛基、酮基、硝基、羧基、取代羧基、羧酸酯基、仲氨基、叔氨基、二碳、三碳、四碳、五碳或六碳烷基氧基、芳基烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、烷硫基、巯酯基、芳基烷硫基、芳硫基、杂芳硫基、酯基、酰氧基、磷酸氧基、磺酸氧基、芳香氧基、季铵盐基、酰胺基、肼基、肟基、腙基、含氮脂肪烃基、含氮芳香烃基、含氮环基、含氮脂环基、含氮芳香环基、含氮芳杂环基、磷化物基、磷酸基、磷酸酯基、一碳、二碳、三碳、四碳或五碳烷基以及与这些取代基组合基。结构式i所述,3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物，包括抗菌药理活性和作为抗菌药物的应用，抗真菌药理活性和作为抗真菌药物的应用，包括与其它已知的抗菌、抗真菌、抗炎和抗病毒及免疫药物配伍使用，还包括对细菌感染伴随的炎症和炎症疾病、真菌和真菌疾病、病毒和病毒性疾病以及免疫系统疾病等与细菌感染的并发症的治疗药物配伍使用、其单独或与已知的下述药物配合使用的给药剂量为0.02mg/kg-250mg/kg（静脉、肌肉注射、口服、局部用药等给药途径）；各种方法治疗和途径治疗，其中该细菌为革兰氏阳性菌：葡萄球菌、肺炎球菌、粪肠球菌、链球菌、牛链球菌，肺炎链球菌、消化链球菌、化脓肺炎链球菌、化脓肺炎链球菌、化脓性链球菌、无乳链球菌、绿色链球菌、牛链球菌、无乳链球菌b、组绿色链球菌、白喉杆菌、破伤风杆菌、丹毒杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌、枯草芽胞杆菌、梭状芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、枯草芽胞杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、梭状芽孢杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、产气荚膜杆菌螺旋体、放线菌、结核菌，其中该细菌为革兰氏阳性耐药菌，耐甲氧西林葡萄球菌、耐万古霉素金葡菌、葡萄球菌属诱导型克林霉素耐药、耐万古霉素肠球菌、肠球菌高水平耐氨基糖苷类、耐青霉素肺炎链球菌、多重耐药鲍曼不动杆菌、耐药与多重耐药结核杆菌与结核分枝杆菌、链球菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌及鮑氏不动桿菌等、耐药流感嗜血杆菌、耐药淋球菌、耐药脑膜炎奈瑟菌、耐药肠杆菌科细菌、耐药铜绿假单胞菌。所述结构式i，3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物具体化合物结构见表1，实施例1至实施例33，但不局限于实施例：3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(4-氰基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-硝基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-甲氧基苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-(二甲氨基)苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-酚钠基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(4-羧酸钠苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(4-磺酸钠苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-氨磺酰基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(4-甲酰基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3,5-双(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(4-乙氧基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(6-氰基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-硝基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-5-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-5-(6-(二甲氨基)吡啶-3-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-5-(6-酚钠吡啶-3-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(4-氰基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、5-(6-羧酸钠吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-硝基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-(二甲氨基)苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-氨磺酰基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、5-(6-氰基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-亚磺酸钠吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-氨磺酰基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-苯氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-((2-(二甲氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(6-甲酰基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠、5-(6-乙酰氧基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠。结构式i所述的3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物的药理活性和作为抗菌和抗真菌药物的应用，所述细菌和真菌等感染所造成的各种感染还包括对细菌感染伴随的炎症和炎症疾病、真菌和真菌疾病、病毒和病毒性疾病以及免疫系统疾病的并发症：甲氧西林敏感葡萄球菌、溶血性链球菌和肺炎链球菌所致的上、下呼吸道感染、皮肤软组织感染、尿路感染、败血症、心内膜炎等；亦可用于流感嗜血杆菌、奇异变形杆菌、大肠埃希菌敏感株所致的尿路感染以及肺炎，链球菌属、肺炎链球菌等革兰阳性球菌、以及流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌等中的敏感株所致的呼吸道感染、尿路感染、皮肤软组织感染、败血症、骨、关节感染和腹腔、盆腔感染，溶血性链球菌、肺炎球菌、敏感金葡菌等感染；草绿色链球菌和肠球菌所致心内膜炎以及气性坏疽、厌氧菌感染、炭疽、梅毒、淋病等。