本发明涉及有机合成化学和天然药物化学领域，尤其涉及去乙酰长春碱酰肼的制备技术。
背景技术：
长春地辛为周期特异性药物,主要作用于细胞有丝分裂中期(M期)。主要通过抑制微管蛋白的聚合,妨碍纺锤体的生成，从而使细胞停止与有丝分裂中期。临床上长春地辛广泛应用于急性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、慢粒急变等血液系统。
去乙酰长春碱酰肼是合成长春地辛合成反应中的重要中间体，去乙酰长春碱酰肼反应后的质量直接决定着长春地辛合成反应最终的质量和收率，且合成长春地辛的初始原料长春碱在长春花之中含量只有约0.0005％左右，如何大量高效的分离出高纯度的长春碱是一个难点。
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种工艺简单、操作方便、收率高、含量高的去乙酰长春酰肼合成方法。
本发明的技术方案是：
一种去乙酰长春碱酰肼的制备方法，包括如下步骤：
(1)长春碱的制备：
配料体积比为文多林：酒石酸长春质碱：三氯化铁：三氟乙醇＝1:1:3:20；
在反应瓶中加入0.1N盐酸水溶液，室温搅拌下依此加入文多林、酒石酸长春质碱、三氯化铁和三氟乙醇；完全溶解后，于20～25℃反应；反应后缓慢加入三氯化铁和草酸铵的混合水溶液，于20～25℃搅拌后继续反应；再向反应液中加入新鲜配制的硼氢化钠氨水溶液，于25～30℃搅拌；用二氯甲烷分次萃取，水层弃去，加入硅藻土和无水硫酸钠，搅拌，静置，滤去硅藻土和无水硫酸钠，滤液于25～35℃减压浓缩至干得到长春碱粗品；
(2)长春碱纯品的制备
将长春碱粗品用5倍体积量乙酸乙酯溶解，待完全溶解后，向其中加入20倍体积量的乙醚溶液；加完后放置于4～6℃的环境下静置析晶过夜；析晶过滤后放置于真空干燥箱，55～65℃干燥得长春碱纯品；
(3)去乙酰长春碱酰肼的制备：
配料体积比为长春碱：无水乙醇：无水肼＝1:5:1；操作步骤：将长春碱、无水乙醇和无水肼投入干燥的反应器中，搅拌，于80～85℃回流反应；反应结束后冷却至室温，加入10倍体积量氯仿混合后再加入20倍体积量的水，水层继续用氯仿萃取两次；合并萃取液，28～32℃减压浓缩至干，抽松至恒重，得类白色去乙酰长春碱酰肼。
本发明以文多林和酒石酸长春质碱为起始物，通过一系列合成、精制手段制备得到长春碱纯品，再由长春碱纯品进行肼化反应得到高纯度的去乙酰长春碱酰肼。本发明具有如下优点：
1.首次以文多林和酒石酸长春质碱为起始物合成去乙酰长春酰肼，且合成去乙酰长春酰肼的反应稳定，产品的收率高，副产物少。
2.工艺简单，操作方便，生产关键点易于控制，适于工业化生产。
3.文多林和酒石酸长春质碱成本低廉，市场量大，易于获得。
具体实施方式
下面将对本发明中技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例1
(1)长春碱的制备：
在5000mL反应瓶中加入0.1N盐酸水溶液1600mL，室温搅拌下依此加入20g文多林、20g酒石酸长春质碱、60g三氯化铁、400mL三氟乙醇。完全溶解后，于20℃反应2小时。反应2小时后，缓慢加入三氯化铁和草酸铵的混合水溶液(由40g三氯化铁和60g草酸铵溶解于1600mL的水溶液)，于20℃搅拌5分钟后继续反应30分钟。再向反应液中加入新鲜配制的硼氢化钠氨水溶液(由3.2g硼氢化钠和375mL氨水组成的溶液)，于25℃搅拌20分钟。用二氯甲烷分次萃取(1000m×1，500mL×2)，水层弃去。向萃取的二氯甲烷溶液中加入20g硅藻土和40g无水硫酸钠，搅拌10分钟，静置20分钟，滤去硅藻土和无水硫酸钠，滤液于25℃减压浓缩至干后称重，得到长春碱粗品35g。
