本发明涉及天然肽的提取方法，特别涉及一种从苍蝇中提取天然肽的方法。
背景技术：
近百年来，人类患的许多疾病，但由于抗生素的发明和发展，治愈不少病人，使抗生素在医药界的地位和作用达到无以论比的地步。但随着时间的推移，抗生素被广泛的使用，其负面作用日渐显现，仅是其耐药性一项，就使其单位用药量越用越高，直至抗生素不再对机体产生作用。十多年前国外一些发达国家已经严格规范管理使用，我国近年也开始严格管控抗生素类药物的使用。人们在重新评价抗生素作用的同时担心无药可用时患者怎么办，是否具有可替代的药物使用？在众多科学家的努力下，发现一种比抗生素疗效更好且安全的新药物——抗菌肽。抗菌肽不同于我们日常所用抗生素，其不具有耐药性和专一性，抗菌肽是一种非专一性的免疫应答产物，具有广谱性，不仅能抗多种细菌、真菌还能抗原虫、病毒甚至抗肿瘤细胞。抗菌肽是科学家们首先从动物体内某一部位分离出来的，据报道，苍蝇的分泌物中有一种抗菌活性蛋白具有极强的杀菌和抗病能力，只要0.01％的浓度就能致多种细菌和病毒死亡，是现有技术中一种抗生素都无法与之相比。
苍蝇堪称地球上元老级动物了，据考证苍蝇的存在历史上已有近4亿年，苍蝇在动物学上的分类，属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、环裂亚目的一大类动物。其中包括果蝇科、花蝇科、麻蝇科、丽蝇科和蝇科等，每个科又有若干个蝇属。我国最常见的是家蝇、市蝇、厩腐蝇、夏厕蝇、元厕蝇、大头金蝇、丝光绿蝇、铜绿蝇、红头丽蝇和伏蝇等，上述这些蝇类的滋生地多在人畜粪便和有机垃圾及腐烂的植物上，盛产期在夏秋较温热的季节。蝇蛆养殖业主要是家蝇，其次是大头蝇，因为家蝇入舍与人类接触最密切，可以集约化人工养殖，大头蝇虽不入舍但其活动范围都在人群居住附近与人类接触较多，经训化亦可集约化养殖。苍蝇体内存在的天然肽量，据检测，与住区的生态环境，采食的物料，蝇种种类等因素有关，与季度无明显差别。生态条件越恶劣，采食的物料越腐败，体肉的天然肽含量越高，同样条件下大头蝇体内的天然肽含量比家蝇多，野生的家蝇天然肽的含量比人工养殖产蛆淘汰的种蝇多。当以提取苍蝇天然肽为产业时，这些因素值得关注，但有一个共同特点，无论含天然肽量多少，它们的肽段分布规律比较接近。
现有技术中提取天然肽大多从蝇蛆中提取，提取方法复杂、成本高，且提取所得天然肽收率不高，因此，目前亟需一种从苍蝇中提取天然肽方便、简洁、收率高的方法。
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现要素：
本发明为解决上述技术问题，发明一种从苍蝇中提取天然肽的方法，从而解决现有技术中提取方法操作复杂、成本高、提取天然肽收率低的问题。
为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：
一种从苍蝇中提取天然肽的方法，包含以下操作步骤：
(1)将苍蝇体表消毒并脱水至体表无水分即可；
(2)步骤(1)脱水后所得苍蝇，按固液质量比1：4加入去离子水磨制浆，所得浆液过筛，所得滤渣烘干可作饲料添加剂或作制甲壳素的原料；
(3)步骤(2)中过筛后所得滤液调节ph值成碱性蝇浆，控温60℃微波处理25～30min，在55～60℃间保温40min；