结构式i所述的3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物及其用途，其中该化合物与至少选自以下一种或其组合已知的抗菌剂、抗真菌剂、抗炎剂或该试剂的可药用盐或前药一起配伍或联合用药，但不局限于以下药物，其中，包括：β-内酰胺类：青霉素、普鲁卡因青霉素、苄星青霉素、甲氧西林、苯唑西林、氯唑西林、双氯西林钠、氨苄西林、阿莫西林、海他西林、羧苄西林、磺苄西林、替莫西林、呋苄西林、哌拉西林、阿洛西林、美洛西林、替卡西林、美西林、阿帕西林、阿扑西林、仑氨西林、氟氯西林、舒他西林、匹氨西林、酞氨西林、巴氨西林、卡茚西林、呋布西林、头孢曲松、头孢匹罗、头孢呋辛、头孢呋辛酯、头孢噻肟、头孢噻吩、头孢噻啶、头孢硫脒、头孢乙腈、头孢匹林、头孢唑林、头孢甲肟、头孢哌酮、头孢克洛、头孢唑肟、头孢他啶、头孢尼西、头孢地尼、头孢克肟、头孢拉宗、头孢匹胺、头孢咪唑、头孢特仑、头孢泊肟酯、头孢地秦、头孢替安、头孢他美、头孢唑南、头孢丙烯、头孢布烯、头孢吡肟、头孢氨苄、头孢拉定、头孢克罗、头孢曲秦、头孢羟氨苄、头孢孟多、头孢磺啶、头孢西丁、头孢美唑、头孢替坦、头孢米诺、拉氧头孢、头孢卡品酯、头孢唑兰、头孢替安、头孢雷特、头孢克定、头孢噻利、氯碳头孢、氟氧头孢，大环内酯类：地红霉素、罗红霉素、罗地霉素、克拉霉素、氟红霉素、阿奇霉素、罗他霉素、他克美司、红霉素、依托红霉素、克拉霉素、吉他霉素、麦白霉素、柱晶白霉素、麦迪霉素、阿奇霉素、交沙霉素、螺旋霉素、乙酰螺旋霉素，氨基糖苷类：奈替米星、阿司米星、阿贝卡星、异帕米星链霉素、卡拉霉素、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、西索米星、新霉素、巴龙霉素、福提米星、小诺米星、异帕米星、地贝米星、达地米星、大观霉素、链霉素、卡那霉素、依替米星、地贝卡星，酰胺醇类：氯霉素、琥珀氯霉素、棕榈氯霉素、甲砜霉素，林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸酯，多肽多烯类：环孢素、替考拉宁、培洛霉素多粘菌素、多粘霉素、万古霉素、去甲万古霉素、杆菌肽、多粘菌素b、夫西地酸、米卡霉素，利福霉素类：利福布汀、利福喷汀、利福昔明、利福平、利福霉素、利福定，喹诺酮类药物：依诺沙星、托氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、司氟沙星、培氟沙星、氟罗沙星、替马沙星、沙氟沙星、莫西沙星、特伐沙星、格帕沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、帕楚沙星、芦氟沙星、磺胺异恶唑、磺胺甲恶唑、磺胺嘧啶、磺胺醋酰钠、磺胺嘧啶银、甲氧苄啶、吡哌酸、呋喃妥因、呋喃唑酮，萘啶酸，氨氟沙星、加替沙星、帕珠沙星、曲氟沙星、酸莫西沙星，四环素类：四环素，甲烯土霉素，米诺环素，金霉素，强力霉素，土霉素、多西环素、美他环素、地美环素、胍甲环素，β-内酰胺酶抑制剂：克拉维酸、舒巴坦、三唑巴坦，碳青霉烯类抗生素：亚胺培南、西司他丁、帕尼培南、倍他米隆、美罗培南、头霉素，磺胺类：磺胺米隆、磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲异嘧啶、磺胺苯吡唑、磺胺间甲氧嘧啶、碘胺对甲氧嘧啶、碘胺多辛、磺胺脒、磺胺嘧啶锌、磺胺林、琥珀磺胺噻唑、联磺甲氧苄啶、酞磺胺噻唑、硫霉素、克拉维酸、氨曲南、亚胺培南、法罗培南、西司他丁、舒巴坦、三唑巴坦、卡芦莫南、西索米星、氯霉素棕榈酸酯、磷霉素、sv、溴莫普林、奥替尼啶、乌洛托品、孟德立胺、次水杨酸铋、甲硝唑磷酸二钠、舒哌酮、新灭菌、甲硝唑，阿柔比星、表柔比星、佐柔比星、吡柔比星、伊达比星、莫匹罗星、硝咪唑、替硝唑、吡哌酸、呋喃妥因，硝基呋喃类：呋喃唑酮、甲氧苄啶，甲基呋喃类：柳氮磺吡啶，抗真菌类：硫康唑、拉诺康唑、齐诺康唑、布康唑、氯康唑、硝酸芬替康唑、舍他康唑、奥昔康唑、联苯苄唑、氟康唑、伊曲康唑、沙康唑、克霉唑、益康唑、噻康唑、咪康唑、酮康唑、萘替芬、布替萘芬、环吡酮、阿莫罗芬、两性霉素b、球红霉素、氟胞嘧啶、特比奈芬、制霉菌素、灰黄霉素、克念菌素。结构式i所述的3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物，药理活性和作为抗菌和抗真菌药物的应用以及联合用药所述的其特征是：本发明药物化合物的给药途径包括：口服、非胃肠道、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、透皮、颊、鞘内、颅内、鼻内或局部途径进行给药。具体实施方式下面将通过实施例对本发明做进一步说明，但下述的实施例仅是本发明其中的举例而已，并不代表本发明所限定的权利范围，该权利范围以权利要求书为准。化学合成与制备(1)重要中间体的制备结构式i所述的3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物，它们的制备方法，其特征是：在催化剂的作用下进行环合反应制备中间体2，含有各种取代基的羰基乙酸乙酯化合物在催化剂作用下与4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺反应形成c-n键，完成环合反应。该催化剂为脱水剂、有机酸和/或无机酸催化剂之一，采用四氢呋喃、1,4-二氧六环、乙氰、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、正己烷、甲苯等其中一种为溶剂，反应温度控制在-40oc至180oc条件下，可形成关键中间体2，3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚，反应式如下：(2)酚盐的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-取代-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚盐类衍生物和类似物的制备方法为：在无机碱的作用下，采用下列其中一种试剂（四氢呋喃、1,4-二氧六环、乙氰、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺等）为溶剂，反应温度控制在-40oc至180oc条件下，可形成酚盐化合物3，反应式如下：本发明化合物的可药用盐也在本发明范围内，其酸可通过和碱反应成盐，例如碳酸钠、氢化钠、氢氧化钾等。含有氮原子结构具有碱性可通过和酸反应成盐如盐酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸、草酸等。本发明化合物的前药也在本发明范围内。可将本发明药物修饰成前药，增大其水溶性和分子体积，并可降低其毒性。合成与制备举例（实施例及其结构1-33见表1）实施例1的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠(1)于100ml的茄形瓶，室温下依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-氧代-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸乙酯0.260g，n,n-二甲基甲酰胺20ml，在氮气保护和搅拌下120oc反应5小时，tlc检测反应完全。冷却后过滤，用乙酸乙酯萃取三次（30ml×2），饱和食盐水反洗两次（20ml×2），无水硫酸钠干燥，减压回收溶剂得到粗产物，粗产物经柱层析获得粗品固体物进行硅胶柱层析，采用流动相ch2cl2:ch3oh不同比例浓度梯度洗脱，获得洗脱物经重结晶得关键中间体3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚。红外光谱测定ir(kbr,cm-1)3246,2986,1612,1565,1478,1326,1171,1104,1064,1014;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ11.53(b,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.72(d,j=7.5,2h),7.68(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)；(2)于100ml的茄形瓶，室温下依次加入3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠0.427g，氢氧化钠0.40g，四氢呋喃和水（1：1）混合溶剂20ml，在氮气保护和搅拌下回流反应5小时，减压下回收容积，冷却后过滤，获得粗品固体物进行重结晶得目标产物,3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1612,1565,1517,1479,1419,1375,1326,1263,1173,1104,1063,1014,964,932,851,791;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=8.0,1h),7.72(d,j=7.5,2h),7.68(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例2的制备5-(4-氰基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-氰基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.217g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3661-2840,2220,1610,1566,1479,1327,1175,1106,1065,964;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.97(d,j=7.5,2h),7.82(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例3的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-硝基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-硝基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.237g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3664-2845,1614,1567,1481,1329,1250,1177,1106,1066,1016;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.32(d,j=7.5,2h),8.05(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例4的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-甲氧基苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.222g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3657-2838,1610,1563,1477,1324,1250,1171,1102,1061,962;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=8.0,1h),7.55(d,j=7.5,2h),7.07(m,3h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),3.83(s,3h),2.06(s,3h)。实施例5的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-(二甲氨基)苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-(二甲氨基)苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.235g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3669-2837,1610,1562,1476,1340,1170,1100,1060,1011;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=8.0,1h),7.61(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.85(d,j=7.5,2h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),3.06(s,6h),2.06(s,3h)。实施例6的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-酚钠基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-羟基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.208g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3658-2841,1612,1564,1224,1172,1104,1061,1012,960;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=8.0,1h),7.49(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.86(d,j=7.5,2h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例7的制备5-(4-羧酸钠苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)苯甲酸0.236g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3665-2810,1617,1600,1480,1326,1173,1104,1063,1014;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.10(d,j=7.5,2h),8.0(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例8的制备5-(4-磺酸钠苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)苯亚磺酸0.256g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3670-2810,1612,1565,1479,1326,1200,1104,1063,1014;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.01(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h)，7.64(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例9的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-氨磺酰基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g3-氧-3-(4-氨磺酰基苯基)丙酸乙酯0.271g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3665-2840,1612,1565,1479,1320,1173,1104,1063,1017;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.07(d,j=7.5,2h),7.92(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h),2.0(b,2h)。