(2)长春碱纯品的制备：
将35g长春碱粗品用175mL乙酸乙酯溶解，待完全溶解后，向其中加入700mL乙醚溶液。加完后放置于4℃的环境下静置析晶过夜。析晶过滤后放置于真空干燥箱，55℃干燥8小时得长春碱纯品。共得到长春碱粗品25g，收率为71.4％。用高效液相色谱法检测长春碱纯品，检测结果长春碱纯品含量为98.84％，最大单一杂质为0.61％。所用的高效液相色谱检测条件为：柱长及型号：SinoChrom ODS AP,4.6x250mm，5μm，柱温：30℃，HPLC检测方法：流动相为二乙胺溶液(取二乙胺14mL，加水986mL，混匀，用磷酸调节pH至7.5)-乙腈-甲醇(32：14：52)。流速：1mL/min，检测波长：262nm。
(3)去乙酰长春碱酰肼的制备：
将长春碱25g、无水乙醇125mL、无水肼25mL投入干燥的500mL三口反应器中，搅拌，于55℃回流反应8小时。反应结束后冷却至室温，转移至分液漏斗后加入250mL氯仿混合。待混匀后再加入500mL的水，水层继续氯仿萃取两次，每次200mL。合并萃取液，28℃减压浓缩至干，抽松至恒重，得类白色去乙酰长春碱酰肼23.5g。用高效液相色谱法检测去乙酰长春碱酰肼，检测结果去乙酰长春碱酰肼含量为91.47％，收率94％。所用的高效液相色谱检测条件为：柱长及型号：SinoChrom ODS AP,4.6x250mm，5μm，柱温：30℃，HPLC检测方法：流动相A相为甲醇，B相为0.02mol/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸调节pH为6.6)。其中A:B＝65:35。流速：1mL/min，检测波长：270nm。
实施例2
(1)长春碱的制备：
在5000mL反应瓶中加入0.1N盐酸水溶液1600mL，室温搅拌下依此加入20g文多林、20g酒石酸长春质碱、60g三氯化铁、400mL三氟乙醇。完全溶解后，于22℃反应2小时。反应2小时后，缓慢加入三氯化铁和草酸铵的混合水溶液(由40g三氯化铁和60g草酸铵溶解于1600mL的水溶液)，于22℃搅拌5分钟后继续反应30分钟。再向反应液中加入新鲜配制的硼氢化钠氨水溶液(由3.2g硼氢化钠和375mL氨水组成的溶液)，于28℃搅拌20分钟。用二氯甲烷分次萃取(1000m×1，500mL×2)，水层弃去。向萃取的二氯甲烷溶液中加入20g硅藻土和40g无水硫酸钠，搅拌10分钟，静置20分钟，滤去硅藻土和无水硫酸钠，滤液于30℃减压浓缩至干后称重，得到长春碱粗品36.5g。
(2)长春碱纯品的制备
将36.5g长春碱粗品用182.5mL乙酸乙酯溶解，待完全溶解后，向其中加入730mL乙醚溶液。加完后放置于5℃的环境下静置析晶过夜。析晶过滤后放置于真空干燥箱，60℃干燥8小时得长春碱纯品。共得到长春碱粗品26g，收率为71.2％。用高效液相色谱法检测长春碱纯品，检测结果长春碱纯品含量为98.91％，最大单一杂质为0.57％。所用的高效液相色谱检测条件为：柱长及型号：SinoChrom ODS AP,4.6x250mm，5μm，柱温：30℃，HPLC检测方法：流动相为二乙胺溶液(取二乙胺14mL，加水986mL，混匀，用磷酸调节pH至7.5)-乙腈-甲醇(32：14：52)。流速：1mL/min，检测波长：262nm。
(3)去乙酰长春碱酰肼的制备