(4)将步骤(3)中微波处理过的蝇浆排出冷却，调节ph值至4.8～5.0，沉析蛋白质、多糖、脂肪等，静置，待分层后过滤，滤渣低温干燥，得苍蝇蛋白粉；滤液依次进行微滤、两级超滤除去大分子物质；
(5)步骤(4)中超滤后所得滤液用反渗透膜，即纳滤过滤，所得滤渣为低价盐，除去低价盐，所得滤液浓缩；
(6)将步骤(5)中浓缩后所得浓缩液排出，加入颗粒型活性炭脱色，过滤，除去活性炭；
(7)将步骤(6)中过滤后所得滤液排出冷却至室温，送去冰柜或冷库冷冻；
(8)将冷冻至-37℃并保持1～2小时后所得冰块取出，打成小块用微波真空干燥机干燥，即得产品。
优选的是，步骤(1)中所述的苍蝇为诱捕野生家蝇或大头蝇，或人工饲养育蛆淘汰的种蝇中的至少一种。
优选的是，步骤(1)中所述的消毒为苍蝇蝇体用质量浓度3.5‰高锰酸钾溶液漂洗12min捞起，再用清水漂洗除去附着的高锰酸钾；所述的脱水为采用60目滤布三足离心机脱水。
优选的是，步骤(2)中水磨制浆，所得浆液过60目筛，过筛后所得滤液再过200目筛；步骤(3)中采用稀naoh调ph值至8.0的碱性的蝇浆。
优选的是，步骤(4)中冷却至低于40℃后，用壳聚糖溶液调节蝇浆ph值至4.8～5.0.
优选的是，步骤(4)中所述的壳聚糖溶液为用15％醋酸溶解1.5％的壳聚糖溶液所得；所述分层后用800目滤布离心过滤。
优选的是，步骤(4)中所述的微滤为用中空纤维膜进行微滤；所述的两级超滤为用能拦截10000da的超滤膜过滤，所得滤液再用能拦截2000da的超滤膜过滤，除去大分子物质，微滤所得滤渣与两级超滤所得滤渣合并处理，浓缩或不浓缩、低温干燥、得蝇蛆蛋白粉。
优选的是，步骤(5)中所述的浓缩为滤液在减压条件下浓缩，控温58℃，浓缩至be25℃，结束浓缩，即得。
优选的是，步骤(6)中用按浓缩液质量分数2％的量加入颗粒型活性炭在60～70℃条件下脱色2h，然后用600目滤布过滤，除去活性炭。
优选的是，步骤(7)中滤液排出冷却至室温，送去冰柜或冷库冷冻至-37℃，并保持1-2h；步骤(8)中所述的干燥温度为58℃，干燥至含水率低于5～6％，结束干燥工序。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明方法操作简洁，提取所得天然肽回收率高达77.33％，大大提高了天然肽的回收率；进一步的，本发明方法能够同时制备得到多个副产品，适用于大工业化生产，流程简洁、易操作。
附图说明
图1是本发明方法流程图。
具体实施方式
下面结合附图具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例中采用的稀naoh为质量浓度为5～8％的naoh溶液。
实施例1
一种从苍蝇中提取天然肽的方法，操作步骤如下：
(1)选用20kg冷冻保存的冰鲜家蝇为原料，其中13kg为生产蝇蛆4代以内淘汰的种蝇，7kg为诱捕的野生蝇，将苍蝇体表用质量浓度3.5‰高锰酸钾溶液漂洗12min捞起，再用清水漂洗除去附着的高锰酸钾，然后采用60目滤布三足离心机脱水至体表无水分即可；
(2)步骤(1)脱水后所得苍蝇，按固液质量比1：4加入去离子水磨制浆，所得浆液用三足离心机过60目筛，过筛后所得滤液再三足离心机过200目滤布，所得滤渣烘干可作饲料添加剂或作制甲壳素的原料；