实施例10的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-氧-3-(4-苯氧基苯基)丙酸乙酯0.284g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1612,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1014;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.60-7.07(m,11h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例11的制备5-(4-甲酰基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-氨甲酰基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.235g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3669-2840,1750,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1014;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.09(d,j=7.5,2h),7.97(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.50(b,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例12的制备3,5-双(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(2,4-二氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.228g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3669-2850,1622,1565,1481,1333,1104,1063;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=7.5,2h),6.82(s,1h),6.74(s,2h),2.06(s,3h)。实施例13的制备5-(4-乙氧基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-乙酰氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.250g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3652-2838,1750,1612,1565,1479,1326,1173,1106,1061,1014;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.83(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.15(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.28(s,3h),2.06(s,3h)。实施例14的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-氧-3-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)丙酸乙酯0.261g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1612,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1018;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.58(s,1h),7.88(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.35(d,j=7.5,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例15的制备5-(6-氰基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(6-氰基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.218g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3651-2831,2240,1612,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1017;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ9.20(s,1h),8.35(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.73(d,j=7.5,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例16的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-硝基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(6-硝基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.238g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3651-2840,1612,1565,1479,1375,1326,1173,1104,1063,1017;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ9.07(s,1h),8.64(d,j=7.5,1h),8.15(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例17的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.223g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3649-2840,1612,1565,1479,1326,1250,1173,1105,1066;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.97(d,j=7.5,1h),7.91(s,1h),7.75(d,j=8.0,1h)，7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),6.60(d,j=7.5,1h),3.80(s,3h),2.06(s,3h)。实施例18的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(6-(二甲氨基)吡啶-3-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(6-(二甲氨基)吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.236g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3639-2850,1612,1565,1479,1326,1200,1104,1063,1021;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.33(s,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.66(d,j=7.5,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.76(d,j=7.5,1h),6.74(s,1h),3.15(s,6h),2.06(s,3h)。