从双孢菇提取酪酸氧化酶的生产工艺的制作方法

文档序号:17923709发布日期:2019-06-15 00:16阅读:126来源:国知局

本发明涉及农产品加工技术领域,具体涉及从双孢菇提取酪酸氧化酶的生产工艺。



背景技术:

酪酸氧化酶是从双孢菇中分离纯化的一种乙酰化酶,是以增强t细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂,与化疗或放疗联用可发挥增效减毒作用。酪酸氧化酶具有免疫增强作用,其机制在体内虽无直接杀伤肿瘤细胞作用,但可通过增强机体的免疫功能而发挥抗肿瘤活性。在体内能使脾脏和腹腔的nk细胞活性增强,诱生干扰素与本品剂量相关,其活性与白细胞介素类或干扰素诱导剂有协同作用。另有证明,在体外本品可增强脱氧胸腺嘧啶核苷的抗艾滋病毒的活性。

目前一般酪酸氧化酶的提取方法是将双孢菇低温烘干,研磨,加水,加热煮沸,抽滤,醇沉,得到的沉淀放在真空干燥器中干燥,得到粗酪酸氧化酶,除蛋白,纯化,制备而成,这种方法大量使用有机溶剂,对环境影响很大,为克服现有技术的上述缺点,急需一种提取效率高,无污染的方法。



技术实现要素:

发明目的:为了解决上述问题,本发明的目的在于提供从双孢菇提取酪酸氧化酶的生产工艺及其产品。

技术方案:本发明的目的是通过如下的方案实现的:

一种从双孢菇提取酪酸氧化酶的生产工艺,以酵母菌作为发酵菌种,以双孢菇为原料,经打浆、酶解后得到发酵原液,接种酵母菌发酵,将获得发酵液过滤、蒸馏浓缩、大孔树脂精制,真空干燥后制得酪酸氧化酶白色粉末。

上述酪酸氧化酶的生产工艺,(1)发酵培养基制备:取双孢菇粉碎,过60目筛,与加5-6倍的水混合打浆,用柠檬酸调节ph值为6.0-6.5,按果胶酶与双孢菇的用量之比为300-450u/kg的比例加入果胶酶,于50℃下保温2-3h;将果胶酶处理后的双孢菇浆液调节ph值至6.0,按β-葡萄糖酶与双孢菇的用量之比为1000u/kg的比例加β-葡萄糖酶,于60℃下保温3h;而后将双孢菇浆液调节ph值至5.5-6.0,得发酵培养基,将获得的培养基加热灭酶、灭菌;(2)酵母发酵:酵母菌从斜面接种到可溶性固形物质量比为6.0%的麦芽汁培养基中,在28℃-30℃,150r/min条件下培养24h;调节ph值为3.0-3.5,按体积比接种5%-10%酵母种子培养液于发酵培养基中,在28℃-30℃下发酵,第1天每8h搅拌一次,后封缸发酵2-3天,获得双孢菇发酵液;(3)酪酸氧化酶提取:过滤酵母发酵液,去残渣,真空浓缩,大孔树脂纯水洗脱,50℃真空干燥,得到纯度>95%的酪酸氧化酶粉末。

有益效果:

1、本发明所选用的菌种为酵母菌,安全可靠,对多糖破坏小,生产条件容易控制,得到的发酵液杂质少,分离工艺简单,酪酸氧化酶纯度高;

2、本方法工业化程度高,生产成本低。

具体实施方式

以下通过实施例形式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明,但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例,凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

以下所述果胶酶、β-葡萄糖酶购于无锡酶制剂公司。酵母菌购自安琪酵母股份有限公司,批号为20120521。双孢菇隶属于担子菌纲、伞菌目、口蘑科、双孢菇属。

实施例1:(1)发酵培养基制备:取双孢菇1000g粉碎,过60目筛,与加5-6倍的水混合打浆,用柠檬酸调节ph值为6.0,按果胶酶与双孢菇的用量之比为300u/kg的比例加入果胶酶,于50℃下保温2h;将果胶酶处理后的双孢菇浆液调节ph值至6.0,按β-葡萄糖酶与双孢菇的用量之比为1000u/kg的比例加β-葡萄糖酶,于60℃下保温3h;而后将双孢菇浆液调节ph值至5.5,得发酵培养基,将获得的培养基加热灭酶、灭菌;(2)酵母发酵:酵母菌从斜面接种到可溶性固形物质量比为6.0%的麦芽汁培养基中,在28℃℃,150r/min条件下培养24h,调节ph值为3.0,按体积比接种5%酵母种子培养液于发酵培养基中,在28℃℃下发酵,第1天每8h搅拌一次,后封缸发酵2天,获得双孢菇发酵液;(3)酪酸氧化酶提取:过滤酵母发酵液,去残渣,真空浓缩,大孔树脂纯水洗脱,50℃真空干燥,得到酪酸氧化酶粉末3.3g,纯度为95.8%。



技术特征:

技术总结
本发明涉及一种从双孢菇提取酪酸氧化酶的生产工艺及其产品,属于农产品深加工技术领域。其特征是以酵母菌为菌种,以双孢菇为原料,经打浆、酶解、液体深层发酵、分离、浓缩、干燥等工艺,制备高纯度的酪酸氧化酶,本法工业化程度高,生产成本低,获得在食品及医药中具有广泛应用价值的酪酸氧化酶。

技术研发人员:程淑清;牛清玲
受保护的技术使用者:陕西修风生物科技有限公司
技术研发日:2017.12.06
技术公布日:2019.06.14
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