(3)步骤(2)中200目过滤后所得滤液采用稀naoh调ph值至8.0的碱性的蝇浆，置于微波频率为2450mhz的微波罐中控温60℃微波处理27min，在55～60℃间保温40min；
(4)将步骤(3)中微波处理过的蝇浆排出冷却低于40℃后，用15％醋酸溶解1.5％的壳聚糖溶液调节ph值至4.8～5.0，沉析蛋白质、多糖、脂肪等，静置，待分层后用800目滤布三足离心机离心过滤，滤渣低温干燥，得苍蝇蛋白粉；滤液依次进行微滤、两级超滤除去大分子物质，即用中空纤维膜进行微滤，所得滤液先用能拦截10000da的超滤膜过滤(超滤1)，所得滤液再用能拦截2000da的超滤膜过滤(超滤2)，除去大分子物质，微滤所得滤渣与两级超滤所得滤渣合并处理，浓缩或不浓缩、低温干燥、得苍蝇蛋白粉；
(5)步骤(4)中超滤后所得滤液用反渗透膜，即纳滤过滤，纳滤的过程中滤液同时会被浓缩，纳滤所得滤渣为低价盐，除去低价盐，纳滤所得滤液在减压条件下再浓缩，控温58℃，浓缩至be25℃上下，结束浓缩；
(6)将步骤(5)中所得浓缩液排出，用按浓缩液质量分数2％的量加入颗粒型活性炭在65℃条件下脱色2h，然后用600目滤布过滤，除去活性炭；
(7)将步骤(6)中过滤后所得滤液排出冷却至室温，送去冰柜或冷库冷冻至-37℃，并保持1.5h；
(8)将冷冻至-37℃并保持2小时后所得冰块取出，打成小块用微波真空干燥机干燥，控温58℃，干燥至含水率低于5％，结束干燥工序，得到疏松状产品，按客户使用要求粉碎或不粉碎进行包装，即为苍蝇天然肽。
实施例2
一种从苍蝇中提取天然肽的方法，操作步骤如下：
(1)选用20kg冷冻保存的冰鲜家蝇为原料，其中12kg为生产蝇蛆4代以内淘汰的种蝇，8kg为诱捕的大头蝇，将苍蝇体表用质量浓度3.5‰高锰酸钾溶液漂洗12min捞起，再用清水漂洗除去附着的高锰酸钾，然后采用60目滤布三足离心机脱水至体表无水分即可；
(2)步骤(1)脱水后所得苍蝇，按固液质量比1：4加入去离子水磨制浆，所得浆液用三足离心机过60目筛，过筛后所得滤液再三足离心机过200目滤布，所得滤渣烘干可作饲料添加剂或作制甲壳素的原料；
(3)步骤(2)中200目过滤后所得滤液采用稀naoh调ph值至8.0的碱性的蝇浆，置于微波频率为2450mhz的微波罐中控温60℃微波处理25min，在55～60℃间保温40min；
(4)将步骤(3)中微波处理过的蝇浆排出冷却低于40℃后，用15％醋酸溶解1.5％的壳聚糖溶液调节ph值至4.8～5.0，沉析蛋白质、多糖、脂肪等，静置，待分层后用800目滤布三足离心机离心过滤，滤渣低温干燥，得苍蝇蛋白粉；滤液依次进行微滤、两级超滤除去大分子物质，即用中空纤维膜进行微滤，所得滤液先用能拦截10000da的超滤膜过滤(超滤1)，所得滤液再用能拦截2000da的超滤膜过滤(超滤2)，除去大分子物质，微滤所得滤渣与两级超滤所得滤渣合并处理，浓缩或不浓缩、低温干燥、得苍蝇蛋白粉；
(5)步骤(4)中超滤后所得滤液用反渗透膜，即纳滤过滤，纳滤的过程中滤液同时会被浓缩，纳滤所得滤渣为低价盐，除去低价盐，纳滤所得滤液在减压条件下再浓缩，控温58℃，浓缩至be25℃上下，结束浓缩；
(6)将步骤(5)中所得浓缩液排出，用按浓缩液质量分数2％的量加入颗粒型活性炭在60℃条件下脱色2h，然后用600目滤布过滤，除去活性炭；