实施例19的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(6-酚钠吡啶-3-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(6-羟基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.209g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1612,1565,1479,1326,1250,1173,1104,1063,1014,964;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.97(d,j=7.5,1h),7.91(s,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),6.60(d,j=7.5,1h),2.06(s,3h)。实施例20的制备5-(4-氰基苯基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-氰基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.217g反应，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3661-2840,2220,1610,1566,1479,1327,1175,1106,1065,964;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.97(d,j=7.5,2h),7.82(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例21的制备5-(6-羧酸钠吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，5-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)吡啶羧酸0.237g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1660,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1020;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ9.23(s,1h),8.40(d,j=7.5,1h),8.35(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例22的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚0.427g，氢氧化钾0.40g，反应5小时，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物,3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1612,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1014,964,932,851,791;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=8.0,1h),7.72(d,j=7.5,2h),7.68(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例23的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-硝基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-硝基苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.237g反应，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3664-2845,1614,1567,1481,1329,1250,1177,1106,1066,1016;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.32(d,j=7.5,2h),8.05(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例24的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-(二甲氨基)苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-(二甲氨基)苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.235g反应，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3656-2837,1610,1562,1476,1340,1170,1100,1060,1011;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.75(d,j=8.0,1h),7.61(d,j=7.5,2h),7.07(d,j=8.0,1h),6.85(d,j=7.5,2h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),3.06(s,6h),2.06(s,3h)。实施例25的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(4-氨磺酰基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g3-氧-3-(4-氨磺酰基苯基)丙酸乙酯0.271g反应，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3665-2840,1612,1565,1479,1320,1173,1104,1063,1017;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.07(d,j=7.5,2h),7.92(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h),2.0(b,2h)。