将长春碱26g、无水乙醇130mL、无水肼26mL投入干燥的500mL三口反应器中，搅拌，于60℃回流反应8小时。反应结束后冷却至室温，转移至分液漏斗后加入260mL氯仿混合。待混匀后再加入520mL的水，水层继续氯仿萃取两次，每次200mL。合并萃取液，30℃减压浓缩至干，抽松至恒重，得类白色去乙酰长春碱酰肼24g。用高效液相色谱法检测去乙酰长春碱酰肼，检测结果去乙酰长春碱酰肼含量为90.97％，收率92.3％。所用的高效液相色谱检测条件为：柱长及型号：SinoChrom ODS AP,4.6x250mm，5μm，柱温：30℃，HPLC检测方法：流动相A相为甲醇，B相为0.02mol/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸调节pH为6.6)。其中A:B＝65:35。流速：1mL/min，检测波长：270nm。
实施例3
(1)长春碱的制备：
在25L反应瓶中加入0.1N盐酸水溶液8000mL，室温搅拌下依此加入100g文多林、100g酒石酸长春质碱、300g三氯化铁、2000mL三氟乙醇。完全溶解后，于25℃反应2小时。反应2小时后，缓慢加入三氯化铁和草酸铵的混合水溶液(由200g三氯化铁和300g草酸铵溶解于8000mL的水溶液)，于25℃搅拌5分钟后继续反应30分钟。再向反应液中加入新鲜配制的硼氢化钠氨水溶液(由16g硼氢化钠和1875mL氨水组成的溶液)，于30℃搅拌20分钟。用二氯甲烷分次萃取(2000mL×2，1000mL×3)，水层弃去。向萃取的二氯甲烷溶液中加入100g硅藻土和200g无水硫酸钠，搅拌10分钟，静置20分钟，滤去硅藻土和无水硫酸钠，滤液于35℃减压浓缩至干后称重，得到长春碱粗品178g。
(2)长春碱纯品的制备
将178g长春碱粗品用890mL乙酸乙酯溶解，待完全溶解后，向其中加入3560mL乙醚溶液。加完后放置于6℃的环境下静置析晶过夜。析晶过滤后放置于真空干燥箱，65℃干燥8小时得长春碱纯品。共得到长春碱粗品130g，收率为73％。用高效液相色谱法检测长春碱纯品，检测结果长春碱纯品含量为98.16％，最大单一杂质为0.73％。所用的高效液相色谱检测条件为：柱长及型号：SinoChrom ODS AP,4.6x250mm，5μm，柱温：30℃，HPLC检测方法：流动相为二乙胺溶液(取二乙胺14mL，加水986mL，混匀，用磷酸调节pH至7.5)-乙腈-甲醇(32：14：52)。流速：1mL/min，检测波长：262nm。
(3)去乙酰长春碱酰肼的制备
将长春碱130g、无水乙醇650mL、无水肼130mL投入干燥的2000mL三口反应器中，搅拌，于75℃回流反应8小时。反应结束后冷却至室温，转移至分液漏斗后加入1300mL氯仿混合。待混匀后再加入2600mL的水，水层继续氯仿萃取两次，每次1000mL。合并萃取液，32℃减压浓缩至干，抽松至恒重，得类白色去乙酰长春碱酰肼124g。用高效液相色谱法检测去乙酰长春碱酰肼，检测结果去乙酰长春碱酰肼含量为91.05％，收率95.3％。所用的高效液相色谱检测条件为：柱长及型号：SinoChrom ODS AP,4.6x250mm，5μm，柱温：30℃，HPLC检测方法：流动相A相为甲醇，B相为0.02mol/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸调节pH为6.6)。其中A:B＝65:35。流速：1mL/min，检测波长：270nm。