(7)将步骤(6)中过滤后所得滤液排出冷却至室温，送去冰柜或冷库冷冻至-37℃，并保持1h；
(8)将冷冻至-37℃并保持1小时后所得冰块取出，打成小块用微波真空干燥机干燥，控温58℃，干燥至含水率低于5％，结束干燥工序，得到疏松状产品，按客户使用要求粉碎或不粉碎进行包装，即为苍蝇天然肽。
实施例3
一种从苍蝇中提取天然肽的方法，操作步骤如下：
(1)选用20kg冷冻保存的冰鲜家蝇为原料，其中13kg为生产蝇蛆4代以内淘汰的种蝇，7kg为诱捕的野生蝇，将苍蝇体表用质量浓度3.5‰高锰酸钾溶液漂洗12min捞起，再用清水漂洗除去附着的高锰酸钾，然后采用60目滤布三足离心机脱水至体表无水分即可；
(2)步骤(1)脱水后所得苍蝇，按固液质量比1：4加入去离子水磨制浆，所得浆液用三足离心机过60目筛，过筛后所得滤液再三足离心机过200目滤布，所得滤渣烘干可作饲料添加剂或作制甲壳素的原料；
(3)步骤(2)中200目过滤后所得滤液采用稀naoh调ph值至8.0的碱性的蝇浆，置于微波频率为2450mhz的微波罐中控温60℃微波处理30min，在55～60℃间保温40min；
(4)将步骤(3)中微波处理过的蝇浆排出冷却低于40℃后，用15％醋酸溶解1.5％的壳聚糖溶液调节ph值至4.8～5.0，沉析蛋白质、多糖、脂肪等，静置，待分层后用800目滤布三足离心机离心过滤，滤渣低温干燥，得苍蝇蛋白粉；滤液依次进行微滤、两级超滤除去大分子物质，即用中空纤维膜进行微滤，所得滤液先用能拦截10000da的超滤膜过滤(超滤1)，所得滤液再用能拦截2000da的超滤膜过滤(超滤2)，除去大分子物质，微滤所得滤渣与两级超滤所得滤渣合并处理，浓缩或不浓缩、低温干燥、得苍蝇蛋白粉；
(5)步骤(4)中超滤后所得滤液用反渗透膜，即纳滤过滤，纳滤的过程中滤液同时会被浓缩，纳滤所得滤渣为低价盐，除去低价盐，纳滤所得滤液在减压条件下再浓缩，控温58℃，浓缩至be25℃上下，结束浓缩；
(6)将步骤(5)中所得浓缩液排出，用按浓缩液质量分数2％的量加入颗粒型活性炭在70℃条件下脱色2h，然后用600目滤布过滤，除去活性炭；
(7)将步骤(6)中过滤后所得滤液排出冷却至室温，送去冰柜或冷库冷冻至-37℃，并保持2h；
(8)将冷冻至-37℃并保持1小时后所得冰块取出，打成小块用微波真空干燥机干燥，控温58℃，干燥至含水率低于6％，结束干燥工序，得到疏松状产品，按客户使用要求粉碎或不粉碎进行包装，即为苍蝇天然肽。
实施例1中原料苍蝇含天然肽3.89％，得苍蝇天然肽产品817.40g，肽含量73.61％，天然肽回收率77.38％。产品中没检出相符分子量小于833da的肽也没检出大于1800da的肽。从8肽至14肽的肽量占总肽量的87.04％，此肽段内占肽量最多的是10肽和11肽，10肽有11个氨基酸序列，占总肽量的41.05％，序列ydesgpgivh占总肽的31.35％；11肽有8个氨基酸序列，占总肽量的23.61％，序列vgddltvtnpk占总肽的20.17％。
通过发明可得出从苍蝇中提取天然肽的有效方法，并且所得天然肽含量较高，主要肽段含量差异明显，10肽、11肽含量较多，可定向提取这两肽段进行利用。
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。