实施例26的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-氧-3-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)丙酸乙酯0.261g反应，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1612,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1018;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.58(s,1h),7.88(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.35(d,j=7.5,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例27的制备5-(6-氰基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钾分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(6-氰基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.218g反应，获得中间体；继续和氢氧化钾反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3651-2831,2240,1612,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1017;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ9.20(s,1h),8.35(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.73(d,j=7.5,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例28的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-亚磺酸钠吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，5-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)吡啶-2-亚磺酸0.257g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3666-2840,1612,1565,1479,1326,1253,1173,1104,1063,1016;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.19(d,j=7.5,1h),7.83(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h),2.0(b,1h)。实施例29的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-氨磺酰基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g3-氧-3-(6-氨磺酰基吡啶-3-基)丙酸乙酯0.272g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3651-2840,1612,1565,1479,1330,1173,1063,1021;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ9.24(s,1h),8.42(d,j=7.5,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.57(d,j=7.5,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h),2.0(b,2h)。实施例30的制备3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-5-(6-苯氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-氧-3-(6-苯氧基吡啶-3-基)丙酸乙酯0.285g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3639-2860,1612,1565,1479,1326,1255,1173,1104,1063,1009;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.96-6.9(m,10h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例31的制备3-(2,4-二氟苯基)-5-(4-((2-(二甲氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-(4-((2-(二甲氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-3-氧代丙酸乙酯0.306g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3656-2837,1680,1640,1562,1476,1410,1340,1170,1100,1060,1011;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ8.09(d,j=7.5,3h)7.97(d,j=7.5,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.82(s,1h),6.74(s,1h),3.60(t,j=7.5,2h),2.57(t,j=7.5,2h),2.26(s,6h),2.06(s,3h)。实施例32的制备5-(6-甲酰基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g，3-氧-3-(6-苯氧基吡啶-3-基)丙酸乙酯0.236g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3659-2840,1720,1565,1479,1326,1173,1104,1063,1021;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ9.11(s,1h),8.44(d,j=7.5,1h),8.41(d,j=7.5,1h),8.37(b,2h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),2.06(s,3h)。实施例33的制备5-(6-乙酰氧基吡啶-3-基)-3-(2,4-二氟苯基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-酚钠分别采用实施例1中的(1)和(2)相似的制备方法，于100ml的茄形瓶，依次加入4-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-1h-吡唑-5-胺0.209g3-(6-乙酰氧基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯0.251g反应，获得中间体；继续和氢氧化钠反应获得目标产物。红外光谱测定ir(kbr.cm-1):3622-2830,1730,1565,1479,1326,1173,1104,1065;核磁共振光谱测定1hnmr(dmso-d6)δ7.97(d,j=7.5,1h),7.91(s,1h),7.75(d,j=8.0,1h),7.07(d,j=8.0,1h),6.88(s,1h),6.74(s,1h),6.60(d,j=7.5,1h),2.28(s,3h),2.06(s,3h)。