一种超声酶解提取肝素钠技术的制作方法

文档序号:12992872阅读:671来源:国知局

本发明涉及一种肝素钠技术,尤其是一种超声酶解提取肝素钠技术。



背景技术:

目前我国生产几乎全部采用猪小肠为原料,在常规反应器内运用盐解法、碱解法和酶解法等几种,其中盐解法应用最为普通,其生产工序是:原料(肠黏膜)、常规反应器内盐水提取、过滤、树脂吸附、洗脱、乙醇沉淀、脱水、干燥、肝素钠粗品,上述方法生产肝素钠的工艺过程虽然比较简单易于实现,但存在的不足之处在于过程的精致,因为粗品肝素钠经反复的酸碱处理,不仅会使肝素钠的收率减少,而且对肝素钠的生物活性也影响很大,尤其效价很难达到90uspu/mg以上,并且时间较长。



技术实现要素:

本发明的目的是在于提供一种超声酶解提取肝素钠技术,利用双酶组进行酶促提取肝素纳,通过选择酶的种类、酶组合的比例、超声场的强度、控制好时间以及其他几道工序制成肝素钠。

该方法采用以下步骤:

一种超声酶解提取肝素钠技术,其特征在于,该方法包括以下步骤:

(a)、将刮制好的小肠粘膜抽入常规酶解罐,在加温前先加入重量比为2.3%-2.8%的精盐,调ph值到9.0-9.2;将刮制好的小肠粘膜抽入复频超声反应罐,复频超声条件为20+40khz,选择超声强度在0.1w/m2到0.9w/m2;

(b)、将步骤(a)中的溶液加温到40℃-45℃时加入胰蛋白酶和脂肪酶,并且使其比例在10:0.5到10:5之间,双酶在步骤(a)中溶液的重量比为0.3%-0.4%,继续加温到50℃-55℃,保温酶解2h-5h,然后继续加温到80℃-85℃,保温10-20分钟后过滤;

(c)、对步骤(b)中的过滤溶液进行吸附、洗涤、洗脱、沉淀、脱水干燥常规步骤后获得肝素钠产品。

所述的步骤(b)中,所选择的胰蛋白酶和脂肪酶的优选比例为10:2。

本发明与现有技术相比,具有如下优点:

1、整个工序的时间减少了大概33%;

2、产品的收率提高了29.6%;

3、效价稳定在120以上(国内先进技术产品效价90-"0)。

具体实施方式

实施例1

制小肠粘膜(10副小肠),每根小肠与水混合后约4-6公斤,将刮制好的小肠抽入常规酶解罐,在加温前先加入2.3-2.8%(体量)的精盐,调ph值9.0-9.2:在42℃时加入胰蛋白酶和脂肪酶(比例为10:2),占总溶液重量比为0.4%;继续加温至52℃,保温3小时后进行酶解,然后继续加温到80℃-85‘c,保温15分钟后过滤,对上述步骤中的过滤溶液进行吸附:吸附水过滤,冷却到58’c时加入树脂吸附;洗涤:收集树脂,清水漂洗数次,再用清水加温58-60‘c,调ph到7。5,到树脂洗干净为止,用1.2n盐水溶液,调ph到8加入树脂中,加温到60℃,洗涤0.5h,去处洗涤溶液,滤干树脂;洗脱:用4m的nacl溶液洗脱2次后,将两次洗脱溶液合并,过滤:沉淀:将一、二次洗脱液用85%的乙醇沉淀,体积比例是1:1.5左右,兑好后的酒精混合液浓度大约是30-40度,沉淀后脱水干燥得肝素钠产品。



技术特征:

技术总结
本发明涉及一种肝素钠技术,尤其是一种超声酶解提取肝素钠技术,利用双酶组进行酶促提取肝素纳,通过选择酶的种类、酶组合的比例、超声场的强度、控制好时间以及其他几道工序制成肝素钠。本发明与现有技术相比,具有如下优点:1、整个工序的时间减少了大概33%;2、产品的收率提高了29.6%;3、效价稳定在120以上(国内先进技术产品效价90‑"0)。

技术研发人员:菜同文;菜俊伟;菜俊林
受保护的技术使用者:盐城盛大肠衣食品有限公司
技术研发日:2017.08.10
技术公布日:2017.11.24
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