表1实施例化合物实施例结构式分子式分子量1c20h11f5n3nao427.072c20h11f2n4nao384.083c19h11f2n4nao3404.074c20h14f2n3nao2389.105c21h17f2n4nao402.136c19h11f2n3na2o2397.067c20h11f2n3na2o3425.068 c19h11f2n3na2o3s445.039c19h13f2n4nao3s438.0610c25h16f2n3nao2451.1111c20h13f2n4nao2402.0912c19h10f4n3nao395.0713c21h14f2n3nao3417.0914c19h10f5n4nao428.0715c19h10f2n5nao385.0816c18h10f2n5nao3405.0617c19h13f2n4nao2390.0918c20h16f2n5nao403.1219c18h10f2n4na2o2398.0620c20h11f2kn4o400.0521c19h10f2n4na2o3426.0522c20h11f5kn3o443.0523c19h11f2kn4o3420.0424c21h17f2kn4o418.1025c19h13f2kn4o3s454.0326c19h10f5kn4o444.0427c19h10f2kn5o401.0528c18h10f2n4na2o3s446.0229c18h12f2n5nao3s439.0530c24h15f2n4nao2452.1131c24h22f2n5nao2473.1632c19h12f2n5nao2403.0933c20h13f2n4nao3418.09实施例34体外抗菌实验实例注射剂制备实例称取0.50g化合物1，加入乙醇60ml，搅拌使溶解，溶解后加入60ml1,2-丙二醇和10ml吐温80，搅拌混合均匀，加注射用水至总体积500ml，用0.22μm滤膜过滤，分装，100℃热压灭菌30min，检漏，全检，包装，即得5mg/5ml（氨瓶），共100支。材料与方法1．标准菌株：蜡样芽孢杆菌2、枯草芽胞杆菌168、粪肠球菌29212、粪肠球菌f2518（vre）、金黄色葡萄球菌29231、金黄色葡萄球菌43300(mrsa)、金黄色葡萄球菌703(mrsa)、肺炎链球菌6303(prsp)、化脓肺炎链球菌m2、无乳链球菌b组、肺炎链球菌10351、炭疽杆菌bacillus1、白喉杆菌、产气荚膜杆菌、口腔念珠菌、皮真菌；2．测试样品：化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6、化合物7、化合物8、化合物9、化合物10、化合物11、化合物12、化合物13、化合物14、化合物15、化合物16、化合物17、化合物18、化合物19、化合物20、化合物21、化合物22、化合物23、化合物24、化合物25、化合物26、化合物27、化合物28、化合物29、化合物30、化合物31、化合物32、化合物333.方法(1)灭菌：将所需实验器材及培养液经121℃、30min高压灭菌；无菌间紫外照射30min；(2)细菌增菌肉汤培养基制备：准确称取胰蛋白大豆肉汤培养基6g于500ml烧杯，加入200ml蒸馏水，加热充分溶解，移入三角烧瓶内，加棉塞，包扎高压灭菌即可；斜面培养基制备：称取胰蛋白大豆琼脂3.8g于500ml烧杯内，加入100ml蒸馏水，加热充分溶解，移入三角烧瓶内，加棉塞，包扎高压灭菌。稍冷却后，分装于7个试管内，每试管约10～15ml，倾斜适当角度，冷却备用；细菌扩增：打开atcc4300密封小瓶，用消毒后的小眼科镊夹取少量菌粉块，移入5ml离心管内，加胰蛋白大豆肉汤培养基0.6ml，混合均匀。平均分至7个斜面培养基内，既80μl/试管，涂布均匀。放入培养箱内，37℃培养24小时；菌悬液制备及细菌计数：用培养液将大试管内细菌洗下，移入无菌离心管中。混合均匀，制得菌悬液。移液枪取出一滴进行细菌密度测定。取洁净血细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片，将所取的菌悬液用生理盐水稀释一定倍数，并吹打均匀，移液枪吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生。将培养板置于显微镜下进行细菌计数。数出16小格的细菌总数，利用以下公式计算菌液浓度：细菌密度（个/ml）＝16小格细菌数×104×稀释倍数(3)96孔板接种样品的配制：首先将待测药物用少量dmso充分溶解，然后用培养基配制成所需初始浓度，并依次稀释成各受试梯度；菌液配制：根据菌浓度测定结果，将菌悬液用培养液（tsb）稀释成1.07×107cfμ/ml浓度的菌液；加药方案：本实验分为阳性对照组、生理盐水组、空白对照组及各受试药组，其中各受试药组、生理盐水组、空白组均设6个梯度孔，阳性对照组为7个梯度孔。各孔分别依次加入50μl菌悬液、30μl培养液及20μl各样品溶液；培养及观察：加完样的96孔板置于恒温箱中培养。培养温度为37℃，培养时间为24小时。培养结束于超净台内观察各组菌落生长情况。菌液澄清、无浑浊、孔底部无菌落。浓度定为该药的最低抑菌浓度（mic）。结果与结论采用微量稀释法以原液在96孔板的微孔稀释板逐孔稀释药液(第1～10孔),然后在第1～11孔加入50μl菌液,使第1～10孔中的药液浓度呈倍递减，第12孔加100μl培养基作空白对照。微孔稀释板震荡混合后，置垫有湿纱布的有盖瓷盘内37℃培养24小时，在有黑色背景的光源下观察结果。有菌生长呈球型、弥漫性浑浊或底部呈扣子样沉淀，无菌生长孔所含的最低药物浓度即为最低抑菌浓度。结果见表2及表2（续表）注：（1）细菌及真菌(带*为耐药菌)1.蜡样芽孢杆菌2；2.枯草芽胞杆菌168；3.粪肠球菌29212；4*.粪肠球菌f2518（vre）；5.金黄色葡萄球菌29231；6*.金黄色葡萄球菌43300(mrsa)；7*.金黄色葡萄球菌703(mrsa)；8*.肺炎链球菌6303(prsp)；9.化脓肺炎链球菌m2；10.无乳链球菌b组；11.肺炎链球菌10351；12.炭疽杆菌bacillus1；13.白喉杆菌；14.产气荚膜杆菌；15.口腔念珠菌；16.皮真菌；（2）mic值（μm）测定值—代表mic值（μm）>150µg/ml;+代表mic值（μm）<150µg//ml;++代表mic值（μm）<100µg//ml;+++代表mic值（μm）<50µg//ml；结论：(1)表2显示本发明的实施例化合物具有很好的抗菌活性。特别值得注意的是实施例化合物2和3对于金黄色葡萄球耐药菌43300(mrsa)和金黄色葡萄球耐药菌703(mrsa)的mic值（μm）分别是<50µg//ml；(2)化合物1,2,3,4,6,7,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26,27,29,30,31,32和33分别对多种不同耐药菌，如粪肠球耐药菌f2518（vre）、金黄色葡萄球耐药菌43300(mrsa)、金黄色葡萄球耐药菌703(mrsa)和肺炎链球耐药菌6303(prsp)有抑制作用，其mic值（μm）分别在<100µg//ml区间；(3)化合物1,2,3,6,9,10,14,15,16,20,22,24,26,27和31对蜡样芽孢杆菌2、枯草芽胞杆菌168、粪肠球菌29212、粪肠球菌f2518（vre）、金黄色葡萄球菌29231、金黄色葡萄球菌43300(mrsa)、金黄色葡萄球菌703(mrsa)、肺炎链球菌6303(prsp)和化脓肺炎链球菌m2有效，mic值（μm）分别在<100µg//ml区间；(4)化合物1,5,6,9,13,14,16,17,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30,31,32和33对口腔念珠菌有效，mic值（μm）分别在<100µg//ml区间。实施例35体内抗菌实验实例1.材料测试样品：化合物3、化合物5、化合物9、化合物10、化合物30，复方1，复方2；试验动物：昆明种健康小鼠,体重19～21g，雌雄各半分组，其它组单性别使用，由北京军事医学科学院药物研究所动物中心提供；菌株：金黄色葡萄球菌43300(mrsa)；2.方法将小鼠随机分成空白对照组、阳性对照组、受试药品组，每组10只，雌雄各半。按小鼠体重0.2ml/10g腹腔接菌(mrsa-2152)，菌浓度为5.0×106cfu/ml，接菌后立即进行尾静脉注射给药，并于6小时后进行第二次给药。观察30天，记录各组动物的存活期，计算阳性对照组及样品组的生命延长率：生命延长率%=（受试组生存天数-空白组生存天数）/空白组生存天数×100%3.结果与结论注：复方1为化合物30+环丙沙星，比例1:1；复方2为化合物5+环丙沙星，比例1:1体内试验表明，化合物3、化合物5、化合物9、化合物10、化合物30、复方1和复方2对耐药性金黄色葡萄球菌43300(mrsa)具有一定的抑制作用，给药时生命延长率均超过50%，复方与单方相比生命延长率明显提高，说明复方用药可以明显增强生命延长率。以上样品可以作为抗mrsa的进一步深入研究。当前第1页12